? 第1節(jié) 植物細(xì)胞工程
第1課時(shí) 植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)
[基礎(chǔ)檢查]
1.下列不能說明植物細(xì)胞具有全能性的是 (  )
A.胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培育成植株
B.無心插柳柳成蔭
C.轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花細(xì)胞培育成植株
D.利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株
解析:“胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培育成植株”是植物組織培養(yǎng),體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性;“無心插柳柳成蔭”屬于扦插繁殖,不能體現(xiàn)植物細(xì)胞具有全能性;“轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花細(xì)胞培育成植株”體現(xiàn)了植物細(xì)胞具有全能性;“利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株”需要借助植物組織培養(yǎng),體現(xiàn)了花粉細(xì)胞具有全能性。
答案:B
2.植物組織培養(yǎng)時(shí)所用的外植體必須經(jīng)過處理后才能接種,這種處理方法是 (  )
A.表面消毒 B.滅菌
C.噴灑生長素 D.灼燒
解析:進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),為了避免雜菌污染,外植體要經(jīng)過表面消毒處理后,才能進(jìn)行接種。
答案:A
3.番茄根尖經(jīng)過植物組織培養(yǎng)可以形成完整的番茄植株。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(  )
A.此過程中發(fā)生了細(xì)胞的脫分化、再分化
B.植物激素在此過程中起調(diào)節(jié)作用
C.此過程中若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株
D.根尖細(xì)胞最終發(fā)育為無葉綠體的植株
解析:植物組織培養(yǎng)涉及脫分化形成愈傷組織和再分化形成根、芽的過程;植物組織培養(yǎng)時(shí)所用培養(yǎng)基除含有各種營養(yǎng)物質(zhì)外,還要加入起調(diào)節(jié)作用的植物激素;植物組織培養(yǎng)過程中應(yīng)進(jìn)行無菌操作,防止培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌,若發(fā)生雜菌污染則難以獲得目的植株;根尖細(xì)胞中雖然沒有葉綠體,但是含有葉綠體基因,所以經(jīng)植物組織培養(yǎng)形成的植株中有葉綠體。
答案:D
4.在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程中,需要的條件是 (  )
①消毒和滅菌?、谝欢舛鹊闹参锛に亍、圻m宜的溫度
④充足的光照?、莩渥愕酿B(yǎng)料
A.①③④⑤     B.②③④⑤
C.①②③④ D.①②③⑤
解析:①植物組織培養(yǎng)過程需要無菌操作,所以需要消毒、滅菌,正確;②脫分化過程所需的培養(yǎng)基需含有一定濃度的植物激素,正確;③植物組織培養(yǎng)過程需要適宜的溫度,正確;④脫分化形成愈傷組織時(shí),需要避光,否則會(huì)形成維管組織,錯(cuò)誤;⑤植物組織培養(yǎng)需要充足的養(yǎng)料,正確。
答案:D
5.下圖表示培養(yǎng)“落地生根”新植株的兩種方法,則遺傳信息相同的是 (  )

A.僅①② B.僅②③
C.僅①③ D.①②③
解析:“落地生根”利用葉片①上長出的不定芽繁殖得到新植株③的過程是扦插,屬于無性繁殖;利用葉片組織通過組織培養(yǎng)得到新植株②的方式為植物組織培養(yǎng),屬于無性繁殖。無性繁殖可以保持親本的優(yōu)良性狀,因此①②③的遺傳信息相同。
答案:D
6.植物體細(xì)胞雜交的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)是將不同物種的兩個(gè)體細(xì)胞融合成一個(gè)雜種細(xì)胞的過程。該過程是指 (  )
A.不同植物的精子與卵細(xì)胞的融合
B.植物花粉細(xì)胞的兩兩融合
C.完整的兩個(gè)體細(xì)胞的融合
D.不同植物的原生質(zhì)體的融合
解析:植物體細(xì)胞雜交通常利用植物的體細(xì)胞進(jìn)行,花粉是生殖細(xì)胞,其融合后產(chǎn)生的雜種細(xì)胞發(fā)育成的植株不能進(jìn)行減數(shù)分裂,不能產(chǎn)生后代;植物體細(xì)胞雜交過程中需要用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體,再借助一定的技術(shù)手段(如電融合法、離心法、PEG融合法和高Ca2+—高pH融合法等)誘導(dǎo)植物的原生質(zhì)體融合。
答案:D
7.植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的原因是 (  )
A.細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合
B.細(xì)胞壁使原生質(zhì)體失去活力
C.植物體細(xì)胞的結(jié)構(gòu)組成中不包括細(xì)胞壁
D.細(xì)胞壁不是原生質(zhì)體的組成部分
解析:植物細(xì)胞的細(xì)胞膜外有細(xì)胞壁,具有支持和保護(hù)作用。細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合,因此在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交之前,需去除細(xì)胞壁。
答案:A
8.下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交的敘述,錯(cuò)誤的是(  )
A.獲得原生質(zhì)體的過程需要用到纖維素酶和果膠酶
B.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以獲得某種多倍體植株
C.植物體細(xì)胞雜交過程就是原生質(zhì)體融合的過程
D.可根據(jù)細(xì)胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定雜種細(xì)胞
解析:植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后得到原生質(zhì)體,去除細(xì)胞壁時(shí)需要用纖維素酶和果膠酶;利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以獲得多倍體植株;植物體細(xì)胞雜交的過程包括原生質(zhì)體融合和植物組織培養(yǎng)的過程;雜種細(xì)胞中的染色體數(shù)目與原來的生物體細(xì)胞不同,因此可根據(jù)細(xì)胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來鑒定雜種細(xì)胞。
答案:C
9.下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交目的的敘述,錯(cuò)誤的是 (  )
A.把兩個(gè)植物的優(yōu)良性狀集中在雜種植株上
B.實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
C.獲得雜種植株
D.實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體的融合
解析:原生質(zhì)體的融合是植物體細(xì)胞雜交的過程,而不是目的。
答案:D
10.植物體細(xì)胞雜交過程中,形成雜種細(xì)胞的標(biāo)志是 (  )
A.再生出細(xì)胞壁
B.細(xì)胞膜發(fā)生融合
C.細(xì)胞質(zhì)發(fā)生融合
D.細(xì)胞核發(fā)生融合
解析:植物體細(xì)胞雜交過程中,雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志是融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁。
答案:A
11.(2022·茂名)科學(xué)家利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)成功獲得了“番茄—馬鈴薯”雜種植株,為了便于雜種細(xì)胞的篩選和鑒定,科學(xué)家利用紅色熒光和綠色熒光分別標(biāo)記番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體膜上的蛋白質(zhì),其培育過程如圖所示,請據(jù)圖回答下列問題。

(1)過程①常用的方法是    ,細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是 。?
(2)番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體能發(fā)生融合的生物學(xué)原理是 ,?
誘導(dǎo)融合常用的物理方法是? 。?
(3)植物原生質(zhì)體誘導(dǎo)融合后,在鑒定雜種原生質(zhì)體時(shí)可用顯微鏡觀察,根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光的不同可觀察到    (只考慮細(xì)胞兩兩融合的情況)種不同的原生質(zhì)體,當(dāng)觀察到                  時(shí)可判斷該原生質(zhì)體是由番茄和馬鈴薯融合而成的。?
(4)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體,則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含    條染色體。?
解析:(1)①是酶解法去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程,常用的酶是纖維素酶和果膠酶;細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁。(2)番茄和馬鈴薯的原生質(zhì)體能發(fā)生融合的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;誘導(dǎo)融合常用的物理方法是電融合法、離心法。(3)在鑒定雜種原生質(zhì)體時(shí)可用顯微鏡觀察,只考慮細(xì)胞兩兩融合的情況,根據(jù)細(xì)胞膜表面熒光的不同可觀察到3種不同的原生質(zhì)體,即“番茄—番茄”“馬鈴薯—馬鈴薯”“番茄—馬鈴薯”;由于番茄原生質(zhì)體用紅色熒光標(biāo)記,馬鈴薯原生質(zhì)體用綠色熒光標(biāo)記,若原生質(zhì)體是由番茄和馬鈴薯融合而成,則可觀察到融合的細(xì)胞膜表面既有紅色熒光,又有綠色熒光。(4)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體,則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)有(m+n)條染色體,在有絲分裂后期,著絲粒分裂,染色體數(shù)目加倍,含(2m+2n)條染色體。
答案:(1)酶解法 雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁 (2)細(xì)胞膜的流動(dòng)性 電融合法(離心法) (3)3 細(xì)胞膜表面既有紅色熒光,又有綠色熒光 (4)2m+2n

[拓展應(yīng)用]
12.下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素的敘述,錯(cuò)誤的是 (  )
A.幼嫩組織相比于成熟組織易培養(yǎng)成功
B.給離體幼莖消毒需要用到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液
C.接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照,但幼小植株形成后需要光照
D.生長素與細(xì)胞分裂素含量的比值大于1時(shí),有利于芽的分化
解析:幼嫩組織分化程度低,脫分化容易,相比于成熟組織易培養(yǎng)成功;植物組織培養(yǎng)時(shí),給離體幼莖消毒需要用到質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液;接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照,防止形成維管組織,但幼小植株形成后需要光照進(jìn)行光合作用;生長素與細(xì)胞分裂素含量的比值大于1時(shí),有利于根的分化。
答案:D
13.“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣,地上結(jié)番茄,地下長馬鈴薯,原因可能是(  )
A.需用生長素處理雜種植株,以促進(jìn)果實(shí)的發(fā)育
B.培育過程中控制結(jié)番茄和長馬鈴薯的基因全部丟失了
C.生物基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的
D.雜種細(xì)胞中沒有同源染色體,不能進(jìn)行正常的減數(shù)分裂
解析:“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣,地上結(jié)番茄,地下長馬鈴薯,說明番茄和馬鈴薯基因的表達(dá)不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的。
答案:C
14.甜葉菊植株中所含甜菊糖的甜度是蔗糖的300倍左右,而它的熱量卻很低,是一種非常理想的蔗糖替代甜味劑。甜葉菊的種子小,發(fā)芽率低,種子繁殖的遺傳性狀不穩(wěn)定,可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)提高甜葉菊繁殖效率。下列敘述錯(cuò)誤的是 (  )
A.植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù),依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性
B.植物組織培養(yǎng)的基本步驟是“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→生根→出芽→移栽”
C.愈傷組織再分化出根和芽,本質(zhì)上是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果
D.培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素含量的比值顯著高于1時(shí),可促進(jìn)愈傷組織分化出根
解析:植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù),依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性;植物組織培養(yǎng)的基本步驟是“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”;愈傷組織的再分化屬于細(xì)胞分化,本質(zhì)上是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果;培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素含量的比值顯著高于1時(shí),可誘導(dǎo)生根。
答案:B
15.(2021·全國Ⅰ卷)月季在我國享有“花中皇后”的美譽(yù)。為了建立月季某新品種的快速繁殖體系,以芽體為外植體,在MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA(6-芐基嘌呤)和IBA(吲哚丁酸)進(jìn)行芽體增殖實(shí)驗(yàn),芽分化率(%)結(jié)果如表。




IBA/(mg·L-1)
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
1.0
31
63
58
49
41
2.0
40
95
76
69
50
3.0
37
75
64
54
41
4.0
25
35
31
30
25
5.0
8
21
12
8
4

關(guān)于上述實(shí)驗(yàn),下列敘述錯(cuò)誤的是 (  )
A.6-BA濃度大于4.0 mg/L時(shí),芽分化率明顯降低
B.6-BA與IBA的比例為10∶1時(shí),芽分化率均高于其他比例
C.在培養(yǎng)基中同時(shí)添加適量的6-BA和IBA,可促進(jìn)芽分化
D.2.0 mg/L的6-BA和0.2 mg/L的IBA是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合
解析:據(jù)題表可知,6-BA濃度為從4.0 mg/L到 5.0 mg/L時(shí),芽分化率明顯降低;當(dāng)6-BA與IBA的比例為10∶1時(shí),芽分化率為31%、95%、64%、30%、4%,因此6-BA與IBA的比例為10∶1時(shí),芽分化率不一定都高于其他比例;6-BA與IBA的比例會(huì)影響芽的分化率,因此在培養(yǎng)基中同時(shí)添加適量的6-BA和IBA,可促進(jìn)芽分化;芽分化率為95%是最高的,此時(shí)6-BA和IBA濃度分別為2.0 mg/L、0.2 mg/L,是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合。
答案:B
16.(2021·宜昌)下圖為通過植物體細(xì)胞雜交培育“番茄—馬鈴薯”植株的過程,請回答下列問題。

(1)圖中過程①②處理后可獲得具有活力的    。過程③一般可
用    作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合。?
(2)過程⑤⑥⑦涉及的細(xì)胞工程技術(shù)是      ,其培養(yǎng)時(shí)選用的材料通常是分生組織,原因是 ? 。?
(3)人們培育“番茄—馬鈴薯”的目的是想獲得地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯的植株,從理論上這種設(shè)想是可以實(shí)現(xiàn)的,原因是?                           。但最后卻未能如愿,原因是基因的表達(dá)相互調(diào)控、相互影響。盡管如此,從整個(gè)過程來看,植物體細(xì)胞雜交的研究在 ?              方面,取得了巨大突破。?
(4)番茄有A、B兩個(gè)品種??蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí),參照品種B的最佳激素配比(見下表)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。

品種B組織培養(yǎng)階段


Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織
m1
n1
Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽
m2
n2
Ⅲ誘導(dǎo)生根
m3
n3

在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是    階段。為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度,參照品種B的激素配比(m1>2.0),以
0.5 μmol/L為梯度,設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn),細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)
為    μmol/L。?
解析:(1)題圖過程①②表示酶解法去除細(xì)胞壁,處理后可獲得具有活力的原生質(zhì)體。過程③一般可用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合。(2)過程⑤⑥⑦中將雜種細(xì)胞培育成雜種植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù),其培養(yǎng)時(shí)選用的材料通常是分生組織,原因是其全能性高,易培養(yǎng)形成愈傷組織。(3)人們培育“番茄—馬鈴薯”的目的是想獲得地上結(jié)番茄、地下長馬鈴薯的植株,從理論上這種設(shè)想是可以實(shí)現(xiàn)的,原因是該植株同時(shí)具有番茄和馬鈴薯的遺傳信息。植物體細(xì)胞雜交的研究使不同生物遠(yuǎn)緣雜交成為可能,取得了巨大突破。(4)設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn),則細(xì)胞分裂素濃度依次為(m1-1.0)μmol/L、(m1-0.5)μmol/L、m1 μmol/L、(m1+0.5)μmol/L、(m1+1.0)μmol/L,可見細(xì)胞分裂素的最高濃度應(yīng)設(shè)為(m1+1.0)μmol/L。
答案:(1)原生質(zhì)體 聚乙二醇(PEG) (2)植物組織培養(yǎng) 分生組織細(xì)胞全能性高(或分化程度低),容易培養(yǎng)形成愈傷組織 (3)該植株同時(shí)具有番茄和馬鈴薯的遺傳信息 打破生殖隔離,實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣育種,培育植物新品種
(4)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ   m1+1.0

探究實(shí)踐課:菊花的組織培養(yǎng)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 1.了解植物組織培養(yǎng)的基本原理。
2.了解生長素和細(xì)胞分裂素的用量的比值對菊花愈傷組織形成和分化的影響。
3.嘗試進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1.植物細(xì)胞一般具有全能性。
2.基本過程。
外植體愈傷組織根、芽植物體
3.植物激素中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素,它們用量的比值會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。
三、材料用具
1.材料。
幼嫩的菊花莖段、培養(yǎng)基、體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液和無菌水等。各種培養(yǎng)基的配制參見教科書附錄1。
2.用具。
50 mL錐形瓶(或植物組織培養(yǎng)瓶)、燒杯、酒精燈、超凈工作臺(或接種箱)、高壓蒸汽滅菌鍋、培養(yǎng)箱、封口膜、濾紙、標(biāo)簽、消毒用酒精棉球、培養(yǎng)皿、解剖刀和鑷子等。
四、探究過程


五、實(shí)驗(yàn)操作
1.操作提醒。
(1)實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和所有的器械都要滅菌。接種操作必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行,并且每次使用后的器械都要滅菌。
(2)誘導(dǎo)愈傷組織期間一般不需要光照,在后續(xù)的培養(yǎng)過程中,每日需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照。
(3)從酒精溶液中取出的用具一定要滴盡酒精后再灼燒,用具要晾涼后再放回酒精溶液中,以免引起火災(zāi)。
2.實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

實(shí)驗(yàn)時(shí)間
某年某月某日。
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)
實(shí)驗(yàn)室。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境
常溫、常壓、無菌等。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
實(shí)驗(yàn)記錄
時(shí)間/d
形態(tài)
生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值
是否需要光照
15~20
愈傷組織
1

30~35
芽組織
小于1

45~55
幼苗
大于1



實(shí)驗(yàn)結(jié)論
通過植物組織培養(yǎng)技術(shù),成功地將幼嫩的菊花莖段培育為完整的植物。
實(shí)驗(yàn)反思
成功之處
嚴(yán)格無菌操作,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
不足之處
個(gè)別外植體消毒時(shí)間過長,導(dǎo)致死亡。

3.實(shí)驗(yàn)拓展。
(1)在選取菊花莖段時(shí),為什么要選取生長旺盛的嫩枝?
提示:外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)其進(jìn)行脫分化和再分化。
(2)幼苗在移栽前為什么要經(jīng)過“煉苗”處理?
提示:由于培養(yǎng)箱和外界環(huán)境差距很大,幼苗不經(jīng)過“煉苗”處理而直接栽種很難適應(yīng)外界環(huán)境,死亡率會(huì)很高?!盁捗纭笔菫榱俗層酌缰饾u地適應(yīng)外界環(huán)境,從而降低幼苗的死亡率。
實(shí)驗(yàn)評價(jià)
1.植物組織培養(yǎng)從提出設(shè)想到實(shí)踐成功,經(jīng)歷了漫長而艱巨的歷程。植物組織培養(yǎng)是指 (  )
A.離體的植物器官、組織或細(xì)胞培育成愈傷組織
B.愈傷組織培育成植株
C.離體的植物器官、組織或細(xì)胞培育成植株
D.愈傷組織形成高度液泡化的組織
解析:一般情況下,植物組織培養(yǎng)是指培養(yǎng)外植體(離體的植物器官、組織或細(xì)胞)得到植物體的過程。
答案:C
2.植物組織培養(yǎng)的過程是 (  )
①離體的植物器官、組織或細(xì)胞?、谟鷤M織?、坌纬筛?、芽?、苊摲只、菰俜只、拗参矬w
A.①②③④⑤⑥     B.①④②⑤③⑥
C.①③④⑤②⑥   D.①④⑤②③⑥
解析:植物組織培養(yǎng)的過程是外植體(離體的植物器官、組織或細(xì)胞)經(jīng)脫分化形成愈傷組織,而后經(jīng)再分化形成根、芽,進(jìn)而發(fā)育成完整的植株。
答案:B
3.菊花的組織培養(yǎng)一般選擇  (  )
A.開過花的老枝
B.正在開花的枝條 
C.未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝  
D.任何枝條均可
解析:植物組織培養(yǎng)過程中,植物材料的年齡、保存時(shí)間的長短等都會(huì)影響組織培養(yǎng)的結(jié)果。對于菊花的組織培養(yǎng)來說,一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。
答案:C
4.用菊花的莖尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可培育出試管苗。下列關(guān)于這一過程的敘述,正確的是 (  )
A.進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),一次性加足營養(yǎng)物質(zhì)以防止污染
B.整個(gè)培養(yǎng)過程應(yīng)在光下進(jìn)行,有利于葉的生長
C.要根據(jù)培養(yǎng)過程的實(shí)際情況,更換培養(yǎng)基
D.整個(gè)培養(yǎng)過程都應(yīng)在密閉條件下進(jìn)行,以免雜菌的污染
解析:進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),在不同的發(fā)育階段,所需營養(yǎng)物質(zhì)的比例是不同的,故營養(yǎng)物質(zhì)需要適時(shí)調(diào)整,不能一次性加入;外植體脫分化形成愈傷組織的過程需要避光,再分化過程需要提供適宜的光照條件;在培養(yǎng)過程中,要根據(jù)實(shí)際情況,更換培養(yǎng)基,如愈傷組織長成后,需要移到分化培養(yǎng)基上,進(jìn)行再分化形成試管苗;在植物組織培養(yǎng)長出根、芽等器官后,植物可以進(jìn)行光合作用,自己制造有機(jī)物,此后的階段不需要嚴(yán)格的密閉條件。
答案:C
5.在菊花的組織培養(yǎng)接種操作完成3~4 d后,觀察同一溫室中的外植體,發(fā)現(xiàn)有的瓶內(nèi)外植體正常生長,有的瓶內(nèi)外植體死亡。下列不可能是外植體死亡的原因的是 (  )
A.接種時(shí)培養(yǎng)基滅菌不徹底
B.愈傷組織形成初期沒有給予充足的光照
C.接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體
D.培養(yǎng)過程中營養(yǎng)、pH等條件不適宜
解析:接種時(shí)培養(yǎng)基滅菌不徹底,就會(huì)受到微生物的污染,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄;愈傷組織形成初期,細(xì)胞還沒有開始再分化,不需要充足的光照;接種工具灼燒后未待冷卻就接種外植體,會(huì)因高溫殺死外植體;一般來講,進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí),若培養(yǎng)條件(如pH、營養(yǎng)等)不適宜,則外植體可能死亡。
答案:B
6.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的接種過程中應(yīng)注意的事項(xiàng),全部正確的是 (  )
①接種室要消毒 ②無菌操作?、劢臃N時(shí)可以談話
④接種時(shí)要防止交叉污染?、萁臃N完立刻蓋好瓶口
A.①②③④ B.①②③④⑤
C.②③④⑤ D.①②④⑤
解析:進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)注意接種室要消毒;實(shí)驗(yàn)過程要無菌操作;接種時(shí)不可以談話,防止雜菌污染;外植體可先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒,取出用無菌水沖洗后,再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液消毒,并用無菌水沖洗干凈;接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止交叉污染;接種完畢后應(yīng)立即蓋好瓶蓋。
答案:D
7.下圖表示菊花嫩枝的離體培養(yǎng)過程,請據(jù)圖回答下列問題。

(1)在植物組織培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基名稱為         ,從物理性質(zhì)上看屬于    培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中要加入一定的植物激素,在培養(yǎng)過程中,使用激素的用量的比值會(huì)影響細(xì)胞的發(fā)育,細(xì)胞分裂素與生長素的比值    (填“大于1”“小于1”或“為1”)有利于根的分化。?
(2)植物組織培養(yǎng)都需要接種,接種前為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底,需要進(jìn)行檢測,檢測的方法是? 。?植物組織培養(yǎng)無菌操作應(yīng)注意                    (至少答出兩點(diǎn))。?
(3)圖中的B過程需要      ,因?yàn)橛鷤M織形成幼小植物后,植物需要葉綠素進(jìn)行光合作用。?
解析:題圖表示植物組織培養(yǎng)過程,其原理是植物細(xì)胞具有全能性。圖中A表示脫分化過程,該過程需避光才能形成愈傷組織,愈傷組織的細(xì)胞分化程度低,全能性高;B表示再分化過程,該過程需光照。(1)在植物組織培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基名稱為MS培養(yǎng)基,從物理性質(zhì)看屬于固體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中要加入一定的植物激素,在培養(yǎng)過程中,使用激素用量的比值會(huì)影響細(xì)胞的發(fā)育,細(xì)胞分裂素與生長素的比值小于1時(shí)有利于根的分化,該比值大于1時(shí),有利于芽的分化。(2)植物組織培養(yǎng)都需要接種,接種前為確定培養(yǎng)基是否滅菌徹底,需要進(jìn)行檢測,檢測的方法是將未接種的培養(yǎng)基放在37 ℃的恒溫箱中培養(yǎng)24 h(或放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間)后觀察是否有菌落出現(xiàn)。植物組織培養(yǎng)無菌操作應(yīng)注意外植體消毒、在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作、操作者雙手消毒等。(3)圖中的B過程需要光照,因?yàn)槿~綠素的合成需要光,且葉綠體需利用光才能進(jìn)行光合作用合成有機(jī)物。
答案:(1)MS培養(yǎng)基 固體 小于1 (2)將未接種的培養(yǎng)基放在37 ℃的恒溫箱中培養(yǎng)24 h(或放在適宜溫度下培養(yǎng)一段時(shí)間)后觀察是否有菌落出現(xiàn) 外植體消毒、在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作、操作者雙手消毒等 (3)光照


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一 植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)

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