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人教版（2019）高中生物選擇性必修3《生物技術(shù)與工程》全冊考點復(fù)習(xí)提綱發(fā)酵工程傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 1、什么是發(fā)酵？人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過微生物的代謝轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程 2、腐乳制作的原理是什么？蛋白質(zhì)eq \o(――→,\s\up7(蛋白酶))小分子的肽和氨基酸。脂肪eq \o(――→,\s\up7(脂肪酶))甘油和脂肪酸。 3、毛霉是什么樣的菌？生殖方式是什么？代謝類型是什么？毛霉是一種絲狀真菌，其繁殖方式為孢子生殖，代謝類型是異養(yǎng)需氧型 4、制作泡菜用的是什么菌？來源是哪兒？乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。菌種來源：植物體表面天然的乳酸菌 5、泡菜制作的原理是什么？C6H12O6eq \o(――→,\s\up7(酶))2C3H6O3(乳酸)＋能量 6、泡菜制作的流程是什么？配置鹽水→原料處理→裝壇→封壇發(fā)酵 7、乳酸菌和醋酸菌分別是什么樣的菌？異養(yǎng)兼性厭氧型；異養(yǎng)需氧型 8、制作果酒的過程中對氧氣的需求是？前期需氧，后期不需氧 9、制作果醋時，在氧氣和糖源充足的情況下，反應(yīng)原理是什么？C6H12O6＋2O2eq \o(――→,\s\up7(酶))2CH3COOH＋2CO2＋2H2O＋能量 10、制作果醋時，在糖源不足時，反應(yīng)式是什么？C2H5OH＋O2eq \o(――→,\s\up7(酶))CH3COOH＋H2O＋能量 11、在果酒發(fā)酵時，發(fā)酵瓶要留有1/3的空間，原因是什么？讓酵母菌大量繁殖；防止發(fā)酵液溢出 12、在果酒和果醋的制作過程中，怎么對發(fā)酵瓶消毒？用洗潔精清洗干凈；并用70%的酒精消毒，晾干備用 13、酒精發(fā)酵時，溫度要控制在多少度？時間是多長？18--30℃；10--12d 14、果醋發(fā)酵時，需要的環(huán)境溫度和時間是什么？30--35℃；7--8d 15、制作泡菜時配制的鹽水為什么要先煮沸，再冷卻使用？一是為了殺死鹽水中的雜菌，二是為了排出溶解的氧氣；冷卻是防止溫度過高殺死發(fā)酵所需要的乳酸菌 16、什么是發(fā)酵工程？發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品 17、發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)是什么？選育菌種、擴(kuò)大化培養(yǎng)、配置培養(yǎng)基、滅菌、接種、發(fā)酵、分離和提純產(chǎn)物、獲得產(chǎn)品 18、啤酒的工業(yè)化的生產(chǎn)流程是什么？發(fā)芽→焙烤→碾磨→糖化→蒸煮→發(fā)酵→消毒→終止 19、發(fā)酵工程的特點是什么？生產(chǎn)條件溫和、原料豐富且價格低廉，產(chǎn)物專一、廢棄物對環(huán)境污染小易處理 20、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是什么？發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵 21、發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，如何獲得發(fā)酵產(chǎn)品？在發(fā)酵結(jié)束以后，采取過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥 22、發(fā)酵產(chǎn)品是細(xì)胞代謝物，如何獲得發(fā)酵產(chǎn)品？根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛?、分離、純化的措施 23、單細(xì)胞蛋白是什么？以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得的大量的微生物菌體 24、利用發(fā)酵工程相關(guān)知識，如何大量生產(chǎn)新冠病毒疫苗？可將新冠病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入某種微生物體內(nèi)，再通過發(fā)酵工程得到的產(chǎn)品可以當(dāng)作新冠病毒疫苗。 25、醬油是如何生產(chǎn)的？利用產(chǎn)生蛋白酶的黑霉菌，將大豆中的蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸，經(jīng)淋洗、調(diào)制而成 26、啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)主發(fā)酵階段主要完成什么？酵母菌繁殖、糖的分解、代謝物的生成 27、啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)后發(fā)酵階段主要完成什么？形成成熟、澄清的啤酒 28、利用纖維素廢料能生產(chǎn)什么？纖維廢料發(fā)酵生產(chǎn)酒精、乙烯等能源物質(zhì) 29、青霉素發(fā)酵是高耗氧的過程，如何能夠保證發(fā)酵過程中給微生物持續(xù)高效供氧？用基因工程的方法，將血紅蛋白基因?qū)肭嗝顾厣a(chǎn)菌，提高菌體對氧的利用率 30、在青霉素發(fā)酵的過程中總有頭孢霉素產(chǎn)生，如何改造青霉素生產(chǎn)菌使其只產(chǎn)生青霉素，或者只生產(chǎn)頭孢霉素？在青霉素和頭孢霉素的生產(chǎn)過程中，他們有一個共同的前體，這個前體經(jīng)不同的酶催化，分別合成2個產(chǎn)物?？梢詫煞N酶的基因進(jìn)行改造或敲除，從而使青霉素生產(chǎn)菌只能生產(chǎn)一種產(chǎn)物 31、青貯飼料中添加乳酸菌有什么意義？提高飼料的品質(zhì)、使飼料保鮮、動物食用后還能提高免疫力微生物培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用 1、什么是培養(yǎng)基？人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì) 2、培養(yǎng)基的用途是什么？用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物 3、培養(yǎng)的主要營養(yǎng)物質(zhì)有什么？水、碳源、氮源、無機鹽 4、以下微生物培養(yǎng)時有什么特殊需求？ ①乳酸桿菌添加維生素 ②霉菌 pH調(diào)至酸性 ③細(xì)菌 pH調(diào)至中性或弱堿性 ④厭氧微生物無氧 5、無菌技術(shù)包括什么？消毒和滅菌 6、消毒的常用方法有哪些？煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線消毒、化學(xué)藥物消毒 7、滅菌常用的方法有哪些？濕熱滅菌法、干熱滅菌法、灼燒滅菌法 8、為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在哪里進(jìn)行？超凈工作臺上并在酒精燈火焰附近進(jìn)行 9、什么是微生物的純培養(yǎng)？獲得由單一個體繁殖而來的子細(xì)胞群體 10、什么是菌落？分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表現(xiàn)或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體 11、微生物的純培養(yǎng)包括哪些步驟？配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板→接種和分離→培養(yǎng) 12、用什么培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌？馬鈴薯培養(yǎng)基 13、根據(jù)此圖，回答平板劃線法的正確流程是？ d→b→f→a→e→c→h→g 14、劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？在第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？需要。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者；能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落接種結(jié)束后，為什么要將一個未接種的培養(yǎng)基和一個已接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)，未接種的培養(yǎng)基表面如果有菌落生長，說明了什么？對照，未接種的培養(yǎng)基經(jīng)過培養(yǎng)后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的；若有菌落形成，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，或培養(yǎng)基被污染了，需要重新制備。 15、怎么培養(yǎng)固氮微生物？缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物 16、什么是選擇培養(yǎng)基？允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長 17、什么是鑒別培養(yǎng)基？根據(jù)微生物的代謝特點在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，進(jìn)而產(chǎn)生特定的顏色或其他變化 18、怎么從微生物中篩選出真菌？在培養(yǎng)基中加入抗生素 19、怎么篩選出自養(yǎng)微生物？無有機碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物 20、在稀釋涂布平板法中，系列稀釋操作的目的是什么？通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散 21、涂布平板的操作步驟是什么？取菌液→涂布器消毒→涂布器滅菌→涂布平板 22、微生物數(shù)量的測定方法是？顯微鏡計數(shù)法；活菌計數(shù)法（稀釋涂布平板法） 23、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在多少的平板進(jìn)行計數(shù)？30---300 24、怎樣分離尿素分解菌？配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能在該培養(yǎng)基中生長的細(xì)菌為尿素分解菌 25、稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際的活菌數(shù)目低，原因是什么？因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落 26、在泡菜腌制過程中壇、蔬菜等均未進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，而在發(fā)酵過程中一般不會出現(xiàn)其他雜菌大量繁殖，其原因是？乳酸菌產(chǎn)生的酸性及厭氧環(huán)境不利于其他雜菌的生長 27、所以發(fā)酵過程中一般不用嚴(yán)格滅菌，泡菜壇內(nèi)表面會長出一層白膜，白膜是怎么產(chǎn)生的？大量酵母菌聚集在發(fā)酵液表面形成的第二章細(xì)胞工程第一節(jié) 植物細(xì)胞工程 1、植物細(xì)胞工程包括哪些技術(shù)？植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交 2、什么是細(xì)胞的全能性？細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能 3、細(xì)胞的全能性在什么情況下能表現(xiàn)出來？離體、營養(yǎng)物質(zhì)、激素、適宜的溫度和pH 4、什么是植物組織培養(yǎng)？將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù) 5、植物組織培養(yǎng)的基本過程是？接種外植體誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)生芽誘導(dǎo)生根移栽成活 6、什么是脫分化？在一定的激素和營養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成愈傷組織的過程 7、什么是愈傷組織？脫分化產(chǎn)生的不定形的薄壁組織團(tuán)塊 8、什么是再分化？愈傷組織重新分化成芽、根等器官的過程 9、怎么對外植體進(jìn)行消毒？酒精消毒30s→無菌水沖洗2-3次→次氯酸鈉溶液處理30min→無菌水沖洗2-3次 10、長出完整試管苗以后，需將其移植到什么樣的環(huán)境中，待其長壯后在移栽入土？將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中 11、在植物組織培養(yǎng)的過程中需要用到幾種培養(yǎng)基？3種培養(yǎng)基。誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基，誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基，誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基 12、誘導(dǎo)愈傷組織形成需不需要光照？誘導(dǎo)形成愈傷組織不需要光照 13、在培養(yǎng)基中，什么樣的植物激素比例促進(jìn)生根？什么樣的比例促進(jìn)生芽？什么樣的比例促進(jìn)愈傷組織形成？①適當(dāng)提高生長素與細(xì)胞分裂素的比例容易生根。 ②適當(dāng)提高細(xì)胞分裂素與生長素的比例容易生芽。③比例適中誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織 14、選用菊花的外植體時，一般選用形成層細(xì)胞或組織塊，其原因是什么？形成層細(xì)胞由于分裂旺盛，全能性高，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，其他部分如葉、花全能性低，不易培養(yǎng)成完整植株 15、為什么說從繁殖方式上看，植物組織培養(yǎng)的繁殖方式是無性繁殖？植物組織培養(yǎng)是在細(xì)胞有絲分裂和細(xì)胞分化的基礎(chǔ)上實現(xiàn)的，此過程并沒有生殖細(xì)胞的產(chǎn)生，所以是無性繁殖 16、在植物組織培養(yǎng)的過程中，為什么要求無菌操作？培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，這些微生物會和外植體爭奪培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)，并且產(chǎn)生大量對外植體有害的物質(zhì)，導(dǎo)致外植體死亡 17、原生質(zhì)體怎么獲得？去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，用到的酶是纖維素酶和果膠酶 18、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的物理方法有哪些？化學(xué)方法有哪些？人工誘導(dǎo)的物理法包括電融合法、離心法，化學(xué)法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法 19、原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是什么？融合的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁，這是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志 20、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)勢是什么？打破生殖隔離，實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種 21、植物體細(xì)胞雜交實現(xiàn)的基礎(chǔ)和植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)分別是什么？細(xì)胞膜的流動性；植物細(xì)胞的全能性 22、植物細(xì)胞工程的應(yīng)用有哪四個方面？快速繁殖、作物脫毒、作物新品種的培育、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn) 23、什么是初生代謝物？初生代謝是生物生長和生存所必需的代謝活動，因此在整個生命過程中它一直進(jìn)行著 24、什么是次生代謝物？次生代謝不是生物生長所必需的，一般在特定的組織和器官中，并在一定的環(huán)境和時間條件下才進(jìn)行 25、植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株是幾倍體？染色體組數(shù)＝兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。 ②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株，有幾個染色體組就稱為幾倍體 26、植物細(xì)胞培養(yǎng)是什么？在離體條件下對單個植物細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù) 第二節(jié) 動物細(xì)胞工程 1、動物細(xì)胞工程包括哪些技術(shù)？動物細(xì)胞工程常用的技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞工程、動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞核移植 2、什么是動物細(xì)胞培養(yǎng)？從動物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù) 3、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的營養(yǎng)條件是什么？①營養(yǎng)條件：糖類、氨基酸、無機鹽、維生素、促生長因子、微量元素、血清 4、動物細(xì)胞培養(yǎng)怎么創(chuàng)造無菌、無毒的條件？無菌、無毒：培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理、培養(yǎng)液定期更換，以便清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害 5、動物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度和pH分別是？溫度、pH和滲透壓：溫度36.5℃，pH7.2-7.4 6、動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體環(huán)境是什么？氣體環(huán)境：95%的空氣和5%的CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱 7、5%的CO2的作用是什么？維持培養(yǎng)液的pH 動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程是什么？如何制備細(xì)胞懸液？首先對新鮮取材的動物組織進(jìn)行處理，或用機械方法，或用胰蛋白酶和膠原蛋白酶處理一段時間將細(xì)胞分散成單個細(xì)胞，然后加入培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是什么？細(xì)胞分裂的原理體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞由哪兩大類？體外培養(yǎng)的細(xì)胞包括體細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞培養(yǎng) 什么是細(xì)胞貼壁？細(xì)胞貼壁是指體外培養(yǎng)的細(xì)胞貼附在瓶壁生長的現(xiàn)象什么是接觸抑制？接觸抑制是指當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞通常會停止分裂增殖的現(xiàn)象干細(xì)胞存在于哪兒？包括哪些類型？干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓、臍帶血等多種的組織和器官什么是胚胎干細(xì)胞？簡稱ES細(xì)胞，存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機體所有組織和器官甚至個體的潛能什么是成體干細(xì)胞？成體組織或器官內(nèi)的干細(xì)胞，包括骨髓中的造血干細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)干細(xì)胞和睪丸中的精原干細(xì)胞。具有組織特異性，只能分化成特定的組織或細(xì)胞，不具有發(fā)育成完整個體的潛能。獲取iPS細(xì)胞的方法？借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中或者用小分子化合物等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞胚胎干細(xì)胞為什么可以解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題？其應(yīng)用有什么限制因素？通過胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化，可以培育出人造組織器官，從而解決供體器官不足問題，另一方面，由于是自身細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)分化形成的，所以無免疫排斥反應(yīng)。胚胎干細(xì)胞必須從胚胎中獲取，這涉及倫理問題，因而限制了應(yīng)用為什么科學(xué)家認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞？iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)過程無需破壞胚胎，而且iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng) 什么是動物細(xì)胞融合技術(shù)？兩個或多個細(xì)胞融合形成一個細(xì)胞的技術(shù) 怎么樣誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合？PEG、電融合、滅活的病毒滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是？滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。 B淋巴細(xì)胞的特點是什么？能分泌抗體，但不具有分裂能力骨髓瘤細(xì)胞的特點是什么？能無限增殖雜交瘤細(xì)胞的特點是什么？既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體單克隆抗體的制備過程？單克隆抗體的制備需要兩次篩選，目的是什么？第一次篩選：特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞（“B—B”細(xì)胞、“瘤—瘤”細(xì)胞）都會死亡，只有雜交瘤細(xì)胞（“B—瘤”細(xì)胞）才能生長第二次篩選：用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群動物細(xì)胞完成融合的標(biāo)志是什么？當(dāng)兩個細(xì)胞核融合后形成具有單核的雜交細(xì)胞，則標(biāo)志著動物細(xì)胞融合的完成什么是動物細(xì)胞核移植？將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育為動物個體的技術(shù) 動物細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是什么？動物體細(xì)胞核具有全能性哺乳動物核移植分為哪兩種？哺乳動物核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植的過程是？什么是抗體---藥物偶聯(lián)物？將細(xì)胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷怎么激活重構(gòu)胚？用電刺激、Ca2+載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑什么是重構(gòu)胚？人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成完整個體的能力動物細(xì)胞核移植技術(shù)中的去核方法有哪些？顯微操作去核法、梯度離心、紫外線短時間照射生物反應(yīng)器怎么獲得？將藥用蛋白基因與在乳腺中特異性表達(dá)的基因的啟動子連接在一起 MII的卵母細(xì)胞的核是什么？紡錘體---染色體的復(fù)合物胚胎工程 1、胚胎工程是什么？對生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞進(jìn)行多種顯微操作和處理，然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求 2、胚胎工程技術(shù)包括什么？體外受精、胚胎移植、胚胎分割 3、胚胎工程的目的是什么？然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求 4、受精是什么？精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵)的過程 5、受精的準(zhǔn)備階段包括？包括精子獲能，卵子培養(yǎng)成熟到MII中期 6、受精階段包括哪四步？ 7、獲能液的作用是使精子獲能，包括哪兩種？肝素、Ca2＋載體 8、受精的標(biāo)志是什么？觀察到兩個極體或者雌、雄原核作為受精的標(biāo)志 9、防止多精入卵受精的生理反應(yīng)有哪些？有什么意義？一是透明帶發(fā)生生理反應(yīng)，二是卵細(xì)胞膜發(fā)生生理反應(yīng)。防止多精入卵，保證受精卵中遺傳物質(zhì)與親代體細(xì)胞一致，從而保證遺傳的穩(wěn)定性 10、胚胎發(fā)育包括哪些階段？ 11、囊胚階段包括哪些結(jié)構(gòu)？滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 12、原腸胚包括哪些胚層？外胚層、內(nèi)胚層、中胚層 13、什么是孵化？囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，會導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來的過程 14、孵化的意義是什么？如果不能正常孵化，胚胎就無法繼續(xù)發(fā)育 15、將體外培養(yǎng)的胚胎移植到子宮時，應(yīng)選擇至少發(fā) 到什么階段的胚胎：小鼠？綿羊？豬？馬？牛？小鼠：桑葚胚；綿羊：16細(xì)胞；豬：4～6細(xì)胞；馬：囊胚；牛：8～16細(xì)胞。 16、胚胎早期發(fā)育過程中，具有全能性的時期有哪些？桑葚胚期及之前的時期 17、卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到什么時期才具備受精能力？MII 18、胚胎移植的概念？通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù) 19、胚胎移植中的供體是？提供胚胎的遺傳性狀優(yōu)良的、生產(chǎn)能力強的個體 20、胚胎移植中的受體是？接受胚胎的具有健康體質(zhì)和正常繁殖能力的個體 21、胚胎移植的操作過程是？ 22、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)是？ 23、胚胎分割選擇什么樣的材料？發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚 24、胚胎分割的操作要求是？分割囊胚階段的胚胎時，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割 25、胚胎移植時怎樣才能做到超數(shù)排卵？對供體母畜用促性腺激素處理 26、胚胎移植時怎樣才能使胚胎在移植前后所處的生理環(huán)境保持一致？對供體和受體母畜進(jìn)行同期發(fā)情處理 27、胚胎移植的優(yōu)勢是什么？可以發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖能力 28、胚胎分割是指什么？采用機械的方法將早期胚胎分割成2等份、4等份、或8等份，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或者多胎的技術(shù) 第三章基因工程第一節(jié) 重組DNA技術(shù)的基本工具 1、基因工程的概念？按照人們的意愿，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)手段，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的生物類型和生物產(chǎn)品。 2、重組DNA技術(shù)的基本工具有哪些？限制酶、DNA連接酶、載體 3、限制性內(nèi)切核酸酶的來源是？主要來自于原核生物 4、限制酶的作用是什么？識別雙鏈DNA分子中特定的核苷酸序列，使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。 5、DNA連接酶的作用是什么？將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵 6、連接酶有哪兩種？分別連接什么末端？E·coli DNA連接酶，連接黏性末端；T4DNA連接酶，連接黏性末端和平末端 7、常見的載體有哪些？質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒 8、載體的特點是什么？有一個至多個限制酶切割位點；攜帶外源DNA片段的質(zhì)粒進(jìn)入到受體細(xì)胞后，能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復(fù)制；常有特殊的標(biāo)記基因，便于重組DNA分子的篩選 9、限制酶來源于原核生物，為什么不能切割自己的DNA分子？原核生物DNA分子中不存在該酶的識別序列或識別序列已經(jīng)被修飾 10、選擇限制酶對DNA進(jìn)行切割時，怎么確保出現(xiàn)相同黏性末端？用相同的限制酶去切割質(zhì)?；蚰康幕?11、為避免目的基因和質(zhì)粒自身環(huán)化和隨意連接，應(yīng)該怎么樣選擇限制酶？也可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒 12、與DNA有關(guān)的幾種酶的比較？ ①限制酶的作用是什么？將DNA分子切成兩個或多個DNA片段 ②DNA連接酶的作用是什么？將兩個DNA片段連接成一個DNA分子 ③DNA聚合酶的作用是什么？以DNA單鏈為模版，依次將單個脫氧核苷酸連接到單鏈的末端 ④解旋酶的作用是什么？將雙鏈DNA分子的局部解旋為單鏈，形成兩條長鏈 ⑤DNA水解酶的作用是什么？將DNA片段水解為單個的脫氧核苷酸基因拼接的理論基礎(chǔ)是什么？①DNA的基本單位都是脫氧核苷酸；②DNA分子都遵循堿基互補配對原則；③雙鏈DNA分子的結(jié)構(gòu)都是雙螺旋結(jié)構(gòu) 第二節(jié) 基因工程的基本操作程序 1、什么是目的基因？在基因工程的設(shè)計和操作中，用于改變受體細(xì)胞性狀或獲得預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物等的基因 2、PCR是什么？（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))：是一項根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù) 3、PCR反應(yīng)的條件是什么？一定的緩沖溶液、DNA模板、2種引物、4種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶，以及能自動調(diào)控溫度的儀器 4、PCR的過程是？高溫變性→低溫復(fù)性→適溫延伸 5、PCR過程中加入的既能充當(dāng)原料，又能提供能量的物質(zhì)是什么？dNTP（即dATP、dGTP、dTTP、dCTP），既可作為合成DNA子鏈的原料，又可為DNA的合成提供能量。 6、PCR中的引物是什么？引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸。 7、PCR擴(kuò)增過程中的循環(huán)圖示與規(guī)律 8、PCR進(jìn)行n次，共消耗的引物的數(shù)量是多少？2n＋1－2 9、DNA粗提取的原理是什么？DNA不溶于酒精，某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA溶于2mol/L的NaCl溶液 10、DNA怎么鑒定？DNA與二苯胺試劑在沸水浴的條件下呈藍(lán)色 11、電泳的原理是什么？DNA分子具有可解離的基團(tuán)，這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個過程就是電泳。 12、PCR的產(chǎn)物一般怎樣鑒定？PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定 13、在凝膠中DNA分子的遷移速率與哪些因素有關(guān)？在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān)。 14、DNA電泳如何鑒定？凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300_nm的紫外燈下被檢測出來。 15、基因工程的核心是什么？基因表達(dá)載體的構(gòu)建 16、基因表達(dá)載體的作用及其組成？ 17、啟動子的作用是什么？位于基因的上游，RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA 18、終止子的作用是什么？位于基因的下游，使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停下來 19、起始密碼子的作用是什么?翻譯的起始信號(編碼氨基酸)，位于mRNA上 20、終止密碼子的作用是什么？翻譯的結(jié)束信號(不編碼氨基酸)，位于mRNA上 21、如何將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞？將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA中→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上→表達(dá) 22、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中的兩次拼接和兩次導(dǎo)入分別是什么？第一次拼接是將目的基因拼接到Ti質(zhì)粒的T－DNA上，第二次拼接(非人工操作)是指插入目的基因的T－DNA拼接到受體細(xì)胞的染色體DNA上；第一次導(dǎo)入是將含目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，第二次導(dǎo)入(非人工操作)是指含目的基因的T－DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞。 23、轉(zhuǎn)化是什么？目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。此處“轉(zhuǎn)化”與肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實驗中的“轉(zhuǎn)化”含義相同，實質(zhì)都是基因重組。 24、如何將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞？將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物 25、如何將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞？Ca2＋處理細(xì)胞→細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)→基因表達(dá)載體導(dǎo)入 26、如何在分子水平進(jìn)行目的基因的檢測與鑒定？PCR等技術(shù)、抗原抗體雜交 27、如何在個體生物學(xué)水平進(jìn)行目的基因的檢測與鑒定？抗蟲抗病接種實驗 28、PCR技術(shù)為什么要用耐高溫的DNA聚合酶？PCR的步驟里第一步需要高溫變性，普通的DNA聚合酶會變性失活 29、PCR技術(shù)為什么需要引物？DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從3′端延伸DNA鏈。 30、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時需要兩種引物，原因是什么？目的基因的兩條反向平行的鏈都作為模板，其堿基序列不同。 31、在PCR擴(kuò)增目的基因之前，需先設(shè)計引物，對設(shè)計的兩種引物之間的堿基序列的要求是什么？兩種引物之間不能互補配對。 32、在PCR的反應(yīng)體系里為什么要加入Mg2+？真核生物和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活 33、質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是什么？便于重組質(zhì)粒的篩選和鑒定第三節(jié) 基因工程的應(yīng)用 1、如何獲得抗蟲植物？從某些生物體內(nèi)分離出抗蟲功能的基因 2、如何利用基因工程的方法提高動物的生長速率？給動物導(dǎo)入外源生長激素基因 3、如何利用基因工程，改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)？將腸乳糖酶基因?qū)肽膛５幕蚪M，使獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中，乳糖的含量大大降低，而其他成分不受影響。 4、如何制作乳腺生物反應(yīng)器？將藥用蛋白基因與乳腺中特異性表達(dá)的基因的啟動子等調(diào)控原件重組在一起，通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動物的受精卵中 5、如何培育出不會引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官？利用基因工程技術(shù)對豬的器官進(jìn)行改造，在器官供體的基因組中導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子，以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出不會引起免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。 6、種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉若干年后，害蟲會不會對轉(zhuǎn)基因抗蟲棉產(chǎn)生抗性？為什么？會。害蟲會因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變產(chǎn)生對轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的抗性。 7、為提高動物的生長速度，需將外源生長激素基因?qū)雱游矬w內(nèi)，應(yīng)該選擇的受體細(xì)胞是什么？并說明理由。受精卵。受精卵體積較大，操作較容易，營養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，也能保障發(fā)育成的個體所有細(xì)胞都含有外源生長激素基因，全能性較高 8、什么是基因工程菌？用基因工程的方法，使外源基因得到高效表達(dá)的菌類一般稱為基因工程菌第四節(jié) 蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用 1、蛋白質(zhì)工程的過程是什么？從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì) 2、蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是什么？定向改造或生產(chǎn)人類所需要的蛋白質(zhì) 3、蛋白質(zhì)工程的結(jié)果是什么？可生產(chǎn)自然界中不存在的蛋白質(zhì) 4、基因工程的步驟包括哪幾步？目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定 5、基因工程的實質(zhì)是什么？定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品 6、基因工程的結(jié)果是什么？只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì) 7、對天然蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，你認(rèn)為應(yīng)該是直接對蛋白質(zhì)分子進(jìn)行操作，還是通過對基因的操作來實現(xiàn)？原因是什么？應(yīng)該通過對基因的操作來實現(xiàn)對天然蛋白質(zhì)的改造。主要原因：①蛋白質(zhì)具有十分復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)，基因的結(jié)構(gòu)相對簡單，容易改造；②改造后的基因可以遺傳給下一代，被改造的蛋白質(zhì)無法遺傳。