高中生物人教版 (2019)選擇性必修3一 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)精品ppt課件

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第一章 發(fā)酵工程第2.1節(jié)微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)。（科學(xué)思維）掌握培養(yǎng)基的配制、無菌技術(shù)及微生物的純培養(yǎng)（科學(xué)思維、科學(xué)探究）首先酸奶制作所用的容器要進(jìn)行消毒晾干后使用，避免酸奶制作過程中混入雜菌；其次，準(zhǔn)備好菌種，最好是純的乳酸菌菌種；再有就是接種時(shí)要在無菌條件下操作，所用攪拌器要經(jīng)過消毒滅菌等。 在經(jīng)過殺菌處理的牛奶中添加某些對人體有益的細(xì)菌，再經(jīng)過發(fā)酵就可以制成酸奶。由于制作工藝并不復(fù)雜，一些人會(huì)在家里自制酸奶。自制酸奶雖然方便，但是食用自制酸奶導(dǎo)致胃腸不適的事例屢見不鮮，主要原因是在制作過程中有雜菌混入。那么怎么才能保證無處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？微生物 概念：個(gè)體無法用肉眼觀察的微小生物真核細(xì)胞原核細(xì)胞無細(xì)胞結(jié)構(gòu)新課講授1一、微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)①要為人們需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件；②要確保其他微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來。1._____________________________________是研究和應(yīng)用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎(chǔ)。防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物2.在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的要求:培養(yǎng)基的配制1.培養(yǎng)基的概念： 人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2.培養(yǎng)基的分類：按照物理性質(zhì)不同分為兩類。1.加入培養(yǎng)基中的凝固劑（如瓊脂），一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。2.微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落3.擴(kuò)大培養(yǎng)獲得大量菌種時(shí)，常用液體培養(yǎng)基。3.營養(yǎng)組成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。1000 mL 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成4.培養(yǎng)基的特殊需求：在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供無氧條件。關(guān)于微生物培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的三個(gè)注意點(diǎn)：（1）培養(yǎng)不同微生物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)可能不同：①自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以無機(jī)營養(yǎng)為主。②異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基主要以有機(jī)營養(yǎng)為主。（2）培養(yǎng)某些微生物時(shí)需要補(bǔ)充生長因子，是由于這些微生物缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。（3）微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)中，需要量最大的是碳源。能合成含碳有機(jī)物的是自養(yǎng)型，反之則為異養(yǎng)型。新課講授2二、無菌技術(shù)1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是______________。防止雜菌污染①消毒：是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物。②滅菌：是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。2.防止雜菌污染的方法：芽孢和孢子的區(qū)別：芽孢是某些細(xì)菌（芽孢桿菌屬、梭狀芽孢桿菌屬、芽孢乳酸菌屬等）在營養(yǎng)條件缺乏時(shí)，在菌體內(nèi)形成的一個(gè)圓形或橢圓形、含水量低、抗逆性強(qiáng)的休眠體；孢子是脫離親本后能直接或間接發(fā)育成新個(gè)體的生殖細(xì)胞，它是有絲分裂或減數(shù)分裂的產(chǎn)物。3.無菌的范圍：①實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒②培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌③實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸注意：為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。常用的消毒和滅菌方法常用的消毒方法①煮沸消毒：100℃煮沸5-6 min，可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。②巴氏消毒：62-65℃下煮30 min或80-90℃處理30s-1min，適合不耐高溫的液體，如牛奶?？梢詺⑺琅Ｄ讨械慕^大多數(shù)微生物，并且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分。③化學(xué)藥劑消毒：用75%酒精、新潔爾滅等進(jìn)行皮膚消毒；氯氣消毒水源等。④紫外線消毒：接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)可用紫外線照射30min。在照射前，適量噴灑石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液，加強(qiáng)消毒效果。常用的消毒和滅菌方法常用的滅菌方法①濕熱滅菌：利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌。高壓蒸汽滅菌效果最好，100 kPa、121℃下維持15-30 min，常用于培養(yǎng)基、無菌水等的滅菌。②干熱滅菌：160-170℃下加熱2-3h。常用于玻璃器皿和金屬器具（耐高溫的和需要保持干燥的物品）。③灼燒滅菌：常用于涂布器、接種環(huán)、接種針、試管口或其它金屬用具等的滅菌。直接在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒。常用滅菌與消毒方法的比較較為溫和理化方法，殺死部分微生物（不包括芽孢、孢子）強(qiáng)烈的理化方法，殺死所有微生物（包括芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑紫外消毒法灼燒滅菌干熱滅菌濕熱滅菌日常生活不耐高溫的液體生物活體、水源等接種的金屬工具、接種時(shí)用的試管口或瓶口等耐高溫、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿等,生產(chǎn)和實(shí)驗(yàn)室常用接種室、接種箱，超凈工作臺(tái)100 ℃煮沸5～6 min62～65 ℃煮30 min或80-90 ℃煮30s-1 min擦拭等,如用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源紫外線照射30 min直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒物品放入干熱滅菌箱,160～170 ℃加熱2～3h高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),100 kPa,溫度121 ℃,15～30 min新課講授3三、微生物的純培養(yǎng)1.培養(yǎng)物：在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。3.純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。4.步驟： → → → 。2.純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。微生物的純培養(yǎng)配置培養(yǎng)基滅菌接種分離和培養(yǎng)酵母菌的純培養(yǎng) 1.概念：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，這就是菌落。2.特征：3.功能：4.獲得單菌落的方法：鑒定菌種的重要依據(jù)大小、形狀、隆起程度、顏色等。平板劃線法、稀釋涂布平板法菌落制備培養(yǎng)基①配制培養(yǎng)基關(guān)于制備培養(yǎng)基的四點(diǎn)提醒（1）如果需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在定容完成后，滅菌之前進(jìn)行操作。（2）滅菌之后，倒平板時(shí)培養(yǎng)基的溫度是50℃左右。因?yàn)槟虅┉傊?8℃以上熔化，在44℃以下凝固，倒平板時(shí)高于50℃則會(huì)燙手，低于50℃時(shí)，若不能及時(shí)操作，瓊脂會(huì)凝固。（3）倒平板的整個(gè)操作在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌的污染。（4）倒平板時(shí)不要將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間，否則此培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)微生物，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡軙?huì)在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。接種和分離酵母菌通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。培養(yǎng)酵母菌完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右（培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異）的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h。作對照，該培養(yǎng)皿無菌落說明培養(yǎng)基沒有污染既可以防止培養(yǎng)基表面的水分揮發(fā)；又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染分區(qū)劃線法（最常用）連續(xù)劃線法平板劃線法的具體劃法：1.灼燒接種環(huán)后，要等冷卻后才能進(jìn)行操作，避免溫度太高殺死菌種。2.第二次及其以后的劃線操作總是在上一次劃線末端開始，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的菌落。3.劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。4.最后一次的劃線不要與第一次的劃線相連。思維導(dǎo)圖防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）A.實(shí)驗(yàn)室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進(jìn)行消毒。B.在實(shí)驗(yàn)室中，切不可吃東西、喝水，離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)一定要洗手，以防止被微生物感染。C.接種環(huán)、接種針等金屬用品，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌。D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理，以免污染環(huán)境。基礎(chǔ)檢測C