基礎(chǔ)梳理——系統(tǒng)化知識點(diǎn)一　動物細(xì)胞培養(yǎng)1．原理：　　　　。2．培養(yǎng)條件（1）營養(yǎng)：糖類、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入　　等一些天然成分，一般使用液體培養(yǎng)基。（2）無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行　　　　以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作，定期更換培養(yǎng)液以清除代謝物。（3）適宜的溫度、pH和滲透壓：溫度為 　　　 （哺乳動物），pH為　　　　。（4）氣體環(huán)境：含95%空氣和　　　的混合氣體。
特別提醒動物細(xì)胞培養(yǎng)時加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，O2的作用是促進(jìn)細(xì)胞的有氧呼吸。
4．生長特點(diǎn)（1）細(xì)胞貼壁：將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，懸液中分散的細(xì)胞很快就　　　　　上，稱為細(xì)胞貼壁。（2）接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面　　　　時，細(xì)胞通常會　　　　　　的現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。5．原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)（1）原代培養(yǎng)：通常指　　　　的細(xì)胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)處理后的　　　　。（2）傳代培養(yǎng)：指　　　的細(xì)胞培養(yǎng)。
6．干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用
知識點(diǎn)二　動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體一、動物細(xì)胞融合技術(shù)1．概念：使　　　　個動物細(xì)胞結(jié)合形成　　　 的技術(shù)。2．結(jié)果：形成　　細(xì)胞，且具有原來兩個或多個細(xì)胞的　　　　。3．誘導(dǎo)方法：　　融合法、　　融合法和　　　　 法等。4．意義：突破了　　　　的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。5．應(yīng)用：（1）是研究細(xì)胞遺傳、　　　　、腫瘤和培育　　　　　等的重要手段。（2）雜交瘤技術(shù)為制造　　　　　開辟了新途徑。
二、單克隆抗體及其應(yīng)用1．單克隆抗體的制備（1）制備原理：①B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)：一種B淋巴細(xì)胞只分泌　　種特異性抗體。②骨髓瘤細(xì)胞特點(diǎn)：能在體外　　　　。③雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：既能　　　　，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的　　　　。
2．單克隆抗體的應(yīng)用（1）作　　　　，在多種疾病的診斷和　　　鑒定中發(fā)揮重要作用。（2）用于運(yùn)載藥物和　　　　。
輕巧記憶單克隆抗體制備的“三個新”①新融合方法（與誘導(dǎo)植物體雜交相比）：滅活病毒誘導(dǎo)法。②新細(xì)胞：雜交瘤細(xì)胞。③新產(chǎn)物：單克隆抗體。
知識點(diǎn)三　動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1．動物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念和類型（1）動物細(xì)胞核移植技術(shù)的概念分析①供體：動物一個細(xì)胞的　　　?。虎谑荏w：去掉細(xì)胞核的　　　??；③結(jié)果：重新組合的細(xì)胞發(fā)育成　　　　，繼而發(fā)育成動物個體。（2）哺乳動物核移植類型：　　細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。
2．體細(xì)胞核移植的過程
3．體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景（1）在畜牧生產(chǎn)中，可以加速家畜　　　　進(jìn)程、促進(jìn)優(yōu)良畜群　　。（2）在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域：①生物產(chǎn)品：培育轉(zhuǎn)基因克隆動物作為　　　　 ，生產(chǎn)　　　　。②器官移植：轉(zhuǎn)基因克隆動物的細(xì)胞、組織或器官可以作為　　　　的供體；以患者作為　　培育的人核移植　　 ，經(jīng)過誘導(dǎo)分化形成相應(yīng)的細(xì)胞、組織或器官，將它們移植給患者時可以避免　　　　反應(yīng)。③科學(xué)研究：研究克隆動物，深入了解　　　　 及衰老過程；克隆一批遺傳背景相同的動物，對比分析　　　?。豢寺√囟膊∧Ｐ偷膭游?，為研究　　　　和開發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。（3）在保護(hù)瀕危物種方面，有望增加瀕危物種的　　　　。
4．體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題（1）體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率　　　　。（2）克隆動物存在健康問題，表現(xiàn)出　　　　　缺陷等。
特別提醒動物體細(xì)胞核移植技術(shù)（克隆）從生殖方式的角度看屬于無性生殖。重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵，需要動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。
基能過關(guān)——問題化一、判一判（判斷正誤并找到課本原話）（一）動物細(xì)胞培養(yǎng)1．動物細(xì)胞雜交是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。（選擇性必修3 P43正文）（　?。?．動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需將動物細(xì)胞放于含95%氧氣和5%CO2的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（選擇性必修3 P44正文）（　?。?．體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞一類能懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖，另一類需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長增殖。（選擇性必修3 P44正文）（　?。?．干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中。（選擇性必修3 P46正文）（　?。?．iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。（選擇性必修3 P46正文）（　?。?br/>（二）動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1．細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。（選擇性必修3 P48正文）（　?。?．早期制備的抗體產(chǎn)量高，純度低，特異性差。（選擇性必修3 P49正文）（　　）3．多種B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合篩選后，還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。（選擇性必修3 P49圖2－16）（　?。?．抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通常由抗體、接頭、藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成。（選擇性必修3 P50思考·討論）（　?。?．單克隆抗體能準(zhǔn)確地識別抗原的細(xì)微差異，與特定的抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。（選擇性必修3 P50正文）（　?。?br/>（三）動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1．動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。（選擇性必修3 P52正文）（　?。?．核移植所用的牛卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期。（選擇性必修3 P53圖2－18）（　?。?．重構(gòu)胚的激活可用Ca2＋載體、蛋白酶合成抑制劑等。（選擇性必修3 P53圖2－18）（　?。?．重構(gòu)胚是天然形成的胚胎，具有發(fā)育成完整個體的能力。（選擇性必修3 P53相關(guān)信息）（　?。?．體細(xì)胞核移植技術(shù)成功率非常高，各個環(huán)節(jié)也相對完善。（選擇性必修3 P54正文）（　　）
二、議一議 【教材易漏拾遺】1．[選擇性必修3 P44正文拓展]動物細(xì)胞培養(yǎng)時，為什么要將動物組織分散成單個細(xì)胞？
提示：①保證細(xì)胞所需要的營養(yǎng)供應(yīng)；②保證細(xì)胞內(nèi)有害代謝物的及時排出。
?2．[選擇性必修3 P44正文拓展]動物細(xì)胞培養(yǎng)需要控制怎樣的氣體環(huán)境？各自起什么作用？
提示：95%空氣加5%CO2；O2維持細(xì)胞代謝，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
3．[選擇性必修3 P44正文拓展]動物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)一樣可以獲得完整個體嗎？
提示：動物細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞只進(jìn)行生長和增殖，不能得到完整個體，但是植物組織培養(yǎng)可以獲得完整個體。
4．[選擇性必修3 P48正文]動物細(xì)胞融合特有的融合方法是什么？
提示：與植物原生質(zhì)體融合相比，動物細(xì)胞融合特有的融合方法為用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。
5．[選擇性必修3 P49圖2－16拓展]B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞各有何特點(diǎn)？
提示：免疫的B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生單一抗體，但不能無限增殖。骨髓瘤細(xì)胞：能無限增殖，不能產(chǎn)生抗體。雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生特定的抗體，又能在培養(yǎng)條件下進(jìn)行無限增殖。
6．[選擇性必修3 P50思考·討論拓展]抗體—藥物偶聯(lián)物中真正起治療作用的物質(zhì)是什么？是單克隆抗體嗎？
提示：在抗體—藥物偶聯(lián)物中真正發(fā)揮治療作用的物質(zhì)是相關(guān)藥物，單克隆抗體所起的作用是將藥物定向帶到靶細(xì)胞所在位置，借助其導(dǎo)向作用，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量。
?7．[選擇性必修3 P49圖2－16]讀圖回答下列問題：（1）制備單克隆抗體時，不直接用經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞來獲得單克隆抗體的原因是什么？???（2）選擇雜交瘤細(xì)胞過程中兩步篩選的目的各是什么？
提示：用于獲得雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞為漿細(xì)胞，是高度分化的動物細(xì)胞，培養(yǎng)時很難恢復(fù)分裂能力，不能進(jìn)行無限增殖，難以獲得單克隆抗體。
提示：第一步篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞。第二步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。
8．[選擇性必修3 P50“思考·討論”]抗體—藥物偶聯(lián)物（antibdy—drug cnjugates，ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如下圖所示。據(jù)此回答下列問題：
（1）ADC的抗體和藥物各具有什么作用？????（2）除了細(xì)胞毒素，還有哪些物質(zhì)理論上可以作為ADC偶聯(lián)的藥物？?????
提示：ADC的抗體和藥物具有的作用分別是導(dǎo)向和治療。
提示： 放射性同位素和化學(xué)藥物等。
（3）ADC在臨床應(yīng)用上的作用機(jī)理是什么？
提示： 其作用機(jī)理是通過單克隆抗體的靶向作用特異性地識別腫瘤細(xì)胞表面抗原，然后利用細(xì)胞本身具備的內(nèi)吞作用使化學(xué)藥物進(jìn)入腫瘤細(xì)胞體內(nèi)發(fā)生藥力，從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。
9．[選擇性必修3 P52正文拓展]克隆動物的誕生是否證明了動物細(xì)胞具有全能性？
提示：用體細(xì)胞核移植技術(shù)得到克隆動物，僅僅說明動物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，而不能說明動物細(xì)胞具有全能性。
10．[選擇性必修3 P53圖2－18拓展]動物體細(xì)胞核移植屬于有性生殖還是無性生殖？并分析原因。
提示：動物體細(xì)胞核移植得到的個體的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)完全來自供體細(xì)胞核，不是經(jīng)卵受精得到的，因此屬于無性生殖。
考點(diǎn)一　動物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞核移植?任務(wù)1　補(bǔ)充動物細(xì)胞培養(yǎng)過程示意圖，并填空
(1)與植物細(xì)胞培養(yǎng)相比，動物細(xì)胞培養(yǎng)過程所用的培養(yǎng)基一般是____培養(yǎng)基，并加入______________。(2)動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶，第一次的作用是將剪碎的組織分散成________；第二次是將貼壁生長的細(xì)胞從瓶壁上_____下來，其目的是避免動物細(xì)胞的________現(xiàn)象。(3)動物細(xì)胞培養(yǎng)時加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的____；O2 的作用是促進(jìn)細(xì)胞________。
任務(wù)2　比較動物細(xì)胞培養(yǎng)與動物體細(xì)胞核移植的不同點(diǎn)
任務(wù)3　細(xì)胞核移植技術(shù)(1)理清克隆動物培育流程
(2)細(xì)胞核移植技術(shù)中的三個注意點(diǎn)①動物細(xì)胞核移植技術(shù)，體現(xiàn)了動物細(xì)胞核的全能性而非細(xì)胞的全能性。 ②克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。 ③核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的原因：a．克隆動物線粒體中的DNA來自去核卵母細(xì)胞；b．性狀受環(huán)境的影響；c．在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變。?
1.細(xì)胞工程的兩個總結(jié)(1)植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)過程都存在細(xì)胞的培養(yǎng)過程，但植物細(xì)胞可以先分裂再分化，而動物細(xì)胞不分化只分裂。(2)克隆動物的起點(diǎn)是經(jīng)過核移植后形成的重組細(xì)胞，其遺傳物質(zhì)主要來自供體，因此形成的個體性狀主要同供體，但也有部分性狀同受體。
2．動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植時注意的五個問題(1)在分散細(xì)胞時，需用胰蛋白酶分散細(xì)胞，不能用胃蛋白酶，因為胃蛋白酶作用的適宜pH約為1.8，胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2～7.8，而多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4。(2)取供體動物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用10代以內(nèi)的細(xì)胞，因為10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(3)克隆動物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來源于提供細(xì)胞核的親本，其遺傳物質(zhì)來自兩個親本。(4)克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同，少數(shù)性狀與提供去核卵母細(xì)胞的動物相同，與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(5)從生殖方式的角度看，動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)屬無性生殖，重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵，需要動物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。
考向一動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的考查1.實驗小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是(　　)A．甲過程需要對實驗小鼠進(jìn)行消毒B．乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶處理C．丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D．丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性
解析：動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無毒無菌的環(huán)境，甲過程指從實驗小鼠身上取下皮膚組織，該過程需要對小鼠進(jìn)行消毒處理，A正確；乙過程表示將得到的皮膚組織分散成單個細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進(jìn)行處理，B正確；丙過程表示原代培養(yǎng)，此時的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型，C錯誤；丁過程表示傳代培養(yǎng)，此時得到的細(xì)胞會克服細(xì)胞壽命的自然極限，獲得不死性，這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變，正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展，D正確。
考向二 體細(xì)胞克隆技術(shù)及應(yīng)用2.有關(guān)“治療性克隆”的說法不正確的是(　　)A．可解決臨床上供體器官不足和器官移植后免疫排斥問題B．其核心技術(shù)是胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)C．胚胎干細(xì)胞可以克隆出不同組織細(xì)胞的根本原因是基因的選擇性表達(dá)D．中國政府既反對生殖性克隆人，也反對治療性克隆
解析：用患者自身的胚胎干細(xì)胞克隆器官，可以克服供體器官不足，器官移植后又不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；治療性克隆的核心是胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)；胚胎干細(xì)胞克隆出不同組織細(xì)胞屬于細(xì)胞分化，細(xì)胞分化是基因的選擇性表達(dá)；中國政府禁止生殖性克隆人，但不反對治療性克隆。
3．[經(jīng)典高考]下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為__________。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時期再進(jìn)行，去核時常采用_______的方法。②代表的過程是______________。(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中__________的穩(wěn)定性會降低。因此，選材時必須關(guān)注傳代次數(shù)。
(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是________________________________________。(4)與克隆羊“多莉”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動物的成功獲得也證明了____________________________________。
卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響
動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性
考點(diǎn)二　動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備任務(wù)1　比較植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合的不同點(diǎn)
細(xì)胞膜的流動性、細(xì)胞增殖
克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，獲得雜種植株
任務(wù)2　據(jù)圖完成下列各題圖1中，a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞，圖2為單克隆抗體制備的流程(順序已被打亂)。(1)由圖1分析：①誘導(dǎo)a、b兩種細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)融合法、____________、電融合法等；②a、b兩種細(xì)胞可發(fā)生融合，融合的原理是______________；③融合后形成圖中的d細(xì)胞，d細(xì)胞的特點(diǎn)是______________________________；④由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與普通血清抗體相比，具有______________________________等特點(diǎn)。
既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體　
特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備
(2)圖2 B中小鼠注射的物質(zhì)是________，其目的是刺激機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答，從而產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。(3)在獲取C細(xì)胞時，被篩選淘汰的細(xì)胞類型有______________________________________，只有融合的__________才能生長。(4)請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來：_______________________________________
未融合細(xì)胞、同種細(xì)胞相互融合后的細(xì)胞
1.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)對動物免疫的原因：B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞。(2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì)，不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力，還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下大量增殖的能力，可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點(diǎn)，而大量生產(chǎn)單克隆抗體。
2．比較制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞
3．培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的兩次篩選
考向一 結(jié)合動物細(xì)胞融合知識，考查歸納與概括能力1.[2023·山東模擬]下列關(guān)于單克隆抗體制備的說法，正確的是(　　)A．將特定抗原注射到小鼠體內(nèi)，可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體B．經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時可分泌單克隆抗體C．誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后，發(fā)生融合的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D．篩選岀雜交瘤細(xì)胞后，需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細(xì)胞
解析：單克隆抗體是指由單個B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，A錯誤；經(jīng)過特定抗原免疫過的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交融合后，接著利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后再進(jìn)行體外培養(yǎng)或注入小鼠腹腔培養(yǎng)獲得單克隆抗體，B錯誤、D正確；誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后，發(fā)生融合的細(xì)胞除了雜交瘤細(xì)胞外，也可能是B淋巴細(xì)胞相互融合的細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞相互融合的細(xì)胞，C錯誤。
2．如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養(yǎng)液中不能正常合成DNA，無法生長。下列敘述不正確的是(　　)A．可用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長C．雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn)D．細(xì)胞膜的流動性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)
解析：滅活的仙臺病毒是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法之一，A正確；骨髓瘤細(xì)胞之間融合因為都缺少次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT－)而不能生長，B錯誤；第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，D正確。
考向二 結(jié)合單克隆抗體的特點(diǎn)，考查科學(xué)思維能力3.[2023·天津模擬]細(xì)胞毒素可有效殺傷腫瘤細(xì)胞，但沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。如圖為特異性殺死腫瘤細(xì)胞的過程，圖中抗體是利用單克隆抗體技術(shù)制備的。下列敘述正確的是(　　)A．單克隆抗體制備過程中需要使用TaqDNA聚合酶B.抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的殺傷力C.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力D．溶酶體破裂導(dǎo)致其中的水解酶釋放，加速了腫瘤細(xì)胞凋亡
解析：單克隆抗體制備過程中不需要使用TaqDNA聚合酶，A錯誤；抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的定向性，細(xì)胞毒素的殺傷力并未改變，B錯誤；細(xì)胞毒素殺傷腫瘤細(xì)胞沒有特異性，能與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的是抗體，C錯誤；溶酶體破裂使其中的多種水解酶釋放出來，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，加速腫瘤細(xì)胞凋亡，D正確。
4．如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，不正確的是(　　)A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的細(xì)胞毒性T細(xì)胞B．②中使用聚乙二醇有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C．③同時具有漿細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群
解析：①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞；②中使用聚乙二醇或滅活的病毒等，有利于雜交瘤細(xì)胞的形成；③同時具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性；④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。
[長句應(yīng)答必備]1．動物細(xì)胞融合需要誘導(dǎo)。2．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要各種營養(yǎng)成分及血清。3．動物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。4．產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞，它既能產(chǎn)生單克隆抗體，又能無限增殖。
[等級選考研考向]1．[2022·江蘇卷]航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細(xì)胞跳動的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是(　　)A．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B．培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動
解析：培養(yǎng)心肌細(xì)胞的器具要先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，但是試劑并不都需要滅菌，如動物血清不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，否則會使其中的成分失活，A錯誤；培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時候既需要氧氣(有助于進(jìn)行有氧呼吸)也需要二氧化碳(有助于維持培養(yǎng)液的pH)，B正確；心肌細(xì)胞高度分化，不能進(jìn)行有絲分裂，C錯誤；心肌細(xì)胞節(jié)律性收縮，受植物性神經(jīng)的支配，是不隨意的，在神經(jīng)細(xì)胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動，D錯誤。
2．[2022·湖北卷]納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對貼壁生長細(xì)胞活性的影響，研究者在培養(yǎng)基中添加一定量的納米氧化亞銅，8小時后觀察到細(xì)胞萎縮、體積變小，細(xì)胞核變大、細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象，培養(yǎng)瓶中大量貼壁細(xì)胞脫落，出現(xiàn)細(xì)胞懸浮。根據(jù)該實驗現(xiàn)象，能得出的正確結(jié)論是(　　)A．納米氧化亞銅改變了細(xì)胞貼壁生長習(xí)性B．納米氧化亞銅對該細(xì)胞生長有抑制作用C．納米氧化亞銅能通過自由擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞D．納米氧化亞銅不影響細(xì)胞的新陳代謝
3．[2022·湖北卷]某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢，其原因不可能的是(　　)A．實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B．為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C．血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D．所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性
解析：小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，不會造成生長緩慢，A符合題意；培養(yǎng)瓶瓶口密封會使培養(yǎng)液中缺氧，影響細(xì)胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使細(xì)胞生長緩慢，B不符合題意；血清經(jīng)過高溫處理后，其中活性成分變性，失去原有功能，細(xì)胞生存環(huán)境嚴(yán)重惡化，可能使細(xì)胞生長緩慢，C不符合題意；小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性，所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細(xì)胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細(xì)胞生長緩慢，D不符合題意。
4．[2022·山東卷]如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是(　　)A．雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D．同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞
解析：根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結(jié)合，A正確；根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；由于雙抗是在兩種不同的抗原刺激下，B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成的，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進(jìn)行抗原－抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，D錯誤。
5．[2022·遼寧卷]某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中，需要表達(dá)N蛋白胞外段，制備相應(yīng)的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1（1）構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時，選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，目的是　　　　　　　　　　　　　　　　。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與輔助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞，質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體　　　　　?。ㄌ睢半p分子層中”或“兩層磷脂分子之間”）。
檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞
（2）質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由　　　　　　　　　　　　　　　.組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細(xì)胞進(jìn)而表達(dá)并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2（3）用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進(jìn)行免疫后，取小鼠脾組織用　　　　　　　　　酶處理，制成細(xì)胞懸液，置于含有混合氣體的　　　中培養(yǎng)，離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合。
蛋白質(zhì)外殼和含N蛋白胞外段基因的核酸　
（4）用選擇性培養(yǎng)基對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，將其接種到96孔板，進(jìn)行　　　　培養(yǎng)。用　　　　　　　技術(shù)檢測每孔中的抗體，篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株，經(jīng)體外擴(kuò)大培養(yǎng)，收集　　　　　，提取單克隆抗體。（5）利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合，形成　　　　　　　　，實現(xiàn)特異性治療。
抗體—藥物偶聯(lián)物(ADC)
[國考真題研規(guī)律]6．[2020·全國卷Ⅰ]為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。回答下列問題：（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是___________________________________________。
誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞

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