1．（2022·海南·高考真題）為探究校內植物園土壤中的細菌種類，某興趣小組采集園內土壤樣本并開展相關實驗。下列有關敘述錯誤的是（ ）
A．采樣時應隨機采集植物園中多個不同地點的土壤樣本
B．培養(yǎng)細菌時，可選用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基
C．土壤溶液稀釋倍數(shù)越低，越容易得到單菌落
D．鑒定細菌種類時，除形態(tài)學鑒定外，還可借助生物化學的方法
2．（2021·天津·高考真題）下列操作能達到滅菌目的的是（ ）
A．用免洗酒精凝膠擦手B．制作泡菜前用開水燙洗容器
C．在火焰上灼燒接種環(huán)D．防疫期間用石炭酸噴灑教室
3．（2021·北京·高考真題）野生草本植物多具有根系發(fā)達、生長較快、抗逆性強的特點，除用于生態(tài)治理外，其中一些可替代木材栽培食用菌，收獲后剩余的菌渣可作肥料或飼料。相關敘述錯誤的是（ ）
A．種植此類草本植物可以減少水土流失
B．菌渣作為農作物的肥料可實現(xiàn)能量的循環(huán)利用
C．用作培養(yǎng)基的草本植物給食用菌提供碳源和氮源
D．菌渣作飼料實現(xiàn)了物質在植物、真菌和動物間的轉移
4．（2021·北京·高考真題）人體皮膚表面存在著多種微生物，某同學擬從中分離出葡萄球菌。下述操作不正確的是（ ）
A．對配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌
B．使用無菌棉拭子從皮膚表面取樣
C．用取樣后的棉拭子在固體培養(yǎng)基上涂布
D．觀察菌落的形態(tài)和顏色等進行初步判斷
5．（2021·山東·高考真題）解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{色。將不能直接吸收脂肪的甲，乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯誤的是（ ）
A．甲菌屬于解脂菌
B．實驗中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源
C．可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進行對比
D．該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力
6．（2021·浙江·高考真題）下列關于原生質體和細胞計數(shù)的敘述，錯誤的是（ ）
A．測定植物原生質體的密度時，可用血細胞計數(shù)板
B．紅墨水不能進入活細胞，可用于檢測細胞的存活狀態(tài)并計數(shù)
C．涂布分離法和劃線分離法均能得到單菌落，都可用于細胞計數(shù)
D．酵母菌在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，可用比濁計測定其密度
7．（2020·江蘇·高考真題）為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細菌，培養(yǎng)結果如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．倒平板后需間歇晃動，以保證表面平整
B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細菌數(shù)量均太多，應從Ⅲ區(qū)挑取單菌落
C．該實驗結果因單菌落太多，不能達到菌種純化的目的
D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色
8．（2020·山東·高考真題）野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補充相應氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨接種在基本培養(yǎng)基上時，均不會產生菌落。某同學實驗過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個細菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學對這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是（ ）
A．操作過程中出現(xiàn)雜菌污染
B．M、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸
C．混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質
D．混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變
9．（2021·山東·高考真題）含硫蛋白質在某些微生物的作用下產生硫化氫導致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產生硫化氫及兩種菌的運動能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯誤的是（ ）
A．乙菌的運動能力比甲菌強
B．為不影響菌的運動需選用液體培養(yǎng)基
C．該實驗不能比較出兩種菌產生硫化氫的量
D．穿刺接種等接種技術的核心是防止雜菌的污染
10．（2022·湖南·高考真題）黃酒源于中國，與啤酒、葡萄酒并稱世界三大發(fā)酵酒。發(fā)酵酒的釀造過程中除了產生乙醇外，也產生不利于人體健康的氨基甲酸乙酯（EC）。EC主要由尿素與乙醇反應形成，各國對酒中的EC含量有嚴格的限量標準?；卮鹣铝袉栴}:
(1)某黃酒釀制工藝流程如圖所示，圖中加入的菌種a是_______，工藝b是_______（填“消毒”或“滅菌”），采用工藝b的目的是____________________。
(2)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑，根據(jù)顏色變化，可以初步鑒定分解尿素的細菌。尿素分解菌產生的脲酶可用于降解黃酒中的尿素，脲酶固定化后穩(wěn)定性和利用效率提高，固定化方法有_________________________（答出兩種即可）。
(3)研究人員利用脲酶基因構建基因工程菌L，在不同條件下分批發(fā)酵生產脲酶，結果如圖所示。推測________是決定工程菌L高脲酶活力的關鍵因素，理由是__________________。
(4)某公司開發(fā)了一種新的黃酒產品，發(fā)現(xiàn)EC含量超標。簡要寫出利用微生物降低該黃酒中EC含量的思路_____________________________。
11．（2021·湖南·高考真題）大熊貓是我國特有的珍稀野生動物，每只成年大熊貓每日進食竹子量可達12~38kg。大熊貓可利用竹子中8%的纖維素和27%的半纖維素。研究人員從大熊貓糞便和土壤中篩選纖維素分解菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少包括三種組分，即_________。為篩選纖維素分解菌，將大熊貓新鮮糞便樣品稀釋液接種至以_________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，該培養(yǎng)基從功能上分類屬于_________培養(yǎng)基。
（2）配制的培養(yǎng)基必須進行_______________滅菌處理，目的是_________。檢測固體培養(yǎng)基滅菌效果的常用方法是_________。
（3）簡要寫出測定大熊貓新鮮糞便中纖維素分解菌活菌數(shù)的實驗思路_________。
（4）為高效降解農業(yè)秸稈廢棄物，研究人員利用從土壤中篩選獲得的3株纖維素分解菌，在37℃條件下進行玉米秸稈降解實驗，結果如表所示。在該條件下纖維素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。
12．（2021·河北·高考真題）葡萄酒生產過程中會產生大量的釀酒殘渣（皮渣）。目前這些皮渣主要用作飼料或肥料，同時研究者也采取多種措施拓展其利用價值。
回答下列問題：
（1）皮渣中含有較多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前將原料干燥、粉碎的目的分別是__________，萃取效率主要取決于萃取劑的__________。萃取過程需要在適宜溫度下進行，溫度過高會導致花色苷__________。研究發(fā)現(xiàn)，萃取時輔以纖維素酶、果膠酶處理可提高花色苷的提取率，原因是____________________。
（2）為了解皮渣中微生物的數(shù)量，取10g皮渣加入90mL無菌水，混勻、靜置后取上清液，用稀釋涂布平板法將0.1mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。104倍稀釋對應的三個平板中菌落數(shù)量分別為78、91和95，則每克皮渣中微生物數(shù)量為__________個。
（3）皮渣堆積會積累醋酸菌，可從中篩選優(yōu)良菌株。制備醋酸菌初篩平板時，需要將培養(yǎng)基的pH調至__________性，滅菌后須在未凝固的培養(yǎng)基中加入無菌碳酸鈣粉末、充分混勻后倒平板，加入碳酸鈣的目的是______________________________。培養(yǎng)篩選得到的醋酸菌時，在缺少糖源的液體培養(yǎng)基中可加入乙醇作為__________。
（4）皮渣堆積過程中也會積累某些兼性厭氧型乳酸菌。初篩醋酸菌時，乳酸菌有可能混入其中，且兩者菌落形態(tài)相似。請設計一個簡單實驗，區(qū)分篩選平板上的醋酸菌和乳酸菌_________。（簡要寫出實驗步驟和預期結果）
13．（2021·廣東·高考真題）中國科學家運用合成生物學方法構建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖）為原料，在實驗室發(fā)酵生產PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價值。工藝流程如圖。
回答下列問題：
（1）為提高菌株H對蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液體培養(yǎng)基中將蔗糖作為___________，并不斷提高其濃度，經多次傳代培養(yǎng)（指培養(yǎng)一段時間后，將部分培養(yǎng)物轉入新配的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)）以獲得目標菌株。培養(yǎng)過程中定期取樣并用___________的方法進行菌落計數(shù)，評估菌株增殖狀況。此外，選育優(yōu)良菌株的方法還有___________等。（答出兩種方法即可）
（2）基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強等特性，研究人員設計了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設為60g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是___________。（答出兩點即可）
（3）研究人員在工廠進行擴大培養(yǎng)，在適宜的營養(yǎng)物濃度、溫度、pH條件下發(fā)酵，結果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液中菌株H細胞增殖和PHA產量均未達到預期，并產生了少量乙醇等物質，說明發(fā)酵條件中___________可能是高密度培養(yǎng)的限制因素。
（4）菌株H還能通過分解餐廚垃圾（主要含蛋白質、淀粉、油脂等）來生產PHA，說明其能分泌___________。
14．（2020·江蘇·高考真題）產脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關研究。請回答下列問題：
（1）常規(guī)微生物實驗中，下列物品及其滅菌方法錯誤的是__________（填編號）。
（2）稱取1．0g某土壤樣品，轉入99mL無菌水中，制備成菌懸液，經__________后，獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0．1mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌__________個。
（3）為了進一步提高酵母菌產酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進行__________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以__________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，按照菌落直徑大小進行初篩，選擇直徑__________的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。
（4）在處理含油廢水的同時，可獲得單細胞蛋白，實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關性能，進行了培養(yǎng)研究，結果如圖。據(jù)圖分析，應選擇菌株__________進行后續(xù)相關研究，理由是__________。
15．（2020·全國·高考真題）某種物質S（一種含有C、H、N的有機物）難以降解，會對環(huán)境造成污染，只有某些細菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細菌菌株。實驗過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機鹽、水和S，乙的組分為無機鹽、水、S和Y。
回答下列問題：
（1）實驗時，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用_______________的方法進行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質是_______________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于______________培養(yǎng)基。
（2）實驗中初步估測搖瓶M中細菌細胞數(shù)為2×107 個/mL，若要在每個平板上涂布100μL稀釋后的菌液，且保證每個平板上長出的菌落數(shù)不超過200個，則至少應將搖瓶M中的菌液稀釋________________倍。
（3）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1點即可）。
（4）若要測定淤泥中能降解S的細菌細胞數(shù)，請寫出主要實驗步驟________________。
（5）上述實驗中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細菌的生長提供4類營養(yǎng)物質，即________________。
菌株
秸稈總重(g)
秸稈殘重(g)
秸稈失重（%）
纖維素降解率（%）
A
2.00
1.51
24.50
16.14
B
2.00
1.53
23.50
14.92
C
2.00
1.42
29.00
23.32
編號
①
②
③
④
物品
培養(yǎng)基
接種環(huán)
培養(yǎng)皿
涂布器
滅菌方法
高壓蒸汽
火焰灼燒
干熱
臭氧

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