基礎(chǔ)鞏固　　　　　　　　　　　　　1．(2019·四川德陽四校聯(lián)考)下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?/span>(　　)A．在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋大腸桿菌培養(yǎng)液以獲得單菌落B．在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無菌空氣制作果酒C．土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌D．在土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)采用平板劃線法解析：在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋后的大腸桿菌培養(yǎng)液可以獲得單個(gè)菌落，A正確；在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無菌空氣酵母菌會(huì)進(jìn)行有氧呼吸，而果酒是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物，B錯(cuò)誤；土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，沒有起到篩選作用，要篩選分解尿素的細(xì)菌應(yīng)選擇以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；在土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中，應(yīng)采用稀釋涂布平板法，D錯(cuò)誤。答案：A2．(2019·北京海淀檢測)下列有關(guān)細(xì)菌純培養(yǎng)的說法，不正確的是    (　　)A．實(shí)驗(yàn)操作者接種前需用70%的酒精棉球擦手消毒B．每次劃線后接種環(huán)要在酒精燈火焰上灼燒滅菌C．培養(yǎng)基上的單個(gè)菌落都是一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的克隆D．菌液梯度稀釋后用涂布法接種，得到單菌落便于計(jì)數(shù)解析：在進(jìn)行無菌操作前，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手要進(jìn)行消毒，一般是用70%酒精擦拭雙手，A正確；接種環(huán)灼燒滅菌可殺死殘留的菌種，B正確；單個(gè)菌落有可能是多個(gè)細(xì)菌的克隆，C錯(cuò)誤；稀釋涂布法接種可用于計(jì)數(shù)，D正確。答案：C3．(2019·山東滕州五中模擬)某研究小組欲研究被石油污染過的土壤中細(xì)菌的數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯(cuò)誤的是(　　)A．稱取和稀釋被污染的土壤時(shí)應(yīng)在火焰旁B．用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選C．分離菌種時(shí)可采用稀釋涂布平板法接種D．對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)宜采用平板劃線法接種解析：微生物的分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是無菌技術(shù)，因此在微生物的分離和培養(yǎng)的過程中稱取和稀釋土壤時(shí)應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，A正確；篩選出能分解石油的細(xì)菌，培養(yǎng)基的配方應(yīng)以石油為唯一碳源，B正確；對(duì)微生物進(jìn)行分離，可用稀釋涂布平板法，C正確；對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)常用稀釋涂布平板法而不能用平板劃線法，D錯(cuò)誤。答案：D4．(2019·上海市青浦區(qū)一模)如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?/span>12345，下列說法中正確的是(　　)A．操作前要將接種環(huán)用酒精消毒B．劃線操作須在火焰上方進(jìn)行C．只有在5區(qū)才可以得到所需菌落D．在12345區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌解析：在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，不用酒精消毒，A錯(cuò)誤；B.接種時(shí)劃線操作是在火焰周圍進(jìn)行，B錯(cuò)誤；在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落，C錯(cuò)誤；每次劃線前都要灼燒接種環(huán)，目的是殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，D正確。答案：D5．(2019·四川成都模擬)在鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中，常常加入水溶性的羧甲基纖維素鈉(CMC－Na)。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)A．羧甲基纖維素鈉(CMC－Na)主要為細(xì)菌提供氮源B．剛果紅染液能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物C．剛果紅可在倒平板時(shí)加入，加入前需要將剛果紅溶液滅菌D．纖維素酶至少包括三種組分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶解析：羧甲基纖維素鈉為可溶性纖維素衍生物，在鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中作為碳源，A錯(cuò)誤；剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌可以分解纖維素，從而使紅色消失產(chǎn)生透明圈，B正確；剛果紅可在倒平板時(shí)加入，加入前需要將剛果紅溶液滅菌，C正確；纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，D正確。答案：A6．(2019·內(nèi)蒙古阿拉善左旗高級(jí)中學(xué)月考)關(guān)于滅菌和消毒不正確的理解是(　　)A．滅菌是指殺滅環(huán)境中一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B．消毒和滅菌實(shí)質(zhì)是相同的C．接種環(huán)用灼燒法滅菌D．常用的消毒方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法解析：滅菌是指采用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子，A正確；消毒是指消除或殺滅外環(huán)境中的病原體，使其無害化，滅菌則是要將所有的微生物和病毒全部殺滅，以達(dá)到無菌的目的，滅菌一定可以達(dá)到消毒的目的，但消毒不一定能達(dá)到滅菌的效果，B錯(cuò)誤；接種工具常用灼燒法滅菌，C正確；常用的消毒方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法，D正確。答案：B能力創(chuàng)新7．(2019·河北名校高三模擬)從土壤中篩選纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)正確的是(　　)A．土壤取樣→梯度稀釋→涂布平板→發(fā)酵培養(yǎng)B．土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌落C．土壤取樣→梯度稀釋→選擇培養(yǎng)→挑選菌落D．土壤取樣→梯度稀釋→涂布平板→選擇培養(yǎng)→挑選菌落解析：正確的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一般是：土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中的菌株數(shù)量的多少來確定)→梯度稀釋→將樣品涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上→挑選菌落。答案：B8．(2018年高考·課標(biāo)全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題：(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基應(yīng)采用________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)觀察到菌落，菌落的含義是______________。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，可促進(jìn)______________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)；若進(jìn)行厭氧培養(yǎng)，可促進(jìn)________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時(shí)，為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松軟的原因是______________________。解析：(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基的碳氮比較高，而且含糖量高，更適合酵母菌；該培養(yǎng)基應(yīng)采用高壓蒸汽滅菌法滅菌；若將酵母菌劃線接種在平板上，培養(yǎng)一段時(shí)間后可觀察到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是菌落。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時(shí)，若通入氧氣，進(jìn)行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2，釋放能量多，細(xì)胞增殖快；若進(jìn)行無氧培養(yǎng)，進(jìn)行無氧呼吸，產(chǎn)生酒精和CO2，釋放能量少，增殖慢。(3)制作面包時(shí)，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，產(chǎn)生二氧化碳，二氧化碳是氣體，遇熱膨脹而形成小孔，使得面包松軟多孔。答案：(1)麥芽汁瓊脂　高壓蒸汽　由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖　乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會(huì)產(chǎn)生CO2，CO2使面包松軟9．(2019·河北衡水聯(lián)考)手機(jī)高溫、潮濕的環(huán)境非常適合細(xì)菌的生長，由大腸桿菌引起的食源性疾病日漸成為社會(huì)比較關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。為了了解手機(jī)上大腸桿菌的種類及分布情況，某興趣小組進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)步驟。請(qǐng)進(jìn)一步完善實(shí)驗(yàn)內(nèi)容并回答相關(guān)問題：(1)實(shí)驗(yàn)步驟：①配制含有________、水、無機(jī)鹽的固體培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)基中加入少量________(使大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色)；②從10名學(xué)生的手機(jī)正、反面采集樣品，分別接種至滅菌的培養(yǎng)基上，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h，選取________的菌落；③將接種針用________法滅菌后，將②中選取的菌落接種到________(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，在恒溫?fù)u床上培養(yǎng)24h，使細(xì)菌大量繁殖；④用________法將③過程所獲得的細(xì)菌接種到培養(yǎng)基上，分別統(tǒng)計(jì)菌落的種類和數(shù)目；⑤根據(jù)菌落的特征進(jìn)一步鑒定大腸桿菌的類型。(2)上述實(shí)驗(yàn)步驟中，從用途看，①所用培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(3)上述實(shí)驗(yàn)步驟④統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低，原因是__________________________________。解析：(1)①微生物生長的培養(yǎng)基需要碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。大腸桿菌可以用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基進(jìn)行鑒別。②大腸桿菌在伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基上呈現(xiàn)黑色，因此挑選黑色菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。③接種針用灼燒法進(jìn)行滅菌，擴(kuò)大培養(yǎng)需將菌落接種到液體培養(yǎng)基，利于細(xì)菌大量繁殖。④用稀釋涂布平板(涂布分離)法統(tǒng)計(jì)大腸桿菌的數(shù)量，根據(jù)菌落的特征區(qū)分不同種類的大腸桿菌。(2)①所用的伊紅－美藍(lán)培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。答案：(1)①碳源、氮源　  伊紅－美藍(lán)②黑色　③灼燒　液體④稀釋涂布(平板)(或“稀釋涂布分離”)(2)鑒別(3)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落10．(2017年高考·課標(biāo)全國卷 Ⅰ )某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用?；卮鹣铝袉栴}：(1)有些細(xì)菌能分解尿素，有些細(xì)菌則不能，原因是前者能產(chǎn)生______________________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源，原因是____________________________。但可用葡萄糖作為碳源，進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細(xì)菌，在配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作為氮源，不選擇其他兩組的原因是____________________________________。(3)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。解析：(1)土壤中的某些細(xì)菌之所以能夠分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生脲酶。尿素分解菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物，必須利用現(xiàn)成的有機(jī)物(如葡萄糖)作為碳源；葡萄糖通過呼吸作用被分解時(shí)，能為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，同時(shí)，葡萄糖還可以轉(zhuǎn)化成脂肪、某些氨基酸等物質(zhì)，所以進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖能為其他有機(jī)物的合成提供原料。(2)選擇培養(yǎng)基是只允許特定種類的微生物(目的微生物)生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。本實(shí)驗(yàn)的目的菌是可分解尿素的細(xì)菌，因此，配制的培養(yǎng)基應(yīng)只允許尿素分解菌生長，NH4NO3可以作為所有細(xì)菌的氮源，培養(yǎng)基中如含有NH4NO3，將不能起到篩選作用。(3)KH2PO4和Na2HPO4能為細(xì)菌生長提供鉀鹽、鈉鹽和磷酸鹽，而H2PO4－/HPO42－可以使培養(yǎng)基中pH保持相對(duì)穩(wěn)定。答案：(1)脲酶　分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)生物，不能利用CO2來合成有機(jī)物　為細(xì)胞生命活動(dòng)提供能量，為其他有機(jī)物的合成提供原料(2)尿素　其他兩組都含有NH4NO3，能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3，不能起到篩選作用(3)為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定11．(2018年高考·課標(biāo)全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染。回答下列問題：(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是________。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑________，可強(qiáng)化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是____________________________。解析：(1)能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。(2)煮沸消毒法即在100℃時(shí)煮沸5～6 min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃時(shí)煮30 min或在80 ℃時(shí)煮l5 min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法的優(yōu)點(diǎn)是達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。(3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強(qiáng)化消毒效果。(4)通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。 (5)采用高壓蒸汽滅菌時(shí)，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會(huì)出現(xiàn)壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。答案：(1)可以(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)　消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡12．(2019·重慶市第二次診斷考)北方每年在小麥豐收的季節(jié)，焚燒秸稈火焰四起，煙霧彌漫，不但導(dǎo)致嚴(yán)重的霧霾而且造成資源的浪費(fèi)?？茖W(xué)家為了解決這個(gè)問題，努力尋找分解秸稈中纖維素的微生物，他們做了如下實(shí)驗(yàn)，據(jù)圖回答：―→―→―→―→　　　　　　　　甲圖(1)根據(jù)甲圖，選擇培養(yǎng)纖維素分解菌要用______________。為了鑒別纖維素分解菌，常在培養(yǎng)基中加入________。為了統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，常用方法除稀釋涂布平板法外，還有____________的方法。(2)乙圖是培養(yǎng)出的單菌落示意圖，最適合分解秸稈的兩個(gè)菌落是______________(填數(shù)字)，纖維素分解菌將纖維素最終分解為________________。從圖中可以看出培養(yǎng)基上菌落數(shù)較少，推測可能的原因是______________________________。(3)為了長期保存該微生物，可以采用________________的方法。解析：(1)從土壤樣液中篩選能分解纖維素的細(xì)菌所用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅會(huì)與纖維素形成紅色復(fù)合物，而呈現(xiàn)紅色，如果纖維素被降解，則培養(yǎng)基表面會(huì)形成以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目，常用稀釋涂布平板法或顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2)透明圈的大小反映了細(xì)菌分解纖維素能力大小，培養(yǎng)基中大的透明圈就是分解纖維素多的地方，所以乙圖中最適合分解秸稈的兩個(gè)菌落是1和4；纖維素是多糖，最終被分解菌分解成葡萄糖；從圖中可以看出培養(yǎng)基上菌落數(shù)較少，推測可能是土壤中纖維素分解菌較少，稀釋的倍數(shù)太大所致。(3)長期保留菌種可用甘油管藏的方法。答案：(1)選擇培養(yǎng)基　剛果紅(CR)　顯微鏡直接計(jì)數(shù)(2)1和4　葡萄糖　土壤中纖維素分解菌較少，稀釋的倍數(shù)太大(3)甘油管藏
  

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