2024版新教材高考生物全程一輪總復(fù)習(xí)第十二單元生物技術(shù)與工程課堂互動探究案2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課件-課件下載-教習(xí)網(wǎng)

基礎(chǔ)梳理——系統(tǒng)化知識點一　微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1．培養(yǎng)基
3．微生物的純培養(yǎng)（1）概念：由　　　　繁殖所獲得的微生物群體是純培養(yǎng)物，獲得　　　　的過程就是純培養(yǎng)。（2）過程：包括　　　　、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。（3）常用方法：　　　　法和　　　　法。
（4）實例——酵母菌的純培養(yǎng)
知識點二　微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)一、微生物的選擇培養(yǎng)1．實驗室中微生物篩選的原理人為提供有利于　　　生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時　　　　其他微生物的生長。2．稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋后，將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進行培養(yǎng)。
（3）培養(yǎng)：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板　　　，放入30～37 ℃的　　　　中培養(yǎng)1～2 d。
二、微生物的數(shù)量測定1．稀釋涂布平板法（1）計數(shù)原理：當(dāng)樣品的　　　　　　時，培養(yǎng)基表面生長的一個　　　，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的　　　，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。（2）計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)：為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為　　　　的平板進行計數(shù)。（3）計數(shù)方法：通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為　　　　、適于計數(shù)的平板。在　　　　下，應(yīng)至少對3個平板進行重復(fù)計數(shù)，然后求出　　　　。（4）當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，統(tǒng)計結(jié)果一般用　　　　來表示。
2．顯微鏡直接計數(shù)法（1）計數(shù)原理：利用特定的　　　　或　　　　，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。（2）優(yōu)點：是一種常用的、　　　　的測定微生物數(shù)量的方法。（3）缺點：統(tǒng)計的結(jié)果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和。
三、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)
基能過關(guān)——問題化一、判一判（判斷正誤并找到課本原話）（一）微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1．微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落。（選擇性必修3 P9正文）（　?。?．在培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性。（選擇性必修3 P10正文）（　?。?．獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。（選擇性必修3 P10正文）（　?。?．為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接種過程中許多操作都應(yīng)在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進行。（選擇性必修3 P10正文）（　?。?br/>5．由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。（選擇性必修3 P11正文）（　　）6．倒平板過程中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿并蓋上皿蓋后，立即將培養(yǎng)皿倒置。（選擇性必修3 P12探究·實踐）（　?。?．培養(yǎng)酵母菌時，可將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h。（選擇性必修3 P12探究·實踐）（　?。?br/>（二）微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)1．菌液的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面會獲得單菌落。（選擇性必修3 P18正文）（　?。?．適于平板計數(shù)的菌落數(shù)范圍為40～300。（選擇性必修3 P18正文）（　?。?．稀釋涂布平板法計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。（選擇性必修3 P18正文）（　　）4．稀釋涂布平板法計數(shù)時，平板上的一個菌落就是一個細(xì)菌。（選擇性必修3 P20練習(xí)與應(yīng)用2）（　?。?br/>二、連一連1．無菌技術(shù)的主要方法及適用對象
2．以下幾種選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基及其應(yīng)用
三、議一議【教材易漏拾遺】1．[選擇性必修3 P10正文拓展]消毒和滅菌都能殺死所有的微生物嗎？
提示：滅菌可殺死處理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒僅殺死部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。
2．[選擇性必修3 P12“探究·實踐”]延伸思考：（1）無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？???（2）為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？
提示：還能有效避免操作者自身被微生物感染。
提示：通過灼燒滅菌，可以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面濕度也比較高，將平板倒置，既可以防止培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。
（3）在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？??（4）平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？目的是什么？
提示：不能。因為空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，可能會造成污染。
提示：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。這樣做的目的是將聚集的菌種逐步稀釋分散以便獲得單個菌落。
3．[選擇性必修3 P17圖1－7發(fā)掘]（1）涂布平板的所有操作為什么都應(yīng)在火焰附近進行？
提示：在酒精燈火焰旁操作可以保證無菌，防止雜菌污染。
（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析：
①獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么？???②某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？
提示：獲得圖A效果的接種方法為稀釋涂布平板法，獲得圖B效果的接種方法為平板劃線法。
提示：最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。
4．[選擇性必修3 P18探究·實踐拓展]（1）分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？??（2）為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長？
提示：碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
提示：分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而為微生物提供氮源。
5．[選擇性必修3 P18正文發(fā)掘]（1）為什么測定活菌的數(shù)量不能用平板劃線法？???（2）利用稀釋涂布平板法純化分解尿素的細(xì)菌時，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)多種菌落，可能的原因有哪些？
提示：由于在所劃的線中，一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個細(xì)菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由兩個細(xì)菌或多個細(xì)菌繁殖而成，而在計數(shù)時一個菌落對應(yīng)著一個細(xì)菌，這樣在劃線所得的平板中，菌落數(shù)目遠(yuǎn)低于活菌的實際數(shù)值，所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。
提示：出現(xiàn)雜菌污染的可能原因有：培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染；接種過程中，無菌操作不符合要求；系列稀釋時，無菌操作不符合要求等。
考點一　微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)?任務(wù)1　歸納培養(yǎng)基的種類和作用(1)按物理狀態(tài)分類
任務(wù)2　比較消毒和滅菌
任務(wù)3　完善微生物的純化培養(yǎng)(1)比較平板劃線法和稀釋涂布平板法的區(qū)別
(2)劃線操作時，需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的?
1.培養(yǎng)基的配制原則(1)目的要明確：配制時應(yīng)根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等來確定配制的培養(yǎng)基種類。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。(3)pH要適宜：真菌為5.0～6.0，細(xì)菌所需pH為6.5～7.5，放線菌為7.5～8.5，故培養(yǎng)不同微生物所需pH 不同。2．培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成(1)各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。(2)不同培養(yǎng)基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
3．微生物對主要營養(yǎng)物質(zhì)的需求特點(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機鹽，碳源可來自大氣中的CO2；氮源可由含氮無機鹽提供，如硝酸鹽等。(2)異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，如糖類、脂肪酸等；氮源也主要由有機物提供，如尿素、牛肉膏等，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。
4．歸納概括平板劃線操作的注意事項(1)灼燒接種環(huán)，待其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。(2)第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。(3)劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相連。(4)劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。(5)操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時，仍需灼燒接種環(huán)。
考向一培養(yǎng)基及其制備方法分析1.[經(jīng)典模擬]下表為某培養(yǎng)基的配方，下列敘述正確的是(　　)A.從物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基；從用途看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B．該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖，屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C．該培養(yǎng)基缺少提供生長因子的物質(zhì)D．該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用
解析：分析表中成分可知，該培養(yǎng)基中沒有凝固劑，為液體培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分齊全，但存在伊紅、美藍等鑒別物質(zhì)，屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯誤；該培養(yǎng)基中的蛋白胨既是唯一的氮源，也是碳源，而葡萄糖是絕大多數(shù)生物最常利用的碳源，B正確；該培養(yǎng)基中存在的無機鹽和蛋白胨中的某些物質(zhì)可以看作是生長因子，C錯誤；對培養(yǎng)基調(diào)節(jié)完pH后還要進行滅菌處理等操作才能使用，D錯誤。
考向二無菌技術(shù)的操作2.[經(jīng)典模擬]微生物培養(yǎng)過程中，要十分重視無菌操作?，F(xiàn)代生物學(xué)實驗中的許多方面也要進行無菌操作，以防止雜菌污染。請分析下列操作中錯誤的是(　　)①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰附近進行?、蹮o菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進行消毒④家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌⑤培養(yǎng)基要進行濕熱滅菌⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌A．①③　　B．②④　　C．③⑤　　D．④⑥
解析：無菌操作包括消毒和滅菌。需進行消毒處理的有植物的外植體及操作人員的雙手等，需進行滅菌的有器皿、培養(yǎng)基、添加劑(指示劑或染色劑)等。煮沸可以殺死微生物的營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢，屬于消毒；為防止空氣中雜菌的污染，接種時要在酒精燈火焰附近進行；家庭制作葡萄酒時所利用的微生物是葡萄表面的酵母菌，故不能滅菌；培養(yǎng)基常用濕熱滅菌。故④⑥操作錯誤。
3．下列關(guān)于滅菌和消毒的理解，錯誤的是(　　)A．滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌實質(zhì)是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用的消毒方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法
解析：滅菌是指采用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正確；消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物，使其無害化，滅菌則是要將所有的微生物全部殺滅，以達到無菌的目的，滅菌一定可以達到消毒的目的，但消毒不一定能達到滅菌的效果，B錯誤；接種工具常用灼燒法滅菌，C正確；常用的消毒方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法，D正確。
考向三大腸桿菌的純化方法及過程分析4.[2023·河南省安陽市高三第一次調(diào)研]一個由英國倫敦帝國學(xué)院和芬蘭圖爾庫大學(xué)的科學(xué)家組成的研究小組日前開發(fā)出一種通過大腸桿菌制造丙烷的新技術(shù)?？蒲腥藛T欲對大腸桿菌進行研究和利用，首先要純化大腸桿菌，請結(jié)合所學(xué)知識，回答下列問題：(1)純化大腸桿菌首先需要制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，其步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、_______。對培養(yǎng)基進行滅菌的方法是_________，檢驗培養(yǎng)基是否有雜菌污染的最有效的方法是____________________________。
將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)
(2)可以估算出樣品中大腸桿菌數(shù)量的接種方法是____________，用該方法得到的結(jié)果一般比實際值________(填“偏大”或“偏小”)。(3)某實驗小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_____的含量和營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。使用過的培養(yǎng)基及培養(yǎng)物必須經(jīng)過________后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物擴散。(4)如果要檢測食品中是否含有大腸桿菌，需要在培養(yǎng)基中加入________(填物質(zhì))，以觀察是否出現(xiàn)_____(填顏色)的菌落。?
考向四微生物培養(yǎng)與分離的考查5.漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述不正確的是(　　)A．生活污水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B．篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C．在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在低溫下長期保存菌株
解析：漆酶降解“木質(zhì)”，則漆酶菌株多存在于“木質(zhì)”豐富的場所，故生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，A錯誤；篩選培養(yǎng)基中需加入漆酶的底物，通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落，從而獲得漆酶菌株，B正確；在涂布平板上長出的菌落，再通過劃線進一步純化，C正確；斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在低溫下長期保存菌株，D正確。
6．如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序為1→2→3→4→5，下列說法正確的是(　　)A．操作前要將接種環(huán)用酒精消毒B．劃線操作須在酒精燈火焰附近進行C．只有在5區(qū)才可以得到所需菌落D．在2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌
解析：在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在酒精燈火焰上灼燒，不能用酒精消毒；接種時劃線操作是在酒精燈火焰附近進行；在5個區(qū)域中，只要有單個活細(xì)菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落；每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物(第一次劃線前)和上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)以防止污染環(huán)境和感染操作者。
考點二　微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)?任務(wù)1　歸納概括微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法
(2)微生物的鑒別方法
任務(wù)2　選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較
某些微生物對某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好、抗性
任務(wù)3　比較兩種微生物計數(shù)方法
1.自養(yǎng)型與異養(yǎng)型微生物培養(yǎng)基的區(qū)別(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機鹽，碳源可來自大氣中的CO2，氮源也可由含氮無機鹽提供。(2)異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，氮源也主要是由有機物提供的，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。
2．名師提醒(1)一般選用相差不大的平板計算平均值，選用保證菌落數(shù)在30～300的稀釋度下的平板進行計數(shù)。(2)設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準(zhǔn)確性。同時為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，設(shè)置三個以上。(3)在同一稀釋度下，至少對3個平板進行重復(fù)計數(shù)，然后求出平均值，并根據(jù)平板所對應(yīng)的稀釋度計算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目，如果某個平板的菌落數(shù)與其他組差別甚遠(yuǎn)，說明該平板操作過程中出現(xiàn)失誤，應(yīng)舍棄。(4)統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目低，這是由于當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是用活菌數(shù)來表示。
3．選擇培養(yǎng)基的應(yīng)用實例(1)加入某些特定的物質(zhì)(前提是培養(yǎng)基具備全部營養(yǎng)成分)
(2)改變培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分
(3)利用培養(yǎng)基“特定化學(xué)成分”分離
(4)通過某些“特殊環(huán)境”分離
考向一微生物分離與計數(shù)的考查1.土壤中含有多種微生物，某研究小組欲分離能在Fe2＋污染的土壤環(huán)境下生存的希瓦氏菌，進行了相關(guān)研究。回答下列問題：(1)配制培養(yǎng)基：加入牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl、H2O及________________等并滅菌；該培養(yǎng)基按功能劃分，屬于____培養(yǎng)基。(2)分離希瓦氏菌：將10 g土樣溶于90 mL蒸餾水中，再稀釋成多個倍數(shù)，取多個稀釋倍數(shù)的土壤樣品液0.1 mL分別接種到多個平板上，這樣做的目的是______________________________________________；培養(yǎng)一段時間后，A、B研究員在105稀釋倍數(shù)下得到的結(jié)果：A涂布4個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是150、178、259、310；B涂布4個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是152、165、175、184，則每克土壤樣品中的希瓦氏菌數(shù)量最可能為________個。
含高濃度Fe2＋的溶液
獲得菌落數(shù)量合適的平板，排除偶然因素造成的誤差
(3)進一步純化希瓦氏菌：采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域上幾乎無菌落，分析出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是_____________________________ (答出兩點)。(4)研究人員還欲采用測定ATP含量的方法估算希瓦氏菌數(shù)，該方法的依據(jù)是______________________________________________，此方法與顯微鏡直接計數(shù)相比，得到的希瓦氏菌數(shù)目____(填“多”或“少”)，原因是____________________________________。
接種環(huán)灼燒后未冷卻就劃線；未從第一區(qū)域末端開始劃線
活細(xì)胞都能產(chǎn)生ATP且含量穩(wěn)定，因此可用于估算數(shù)目
顯微鏡直接計數(shù)統(tǒng)計中包括死細(xì)胞和活細(xì)胞
考向二微生物篩選的拓展應(yīng)用2．營養(yǎng)缺陷型菌株是指缺乏合成某些營養(yǎng)物質(zhì)(如氨基酸、維生素)的能力，必須在基本培養(yǎng)基中補充特殊營養(yǎng)物質(zhì)才能正常生長的一類菌株，可自然產(chǎn)生或人工誘導(dǎo)獲得。用一定方法誘變大腸桿菌并將其接種到甲培養(yǎng)皿上，一段時間后將菌落影印接種(不改變菌落位置)到乙、丙兩培養(yǎng)皿中，進一步培養(yǎng)一段時間可篩選出營養(yǎng)缺陷型菌株，結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是(　　)A．將大腸桿菌接種到甲培養(yǎng)皿的方法為平板劃線法B．甲、丙兩種培養(yǎng)基中均添加了特殊營養(yǎng)物質(zhì)C．乙培養(yǎng)皿中能生長的為所需的營養(yǎng)缺陷型菌株D．甲中的部分大腸桿菌發(fā)生了基因突變或染色體變異
解析：由菌落的分布情況可知，將大腸桿菌接種到甲培養(yǎng)皿的方法為稀釋涂布平板法，A錯誤；根據(jù)甲、丙兩種培養(yǎng)基中菌落位置可知，甲中的菌種在丙培養(yǎng)基中均能生長，再結(jié)合乙培養(yǎng)基中菌落的生長情況，可推測甲培養(yǎng)基和丙培養(yǎng)基都添加了某種特殊物質(zhì)，B正確；乙培養(yǎng)皿中不能生長的為所需的營養(yǎng)缺陷型菌株，C錯誤；甲中的部分大腸桿菌發(fā)生了基因突變，不可能發(fā)生染色體變異，因為大腸桿菌不含染色體，D錯誤。
3.[2023·德州檢測]篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基。接種培養(yǎng)后，得到如圖所示的兩個菌落，培養(yǎng)平板經(jīng)稀碘液處理，出現(xiàn)了以菌落為中心的透明圈。相關(guān)敘述錯誤的是(　　)A．培養(yǎng)基中的淀粉可為微生物提供碳源B．兩個菌落中的微生物為同一種微生物C．兩個菌落中的微生物均能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外D．透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說明該微生物分解淀粉的能力越大?
解析：培養(yǎng)基中的淀粉能為微生物提供碳源，A正確；能夠水解淀粉的微生物不一定是同一種微生物，B錯誤；據(jù)圖分析可知，兩個菌落均產(chǎn)生了透明圈，說明兩個菌落中的微生物均能將淀粉酶分泌至細(xì)胞外，C正確；透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，微生物分解淀粉能力越強，該值的大小反映了兩個菌落中的微生物分解淀粉能力的差異，D正確。
[長句應(yīng)答必備]1．無菌操作技術(shù)包括消毒和滅菌，消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥劑消毒和紫外線消毒等；滅菌包括灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。2．培養(yǎng)基的制備過程包括計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板等步驟，倒置平板的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水滴落入培養(yǎng)基造成污染。3．大腸桿菌的純化包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法要求多次劃線，稀釋涂布平板法要求將菌液充分稀釋。4．微生物的計數(shù)要求制作多個平板，且每個平板上能長出30～300個菌落。5．尿素分解菌和纖維素分解菌的分離都運用了選擇培養(yǎng)基，前者所用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源，后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。
[等級選考研考向]1．[2023·浙江1月]某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進行了如下實驗：取泡菜汁樣品，劃線接種于一定NaCl濃度梯度的培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)得到了單菌落。下列敘述正確的是(　　)A．培養(yǎng)基pH需偏堿性B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C．需在無氧條件下培養(yǎng)D．分離得到的微生物均為乳酸菌
解析：培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基應(yīng)偏酸性，A項錯誤；劃線接種時，泡菜汁無需進行多次稀釋，B項錯誤；乳酸菌是厭氧菌，需在無氧條件下培養(yǎng)，C項正確；泡菜汁中還有酵母菌等，因此分離得到的微生物不只有乳酸菌，D項錯誤。
2．[2022·遼寧卷] 為避免航天器在執(zhí)行載人航天任務(wù)時出現(xiàn)微生物污染風(fēng)險，需要對航天器及潔凈的組裝車間進行環(huán)境微生物檢測。下列敘述錯誤的是(　　)A．航天器上存在適應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物B．細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕C．在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品D．采用平板劃線法等分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征
解析：嗜極微生物適應(yīng)極端環(huán)境的特性使它們有在空間暴露環(huán)境或地外星球環(huán)境中存活的可能，因此航天器上存在適應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)匱乏等環(huán)境的極端微生物，A正確；細(xì)菌形成菌膜粘附于航天器設(shè)備表面產(chǎn)生生物腐蝕，會腐蝕艙內(nèi)材料以及設(shè)備線路、元器件，B正確；對航天器及潔凈的組裝車間進行環(huán)境微生物檢測，需要在組裝車間地面和設(shè)備表面采集環(huán)境微生物樣品，C正確；航天器及潔凈的組裝車間環(huán)境微生物很少，分離培養(yǎng)微生物，觀察菌落特征，不需要采用平板劃線法，D錯誤。
3．[2022·江蘇卷]下列是某同學(xué)分離高產(chǎn)脲酶菌的實驗設(shè)計，不合理的是(　　)A．選擇農(nóng)田或公園土壤作為樣品分離目的菌株B．在選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源C．適當(dāng)稀釋樣品是為了在平板上形成單菌落D．可分解酚紅指示劑使其褪色的菌株是產(chǎn)脲酶菌
解析：農(nóng)田或公園土壤中含有較多的含脲酶的微生物，A正確；為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，配制的培養(yǎng)基應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源，含脲酶的微生物在該培養(yǎng)基上能生長，B正確；當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，C正確；在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的pH升高，酚紅指示劑將變紅，因此在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，能對分離的菌種做進一步鑒定，D錯誤。
4．[2022·海南卷]為探究校內(nèi)植物園土壤中的細(xì)菌種類，某興趣小組采集園內(nèi)土壤樣本并開展相關(guān)實驗。下列有關(guān)敘述錯誤的是(　　)A．采樣時應(yīng)隨機采集植物園中多個不同地點的土壤樣本B．培養(yǎng)細(xì)菌時，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落D．鑒定細(xì)菌種類時，除形態(tài)學(xué)鑒定外，還可借助生物化學(xué)的方法
解析：采集植物園中土壤樣本的原則之一是要隨機采樣，A正確；牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基中含有細(xì)菌生長所需的碳源、氮源、水、無機鹽等，可用于細(xì)菌的培養(yǎng)，B正確；土壤溶液稀釋倍數(shù)足夠高時，才能將聚集的細(xì)菌分散開，有助于在培養(yǎng)基表面形成單菌落，C錯誤；不同種類細(xì)菌的理化特性一般不同，鑒定細(xì)菌種類時，除根據(jù)菌落特征進行形態(tài)學(xué)鑒定外，還可以借助生物化學(xué)的方法進行鑒定，D正確。
5．[2022·湖北卷]滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實驗中常見的操作。下列敘述正確的是(　　)A．動、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B．微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C．為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D．可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌
解析：動、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進行，A錯誤；動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯誤；一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌，以防止雜菌污染，C錯誤；可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。
6．[2022·廣東卷]研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號”考察船對中國南?？瓶贾?，中國科學(xué)家采集了某海域1 146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學(xué)特性?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用___________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________為碳源時生長狀況最好。
(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是？(答一點即可) (3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是？(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有___________。
某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才能生存(或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)　
擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行
7．[2022·浙江6月選考]回答下列(一)、(二)小題：(一)回答與產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌育種有關(guān)的問題：(1)為快速分離產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可將土樣用________制成懸液，再將含有懸液的三角瓶置于80℃的________中保溫一段時間，其目的是_________________。(2)為提高篩選效率，可將菌種的____過程與菌種的產(chǎn)酶性能測定一起進行：將上述懸液稀釋后涂布于以淀粉為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，采用____顯色方法，根據(jù)透明圈與菌落直徑比值的大小，可粗略估計出菌株是否產(chǎn)酶及產(chǎn)酶性能。(3)為了獲得高產(chǎn)淀粉酶的枯草桿菌，可利用現(xiàn)有菌種，通過________后再篩選獲得，或利用轉(zhuǎn)基因、___________等技術(shù)獲得。
[國考真題研規(guī)律]8．[2022·全國甲卷]某同學(xué)從被石油污染的土壤中分離得到A和B兩株可以降解石油的細(xì)菌，在此基礎(chǔ)上采用平板培養(yǎng)法比較二者降解石油的能力，并分析兩個菌株的其他生理功能。實驗所用的培養(yǎng)基成分如下。培養(yǎng)基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培養(yǎng)基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步驟：①將A、B菌株分別接種在兩瓶液體培養(yǎng)基Ⅰ中培養(yǎng)，得到A、B菌液；②液體培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中添加瓊脂，分別制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按圖中所示在平板上打甲、乙兩孔。
回答下列問題。(1)實驗所用培養(yǎng)基中作為碳源的成分是____。培養(yǎng)基中NH4NO3的作用是為菌株的生長提供氮源，氮源在菌體內(nèi)可以參與合成____________(答出2種即可)等生物大分子。(2)步驟①中，在資源和空間不受限制的階段，若最初接種N0個A細(xì)菌，繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是________。(3)為了比較A、B降解石油的能力，某同學(xué)利用步驟②所得到的平板Ⅰ、Ⅱ進行實驗，結(jié)果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示無透明圈)，推測該同學(xué)的實驗思路是_____________________________________。
將含等量A、B的菌液分別接種到平板Ⅰ、Ⅱ的甲、乙兩孔中，分析A、B菌株在有無NH4NO3的條件下對石油的降解能力，透明圈越大表明其降解石油的能力越強
(4)現(xiàn)有一貧氮且被石油污染的土壤，根據(jù)上表所示實驗結(jié)果，治理石油污染應(yīng)選用的菌株是________，理由？
在平板Ⅱ中，A菌株周圍有透明圈，而B菌株周圍沒有透明圈
解析：(1)碳源是培養(yǎng)基中提供碳元素的物質(zhì)，培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ中含有碳元素的物質(zhì)只有石油(組成元素有碳、氫、硫、氮、氧等)。培養(yǎng)基中的氮源可以為微生物提供合成含氮物質(zhì)的原料，參與合成蛋白質(zhì)、核酸等。(2)資源、空間等條件適宜的情況下，細(xì)菌每繁殖一代，種群數(shù)量增長一倍，故繁殖n代后細(xì)菌的數(shù)量是2nN0。
(3)分析題意可知，該同學(xué)的實驗設(shè)計如圖所示：由培養(yǎng)基Ⅰ、Ⅱ的成分可知，平板Ⅰ、Ⅱ的區(qū)別是有無NH4NO3，分析實驗結(jié)果可知：①無論有無額外氮源，菌株A均可降解石油，且在額外加入氮源的培養(yǎng)基中降解能力更強。②只有在額外加入氮源的培養(yǎng)基中，菌株B才可以降解石油，且降解能力弱于菌株A。(4)平板Ⅱ中無充足氮源(與貧氮土壤類似)，表中結(jié)果顯示，平板Ⅱ中，A菌株周圍有透明圈，而B菌株周圍沒有透明圈，說明前者可以在無充足氮源的條件下降解石油，而后者無法降解，故選A菌株。
9．[2022·全國乙卷]化合物S被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和化工工業(yè)。用菌株C可生產(chǎn)S，S的產(chǎn)量與菌株C培養(yǎng)所利用的碳源關(guān)系密切。為此，某小組通過實驗比較不同碳源對菌體生長和S產(chǎn)量的影響，結(jié)果見表?；卮鹣铝袉栴}。(1)通常在實驗室培養(yǎng)微生物時，需要對所用的玻璃器皿進行滅菌，滅菌的方法有______________________(答出2點即可)。(2)由實驗結(jié)果可知，菌株C生長的最適碳源是________________；用菌株C生產(chǎn)S的最適碳源是________________。菌株C的生長除需要碳源外，還需要________________(答出2點即可)等營養(yǎng)物質(zhì)。
高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌

相關(guān)課件

相關(guān)課件更多

相關(guān)課件

相關(guān)課件 更多

相關(guān)課件更多