高中生物人教版 (2019)選擇性必修3二 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體優(yōu)秀作業(yè)課件ppt

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闡明動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的異同（科學(xué)思維）
結(jié)合單克隆抗體制備的實(shí)驗(yàn)方案，理解單克隆抗體的含義、特點(diǎn)、制備過(guò)程和應(yīng)用（科學(xué)探究）
高Ca2+ —高pH融合法等
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)勢(shì)：跨越不同種植物之間生殖隔離的屏障，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，培育出新的作物類型?！　　　?br/>實(shí)驗(yàn)：人——鼠細(xì)胞熒光標(biāo)記融合實(shí)驗(yàn)
有沒(méi)有技術(shù)讓不同種動(dòng)物的體細(xì)胞雜交，培育出集不同細(xì)胞優(yōu)勢(shì)于一身的動(dòng)物細(xì)胞呢？　
動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)是使 或 結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。融合后形成的 具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的 。
動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)，一般將多個(gè)細(xì)胞混合進(jìn)行處理，因?yàn)榫湍壳俺Ｓ玫募?xì)胞融合方法來(lái)看，不管是用物理、化學(xué)方法，還是用生物方法，其融合率都不可能是100%。若僅有少數(shù)細(xì)胞進(jìn)行融合，則不一定能得到融合細(xì)胞，更重要的是，即使兩個(gè)細(xì)胞已發(fā)生融合，也并不一定是研究者期望得到的細(xì)胞類型。動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用就是制備單克隆抗體。
PEG融合法（聚乙二醇）
①與植物原生質(zhì)體融合相比，動(dòng)物特有的誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法是用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑。②在這里需要理解，滅活是指用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但并不破壞它們的抗原結(jié)構(gòu)。③滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理：是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)、細(xì)胞發(fā)生融合。這一過(guò)程既能反映出糖蛋白在細(xì)胞識(shí)別中的重要作用，又能反映出細(xì)胞膜具有流動(dòng)性這一結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。
動(dòng)物細(xì)胞融合的結(jié)果是形成單核雜交細(xì)胞，此雜交細(xì)胞具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息。
（1）突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能（2）已經(jīng)成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和培育生物新品種等的重要手段（3）為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑
動(dòng)物細(xì)胞融合與受精作用的區(qū)別
（1）受精作用：是在同種生物之間進(jìn)行的，精子與卵細(xì)胞的融合不需要任何誘導(dǎo)劑，受精卵內(nèi)具備同種生物的兩個(gè)親本的遺傳物質(zhì)
（2）動(dòng)物細(xì)胞融合可在不同物種間進(jìn)行，由于物種間存在生殖隔離，所以自然條件下不能融合成雜交細(xì)胞，必須有誘導(dǎo)劑才能融合。形成的雜交細(xì)胞具備兩個(gè)親本細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，從而體現(xiàn)兩個(gè)親本的遺傳特性
二、單克隆抗體及其應(yīng)用
獲得抗體的傳統(tǒng)方法和缺點(diǎn)
（1）方法：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物血清中分離所需抗體。
（2）缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低、特異性差
由單一的B淋巴細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體
①每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體，但不能在體外無(wú)限增殖
②小鼠骨髓瘤細(xì)胞能在體外無(wú)限增殖，但不能產(chǎn)生抗體
③利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞可以保持親代雙方的特性，既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體
（3）來(lái)源：?jiǎn)慰寺】贵w是由B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交形成的單一雜交瘤細(xì)胞增值產(chǎn)生的高度專一的抗體
①B淋巴細(xì)胞：能產(chǎn)生特異性強(qiáng)的抗體
②骨髓瘤細(xì)胞：在體外能無(wú)限增殖
米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體過(guò)程的示意圖
在小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)與在體外培養(yǎng)相比，優(yōu)點(diǎn)是不需要特定的培養(yǎng)基，不需要嚴(yán)格控制環(huán)境條件
相應(yīng)的B淋巴（漿細(xì)胞）細(xì)胞
能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
（1）篩選原因：誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞
（2）篩選方法：用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種融合后形成的細(xì)胞（“B-B細(xì)胞”、“瘤-瘤細(xì)胞”）都會(huì)死亡，只有雜交瘤細(xì)胞（“B-瘤細(xì)胞”）才能生長(zhǎng)
（3）篩選目的：得到雜交瘤細(xì)胞
（1）篩選原因：由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)第一次篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞中存在產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞
（2）篩選方法：用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔內(nèi)只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
（3）篩選目的：得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
（1）作為診斷試劑：?jiǎn)慰寺】贵w能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備，因此被廣泛用作診斷試劑，在腫瘤、心血管畸形等多種疾病的診斷和病原體鑒定中發(fā)揮重要作用
（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物
單克隆抗體+藥物=生物導(dǎo)彈
用抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕診斷試劑盒”，在妊娠第8天就可以作出診斷，這比原來(lái)的診斷方法提前了10 d 左右，可以避免孕婦在不知道妊娠的情況下因服用藥物而對(duì)胎兒造成不利影響。該方法檢測(cè)的準(zhǔn)確率在90％以上。
使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞。但細(xì)胞毒素沒(méi)有特異性，在殺傷
腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害，這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ antibdy - drug cnjugates , ADC ）通過(guò)將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。 ADC 通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如下圖所示。
討論1. ADC 的抗體和藥物各具有什么作用？2．除了細(xì)胞毒素，還有哪些物質(zhì)理論上可以作為 ADC 偶聯(lián)的藥物？3．單克隆抗體診斷試劑盒和 ADC 在臨床應(yīng)用上各具有什么優(yōu)勢(shì)？4．單克隆抗體在臨床上還有哪些應(yīng)用？
ADC的抗體在生物體內(nèi)與特定目標(biāo)細(xì)胞或組織相結(jié)合，具有導(dǎo)向作用，藥物起治療作用
單克隆抗體診斷試劑盒具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備的優(yōu)勢(shì)，ADC在臨床上用于治療癌癥或其他疾病，具有療效高，毒副作用小的特點(diǎn)
應(yīng)用于定位腫瘤，心血管畸形等疾病
1.雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎。（ ）
2.雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一抗體（ ）