第2節(jié)　微生物的培養(yǎng)技術及應用第1課時　微生物的基本培養(yǎng)技術 課標內容要求核心素養(yǎng)對接1．闡明在發(fā)酵工程中滅菌是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。2．闡明無菌技術是在操作過程中，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術。3．概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室進行微生物分離和純化的常用方法。1．科學思維：根據微生物的代謝類型分析培養(yǎng)基的組成；比較消毒和滅菌方法的不同。2．科學探究：討論并掌握無菌技術的實驗操作方法；討論并掌握微生物的純培養(yǎng)的方法。 一、培養(yǎng)基的配制1．培養(yǎng)基人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2．培養(yǎng)基的種類3．培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質，此外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及O2的需求。4．培養(yǎng)基特殊需求(1)培養(yǎng)乳酸桿菌時，在培養(yǎng)基中添加維生素。(2)培養(yǎng)霉菌時，將培養(yǎng)基調至酸性。(3)培養(yǎng)細菌時，將培養(yǎng)基調至中性或弱堿性。(4)培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件。二、無菌技術1．無菌技術關鍵：防止雜菌污染。2．消毒與滅菌(1)概念①消毒：使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內部一部分微生物。②滅菌：使用強烈的理化方法殺死物體內外所有的微生物(包括芽孢和孢子)。(2)類型與方法連一連：將無菌技術類型、常用方法和適用對象用線連起來。提示：3．具體操作(1)對操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進行。(4)實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。三、微生物的純培養(yǎng)1．微生物純培養(yǎng)的概念：由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。2．微生物純培養(yǎng)的步驟：微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。3．酵母菌的純培養(yǎng)(1)菌落：分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞群體。(2)純培養(yǎng)的原理：設法在培養(yǎng)基上得到由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物(單菌落)。(3)純培養(yǎng)方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。(4)酵母菌的純培養(yǎng)步驟判斷對錯(正確的打“√”，錯誤的打“×”)1．液體培養(yǎng)基含有水，而固體培養(yǎng)基不含水。 (×)提示：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基都含有水，它們的區(qū)別為是否含有凝固劑。2．獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。 (√)3．用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基都要進行消毒。 (×)提示：用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基都要進行滅菌。4．培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后進行滅菌。  (×)提示：培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿之前要進行滅菌。5．平板冷凝后應將平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。????????????? ????????????? (√)6．轉換劃線角度后需要灼燒接種環(huán)再進行劃線。 (√)　制備培養(yǎng)基1．培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確：不同的微生物需求不同，根據培養(yǎng)目的進行配制。(2)營養(yǎng)要協(xié)調：營養(yǎng)物質的濃度和比例要適宜。(3)pH要適宜：為維持pH的相對恒定，可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑，常用K2HPO4－KH2PO4。2．培養(yǎng)基的成分及功能營養(yǎng)物質作用功能主要來源碳源能為微生物代謝提供碳元素構成生物體的細胞物質和一些代謝產物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質無機碳源：CO2、NaHCO3等；有機碳源：糖類、脂質、蛋白質、有機酸等氮源能為微生物的代謝提供氮元素合成蛋白質、核酸以及含氮的代謝產物無機化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽等；有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等生長因子微生物生長不可缺少的微量有機物酶和核酸的組成成分；參與代謝過程中的酶促反應維生素、氨基酸、堿基等水是生命活動所必需的不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結構的穩(wěn)定外界攝入無機鹽為微生物提供除碳、氮以外的各種重要元素，包括大量元素細胞內的組成成分，生理調節(jié)物質，某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑無機化合物1．能夠利用無機碳源的微生物的同化作用類型是什么？提示：能利用無機碳源的微生物的同化作用類型是自養(yǎng)型微生物。2．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種常見的細菌培養(yǎng)基，其中牛肉膏、蛋白胨能夠提供哪些營養(yǎng)成分？提示：牛肉膏、蛋白胨能夠提供碳源、氮源、維生素(生長因子)和無機鹽。1．(2020·吉林三中高二月考)下列有關培養(yǎng)基配制原則的表述，正確的是(　　)A．任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、無機鹽、水B．碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C．微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受溫度、pH、氧氣、滲透壓等的影響D．營養(yǎng)物質的濃度越高越好C　[培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無機鹽和水等營養(yǎng)物質，但不是必須全部含有，如自養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基中可不含碳源，A項錯誤；碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，B項錯誤；微生物的生長除受營養(yǎng)因素影響外，還受溫度、pH、氧氣、滲透壓等的影響，C項正確；營養(yǎng)物質的濃度過高可能會造成微生物滲透失水而死亡，D項錯誤。]2．下列關于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是(　　)A．操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時倒平板D．待培養(yǎng)基冷卻凝固后將平板倒過來放置A　[制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，其順序不能顛倒，A錯誤；牛肉膏比較黏稠，所以稱好后需將稱量紙一同放入燒杯中加熱，當牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙，B正確；待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右，開始倒平板，C正確；培養(yǎng)基冷卻凝固后需將平板倒置，D正確。]　無菌技術1．無菌技術的概念：防止外來雜菌的入侵，并保持已滅菌物品及無菌區(qū)域不再被污染的方法，稱為無菌技術。2．無菌技術的目的：(1)可防止實驗室的培養(yǎng)物被其他微生物污染。(2)有效避免操作者自身被微生物感染。3．無菌技術的選擇原則(1)考慮效果：滅菌的效果比消毒要好。(2)考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒的方法，而不能采用滅菌的方法。4．無菌技術的方法——滅菌和消毒滅菌和消毒的種類主要方法應用范圍滅菌濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌法)100 kPa、121 ℃維持15～30 min培養(yǎng)基及多種器材、物品干熱滅菌干熱滅菌箱160～170 ℃加熱2～3 h玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿等)、金屬用具等凡不適宜用其他方法滅菌而又能耐高溫的物品灼燒滅菌酒精燈火焰灼燒微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中的試管口或瓶口等消毒煮沸消毒法100 ℃煮沸5～6 min家庭餐具等生活用品巴氏消毒法62～65 ℃煮30 min或80～90 ℃煮30 s～1 min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行高溫滅菌的液體紫外線消毒30 W紫外燈照射30 min接種室空氣化學藥物消毒用體積分數為75%的乙醇、碘酒涂抹，來蘇水噴灑等皮膚、傷口、動植物組織表面和空氣、手術器械、塑料或玻璃器皿等1．滅菌和消毒的作用原理是什么？提示：作用原理是借助理化因素，通過使蛋白質變性來抑制微生物生命活動或殺死微生物。2．滅菌和消毒的根本區(qū)別是什么？提示：根本區(qū)別是芽孢和孢子是否滅活，滅菌能殺死芽孢和孢子，因而滅菌更徹底。3．對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗者的雙手、空氣和牛奶常采用的滅菌或消毒方法分別是什么？提示：分別為高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學藥物消毒、紫外線消毒、巴氏消毒。4．在用酒精消毒時為什么用75%的酒精，而不用100%的酒精？提示：75%的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過高，菌體表面蛋白質變性過快而凝固成一層保護膜，酒精不能滲入其中。1．(2020·山東萊州一中高二檢測)微生物的實驗室培養(yǎng)，獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌入侵。下列無菌操作中，錯誤的是(　　)A．對實驗用的培養(yǎng)基，采用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌B．對錐形瓶、塞上棉塞的試管、吸管等，用干熱滅菌箱進行滅菌C．對操作者的雙手、衣著以及操作空間等，采用紫外線進行消毒D．對試管口、錐形瓶口等部位，通過火焰灼燒進行滅菌C　[對實驗用的培養(yǎng)基，采用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌，A項正確；對錐形瓶、塞上棉塞的試管、吸管等，用干熱滅菌箱進行滅菌，B項正確；對操作者的雙手采用酒精進行消毒，C項錯誤；對試管口、錐形瓶口等部位，通過火焰灼燒進行滅菌，D項正確。]2．在生產、生活和科研實踐中，經常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。請回答下列問題：(1)在實驗室中，玻璃和金屬材質的實驗器具________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是___________________________。(3)密閉空間內的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能_____________。在照射前，適量噴灑________，可強化消毒效果。(4)水廠供應的自來水通常是經過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內并沒有達到相應溫度，最可能的原因是___________________。[解析]　(1)在實驗室中，能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿和金屬材質的實驗器具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點表現(xiàn)為在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少。(3)紫外線照射能消毒的原因是其能夠破壞微生物細胞中的DNA分子。在利用紫外線照射前，適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液，可強化消毒效果。(4)自來水通常是采用氯氣進行消毒的。(5)采用高壓蒸汽滅菌時，若壓力達到設定要求，而溫度未達到相應要求，最可能的原因是沒有排盡高壓蒸汽滅菌鍋內的冷空氣。[答案]　(1)可以　(2)在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質損失較少　(3)破壞DNA結構　消毒液　(4)氯氣　(5)未將鍋內冷空氣排盡　無菌技術的主要內容(1)對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌。(3)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。(4)實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。　酵母菌的純培養(yǎng)1．平板劃線法接種和分離酵母菌(1)平板劃線法：通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。(2)平板劃線法的注意事項①灼燒接種環(huán)后，要冷卻后才能進行操作，以免溫度太高殺死菌種。②第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使微生物的數目隨著劃線次數的增加而逐漸減少，最終得到由單個細胞繁殖而來的菌落。③劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。④最后一次的劃線不要與第一次的劃線相連。⑤幾次灼燒接種環(huán)的目的灼燒時期目的第一次操作(取菌種前)殺死接種環(huán)上原有的微生物，避免污染培養(yǎng)物每次劃線之前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數目減少劃線結束殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者2．培養(yǎng)酵母菌：接種和未接種的平板在溫度適宜的恒溫箱中培養(yǎng)。3．結果分析與評價(1)平板劃線法結果平板劃線示意圖(A)及培養(yǎng)后菌落分布示意圖(B)如下圖所示。(2)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到獨立的菌落，這些菌落在顏色、形狀和大小上相似，酵母菌菌落一般表面光滑，多呈乳白色。(3)若在培養(yǎng)基中觀察到不同形態(tài)的菌落，原因可能是菌液不純，混入其他雜菌，或在實驗操作過程中被雜菌污染。1．倒平板時，培養(yǎng)基冷凝后，為什么要將平板倒置？提示：培養(yǎng)基冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，將平板倒置既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地揮發(fā)。2．接種結束后，為什么要將一個未接種的培養(yǎng)基和一個接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)，未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長很關鍵。如果有菌落生長，說明了什么？提示：培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是作對照，未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的。若有菌落形成，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，或培養(yǎng)基被污染了，需要重新制備。1．下圖為實驗室培養(yǎng)和純化酵母菌過程中的部分操作步驟，下列說法錯誤的是(　　)A．①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行B．步驟①中待倒入的培養(yǎng)基冷卻后蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋C．步驟③中，每次劃線前后都需對接種環(huán)進行滅菌處理D．劃線接種結束后，將圖④平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)B　[由題干圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)蘸取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)。①②③步驟操作時需要在酒精燈火焰旁進行，防止被雜菌污染，A正確；倒完平板后應立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，B錯誤；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數的增加，使每次劃線時菌種的數目逐漸減少，以便得到單菌落，C正確；劃線接種結束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，可以避免培養(yǎng)基中的水分過快地揮發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，D正確。]2．(2020·遼寧沈陽鐵路實驗中學期中)在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種(甲)、培養(yǎng)結果(乙)如圖所示，且甲、乙的對應位置不變。有關敘述錯誤的是(　　)甲　　　乙A．配制培養(yǎng)基時需進行高壓蒸汽滅菌B．甲中a區(qū)域為劃線的起始位置C．連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落D．圖示接種過程中接種環(huán)灼燒了5次B　[為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進行高壓蒸汽滅菌，A正確；起始劃線的區(qū)域長出的菌落多且密，甲中d區(qū)域為劃線的起始位置，a區(qū)域為劃線的結束位置，B錯誤；連續(xù)劃線的目的是獲得單個細菌形成的菌落，C正確；由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，圖示甲中共有4次劃線接種，接種過程中接種環(huán)灼燒了5次，D正確。]下表是某種微生物培養(yǎng)基的成分。請思考回答下列問題：編號①②③④⑤成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL 通過對某種微生物培養(yǎng)基成分的分析培養(yǎng)學生的物質與能量觀、適應觀等生命觀念，認識生物的多樣性、獨特性。(1)該培養(yǎng)基含有微生物生長所需要的營養(yǎng)成分有哪幾類？(生命觀念)(2)該培養(yǎng)基可培養(yǎng)什么樣的微生物？說明理由。(生命觀念)(3)若除去成分①，加入(CH2O)，該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)什么樣的微生物？(科學思維)提示：(1)該培養(yǎng)基含有的營養(yǎng)成分有三類：水、無機鹽和氮源。(2)該培養(yǎng)基培養(yǎng)的是自養(yǎng)型微生物，因為該培養(yǎng)基中不含含碳有機物。(3)若除去成分①，加入含碳有機物可用于培養(yǎng)固氮菌。[課堂小結]知 識 網 絡 構 建核 心 語 句 背 誦1.各種培養(yǎng)基都含有水、碳源、氮源和無機鹽等營養(yǎng)物質。2.獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。3.消毒是指使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內部一部分微生物。4.滅菌是指使用強烈的理化方法殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。5.由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。6.菌落是分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結構的子細胞群體。1．不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含(　　)A．碳源、磷酸鹽和維生素B．氮源和維生素C．水、碳源、氮源和無機鹽D．碳元素、氧元素、氫元素、氮元素C　[培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽，此外還應考慮pH、特殊營養(yǎng)物質及O2等條件。]2．采用干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌、紫外線照射等幾種方法，可分別殺死哪些部位的雜菌(　　)A．接種環(huán)、吸管、培養(yǎng)基、接種室B．吸管、接種環(huán)、培養(yǎng)基、接種箱C．培養(yǎng)基、吸管、接種環(huán)、接種箱D．培養(yǎng)皿、吸管、培養(yǎng)基、雙手B　[干熱滅菌是將滅菌物品放入干熱滅菌箱內，在160～170 ℃下加熱2～3 h，適用于耐高溫且需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等；灼燒滅菌是利用酒精燈火焰的充分燃燒層滅菌，如接種針、接種環(huán)等；高壓蒸汽滅菌用高壓蒸汽滅菌鍋，一般在壓力為100 kPa、溫度為121 ℃的條件下，維持15～30 min，主要用于培養(yǎng)基滅菌；紫外線照射適用于物體表面滅菌和空氣滅菌，如接種室、接種箱、超凈工作臺等，使用前用紫外線照射約30 min。]3．(2020·河北邢臺期末)下列有關微生物的分離與培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(　　)A．獲得純培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染B．倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染C．倒平板時將培養(yǎng)皿的蓋拿開，以便于將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿D．檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)C　[獲得純培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染，A正確；倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落造成污染，B正確；倒平板時用食指和拇指夾住皿蓋并開啟一縫，使其恰好能讓錐形瓶瓶口伸入，隨后倒入培養(yǎng)基，C錯誤；檢驗培養(yǎng)基是否被雜菌污染的最有效方法是將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，D正確。]4．下列有關平板劃線操作的描述，錯誤的是(　　)A．將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅B．接種環(huán)在平板上劃線的位置是隨機的C．在挑取菌種前和接種完畢后均要將試管口通過酒精燈火焰D．最后一區(qū)的劃線不能與第一區(qū)相連B　[接種環(huán)在平板上劃線的位置并不是隨機的：將蘸有菌種的接種環(huán)伸入平板內，劃三至五條平行線后應蓋上皿蓋，并灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內劃線，重復以上操作，在三、四、五區(qū)域內劃線。]5．下表是培養(yǎng)某微生物的培養(yǎng)基的配方，請回答下列問題：組分牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5 g10 g5  g20 g1 000 mL(1)培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、_____和無機鹽。上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是_______。培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行______處理。(2)在配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮________、________和滲透壓等條件。(3)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進行________(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需進行清洗和________；空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質________，還能損傷DNA的結構。(4)分離純化微生物最常使用的接種方法是______________。(5)在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是____________________。[解析]　(1)培養(yǎng)基中都應含有水、無機鹽、碳源和氮源。培養(yǎng)基配制完成后要調pH和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機碳源。(2)配制培養(yǎng)基時，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。(3)滅菌是指使用強烈的理化方法殺死物體內外所有的微生物，所以要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行滅菌。消毒是指使用較為溫和的物理、化學或生物等方法殺死物體表面或內部一部分微生物，故操作者的雙手需要進行清洗和消毒。紫外線能使蛋白質變性，還能損傷DNA的結構。(4)分離純化微生物常采用平板劃線法。(5)培養(yǎng)微生物時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生。[答案]　(1)氮源　牛肉膏和蛋白胨　滅菌　(2)溫度　酸堿度　(3)滅菌　消毒　變性　(4)平板劃線法　(5)將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生  

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高中生物人教版 (2019)選擇性必修3一 微生物的基本培養(yǎng)技術學案

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高中生物人教版 (2019)選擇性必修3電子課本

一 微生物的基本培養(yǎng)技術

版本： 人教版 (2019)

年級： 選擇性必修3

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