?單元清通關卷（十）　生物技術與工程
（滿分：100分　時間：75分鐘）
一、單項選擇題（每小題2分，共30分）
1.[經(jīng)典高考]下列關于細菌的敘述，正確的是（　?。?br /> A.不同種類細菌的生長均需要相同碳源
B.常用液體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落
C.細菌大量培養(yǎng)過程中，芽孢形成于細菌生長的調(diào)整期
D.培養(yǎng)基中含有高濃度NaCl有利于金黃色葡萄球菌的篩選
2.通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細菌和放線菌的生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出（　?。?br /> ①大腸桿菌 ②霉菌
③放線菌 ④固氮細菌
A.④②③ B．①②③
C.①③④ D．只有③④
3.[2021·山東淄博市三模]微生物實驗需要嚴格的無菌操作以防止污染，下列說法錯誤的是（　?。?br /> A.紫外線用于實驗室空氣及實驗臺表面的消毒
B.無菌技術可有效地避免實驗操作者自身被微生物感染
C.為防止DNA污染，PCR用水應來自加熱煮沸的自來水
D.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要滅菌處理
4.[2022·湖北黃岡市模擬]牛奶消毒及細菌檢測實驗的過程如下圖所示，下列相關敘述不正確的是（　?。?br />
A.步驟①為巴氏消毒法，步驟②為系列梯度稀釋，步驟③中的牛肉膏蛋白胨均可提供碳源、氮源
B.實驗中對試管、培養(yǎng)皿的滅菌是干熱滅菌，這種方法適用的是能耐高溫且需要保持干燥的物品
C.實驗中的培養(yǎng)基適宜的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌
D.實驗中采用平板劃線法計數(shù)，最可能導致實驗結果偏低
5.[2022·天津和平區(qū)二模]如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的示意圖，有關敘述正確的是（　?。?br />
A.步驟③純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落
B.在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時，高壓蒸汽滅菌后還需調(diào)pH
C.步驟③中需要配制含酚紅的選擇性培養(yǎng)基進行篩選
D.步驟③采用稀釋涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素
6.下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖 1、圖 2 中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。下列說法正確的是（　?。?br />

A．重組 DNA 技術所用的工具酶是限制酶、DNA 連接酶和載體
B．只有用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的黏性末端才能互補
C．用圖中質(zhì)粒和外源基因DNA構建重組質(zhì)粒，可使用 SmaⅠ切割
D．使用 EcoRⅠ同時處理質(zhì)粒和外源DNA，可能會發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化
7.ChlL基因是藍細菌擬核DNA上控制葉綠素合成的基因。為了研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，需要構建缺失ChlL基因的藍細菌細胞。構建的過程如下圖。相關敘述中，正確的是（　?。?br />
A．②過程共形成2個磷酸二酯鍵
B．①②過程都需要使用限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶
C．該項技術操作成功的標志是目的基因的表達
D.紅霉素抗性基因是標記基因，用于篩選含有ChlL基因的受體細胞
8.植物體細胞雜交與動物細胞工程中所用技術或方法與原理不相符的是（　?。?br /> A．植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體——細胞的全能性
B．纖維素酶、果膠酶處理植物細胞壁——酶的專一性
C．原生質(zhì)體融合和動物細胞融合——細胞膜的流動性
D．紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)——細胞增殖
9.2019年1月24日，我國科學家宣布世界首批疾病克隆猴在中國誕生，這標志著中國體細胞克隆技術走向成熟，實驗用疾病模型猴批量克隆“照進現(xiàn)實”，全球?qū)嶒瀯游锸褂脭?shù)量有望大幅降低，藥物研發(fā)駛?cè)搿翱燔嚨馈?。下列相關敘述正確的是（　?。?br /> A．體細胞核移植技術的原理是動物細胞的全能性
B.5只克隆獼猴細胞核基因型與核供體細胞一致
C.用于核移植的受體細胞通常選擇處于減數(shù)分裂Ⅰ時期的卵母細胞
D．動物細胞培養(yǎng)時，將其置于含95% O2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)以滿足細胞代謝
10.治療性克隆對解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應具有重要意義，簡要流程如圖。下列有關敘述正確的是（　?。?br />
A．過程①、②分別應用了核移植技術和胚胎移植技術
B．細胞培養(yǎng)中需提供5%CO2，目的是調(diào)節(jié)細胞外液的滲透壓
C.胚胎干細胞可來源于囊胚中的內(nèi)細胞團，具有發(fā)育的全能性
D．將圖中獲得的組織器官移植給個體A，不會發(fā)生免疫排斥反應
11.將人細胞與小鼠細胞融合得到的人－鼠雜種細胞進行長期培養(yǎng)，雜種細胞隨機丟失一部分人的染色體后，染色體數(shù)目會保持穩(wěn)定。選取三種雜種細胞，對編碼人的芳烴羥化酶（AHH）和磷酸甘油酸激酶（PGK）的基因進行染色體定位研究，結果如表（“＋”表示有，“－”表示無）。
雜種細胞
人的染色體
AHH
PGK
2號
11號
17號
X
甲
－
＋
－
＋
－
＋
乙
＋
＋
－
－
＋
－
丙
－
＋
＋
＋
－
＋
下列有關敘述錯誤的是（　?。?br /> A．人細胞與小鼠細胞融合體現(xiàn)了細胞膜具有流動性
B．基因在染色體上的位置稱為基因座位
C．人細胞中11號染色體小于17號染色體
D．編碼AHH和PGK的基因分別在2號染色體和X染色體上
12.動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術，①②③分別表示其對應的結果，請據(jù)圖回答，下面說法正確的是（　?。?br />
A．若a是胚胎分割技術，則產(chǎn)生的①中，所有個體的基因型和表型一定相同
B．若b是體外受精技術，則形成②的過程屬于克隆
C．若c是核移植技術，則形成③的過程體現(xiàn)了動物體細胞也具有全能性
D．①②③生產(chǎn)過程中的代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情
13.目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動物方法之一，該方法以精子作為外源基因的載體，使精子攜帶外源基因進入卵細胞受精。如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列說法正確的是（　　）

A．獲取外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶
B．導入外源基因的精子與卵細胞結合后即可完成轉(zhuǎn)化過程
C．②采用體外受精技術，受精的標志是在卵細胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體
D．④過程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是原腸胚
14.下列關于治療性克隆和生殖性克隆的說法，錯誤的是（　?。?br /> A．使用病人自己的細胞產(chǎn)生胰島細胞以治療糖尿病屬于治療性克隆
B．將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆
C．治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖
D．治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用動物細胞培養(yǎng)和核移植技術
15.某種微生物合成的蛋白酶與人體消化液中的蛋白酶的結構和功能很相似，只是熱穩(wěn)定性較差，進入人體后容易失效?，F(xiàn)要將此酶開發(fā)成一種片劑，臨床治療食物的消化不良，最佳方案是（　?。?br /> A．對此酶中的少數(shù)氨基酸替換，以改善其功能
B.將此酶與人蛋白酶進行拼接，形成新的蛋白酶
C．重新設計與創(chuàng)造一種全新的蛋白酶
D．減少此酶在片劑中的含量
二、不定項選擇題（每題4分，共20分）
16.[2021·山東淄博市高三三模]以蘋果汁為原料，經(jīng)酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵可制得果醋。下列說法錯誤的是（　?。?br /> A．酒精發(fā)酵階段和醋酸發(fā)酵階段的適宜溫度相同
B．酒精發(fā)酵階段和醋酸發(fā)酵階段均有大量氣體產(chǎn)生
C．在醋酸發(fā)酵階段醋酸桿菌將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸
D．在醋酸發(fā)酵階段接種乳酸菌可提高醋酸的酸度
17.科研人員利用誘變方式選育高產(chǎn)β－胡蘿卜素的三孢布拉霉負菌，未突變的三孢布拉霉負菌不能在含有β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長。隨著β－胡蘿卜素含量的增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色。圖甲為選育菌種及獲得β－胡蘿卜素的流程示意圖，下列相關敘述正確的是（　?。?br />
A．要得到乙培養(yǎng)基中的菌落，可用稀釋涂布平板法進行②操作，然后培養(yǎng)
B．經(jīng)①過程紫外線照射的三孢布拉霉負菌都能在含β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長
C．進行③操作時，應選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)
D．能在添加了β－紫羅酮的乙培養(yǎng)基上長成菌落的細菌，其遺傳物質(zhì)都發(fā)生了改變
18.熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應體系中每加入一對引物的同時加入一個與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處，會水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號，即每擴增一次，就有一個熒光分子生成。相關敘述正確的是（　?。?br />
A．引物與熒光探針都具特異性，與模板結合時都遵循堿基互補配對原則
B．Taq酶可以催化子鏈沿著5′→3′方向延伸，需反應體系中ATP供能
C．若擴增n次，則共有2n－1個熒光分子生成
D.若用上述技術檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，則需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶
19.關于現(xiàn)代生物工程技術應用的安全性，下列說法正確的是（　?。?br /> A．對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器
B．對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)
C．我國不反對治療性克隆，允許有限制地進行克隆人實驗
D．一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物
20.小鼠胚胎干細胞經(jīng)定向誘導可獲得多種功能細胞，制備流程如下圖所示，下列敘述錯誤的是（　?。?br />
A．取細胞b，僅僅進行DNA分析不能鑒定動物性別
B．細胞a和細胞b內(nèi)含有的核基因相同，但全能性高低不同
C．使用分割針分割囊胚期胚胎時，內(nèi)細胞團要盡可能地均等分割
D．為了獲得更多的囊胚，可注射激素促進雄鼠產(chǎn)生更多生殖細胞
三、非選擇題（共50分）
21.（10分）某研究小組以紫葡萄為原料制作葡萄酒的基本流程和裝置示意圖如下。


請回答：
（1）制作葡萄漿前，對葡萄進行清洗和用　　　　　色的高錳酸鉀溶液浸泡。制作酵母懸液時，在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖，待酵母懸液中出現(xiàn)　　　即可。
（2）裝瓶后開始一段時間，發(fā)酵瓶中溶解氧的含量變化是　　　　　　。發(fā)酵過程中，發(fā)酵瓶中酒精的含量變化是________________________________________________。
（3）下列關于裝置中有水彎管作用的敘述，錯誤的是　　　　。
A．隔絕氣體出入
B．使發(fā)酵瓶內(nèi)外的壓強基本平衡
C．減少雜菌污染
D．有利于發(fā)酵瓶內(nèi)形成缺氧環(huán)境
（4）實驗中，判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是　　　　。
A.發(fā)酵瓶中pH開始下降
B．發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡
C．發(fā)酵瓶中酒精濃度達到30%
D．發(fā)酵瓶中酵母菌數(shù)量急劇減少
（5）欲利用葡萄酒制作果醋，發(fā)酵瓶中應加入的菌種是　　　　　　，該菌種在　　　　條件下能將乙醇氧化為醋酸。
22.（10分）雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細胞因子，廣泛用于動物領域的抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構建基因表達載體，通過農(nóng)桿菌介導法導入煙草，以獲得抗病毒煙草。如圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細胞的流程，①～④表示相關的操作，兩種限制酶的識別序列及切割位點如表所示。請回答下列問題：

（1）步驟①中，利用PCR技術擴增干擾素基因時，設計引物序列的主要依據(jù)是　　　　　　　　?？蒲腥藛T還在兩種引物的一端分別加上了　　　　　　　　和　　　　　　　　序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構建表達載體需用兩種限制酶，選擇的原則是　　　　。
A．Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個切割位點
B．目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個切割位點
C．酶切后，目的基因形成的兩個黏性末端序列不相同
D．酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同
（2）步驟②所構建的基因表達載體中未標注出的必需元件還有　　　　　　　，步驟③中需先用　　　　　　　　處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入細胞。
（3）步驟④中，科研人員提取愈傷組織細胞的RNA后，先獲得cDNA，再進行PCR擴增，若最終未能檢測出干擾素基因，其可能原因是________________________________
________________________________________________________________________。
23.（10分）犬細小病毒（CPV）感染幼犬后會引發(fā)出血性腸炎或心肌炎，VP2蛋白是其主要的抗原。如圖是利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）單克隆抗體技術的基礎是　　　　?？贵w是由已免疫的B淋巴細胞分泌的，生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接培養(yǎng)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，原因是　　　　　　　　。
（2）過程①是給實驗小鼠注射　　　　　　，目的是獲得_________________________。
（3）過程②采用的技術是　　　　　　　　，得到的是多種類型的細胞，原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。對獲得的雜種細胞選擇培養(yǎng)后，還需要在體外進行　　　　　　　　，并經(jīng)過多次篩選才能獲得數(shù)量足夠多的能分泌抗體的雜交瘤細胞。
24.（10分）隨著生物技術的發(fā)展，現(xiàn)代的試管嬰兒技術不僅能解決部分人的生育問題，還能用于部分腫瘤疾病、遺傳性疾病的治療等，實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育?；卮鹣铝袉栴}：
（1）培育試管嬰兒時，為了提高受孕率，需培植多個胚胎，因此需要用　　　　　 處理，促進女性排出更多的卵子。
（2）從受精卵到原腸胚需依次經(jīng)歷哪些時期？卵裂→　　　　　　　　　　　 。
（3）一對夫妻，妻子是血友病患者，而丈夫正常。為了生育一個健康的孩子，進行胚胎移植前需要進行　　　　　　，目前最有效最準確的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：從被檢測的囊胚中取出幾個　　　　　?。ㄌ睢白甜B(yǎng)層”或“內(nèi)細胞團”）細胞，提取DNA進行擴增，用位于Y染色體上的性別決定基因（即SRY基因）制成的探針進行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，胚胎性別為　　　　　，而基因工程中　　　　　　　　　　　　　　　　也會用到DNA探針。
（4）如圖是治療性克隆獲取病人胚胎干細胞的兩種方法，其中方法一中③的獲得用到了　　　　技術；方法二中獲得④運用的原理是　　　　　　　　　　　　。

25.（10分）α1－抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見的單基因遺傳病，患者成年后會出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴重者甚至死亡。對于該致病患者?？刹捎米⑸淙甩?－抗胰蛋白酶來緩解癥狀。據(jù)此回答：

（1）圖1表示獲取人α1－抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請回答下列問題：
①a過程是在酶的作用下完成的，該酶的作用特點是　　　　　　　　　　　　。
②c過程需要的原料是____________________________________________________。
③要確定獲得的基因是否是所需的目的基因，可以從分子水平上利用　　　　　　　　技術檢測該基因的堿基序列。
（2）利用轉(zhuǎn)基因技術將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?，最終培育出能在乳腺細胞表達人α1－抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更易獲得這種酶，簡要過程如圖2所示。
①獲得目的基因后，常利用PCR技術在體外將其大量擴增，其過程是高溫變性后解鏈低溫復性后　　　　　　　　，然后中溫延伸在Taq酶的作用下從　　　　　　　　進行互補鏈的合成。
②載體上綠色熒光蛋白（GEP）基因的作用是便于_____________________________。
基因表達載體d，除圖中的標示部分外，還必須含有　　　　　　　　　　　　。
（3）人類遺傳病一般很難用藥物治療，基因治療是指把　　　　導入病人體內(nèi)進行治療。目前基因治療分為　　　　　　　　　　　　　　　　　兩種方法。
（4）在基因工程的基礎上發(fā)展起了蛋白質(zhì)工程，蛋白質(zhì)工程目標是_____________
________________________________________________________________________。
（5）目前對轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，人們存在爭論主要從轉(zhuǎn)基因生物可能存在　　　　　　　　安全問題三個方面。
單元清通關卷(十)　生物技術與工程
1．D　自養(yǎng)型細菌(如硝化細菌)可直接利用空氣中的CO2作碳源，異養(yǎng)型細菌(如大腸桿菌)只能利用培養(yǎng)基中現(xiàn)成的有機碳源(如葡萄糖)，A錯誤；常利用固體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落，B錯誤；細菌的生長曲線包括調(diào)整期、對數(shù)期、穩(wěn)定期、衰亡期四個階段，芽孢形成于細菌生長的穩(wěn)定期，C錯誤；金黃色葡萄球菌能在含有高濃度NaCl的培養(yǎng)基中正常生長、繁殖，其他微生物則不能，故可用含高濃度NaCl的選擇培養(yǎng)基來篩選金黃色葡萄球菌，D正確。
2．A　缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長，而固氮細菌能生長；在培養(yǎng)基中加青霉素可以抑制細菌和放線菌等原核生物細胞壁的合成，而霉菌屬于真核生物，故能生長；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細菌和霉菌的生長，對放線菌的生長無影響。
3．C　紫外線能破壞DNA的結構，故紫外線可用于實驗室空氣及實驗臺表面的消毒，A正確；無菌技術可以避免實驗材料被感染，也可以避免操作者自身被微生物感染，B正確；為防止DNA污染，PCR用水應為高壓的雙蒸水，加熱煮沸的自來水也仍存在細菌等微生物，C錯誤；使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要高壓蒸汽滅菌處理，以免污染環(huán)境，D正確。
4．D　步驟①為巴氏消毒法，這種消毒法的特點是既能殺死牛奶中的微生物，又不破壞牛奶中的營養(yǎng)成分，步驟②采用無菌水進行梯度稀釋，步驟③中的牛肉膏蛋白胨都能為微生物的生長提供碳源和氮源，A正確；實驗中對試管、培養(yǎng)皿的滅菌可采用的方法是干熱滅菌，這種方法適用的是能耐高溫且需要保持干燥的物品，B正確；培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，C正確；平板劃線法不能對微生物進行計數(shù)，應該用稀釋涂布平板法，D錯誤。
5．A　步驟③是利用稀釋涂布平板法將聚集的細菌分散成單個，從而獲得單細胞菌落，A正確；制備培養(yǎng)基時，需要先調(diào)節(jié)pH，后進行高壓蒸汽滅菌，B錯誤；步驟③中含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基，C錯誤；由于實驗目的是篩選高效分解尿素細菌，所以應該以尿素作為唯一的氮源，而不應該加入牛肉膏和蛋白胨，D錯誤，
6．D　重組DNA技術中常用的工具酶有限制酶和DNA連接酶，載體不屬于工具酶，A錯誤；可用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生互補的黏性末端，也可用雙酶切法切割DNA產(chǎn)生互補的黏性末端，B錯誤；若使用SmaⅠ切割質(zhì)粒和外源基因DNA會導致質(zhì)粒中抗生素抗性基因(標記基因)和目的基因被破壞，C錯誤；使用 EcoRⅠ同時處理質(zhì)粒和外源DNA，可能會發(fā)生質(zhì)粒與質(zhì)粒的結合、目的基因與目的基因的結合即自身環(huán)化，D正確。
7．B?、谶^程共形成4個磷酸二酯鍵，A錯誤；①過程和②過程都需要限制酶切割和DNA連接酶連接，形成重組質(zhì)粒，B正確；因最終得到的是無ChlL基因的藍細菌，故操作成功的標志并不是目的基因的表達，C錯誤；插入紅霉素抗性基因后ChlL基因被破壞，因此不可能是篩選含有ChlL基因的受體細胞，D錯誤。
8．A　植物組織培養(yǎng)技術利用了細胞的全能性，單克隆抗體的制備利用了細胞膜的流動性和細胞增殖的原理，A錯誤；細胞壁的成分主要是纖維素和果膠，利用酶的專一性，纖維素酶和果膠酶能夠去細胞壁，B正確；原生質(zhì)體融合和動物細胞融合的過程中，都利用了細胞膜的流動性，C正確；紫草細胞培養(yǎng)和雜交瘤細胞的培養(yǎng)都利用了細胞增殖的原理，從而獲得相應的細胞產(chǎn)物，D正確。
9．B　體細胞核移植技術的原理是動物細胞核的全能性，A錯誤；5只克隆獼猴細胞核基因型與核供體細胞一致，B正確；用于核移植的受體細胞通常選擇處于減數(shù)分裂Ⅱ期的卵母細胞，C錯誤；動物細胞培養(yǎng)時，將其置于95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)以滿足細胞代謝，D錯誤。
10．C　過程①是核移植技術，過程②是早期胚胎培養(yǎng)，A錯誤；細胞培養(yǎng)中需提供5%CO2，目的是維持培養(yǎng)液的pH值，B錯誤；胚胎干細胞來源于囊胚的內(nèi)細胞團或原始性腺，具有發(fā)育的全能性，C正確；圖中的重組細胞的細胞核來自個體B，因此將圖中獲得的組織器官移植給A個體，會發(fā)生免疫排斥，D錯誤。
11．C　人細胞與小鼠細胞融合體現(xiàn)了細胞膜具有流動性，A正確；基因在染色體上的位置稱為基因座位，B正確；此實驗無法證明人細胞中11號染色體小于17號染色體，C錯誤；根據(jù)圖表分析可判斷，編碼AHH的基因在2號染色體上，編碼PGK的基因在X染色體上，D正確。
12．D　利用胚胎分割技術得到的個體是由同一個受精卵分裂發(fā)育的，所有個體的基因型相同，但表型由基因型和環(huán)境共同決定，故表型不一定相同，A錯誤；體外受精屬于有性生殖，而克隆屬于無性生殖，B錯誤；核移植技術體現(xiàn)動物細胞核具有全能性，C錯誤；①②③生產(chǎn)過程均需進行胚胎移植，代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情，以確保生殖器官的生理環(huán)境相同，D正確。
13．C　獲取外源基因通常用到的工具酶是限制酶，A錯誤；導入外源基因的精子與卵細胞結合后且外源基因能進行復制并完成了表達，才說明完成了轉(zhuǎn)化過程，B錯誤；②采用體外受精技術，受精的標志是觀察到兩個極體，C正確；④過程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是桑葚胚或囊胚，D錯誤。
14．C　要把病人的胚胎干細胞在一定的條件下，通過離體培養(yǎng)和誘導分化形成胰島細胞以治療糖尿病，屬于治療性克??；生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的克隆，即用生殖技術將一個克隆的胚胎植入一個女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程；治療性克隆和生殖性克隆都屬于無性生殖；治療性克隆和生殖性克隆技術均需要應用動物細胞培養(yǎng)和核移植技術。
15．A　因某種微生物合成的蛋白酶與人體消化液中的蛋白酶結構和功能很相似，可見要想使蛋白酶熱穩(wěn)定性有所提高，就要改變蛋白質(zhì)的結構，此類問題一般是對蛋白質(zhì)中的個別氨基酸進行替換。
16．ABD　酒精發(fā)酵階段適宜溫度為18～30℃，醋酸發(fā)酵階段的適宜溫度為30～35℃，A錯誤；醋酸發(fā)酵階段產(chǎn)生醋酸，無氣體產(chǎn)生，B錯誤；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿幔珻正確；在醋酸發(fā)酵階段接種醋酸菌可提高醋酸的酸度，乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)物是乳酸，不是醋酸，D錯誤。
17．ACD　根據(jù)分析可知要得到乙培養(yǎng)基中的分布均勻的菌落，可用稀釋涂布平板法接種，A正確；使用紫外線照射進行誘變育種，其原理是基因突變，由于基因突變的低頻性和不定向性，經(jīng)①過程紫外線照射的三孢布拉霉負菌不可能都能在含β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，B錯誤；根據(jù)題干可知未突變的三孢布拉霉負菌不能在含有β－紫羅酮的培養(yǎng)基上生長。隨著β－胡蘿卜素含量的增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色，進行③操作時，應選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)，C正確、D正確。
18．ACD　引物與探針均具特異性，與模板結合時遵循堿基互補配對原則，A正確；根據(jù)圖示中引物延伸的方向可以確定，Taq酶只能從引物的3′端延伸子鏈，催化子鏈沿著5′→3′方向延伸，需dNTP作為原料，不需要反應體系中ATP供能，B錯誤；據(jù)題意可知，擴增1次，子代中有1個熒光分子，擴增2次，子代中有3個熒光分子，若擴增n次，則共有2n－1個熒光分子生成，C正確；熒光探針為DNA序列，基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是mRNA，若用上述技術檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，則需要先形成cDNA再進行PCR擴增，因此用到逆轉(zhuǎn)錄酶，D正確。
19．ABD　對待生物武器的態(tài)度應明確而堅定，即堅決禁止生物武器，A正確；對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要進行認真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克隆，禁止進行克隆人的實驗，C錯誤；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物，D正確。
20．AD　細胞b是滋養(yǎng)層細胞，通過DNA分析可以鑒定動物性別，A錯誤；細胞a是內(nèi)細胞團，細胞b是滋養(yǎng)層細胞，兩者來源相同，細胞內(nèi)核基因相同，但是滋養(yǎng)層細胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤，內(nèi)細胞團發(fā)育成胎兒的各種組織，所以全能性高低不同，B正確；進行胚胎分割時，要盡可能的將內(nèi)細胞團均等分割，C正確；為了獲得更多的囊胚，可注射激素促進雌鼠產(chǎn)生更多生殖細胞，D錯誤。
21．答案：(1)紅(紫)　氣泡　(2)減少　增加　(3)A　(4)B　(5)醋酸菌　有氧
解析：(1)制作葡萄漿前，將成熟的葡萄用水清洗干凈，再用紅(紫)色的高錳酸鉀溶液浸泡約5 min。為了使酵母菌迅速發(fā)生作用，制作酵母懸液時，在干酵母中應加入少量溫水和極少量蔗糖，待酵母懸液中出現(xiàn)氣泡即可。(2)裝瓶后開始一段時間，酵母菌即進行需氧呼吸，快速繁殖，消耗發(fā)酵瓶內(nèi)的氧氣，瓶內(nèi)溶解氧的含量減少。氧氣耗盡后，酵母菌進行厭氧呼吸，生成酒精和二氧化碳，酒精含量逐漸增多。(3)裝置中有水彎管可使發(fā)酵瓶內(nèi)外的壓強基本平衡，并減少雜菌污染，有利于發(fā)酵瓶內(nèi)形成缺氧環(huán)境。(4)當發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡時，即表示發(fā)酵完畢。(5)制作果醋需用醋酸菌作為菌種，該菌種在有氧條件下能將乙醇氧化為醋酸。
22．答案：(1)雞干擾素基因兩端的部分核苷酸序列　GAATTC　GGATCC　AC　(2)復制原點　Ca2＋　(3)雞干擾素基因未能導入煙草愈傷組織細胞或?qū)霟煵萦鷤M織細胞的雞干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄
解析：分析圖解，圖中過程①表示獲取目的基因，過程②表示基因表達載體的構建，過程③表示將重組質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌，過程④表示目的基因的檢測和鑒定。
(1)利用PCR技術擴增干擾素基因時，設計引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分核苷酸序列；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，因此科研人員還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構建表達載體需用兩種限制酶，Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個切割位點，A正確；目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，不能有限制酶的切割位點，B錯誤；酶切后，目的基因形成的兩個黏性末端序列不相同，否則會自身環(huán)化，C正確；酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列應該不同，否則會自身環(huán)化，D錯誤。故選AC。
(2)基因表達載體必須具備的有目的基因、標記基因、啟動子、終止子和復制原點，圖中還缺復制原點；微生物細胞作為受體細胞時，需要鈣離子處理使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細胞，因此過程③中需先用Ca2＋(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入細胞。
(3)提取的愈傷組織細胞的RNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程得到DNA；最終未能檢測出干擾素基因，可能是因為雞干擾素基因未能導入煙草愈傷組織細胞或?qū)霟煵萦鷤M織細胞的雞干擾素基因未能轉(zhuǎn)錄。
23．答案：(1)動物細胞培養(yǎng)　B淋巴細胞不能無限增殖，骨髓瘤細胞不能分泌抗體　(2)VP2蛋白(或滅活的CPV)　誘導小鼠產(chǎn)生能分泌抗VP2蛋白抗體的B淋巴細胞　(3)動物細胞融合　細胞融合是隨機的，且不能百分之百成功融合　克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
解析：(1)單克隆抗體技術的基礎是動物細胞培養(yǎng)。B淋巴細胞不能無限增殖，骨髓瘤細胞不能分泌抗體，但二者融合的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能分泌抗體。
(2)過程①是給實驗小鼠注射VP2蛋白(或滅活的CPV)，目的是誘導小鼠產(chǎn)生能分泌抗VP2蛋白抗體的B淋巴細胞。
(3)過程②采用的技術是動物細胞融合，由于細胞隨機融合，且不能百分之百成功融合，因此獲得的是多種類型的細胞，包括未融合的細胞、同種融合的細胞和雜種細胞。對獲得的雜種細胞選擇培養(yǎng)后，還需要再進行體外克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，并經(jīng)過多次篩選才能獲得目的細胞。
24．答案：(1)促性腺激素　(2)桑葚胚→囊胚　(3)性別鑒定　滋養(yǎng)層　女性　目的基因的檢測和鑒定　(4)顯微注射　細胞膜具有流動性
解析：(1)促性腺激素能促進超數(shù)排卵。(2)受精卵發(fā)育至原腸胚需要依次經(jīng)歷的時期為卵裂→桑葚胚→囊胚。(3)血友病屬于伴X染色體隱性遺傳病(相關基因用B、b表示)。一對夫妻，妻子是血友病患者(XbXb)，而丈夫正常(XBY)，則他們所生兒子均患病，女兒均正常，因此為了生育一個健康的孩子，進行胚胎移植前需要進行性別鑒定。目前最有效最準確的方法是SRY－PCR法，操作的基本程序是：從被檢測的囊胚中取出幾個滋養(yǎng)層細胞，提取DNA進行擴增，用位于Y染色體上的性別決定基因(即SRY基因)制成的探針進行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，說明不含Y染色體，則胚胎性別為女性?；蚬こ讨心康幕虻臋z測和鑒定也會用到DNA探針。(4)方法一中③的獲得用到了顯微注射技術；方法二中獲得④的方法是細胞融合，而細胞融合的原理是細胞膜具有流動性。
25．答案：(1)①識別特定的核苷酸序列，并在特定的切點上切割DNA分子?、?種游離的脫氧核苷酸?、跠NA分子雜交　(2)①引物結合到互補DNA鏈上　引物　②篩選含有目的基因的受體細胞　啟動子、終止子　(3)正?；颉◇w內(nèi)基因治療、體外基因治療　(4)根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求，對蛋白質(zhì)結構進行分子設計　(5)生物、食品、環(huán)境
解析：(1)①a過程是在限制酶的作用下完成的，該酶的作用特點是識別特定的核苷酸序列，并在特定的切點上切割DNA分子。②c過程表示逆轉(zhuǎn)錄，需要的原料是4種游離的脫氧核苷酸。③要確定獲得的基因是否是所需的目的基因，可以從分子水平上利用DNA分子雜交技術檢測該基因的堿基序列。(2)利用轉(zhuǎn)基因技術將控制該酶合成的基因?qū)胙虻氖芫?，最終培育出能在乳腺細胞表達人α1－抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更易獲得這種酶，簡要過程如圖2所示。①獲得目的基因后，常利用PCR技術在體外將其大量擴增，其過程是高溫變性后解鏈，低溫復性后引物結合到互補DNA鏈上，然后中溫延伸在Taq酶的作用下從引物進行互補鏈的合成。②載體上綠色熒光蛋白(GEP)基因的作用是便于篩選含有目的基因的受體細胞。基因表達載體d，除圖中的標示部分外，還必須含有啟動子、終止子。(3)人類遺傳病一般很難用藥物治療，基因治療是指把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)進行治療。目前基因治療分為體內(nèi)基因治療、體外基因治療兩種方法。(4)在基因工程的基礎上發(fā)展起了蛋白質(zhì)工程，蛋白質(zhì)工程目標是根據(jù)人們對蛋白質(zhì)功能的特定需求，對蛋白質(zhì)結構進行分子設計。(5)目前對轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題，人們存在爭論主要從轉(zhuǎn)基因生物可能存在生物、食品、環(huán)境安全問題三個方面。

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