高考一輪生物復(fù)習(xí)策略1、落實考點。一輪復(fù)習(xí)時要在熟讀課本、系統(tǒng)掌握基礎(chǔ)知識、基本概念和基本原理后,要找出重點和疑點;通過結(jié)合復(fù)習(xí)資料,篩選出難點和考點,有針對地重點復(fù)習(xí)。這就需要在掌握重點知識的同時,要善于進(jìn)行知識遷移和運(yùn)用,提高分析歸納的能力。2、注重理論聯(lián)系實際,高三生物的考試并不僅僅是考概念,學(xué)會知識的遷移非常重要,并要靈活運(yùn)用課本上的知識。不過特別強(qiáng)調(diào)了從圖表、圖形提取信息的能力。歷年高考試題,圖表題都占有比較大的比例。那些圖表題雖不是教材中的原圖,但它源于教材而又高于教材,是對教材內(nèi)容和圖表的變換、深化、拓展,使之成了考查學(xué)生讀圖能力、綜合分析能力、圖文轉(zhuǎn)換能力的有效途徑。3、一輪復(fù)習(xí)基礎(chǔ)知識的同時,還要重點“攻堅”,突出對重點和難點知識的理解和掌握。這部分知識通常都是學(xué)生難于理解的內(nèi)容,做題時容易出錯的地方。分析近幾年的高考生物試題,重點其實就是可拉開距離的重要知識點。 4、學(xué)而不思則罔,思而不學(xué)則殆。這一點對高三生物一輪復(fù)習(xí)很重要。尤其是對于錯題。錯題整理不是把錯題抄一遍。也不是所有的錯題都需要整理。 專題59  DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)一、蛋白質(zhì)的提取與分離1.蛋白質(zhì)提取與分離的依據(jù)分子的形狀、大小;電荷性質(zhì)和多少;溶解度;吸附性質(zhì);對其他分子親和力。2.凝膠色譜法1)材料:凝膠多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。2)步驟:混合物上柱洗脫大分子流動快、小分子流動慢收集大分子收集小分子原理:當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程較長,移動速度較慢;相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠外部移動,路程較短,移動速度較快。相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離。3.緩沖溶液1)概念:在一定范圍內(nèi),能對抗外來少量強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或稍加稀釋不引起溶液pH發(fā)生明顯變化的溶液。2)作用:能夠抵制外界的酸或堿的對溶液的pH的影響,維持pH基本不變。3)配制:通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成。調(diào)節(jié)緩沖劑的使用比例就可以制得在不同pH范圍內(nèi)使用的緩沖液。由弱酸和相應(yīng)的強(qiáng)堿弱酸鹽溶解于水中。如H2CO3/NaHCO3,NaH2PO4/Na2HPO4等。4)本實驗使用的是磷酸緩沖液(NaH2PO4/Na2HPO4),目的是利用緩沖液模擬細(xì)胞內(nèi)的pH環(huán)境,保證血紅蛋白的正常結(jié)構(gòu)和功能,便于觀察(紅色)和科學(xué)研究(活性)。4.電泳法1)概念:指帶電粒子在電場作用下發(fā)生遷移的過程。2)原理:分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小,形狀的不同使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。3)類型:瓊脂糖凝膠電泳法:由于瓊脂糖本身不帶電荷,各種分子在電場中遷移速度決定于所帶電荷性質(zhì)的差異及分子的大小、形狀的不同。聚丙烯酰胺凝膠電泳法:在凝膠中加入SDS,使蛋白質(zhì)解聚成單鏈,與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物,使其遷移速度完全取決于分子的大小。5.實驗操作實驗操作的基本步驟:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。(一)樣品處理1)紅細(xì)胞的洗滌:目的:去除雜蛋白。為防止血液凝固,應(yīng)先加入檸檬酸鈉。所用洗滌液:是五倍體積的生理鹽水(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%NaCl溶液)。緩慢攪拌,采用低速短時間離心。洗滌干凈的標(biāo)準(zhǔn)是上清液沒有黃色。2)血紅蛋白的釋放:在蒸餾水和甲苯的作用下,紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。3)分離血紅蛋白溶液:(方法)離心。試管中的溶液分為4層,從上往下依次是:無色透明的甲苯層。白色薄層固體:脂溶性物質(zhì)沉淀層。紅色透明液體:血紅蛋白溶液層。暗紅色沉淀層:紅細(xì)胞破碎物沉淀。4)透析:方法:取1 mL血紅蛋白溶液裝入透析袋,將透析袋放入盛有300 mL物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液(pH7)中,透析12 h。目的:去除樣品中分子量較小的雜質(zhì)。原理:透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而將大分子物質(zhì)保留在袋內(nèi)。(二)凝膠色譜操作1)凝膠色譜柱的制作制作步驟:打孔挖穴安管覆網(wǎng)紗包插管。2)凝膠色譜柱的裝填材料:實驗所用凝膠是交聯(lián)葡聚糖凝膠。方法:凝膠用蒸餾水充分溶脹后,配成凝膠懸浮液,一次性緩慢倒入色譜柱內(nèi)。不能有氣泡存在。然后用300 mL物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌平衡12 h,使凝膠裝填緊密。3)樣品的加入和洗脫使吸管管口沿管壁將樣品緩慢加入色譜柱內(nèi),不要破壞凝膠面。待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱低端時,用試管收集流出液,每5 mL收集一管,連續(xù)收集。二、DNA的粗提取與鑒定1.實驗原理1DNA與蛋白質(zhì)在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同 溶解規(guī)律2 mol/L NaCl溶液0.14 mol/L NaCl溶液DNA溶解析出蛋白質(zhì)NaCl溶液物質(zhì)的量濃度從2 mol/L逐漸降低的過程中,溶解度逐漸增大部分發(fā)生鹽析沉淀溶解2DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用這一原理可將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離。3DNA與二苯胺沸水浴加熱,呈藍(lán)色。2操作流程解題技巧DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、34”加蒸餾水2加到雞血細(xì)胞液中,使血細(xì)胞吸水漲破;加到含DNA2 mol/LNaCl溶液中,使NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度稀釋到0.14 mol/L,使DNA析出用紗布過濾4過濾血細(xì)胞破裂液,得到含細(xì)胞核物質(zhì)的濾液;過濾用2 mol/LNaCl充分溶解的DNA,濾去溶液中的雜質(zhì);濾取0.14 mol/LNaCl溶液中析出的DNA(黏稠物);過濾溶有DNA2 mol/LNaCl溶液NaCl溶液42 mol/LNaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì);0.14 mol/LNaCl溶液使DNA析出;2 mol/LNaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物;2 mol/LNaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA一、單選題1.下列各項中,除哪項外均為電泳使樣品中各分子分離的原因( ?。?/span>A.分子帶電性質(zhì)的差異 B.分子的大小C.分子的形狀 D.分子的變性溫度2.如圖是進(jìn)行血紅蛋白的提取和分離實驗的裝置,下列有關(guān)敘述錯誤的是( ?。?/span>A.首先用圖甲裝置對血紅蛋白溶液進(jìn)行處理,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)B.圖乙裝置的試管收集到的液體中最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)C.用圖乙裝置分離血紅蛋白時,待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管開始收集D.用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳可對分離得到的血紅蛋白進(jìn)行純度鑒定3.利用新鮮洋蔥作為實驗材料提取DNA時( ?。?/span>A.可將洋蔥置于清水中,細(xì)胞吸水破裂后將DNA釋放出來B.離心后上清液中加入75%冷酒精,出現(xiàn)的白色絲狀物就是純凈的DNAC.將晾干的白色絲狀物置于2mol/LNaCl溶液中,會發(fā)生溶解現(xiàn)象D.可利用DNA在低溫下遇到二苯胺試劑呈現(xiàn)藍(lán)色反應(yīng)的特性對其進(jìn)行鑒定4.在“DNA 的粗提取與鑒定實驗中,甲、乙、丙、丁四個小組除表中所列處理方法不同外,其 他操作步驟均正確,但實驗結(jié)果卻不同。下列有關(guān)敘述不正確的是(     組別實驗材料提取核物質(zhì)時加入的溶液 去除雜質(zhì)時加入的溶液DNA 鑒定時加入的試劑雞血蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精(25 ℃二苯胺試劑菜花蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精(冷卻)雙縮脲試劑豬血蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精(冷卻)二苯胺試劑雞血蒸餾水體積分?jǐn)?shù)為 95%的酒精(冷卻)二苯胺試劑A.實驗材料選擇錯誤的組別是丙B.沸水浴后試管中溶液顏色變藍(lán)的組別是甲、丁C.甲組實驗現(xiàn)象不明顯的原因是 25 ℃的酒精對 DNA 的凝集效果差D.乙組實驗不成功僅因為在鑒定時加入了雙縮脲試劑5.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì),其相對分子質(zhì)量大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示。下列敘述正確的是( ?。?/span>A.用凝膠色譜柱分離時,甲的移動速度最快B.透析后,若乙保留在袋內(nèi),則甲也保留在袋內(nèi)C.離心后,若戊存在于沉淀中,則丙也存在于沉淀中DSDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳后,甲和戊的電泳帶相距最遠(yuǎn)6.下列關(guān)于凝膠色譜柱的制作和裝填,錯誤的是(    A.色譜柱裝填過程中一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡,必須重裝B.用長20cm,內(nèi)徑16m的玻璃管兩端磨平,制作柱身C.根據(jù)色譜柱內(nèi)的體積,計算出所需凝膠量D.干燥的凝膠,使用前直接放在磷酸緩沖液中膨脹7.下列有關(guān)蛋白質(zhì)和DNA提取和分離實驗的敘述,錯誤的是(    A.可用蒸餾水漲破細(xì)胞的方法從豬紅細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)B.透析法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是蛋白質(zhì)不能通過半透膜C.可以用雞血作為血紅蛋白和DNA提取的良好材料D.調(diào)節(jié)NaC1溶液濃度或加入木瓜蛋白酶,都可以去除血紅蛋白中的部分雜質(zhì)8.血紅蛋白的提取和分離一般分為四步,符合要求的一項為( ?。?/span>A.粗分離樣品處理純化純度鑒定B.粗分離純化樣品處理純度鑒定C.樣品處理粗分離純化純度鑒定D.純化純度鑒定粗分離樣品處理9.下列與“DNA的粗提取與鑒定實驗相關(guān)的說法,錯誤的是( ?。?/span>A.研磨液中應(yīng)加入DNA酶的抑制劑,以防細(xì)胞破碎后DNA酶降解DNAB.研磨時需要控制好時間,以防影響DNA的提取量C.鑒定時加入二苯胺試劑后沸水浴即可觀察到較為明顯的顯色反應(yīng)D.鑒定時溶液藍(lán)色的深淺與DNA含量的多少有關(guān)10.下列關(guān)于“DNA 的粗提取與鑒定實驗敘述,錯誤的是 ( ?。?/span>A.在酒精中,某些蛋白質(zhì)的溶解度大于DNA的溶解度B.蛙的紅細(xì)胞不適宜作為DNA提取的實驗材料C.檸檬酸鈉能夠稀釋血液,防止血液凝固D.嫩肉粉有助于在實驗中去除雜質(zhì)11.將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2 000 r/min的速度離心10 min后,離心管中的溶液分為四層,從上到下的順序依次是(    A.血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、細(xì)胞破碎物沉淀層B.甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層C.脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、細(xì)胞破碎物沉淀層D.甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、細(xì)胞破碎物沉淀層12.在血紅蛋白的整個提取過程中,不斷用磷酸緩沖液處理的目的是( ?。?/span>A.防止血紅蛋白被氧化B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì),需要酸中和C.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi),維持其結(jié)構(gòu)和功能D.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程13.在蛋白質(zhì)的提取和分離中,下列關(guān)于樣品的加入和洗脫的操作敘述,不正確的是(    A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢流出B.加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi)C.等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口D.用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面14.下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定實驗原理與方法的敘述,錯誤的是(    ADNANaCl溶液中的溶解度隨著溶液濃度的減小而減小B.向雞血細(xì)胞液中加入蒸餾水的目的是使其吸水漲破,釋放出其中的DNAC.向濾液中加入冷卻酒精的目的是除去DNA中的雜質(zhì),純化DNAD.在酒精溶液中,某些蛋白質(zhì)的溶解度比DNA15.在蛋白質(zhì)的提取和分離中,關(guān)于對樣品的處理,分析正確的是(    A.洗滌紅細(xì)胞的目的是除去血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽B.采集的血樣應(yīng)采用高速短時間離心的方法及時分離紅細(xì)胞C.洗滌過程選質(zhì)量分?jǐn)?shù)為01%NaCl溶液D.透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)16.生物產(chǎn)品的分離、純化是現(xiàn)代生物技術(shù)中一種常見的技術(shù)。下列關(guān)于物質(zhì)提取、純化原理的敘述中,不正確的是( ?。?/span>A.采用凝膠色譜法分離果膠酶的原理是蛋白質(zhì)分子的相對分子質(zhì)量不同,在色譜柱中的移動速度不同B.蛋白質(zhì)的提取和分離中洗滌時離心速度過小,時間過短,白細(xì)胞會沉淀達(dá)不到分離效果C.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程D.離心法分離蛋白質(zhì)的依據(jù)是不同大小的分子離心時沉降速度不同17.下面說法不正確的是( ?。?/span>A.凝膠色譜分離法分離蛋白質(zhì)時,利用凝膠改變蛋白質(zhì)分子通過的路徑B.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程C.洗滌紅細(xì)胞時,離心所采用的方法是低速長時間離心D.在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響,維持pH基本不變18.下列關(guān)于DNA粗提取與鑒定及DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定的敘述,正確的是(    A.用同樣方法從等體積豬血和雞血中提取的DNA量相近B.使用二苯胺試劑能有效測定不同提取液中DNA的純度差別CPCR擴(kuò)增的DNA片段在瓊脂糖凝膠中遷移的速率與凝膠濃度、DNA分子大小等有關(guān)DPCR擴(kuò)增4次循環(huán)后,得到的含有兩種引物的DNA片段所占比例為1/819.利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的實驗中,下列說法正確的是(    A.相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)因質(zhì)量較小而運(yùn)動速度更快B.紅細(xì)胞洗滌過程中要加入5倍體積的蒸餾水,重復(fù)洗滌3C.將血紅蛋白溶液進(jìn)行透析,其目的是去除相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)D.凝膠裝填在色譜柱內(nèi)要均勻,不能有氣泡存在20.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種物質(zhì),其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如右圖所示。下列敘述正確的是(    A.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子甲也保留在袋內(nèi)B.若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì),則用凝膠色譜柱分離時,甲的移動速度最快C.將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,若分子戊存在于沉淀中,則分子丙也存在于沉淀中D.若五種物質(zhì)為蛋白質(zhì),用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最近二、綜合題21.如圖為“DNA的粗提取與鑒定實驗過程中的一些重要操作示意圖,請分析回答有關(guān)問題:1)正確的操作順序是_______________________(用字母和箭頭表示)。2)圖中C、E步驟都加入了蒸餾水,但其目的不同,分別是______________________________________________。3)為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA,可將其溶解后,滴加________________試劑后沸水浴加熱,如果出現(xiàn)___________________,則證明該絲狀物的主要成分為DNA4)圖中A步驟的目的是_________________________________________。22.蛋白質(zhì)是生命活動不可缺少的物質(zhì)。隨著人類基因組計劃的進(jìn)展以及多種生物基因組測序工作的完成,人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時代。血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,負(fù)責(zé)血液中氧氣和二氧化碳的運(yùn)輸。1)分離血紅蛋白的方法是_____,其原理是根據(jù)_____來分離蛋白質(zhì)。2)蛋白質(zhì)的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、_____和純度鑒定。3)血紅蛋白因含有_____而呈現(xiàn)紅色,采集血液時需要預(yù)先加入檸檬酸鈉,目的是_____。在血紅蛋白樣品處理和粗分離中需要用到很多試劑,如在紅細(xì)跑的洗滌中需要用到生理鹽水直至上清液不再呈現(xiàn)黃色;在血紅蛋白的釋放過程中需用到蒸餾水和40%體積的_____,目的是使紅細(xì)胞破裂釋放血紅蛋白;在透析過程中需要將透析袋放入20 mmol/L_____中。4)本實驗用的是交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex G-75),其中“G”表示_____,“75”表示凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸收水分7.5g。在裝填凝膠時色譜柱內(nèi)不能出現(xiàn)氣泡的原因是_____,給色譜柱添加樣品的具體操作是_____5)判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求,選用的檢測方法是_____23.某小組按如下步驟提取血紅蛋白:取新鮮的哺乳動物血液,加入檸檬酸鈉并低速離心洗滌紅細(xì)胞釋放蛋白將蛋白溶液在透析袋中透析獲得粗樣品純化蛋白。請回答下列相關(guān)問題: 1)選擇哺乳動物紅細(xì)胞作實驗材料的原因是________________。2)實驗中加入檸檬酸鈉的目的是________________;若該蛋白分離不明顯,可能的原因是紅細(xì)胞洗滌的次數(shù)過少,導(dǎo)致________________。3)釋放紅細(xì)胞時需要加入甲苯的作用是________________。4)在裝填色譜柱時不能有氣泡存在,因為________________,降低分離效果;如果________________,說明色譜柱制作成功。5)通過凝膠色譜法將粗樣品進(jìn)一步純化后,需要進(jìn)行蛋白質(zhì)純度的鑒定,使用最多的鑒定方法是________________。242019110日,施一公教授研究團(tuán)隊在《學(xué)》上報道了人源γ-分泌酶結(jié)合淀粉樣前體蛋白(APP)的高分辨率冷凍電鏡結(jié)構(gòu)揭示了結(jié)合底物后γ-分泌酶發(fā)生的構(gòu)象變化,并對這些構(gòu)象變化的功能進(jìn)行了生化研究從而為研究與癌癥以及阿爾茲海默癥相關(guān)的特異性藥物設(shè)計提供了重要的結(jié)構(gòu)信息。回答下列問題:1)該項研究進(jìn)行時,需控制溫度、酸堿度等條件,因為高溫、過酸、過堿會使γ-分泌酶的_______遭到破壞,失去活性。2)根據(jù)蛋白質(zhì)的各種特性,如蛋白質(zhì)分子的_______、所帶電荷的_______、以及溶解度、吸附性、對其他分子親和力等來分離不同種類蛋白質(zhì),從而得到γ-分泌酶。3γ-分泌酶由4個跨膜蛋白亞基組成,分別為PS1、Pen-2Aph-1Nicastrin。若對γ-分泌酶4個跨膜蛋白亞基進(jìn)行分離、純化及分子量測定,需采用_______及電泳技術(shù)。前者是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法,相對分子質(zhì)量較_______(填)的跨膜蛋白移動速度較慢。4)電泳是指_______在電場的作用下發(fā)生遷移的過程。對γ-分泌酶的4個跨膜蛋白亞基進(jìn)行分子量測定時,通常采用_______的方法,該方法測定的結(jié)果只是_______的分子量。25.含有兩部分Ⅰ.回答下列有關(guān)血紅蛋白的提取和分離實驗的問題:同學(xué)乙利用凝膠色譜法進(jìn)行血紅蛋白的分離,他在操作中加樣的正確順序是_____,在執(zhí)行圖一中所示操作時,色譜柱下端連接的尼龍管應(yīng)該_____(打開或關(guān)閉)。Ⅱ.回答下列有關(guān)從生物材料中提取某些特定成分的問題:1)薄荷油和玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)相似,因此適合選用_____法來提取。用此方法收集到的液體_____(是/不是)純的薄荷油,原因是_____。在此過程中,影響薄荷油提取量的主要因素有__________。2)青蒿素,無色針狀晶體,易溶于有機(jī)溶劑,不溶于水,不易揮發(fā)。獲取途徑主要是從黃花蒿中直接提取得到。使用水蒸氣蒸餾法_____(填適用不適用)提取青蒿素,原因是_____。蛋白質(zhì)對于生命活動來說是不可缺少的,人們要研究蛋白質(zhì),就得從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提 取、分離高純度的蛋白質(zhì)。下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置。請回答下列問題:26.根據(jù)圖甲所示可知,這是采用_________________________________ 法對血紅蛋白進(jìn)行分離的過程,此方法是根據(jù) 蛋白質(zhì)______________的不同來分離的。在對甲圖所示的凝膠柱進(jìn)行裝填時,一定要裝填均 勻,不能有氣泡存在,因為氣泡會_________________________________________。27.圖乙表示對分離出的血紅蛋白進(jìn)行____________________過程,此步操作目的是______________________。28.圖丙為向色譜柱中加樣的過程。操作先后順序應(yīng)為_________________圖中數(shù)字和“→ ”表示)。29.經(jīng)過丙圖所示的操作,連接好緩沖液洗脫瓶,并以較為恒定的流速緩慢加入緩沖液。如果能看到凝 膠色譜柱中的紅色區(qū)帶_____,說明色譜柱制作成功。在對蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化后,還需要對得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分子量的測定,通常使用_________,這種方法中, 蛋白質(zhì)的遷移率完全取決于_____。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題:30.將實驗流程按先后順序補(bǔ)充完整:_____、_____。31.凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_____分離蛋白質(zhì)。32.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除_____,洗滌干凈的標(biāo)志是_____33.下面是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品加入過程的示意圖,正確的加樣順序是_____。34.如果紅色區(qū)帶_____,說明色譜柱制作成功。35.下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題:1)血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有______功能。2)甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A______。甲裝置用于____________,目的是__________________。3)乙裝置中C______,該分離蛋白質(zhì)的方法叫____________,是根據(jù)______分離蛋白質(zhì)的有效方法,通常______的蛋白先流出來。當(dāng)______時,用試管收集流出液,每5mL收集一管,連續(xù)收集。4)判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求,需要進(jìn)行蛋白質(zhì)純度的鑒定。在鑒定的方法中使用最多的是______凝膠電泳。36.血紅蛋白是人和其他脊推動物血液中運(yùn)輸OCO2的蛋白質(zhì),請回答問題:1)蛋白質(zhì)的提取和分離一股分為樣品處理、_______、純化、純度鑒定四步。純化時可根據(jù)相對分子質(zhì)量大小采用_____________法對其進(jìn)行分離:此法常用的凝膠為___________等多糖類化合物。2)在色譜柱中裝填凝膠制作凝膠色譜柱時,不得有氣泡存在,這是因為:氣泡會________,降低分離效果。在用凝膠色譜柱分離血紅蛋白過程中,如果觀察到____________________,說明色譜柱制作成功。3)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白,這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力。分離該抗菌蛋白可用電泳法。此法利用了待分離樣品中各種分子的_______________、分子大小及形狀不同,在電場中的___________不同而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。37.納豆是一種大豆經(jīng)納豆桿菌發(fā)酵而成的健康食品。納豆桿菌能分泌納豆激酶等物質(zhì)。納豆激酶能夠水解血栓中水不溶性的纖維蛋白,所以具有溶解血栓的作用。提純納豆激酶可用于制備藥物。為提取純化納豆激酶,可進(jìn)行下列實驗:1)接種具有________________高纖維蛋白表達(dá)活性高纖維蛋白水解活性)的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃,搖床振蕩,發(fā)酵3天。2)收集發(fā)酵液,離心,分層,取_____________上清液沉淀物)作為提取納豆激酶的材料。3)透析法分離:將上述離心所得樣品裝入透析袋,置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析,以便達(dá)到_______________________的目的。4)凝膠色譜法(凝膠是一些微小的多孔球體,大多數(shù)是由_____________化合物構(gòu)成的,如葡聚糖或瓊脂糖)純化:將透析液進(jìn)行柱層析,用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行洗脫,試管連續(xù)收集。用此法分離蛋白質(zhì)時,對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)_______)從層析柱中洗脫出來。5SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定純度:此過程中分子的遷移速度取決于_____________。6)裝填凝膠柱,不得有氣泡的存在,原因是氣泡的存在會____________,降低分離效果。38.細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、代謝等都與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能密切相關(guān),而對蛋白質(zhì)的研究和應(yīng)用,首先需要獲得高純度的蛋白質(zhì)。某生物興趣小組準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列有關(guān)問題:1)在對樣品進(jìn)行處理時要洗滌紅細(xì)胞,洗滌紅細(xì)胞的目的是_____,洗滌干凈的標(biāo)志是_____2)在_____的作用下,紅細(xì)胞會破裂釋放出血紅蛋白。甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A_____,甲裝置的作用是_____3)在利用凝膠色譜法純化血紅蛋白的過程中,色譜柱不能有氣泡存在,原因是_____。用乙裝置分離血紅蛋白, C溶液的作用是_____。4)電泳是分離鑒定蛋白質(zhì)的常用方法。圖丙為某樣品中幾種蛋白質(zhì)通過SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳的圖譜,據(jù)圖推測該樣品在凝膠色譜法中最后流出的蛋白質(zhì)是_____。下圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實驗過程中的部分操作示意圖,請據(jù)圖分析,回答下列問題:39.上述圖示中,該實驗的正確操作順序是__________________(用序號與箭頭表示)。40.在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是______________。41.步驟的目的是____________,其依據(jù)原理是__________________42.實驗室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA,利用植物組織提取DNA時,須先破碎細(xì)胞,破碎細(xì)朐時需添加食鹽和_____________進(jìn)行研磨,添加后者的目的是_____________。43.由于雞血較難找到,某學(xué)生試圖用豬血代替,結(jié)果沒有成功,其原因最可能是________________。紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成。下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請回答下列問題:44.血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分,其在紅細(xì)胞中的作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)具有_________功能。我們選用動物的血液進(jìn)行實驗時加入檸檬酸鈉的目的是____________。45.甲裝置中,B是血紅蛋白溶液,則A______________________;該操作目的是去除樣品中____________。乙裝置中,操作壓一定,保證C溶液的流速__________(快或慢或一定)。46.用乙裝置分離蛋白質(zhì)的方法叫____________________________47.最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行______________________48.還有同學(xué)將大腸桿菌破碎并提取得到大腸桿菌蛋白質(zhì),一同學(xué)利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離,在電泳過程中,影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的分子大小、____________以及分子的形狀等。而另一位同學(xué)則利用乙圖分離,待蛋白質(zhì)接近色柱底端時,用試管連續(xù)收集流出液。先收集到的蛋白質(zhì)與后收集到的蛋白質(zhì)的區(qū)別是先收集到的蛋白質(zhì)_____________。 
 

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