
沃森和克里克在發(fā)DNA螺構(gòu)的那篇著名短文的尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種基特異性配對方式,暗示著傳物質(zhì)進(jìn)行復(fù)制的一種可能的機(jī)制?!?br/>堿基互補(bǔ)配對原則是指DNA兩條鏈的堿基之間有準(zhǔn)確的一一對應(yīng)關(guān)系,暗示DNA的復(fù)制,可能需要先解開DNA的兩條鏈,然后通過堿基互補(bǔ)配對合成互補(bǔ)鏈。
科學(xué)研究需要大膽的想象,但是得出結(jié)論必須建立在確鑿的證據(jù)之上。
◆提出者:沃森和克里克
DNA復(fù)制時,DNA雙螺旋解開,互補(bǔ)的堿基之間的氫鍵斷裂
解開的兩條單鏈作為復(fù)制的模板,游離的脫氧核苷酸依據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,通過形成氫鍵,結(jié)合到作為模板的單鏈上
新合成的每個DNA分子中,都保留了原來DNA分子中的一條鏈,這種復(fù)制方式被稱作半保留復(fù)制
DNA復(fù)制以DNA雙鏈為模板,子代DNA的雙鏈都是新合成的
證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)
通過實(shí)驗(yàn)區(qū)分親代和子代的DNA。
美國生物學(xué)家梅塞爾森和斯塔爾
15N和14N是N元素的兩種穩(wěn)定的同位素,這兩種同位素的相對原子質(zhì)量不同,含15N的 DNA比含14N的DNA密度大。
含15N的 DNA比含14N的DNA密度大,利用離心技術(shù)可以在試管中區(qū)分不同N元素的DNA分子。
同位素標(biāo)記法、密度梯度離心法
15N/15N-DNA
14N/14N-DNA
如果DNA復(fù)制是半保留復(fù)制
轉(zhuǎn)移到含14NH4Cl的培養(yǎng)液中
大腸桿菌在含15NH4Cl的培養(yǎng)液中生長若干代
15N/14N-DNA
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,DNA的復(fù)制是以半保留的方式進(jìn)行的。
如果DNA復(fù)制是全保留復(fù)制
1.沃森和克里克證明了DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制。( )2.證明DNA半保留復(fù)制的實(shí)驗(yàn)運(yùn)用了同位素標(biāo)記技術(shù)和離心技術(shù)。( )3.DNA半保留復(fù)制的證明過程使用了假說-演繹法。( )
[典例1] 某親本DNA分子雙鏈均以白色表示,以灰色表示第一次復(fù)制出的DNA子鏈,以黑色表示第二次復(fù)制出的DNA子鏈,該親本雙鏈DNA分子連續(xù)復(fù)制兩次后的產(chǎn)物是( )
因?yàn)镈NA的復(fù)制為半保留復(fù)制,因此親本DNA的兩條鏈將分別進(jìn)入不同的子代DNA分子中,A、B錯誤;第二次復(fù)制時得到的4個DNA分子中,都有一條DNA子鏈?zhǔn)窃诘诙螐?fù)制時形成的,而C中只有兩個DNA分子中含第二次復(fù)制出的子鏈(黑色表示),C錯誤,D正確。
1.DNA復(fù)制的概念是什么?2.DNA復(fù)制的時間?3.DNA復(fù)制的場所?4.DNA復(fù)制過程怎么進(jìn)行?5.DNA復(fù)制過程需要哪些條件?6.DNA復(fù)制過程有何特點(diǎn)?7.DNA復(fù)制有何生物學(xué)意義?
閱讀教材P55,思考下列問題:
以親代DNA為模板合成子代DNA的過程
在真核生物中,這一過程是在細(xì)胞分裂前的間期,隨著染色體的復(fù)制而完成的
即有絲分裂前的間期或減數(shù)分裂Ⅰ前的間期
真核生物:細(xì)胞核(主要)、葉綠體、線粒體
利用能量,在解旋酶作用下,DNA雙鏈解開
以解開的每一段母鏈為模板
在DNA聚合酶等酶的作用下
利用細(xì)胞中游離的4種脫氧核苷酸為原料按照堿基互補(bǔ)配對原則
各自合成與母鏈互補(bǔ)的一條子鏈
每條新鏈與其對應(yīng)的模板鏈盤繞成雙螺旋結(jié)構(gòu)
DNA聚合酶都只能催化DNA從5’至3’延伸
解旋酶,DNA聚合酶等
一個DNA分子形成兩個完全相同的DNA分子
邊解旋邊復(fù)制、半保留復(fù)制
DNA通過復(fù)制,將遺傳信息從親代細(xì)胞傳遞給子代細(xì)胞,從而保持了遺傳信息的連續(xù)性
DNA獨(dú)特的雙螺旋結(jié)構(gòu),為復(fù)制提供了精確的模板通過堿基互補(bǔ)配對,保證了復(fù)制能夠準(zhǔn)確地進(jìn)行
4.DNA復(fù)制時新合成的兩條鏈堿基排列順序相同( )5.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)全部解旋后,開始DNA的復(fù)制( )6.單個脫氧核苷酸在DNA酶的作用下連接合成新的子鏈( )7.真核細(xì)胞的DNA復(fù)制只發(fā)生在細(xì)胞核中( )8.解旋酶和DNA聚合酶的作用部位均為氫鍵( )
[典例2] 下列有關(guān)DNA復(fù)制的敘述,正確的是( )A.DNA復(fù)制時以DNA分子的一條鏈作為模板B.洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞在減數(shù)分裂前的間期進(jìn)行DNA復(fù)制C.DNA復(fù)制時先解旋后復(fù)制D.藍(lán)細(xì)菌細(xì)胞的擬核可發(fā)生DNA復(fù)制
DNA分子復(fù)制時兩條脫氧核糖核苷酸鏈都作為模板,A錯誤;洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞只進(jìn)行有絲分裂,在分裂間期進(jìn)行DNA復(fù)制,B錯誤;DNA分子復(fù)制是邊解旋邊復(fù)制的過程,C錯誤;藍(lán)細(xì)菌的擬核區(qū)是環(huán)狀DNA分子,能進(jìn)行DNA的復(fù)制,D正確。
假設(shè)將一個全部被15N標(biāo)記的雙鏈DNA分子(親代)轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)3代,子代DNA含N情況結(jié)果如下:
DNA復(fù)制的相關(guān)計(jì)算規(guī)律
假設(shè)將一個全部被15N標(biāo)記的雙鏈DNA分子(親代)轉(zhuǎn)移到含14N的培養(yǎng)液中培養(yǎng)n代,子代DNA含N情況:
(1)DNA分子數(shù)①子n代DNA分子總數(shù)為 個。②含15N的DNA分子數(shù)為 個。③含14N的DNA分子數(shù)為 個。④只含15N的DNA分子數(shù)為 個。⑤只含14N的DNA分子數(shù)為 個。
(2)脫氧核苷酸鏈數(shù)①子代DNA中脫氧核苷酸鏈數(shù)= 條。②親代脫氧核苷酸鏈數(shù)= 條。③新合成的脫氧核苷酸鏈數(shù)= 條。
(3)消耗的脫氧核苷酸數(shù)①若一親代DNA分子含有某種脫氧核苷酸m個,經(jīng)過n次復(fù)制需消耗游離的該脫氧核苷酸數(shù)為 個。②若一親代DNA分子含有某種脫氧核苷酸m個,在第n次復(fù)制時,需消耗游離的該脫氧核苷酸數(shù)為 個。
DNA復(fù)制的起點(diǎn)和方向
原核生物:單起點(diǎn)雙向復(fù)制
真核生物:多起點(diǎn)雙向復(fù)制
在復(fù)制速率相同的前提下,圖中DNA是從其最右邊開始復(fù)制的,這種復(fù)制方式提高了DNA復(fù)制的效率
1.下圖為某真核細(xì)胞中DNA復(fù)制過程模式圖,下列分析正確的是( )
A.酶①和酶②均作用于氫鍵D
B.該過程的模板鏈?zhǔn)莂、d鏈
C.該過程中的c、d鏈結(jié)構(gòu)相同
D.DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制
圖中酶①是解旋酶,酶②是DNA聚合酶,前者作用于氫鍵,后者作用于磷酸二酯鍵,A項(xiàng)錯誤;該過程中a、b鏈為模板鏈,c、d鏈分別是以a、b鏈為模板合成的子鏈,B、C項(xiàng)錯誤;DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制,D項(xiàng)正確。
2.一個雙鏈被32P標(biāo)記的DNA片段有100個堿基對,其中腺嘌呤占堿基總數(shù)的20%,將其置于含31P的環(huán)境中復(fù)制3次。下列敘述錯誤的是( )
A.該DNA片段中含有胞嘧啶的數(shù)目是60個
B.第三次復(fù)制過程需要240個游離的胞嘧啶脫氧核苷酸
C.復(fù)制3次后,子代DNA中含32P的單鏈與含31P的單鏈之比為1∶8
D.復(fù)制3次后,子代DNA中含32P與含31P的分子數(shù)之比為1∶4
該DNA片段有100個堿基對,其中腺嘌呤占堿基總數(shù)的20%,則腺嘌呤數(shù)目為100×2×20%=40(個),根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則,A=T、G=C,故該DNA片段中含有胞嘧啶的數(shù)目是(100×2-40×2)/2=60(個),A正確;第三次復(fù)制DNA分子數(shù)由4個變?yōu)?個,增加4個DNA分子,需要游離的胞嘧啶脫氧核苷酸60×4=240(個),B正確;復(fù)制3次后,共得到8個DNA分子,16條DNA單鏈,其中只有2條單鏈含32P,含32P的單鏈與含31P的單鏈之比為1∶7,C錯誤;由于DNA的復(fù)制為半保留復(fù)制,子代DNA均含31P,其中有2個DNA分子含32P,所以子代DNA中含32P與含31P的分子數(shù)之比為1∶4,D正確。
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