【生物】山東省泰安市寧陽一中2018-2019學年高二下學期階段性考試-試卷下載-教習網(wǎng)

階段性考試試題
說明： 1．本試卷分第I卷（選擇題）和第II卷（非選擇題）兩部分，總分100分，考試時間90分鐘。
2．答題前請將密封線內(nèi)的項目填寫清楚。
3．請將第Ⅰ卷和第II卷的答案統(tǒng)一填寫在“答題卷”上，否則作零分處理。
第Ⅰ卷（選擇題共60分）
一、選擇題（1-20每題1分，21-40題每題2分，共60分，在下列所給的四個選項中只有一個選項最符合題意，請將答案填寫在選擇題答題卡中，否則無效。）
1．下列技術(shù)和方法與原理相符的是（）
A. 人參細胞的大量培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)——細胞增殖
B. 植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體的制備——細胞的全能性
C. 動物細胞培養(yǎng)和人鼠細胞融合——細胞膜的流動性
D. 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉和克隆羊多利的培育——基因重組
2．下列關(guān)于“分子運輸車”的敘述，正確的是（）
A. 常見種類只有質(zhì)粒和動植物病毒
B. 能夠在受體細胞中進行自我復制，但不能整合到染色體DNA上
C. 質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于質(zhì)粒與外源基因連接
D. 在基因工程操作中真正被用作載體的質(zhì)粒都是進行過人工改造的
3．下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是( )
A. DNA連接酶和RNA聚合酶催化生成的化學鍵相同
B. 通常用一種限制酶處理含目的基因的DNA，用另一種限制酶處理運載體DNA
C. 為育成抗除草劑的作物新品種，導入抗除草劑基因時只能以受精卵為受體
D. 受體細菌若能表達質(zhì)粒載體上抗性基因，即表明重組質(zhì)粒成功導入
4．下列關(guān)于生物工程中相關(guān)酶的敘述正確的是（）
A. DNA連接酶可把目的基因與載體連接形成重組DNA
B. 限制酶將DNA分子切成兩個片段可產(chǎn)生兩分子的水
C. 纖維素酶和果膠酶處理植物細胞直接獲得雜種細胞
D. 胰蛋白酶或胃蛋白酶處理動物組織塊使細胞分散開

5．下列關(guān)于cDNA文庫和基因組文庫的說法中，正確的是（）
A. 同一物種的cDNA文庫只有1種
B. 某真核生物的cDNA文庫中的某基因一定比基因組文庫中的該基因短
C. 可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫和基因組文庫
D. 只有cDNA文庫的基因可實現(xiàn)物種間的基因交流
6．我國上海研究所合成一種具有鎮(zhèn)痛作用而又不會使病人上癮的藥物——腦啡呔多糖（類似人類中的糖蛋白）。如要采用基因工程和發(fā)酵技術(shù)讓微生物來生產(chǎn)有生物活性的腦啡呔多糖，應選哪種微生物為受體細胞（）
A. 大腸桿菌
B. 大腸桿菌質(zhì)粒
C. T4噬菌體
D. 酵母菌
7．下列有關(guān)基因工程的說法正確的是( )
A. 如果某種生物的cDNA文庫中的某個基因與該生物的基因組文庫中的某個基因控制的性狀相同，則這兩個基因的結(jié)構(gòu)也完全相同
B. 一個基因表達載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動子、終止密碼子和標記基因
C. 目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉(zhuǎn)化
D. 限制酶切割DNA產(chǎn)生的末端都為黏性末端
8．關(guān)于生物技術(shù)的敘述，錯誤的是（）
A. 目的基因必須位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子之間，才能進行轉(zhuǎn)錄
B. 目的基因與熒光標記的DNA探針進行分子雜交，能形成磷酸二酯鍵
C. 煙草葉片可離體培養(yǎng)產(chǎn)生新個體，小鼠雜交瘤細胞可離體培養(yǎng)增殖
D. 動物細胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒
9．來源于細菌的藍色色素（谷氨酰胺藍靛素）合成酶基因在白色玫瑰的花瓣中成功表達，觀察到玫瑰花瓣呈現(xiàn)藍色。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）
A．目的基因為谷氨酰胺藍靛素基因
B．花瓣中的藍色化合物是谷氨酰胺藍靛素
C．可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)朊倒寮毎?br /> D．構(gòu)建基因表達載體是培育藍色玫瑰的核心步驟
10．下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程，有關(guān)說法錯誤的是（）

A．A→B過程中一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入兩種引物
B．B→C為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過程，常選用的受體細胞是卵母細胞
C．A→B過程利用了DNA（雙鏈）復制原理，需要使用耐高溫的DNA聚合酶
D．B→D為轉(zhuǎn)基因植物的培育過程，其中④過程常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
11．科學家創(chuàng)造了“基因敲除”的方式：用外源基因整合到小鼠胚胎干細胞的DNA同源序列中，使某一個基因被取代或破壞而失活，形成雜合體細胞。然后將“修飾”后的胚胎干細胞植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合體小鼠?？茖W家已經(jīng)利用上述技術(shù)成功地把人類囊腫性纖維化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊腫性纖維化病的小鼠。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）
A．這種嵌合體小鼠長大后體內(nèi)存在外源基因，而且可能會遺傳給后代
B．在基因敲除中需要用到限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶等
C．通過“基因敲除”方式導致的變異類型屬于基因突變
D．基因敲除技術(shù)有利于人類對某些遺傳因素引發(fā)的疾病進行研究
12．下列有關(guān)基因工程的相關(guān)敘述中，正確的是（）
A. 基因治療就是去除生物體細胞中有缺陷的突變基因
B. 運載體上抗性基因的存在有利于對目的基因是否表達進行檢測
C. 在基因工程操作中，剪切目的基因和質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶一定不同
D. 轉(zhuǎn)基因技術(shù)造成的變異，實質(zhì)上相當于人為的基因重組，但卻產(chǎn)生了定向變異
13．為使玉米獲得抗除草劑性狀，需進行如圖所示的操作。報告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。下列敘述不正確的（ ?）

A. 篩選1需要用氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出成功導入表達載體的農(nóng)桿菌
B. 篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍色的組織
C. 報告基因在玉米的愈傷組織和農(nóng)桿菌細胞中均能正確表達
D. 誘導幼胚脫分化形成愈傷組織的培養(yǎng)基需添加植物激素
14．蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確的是（ ? ）
①設計預期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) ②找到相對應的脫氧核苷酸的序列
③推測應有的氨基酸的序列 ④蛋白質(zhì)的預期功能
A. ①→②→③→④ B. ④→③→②→①
C. ④→①→③→② D. ②→③→①→④
15．在應用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實驗步驟中，不需要的是（）
A．用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細胞
B．用選擇培養(yǎng)基篩選導入目的基因的細胞
C．用聚乙二醇誘導轉(zhuǎn)基因細胞的原生質(zhì)體融合
D．用適當比例的生長素和細胞分裂素誘導愈傷組織生芽
16．以某植物的綠色葉片和白色花瓣為材料進行植物組織培養(yǎng)，下列相關(guān)敘述正確的是（）
A. 外植體脫分化形成愈傷組織的過程需要生長調(diào)節(jié)劑和光照
B. 綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗
C. 若選用花粉進行組織培養(yǎng)，能獲得與原植株基因型相同的個體
D. 組織培養(yǎng)所選用的外植體細胞必須有完整的細胞核和葉綠體
17．下列事實中，可以體現(xiàn)細胞全能性的是（ ? ）
①利用胡蘿卜韌皮部的細胞培育出植株 ②轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花葉肉細胞培育出植株③番茄體細胞與馬鈴薯體細胞融合后培育出植株?④利用小麥花藥離體培育出單倍體植株⑤蜜蜂未受精的卵發(fā)育成雄蜂
A. 只有①④⑤ B. 只有①②③
C. 只有①②④⑤ ? ? D. ①?⑤全
18．實驗人員利用矮牽牛（二倍體，2n=14）的紅色花瓣細胞（液泡呈紅色）與枸杞（四倍體，4n=48）葉肉細胞，制備了相應的原生質(zhì)體，并誘導其融合，經(jīng)篩選、培養(yǎng)獲得雜種植株。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）
A. 獲得該雜種植株克服了遠緣雜交不親和的障礙
B. 可利用電激、離心等方法誘導原生質(zhì)體融合
C. 可利用光學顯微鏡觀察，篩選出雜種原生質(zhì)體
D. 若原生質(zhì)體均為兩兩融合，則融合后的細胞中染色體數(shù)目均為62條
19．下圖為植物體細胞雜交過程圖解，相關(guān)敘述錯誤的是（）

A. 植物細胞A和B可以是種間細胞
B. ②表示原生質(zhì)體的融合，包括細胞膜和細胞核膜的融合
C. 誘導再生出細胞壁標志雜種細胞的形成
D. ⑤屬于脫分化，是指從愈傷組織培育出雜種植株的過程
20．紫草素具有抗菌、消炎效果。在工業(yè)化生產(chǎn)中，取紫草植株部分組織誘導形成紫草愈傷組織，然后再將細胞破碎后提取出紫草素。下列相關(guān)敘述中，不正確的是（）
A. 工業(yè)化生產(chǎn)過程包括細胞的脫分化過程
B. 愈傷組織無法進行光合作用需從培養(yǎng)基吸收有機物
C. 紫草素在細胞內(nèi)合成后被分泌到細胞外
D. 紫草的愈傷組織細胞在低滲溶液中不會漲破
21．以下有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的表述中正確的是（）
A. 動物細胞培養(yǎng)中，含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來調(diào)控pH值和溫度
B. 動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)組織分化
C. 傳代培養(yǎng)的細胞因最接近于體內(nèi)細胞的生長特性，常用于藥物測試研究
D. 動物細胞培養(yǎng)過程中，首先要用胃蛋白酶處理部分組織使細胞分散獲得單個細胞
22．有一種“生物活性繃帶”的原理是先采集一些細胞標本，再讓其在特殊膜片上增殖，5～7天后，將膜片敷到患者傷口上，膜片會將細胞逐漸“釋放”到傷口處，并促進新生皮膚層生長，達到愈合傷口的目的。下列有關(guān)敘述中，錯誤的是（）
A. 若采用異體皮膚移植會導致排異反應，主要是因為效應T對移植皮膚細胞有殺傷作用
B. 種植在膜片上的細胞樣本最好選擇來自本人的干細胞
C. 膜片“釋放”的細胞能與患者自身皮膚愈合，與兩者細胞膜上的糖蛋白有關(guān)
D. 人的皮膚燒傷后易引起感染，主要是由于特異性免疫機能受損所致
23．某同學列表比較了動、植物細胞工程的有關(guān)內(nèi)容，不正確的是（）

比較內(nèi)容
植物細胞工程
動物細胞工程
A
特殊處理
酶解法去除細胞壁
用膠原蛋白酶處理制成細胞懸液
B
融合方法
物理方法、化學方法、生物方法
物理方法、化學方法
C
典型應用
人工種子、種間雜種植物
單克隆抗體的制備
D
培養(yǎng)基區(qū)別
蔗糖是離體組織賴以生長的成分
通常需加入動物血清
A. A B. B C. C? D. D
24．下列對動物核移植技術(shù)的描述，不正確的是（）
A. 哺乳動物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植
B. 體細胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動物是對供體動物的完全復制
C. 體細胞核移植過程中通常選擇MⅡ期卵母細胞為受體細胞
D. 體細胞核移植過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的核
25．某實驗室做了下圖所示的實驗研究，下列相關(guān)敘述正確的是（）

A. 過程②是誘導干細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程
B. 與纖維母細胞相比，經(jīng)過程①形成的誘導干細胞的全能性較高
C. 肝細胞、神經(jīng)細胞、上皮細胞等細胞中基因組成相同，蛋白質(zhì)完全不同
D. 上述細胞中具有細胞周期的是誘導干細胞和神經(jīng)細胞
26．對于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是（）

A. ④中的篩選是通過抗原、抗體反應進行的
B. ①表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞，均是從小鼠的脾臟中提取的
C. ②促進細胞融合的方法可以利用滅活的病毒作介導
D. ⑤可以無限增殖
27．科學家們用磷脂制成雙分子層的微球體，里面包裹著抗癌藥物，外面帶上單克隆抗體，制成“生物導彈”。下列有關(guān)敘述不正確的是（）
A. 單克隆抗體的制備應用了動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)
B. 單克隆抗體的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)，特異性強、靈敏度高
C. 選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)出的雜交瘤細胞都能夠經(jīng)專一抗體檢驗呈陽性
D. 理論上利用“生物導彈”技術(shù)治療癌癥療效高，毒副作用小
28．通過細胞工程生產(chǎn)單克降抗體時，通常要經(jīng)過三次篩選：（）
①選出能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞
②在特定培養(yǎng)基中篩選雜交瘤細胞
③選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細胞群。
這三個過程的先后順序是
A. ②①③ B. ①②③ C. ①③② D. ③②①
29.下列有關(guān)細胞工程的敘述,正確的是( )
A.植物體細胞雜交和單克隆抗體的制備過程中都需要對融合后的細胞進行篩選
B.植物體細胞雜交就是指不同種植物原生質(zhì)體融合的過程,原理是膜的流動性
C.植物細胞在組織培養(yǎng)過程中染色體數(shù)目始終保持不變
D.經(jīng)核移植培育出的新個體只具有一個親本的遺傳性狀
30．下列有關(guān)生物工程的敘述正確的是( )
A.應用基因診斷技術(shù)，可檢測受體細胞中的目的基因是否表達
B.篩選產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞需要使用特定的選擇培養(yǎng)基
C.莖尖細胞具有很強的分裂能力，離體培養(yǎng)時也需要脫分化才可培養(yǎng)成完整植株
D.將牛的體細胞核移植到去核卵母細胞中，獲得克隆牛是一種培育新品種的方式
31．生物工程是一門生物科學與工程技術(shù)有機結(jié)合而興起的一門綜合性的科學技術(shù)，近些年來發(fā)展迅猛，碩果累累，下列關(guān)于生物工程的說法，不正確的是（）
A．植物體細胞雜交技術(shù)和動物細胞融合技術(shù)的原理是一樣的，植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是相同的
B．從理論上講，基因工程和細胞工程都可以定向改造生物的遺傳性狀和克服遠緣雜交不親和的障礙
C．基因工程的工具酶有限制酶、DNA 連接酶等，細胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等
D．通過基因工程可以生產(chǎn)出乙肝疫苗、胰島素、某些種類的抗體
32．科學家通過基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白。以下有關(guān)該基因工程的敘述錯誤的是（）
A．人工種植的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯種群的人奶蛋白基因頻率將不會發(fā)生改變
B．基因非編碼區(qū)對于目的基因在塊莖中的表達是不可缺少的
C．馬鈴薯的葉肉細胞可作為受體細胞
D．用同一種限制酶處理質(zhì)粒和含有目的基因的DNA，可產(chǎn)生相同的黏性末端
33．用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段，酶切位點及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是（）

A．如圖中兩種酶識別的核苷酸序列不同 B．如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNA
C．泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物 D．圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA
34．下列有關(guān)敘述錯誤的是（）
A．從基因組文庫中獲取的某種生物的部分基因，可以實現(xiàn)物種間的基因交流
B．從cDNA文庫中獲取的目的基因，既無啟動子，又無終止子
C．用人胰高血糖素基因制成的DNA探針，檢測人胰島B細胞中的mRNA，可形成雜交分子
D．基因表達載體中的標記基因不能含有限制酶的切割位點
35．科研人員以抗四環(huán)素基因為標記基因，通過基因工程的方法讓大腸桿菌生產(chǎn)鼠的 β-珠蛋白，治療鼠的鐮刀型細胞貧血癥。下列相關(guān)實驗設計中正確的是（）
A．用 β-珠蛋白基因的編碼序列加啟動子、終止子、抗四環(huán)素基因等元件來構(gòu)建表達載體
B．利用小鼠的成熟紅細胞提取 mRNA，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄可獲得 β-珠蛋白基因的編碼序列
C．用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出能繁殖的大腸桿菌，即可產(chǎn)生β-珠蛋白
D．用 Ca2＋處理大腸桿菌后，將表達載體導入具有四環(huán)素抗性的大腸桿菌中
36．下列關(guān)于細胞工程的有關(guān)敘述，不正確的是（）
A．利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株，從紫草的愈傷組織中提取紫草素，利用細胞工程培育“番茄-馬鈴薯”雜種植株，都利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)
B．在進行組織培養(yǎng)時，由根尖細胞形成愈傷組織的過程中，可能會發(fā)生細胞脫分化，染色體變異或基因突變
C．動物細胞融合與植物體細胞雜交相比，所依據(jù)的原理均相同，都能形成雜種細胞和雜種個體
D．“試管嬰兒”就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產(chǎn)物”，不能使不能產(chǎn)生精子或卵細胞的夫婦能得到自己的孩子；單克隆抗體制備采用了動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)
37．“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述中正確的有幾項( )
①重組質(zhì)粒上的標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來
②單克隆抗體制備過程中，在完成細胞融合后，第一次篩選出的是雜交瘤細胞
③單克隆抗體制備過程中，在完成細胞融合后，第二次篩選出的是針對目標抗原的抗體檢驗為陽性的雜交瘤細胞
④為了快速繁殖無子西瓜，需篩選出特定染色體組數(shù)的體細胞才能進行組織培養(yǎng)
A．一項 B．二項 C．三項 D．四項
38．下列關(guān)于細胞工程的敘述，正確的是（）
A．電激可誘導植物原生質(zhì)體融合，不能誘導動物細胞融合
B．去除植物細胞壁用酶處理，將動物組織分散成單個細胞不需酶處理
C．小鼠骨髓癌細胞和經(jīng)抗原免疫的B淋巴細胞融合后培養(yǎng)可制備單克隆抗體
D．動植物細胞培養(yǎng)都需要經(jīng)過脫分化處理
39．下列關(guān)于細胞工程的敘述，錯誤的是（）
A．電刺激可誘導植物原生質(zhì)體融合或動物細胞融合
B．某種植物甲乙兩品種體細胞雜交與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同
C．小鼠骨髓瘤細胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體
D．去除植物細胞的細胞壁和將動物組織分散成單個細胞均需酶處理
40．下列有關(guān)細胞工程的敘述錯誤的是（）
A．選擇高度分化的動物體細胞進行培養(yǎng)不利于獲得大量細胞
B．選擇胚胎細胞作為核供體進行核移植可提高克隆動物的成功率
C．植物愈傷組織經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以得到具有胚性細胞特征的單細胞
D．用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物細胞原生質(zhì)體失去了全能性

第II卷（非選擇題共40分）
31．（8分）糖尿病是一種常見病,其發(fā)病率有逐年上升的局勢，治療糖尿病少不了胰島素。如圖表示運用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的幾條途徑。據(jù)圖回答下列問題：

(1)科研人員用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒M轉(zhuǎn)移到受體細胞A中,細胞A應該是___________。
(2)科研人員用DNA分子雜交技術(shù)檢測胰島素基因是否整合到轉(zhuǎn)基因母羊的DNA上,以___ _ __為探針,使探針與羊基因組的DNA雜交,如果顯示出________________，則表明胰島素基因已插人染色體DNA中。
(3)受體細胞B應該是萵苣的_______________(填“體細胞”“卵細胞”或“受精卵),過程②常用的方法是______________。導入該細胞后,需對該細胞進行組織培養(yǎng),經(jīng)____________過程形成愈傷組織。
(4)若該轉(zhuǎn)基因“胰島素羊”乳汁中檢測到胰島素,該胰島素與轉(zhuǎn)基因“胰島素細菌”產(chǎn)生的胰島素相比不同之處是_____________________。其原因_________ __________。
32．（8分）下圖所示為科學家利用番茄葉細胞和馬鈴薯葉細胞雜交培育“番茄-馬鈴薯”植株的過程，請回答下列問題：

（1）①②過程使用了__________酶和酶，以使植物原生質(zhì)體相互分離，在動物細胞培養(yǎng)技術(shù)中，使細胞分離開來的酶是__________。
（2）過程③在化學藥劑__________的作用下會發(fā)生植物原生質(zhì)體的融合；植物細胞融合完成的標志是。
（3）過程⑤⑥⑦的細胞工程技術(shù)是，其原理是。
（4）植物體細胞雜交的研究在方面，取得了巨大突破。
33.（8分）CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是近年來頗受關(guān)注的一項新技術(shù)。該基因表達系統(tǒng)主要包含引導RNA和Cas9蛋白兩個部分，引導RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白結(jié)合到相應位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。研究人員試圖用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對水稻產(chǎn)量基因Q基因進行編輯，請回答下列問題：
（1）研究發(fā)現(xiàn)，CRISPR/Cas9僅存在于原核生物，故需借助____________技術(shù)才能在水稻細胞中發(fā)揮作用。Cas9蛋白與_____________酶的功能相似。
（2）首先依據(jù)___________的部分序列設計DNA片段A（負責編碼相應引導RNA），再將片段A與含有Cas9基因的質(zhì)粒B連接，以構(gòu)建編輯水稻Q基因的CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因表達載體（如圖所示）。位點Ⅰ、位點Ⅱ分別表示酶切位點。

（3）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨臼荏w細胞，依據(jù)農(nóng)桿菌的侵染特點，目的基因?qū)⒉迦氲絋i質(zhì)粒的_______上，經(jīng)過轉(zhuǎn)化作用，進入水稻細胞，并將其插入到____________，從而使其得以維持穩(wěn)定和表達。
（4）CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時存在編輯對象出錯而造成脫靶，試從引導RNA的角度分析脫靶的原因。
34（8分）下圖為吉林大學農(nóng)學部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉(zhuǎn)入賴氨酸基因的克隆牛的大致過程，請據(jù)圖回答問題。

（1）獲得賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛所用的細胞工程技術(shù)手段包括動物細胞培養(yǎng)和_______ _____。通過__________去除卵母細胞中的核，用___________方法激活受體細胞，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程，構(gòu)建重組胚胎?？寺∨ＵQ生的主要原理是_______________，這個過程屬于_______________(有性生殖/無性生殖）。
（2）將編碼賴氨酸的基因轉(zhuǎn)入胚胎成纖維細胞的核心步驟是_______________。
(3),對胚胎成纖維細胞進行的初次培養(yǎng)稱為____________,培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂,這種現(xiàn)象稱為 _____________。
35.（8分）下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點是，此外還要用到________酶。
(2)過程②中首先需要用Ca2＋處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達的過程稱為______。
(3)與植物原生質(zhì)體融合相比，過程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。
(4)圖示過程應用的生物技術(shù)有____________________ 、__________________和動物細胞融合技術(shù)。

參考答案
一、選擇題（1-20每題1分，21-40題每題2分，共60分）
題號
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
選項
A
D
A
A
B
D
C
B
A
B
題號
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
選項
C
D
C
C
C
B
D
D
D
C
題號
21
22
23
2?4
25
26
27
28
29
30
選項
A
D
B
B
B
B
C
B
A
C
題號
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
選項
A
A
D
C
A
C
C
C
B
D
二、非選擇題（40分）
31．（8分）（1）受精卵（2）放射性同位素（或熒光）標記的胰島素基因雜交帶（3）體細胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法脫分化
（4）“胰島素羊”乳腺細胞分泌的胰島素具有生物活性，而轉(zhuǎn)基因“胰島素細菌”產(chǎn)生的胰島素無生物活性乳腺細胞有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體，能加工相關(guān)的蛋白質(zhì)，而細菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體
32．（8分）（1）纖維素果膠胰蛋白酶（2）聚乙二醇細胞壁的形成（3）植物組織培養(yǎng) 植物細胞全能性（4）克服不同生物遠緣雜交不親和的障礙
33.（8分）（1）轉(zhuǎn)基因（DNA重組或基因工程）限制酶（2） Q基因 KpnⅠ、BamHⅠ（2分）（3） T-DNA 水稻細胞染色體的DNA上（4）其他DNA序列也含有與引導RNA互補配對的序列，造成引導RNA錯誤結(jié)合而脫靶
34．（8分）（1）動物細胞核移植顯微操作物理或化學方法已高度分化的動物體細胞的細胞核仍具有發(fā)育的全能性無性生殖（2）目的基因表達載體的構(gòu)建（3）原代培養(yǎng) 接觸抑制
35.（8分）（1）防止自身環(huán)化 DNA連接（2）轉(zhuǎn)化（3）滅活的病毒
防止培養(yǎng)過程中的污染不是（4）基因工程動物細胞培養(yǎng)