考點1　植物細(xì)胞工程一、植物組織培養(yǎng)技術(shù)
知識歸納????(1)外植體:離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞。一般選擇植物幼嫩的組織作為外植 體,因為其易誘導(dǎo)形成愈傷組織。(2)愈傷組織:不定形薄壁組織團塊。在離體培養(yǎng)條件下產(chǎn)生的愈傷組織細(xì)胞具有再分 化的潛力,即細(xì)胞能夠分裂、分化出不同形態(tài)、執(zhí)行不同功能的組織和器官。(3)在自然狀態(tài)下,當(dāng)植物體的一部分受到機械損傷等襲擊后,能夠在傷口處形成愈傷 組織,起到修復(fù)和保護作用。(4)組織培養(yǎng)過程中也可無明顯愈傷組織形成,直接形成胚狀體等結(jié)構(gòu)。
二、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
三、植物細(xì)胞工程的應(yīng)用
小表達(dá)????細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)　　????(填“能”或“不能”)體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,理由是?? ??。
答案:不能　細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)的目的是通過大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞,獲取初生或次生 代謝物,即植物組織細(xì)胞形成愈傷組織后,不再發(fā)育成完整生物體或分化成其他各種 細(xì)胞
考點2　動物細(xì)胞工程一、動物細(xì)胞培養(yǎng)1.動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件、過程等
知識歸納????血清中含有多種維持細(xì)胞正常代謝和生長的物質(zhì),如蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長 因子等,因此動物細(xì)胞培養(yǎng)時,為保證細(xì)胞能順利生長和繁殖,一般需添加血清等天然 成分。2.干細(xì)胞
知識拓展可借助載體將特定基因?qū)爰?xì)胞中,直接將特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞中或者用小分子化合物 等來誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞。
二、動物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體1.動物細(xì)胞融合技術(shù)
2.單克隆抗體及其應(yīng)用
知識歸納????兩次篩選的目的:第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞,采用的是特定的選擇培養(yǎng)基, 在該培養(yǎng)基中,只有雜交瘤細(xì)胞可以存活。第二次篩選的目的是將能產(chǎn)生特定抗體的 雜交瘤細(xì)胞篩選出來,采用的是抗原—抗體雜交技術(shù)。
小表達(dá)????ADC的抗體和藥物各具有的作用是?? ??。
答案:抗體主要發(fā)揮靶向運輸作用,即通過特異性結(jié)合靶細(xì)胞表面的抗原,將連接的藥 物輸送到靶細(xì)胞;藥物發(fā)揮治療效應(yīng),如殺傷靶細(xì)胞
三、動物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動物1.動物體細(xì)胞核移植技術(shù)
小表達(dá)????1.克隆動物　　????(填“是”或“不是”)對體細(xì)胞供體動物進(jìn)行100%復(fù)制,理由是 ?? ??。2.體細(xì)胞核移植技術(shù)選擇MⅡ期的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是　　　　　　???? 　　????。將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞時,需先對卵母細(xì)胞進(jìn)行去核操作的原因是 ?? ??。
1.答案:不是　動物細(xì)胞除核基因外,在細(xì)胞質(zhì)中也有少量基因,克隆動物的細(xì)胞質(zhì)基 因同時來自核供體細(xì)胞和受體卵母細(xì)胞;克隆過程中,基因的甲基化程度等一些方面 也可能有所變化;生物的性狀還受環(huán)境的影響2.答案:MⅡ期的卵母細(xì)胞體積大,易操作,細(xì)胞質(zhì)中含有促使細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) 和營養(yǎng)條件　使克隆動物的核遺傳物質(zhì)全部來自供體細(xì)胞核
考點3　胚胎工程一、胚胎工程的理論基礎(chǔ)
易混易錯????(1)常以觀察到兩個極體或者雌、雄原核作為受精的標(biāo)志。(2)將精子培養(yǎng)在人工配制的獲能液中也可使其獲能。常見的有效成分有肝素,Ca2+載 體等。精子獲能是指精子獲得受精“能力”,而不是獲得能量。
二、胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用
小表達(dá)????1.通過胚胎分割技術(shù)獲得的動物毛色和斑紋存在差異嗎,原因是?? ??。2.對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時要將內(nèi)細(xì)胞團均等分割的原因是?? ??。
1.答案:可能存在差異,因為切割的胚胎可能不完全一致,而且也可能會因為表觀遺傳 等導(dǎo)致后代性狀出現(xiàn)差異2.答案:內(nèi)細(xì)胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織,若分割時不能將內(nèi)細(xì)胞團均等分割,會 出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良,甚至不能發(fā)育等問題
深挖教材(1)單克隆和單克隆抗體①單克隆:　　　 　????細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。要獲得大量的某種單一抗體,必須克隆產(chǎn)生這種抗體的　　　　　????細(xì)胞(選擇性必修3 P49)(2022山東,15,2分)。②單克隆抗體:在體外培養(yǎng)條件下,把不能無限增殖的　　 　????細(xì)胞和能在體外大量增殖的　　　　 ????細(xì)胞融合,得到的融合細(xì)胞(雜交瘤細(xì)胞)既能大量增殖,又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體,該抗體就稱為單克隆抗體(選擇性必修3 P49)(2023北京,12,2分)(2021山東,15,2分)。(2)單克隆抗體制備過程:細(xì)胞融合前,需先用　　　 　????對小鼠免疫,再取小鼠
的　????　　　????(含B淋巴細(xì)胞)用　　 　????酶處理,并用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。用　　　 　??? ?法誘導(dǎo)　 　???? 細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,并用選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基)篩選,該培養(yǎng)基對　　 　 ????和　　　 　　　????生長具有抑制作 用。獲得雜交瘤細(xì)胞后,將其接種到96孔板,進(jìn)行　　 ??? 培養(yǎng),然后用　　　　　????進(jìn)行抗體檢測,多次篩選　　　　 　　　　　　　? ???(選擇性必修3 P48—49)(2023湖北,22,16分)(2023北京,12,2分)(2022遼寧,24,10分)。
滅活病毒誘導(dǎo)(或PEG融合或電融合)
融合的具有同種核的細(xì)胞
陽性細(xì)胞(或抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞)
真題演練????(2023湖北,22,16分)某病毒對動物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國學(xué)者擬以該 病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體,以期快速檢測該病毒,其主要技術(shù)路線如圖 所示。?
回答下列問題:(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前,已免疫的脾細(xì)胞(含漿細(xì)胞)　　　????(填“需要”或“不 需要”)通過原代培養(yǎng)擴大細(xì)胞數(shù)量;添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合,該過程中 PEG對細(xì)胞膜的作用是????。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中,常使用特定的選擇培養(yǎng)基(如HAT培養(yǎng)基),該培養(yǎng)基對???? 　　　????和　　　　　????生長具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中,將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交,其目的是????。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是　　　????。

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