?單元質(zhì)檢卷十　生物技術(shù)與工程
(時(shí)間:75分鐘　滿分:100分)
一、選擇題:本題共16小題,共40分。第1~12小題,每小題2分;第13~16小題,每小題4分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中,只有一項(xiàng)是符合題目要求的。
1.(2021山東泰安模擬)微生物發(fā)酵已經(jīng)廣泛應(yīng)用于人類生活的各個(gè)領(lǐng)域。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的說法,正確的是(　　)
A.果酒發(fā)酵過程溫度控制在30 ℃,果醋發(fā)酵過程溫度控制在20 ℃
B.制作果醋需要醋酸菌,它是一種嚴(yán)格厭氧的微生物,可將葡萄中的糖分解為乙酸
C.多種微生物參與了腐乳的制作,如酵母菌、毛霉、曲霉等
D.制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物,可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸和二氧化碳
答案:C
解析:果酒發(fā)酵過程中溫度控制在18~30 ℃,果醋發(fā)酵過程中溫度控制在30~35 ℃,A項(xiàng)錯(cuò)誤;制作果醋需要醋酸菌,它是一種好氧的微生物,可將葡萄中的糖(或乙醇)分解為乙酸,B項(xiàng)錯(cuò)誤;多種微生物參與了腐乳的制作,如酵母菌、毛霉、曲霉等,其中起主要作用的是毛霉,C項(xiàng)正確;制作泡菜利用的乳酸菌是一種厭氧微生物,可以通過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸,乳酸菌的無氧呼吸不會(huì)產(chǎn)生二氧化碳,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
2.(2021山東煙臺(tái)三模)普洱茶“渥堆”為普洱茶的發(fā)酵過程,是云南大葉種曬青毛茶經(jīng)“潮水”(噴灑適量水分)后“渥堆”,在黑曲霉、青霉、根霉、酵母菌等微生物產(chǎn)生的胞外酶、代謝產(chǎn)生的熱量和茶葉水分濕熱作用的協(xié)同下,使茶葉發(fā)生了一系列的物理、化學(xué)變化,促成了普洱茶風(fēng)味及良好品質(zhì)的形成。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.“潮水”的目的是增加茶葉含水率,為微生物的繁殖創(chuàng)造條件
B.“渥堆”過程容易聞到酒香,主要是酵母菌進(jìn)行無氧呼吸的結(jié)果
C.“渥堆”過程中定期翻堆的目的只是降低堆子的溫度
D.普洱回甘味覺,可能是因?yàn)槲⑸锂a(chǎn)生的纖維素酶能降解茶葉中的纖維,增加了茶葉中單糖、二糖的含量
答案:C
解析:“潮水”即噴灑適量水分的目的是增加茶葉含水率,為微生物的繁殖創(chuàng)造條件,A項(xiàng)正確;“渥堆”過程容易聞到酒香,說明有酒精的形成,這是酵母菌進(jìn)行無氧呼吸的結(jié)果,B項(xiàng)正確;濕度、溫度、通氣情況可能會(huì)影響渥堆過程中微生物的生命活動(dòng),進(jìn)而影響普洱茶的品質(zhì),“渥堆”過程中定期翻堆的目的是降低堆子的溫度、增大通氣量等,C項(xiàng)錯(cuò)誤;普洱回甘味覺,而纖維素沒有甜度,可能是因?yàn)槲⑸锂a(chǎn)生的纖維素酶能降解茶葉中的纖維,增加了茶葉中單糖、二糖的含量,D項(xiàng)正確。
3.(2021江蘇南通模擬)疣粒野生稻(2n=24)對(duì)白葉枯病的抗性持久穩(wěn)定,是理想的抗病育種材料。為了充分利用疣粒野生稻資源,通過采用疣粒野生稻和栽培稻(2n=24)體細(xì)胞雜交的方法獲得后代,從而實(shí)現(xiàn)疣粒野生稻遺傳物質(zhì)向栽培稻轉(zhuǎn)移。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.疣粒野生稻和栽培稻之間存在生殖隔離,自然條件下不能進(jìn)行基因交流
B.兩種水稻細(xì)胞經(jīng)酶解去壁、誘導(dǎo)融合后可通過觀察染色體數(shù)目篩選出雜種細(xì)胞
C.雜種水稻的組培過程需要更換培養(yǎng)基,提高生長(zhǎng)素的比例有利于根的分化
D.經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的雜種幼苗,一般需要經(jīng)過由無菌到有菌的煉苗過程才能用于生產(chǎn)實(shí)踐
答案:B
解析:疣粒野生稻和栽培稻之間存在生殖隔離,自然條件下不能進(jìn)行基因交流,故需要植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得雜種植株,A項(xiàng)正確。兩種水稻細(xì)胞的染色體數(shù)目相同,故不能通過觀察染色體數(shù)目篩選出雜種細(xì)胞,需要觀察染色體形態(tài),B項(xiàng)錯(cuò)誤。在植物組織培養(yǎng)時(shí),通過調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽。生長(zhǎng)素用量和細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí),有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低時(shí),有利于芽的分化、抑制根的形成;比值適中時(shí),促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng),C項(xiàng)正確。經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的雜種幼苗,一般需要經(jīng)過由無菌到有菌的煉苗過程才能用于生產(chǎn)實(shí)踐,D項(xiàng)正確。
4.(2021江蘇常熟三模)青蒿素主要用于惡性瘧疾的癥狀控制以及耐氯喹蟲株的治療。為了快速檢測(cè)青蒿素,科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗青蒿素的單克隆抗體,其基本操作過程如下圖所示。以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)

A.過程②體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,過程⑤若在體內(nèi)進(jìn)行則操作更簡(jiǎn)單
B.過程③常使用選擇培養(yǎng)基,過程④常使用抗原—抗體雜交技術(shù)
C.若細(xì)胞乙均由細(xì)胞兩兩融合而成,則細(xì)胞乙、丙、丁的染色體組數(shù)一定相同
D.骨髓瘤細(xì)胞通常是從小鼠脾臟中提取的,其表面糖蛋白減少,培養(yǎng)時(shí)失去接觸抑制
答案:D
解析:過程②為將具有免疫能力的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,過程⑤若在體內(nèi)進(jìn)行則操作更簡(jiǎn)單,A項(xiàng)正確;過程③是篩選雜交瘤細(xì)胞,常使用選擇培養(yǎng)基,過程④用抗體檢測(cè)和克隆培養(yǎng)得到能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞,常使用抗原—抗體雜交技術(shù),B項(xiàng)正確;若細(xì)胞乙均由細(xì)胞兩兩融合而成,則細(xì)胞乙、丙、丁的染色體組數(shù)一定相同,C項(xiàng)正確;脾臟中無骨髓瘤細(xì)胞,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
5.丙草胺(C17H26ClNO2)是一種廣泛應(yīng)用的除草劑。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株,并對(duì)其計(jì)數(shù),如下圖所示,以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述正確的是(　　)

A.實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)避免已滅菌處理的土壤與周圍物品接觸
B.以丙草胺為唯一氮源配制的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基
C.依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算出每克土壤中的菌株數(shù)約為1.5×1010個(gè)
D.利用稀釋涂布平板法得到的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)要低
答案:D
解析:若土壤進(jìn)行滅菌,則無法得到相應(yīng)菌株,A項(xiàng)錯(cuò)誤;丙草胺可提供碳源、氮源,配制以丙草胺為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),可提高降解菌的濃度,屬于選擇培養(yǎng)基,B項(xiàng)錯(cuò)誤;用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí),在每一個(gè)梯度濃度內(nèi),至少要涂布3個(gè)平板,選擇菌落數(shù)在30~300的進(jìn)行記數(shù),求其平均值,據(jù)圖可知,該實(shí)驗(yàn)結(jié)果只有兩個(gè)30~300之間的平板,不能用來計(jì)數(shù),C項(xiàng)錯(cuò)誤;圖示采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法,由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),在平板上觀察到一個(gè)菌落,因此用該方法計(jì)數(shù)結(jié)果往往比顯微鏡直接計(jì)數(shù)法偏低,D項(xiàng)正確。
6.(2021重慶模擬)有一環(huán)狀雙鏈DNA,其中一條鏈的核苷酸片段序列為CGAGCCGAATTCTGCGCCTATAGGCCTCGA(共30個(gè)堿基,其中C+G=18個(gè)),限制酶EcoRⅠ在單鏈上的識(shí)別位點(diǎn)序列為GAATTC。以下有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.用EcoRⅠ切該環(huán)狀雙鏈DNA,至少會(huì)產(chǎn)生2個(gè)片段
B.該單鏈片段中G+C占比為60%,其互補(bǔ)片段中A+T占比為40%
C.如果該環(huán)狀DNA缺失了一個(gè)堿基對(duì),用EcoRⅠ可能切不開該DNA
D.以該單鏈片段為模板轉(zhuǎn)錄的mRNA編碼的肽鏈最多含10個(gè)氨基酸
答案:A
解析:該條鏈的核苷酸片段序列中只有一個(gè)—GAATTC—的堿基序列,要產(chǎn)生2個(gè)片段,用EcoRⅠ切該環(huán)狀雙鏈DNA,至少要有限制酶EcoRⅠ的兩個(gè)酶切位點(diǎn),而該序列只有一個(gè),A項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA鏈由A、T、G、C四種堿基構(gòu)成,該單鏈片段鏈中G+C=18÷30=60%,則A+T=40%,其互補(bǔ)鏈中T+A=40%,B項(xiàng)正確;如果該環(huán)狀DNA缺失了一個(gè)堿基對(duì),該DNA序列會(huì)發(fā)生改變,酶切位點(diǎn)也會(huì)發(fā)生改變,用EcoRⅠ可能切不開該DNA,C項(xiàng)正確;該單鏈片段共30個(gè)堿基,以該模板轉(zhuǎn)錄的mRNA上可以有10個(gè)密碼子,其中可能存在終止密碼子,終止密碼子不編碼氨基酸,故編碼的肽鏈最多含10個(gè)氨基酸,D項(xiàng)正確。
7.(2021江蘇南通模擬)受傷的雙子葉植物產(chǎn)生的酚類化合物可誘導(dǎo)毒力效應(yīng)蛋白(Vir)基因表達(dá)產(chǎn)生Vir蛋白,其中VirD1/D2蛋白復(fù)合體可將Ti質(zhì)粒上的一段T-DNA單鏈(T鏈)切下并形成VirD2-T鏈復(fù)合物。轉(zhuǎn)移至植物細(xì)胞中的VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核,將T鏈隨機(jī)整合到植物染色體上。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨炯?xì)胞,可用酚類化合物處理提高轉(zhuǎn)化效率
B.VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體可避免T-DNA的胞內(nèi)降解
C.T-DNA的整合具有隨機(jī)性,需經(jīng)過篩選(抗性、熒光等)獲得符合要求的轉(zhuǎn)化苗
D.T-DNA整合至植物細(xì)胞染色體上的過程不需要DNA聚合酶和DNA連接酶
答案:D
解析:農(nóng)桿菌在自然條件下容易感染雙子葉植物和裸子植物,對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力,因?yàn)槎鄶?shù)單子葉植物不能合成酚類化合物,可以通過在傷口處施加相關(guān)酚類化合物而使單子葉植物成為農(nóng)桿菌易感染的植物,從而提高轉(zhuǎn)化效率,A項(xiàng)正確;VirD2-T鏈復(fù)合物結(jié)合VirE2等蛋白形成T復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞核,將T鏈隨機(jī)整合到植物染色體上,可避免T-DNA在細(xì)胞內(nèi)被降解,B項(xiàng)正確;經(jīng)過轉(zhuǎn)化的植物不一定都得到目的表型,因?yàn)門-DNA的整合是隨機(jī)的,還需經(jīng)過篩選(抗性、熒光等)才能獲得符合要求的轉(zhuǎn)化苗,C項(xiàng)正確;Ti質(zhì)粒上的Vir基因區(qū)段在宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)產(chǎn)物能誘導(dǎo)Ti質(zhì)粒產(chǎn)生一條新的T-DNA單鏈分子,而合成新的T-DNA單鏈不需要限制酶,需要的是DNA聚合酶和DNA連接酶,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
8.(2021江蘇鹽城二模)精子載體法是以精子作為外源基因載體攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞,下圖表示用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述正確的是(　　)

A.①過程需將成熟的精子放入ATP溶液中進(jìn)行獲能處理
B.②采用體外受精技術(shù),受精卵中的遺傳物質(zhì)來自父母雙方
C.②③過程所用培養(yǎng)液的成分相同且都加入動(dòng)物血清
D.④過程需要對(duì)受體母鼠用相關(guān)激素進(jìn)行同期發(fā)情處理
答案:D
解析:①過程需將成熟的精子放在一定濃度的肝素或Ca2+載體溶液中,用化學(xué)藥物誘導(dǎo)精子獲能,A項(xiàng)錯(cuò)誤;②采用體外受精技術(shù),受精卵中的遺傳物質(zhì)來自父母雙方和外源基因,B項(xiàng)錯(cuò)誤;②為體外受精過程,③為早期胚胎培養(yǎng)過程,前者在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐羞M(jìn)行,后者在發(fā)育培養(yǎng)基中進(jìn)行,這兩個(gè)過程所用培養(yǎng)液的成分不完全相同,C項(xiàng)錯(cuò)誤;胚胎移植時(shí),需對(duì)供體和受體使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理,以保證胚胎植入相同的生理環(huán)境,D項(xiàng)正確。
9.(2021北京房山一模)為有效防范由各類生物因子、生物技術(shù)誤用濫用等引起的生物性危害,生物安全已納入國(guó)家安全體系。以下選項(xiàng)中會(huì)給我國(guó)帶來生物安全風(fēng)險(xiǎn)的是(　　)
A.將新冠患者的血漿采集后注射到危重患者體內(nèi)
B.試管嬰兒通過基因篩查技術(shù)阻斷遺傳疾病的遺傳
C.利用生物技術(shù)改造的工程菌獲得大量的抗生素
D.克隆技術(shù)可應(yīng)用到器官移植但不能進(jìn)行人體克隆
答案:A
解析:新冠患者的血漿中可能含有病毒,采集后是不可以直接輸入到任何人身體里的,輸入到危重患者身體里存在安全隱患,與題意相符,A項(xiàng)正確;試管嬰兒可以通過基因篩選技術(shù)來阻斷遺傳疾病的遺傳,因此經(jīng)過一定的技術(shù)手段可以避免安全風(fēng)險(xiǎn),與題意不符,B項(xiàng)錯(cuò)誤;利用生物技術(shù)改造的工程菌獲得大量的抗生素已經(jīng)投入生產(chǎn),一般不會(huì)帶來生物安全風(fēng)險(xiǎn),與題意不符,C項(xiàng)錯(cuò)誤;克隆技術(shù)可以克隆器官,但是不可以進(jìn)行人體克隆,這樣可以避免影響倫理道德,與題意不符,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
10.農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán),并以此環(huán)為模板,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列,以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是(　　)

注:子鏈從引物的3'端開始延伸
A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈轉(zhuǎn)錄的原理
B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶
C.利用圖中的引物②③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列
D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì),可確定T-DNA的插入位置
答案:D
解析:PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理,A項(xiàng)錯(cuò)誤;進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要耐高溫的DNA聚合酶,但不需要解旋酶,B項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA的兩條鏈反向平行,子鏈從引物的3'端開始延伸,則利用圖中的引物①④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列,C項(xiàng)錯(cuò)誤;通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對(duì),即可確定T-DNA的插入位置,D項(xiàng)正確。
11.(2021北京房山一模)基因編輯CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和人工設(shè)計(jì)的gRNA構(gòu)成。在gRNA引導(dǎo)下,Cas9與靶序列結(jié)合并將DNA雙鏈切斷。通過在Cas9基因中引入突變,獲得了只有切割一條鏈活性的nCas9,可以實(shí)現(xiàn)C→T(C→A)或A→G(T→C)的堿基替換。下列相關(guān)說法不正確的是(　　)

A.gRNA與靶序列特異性結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則
B.利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以使靶基因發(fā)生定點(diǎn)突變
C.可設(shè)計(jì)gRNA與靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域互補(bǔ),從而抑制靶基因復(fù)制
D.將CRISPR/Cas9技術(shù)應(yīng)用人類疾病治療時(shí),需注意安全性及倫理問題
答案:C
解析:由圖示分析可知,gRNA與靶序列特異性結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,A項(xiàng)正確。利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)可以使靶基因?qū)崿F(xiàn)堿基替換,從而發(fā)生定點(diǎn)突變,B項(xiàng)正確。啟動(dòng)子在基因的首段,它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),能控制著轉(zhuǎn)錄的開始,故可設(shè)計(jì)gRNA與靶基因的啟動(dòng)子區(qū)域互補(bǔ),從而抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄過程,C項(xiàng)錯(cuò)誤。根據(jù)題意分析可知,CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達(dá)系統(tǒng)中的gRNA能識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列,從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA,最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。由于其他DNA序列中可能含有與gRNA互補(bǔ)配對(duì)的序列,造成gRNA錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)脫靶現(xiàn)象,故將CRISPR/Cas9技術(shù)應(yīng)用于人類疾病治療時(shí),特別要注意安全性和倫理方面的問題,D項(xiàng)正確。
12.(2021湖南長(zhǎng)郡中學(xué)模擬)油菜中基因G和g控制菜籽的芥酸含量,而芥酸會(huì)降低菜籽油的品質(zhì)。研究人員擬利用高芥酸油菜品種(gg)和水稻抗病基因R培育低芥酸抗病油菜新品種(GGRR),育種過程如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)

A.過程①誘發(fā)基因突變,其優(yōu)點(diǎn)是提高基因突變的頻率
B.過程②的原理是基因重組,可以克服物種遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙
C.過程①與過程②操作順序互換,對(duì)育種結(jié)果沒有影響
D.若要縮短育種年限,在過程②后可進(jìn)行單倍體育種
答案:C
解析:過程①誘發(fā)基因突變,其優(yōu)點(diǎn)是提高基因突變的頻率,A項(xiàng)正確;過程②采用的是基因工程技術(shù),其原理是基因重組,可以克服物種遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,B項(xiàng)正確;若先導(dǎo)入基因R再人工誘變,這樣可能會(huì)導(dǎo)致基因R發(fā)生突變,進(jìn)而影響育種結(jié)果,造成篩選困難,C項(xiàng)錯(cuò)誤;單倍體育種能明顯縮短育種年限,因此若要縮短育種年限,在過程②后可進(jìn)行單倍體育種,D項(xiàng)正確。
13.(2021江蘇模擬)某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A,研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素等配制的培養(yǎng)基,成功篩選到高效降解化合物A的細(xì)菌(目的菌),實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)

A.培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌
B.實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng),可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸
C.實(shí)驗(yàn)操作過程中,獲得純凈目的菌的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染
D.將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實(shí)驗(yàn)的目的是獲得大量菌種
答案:D
解析:本實(shí)驗(yàn)的目的是“篩選到高效降解化合物A的細(xì)菌”,因此培養(yǎng)基中加入化合物A作為唯一碳源,目的是篩選目的菌,A項(xiàng)正確;實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)過程中進(jìn)行振蕩培養(yǎng),可使目的菌和培養(yǎng)液充分接觸,B項(xiàng)正確;實(shí)驗(yàn)操作過程中,獲得純凈目的菌的關(guān)鍵是防止外來雜菌污染,C項(xiàng)正確;在以化合物A為唯一碳源的培養(yǎng)基中,只有能降解化合物A的微生物才能生長(zhǎng)繁殖,不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源,無法生長(zhǎng)繁殖,將固體培養(yǎng)基得到的目的菌重復(fù)多次上述實(shí)驗(yàn)的目的是對(duì)菌種進(jìn)行“純化”,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
14.(2021山東省實(shí)驗(yàn)中學(xué)二模)CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列說法錯(cuò)誤的是(　　)

A.多次進(jìn)行步驟①的目的是獲得更多分泌抗CD47抗體的漿細(xì)胞
B.步驟②后可篩選出既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能大量增殖的細(xì)胞
C.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系需放入CO2培養(yǎng)箱
D.對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè)
答案:D
解析:多次向免疫動(dòng)物注射抗原(CD47)的目的是刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫,使小鼠產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞,A項(xiàng)正確;經(jīng)步驟②將脾臟中的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,經(jīng)選擇后可以獲得既能產(chǎn)生抗CD47抗體又能大量增殖的細(xì)胞,B項(xiàng)正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)放在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行,C項(xiàng)正確;根據(jù)單一變量原則可知,應(yīng)設(shè)置不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞的共培養(yǎng)體系為對(duì)照,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,沒有抗體抑制,CD47對(duì)巨噬細(xì)胞有抑制作用,對(duì)照組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于實(shí)驗(yàn)組可驗(yàn)證上述推測(cè),D項(xiàng)錯(cuò)誤。
15.(2021福建莆田一模)哺乳動(dòng)物單倍體胚胎干細(xì)胞技術(shù)是遺傳學(xué)研究的新手段,可以獲得孤雌或孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞,為研究基因功能提供了理想的細(xì)胞模型。下圖表示研究人員利用小鼠獲取單倍體胚胎干細(xì)胞的方法,下列說法正確的是(　　)

A.方法一中,研究人員需對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠注射孕激素,從而獲得更多的卵母細(xì)胞
B.用SrCl2溶液處理的作用是激活卵母細(xì)胞,得到孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞
C.獲得孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞需要去除細(xì)胞M中的雌原核
D.若研究Y染色體上相關(guān)基因功能,應(yīng)用方法一得到的胚胎干細(xì)胞
答案:C
解析:方法一中,給小鼠注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵,可以獲得更多的卵母細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;用SrCl2溶液處理的作用是激活卵母細(xì)胞,發(fā)育形成的干細(xì)胞稱為孤雌單倍體胚胎干細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;采用方法二去除細(xì)胞M中的雌原核,可獲得孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞,C項(xiàng)正確;若研究Y染色體上相關(guān)基因功能,應(yīng)用方法二得到的孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞,D項(xiàng)錯(cuò)誤。
16.地中海貧血癥是一種遺傳性溶血性貧血癥。有一對(duì)表型正常的夫婦,他們以前生育過β- 地中海貧血癥兒子,該患兒的β- 珠蛋白結(jié)構(gòu)異常,在一歲時(shí)死去?，F(xiàn)在妻子又懷孕了,于是進(jìn)行了產(chǎn)前診斷,診斷時(shí)用限制酶PstⅠ酶切后電泳結(jié)果如圖1所示,圖2為β- 珠蛋白基因及其側(cè)翼序列的PstⅠ酶切位點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)

A.正常的β- 珠蛋白基因長(zhǎng)度為4.4 kb,突變后的致病基因長(zhǎng)度為3.7 kb
B.若未產(chǎn)生新的PstⅠ酶切位點(diǎn),則致病基因可能是堿基缺失產(chǎn)生的
C.致病基因是隱性基因,并且夫妻兩人都是隱性致病基因的攜帶者
D.孕婦體內(nèi)的胎兒雖然含有致病基因,但是生下來并不會(huì)患該病
答案:A
解析:由圖示可知,兩個(gè)Pst Ⅰ酶切位點(diǎn)之間分別是4.4 kb和3.7 kb,正常的β-珠蛋白基因和突變后的致病基因位于酶切位點(diǎn)內(nèi)部,因此兩個(gè)基因長(zhǎng)度分別小于4.4 kb和3.7 kb,A項(xiàng)錯(cuò)誤;含有珠蛋白基因的DNA片段的Pst Ⅰ酶切位點(diǎn)之間的長(zhǎng)度由4.4 kb變?yōu)?.7 kb,而突變并未產(chǎn)生新的酶切位點(diǎn),由此可知酶切位點(diǎn)之間發(fā)生了堿基的缺失,而且這種差異導(dǎo)致了正?；蛲蛔?yōu)橹虏』?因此突變可能就是堿基的缺失所導(dǎo)致的,B項(xiàng)正確;該夫婦已經(jīng)生育過患病孩子,因此致病基因是隱性的,夫妻兩人都是攜帶者,C項(xiàng)正確;圖1可以看出胎兒含有3.7 kb,即含有致病基因,但是同時(shí)含有4.4 kb,即含有顯性的正常β-珠蛋白基因,即胎兒為雜合子,不會(huì)患病,D項(xiàng)正確。
二、非選擇題:共60分。
17.(2020山東日照檢測(cè))(12分)亞麻酸(ALA)能夠促進(jìn)卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育。為了給水牛體外胚胎產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中合理使用亞麻酸提供理論依據(jù),科研人員研究了不同濃度的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎早期發(fā)育的影響。分析回答下列問題。
①卵母細(xì)胞的收集和體外培養(yǎng):從屠宰場(chǎng)水牛的卵巢中收集并處理卵母細(xì)胞,隨機(jī)分成5組,分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中,在39 ℃、體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22~24 h。
②卵母細(xì)胞成熟判斷:在顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞,判斷其是否成熟,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表1所示。
③體外受精:在受精溶液中進(jìn)行體外受精后,用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。
④早期胚胎培養(yǎng):將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44~48 h后檢查分裂情況,每隔48 h更換一次培養(yǎng)液,第5~9天觀察囊胚發(fā)育情況,統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表2所示。
表1　亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響
ALA濃度/(μmol·L-1)
卵母細(xì)胞數(shù)
核成熟卵子數(shù)
0
229
137
10
201
133
50
227
166
100
215
137
200
215
135
表2　亞麻酸對(duì)水牛胚胎早期發(fā)育的影響
ALA濃度/(μmol·L-1)
受精卵數(shù)
分裂數(shù)
囊胚數(shù)
0
309
171
75
10
325
182
82
50
292
185
97
100
310
188
84
200
231
145
68
(1)步驟①中,細(xì)胞培養(yǎng)箱中加體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2的作用是　　　　　。?
(2)步驟②中,成熟卵母細(xì)胞內(nèi)染色體的行為特征是　　　　　　　　　　　　　　　。步驟③中,判斷是否受精的依據(jù)是　　　　　?　。?
(3)步驟④中,受精卵經(jīng)　　　　(時(shí)期)發(fā)育成囊胚,培養(yǎng)過程定期更換培養(yǎng)液的目的是　? 　。?
(4)根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析,亞麻酸溶液濃度為200 μmol/L時(shí),對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育起　　　　(填“促進(jìn)”或“抑制”)作用。?
(5)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,濃度為　　　　μmol/L的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都比較有利,判斷依據(jù)是　? 　　。?
答案:(1)維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定　(2)染色體的著絲粒排列在赤道板上　在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核　(3)桑葚胚　清除有害代謝產(chǎn)物,補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
(4)促進(jìn)　(5)50　核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例較高,囊胚數(shù)占受精卵數(shù)的比例較高
解析:(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)箱中加體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH的相對(duì)穩(wěn)定。(2)卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期時(shí)才成熟,而減數(shù)分裂Ⅱ中期的特征是染色體的著絲粒排列在赤道板上;判斷是否受精的依據(jù)是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個(gè)極體或者雌、雄原核。(3)胚胎早期發(fā)育過程為受精卵→桑葚胚→囊胚→原腸胚,因此步驟④中,受精卵經(jīng)桑葚胚發(fā)育成囊胚;培養(yǎng)過程定期更換培養(yǎng)液的目的是清除有害代謝產(chǎn)物,補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(4)題表1中亞麻酸溶液濃度為0 μmol/L的一組為對(duì)照組,與對(duì)照組相比,亞麻酸溶液濃度為200 μmol/L時(shí),核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例較高,囊胚數(shù)占受精卵數(shù)的比例較高,可見其對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育起促進(jìn)作用。(5)題表2中,亞麻酸溶液濃度為50 μmol/L 時(shí),核成熟卵子數(shù)占卵母細(xì)胞的比例最高,囊胚數(shù)占受精卵數(shù)的比例最高,因此濃度為50 μmol/L的亞麻酸對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟和囊胚發(fā)育都比較有利。
18.(2021天津北辰一模)(10分)生活飲用水已經(jīng)過沉淀、過濾、加氯消毒等處理,含微生物很少。我國(guó)生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—85)中規(guī)定生活飲用水中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個(gè)/mL,總大腸桿菌群不得大于3個(gè)/L。某同學(xué)欲檢測(cè)家中自來水中大腸桿菌含量,對(duì)自來水中大腸桿菌進(jìn)行了培養(yǎng)、計(jì)數(shù)和鑒定?；卮鹣铝袉栴}。
(1)該同學(xué)用涂布平板法檢測(cè)大腸桿菌數(shù):配制的培養(yǎng)基中含有蛋白膏、酵母膏、NaCl、H2O和X,其中蛋白胨可為大腸桿菌提供　　　　　　　和維生素,X是　　　　。?
(2)該同學(xué)用濾膜法檢測(cè)大腸桿菌數(shù),其大致流程為:先用濾膜過濾已知體積的待測(cè)水樣,水樣中的大腸桿菌留在濾膜上,其他雜質(zhì)則被濾出,再將濾膜轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上培養(yǎng)并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量。該方法所統(tǒng)計(jì)樣品中含菌數(shù)往往偏低的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?
(3)為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底,需要設(shè)置對(duì)照,其做法是將滅菌的　　　　　(填“接種”或“未接種”)培養(yǎng)基放在恒溫?zé)o菌箱中進(jìn)行培養(yǎng)。取10 mL自來水,稀釋10倍后,取10 mL稀釋液進(jìn)行過濾,將濾膜置于培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),獲得了30個(gè)目的菌落,則每毫升自來水中含有目的菌為　　　　個(gè)。?
(4)下圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟,下列敘述錯(cuò)誤的是　　　　(多選)。?

A.步驟①倒平板操作時(shí),倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置
B.步驟②接種環(huán)在火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線
C.步驟③多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落
D.步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)
答案:(1)碳源、氮源　瓊脂　(2)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落　(3)未接種　30　(4)ABD
解析:(1)蛋白胨既可以為微生物提供氮源,又可以為其提供碳源和維生素。涂布平板法接種微生物所用培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)加入瓊脂,所以X為瓊脂。(2)由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),平板上觀察到的只是一個(gè)菌落,所以通過菌落計(jì)數(shù)的方法統(tǒng)計(jì)的樣品中含菌數(shù)往往偏低。(3)為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底,需要設(shè)置對(duì)照,其做法是將滅菌的未接種的培養(yǎng)基放在恒溫?zé)o菌箱中進(jìn)行培養(yǎng),若對(duì)照組出現(xiàn)菌落,說明滅菌不徹底。10 mL稀釋液過濾后培養(yǎng)得到30個(gè)目的菌落,說明1 mL稀釋液含有3個(gè)菌體,由于稀釋了10倍,所以每毫升自來水中含有30個(gè)目的菌。(4)步驟①倒平板操作時(shí),倒好后應(yīng)待平板冷卻凝固后再將平板倒過來放置,目的是防止冷凝水滴落污染培養(yǎng)基,A項(xiàng)錯(cuò)誤;灼燒后的接種環(huán)需在火焰旁冷卻后再蘸取菌液進(jìn)行平板劃線,否則會(huì)將菌種燙死,B項(xiàng)錯(cuò)誤;步驟③多個(gè)方向劃線,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落,C項(xiàng)正確;平板劃線法進(jìn)行接種時(shí)無法對(duì)其計(jì)數(shù),D項(xiàng)錯(cuò)誤。
19.(2021云南昆明一中二模)(14分)研究發(fā)現(xiàn),蘆薈是一種具有抗衰老、促進(jìn)愈合、強(qiáng)心活血、免疫和再生作用的常綠多肉質(zhì)草本植物,其栽培產(chǎn)業(yè)早已在全世界興起。目前,可采用對(duì)蘆薈進(jìn)行植物組織培養(yǎng)來快速獲得種苗,獲得蘆薈試管苗的過程如下圖所示。

回答下列問題。
(1)步驟①切取的蘆薈莖尖要包括植物的分生組織,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?
(2)步驟②中常用的試劑有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出兩種)。?
(3)愈傷組織由一些　　　　　　　　　　細(xì)胞形成。步驟④中愈傷組織的形成標(biāo)志著接種的外植體的生長(zhǎng)狀態(tài)為　　　　　　　　　　　　　　。?
(4)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用,加入培養(yǎng)基中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類、　　　　　　　不同將會(huì)影響培養(yǎng)的結(jié)果。其中,在分化培養(yǎng)基中　　　　(填“適合”或“不適合”)使用2,4-D,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　。?
(5)植物組織培養(yǎng)除了用于種苗的快速繁殖,還可用于作物新品種的培育。例如,通過　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　培育得到京花1號(hào)小麥、抗鹽堿的野生煙草等植物新品種。?
答案:(1)植物的分生組織容易誘導(dǎo)形成愈傷組織　(2)體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精、無菌水、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液　(3)具有分生能力的薄壁　已脫離分化狀態(tài)(或已經(jīng)脫分化狀態(tài))
(4)濃度與配比　不適合　其作用趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生,不利于幼苗形成　(5)單倍體育種和對(duì)突變體的利用
解析:(1)分生組織的細(xì)胞能不斷進(jìn)行細(xì)胞分裂,因此植物組織培養(yǎng)時(shí)要選擇包括植物分生組織的部位,分裂旺盛,能更容易形成愈傷組織。(2)步驟②是對(duì)外植體進(jìn)行消毒,理想的消毒劑應(yīng)具有消毒效果好,易被無菌水沖洗掉或能自行分解,對(duì)材料損傷小,對(duì)人體及其他生物無害,來源廣泛,價(jià)格低廉。因此步驟②常用的試劑是體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精、無菌水、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液。(3)愈傷組織是植物細(xì)胞脫分化后形成的一種無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞,具有再度分化成其他組織細(xì)胞的能力。步驟④中愈傷組織的形成標(biāo)志著接種的外植體的生長(zhǎng)狀態(tài)為已脫離分化狀態(tài)(或已經(jīng)脫分化狀態(tài))。(4)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,是人工合成的(或從微生物中提取的天然的),具有和天然植物激素相似生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)作用的有機(jī)化合物。加入培養(yǎng)基中的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類、濃度與配比不同將會(huì)影響培養(yǎng)的結(jié)果。其中,在分化培養(yǎng)基中不適合使用2,4-D,2,4-D常用于愈傷組織的誘導(dǎo),對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用,因此為促進(jìn)愈傷組織再分化,在配制分化培養(yǎng)基時(shí)不需要加入2,4-D。(5)植物細(xì)胞工程技術(shù)被廣泛應(yīng)用于作物新品種的培育,常見的有單倍體育種和突變體的利用,比如通過單倍體育種和對(duì)突變體的利用培育得到京花1號(hào)小麥、抗鹽堿的野生煙草等植物新品種。
20.(2021廣東惠州一模)(12分)經(jīng)過基因工程改造的、能生產(chǎn)人胰島素的大腸桿菌是一種特殊的“工程菌”。所用運(yùn)載體(普通質(zhì)粒)結(jié)構(gòu)如下圖左,目的基因如下圖右。

(1)該過程中最重要的環(huán)節(jié)是基因表達(dá)載體的構(gòu)建,方法是選用　　　(填“X”或“Y”)限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒和目的基因,再用　　　　　　　　處理使之成為重組質(zhì)粒。?
(2)將上述重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),應(yīng)選用　　　　處理,使其成為　　　　　細(xì)胞。?
(3)將目的基因?qū)胧荏w菌時(shí),常出現(xiàn)三種情況:未轉(zhuǎn)化的細(xì)菌、含空載體(普通質(zhì)粒)的細(xì)菌、含重組質(zhì)粒的細(xì)菌。下圖是含人胰島素目的基因的重組質(zhì)粒的“工程菌”的篩選示意圖。

上圖中的　　　和　　　(用圖中字母作答)菌落為含有目的基因的“工程菌”。?
答案:(1)X　DNA連接酶　(2)Ca2+　感受態(tài)　(3)B　D
解析:(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟,該過程需要選用X限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒和目的基因,保證目的基因結(jié)構(gòu)的完整性。再用DNA連接酶處理質(zhì)粒和目的基因,將其連接為重組質(zhì)粒。(2)將上述重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌時(shí),應(yīng)選用Ca2+處理,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,更容易吸收外界的DNA。(3)據(jù)分析可知,X限制酶切位點(diǎn)位于抗青霉素基因內(nèi)部,故重組質(zhì)粒只含有抗四環(huán)素基因,不含有抗青霉素基因,故含人胰島素目的基因的重組質(zhì)粒的“工程菌”,可以在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),不能在含青霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng),故可以選擇B和D菌落為含有目的基因的“工程菌”。
21.(2021天津南開附中模擬)(12分)養(yǎng)殖家禽的飼料中富含谷物,纖維素是谷物的重要成分,但家禽消化道中缺少能降解纖維素的酶,阻礙了家禽對(duì)飼料的吸收與利用。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造乳酸桿菌,將其添加于飼料中,以提高家禽養(yǎng)殖效率。
(1)枯草芽孢桿菌分泌可降解纖維素的一種酶,這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達(dá)W基因,需使用圖1中質(zhì)粒為載體。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段,W基因以乙鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈,轉(zhuǎn)錄時(shí)mRNA自身延伸的方向?yàn)?'→3'。

很多啟動(dòng)子具有物種特異性,在圖1質(zhì)粒中插入W基因,其上游啟動(dòng)子應(yīng)選擇　　　　(填寫字母)。?
A.枯草芽孢桿菌啟動(dòng)子
B.乳酸桿菌啟動(dòng)子
C.農(nóng)桿菌啟動(dòng)子
(2)下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。
限制酶
EcoRⅠ
BamHⅠ
KpnⅠ
MfeⅠ
HindⅢ
識(shí)別序
列及切
割位點(diǎn)





根據(jù)上述信息,應(yīng)使用限制酶　　　　　　　　　　切割圖2中含W基因的DNA片段,以獲得能正確表達(dá)W基因的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化乳酸桿菌后,使用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選,以得到轉(zhuǎn)入W基因的乳酸桿菌。?
(3)為確定導(dǎo)入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力,研究人員用液體培養(yǎng)基分別培養(yǎng)下表所示菌種。所得部分菌液接種于固體鑒定培養(yǎng)基上,另取部分菌液上清液測(cè)定酶活力,實(shí)驗(yàn)方案及測(cè)定結(jié)果如下表所示。
菌　　種
酶活性相對(duì)值
乳酸桿菌
未檢出
X
未檢出
導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌
0.96
①表中的X應(yīng)為　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。?
②在配制固體鑒定培養(yǎng)基時(shí),除加入水、無機(jī)鹽、剛果紅、維生素、氮源外,還需要添加　　　　　　　　　　　　。導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌在此培養(yǎng)基上應(yīng)出現(xiàn)　　　　　　　　　　　　。?
答案:(1)B　(2)EcoRⅠ、HindⅢ　(3)①導(dǎo)入空質(zhì)粒(或“空載體”)的乳酸菌?、诶w維素、瓊脂　以菌落為中心的透明圈
解析:(1)該基因工程是將枯草芽孢桿菌的W基因?qū)肴樗釛U菌,想讓W(xué)基因在乳酸桿菌中成功表達(dá),所以應(yīng)當(dāng)選擇乳酸桿菌啟動(dòng)子。(2)由分析可知,MfeⅠ與EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的黏性末端相同,但MfeⅠ會(huì)破壞目的基因,所以質(zhì)粒使用限制酶MfeⅠ、Hind Ⅲ切割,含W基因的DNA片段使用限制酶EcoRⅠ、Hind Ⅲ切割(能切下目的基因)。(3)①本實(shí)驗(yàn)的目的是確定導(dǎo)入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌是否具有分解纖維素的能力,所以不光有空白對(duì)照,還要排除質(zhì)粒自身的影響,所以X應(yīng)為入空質(zhì)粒(或“空載體”)的乳酸菌。②鑒定纖維素的固體培養(yǎng)基還要含有纖維素、凝固劑瓊脂和水。剛果紅使纖維素培養(yǎng)基成紅色,若纖維素被分解,則會(huì)出現(xiàn)透明圈,由于導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌具有分解纖維素的能力,因此導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的乳酸桿菌在此培養(yǎng)基上應(yīng)出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈。

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