考點(diǎn)一　微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)
1.培養(yǎng)基(1)概念:人們按照微生物對　　　　　　的不同需求,配制出的供其　　　　　　的營養(yǎng)基質(zhì)。?(2)培養(yǎng)基的種類、特點(diǎn)及用途分析:①按物理狀態(tài)分類
微生物分離、鑒定,活菌計(jì)數(shù)
從眾多微生物中分離所需的微生物
(3)培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的含義、作用、主要來源分析:
2.無菌技術(shù)(1)目的:獲得純凈培養(yǎng)物。(2)關(guān)鍵:防止雜菌污染。(3)常用方法:滅菌和消毒。 殺滅所有微生物
(4)無菌技術(shù)的主要方法及適用對象:①消毒方法及適用對象
②滅菌方法及適用對象
3.微生物的純培養(yǎng)(1)概念:由　　　　　　繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物,獲得　　　　　　的過程就是純培養(yǎng)。?
(2)過程:　　　　　　　　、滅菌、接種、　　　　和培養(yǎng)等步驟。?(3)常用方法:　　　　　　　法和　　　　　　　　法。?
(4)實(shí)例——酵母菌的純培養(yǎng):
(5)倒平板的操作步驟:
(6)平板劃線法:①平板劃線操作成功關(guān)鍵點(diǎn)
②平板劃線操作中幾次灼燒接種環(huán)的目的
教材深挖1.[選擇性必修3第10頁“旁欄思考”]培養(yǎng)基中加入氮源的原因是?? 　。提示 培養(yǎng)基中的氮元素是微生物合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)所必需的2.[選擇性必修3第10頁“相關(guān)信息”]生物消毒法是指利用生物或其　　　 　除去環(huán)境中的部分微生物的方法。?3.[選擇性必修3第10頁“旁欄思考”]無菌技術(shù)除用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么作用?提示 無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。
鏈高考·前掛后連(1)用免洗酒精凝膠擦手能達(dá)到滅菌目的。[2021·天津卷](　　)(2)在火焰上灼燒接種環(huán)能達(dá)到滅菌目的。[2021·天津卷](　　)(3)平板劃線法接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染。[2021·山東卷](　　)(4)配制培養(yǎng)基時應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH。[2020·浙江卷](　　)(5)篩選分解淀粉的細(xì)菌時,培養(yǎng)基除淀粉外還含有氮源等其他營養(yǎng)物質(zhì)。[2019·北京卷](　　)(6)在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具不可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。[2018·全國Ⅱ卷](　　)
幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源
練思維·考教銜接[根據(jù)2022全國乙卷、2018江蘇卷、2018全國Ⅲ卷、2018全國Ⅱ卷、2018全國Ⅰ卷、2019全國Ⅲ卷情境設(shè)計(jì)]酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng),這樣既可以減少污染又可以降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,請回答下列問題。
(1)通常在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時,需要對所使用的玻璃器皿進(jìn)行滅菌,滅菌的方法有　　　　　　　 　　　　　(答出兩點(diǎn)即可)。?(2)取步驟②中不同濃度梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約　　　　(填“25 ℃”“50 ℃”或“80 ℃”)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后一般需要將平板　　　　培養(yǎng)。?(3)分離培養(yǎng)的酵母菌通常使用　　　 　　(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基能為微生物生長提供多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有　　　　　　　　(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有　　　　　　　　(答出兩點(diǎn)即可)。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是　?　 。?
濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌法)、干熱滅菌法
由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體
(4)接種時,密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能　　　　　　　　　　,在照射前,適量噴灑　　　　,可強(qiáng)化消毒效果。使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過　　　　處理,這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。?(5)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有　　　　。?a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌b.劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時,應(yīng)挑取多個菌落,分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株
(6)通常,制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上　　　　(填“能夠”或“不能”)生長,原因是　?　 。?
不同細(xì)菌生長繁殖所需的最適pH不同
硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源
考向一 結(jié)合培養(yǎng)基成分及配制方法和無菌技術(shù),考查科學(xué)探究1.(2023·山東濟(jì)寧模擬)下表表示某培養(yǎng)基的配方,下列敘述正確的是(　　)
A.從用途看,該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基B.培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培養(yǎng)基沒有提供維生素等營養(yǎng)D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)到合適的pH后就可以接種使用
解析 該培養(yǎng)基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨,B項(xiàng)正確。
2.防止雜菌污染,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是(　　)A.實(shí)驗(yàn)室里可用紫外線或化學(xué)藥物對物體表面或空氣進(jìn)行消毒B.在實(shí)驗(yàn)室里不可以吃東西,離開時一定要洗手以防被微生物感染C.接種環(huán)、接種針等用具應(yīng)在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌D.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要進(jìn)行滅菌處理,以免污染環(huán)境
考向二 結(jié)合微生物的純培養(yǎng),考查科學(xué)探究3.(2023·廣東廣州二模)有些酵母菌可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源,既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母菌,并進(jìn)行大量培養(yǎng),大致過程:①稱量土樣→②依次等比稀釋→③涂布平板→④挑取平板單菌落轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)液中培養(yǎng)→⑤進(jìn)行甲醇分解能力的檢測→⑥選取優(yōu)良菌株擴(kuò)大培養(yǎng)。下列敘述錯誤的是(　　)A.培養(yǎng)基滅菌后需冷卻至25 ℃左右,在酒精燈火焰附近倒平板B.步驟③應(yīng)將稀釋后的菌液涂布在以甲醇為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上C.步驟⑤分別測定培養(yǎng)液中甲醇的剩余量進(jìn)一步篩選菌株D.步驟⑥為使酵母菌數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和有氧環(huán)境
解析 培養(yǎng)基滅菌后冷卻至25 ℃左右,此時培養(yǎng)基已經(jīng)凝固,故培養(yǎng)基滅菌后需冷卻至50 ℃左右,在酒精燈火焰附近倒平板,A項(xiàng)錯誤;為挑選能分解甲醇的菌種,應(yīng)將稀釋后的菌液涂布在以甲醇為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上,B項(xiàng)正確;培養(yǎng)液中甲醇的剩余量越低,說明目標(biāo)菌株分解甲醇的能力越強(qiáng),可進(jìn)一步篩選菌株,C項(xiàng)正確;酵母菌為異養(yǎng)兼性厭氧型生物,在充足的營養(yǎng)和有氧條件下能大量繁殖,D項(xiàng)正確。
考點(diǎn)二　微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
2.微生物的選擇培養(yǎng)(稀釋涂布平板法)
3.微生物的數(shù)量測定(1)稀釋涂布平板法
(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
4.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)
5.分解纖維素的微生物的分離(1)分離方法與原理
(2)纖維素分解菌的培養(yǎng)基成分及鑒定原理
教材深挖1.[選擇性必修3第18頁“相關(guān)信息”挖掘]血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和細(xì)菌計(jì)數(shù)板的主要區(qū)別是什么?提示 前者常用于相對較大的酵母菌細(xì)胞、霉菌孢子等的計(jì)數(shù);后者可對細(xì)菌等較小的細(xì)胞進(jìn)行觀察和計(jì)數(shù)。2.[選擇性必修3第18頁正文延伸思考]為什么測定活菌的數(shù)量不能用平板劃線法?提示 由于在所劃的線中,一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個細(xì)菌形成的單菌落,而其他一些菌落往往由兩個或多個細(xì)菌繁殖而成,而在計(jì)數(shù)時一個菌落對應(yīng)著一個細(xì)菌,這樣在劃線所得的平板中,菌落數(shù)目遠(yuǎn)低于活菌的實(shí)際數(shù)值,所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。
3.[選擇性必修3第18~19頁“探究·實(shí)踐”]利用稀釋涂布平板法純化分解尿素的細(xì)菌時,經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)多種菌落,可能的原因有哪些?提示 出現(xiàn)雜菌污染的可能原因:培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染;接種過程中,無菌操作不符合要求;系列稀釋時,無菌操作不符合要求等。
鏈高考·前掛后連(1)利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物,而保留利用尿素的微生物。[2020·浙江卷](　　)(2)在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌,若實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多,不能達(dá)到菌種純化的目的。[2020·江蘇卷](　　)(3)在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌,菌落周圍的纖維素被降解后,可被剛果紅染成紅色。[2020·江蘇卷](　　)(4)篩選分解淀粉的細(xì)菌時,菌液應(yīng)稀釋后涂布。[2019·北京卷](　　)
(5)分離產(chǎn)纖維素酶菌的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)。[2019·江蘇卷](　　)(6)獲得產(chǎn)纖維素酶菌可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌。[2019·江蘇卷](　　)(7)分離產(chǎn)纖維素酶菌,在分離平板上長出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力。[2019·江蘇卷](　　)
1.兩種純化方法的比較
2.微生物的選擇培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評價
3.微生物的篩選方法
4.微生物的鑒別方法
練思維·考教銜接1.[根據(jù)2017全國Ⅰ卷、2014四川卷、2014全國Ⅰ卷、2019全國Ⅱ卷情境設(shè)計(jì)]回答下列與微生物的選擇培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生　　　　。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　,但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　(答出兩點(diǎn)即可)。?
分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2來合成有機(jī)物
為細(xì)胞生物的生命活動提供能量;為其他有機(jī)物的合成提供原料
(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇　　　　(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用 用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　(答出兩點(diǎn)即可)。?
為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng),作為緩沖物質(zhì)保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定
(3)有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯磺隆能被土壤中的某些微生物降解。該實(shí)驗(yàn)所用的選擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是??　 。?
只有能利用苯磺隆的微生物能在所用的培養(yǎng)基上正常生長和繁殖
(4)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表):
注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲　　　　(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是　　　　　　　　　　　　　　;培養(yǎng)基乙　　　　(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是　? 　。?培養(yǎng)基乙中沒有纖維素,不會形成CR-纖維素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌
液體培養(yǎng)基不能分離單菌落
(5)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?請簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即?? 　。?將甲、乙菌分別接種在無氮源的培養(yǎng)基上,若細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?br/>2.[根據(jù)2019全國Ⅰ卷、2015全國Ⅰ卷、2020全國Ⅰ卷、2018全國Ⅰ卷、2018江蘇卷情境設(shè)計(jì)]已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目的細(xì)菌)。Ⅰ號培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。Ⅱ號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15 g/L)。Ⅲ號培養(yǎng)基:氯化鈉(5 g/L),硝酸銨(3 g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45 g/L)。
回答下列問題。(1)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細(xì)菌比例會　　　　,原因是　?? 　。不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖?(2)在篩選過程中,發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的X超過某一濃度時,某菌株對X的降解量反而下降,其原因可能是　　　　　　　　　　　　　 　　　(答出1點(diǎn)即可)。?(3)若要測定污泥中能降解X的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),請寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟:　 。取污泥加入無菌水,稀釋涂布到選擇培養(yǎng)基上,培養(yǎng)后計(jì)數(shù)
X的濃度超過某一值時會抑制菌株的生長
(4)若要測定培養(yǎng)液中目的菌的菌體數(shù),可在顯微鏡下用　　 　　直接計(jì)數(shù);若要測定其活菌數(shù)量,可選用　　　 　法進(jìn)行計(jì)數(shù)。?(5)實(shí)驗(yàn)中初步估測某搖瓶中目的菌細(xì)胞數(shù)為2×107個/mL,若要在每個平板上涂布100 μL稀釋后的菌液,且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個,則至少應(yīng)將該搖瓶中的菌液稀釋　　　　倍。?
(6)甲、乙兩名同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩名同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是?? 　。?乙同學(xué)的結(jié)果中,其中1個平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另外2個相差較大,結(jié)果的重復(fù)性差
考向一 結(jié)合選擇培養(yǎng)基及微生物的篩選,考查科學(xué)思維1.稀釋涂布平板法是分離菌種常用的方法,下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖?　　)A.固體培養(yǎng)基滅菌后,應(yīng)冷卻至50 ℃左右時倒平板B.倒好的平板需立即使用,以免表面干燥,影響菌種的生長C.稀釋涂布平板分離到的單菌落需進(jìn)一步劃線純化D.稀釋涂布平板法既可用于微生物的分離,也可用于微生物的計(jì)數(shù)
解析 培養(yǎng)基滅菌后需要冷卻至50 ℃左右時才能用來倒平板,避免溫度過高,A項(xiàng)正確;倒好的平板需要放置一段時間,用以觀察培養(yǎng)基是否被雜菌污染,B項(xiàng)錯誤;稀釋涂布平板法分離到的單菌落需要用平板劃線法進(jìn)行純化培養(yǎng),C項(xiàng)正確;稀釋涂布平板法可以計(jì)數(shù),也可觀察菌落特征進(jìn)行菌種分離, D項(xiàng)正確。
2.(2024·廣東深圳聯(lián)考)熱纖梭菌是一種能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細(xì)菌,可分泌一種多酶復(fù)合體將纖維素水解為可溶性糖,在農(nóng)林廢棄物的轉(zhuǎn)化利用中具有應(yīng)用價值。下圖是篩選該菌的過程,下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)A.從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理B.甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C.用平板乙統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)可準(zhǔn)確反映該菌的真實(shí)數(shù)量D.丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力
解析 根據(jù)圖乙的菌落分布均勻可知,平板乙接種菌株采用了稀釋涂布平板法,由于當(dāng)兩個或多個菌體繁殖后連在一起時,平板上觀察到的只有一個菌落,因此用該方法統(tǒng)計(jì)的菌體數(shù)量會比活菌的實(shí)際數(shù)量少,C項(xiàng)錯誤。
考向二 圍繞微生物的分離和計(jì)數(shù),考查科學(xué)探究3.釀酒酵母菌種的性能是決定果酒品質(zhì)的重要因素。如圖表示從土壤中篩選釀酒酵母的過程。
下列敘述正確的是(　　)A.圖示接種方法為稀釋涂布平板法,據(jù)結(jié)果推測,1 g土壤中酵母菌數(shù)最多為1.6×106B.分離、純化酵母菌時,還可采用平板劃線法且該方法也需要進(jìn)行③步驟操作C.獲得釀酒酵母純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染,故應(yīng)對土壤、培養(yǎng)基及用具進(jìn)行滅菌D.進(jìn)行步驟⑤時,應(yīng)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的酵母菌,并檢測酵母菌的數(shù)量和酒精含量
解析 圖示接種方法為稀釋涂布平板法,據(jù)結(jié)果推測,1 g土壤中酵母菌數(shù)為1.6×106,該方法估算值低于真實(shí)數(shù)值,故1 g土壤中酵母菌數(shù)最少為1.6×106,A項(xiàng)錯誤;分離、純化酵母菌時,還可采用平板劃線法且該方法不需要進(jìn)行③步驟操作,B項(xiàng)錯誤;對土壤滅菌可將其中的釀酒酵母殺死,將不能獲得釀酒酵母的純培養(yǎng)物,C項(xiàng)錯誤;進(jìn)行步驟⑤時,應(yīng)用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)④中的酵母菌,并檢測酵母菌的數(shù)量和酒精含量,D項(xiàng)正確。
角度1 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)1.(2022·湖北卷)滅菌、消毒、無菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的操作。下列敘述正確的是(　　)A.動、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B.微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性,不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌
解析 動、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行,A項(xiàng)錯誤;動物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染,保證無菌環(huán)境,而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素,B項(xiàng)錯誤;一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,C項(xiàng)錯誤;可用濕熱滅菌法對實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌,以防止雜菌污染,D項(xiàng)正確。
2.(2023·山東卷)平板接種常用在微生物培養(yǎng)中。下列說法正確的是(　　)A.不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)B.平板涂布時涂布器使用前必須進(jìn)行消毒C.接種后未長出菌落的培養(yǎng)基可以直接丟棄D.利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物
解析 不含氮源的平板可用于固氮微生物的培養(yǎng),A項(xiàng)錯誤;平板涂布時涂布器使用前通常用酒精消毒后通過火焰灼燒滅菌,B項(xiàng)錯誤;接種后未長出菌落的培養(yǎng)基需要經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后丟棄,以防污染環(huán)境,C項(xiàng)錯誤;只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,因此利用以尿素為唯一氮源的平板能分離出合成脲酶的微生物,D項(xiàng)正確。
角度2 微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)3.(2023·廣東卷)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷,下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是(　　)A.A點(diǎn)時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.B點(diǎn)時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.B點(diǎn)時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.C點(diǎn)時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基
解析 本實(shí)驗(yàn)的目的是篩選能高效降解角蛋白的嗜熱菌,因此既要耐高溫,又要能夠高效降解角蛋白,所以在C點(diǎn)取樣,并且以角蛋白氮源培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)。
4.(2021·山東卷)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色,乙菌菌落周圍不變色,下列說法錯誤的是(　　)A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力
解析 根據(jù)題干信息“甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色”,說明甲菌可以分泌脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色,因此甲菌屬于解脂菌,A項(xiàng)正確;乙菌菌落周圍沒有出現(xiàn)深藍(lán)色,說明乙菌菌落不能產(chǎn)生脂肪酶,不能利用脂肪為其供能,但乙菌菌落也可以在培養(yǎng)基上生存,說明該培養(yǎng)基不是以脂肪為唯一碳源,B項(xiàng)錯誤;可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對比,更加直觀,C項(xiàng)正確;可以利用該平板來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力,觀察指標(biāo)是菌落周圍深藍(lán)色圈的大小,D項(xiàng)正確。
1.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是?? 　。?2.(選擇性必修3第10頁正文延伸)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是　　　　　　　　,無菌技術(shù)除了用來　? 　。?防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還能有效避免操作者自身被微生物感染
在達(dá)到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少

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