通過(guò)對(duì)培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，了解消毒和滅菌的原理及方法。（科學(xué)思維）
掌握通過(guò)配制培養(yǎng)基，了解配制培養(yǎng)基的基本步驟，以及培養(yǎng)基中各類(lèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比。（生命觀念）
通過(guò)對(duì)酵母菌進(jìn)行純培養(yǎng)，理解并掌握微生物接種、分離和培養(yǎng)的基本原理和過(guò)程。（科學(xué)探究）
情景材料一：從社會(huì)中來(lái)
向經(jīng)過(guò)殺菌處理的牛奶中添加某些對(duì)人體有益的細(xì)菌，再經(jīng)過(guò)發(fā)酵就可以制成酸奶，由于制作工藝并不復(fù)雜，一些人會(huì)在家里自制酸奶，自制酸奶雖然方便，但是食用自制酸奶導(dǎo)致腸胃不適的事件屢見(jiàn)不鮮，主要原因是在制作過(guò)程中有雜菌混入。
問(wèn)題1：怎樣才能保證無(wú)處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？
控制發(fā)酵條件避免雜菌進(jìn)入
問(wèn)題2：雜菌屬于微生物，你知道雜菌屬于微生物中的哪種類(lèi)型嗎？
微生物的勵(lì)志獨(dú)白（視頻）
個(gè)體無(wú)法用肉眼觀察的微小生物。
真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履蟲(chóng)、變形蟲(chóng)等
病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌體等DNA病毒
細(xì)菌:藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、乳酸菌等；放線菌:鏈霉菌等
問(wèn)題3：微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、形體微小，眼睛看不到，若想看某種純凈的微生物,我們?cè)撛趺醋?？若想通過(guò)肉眼能看到細(xì)菌，我們又該如何？
本章提及的微生物主要指用于發(fā)酵的細(xì)菌和真菌。
一、微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)
微生物結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、形體微小，眼睛看不到，若想得到純凈的微生物，就必須對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)和分離。
實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的條件
(1)要為人們需要的微生物提供合適的___________條件。
(2)要確保 ，并將需要的微生物分離出來(lái)。
問(wèn)題4：難以用肉眼觀察到的微生物吃什么呢？該如何培養(yǎng)呢？
1.培養(yǎng)基的概念、作用、種類(lèi)及用途？2.結(jié)合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成”，分析培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必備營(yíng)養(yǎng)成分有哪些？3.配制培養(yǎng)基時(shí)，如何滿足不同微生物的特殊需求？舉例說(shuō)明。
合作探究一：請(qǐng)同學(xué)們自主學(xué)習(xí)教材P9-10頁(yè)，小組合作思考討論完成問(wèn)題。
人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。
用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。
有無(wú) 凝固劑瓊脂
微生物的分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)
微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落。
觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類(lèi)鑒定
微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種
含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)
在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng),促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)
培養(yǎng)、分離出特定微生物
在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類(lèi)的微生物
【注意】病毒為非細(xì)胞結(jié)構(gòu)生物，只能在活細(xì)胞中營(yíng)寄生生活，目前不能利用人工培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)。
問(wèn)題3：結(jié)合教材P10中“表1-1 1000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成”，分析培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基必備營(yíng)養(yǎng)成分有哪些？
4.培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分：
（1）一般都含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽
無(wú)機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-
有機(jī)碳源：糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、有機(jī)酸、石油等
功能：①構(gòu)成細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②有機(jī)碳既是碳源又是能源。
無(wú)機(jī)氮源：NH4＋、NO3-、NH3等
有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
功能：主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝產(chǎn)物等。
含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源。
功能：提供無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) 調(diào)劑PH 維持滲透壓
功能：良好的溶劑 維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定
滿足微生物對(duì) 、 、 的需求。
①培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加 ；
②培養(yǎng)霉菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至 ；
③培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至 ；
④培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供 的條件。
主要提供碳源的是牛肉膏，主要提供氮源的是蛋白胨。
1.關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，下列說(shuō)法正確的是 A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 B.凡是碳源都能提供能量 C.除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽 D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量
2.微生物的培養(yǎng)需要配制培養(yǎng)基，以下敘述合理的是( )。
A.培養(yǎng)基中都含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽 B.因成分不同，培養(yǎng)基可分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基 C.培養(yǎng)基中的氮源能提供氮元素，但不能作為能源物質(zhì) D.篩選自養(yǎng)型微生物時(shí)，培養(yǎng)基中不需要加碳源
3. 下表記錄了某培養(yǎng)基的配方，下列敘述錯(cuò)誤的是( )。
A.根據(jù)物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基不能用于培養(yǎng)大腸桿菌C.根據(jù)培養(yǎng)基的配方可知，該培養(yǎng)基培養(yǎng)的是異養(yǎng)型微生物D.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可形成液體培養(yǎng)基
4.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是A.微生物的培養(yǎng)都需要提供水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，缺一不可B.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見(jiàn)的單個(gè)菌落C.在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性D.培養(yǎng)基既能培養(yǎng)細(xì)菌，也能培養(yǎng)真菌
問(wèn)題4：獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？，防止雜菌污染的方法有哪些呢？
1.無(wú)菌操作的對(duì)象是什么？2.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？如何針對(duì)不同的作用對(duì)象選擇合適的消毒/滅菌方法？
合作探究二：請(qǐng)同學(xué)們自主學(xué)習(xí)教材P10-11頁(yè)，小組合作思考討論完成問(wèn)題。
（1）實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。
（2）培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。
注意：實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。為了避免周?chē)h(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。
獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。
接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)可用紫外線照射30min
100℃煮沸5-6 min
62-65℃下煮30 min或80-90℃處理30s-1min
用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒；氯氣消毒水源等
常用于玻璃器皿和金屬器具
較為溫和理化方法，殺死部分微生物。
強(qiáng)烈的理化方法，殺死所有微生物。
100℃煮沸5～6min
62～65℃煮30min或80-90℃煮30s-1min
生物活體（皮膚、傷口）、水源等
擦拭等,如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源
接種的金屬工具、接種時(shí)用的試管口或瓶口等
直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒
耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等
物品放入干熱滅菌箱,160～170℃加熱2～3h
培養(yǎng)基及多種器材和物品
高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100kPa,溫度121 ℃,15～30min
接種室、接種箱，超凈工作臺(tái)
4.無(wú)菌技術(shù)的類(lèi)型比較：
5.請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）實(shí)驗(yàn)器具用什么方法滅菌？（2）培養(yǎng)基用什么方法滅菌？（3）雙手用什么方法消毒？（4）接種環(huán)用什么方法滅菌？（5）涂布器用什么方法滅菌？（6）為保證無(wú)雜菌，實(shí)驗(yàn)操作都要在哪里進(jìn)行？（7）如何制備無(wú)菌水？
浸泡在75%酒精中，使用前灼燒
超凈工作臺(tái)的酒精燈火焰旁
用三角瓶裝水，高壓蒸汽滅菌法滅菌
基本成分：碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽
特殊需求：維生素（如乳酸桿菌）、堿基等
6.下列對(duì)滅菌和消毒的理解不正確的是（ ） A．滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子 B．消毒是指殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物 C．消毒和滅菌都是采用物理方法殺滅微生物 D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌等
7.生產(chǎn)、生活和科研實(shí)驗(yàn)中常用到無(wú)菌技術(shù)。下列相關(guān)敘述不正確的是( )。
A.腌制泡菜時(shí)，泡菜壇內(nèi)缺氧、呈酸性的環(huán)境不利于雜菌生長(zhǎng) B.實(shí)驗(yàn)室中的玻璃涂布器、吸管、培養(yǎng)基等均可以用干熱滅菌法處理 C.生活中用巴氏消毒法處理牛奶既可消毒，又基本不會(huì)破壞牛奶中的營(yíng)養(yǎng)成分 D.濕熱滅菌是一種利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法
8. 在微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，分別采用了高壓蒸汽滅菌、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次可用于殺滅什么部位的雜菌？( )。 A.接種環(huán)、手、培養(yǎng)基 B.培養(yǎng)容器、手、微生物菌種 C.培養(yǎng)基、手、接種環(huán) D.培養(yǎng)容器、微生物菌種、接種環(huán)
9.下列有關(guān)無(wú)菌技術(shù)的說(shuō)法，正確的是( ) A.無(wú)菌技術(shù)的關(guān)鍵是殺滅實(shí)驗(yàn)室中的所有的微生物 B.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進(jìn)行濕熱滅菌 C.經(jīng)巴氏消毒法處理的食品因微生物未被徹底消滅，不能在常溫下長(zhǎng)期　保存 D.無(wú)菌技術(shù)中，若處理對(duì)象為液體，則只能消毒，不能滅菌
10.培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種針、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是( )①化學(xué)消毒?、谧茻郎缇、鄹蔁釡缇、茏贤饩€消毒?、轁駸釡缇、薨褪舷痉?A.⑤③②①④⑥ B.⑤③②⑥④① C.⑤⑥②③④① D.③④②①⑥⑤
11.養(yǎng)殖池中存在的有毒物質(zhì)，主要是氨及亞硝酸，這兩種物質(zhì)可被硝化細(xì)菌吸收利用。在“養(yǎng)殖池底泥中硝化細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中，說(shuō)法正確的是（ ） A.需要配制添加一定濃度氨鹽的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，以篩選硝化細(xì)菌 B.應(yīng)對(duì)采集底泥使用的工具進(jìn)行滅菌，全部接種過(guò)程均需在酒精燈火焰旁進(jìn)行 C.可以采用平板劃線法進(jìn)行接種，還需與未接種的空白培養(yǎng)基同時(shí)培養(yǎng) D.應(yīng)將接種后的培養(yǎng)基放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，原因是硝化細(xì)菌為生產(chǎn)者
12．如圖顯示的是微生物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的一個(gè)操作，則在此操作中（ ） A．酒精燈用于熔化培養(yǎng)基 B．培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后需再滅菌 C．培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基均已滅菌 D．培養(yǎng)皿和三角燒瓶無(wú)需與酒精燈火焰有接觸

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一 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

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