說明： 1．本試卷分第I卷（選擇題）和第II卷（非選擇題）兩部分，總分100分，考試時(shí)間90分鐘。
2．答題前請(qǐng)將密封線內(nèi)的項(xiàng)目填寫清楚。
3．請(qǐng)將第Ⅰ卷和第II卷的答案統(tǒng)一填寫在“答題卷”上，否則作零分處理。
第Ⅰ卷（選擇題 共60分）
一、選擇題（1-20每題1分，21-40題每題2分，共60分，在下列所給的四個(gè)選項(xiàng)中只有一個(gè)選項(xiàng)最符合題意，請(qǐng)將答案填寫在選擇題答題卡中，否則無效。）
1．下列技術(shù)和方法與原理相符的是（ ）
A. 人參細(xì)胞的大量培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞增殖
B. 植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體的制備——細(xì)胞的全能性
C. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和人鼠細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流動(dòng)性
D. 轉(zhuǎn)基因抗蟲棉和克隆羊多利的培育——基因重組
2．下列關(guān)于“分子運(yùn)輸車”的敘述，正確的是（ ）
A. 常見種類只有質(zhì)粒和動(dòng)植物病毒
B. 能夠在受體細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，但不能整合到染色體DNA上
C. 質(zhì)粒上的抗生素抗性基因有利于質(zhì)粒與外源基因連接
D. 在基因工程操作中真正被用作載體的質(zhì)粒都是進(jìn)行過人工改造的
3．下列關(guān)于基因工程的敘述，正確的是(　　)
A. DNA連接酶和RNA聚合酶催化生成的化學(xué)鍵相同
B. 通常用一種限制酶處理含目的基因的DNA，用另一種限制酶處理運(yùn)載體DNA
C. 為育成抗除草劑的作物新品種，導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體
D. 受體細(xì)菌若能表達(dá)質(zhì)粒載體上抗性基因，即表明重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入
4．下列關(guān)于生物工程中相關(guān)酶的敘述正確的是（ ）
A. DNA連接酶可把目的基因與載體連接形成重組DNA
B. 限制酶將DNA分子切成兩個(gè)片段可產(chǎn)生兩分子的水
C. 纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞直接獲得雜種細(xì)胞
D. 胰蛋白酶或胃蛋白酶處理動(dòng)物組織塊使細(xì)胞分散開
5．下列關(guān)于cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)的說法中，正確的是（ ）
A. 同一物種的cDNA文庫(kù)只有1種
B. 某真核生物的cDNA文庫(kù)中的某基因一定比基因組文庫(kù)中的該基因短
C. 可以利用反轉(zhuǎn)錄法獲取cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù)
D. 只有cDNA文庫(kù)的基因可實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流
6．我國(guó)上海研究所合成一種具有鎮(zhèn)痛作用而又不會(huì)使病人上癮的藥物——腦啡呔多糖（類似人類中的糖蛋白）。如要采用基因工程和發(fā)酵技術(shù)讓微生物來生產(chǎn)有生物活性的腦啡呔多糖，應(yīng)選哪種微生物為受體細(xì)胞（ ）
A. 大腸桿菌
B. 大腸桿菌質(zhì)粒
C. T4噬菌體
D. 酵母菌
7．下列有關(guān)基因工程的說法正確的是( )
A. 如果某種生物的cDNA文庫(kù)中的某個(gè)基因與該生物的基因組文庫(kù)中的某個(gè)基因控制的性狀相同，則這兩個(gè)基因的結(jié)構(gòu)也完全相同
B. 一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、終止密碼子和標(biāo)記基因
C. 目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為轉(zhuǎn)化
D. 限制酶切割DNA產(chǎn)生的末端都為黏性末端
8．關(guān)于生物技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A. 目的基因必須位于重組質(zhì)粒的啟動(dòng)子和終止子之間，才能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄
B. 目的基因與熒光標(biāo)記的DNA探針進(jìn)行分子雜交，能形成磷酸二酯鍵
C. 煙草葉片可離體培養(yǎng)產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖
D. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒
9．來源于細(xì)菌的藍(lán)色色素（谷氨酰胺藍(lán)靛素）合成酶基因在白色玫瑰的花瓣中成功表達(dá)，觀察到玫瑰花瓣呈現(xiàn)藍(lán)色。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．目的基因?yàn)楣劝滨０匪{(lán)靛素基因
B．花瓣中的藍(lán)色化合物是谷氨酰胺藍(lán)靛素
C．可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)朊倒寮?xì)胞
D．構(gòu)建基因表達(dá)載體是培育藍(lán)色玫瑰的核心步驟
10．下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程，有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）

A．A→B過程中一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入兩種引物
B．B→C為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過程，常選用的受體細(xì)胞是卵母細(xì)胞
C．A→B過程利用了DNA（雙鏈）復(fù)制原理，需要使用耐高溫的DNA聚合酶
D．B→D為轉(zhuǎn)基因植物的培育過程，其中④過程常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
11．科學(xué)家創(chuàng)造了“基因敲除”的方式：用外源基因整合到小鼠胚胎干細(xì)胞的DNA同源序列中，使某一個(gè)基因被取代或破壞而失活，形成雜合體細(xì)胞。然后將“修飾”后的胚胎干細(xì)胞植入小鼠的早期胚胎，生成嵌合體小鼠。科學(xué)家已經(jīng)利用上述技術(shù)成功地把人類囊腫性纖維化病的致病基因移植到小鼠身上，培育出了患囊腫性纖維化病的小鼠。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后體內(nèi)存在外源基因，而且可能會(huì)遺傳給后代
B．在基因敲除中需要用到限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶等
C．通過“基因敲除”方式導(dǎo)致的變異類型屬于基因突變
D．基因敲除技術(shù)有利于人類對(duì)某些遺傳因素引發(fā)的疾病進(jìn)行研究
12．下列有關(guān)基因工程的相關(guān)敘述中，正確的是（　　）
A. 基因治療就是去除生物體細(xì)胞中有缺陷的突變基因
B. 運(yùn)載體上抗性基因的存在有利于對(duì)目的基因是否表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)
C. 在基因工程操作中，剪切目的基因和質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶一定不同
D. 轉(zhuǎn)基因技術(shù)造成的變異，實(shí)質(zhì)上相當(dāng)于人為的基因重組，但卻產(chǎn)生了定向變異
13．為使玉米獲得抗除草劑性狀，需進(jìn)行如圖所示的操作。報(bào)告基因的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下列敘述不正確的 （ ）

A. 篩選1需要用氨芐青霉素培養(yǎng)基篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的農(nóng)桿菌
B. 篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出呈現(xiàn)藍(lán)色的組織
C. 報(bào)告基因在玉米的愈傷組織和農(nóng)桿菌細(xì)胞中均能正確表達(dá)
D. 誘導(dǎo)幼胚脫分化形成愈傷組織的培養(yǎng)基需添加植物激素
14．蛋白質(zhì)工程的基本操作程序正確的是（ ）
①設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu) ②找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸的序列
③推測(cè)應(yīng)有的氨基酸的序列 ④蛋白質(zhì)的預(yù)期功能
A. ①→②→③→④ B. ④→③→②→①
C. ④→①→③→② D. ②→③→①→④
15．在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實(shí)驗(yàn)步驟中，不需要的是（ ）
A．用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞
B．用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞
C．用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合
D．用適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽
16．以某植物的綠色葉片和白色花瓣為材料進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A. 外植體脫分化形成愈傷組織的過程需要生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和光照
B. 綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗
C. 若選用花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)，能獲得與原植株基因型相同的個(gè)體
D. 組織培養(yǎng)所選用的外植體細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核和葉綠體
17．下列事實(shí)中，可以體現(xiàn)細(xì)胞全能性的是（ ）
①利用胡蘿卜韌皮部的細(xì)胞培育出植株 ②轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花葉肉細(xì)胞培育出植株③番茄體細(xì)胞與馬鈴薯體細(xì)胞融合后培育出植株 ④利用小麥花藥離體培育出單倍體植株⑤蜜蜂未受精的卵發(fā)育成雄蜂
A. 只有①④⑤ B. 只有①②③
C. 只有①②④⑤ D. ①?⑤全
18．實(shí)驗(yàn)人員利用矮牽牛（二倍體，2n=14）的紅色花瓣細(xì)胞（液泡呈紅色）與枸杞（四倍體，4n=48）葉肉細(xì)胞，制備了相應(yīng)的原生質(zhì)體，并誘導(dǎo)其融合，經(jīng)篩選、培養(yǎng)獲得雜種植株。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 獲得該雜種植株克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙
B. 可利用電激、離心等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合
C. 可利用光學(xué)顯微鏡觀察，篩選出雜種原生質(zhì)體
D. 若原生質(zhì)體均為兩兩融合，則融合后的細(xì)胞中染色體數(shù)目均為62條
19．下圖為植物體細(xì)胞雜交過程圖解，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 植物細(xì)胞A和B可以是種間細(xì)胞
B. ②表示原生質(zhì)體的融合，包括細(xì)胞膜和細(xì)胞核膜的融合
C. 誘導(dǎo)再生出細(xì)胞壁標(biāo)志雜種細(xì)胞的形成
D. ⑤屬于脫分化，是指從愈傷組織培育出雜種植株的過程
20．紫草素具有抗菌、消炎效果。在工業(yè)化生產(chǎn)中，取紫草植株部分組織誘導(dǎo)形成紫草愈傷組織，然后再將細(xì)胞破碎后提取出紫草素。下列相關(guān)敘述中，不正確的是（ ）
A. 工業(yè)化生產(chǎn)過程包括細(xì)胞的脫分化過程
B. 愈傷組織無法進(jìn)行光合作用需從培養(yǎng)基吸收有機(jī)物
C. 紫草素在細(xì)胞內(nèi)合成后被分泌到細(xì)胞外
D. 紫草的愈傷組織細(xì)胞在低滲溶液中不會(huì)漲破
21．以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的表述中正確的是（ ）
A. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中，含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來調(diào)控pH值和溫度
B. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)組織分化
C. 傳代培養(yǎng)的細(xì)胞因最接近于體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性，常用于藥物測(cè)試研究
D. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，首先要用胃蛋白酶處理部分組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞
22．有一種“生物活性繃帶”的原理是先采集一些細(xì)胞標(biāo)本，再讓其在特殊膜片上增殖，5～7天后，將膜片敷到患者傷口上，膜片會(huì)將細(xì)胞逐漸“釋放”到傷口處，并促進(jìn)新生皮膚層生長(zhǎng)，達(dá)到愈合傷口的目的。下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（ ）
A. 若采用異體皮膚移植會(huì)導(dǎo)致排異反應(yīng)，主要是因?yàn)樾?yīng)T對(duì)移植皮膚細(xì)胞有殺傷作用
B. 種植在膜片上的細(xì)胞樣本最好選擇來自本人的干細(xì)胞
C. 膜片“釋放”的細(xì)胞能與患者自身皮膚愈合，與兩者細(xì)胞膜上的糖蛋白有關(guān)
D. 人的皮膚燒傷后易引起感染，主要是由于特異性免疫機(jī)能受損所致
23．某同學(xué)列表比較了動(dòng)、植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，不正確的是（ ）

比較內(nèi)容
植物細(xì)胞工程
動(dòng)物細(xì)胞工程
A
特殊處理
酶解法去除細(xì)胞壁
用膠原蛋白酶處理制成細(xì)胞懸液
B
融合方法
物理方法、化學(xué)方法、生物方法
物理方法、化學(xué)方法
C
典型應(yīng)用
人工種子、種間雜種植物
單克隆抗體的制備
D
培養(yǎng)基區(qū)別
蔗糖是離體組織賴以生長(zhǎng)的成分
通常需加入動(dòng)物血清
A. A B. B C. C D. D
24．下列對(duì)動(dòng)物核移植技術(shù)的描述，不正確的是（ ）
A. 哺乳動(dòng)物核移植包括胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植
B. 體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物是對(duì)供體動(dòng)物的完全復(fù)制
C. 體細(xì)胞核移植過程中通常選擇MⅡ期卵母細(xì)胞為受體細(xì)胞
D. 體細(xì)胞核移植過程中可通過顯微操作去除卵母細(xì)胞中的核
25．某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究，下列相關(guān)敘述正確的是（ ）

A. 過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程
B. 與纖維母細(xì)胞相比，經(jīng)過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高
C. 肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、上皮細(xì)胞等細(xì)胞中基因組成相同，蛋白質(zhì)完全不同
D. 上述細(xì)胞中具有細(xì)胞周期的是誘導(dǎo)干細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞
26．對(duì)于下面制備單克隆抗體過程示意圖，不正確的敘述是（ ）

A. ④中的篩選是通過抗原、抗體反應(yīng)進(jìn)行的
B. ①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，均是從小鼠的脾臟中提取的
C. ②促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用滅活的病毒作介導(dǎo)
D. ⑤可以無限增殖
27．科學(xué)家們用磷脂制成雙分子層的微球體，里面包裹著抗癌藥物，外面帶上單克隆抗體，制成“生物導(dǎo)彈”。下列有關(guān)敘述不正確的是（ ）
A. 單克隆抗體的制備應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
B. 單克隆抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，特異性強(qiáng)、靈敏度高
C. 選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)出的雜交瘤細(xì)胞都能夠經(jīng)專一抗體檢驗(yàn)呈陽(yáng)性
D. 理論上利用“生物導(dǎo)彈”技術(shù)治療癌癥療效高，毒副作用小
28．通過細(xì)胞工程生產(chǎn)單克降抗體時(shí)，通常要經(jīng)過三次篩選：（ ）
①選出能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞 ②在特定培養(yǎng)基中篩選雜交瘤細(xì)胞
③選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細(xì)胞群。
這三個(gè)過程的先后順序是
A. ②①③ B. ①②③ C. ①③② D. ③②①
29.下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是( )
A.植物體細(xì)胞雜交和單克隆抗體的制備過程中都需要對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選
B.植物體細(xì)胞雜交就是指不同種植物原生質(zhì)體融合的過程,原理是膜的流動(dòng)性
C.植物細(xì)胞在組織培養(yǎng)過程中染色體數(shù)目始終保持不變
D.經(jīng)核移植培育出的新個(gè)體只具有一個(gè)親本的遺傳性狀
30．下列有關(guān)生物工程的敘述正確的是(??)
A.應(yīng)用基因診斷技術(shù)，可檢測(cè)受體細(xì)胞中的目的基因是否表達(dá)
B.篩選產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞需要使用特定的選擇培養(yǎng)基
C.莖尖細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力，離體培養(yǎng)時(shí)也需要脫分化才可培養(yǎng)成完整植株
D.將牛的體細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞中，獲得克隆牛是一種培育新品種的方式
31．生物工程是一門生物科學(xué)與工程技術(shù)有機(jī)結(jié)合而興起的一門綜合性的科學(xué)技術(shù)，近些年來發(fā)展迅猛，碩果累累，下列關(guān)于生物工程的說法，不正確的是（ ）
A．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理是一樣的，植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是相同的
B．從理論上講，基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物的遺傳性狀和克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙
C．基因工程的工具酶有限制酶、DNA 連接酶等，細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等
D．通過基因工程可以生產(chǎn)出乙肝疫苗、胰島素、某些種類的抗體
32．科學(xué)家通過基因工程的方法，能使馬鈴薯塊莖含有人奶蛋白。以下有關(guān)該基因工程的敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．人工種植的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯種群的人奶蛋白基因頻率將不會(huì)發(fā)生改變
B．基因非編碼區(qū)對(duì)于目的基因在塊莖中的表達(dá)是不可缺少的
C．馬鈴薯的葉肉細(xì)胞可作為受體細(xì)胞
D．用同一種限制酶處理質(zhì)粒和含有目的基因的DNA，可產(chǎn)生相同的黏性末端
33．用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段，酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是（　　）

A．如圖中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同 B．如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNA
C．泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物 D．圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA
34．下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．從基因組文庫(kù)中獲取的某種生物的部分基因，可以實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流
B．從cDNA文庫(kù)中獲取的目的基因，既無啟動(dòng)子，又無終止子
C．用人胰高血糖素基因制成的DNA探針，檢測(cè)人胰島B細(xì)胞中的mRNA，可形成雜交分子
D．基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因不能含有限制酶的切割位點(diǎn)
35．科研人員以抗四環(huán)素基因?yàn)闃?biāo)記基因，通過基因工程的方法讓大腸桿菌生產(chǎn)鼠的 β-珠蛋白，治療鼠的鐮刀型細(xì)胞貧血癥。下列相關(guān)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中正確的是（ ）
A．用 β-珠蛋白基因的編碼序列加啟動(dòng)子、終止子、抗四環(huán)素基因等元件來構(gòu)建表達(dá)載體
B．利用小鼠的成熟紅細(xì)胞提取 mRNA，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄可獲得 β-珠蛋白基因的編碼序列
C．用含有四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出能繁殖的大腸桿菌，即可產(chǎn)生β-珠蛋白
D．用 Ca2＋處理大腸桿菌后，將表達(dá)載體導(dǎo)入具有四環(huán)素抗性的大腸桿菌中
36．下列關(guān)于細(xì)胞工程的有關(guān)敘述，不正確的是 （ ）
A．利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株，從紫草的愈傷組織中提取紫草素，利用細(xì)胞工程培育“番茄-馬鈴薯”雜種植株，都利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)
B．在進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，由根尖細(xì)胞形成愈傷組織的過程中，可能會(huì)發(fā)生細(xì)胞脫分化，染色體變異或基因突變
C．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比，所依據(jù)的原理均相同，都能形成雜種細(xì)胞和雜種個(gè)體
D．“試管嬰兒”就是“體外受精”和“胚胎移植”的“產(chǎn)物”，不能使不能產(chǎn)生精子或卵細(xì)胞的夫婦能得到自己的孩子；單克隆抗體制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
37．“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述中正確的有幾項(xiàng)( )
①重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來
②單克隆抗體制備過程中，在完成細(xì)胞融合后，第一次篩選出的是雜交瘤細(xì)胞
③單克隆抗體制備過程中，在完成細(xì)胞融合后，第二次篩選出的是針對(duì)目標(biāo)抗原的抗體檢驗(yàn)為陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞
④為了快速繁殖無子西瓜，需篩選出特定染色體組數(shù)的體細(xì)胞才能進(jìn)行組織培養(yǎng)
A．一項(xiàng) B．二項(xiàng) C．三項(xiàng) D．四項(xiàng)
38．下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，正確的是 （ ）
A．電激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，不能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合
B．去除植物細(xì)胞壁用酶處理，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞不需酶處理
C．小鼠骨髓癌細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫的B淋巴細(xì)胞融合后培養(yǎng)可制備單克隆抗體
D．動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)都需要經(jīng)過脫分化處理
39．下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合
B．某種植物甲乙兩品種體細(xì)胞雜交與甲乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同
C．小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體
D．去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理
40．下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．選擇高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)不利于獲得大量細(xì)胞
B．選擇胚胎細(xì)胞作為核供體進(jìn)行核移植可提高克隆動(dòng)物的成功率
C．植物愈傷組織經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以得到具有胚性細(xì)胞特征的單細(xì)胞
D．用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物細(xì)胞原生質(zhì)體失去了全能性

第II卷（非選擇題 共40分）
31．（8分）糖尿病是一種常見病,其發(fā)病率有逐年上升的局勢(shì)，治療糖尿病少不了胰島素。如圖表示運(yùn)用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的幾條途徑。據(jù)圖回答下列問題：

(1)科研人員用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒M轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞A中,細(xì)胞A應(yīng)該是___________。
(2)科研人員用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)胰島素基因是否整合到轉(zhuǎn)基因母羊的DNA上,以______為探針,使探針與羊基因組的DNA雜交,如果顯示出________________，則表明胰島素基因已插人染色體DNA中。
(3)受體細(xì)胞B應(yīng)該是萵苣的_______________(填“體細(xì)胞”“卵細(xì)胞”或“受精卵),過程②常用的方法是______________。導(dǎo)入該細(xì)胞后,需對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),經(jīng)____________過程形成愈傷組織。
(4)若該轉(zhuǎn)基因“胰島素羊”乳汁中檢測(cè)到胰島素,該胰島素與轉(zhuǎn)基因“胰島素細(xì)菌”產(chǎn)生的胰島素相比不同之處是_____________________。其原因_________ __________。
32．（8分）下圖所示為科學(xué)家利用番茄葉細(xì)胞和馬鈴薯葉細(xì)胞雜交培育“番茄-馬鈴薯”植株的過程，請(qǐng)回答下列問題：

（1）①②過程使用了__________酶和 酶，以使植物原生質(zhì)體相互分離，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，使細(xì)胞分離開來的酶是__________。
（2）過程③在化學(xué)藥劑__________的作用下會(huì)發(fā)生植物原生質(zhì)體的融合；植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是 。
（3）過程⑤⑥⑦的細(xì)胞工程技術(shù)是 ，其原理是 。
（4）植物體細(xì)胞雜交的研究在 方面，取得了巨大突破。
33.（8分）CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是近年來頗受關(guān)注的一項(xiàng)新技術(shù)。該基因表達(dá)系統(tǒng)主要包含引導(dǎo)RNA和Cas9蛋白兩個(gè)部分，引導(dǎo)RNA能識(shí)別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)靶基因序列的編輯。研究人員試圖用CRISPR/Cas9系統(tǒng)對(duì)水稻產(chǎn)量基因Q基因進(jìn)行編輯，請(qǐng)回答下列問題：
（1）研究發(fā)現(xiàn)，CRISPR/Cas9僅存在于原核生物，故需借助____________技術(shù)才能在水稻細(xì)胞中發(fā)揮作用。Cas9蛋白與_____________酶的功能相似。
（2）首先依據(jù)___________的部分序列設(shè)計(jì)DNA片段A（負(fù)責(zé)編碼相應(yīng)引導(dǎo)RNA），再將片段A與含有Cas9基因的質(zhì)粒B連接，以構(gòu)建編輯水稻Q基因的CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因表達(dá)載體（如圖所示）。位點(diǎn)Ⅰ、位點(diǎn)Ⅱ分別表示 酶切位點(diǎn)。

（3）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨臼荏w細(xì)胞，依據(jù)農(nóng)桿菌的侵染特點(diǎn)，目的基因?qū)⒉迦氲絋i質(zhì)粒的_______上，經(jīng)過轉(zhuǎn)化作用，進(jìn)入水稻細(xì)胞，并將其插入到____________，從而使其得以維持穩(wěn)定和表達(dá)。
（4）CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成脫靶，試從引導(dǎo)RNA的角度分析脫靶的原因 。
34（8分）下圖為吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部奶牛繁育基地成功培育出的一頭攜帶轉(zhuǎn)入賴氨酸基因的克隆牛的大致過程，請(qǐng)據(jù)圖回答問題。

（1）獲得賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛所用的細(xì)胞工程技術(shù)手段包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和_______ _____。通過__________去除卵母細(xì)胞中的核，用___________方法激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，構(gòu)建重組胚胎?？寺∨ＵQ生的主要原理是_______________，這個(gè)過程屬于_______________(有性生殖/無性生殖）。
（2）將編碼賴氨酸的基因轉(zhuǎn)入胚胎成纖維細(xì)胞的核心步驟是_______________。
（3）對(duì)胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為____________,培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂,這種現(xiàn)象稱為 _____________。
35.（8分）下圖是制備抗埃博拉病毒VP40蛋白的單克隆抗體的過程

(1)過程①中選用EcoRⅠ和XhoⅠ兩種限制酶切割的優(yōu)點(diǎn)是 ，此外還要用到________酶。
(2)過程②中首先需要用Ca2＋處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，VP40基因進(jìn)入大腸桿菌后維持穩(wěn)定并表達(dá)的過程稱為______。
(3)與植物原生質(zhì)體融合相比，過程④特有的方法是用________處理。通常在選擇培養(yǎng)基中需加入抗生素，目的是________________________。選擇培養(yǎng)基上存活的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體________(填“是”或“不是”)單克隆抗體。
(4)圖示過程應(yīng)用的生物技術(shù)有____________________ 、__________________和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。
參考答案
一、 選擇題（1-20每題1分，21-40題每題2分，共60分）
題號(hào)
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
選項(xiàng)
A
D
A
A
B
D
C
B
A
B
題號(hào)
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
選項(xiàng)
C
D
C
C
C
B
D
D
D
C
題號(hào)
21
22
23
2 4
25
26
27
28
29
30
選項(xiàng)
A
D
B
B
B
B
C
B
A
C
題號(hào)
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
選項(xiàng)
A
A
D
C
A
C
C
C
B
D
二、非選擇題（40分）
31．（8分）（1）受精卵 （2）放射性同位素（或熒光）標(biāo)記的胰島素基因 雜交帶 （3） 體細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 脫分化
（4）“胰島素羊”乳腺細(xì)胞分泌的胰島素具有生物活性，而轉(zhuǎn)基因“胰島素細(xì)菌”產(chǎn)生的胰島素?zé)o生物活性 乳腺細(xì)胞有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體，能加工相關(guān)的蛋白質(zhì)，而細(xì)菌沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體
32．（8分）（1） 纖維素 果膠 胰蛋白酶 （2） 聚乙二醇 細(xì)胞壁的形成 （3）植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞全能性 （4）克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙
33.（8分）（1）轉(zhuǎn)基因（DNA重組或基因工程） 限制酶 （2） Q基因 KpnⅠ、BamHⅠ（2分） （3） T-DNA 水稻細(xì)胞染色體的DNA上 （4）其他DNA序列也含有與引導(dǎo)RNA互補(bǔ)配對(duì)的序列，造成引導(dǎo)RNA錯(cuò)誤結(jié)合而脫靶
34．（8分）（1）動(dòng)物細(xì)胞核移植 顯微操作 物理或化學(xué)方法 已高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有發(fā)育的全能性 無性生殖 （2） 目的基因表達(dá)載體的構(gòu)建 （3）原代培養(yǎng) 接觸抑制
35.（8分）（1）防止自身環(huán)化 DNA連接 （2）轉(zhuǎn)化 （3）滅活的病毒
防止培養(yǎng)過程中的污染 不是 （4） 基因工程 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

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