【期中復習】2023-2024學年（人教版2019選擇性必修3）高二下冊生物期中易錯題訓練.zip-試卷下載-教習網(wǎng)

1．下列關于泡菜的制作和亞硝酸鹽含量測定的敘述，正確的是（）
A．將蔬菜用開水和白酒浸泡 1min 以加快發(fā)酵速度
B．在發(fā)酵過程中出現(xiàn)白膜可能是由于酵母菌大量增殖而引起的
C．測定亞硝酸鹽含量用波長為 550nm 的光是因為亞硝酸鹽對該波長的光有最大的吸收率
D．若制作標準曲線時用的比色杯的光程比待測樣品的比色杯光程大，則計算出的待測樣品中亞硝酸鹽的含量偏低
2．從自然界中篩選具有優(yōu)良性狀的菌種的一般步驟為：采集樣品→富集培養(yǎng)（使菌體數(shù)量增多）→純種分離→性能測定，如圖a、b是采用兩種接種方法接種后純化培養(yǎng)的效果圖。下列相關敘述正確的是（）
A．可使用液體培養(yǎng)基進行富集培養(yǎng)
B．為獲得純種的目的菌種，需對采集的樣品進行滅菌
C．獲得圖a所示結果的接種過程中，接種環(huán)需灼燒滅菌3次
D．利用圖b計算出樣品中菌體濃度為5．85×108個/ml，則接種稀釋液的稀釋倍數(shù)為107倍
3．在某地的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，研究人員發(fā)現(xiàn)了一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，且長期使用會導致土壤被污染。為修復被該除草劑污染的土壤，可按下圖程序選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑是一種含氮有機物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。下列相關敘述正確的是（）
A．只有長期使用該除草劑的土壤中才含有能降解該除草劑的細菌
B．篩選能降解該除草劑的細菌的培養(yǎng)基中該除草劑是唯一的氮源
C．圖中操作Ⅰ的接種方法為平板劃線法，該方法可用于細菌計數(shù)
D．經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)，培養(yǎng)皿中應該只存在有透明圈的菌落
4．近期在“科學號”考察船對南中國海科考中，中國科學家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株——擬桿菌新菌株并進一步研究了其生物學特性。有關說法錯誤的是（）
A．培養(yǎng)基接入沉積物樣品后，需要在低溫厭氧培養(yǎng)一段時間才能獲得含擬桿菌的培養(yǎng)物
B．在以纖維素為唯一碳源時可以得到純種培養(yǎng)的擬桿菌新菌株
C．將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質才能生存
D．藻類細胞解體后難降解的多糖物質，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部，推測擬桿菌新菌株為異養(yǎng)生物，作為分解者起作用
5．鎮(zhèn)江陳醋具有“色、香、酸、醇、濃”之特色，其主要工藝流程如下圖。相關敘述正確的是（）
A．作為工業(yè)生產(chǎn)，鎮(zhèn)江陳醋的釀制過程需要做到嚴格無菌
B．“淋飯”有助于提高發(fā)酵原料的透氣性，有助于霉菌的糖化等過程
C．接種醋酸菌后的固態(tài)發(fā)酵需要“翻缸”，主要目的是抑制雜菌
D．后發(fā)酵時間越長，醋體中風味物質的不斷堆積導致醋品更佳
6．培養(yǎng)基是指供給微生物、植物或動物細胞（或組織）生長繁殖的，由不同物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。針對下表中的三組培養(yǎng)基，下列敘述錯誤的是（）
A．a(chǎn)組培養(yǎng)基可用于醋化醋桿菌的擴大培養(yǎng)，該培養(yǎng)過程需用到磁力攪拌器和搖床
B．b組培養(yǎng)基可用于分離含脲酶的微生物，該實驗中需用全營養(yǎng)LB固體培養(yǎng)基作對照
C．c組培養(yǎng)基可用于誘導植物愈傷組織再分化，添加的植物生長調(diào)節(jié)劑需事先過濾滅菌
D．上述培養(yǎng)基不僅要為相應的細胞提供營養(yǎng)物質還要為其生存和繁殖提供適宜的環(huán)境
7．堆肥指利用自然界廣泛存在的微生物，有控制地促進固體廢物中可降解有機物轉化為穩(wěn)定的腐殖質的生物化學過程。下圖為堆肥處理時材料內(nèi)部溫度的變化曲線。若要從堆肥材料中篩選出能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，下列相關敘述錯誤的是（）
A．微生物呼吸作用釋放的熱量積累，導致堆肥內(nèi)部溫度逐漸升高
B．與a點相比b點時微生物的數(shù)量較多，與c點相比b點時微生物種類較多
C．c點時，可對堆肥取樣并用角蛋白氮源培養(yǎng)基對微生物群進行培養(yǎng)和篩選
D．若采用平板劃線法分離微生物，需對取樣獲得的原液進行適當稀釋后再劃線
8．影印平板法是將長有若干個菌落的平板作為母平板，將其倒置于包有一層滅菌絲絨布的印章上，使印章均勻地沾滿來自母平板的菌落，然后通過此印章將母平板上的菌落“忠實”地接種到不同選擇培養(yǎng)基上的培養(yǎng)方法。通過比較影印平板與母平板上菌落的生長情況，可以篩選出所需要的菌種。已知地衣芽孢桿菌能產(chǎn)生耐高溫的α-淀粉酶，野生型地衣芽孢桿菌對頭孢菌素和慶大霉素均有抗性，利用誘變技術獲得的某突變株對頭孢菌素和慶大霉素同時具有敏感性，但其同時也成為了能合成耐高溫α-淀粉酶的高產(chǎn)菌株。請利用影印平板法篩選出此高產(chǎn)菌株。關于實驗思路的敘述錯誤的是（）
A．將待測菌懸液用稀釋涂布平板法接種到完全培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)，待菌落穩(wěn)定后作為母平板
B．將母平板上的菌落用印章影印接種到同時含有頭孢菌素和慶大霉素的選擇培養(yǎng)基平板（影印平板）上
C．培養(yǎng)到長出穩(wěn)定菌落，比較不同平板上相同位置菌落的生長情況
D．在兩種平板的相同位置上，在影印平板上不能生長而在母平板上能生長的菌落中含有高產(chǎn)菌落
9．野生型大腸桿菌能夠在基本培養(yǎng)基中生長，突變菌株A和突變菌株B由于不能自己合成某些營養(yǎng)素，而不能在基本培養(yǎng)基上生長?？茖W工作者利用菌株A和菌株B進行了如下兩個實驗。實驗一：將菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培養(yǎng)基上，結果如圖1；實驗二：將菌株A和菌株B分別置于U型管的兩端，中間由過濾器隔開。加壓力或吸力后，培養(yǎng)液可以自由流通，但細菌細胞不能通過。經(jīng)幾小時培養(yǎng)后，將菌液A、B分別涂布于基本培養(yǎng)基上，結果如圖2。下列推測錯誤的是（）
A．菌株A和B的代謝產(chǎn)物不能改變彼此的遺傳特性
B．混合培養(yǎng)的菌株不一定都能在基本培養(yǎng)基上生長
C．不同菌株間接觸后才可能交換遺傳物質
D．菌株A和菌株B含有相同的突變基因
10．細菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在與其他細菌的競爭中占優(yōu)勢，其中tcel蛋白是一種有毒性的分泌蛋白。研究人員利用野生型細菌X及其不同突變體進行了如下實驗：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離細菌的濾膜，將一種菌（下層菌）滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌（上層菌），共同培養(yǎng)后，對上、下層菌計數(shù)得到的結果如圖所示。下列敘述正確的是（）
A．實驗中的培養(yǎng)皿、固體培養(yǎng)基和濾膜均需要進行消毒處理
B．對上、下層菌計數(shù)可以將濾膜菌體稀釋后采用血球計數(shù)板計數(shù)
C．由甲、乙，丙三組結果可推測tcil蛋白能夠中和tcel蛋白的毒性
D．野生型細菌X在與tcel—tcil雙突變體和tcel突變體的競爭中均占優(yōu)勢
11．普通六倍體小麥基因組龐大，研究相對困難。擬南芥基因組測序已完成，遺傳背景相對清晰。用紫外線分別照射普通小麥愈傷組織的原生質體30s、1min、2min，再與擬南芥原生質體進行融合，可將小麥染色體小片段插入擬南芥基因組。下列敘述錯誤的是（）
A．紫外線照射可隨機破壞染色體結構
B．可利用滅活病毒促進兩種原生質體融合
C．需設置單獨培養(yǎng)的未融合原生質體作為對照組
D．借助擬南芥的遺傳背景對小麥基因組進行研究
12．某雜種植株的獲取過程如圖所示，下列有關分析正確的是（）
A．葉片經(jīng)消毒后需用流水多次沖洗，以避免消毒劑長時間作用而產(chǎn)生毒害作用
B．圖示①過程采用酶解法獲取原生質體時，可用聚乙二醇調(diào)節(jié)滲透壓
C．圖示②過程通過抽真空處理使酶溶液滲入細胞間隙，提高酶解效率
D．經(jīng)④過程獲得的雜種細胞經(jīng)鑒定和篩選后進行植物組培，即可獲得目標雜種植株
13．花椰菜（2n=18）種植時容易遭受病菌侵害形成病斑，紫羅蘭（2n=14）具有一定的抗病性。科研人員利用植物體細胞雜交技術培育具有抗病性狀的花椰菜新品種如圖1所示。通過蛋白質電泳技術分析了親本及待測植株中某些特異性蛋白，結果圖2所示。下列有關敘述錯誤的是（）
A．圖1培育雜種植株所用的技術體現(xiàn)了植物細胞全能性和細胞膜流動性原理
B．圖1過程①是在無菌水中進行，過程②是在固體培養(yǎng)基中進行
C．圖2中屬于雜種植株的是4和5，1可能是花椰菜
D．病菌懸浮液均勻噴施于雜種植株葉片上，一段時間后，測定病斑面積占葉片總面積的百分比，可篩選抗病性強的雜種植株
14．下面圖1為某植物育種流程，圖2表示利用農(nóng)桿菌轉化法獲得某種轉基因植物的部分操作步驟。下列相關敘述錯誤的是
A．圖1子代Ⅰ與原種保持遺傳穩(wěn)定性，子代Ⅱ和子代Ⅲ選育原理相同
B．圖1子代Ⅲ選育顯性性狀需自交多代，子代Ⅴ可能發(fā)生基因突變和染色體變異
C．圖2中①過程的完成需要限制酶和DNA連接酶的參與
D．圖2中⑥可與多個核糖體結合，并可以同時翻譯出多種蛋白質
15．下圖是遺傳育種的一些途徑，下列有關分析錯誤的是（）
A．H→I、J→K都必須用到與G過程相同的技術操作
B．由F1→F2的育種原理是基因重組
C．圖中的遺傳育種途徑，A→B所表示的方法具有典型的不定向性
D．若要在較短時間內(nèi)獲得圖示新品種小麥，可選圖中E→F→G的育種方法
16．CD20抗原是一種B細胞分化抗原，可位于前B細胞和成熟B細胞上。CD20抗原基因在95%以上的B細胞性淋巴瘤中表達，而在造血干細胞、漿細胞和其他正常組織細胞中不表達。利妥昔單抗是針對CD20抗原的一種單克隆抗體，其與腫瘤細胞上的CD20抗原特異性結合后可以誘導腫瘤細胞凋亡。分析以上材料，下列敘述錯誤的是（）
A．利妥昔單抗能特異性識別CD20抗原并發(fā)揮作用
B．利妥昔單抗為腫瘤細胞提供了誘導細胞凋亡的信息
C．造血干細胞分化為成熟B細胞的過程中，CD20抗原基因進行表達
D．當受到病原體和相應輔助T細胞表面發(fā)生變化的特定分子刺激時B細胞即可活化
17．治療最兇險乳腺癌“HER2+”的抗體-藥物偶聯(lián)物(T-DM1)被納入2023年醫(yī)保目錄名單。T-DM1由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)形成。T-DM1作用機制如下圖，下列有關敘述錯誤的是（）
A．曲妥珠單抗的作用是將DM1準確帶至乳腺癌細胞
B．T-DM1被乳腺癌細胞吞噬后釋放DM1抑制微管聚合進而導致細胞凋亡
C．曲妥珠單抗制備中可選擇DM1作為抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫應答
D．利用同位素或熒光標記的曲妥珠單抗可定位診斷HER2+
18．我國科研人員利用大鼠、小鼠兩個遠親物種創(chuàng)造出世界首例異種雜合二倍體胚胎干細胞（AdESCs），過程如下圖所示。該細胞可分化成各種雜種體細胞，為研究不同物種性狀差異的分子機制提供了模型。相關敘述錯誤的是（）
A．單倍體囊胚1最可能由小鼠的卵母細胞經(jīng)體外誘導培養(yǎng)獲得
B．體外培養(yǎng)AdESCs需向培養(yǎng)液中添加動物血清等天然成分
C．該項技術突破生殖隔離獲得了哺乳動物遠親物種的雜種細胞
D．AdESCs的染色體組數(shù)與大鼠和小鼠體細胞融合的雜種細胞相同
19．CD47是一種在多種細胞中廣泛表達的跨膜糖蛋白，能夠與巨噬細胞膜上的受體結合，并抑制其吞噬作用。結腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6—5倍。科研人員嘗試合成抗CD47的單克隆抗體，并進一步探究其對巨噬細胞吞噬作用的影響。過程如下圖所示，下列分析正確的是（）
A．可用滅活病毒誘導②過程兩種細胞融合，該方法也適用于植物體細胞的雜交
B．③過程可利用CD47糖蛋白篩選出目標雜交瘤細胞
C．抗CD47單克隆抗體與巨噬細胞結合，增強其吞噬作用
D．在腫瘤細胞培養(yǎng)液中加入抗CD47抗體將抑制腫瘤細胞的增殖
20．6-磷酸葡萄糖脫氫酶（G-6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼。基因型為XFXS的女性體細胞中的兩個X染色體，會有一個隨機失活，且這個細胞的后代相應的X染色體均會發(fā)生同樣的變化。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理后先進行細胞的原代培養(yǎng)，再對不同的單細胞分別進行單克隆培養(yǎng)。分別對原代培養(yǎng)和單克隆培養(yǎng)的細胞進行G-6PD蛋白電泳檢測，結果如下圖所示。有關敘述錯誤的是（）。
A．原代培養(yǎng)的細胞中都含有XF基因和XS基因
B．用胰蛋白酶處理皮膚組織可使其分散成單個細胞
C．原代培養(yǎng)細胞電泳圖有2個條帶是因為同時檢測了多個細胞
D．單克隆培養(yǎng)的細胞1、2、4、5、8、9與3、6、7所含基因不同
21．近年來由于棲息地喪失和人為捕獵，亞洲黑熊數(shù)量驟減，近日動物學家在某林地發(fā)現(xiàn)了少量野生亞洲黑熊。他們期望通過體內(nèi)授精、胚胎移植等方法拯救亞洲黑熊，其過程如下圖。以下說法正確的是（）
A．胚胎工程一般采用促性腺激素釋放激素處理A使其超數(shù)排卵
B．A超數(shù)排卵排出的細胞必須生長到MII期才能與C的獲能后的精子發(fā)生受精
C．D受體雌性必須和動物園亞洲黑熊♀A、野生亞洲黑熊♀B同期發(fā)情處理
D．E后代遺傳性狀與A和C一致，F(xiàn)后代遺傳性狀與B一致
22．目前發(fā)現(xiàn)的雙胞胎有同卵雙胞胎、異卵雙胞胎和“半同卵雙胞胎”。1對“半同卵小姐弟雙胞胎”形成過程如圖所示，染色體全部來自父系的“合子”致死。下列相關敘述錯誤的是（）
A．“半同卵雙胞胎”的產(chǎn)生與透明帶反應和卵細胞膜反應異常有關
B．排卵是卵子從卵泡中排出的過程，圖中卵子發(fā)育到減數(shù)分裂Ⅱ的中期
C．細胞a的染色體組成為MP1,則細胞c的染色體組成為P1P1或MM
D．這對小姐弟來源于母親的染色體相同，來源于父親的常染色體可能不同
23．我國科學家利用體細胞誘導產(chǎn)生多能干細胞（iPS細胞），并將其注射到無法發(fā)育到成體階段的四倍體囊胚中，最終獲得克隆鼠，經(jīng)鑒定證實克隆鼠確實從iPS細胞發(fā)育而來，并可繁殖后代。實驗流程見圖，下列分析錯誤的是（）
A．小鼠iPS細胞在特定條件下可恢復受精卵時期的功能
B．四倍體囊胚可能因染色體數(shù)目變異而無法發(fā)育為成體
C．本實驗使用到體外受精、胚胎移植和胚胎分割等技術
D．克隆鼠的肝臟移植給黑鼠可避免免疫排斥反應
24．下列有關精子和卵細胞的發(fā)生以及受精作用的敘述錯誤的是（）
A．受精過程開始的標志是精子進入次級卵母細胞
B．防止多精入卵的兩道屏障是頂體反應和卵細胞質膜反應
C．精子的發(fā)生是依附在支持細胞上進行的
D．精子細胞質膜與卵子細胞質膜的融合依靠了細胞質膜的結構特點
25．澳大利亞布里斯班一對小姐弟被確認為全球第二對半同卵雙胞胎，發(fā)育成該對半同卵雙胞胎的受精卵形成過程如圖所示，圖3中染色單體分離后分別移向細胞的三個不同方向，從而分裂成A、B、C三個細胞，其中兩個細胞發(fā)育成姐弟二人。下列說法，正確的是（）
A．圖1表示卵子的異常受精過程，此時卵子發(fā)育到減數(shù)第一次分裂的中期
B．該卵子與2個精子受精，表明頂體反應和透明帶反應未能阻止多精入卵
C．若圖4細胞A包含父系和母系染色體組各1個，則細胞C含2個母系染色體組
D．這對小姐弟來源于母親的染色體一般相同，來源于父親的染色體可能不同
26．某家系甲、乙兩種單基因遺傳病的系譜圖如圖1所示?？刂苾刹〉幕蚓辉赮染色體上，已死亡個體無法知道其性狀。圖2是對控制甲病的基因通過PCR技術后用某限制酶處理并電泳的結果圖。外周血相對骨髓而言，指被造血器官釋放到血管里參與血液循環(huán)的血。下列相關敘述錯誤的是（）
A．乙病是常染色體隱性遺傳病的依據(jù)是Ⅱ?、Ⅱ?正常，生出了患乙病的Ⅲ??
B．判定甲病是伴X顯性遺傳病，Ⅱ?和Ⅱ?再生育一位健康女孩的概率是1/6
C．從電泳的結果可知致病基因的限制酶的切割位點移往原基因長的片段
D．Ⅱ?和一位家族無相關病史的女性結婚，抽取母體外周血進行基因檢測可以判斷胎兒是否患病
27．我國科學家研究發(fā)現(xiàn)，真核細胞的核基因表達調(diào)節(jié)機制——內(nèi)含子miRNA通過下調(diào)轉錄因子來調(diào)控基因的表達，圖甲和圖乙是發(fā)生在細胞核內(nèi)的正向和反向調(diào)節(jié)機制模式圖。請據(jù)所學知識分析，下列敘述錯誤的是（）
A．內(nèi)含子miRNA是在轉錄水平來調(diào)控基因的表達
B．內(nèi)含子miRNA調(diào)控基因的表達存在反饋調(diào)節(jié)機制
C．形成主基因mRNA和成熟miRNA需解旋酶和限制酶的作用
D．該研究為某些疾病如腫瘤提供多個靶點聯(lián)合治療
28．圖1為某單基因遺傳病的遺傳系譜圖，Ⅲ1表型未知。取圖1中四名成員的DNA，通過PCR擴增與該病基因相關的片段，并對產(chǎn)物酶切后進行電泳，結果如圖2。不考慮基因位于X、Y染色體的同源區(qū)段，下列敘述錯誤的是（）
A．Ⅱ3的基因型與Ⅱ5的基因型相同的概率是1/3
B．與正?；蛳啾?，突變基因可能發(fā)生了堿基的替換
C．該突變基因新增的酶切位點可能位于310bp的片段中
D．如果用PCR擴增Ⅲ1與此病基因相關的片段，酶切后電泳將產(chǎn)生三種條帶
29．CRISPR/Cas9是一種生物學工具，能夠通過“剪切和粘貼”脫氧核糖核酸（DNA）序列的機制來編輯基因組。CRISPR-Cas9基因組編輯系統(tǒng)由向導RNA（也叫sgRNA）和Cas9蛋白組成，向導RNA識別并結合靶基因DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個末端。這兩個末端通過“斷裂修復”重新連接時通常會有個別堿基對的插入或缺失，從而實現(xiàn)基因敲除，如圖所示。CRISPR-Cas9基因組編輯技術有時存在編輯出錯而造成脫靶。下列敘述正確的是（）
A．Cas9蛋白的功能與限制酶類似，能作用于脫氧核糖和堿基之間的化學鍵
B．設計sgRNA時只需要考慮識別區(qū)域的堿基序列不需要考慮sgRNA的長度
C．其他DNA序列含有與sgRNA互補配對的序列，造成sgRNA錯誤結合而脫靶
D．對不同目標DNA進行編輯時，使用Cas9蛋白和相同的sgRNA進行基因編輯
30．苯丙酮尿癥是由pH基因編碼的苯丙氨酸羥化酶異常引起的一種遺傳病。已知人群中染色體上pH基因兩側限制性內(nèi)切酶MspⅠ酶切位點的分布存在兩種形式（圖1）。一對夫妻婚后生育了一個患有苯丙酮尿癥的孩子，②號個體再次懷孕（圖2）。為確定胎兒是否正常，需要進行產(chǎn)前診斷，提取該家庭所有成員的DNA經(jīng)Msp I酶切后進行電泳分離，并利用熒光標記的pH基因片段與酶切片段雜交，得到DNA條帶分布情況如圖3.下列敘述正確的是（）
A．①號個體23Kb的DNA條帶中一定含有正常pH基因
B．②號個體23Kb的DNA條帶中一定含有正常pH基因
C．推測④號個體不一定是苯丙酮尿癥患者
D．④號個體為PAH基因雜合體的概率為2/3
31．Cre-lxP系統(tǒng)能實現(xiàn)特定基因的敲除（如圖1）。把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識別并切割的序列（lxP1和lxP2）串在一起，構建表達載體T（如圖2）。部分熒光蛋白基因會被Cre酶隨機“剪掉”，且兩個lxP1之間或兩個lxP2之間的基因，最多會被Cre酶敲除一次，剩下的部分得以表達，隨機呈現(xiàn)不同的顏色。下列說法錯誤的是（）
A．Cre酶切下一個待敲除基因的過程，需要破壞四個磷酸二酯鍵
B．若小鼠細胞含一個表達載體T（不含Cre酶），其肌肉組織細胞呈紅色
C．若小鼠細胞含一個表達載體T（含Cre酶），其腦組織細胞呈紅色或黃色或藍色
D．若小鼠細胞含兩個表達載體T（含Cre酶），其一個細胞內(nèi)可能隨機出現(xiàn)兩種顏色
32．脊髓性肌萎縮癥（SMA）是一種單基因遺傳病，主要由運動神經(jīng)元存活基因 1（SMN1）突變引起，SMA 在胎兒發(fā)育期常常不表現(xiàn)出結構畸形，出生后表現(xiàn)為肌無力和肌萎縮，具有嚴重的致死性?，F(xiàn)有一對正常夫妻，生出一個 SMA 男孩（染色體組成為 XXY）后他們進行了基因檢測，電泳結果如圖（正?；蛞粭l帶，致病基因為另一不同的條帶，不考慮 XY同源區(qū)段）。下列敘述正確的是（）
A．患病男孩同時患有常染色體隱性遺傳病和染色體異常遺傳病
B．SMA的致病原因是SMN1 基因堿基的缺失引起的基因突變
C．患病男孩的染色體異常是由于母親或父親減數(shù)分裂Ⅰ性染色體未分離導致的
D．SMA 遺傳病可以通過 B超檢查等產(chǎn)前診斷進行治療
33．PHB2蛋白具有抑制細胞增殖的作用。為初步探究某動物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細胞增殖的原因，研究者獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡稱phb2基因），利用大腸桿菌表達該蛋白。下圖為所用載體示意圖，phb2基因基因序列不含圖中限制酶的識別序列。下列敘述錯誤的是（）
A．將phb2基因與載體正確連接構建基因表達載體是培育轉基因大腸桿菌的核心工作
B．為使phb2基因與載體正確連接，在擴增的phb2基因兩端可分別引入PvuⅡ和EcRI限制酶的識別序列
C．在使phb2基因與載體連接時，在擴增的phb2基因兩端都引入PvuⅡ限制酶的識別序列可能導致目的基因環(huán)化
D．構建基因表達載體時，需選擇BamHI限制酶破壞氨芐青霉素抗性基因，以便對目的基因是否正常轉人進行檢測與鑒定
34．接種流感疫苗是目前普遍采用的預防流感的措施。流感病毒極易突變，流感疫苗需要根據(jù)流行毒株不斷更新。為研發(fā)廣譜且高效的流感疫苗，科研人員嘗試將不同流感毒株共有的某種抗原蛋白片段展示在T4噬菌體衣殼表面。下列敘述錯誤的是（）
A．可用滅活或減毒的流感病毒制成流感疫苗，誘導機體產(chǎn)生相應抗體
B．抗原呈遞細胞能攝取和加工處理病毒抗原，并呈遞給輔助性T細胞
C．廣譜型流感疫苗是利用流感病毒容易改變的抗原蛋白誘發(fā)免疫反應
D．若使T4噬菌體表面攜帶抗原蛋白，需將目的基因整合到其基因組中
35．黏粒是質粒的衍生物，cs序列是λ噬菌體將DNA包裝到噬菌體顆粒中所需的序列。如圖是黏粒作用原理的示意圖，其中ri是復制原點，AmpR是氨芐青霉素抗性基因。下列相關敘述正確的是（）
A．線狀重組黏粒進入受體菌后不會發(fā)生自身環(huán)化
B．ri和AmpR序列均便于篩選出含目的基因的受體菌
C．步驟①和②應使用同一種酶，以確保目的基因與黏粒正確連接
D．含目的基因的重組黏粒與λ噬菌體包裝蛋白混合后用于構建λ噬菌體
36．甜菜堿是一種滲透調(diào)節(jié)物質，可提高植物耐旱能力。科研人員將球形節(jié)桿菌中的cdA基因（合成某種酶催化膽堿生成甜菜堿）導入楊樹細胞內(nèi)，以提高其抗旱能力。已知膽堿在合成甜菜堿的過程中有副產(chǎn)物H2O2（具有較強氧化性）產(chǎn)生。下列相關敘述錯誤的是（）
CNT：正常供水的野生型；CT：正常供水的轉基因楊樹；DNT：干旱脅迫下的野生型；DT：干旱脅迫下的轉基因楊樹。
A．為保證實驗準確性，正常供水組和干旱脅迫組需要每天檢測栽培土壤的含水量并維持其恒定在兩個不同水平
B．甲圖顯示，野生型楊樹在干旱周時葉片中甜菜堿含量明顯上升，這說明其細胞內(nèi)也含一定數(shù)量的cdA基因
C．據(jù)甲、乙兩圖分析可知，干旱3周時轉基因楊樹葉片內(nèi)H2O2的分解速度快于野生型楊樹
D．在干旱脅迫5周復水1周后，兩種楊樹葉片內(nèi)甜菜堿和H2O2含量均下降，說明葉片細胞可能被過量H2O2氧化開始死亡
37．人類是乙肝病毒的唯一宿主，接種乙肝疫苗是預防乙肝病毒感染的最有效方法。下圖為乙肝病毒基因工程疫苗的生產(chǎn)和使用流程，質粒中LacZ基因可使細菌能夠利用加入培養(yǎng)基的物質X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍色，若無該基因，菌落則呈白色。下列有關敘述正確的是（）
A．過程①最好的限制酶選擇方案是BamHI和EcRV
B．質粒用限制酶BamHI和EcRV切割后產(chǎn)生4個游離的磷酸基團
C．過程②需要在培養(yǎng)基中加青霉素和X-gal以篩選藍色的大腸桿菌菌落
D．基因工程疫苗不會出現(xiàn)病毒的增殖和感染，安全性高
38．在胰島B細胞中，當胰島素原向胰島素轉變的過程中，furin酶可以識別并切除胰島素原分子中特定的氨基酸序列，從而完成胰島素的加工，產(chǎn)生具有生物活性的胰島素。某些糖尿病患者體內(nèi)合成的胰島素原結構異常，不能正常完成上述過程?；蛑委熢擃惢颊叩姆椒ㄖ皇牵簩⒁葝u素基因導入胰島B細胞以外的細胞，同時導入一些調(diào)節(jié)因子刺激該細胞再生，使之成為能分泌具生物活性胰島素的新B細胞。欲使胰島素基因的表達產(chǎn)物在新的B細胞中能被加工，產(chǎn)生生物活性，正確的操作是
A．導入胰島素基因時，同時導入furin酶基因
B．導入胰島素基因后，加入furin酶
C．使胰島素基因的表達產(chǎn)物中含furin酶切位點
D．改造furin酶基因，使其喪失識別和切除功能
39．水稻是我國最重要的糧食作物。稻瘟病是由稻瘟病菌（Mp）侵染水稻引起的病害，嚴重危害我國糧食生產(chǎn)安全。與使用農(nóng)藥相比，抗稻瘟病基因的利用是控制稻瘟病更加有效、安全和經(jīng)濟的措施。現(xiàn)有甲（R1R1r2r2r3r3）、乙（r1r1R2R2r3r3）、丙（r1r1r2r2R3R3）三個水稻抗病品種，抗?。≧）對感?。╮）為顯性，三對抗病基因位于不同染色體上。根據(jù)基因的 DNA 序列設計特異性引物，用 PCR 方法可將樣本中的 R1、r1、R2、r2、R3、r3 區(qū)分開。這種方法可用于抗病品種選育中基因型的鑒定。并且研究發(fā)現(xiàn)，水稻的抗病表現(xiàn)不僅需要自身抗病基因（R1、R2、R3等）編碼的蛋白，也需要 Mp 基因（A1、A2、A3等）編碼的蛋白。只有 R 蛋白與相應的 A 蛋白結合，抗病反應才能被激活。
用甲品種與感病品種雜交后，對F2不同植株的 R1、r1進行 PCR 擴增。已知 R1比r1 片段短。如下為擴增結果。請分析選項中正確的是：
A．水稻種植區(qū)的 Mp 是由不同基因型組成的群體。大面積連續(xù)種植某個含不同抗病基因的水稻品種，將會引起 Mp 種群基因頻率改變，使該品種抗病性逐漸減弱直至喪失，無法在生產(chǎn)中繼續(xù)使用
B．為了在較短時間內(nèi)將甲、乙、丙三個品種中的抗病基因整合，選育新的純合抗病植株，育種步驟的正確排序是先將甲×乙，得到F1R1r1R2r2r3r3植株×丙，得到不同基因型的子代，再用 PCR 方法選出 R1R1R2R2R3R3植株
C．若基因型為 R1R1r2r2R3R3和 r1r1R2R2R3R3的水稻，被基因型為 a1a1A2A2a3a3的 Mp侵染，推測這兩種水稻的抗病性表現(xiàn)依次為抗病、感病
D．研究人員每年用 Mp（A1A1a2a2a3a3）人工接種水稻品種甲（R1R1r2r2r3r3），幾年后甲品種喪失了抗病性，檢測水稻的基因未發(fā)現(xiàn)變異。推測甲品種抗病性喪失的原因是 Mp 的A1基因發(fā)生了突變。
40．利用山金柑愈傷組織細胞（2n）和早花檸檬葉肉細胞（2n）進行體細胞雜交可以得到高品質、抗逆性強的雜種植株。下圖是7組雜種植株核DNA和線粒體DNA來源鑒定的結果。下列分析正確的是（）
A．山金柑愈傷組織細胞沒有細胞壁，早花檸檬葉肉細胞用酶解法去除細胞壁后才能與前者融合
B．用滅活的病毒誘導兩種細胞原生質體的融合，依賴于細胞膜的流動性
C．可通過觀察融合后細胞的顏色進行初步篩選
D．雜種植株是四倍體，其核基因只來自早花檸檬，線粒體基因只來自山金柑
41．新型冠狀病毒是一種 RNA 病毒，極易發(fā)生變異，其通過表面棘突蛋白（S 蛋白）的受體結合域（RBD）與人體細胞表面的ACE2受體相互作用而感染人體細胞。科學家設計了一種自然界中不存在的蛋白質LCB1，可與S蛋白RBD緊密結合，以干擾新型冠狀病毒的感染。下列有關說法，錯誤的是（）
A．LCB1的作用效應與抗S蛋白抗體類似
B．可用蛋白質工程進行LCB1的生產(chǎn)
C．新型冠狀病毒侵入人體后可在內(nèi)環(huán)境中大量增殖
D．易感人群即使注射疫苗也仍然具有被感染的可能
42．玉米中賴氨酸含量比較低的原因是賴氨酸合成過程中的兩種關鍵酶——天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的活性，受細胞內(nèi)氨基酸濃度的影響較大。賴氨酸達到一定濃度時會抑制這兩種酶的活性。為了提高玉米中的賴氨酸含量，興趣小組提出的下列方法不可行的是（）
A．用紫外線處理玉米愈傷組織，篩選有利突變體
B．將富含賴氨酸的蛋白質編碼基因導入玉米細胞
C．通過基因定點突變技術修飾天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶基因的個別堿基
D．利用蛋白質工程直接改造天冬氨酸激酶和二氫吡啶二羧酸合成酶的空間結構
43．抗體酶又稱催化抗體，是一類免疫球蛋白，其結構如下圖所示，它既具有相應的免疫活性，又能像酶那樣催化某種化學反應。下列有關敘述錯誤的是（）
A．抗體酶與抗原、底物的結合均具有專一性的特點
B．抗體酶可使藥物的前體物質在腫瘤組織中水解為活性分子，從而起殺傷作用
C．抗體酶能阻止病毒與靶細胞結合的機理可能是選擇性地使病毒外殼蛋白發(fā)生水解
D．可通過蛋白質工程對特異抗體的抗原結合位點進行空間改造，使其獲得催化功能
44．基因定點突變的目的是通過定向地改變基因內(nèi)一個或少數(shù)幾個堿基來改變多肽鏈上一個或幾個氨基酸。該技術是蛋白質工程的重要技術。下圖為利用PCR技術進行定點突變的流程，相關敘述錯誤的是（）
A．由于基因決定蛋白質，因此要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成
B．酶① 應為耐高溫DNA聚合酶，引物X和Y應該為引物2和4
C．可以將引物1、引物2、引物3和引物4置于同一個反應系統(tǒng)中同時進行第一個階段的反應，進而縮短實驗時間
D．利用圖示流程技術可以將兩個不同的基因拼接到一起
45．基因定點突變的目的是通過定向地改變基因內(nèi)一個或少數(shù)幾個堿基來改變多肽鏈上一個或幾個氨基酸。該技術是蛋白質工程的重要技術。下圖為利用PCR技術進行定點突變的流程，相關敘述錯誤的是（）
A．由于基因決定蛋白質，因此要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成
B．酶A應為耐高溫DNA聚合酶，從4中引物中應該選擇引物1和4進行PCR
C．可以將引物1、引物2、引物3和引物4置于同一個反應系統(tǒng)中同時進行第一個階段的反應，進而縮短實驗時間
D．利用圖示流程技術可以將兩個不同的基因拼接到一起
二、多選題
46．雙層平板法是一種利用底層和上層均為牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基對噬菌體進行檢測的常用方法。具體操作如下：先在無菌培養(yǎng)皿中倒入瓊脂含量是2%的培養(yǎng)基凝固成底層平板后，將瓊脂含量是1%的培養(yǎng)基融化并冷卻至45～48℃，然后加入宿主細菌和待測噬菌體稀釋懸液的混合液，充分混勻后立即倒入底層平板上形成雙層平板。培養(yǎng)一段時間后，在上層平板上看見由于噬菌體侵染周圍細菌而使宿主細胞裂解死亡形成的空斑即噬菌斑。通常一個噬菌斑來自原液中的一個噬菌體。根據(jù)噬菌斑的數(shù)目計算原液中噬菌體的數(shù)量，如圖所示。下列敘述正確的是（）
A．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可作為選擇培養(yǎng)基選擇出噬菌體的宿主細胞
B．加入混合液后，使用滅菌后的涂布器將混合液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面
C．上層培養(yǎng)基中瓊脂濃度較低，因此形成的噬菌斑較大，更有利于計數(shù)
D．雙層平板法獲得的噬菌斑不易發(fā)生上下重疊現(xiàn)象
47．研究發(fā)現(xiàn)，鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株在基本培養(yǎng)基平板上不能生長，如果發(fā)生回復突變成原養(yǎng)型（其營養(yǎng)要求在表現(xiàn)型上與野生型相同）后則能生長。誘變劑A只有進入機體并在肝臟的解毒過程中才能形成有害的誘變物質?？梢允褂眉毦鸂I養(yǎng)缺陷型是否發(fā)生回復突變來檢測食品樣品中是否存在誘變劑A。將疑似含有誘變劑A的食品樣品中加入新鮮鼠肝臟勻漿液，經(jīng)一段時間保溫后吸入小圓形濾紙片中，然后將圓形濾紙片貼在已接種了組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株且含有少量組氨酸的基本培養(yǎng)基上。經(jīng)培養(yǎng)后，觀察濾紙片周圍菌落的生長情況。下列有關說法正確的是（）
A．若含有少量組氨酸的基本培養(yǎng)基上沒有產(chǎn)生大量菌落，則說明食品樣品中可能不含誘變劑A，不含有組氨酸的基本培養(yǎng)基上接種組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株出現(xiàn)少量菌落可能是自發(fā)突變的結果
B．食品樣品加入新鮮鼠肝臟勻漿液保溫一段時間的目的是誘發(fā)肝臟突變產(chǎn)生能夠合成組氨酸的相關酶
C．若濾紙片周圍出現(xiàn)了抑制圈，抑制圈外產(chǎn)生大量菌落，推測食品樣品中可能含有高濃度誘變劑A
D．組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株突變?yōu)樵B(yǎng)型是在食品樣品中誘變劑A的作用下等位基因發(fā)生回復突變的結果
48．三糖鐵（TSI）培養(yǎng)基含有牛肉膏、蛋白胨、蔗糖、乳糖、微量葡萄糖、硫酸亞鐵、氯化鈉、酚紅、瓊脂等成分，可根據(jù)觀察單一細菌對三種糖的分解能力及是否產(chǎn)生硫化氫，來鑒別細菌的種類。三糖鐵（TSI）瓊脂試驗方法是：使用筆直的接種針挑取待測菌落，將接種針平穩(wěn)刺入三糖鐵固體斜面培養(yǎng)基內(nèi)，然后沿原穿刺途徑慢慢抽出接種針，最后在斜面上進行“之”字劃線，36℃下培養(yǎng)18～24h，觀察實驗結果。酚紅在酸性條件下顯黃色，在堿性條件下顯紅色。細菌產(chǎn)生的硫化氫與鐵鹽反應生成黑色沉淀。下列敘述正確的是（）
A．穿刺或劃線的目的是為了將純培養(yǎng)物進行二次傳代培養(yǎng)，須嚴格控制交叉污染
B．若培養(yǎng)基出現(xiàn)黑色沉淀，可推測該細菌能夠分解牛肉膏、蛋白胨
C．若細菌能分解乳糖和葡萄糖而產(chǎn)酸、產(chǎn)CO2，推測斜面為黃色、底層為紅色且有氣泡
D．若底層穿刺線四周出現(xiàn)擴散生長現(xiàn)象，可推測細菌是可以運動的
49．人類病原微生物在人與實驗動物上癥狀表現(xiàn)和代謝差異大，導致實驗結果無法準確應用于人體。人源化肝臟嵌合鼠的成功構建提供了一種新的實驗動物模型，下圖為建立人源化肝臟嵌合鼠的主要流程，相關敘述正確的有（）
A．選擇免疫缺陷的小鼠可以防止其對肝毒性基因的免疫排斥
B．可將iPS細胞在一定條件下定向分化成有功能的肝細胞，用于移植
C．人源化肝臟嵌合鼠是含有人、鼠各兩個染色體組的四倍體
D．人源化肝臟嵌合鼠適用于人類病毒性肝炎的研究
50．現(xiàn)已建立一種簡便快捷、適用于諾如病毒常見流行株的膠體金免疫層析檢測方法。即用常見流行株GII.4型諾如病毒的衣殼蛋白P顆粒作為抗原利用小鼠制備單克隆抗體1B10（濃度為5 mg/mL）和1D6（濃度2.2 mg/mL）。利用羊制備羊抗鼠抗體作為質控線組裝成膠體金試紙條（見圖）。下列說法正確的是（）。
A．單克隆抗體1B10和單克隆抗體1D6特異性識別同一種抗原決定簇
B．膠體金試紙條上使用的三種抗體由同一種雜交瘤細胞合成并分泌
C．檢測時，在控制線和檢測線出現(xiàn)兩條色帶時，表示結果陽性
D．膠體金試紙條可以用來檢測所有類型諾如病毒感染導致的胃腸炎
51．生物科技已有廣泛的應用，下列相關敘述正確的是（）
A．基因工程可實現(xiàn)同一基因在不同生物體內(nèi)表達，這表明生物界在遺傳物質種類及遺傳密碼方面具有統(tǒng)一性
B．單克隆抗體的制備過程中需要進行嚴格的細胞篩選，這表明產(chǎn)生抗體的細胞毒性T細胞具有多樣性和特異性
C．胚胎移植時需要選擇合適發(fā)育時期的胚胎，這與胚胎發(fā)育中細胞分化程度及胚胎是否處于游離狀態(tài)有重要關系
D．生態(tài)修復工程可幫助受損生態(tài)系統(tǒng)更快恢復原有結構與功能，移栽綠植需要適應當?shù)丨h(huán)境且無生物入侵危害
52．基因組印記（通過甲基化實現(xiàn)受精卵中來自雙親的兩個等位基因一個表達另一個不表達）阻礙了哺乳動物孤雌生殖的實現(xiàn)。某研究團隊利用甲基化酶、去甲基化酶以及基因編輯技術增加了兩個父系基因組印記控制區(qū)域的甲基化，以及母系控制區(qū)域的5個去甲基化，經(jīng)修飾的卵母細胞經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)后進行胚胎移植，成功培育出可育的孤雌小鼠，部分過程如下圖所示。相關敘述錯誤的是（）
A．基因組印記導致一對等位基因中的一個發(fā)生突變而不能表達
B．卵母細胞的體外培養(yǎng)除需加入血清等營養(yǎng)，還需加入干擾素
C．生育出的孤雌小鼠為只含有母系基因的單倍體小鼠
D．與野生型小鼠相比孤雌小鼠的遺傳多樣性降低，野外生存能力下降
53．瓊脂糖凝膠電泳中染色方式根據(jù)電泳與染色的前后關系分為前染色與后染色，前染色是將染色劑預混在瓊脂糖凝膠中，DNA 在移動過程中結合染色劑形成染色劑-DNA復合體，電泳過程中可以隨時觀察 DNA 移動情況；后染色是電泳結束后再單獨染色，染色劑用量較太。將某 DNA樣品均分為三份，進行瓊脂糖凝膠電泳，結果如下圖所示。下列有關說法正確的是（）
A．DNA 的遷移速率與自身分子大小和構象、凝膠濃度以及是否結合染色劑等因素有關
B．向熔化稍冷卻的瓊脂糖溶液中加入核酸染料后制成凝膠屬于后染色
C．后染色較前染色 DNA 遷移速度快
D．對于大于3000bp的DNA片段，EB染色的分辨效果好于 GelRed染色
54．交錯PCR能實現(xiàn)同源基因的重組（如圖，僅示單鏈）。第一輪延伸15s，獲得短產(chǎn)物①②。在第二輪開始時（95℃）產(chǎn)物①②與原來模板分開，然后（55℃）隨機地與不同模板交錯結合，延伸15s，合成交錯產(chǎn)物③④。每一輪擴增僅延伸一小段，經(jīng)過多輪“產(chǎn)物-模板”交替結合、延伸，最終擴增出交錯重組基因產(chǎn)物。相關敘述正確的是（）
A．交錯PCR原理是DNA半保留復制
B．交錯PCR延伸溫度設定為55℃可增加交錯次數(shù)
C．上一輪交錯產(chǎn)物需與模板鏈嚴格配對才能繼續(xù)下一輪擴增
D．若交錯循環(huán)20輪，一共產(chǎn)生220個DNA分子
55．Sanger測序法是第一代基因測序方法，測序原理如圖所示，其中ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP(統(tǒng)稱為ddNTP)為雙脫氧核苷酸，其2、3號碳原子上沒有氧原子。下列相關說法正確的是（）
A．被測模板的序列應該為5'—CTAAGCTCGACT—3'
B．ddNTP可以連接到延伸的子鏈中，但此后子鏈將無法延伸
C．合成的子鏈中最長的類型會出現(xiàn)在第一組實驗中
D．電泳結果共出現(xiàn)了12條長短不同的條帶，但被測模板實際堿基數(shù)要超過12個
三、非選擇題
56．發(fā)酵工程是指采用工程技術手段，利用生物（主要是微生物）和有活性的離體酶的某些功能，為人類生產(chǎn)有用的生物產(chǎn)品，或直接用微生物參與控制某些工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術。與傳統(tǒng)發(fā)酵相比，發(fā)酵工程所用發(fā)酵菌往往是優(yōu)良菌種，分離、篩選、純化優(yōu)良菌種是發(fā)酵工程的重要環(huán)節(jié)。請回答下列問題。
(1)分離、篩選、純化優(yōu)良菌種時，需要先配制固體培養(yǎng)基或液體培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基在成分上的差異一定有。
(2)進行圖1所示操作時，應在酒精燈火焰旁進行，原因是。培養(yǎng)階段，進行圖2所示操作的主要目的是。培養(yǎng)階段，會預留一部分不接種的平板，目的是。
(3)工業(yè)化生產(chǎn)酸奶，需用到優(yōu)良的乳酸菌。從分離出的乳酸菌中篩選出優(yōu)良的乳酸菌，可將乳酸菌樣液經(jīng) 后，再涂布到含CaCO3的特定培養(yǎng)基上（不透明），在適宜條件下培養(yǎng)一段時間后，挑選的單菌落可視為由優(yōu)良乳酸菌形成的。
(4)某興趣小組利用抽樣檢測法統(tǒng)計酵母菌樣液中活菌的數(shù)量時，先向樣液中滴加適量臺盼藍染液（臺盼藍染液對樣液體積的影響忽略不計），這樣處理的原理及目的是。
57．三峽水庫運行后，沿岸的生態(tài)系統(tǒng)平衡遭到了巨大挑戰(zhàn)。水位周期性漲落形成了消落帶，水土流失導致植被難以生長。有學者提出桑樹抗干旱、耐水淹，有望作為消落帶生態(tài)系統(tǒng)恢復候選植被。同時，利用微生物菌肥，可促進桑樹在消落帶中生長。為分離、篩選產(chǎn)吲哚乙酸的桑樹根際細菌，并檢測對不同環(huán)境耐受性，研究人員進行了以下操作。
步驟一：樣品的采集與保存：將緊貼桑樹根表的土壤作為桑樹根際土壤，收集至無菌封口袋中編號，4℃保存?zhèn)溆谩?br>步驟二：桑樹根際細菌的分離：利用梯度稀釋涂布平板法分離細菌，如圖。
步驟三：桑樹根際細菌的純化：將上述平板置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，逐日觀察。待平板上長出新菌落后進行純化培養(yǎng)。
步驟四：篩選產(chǎn)吲哚乙酸（IAA）的根際細菌。結果如下圖（IAA溶液與Salkawski發(fā)生顯色反應，呈粉紅色）。
步驟五：檢測菌株對不同環(huán)境耐受性。
請回答下列問題。
(1)步驟一中從根表土壤取樣，不從深層土壤取樣，其原因是。
(2)步驟二圖中的液體量分別是、，涂布時所采用的工具是。
(3)步驟三中需將平板倒置培養(yǎng)的原因是。
(4)步驟四中A、B的處理分別表示、，初步判斷（HGS7/HWS1菌株）產(chǎn)IAA的能力更強。
(5)步驟五的結果如下圖（OD值表示菌體濃度）。
HGS7、HWS1兩種菌株中對環(huán)境適應性較強的是，理由是。
(6)施用篩選出的根際細菌能促進桑樹生長的原因有；與施用化學肥料相比，施用微生物菌肥的優(yōu)點是。
58．近年來，高氨氮廢水的處理不當以及持續(xù)排放，導致了水體污染的日益嚴重。生物脫氮法相對于物化法來說，工藝簡單、處理成本低、無二次污染，是較好的氨氮廢水處理方法。某科研團隊從湖底污泥中分離、篩選出能降解氨氮的菌株，并研究其降解氨氮的最適條件，包括培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間、起始的pH等，實驗步驟如下。回答下列問題：
（1）步驟一：將1g水底污泥加入9 mL無菌水中制成懸液，接種至100mL液體培養(yǎng)基中，于30℃的溫度條件下在搖床中培養(yǎng)7天。期間，每天向培養(yǎng)基中加入1mL濃度為5％的（NH4）2SO4溶液，這項操作的目的是。
（2）步驟二：將培養(yǎng)后的菌液用法涂布到分離培養(yǎng)基中，倒置于30℃的恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)至長出菌落。若平板中菌落過于密集，應進一步。反復分離純化，至同一平板中只出現(xiàn)同種形態(tài)的菌落。
（3）步驟三：將篩選分離后的各菌株分別接種到氨氮含量為120 mg·L﹣1的液體篩選培養(yǎng)基（模擬高濃度氨氮水樣）中，在30℃的溫度條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24小時后，取培養(yǎng)液進行離心10分鐘，取其上清液，，從而計算出各個降解菌的氨氮降解率。
（4）步驟四：將篩選出的最優(yōu)菌種于30℃的溫度條件下在搖床中培養(yǎng)24小時。每隔2小時對培養(yǎng)基進行測定，研究降解氨氮的最佳培養(yǎng)時間。下圖是某菌株的氨氮降解率曲線圖，據(jù)圖可以得到的結論有（寫出兩點）。
（5）步驟五：若要探究所分離純化出的菌株對氨氮降解的最適培養(yǎng)溫度，實驗思路是：。
59．人參和西洋參是五加科人參屬的藥用植物，它們含有的人參皂苷具有抗腫瘤等作用?？蒲腥藛T選用人參和西洋參有性雜交獲得的雜種胚細胞以及人參種子胚、西洋參種子胚的愈傷組織進行懸浮細胞培養(yǎng)，建立其單細胞株系并對三者的部分特性進行比較研究，下圖1是主要流程：
(1)人參與西洋參雜交存在花期不遇、F1代結實率低及難獲得F2代的現(xiàn)象，說明兩者之間存在，是兩個不同的物種。人參和西洋參含有人參皂苷，可以作為藥物，體現(xiàn)了生物多樣性的價值。
(2)過程①稱為。過程④優(yōu)化懸浮細胞培養(yǎng)體系，最重要的條件是蔗糖濃度的篩選，蔗糖濃度過低和過高均不利于懸浮細胞的培養(yǎng)，原因是。
(3)科研人員研究了三種愈傷組織中的人參皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，結果見下圖2，其中Re具有治療心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。雜種胚中的大多數(shù)種類的皂苷的含量均高于其他兩種，這體現(xiàn)了。若要獲得具有抗癌作用的藥物應優(yōu)先選擇的愈傷組織。
(4)科研人員繼續(xù)研究了Rg3和常見的化療藥物5-FU對腫瘤的抑制效果：
①首先培養(yǎng)胃癌細胞，培養(yǎng)液中加入胎牛血清的目的是。培養(yǎng)條件為5%CO2，作用是、飽和濕度，溫度為37℃。將準備好的胃癌細胞懸濁液皮下接種于小鼠裸鼠，每只裸鼠接種0.1mL細胞懸濁液。接種后2周可見背部長出腫塊，證明接種成功。
②將上述40只裸鼠隨機分為四組，生理鹽水組對照組、5-FU組、Rg3組和5-FU+Rg3組（聯(lián)合給藥組）。各組均采用腹腔注射給藥，給藥前測定腫瘤的體積，給藥后每2日測量1次腫瘤體積。請根據(jù)圖3寫出計算腫瘤體積變化的公式：。根據(jù)實驗結果可以得出的結論有。
60．我國是個農(nóng)業(yè)大國，加快建設農(nóng)業(yè)強國，強化生物育種，捍衛(wèi)種子安全是我國當前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和發(fā)展的重要問題。生物的變異理論常用于指導農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，植物突變育種是指人為利用物理、化學因素，使植物發(fā)生遺傳變異，從而獲得優(yōu)良品種或品系的一種育種方法?；卮鹣铝袉栴}：
(1)玉米（2n=20）是我國主要糧食作物之一，常用單倍體育種技術選育玉米新品種。單倍體玉米植株的一個染色體組含有條染色體，其在減數(shù)分裂中染色體不能正常聯(lián)會，導致引起高度不育。
(2)油菜是白菜（染色體組為 AA，n=10）與甘藍（染色體組為CC，n=9）通過種間雜交產(chǎn)生的異源四倍體。科研人員以蘿卜（染色體組為 RR，n=9）和油菜為親本雜交，通過如圖所示途徑獲得油菜新品種。
①般情況下，種間植物的基因不能自由交流，原因是種間植物存在。油菜與蘿卜雜交獲得F?,F? （填“可育”或“不可育”）。
②雜合植物 BC1的染色體組成是。）BC2植株的染色體數(shù)目可能在條之間，原因是。
(3)科研人員用 X射線處理女婁菜（XY 型）種子，種植后得到了一株金黃色的突變雄株。研究發(fā)現(xiàn)，突變株是染色體上的1個基因突變引起的。為進一步了解突變基因的顯隱性關系，以及突變基因在染色體的位置，請設計實驗方案，寫出實驗思路：。
61．癌癥的免疫療法通過重新激活抗腫瘤的免疫細胞，克服腫瘤的免疫逃逸，在癌癥治療方法中取得越來越突出的地位，科研人員在不斷研究中發(fā)現(xiàn)多種免疫治療方法的結合是提高治療效果的途徑之一。
(1)癌細胞由于突變導致其表面物質發(fā)生改變，如某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白PSMA和PD-L1，如圖PD-L1能抑制T細胞的活化，使癌細胞發(fā)生免疫逃逸。臨床上可利用PD-1的單克隆抗體進行癌癥治療，據(jù)圖1推測，其原因是。但此種方法對一些腫瘤無效。
(2)CD28是T細胞表面受體，T細胞的有效激活依賴于CD28在癌細胞與T細胞結合部位的聚集。因此，科研人員嘗試構建既能結合PSMA，還能結合CD28的雙特異性抗體PSMA×CD28，誘導T細胞定向殺傷癌細胞，如下圖2。
制備過程為：先將分別注射到小鼠體內(nèi)，分離出B淋巴細胞，誘導其與小鼠的細胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細胞，再誘導兩種細胞融合。成功融合的細胞會表達兩種L鏈和兩種H鏈，由于而產(chǎn)生多種抗體，因此還需進行篩選才能獲得所需的雙特異性抗體PSMA×CD28。
(3)科研人員將癌細胞和T細胞共同培養(yǎng)，加入不同抗體，比較不同抗體對T細胞活化的作用。實驗各組由活化T細胞產(chǎn)生的細胞因子IL-2含量如下圖3，結果說明。
(4)共同培養(yǎng)癌細胞和T細胞，經(jīng)處理形成圖4所示的細胞結合部位，再均分為兩組，A組中加入非阻斷性PD-1單抗（與PD-1結合后，PD-1仍可和PD-L1結合），B組加入正常PD-1單抗，兩組均加入藍色熒光標記的CD28單抗，觀察熒光分布，結果如下圖4。請據(jù)此實驗解釋（3）中雙特異性抗體PSMA×CD28與PD-1單抗聯(lián)合使用對T細胞激活的影響。
62．調(diào)查顯示，病毒性傳染病嚴重危害山羊健康，且多種病原體混合感染的情況較普遍。干擾素是對抗病毒感染中發(fā)揮重要作用的蛋白質，因此通過疫苗接種控制傳染病暴發(fā)流行的同時，積極研究廣譜、高效、安全的干擾素對山羊病毒性傳染病的防治有著十分現(xiàn)實的意義，其基本流程如下。
(1)獲取干擾素基因：從下列①~⑧項中選擇合適選項填入空格處，使方案可行。
①肝細胞的總RNA；②單核細胞的所有DNA；③引物；④RNA酶抑制劑；
⑤逆轉錄酶；⑥dNTP；⑦TaqDNA聚合酶；⑧DNA連接酶
設計方案：獲取作為模板，同時還需要的實驗材料或試劑有。
(2)構建重組表達載體：將獲得的含目的基因的DNA片段（不含限制酶的識別序列）進行PCR，利用的引物序列如下：
引物1：5'-CATGCCATGGCAGGCTGCCACCTGCCTCACATCCA-3'；
引物2：5'-CGGTACCTTCAGTCCTTCCTCTGGATCT-3'。
經(jīng)大量擴增后，用限制酶NcI（5'-C↓CATGG-3'）對獲得的含目的基因的DNA片段進行酶切，目的基因的DNA片段上有個黏性末端，理由是。作為表達載體的質粒上，除了標記基因和多個限制酶的識別序列外，還需要有（寫2種即可）。質粒與目的基因用合適的限制酶處理后進行拼接。
(3)大腸桿菌的轉化和表達：將大腸桿菌放于低溫、低濃度的溶液中，成為感受態(tài)細胞，再將大腸桿菌與重組DNA分子混合，最后進行短暫的處理，使外源DNA轉入大腸桿菌，然后將重組菌在適宜條件下，誘導其表達干擾素，最后進行產(chǎn)物分離保存。
(4)干擾素的抗病毒活性檢測：先將一種山羊的腎細胞接種于多孔板，培養(yǎng)至單層貼壁細胞，再將其隨機均分為6組（A~F），其中C~F組加入不同濃度的干擾素，A~F組置于適宜條件下培養(yǎng)24小時后，組加入病毒，其中以組為陽性對照，每隔12小時觀察細胞病變情況。結果是A組細胞大小形態(tài)正常，貼壁良好，B組細胞逐漸出現(xiàn)壞死脫落，C~F組的細胞不同程度的少量壞死脫落，而且，由此可見，干擾素能以濃度依賴的方式顯著抑制病毒誘導的細胞病變。
63．磷脂酸（PA）是調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育和逆境響應的重要信使物質。為了解植物細胞中PA的動態(tài)變化，研究人員用無縫克隆技術將高度專一的PA結合蛋白（PABD）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因融合，構建有效監(jiān)測細胞PA變化的熒光探針，并測定擬南芥細胞內(nèi)PA含量。無縫克隆技術連接DNA片段的機理和構建熒光探針表達載體過程如圖所示，請回答下列問題。
(1)無縫克隆時，T5核酸外切酶沿的方向水解DNA，其目的是形成。T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而過程①選擇的溫度為50℃，目的是降低酶活性，。
(2)過程②兩個片段退火后存在“缺口”的原因是，過程③所需的酶有。
(3)與傳統(tǒng)的酶切再連法相比無縫克隆技術構建重組質粒的優(yōu)點有___。
A．不受限制酶切位點的限制B．不會引入多余堿基
C．操作時間短，成功率高D．有利于多個小片段
(4)PCR擴增PABD基因時需依據(jù) 設計引物R1。據(jù)圖分析擴增目的片段的引物F1和R2對應于下表中的。
(5)利用農(nóng)桿菌花序侵染法轉化擬南芥，將獲得的種子（T1）進行表面消毒，均勻鋪在含有的MS培養(yǎng)基上進行篩選和鑒定。T1代自交獲得的T2代幼苗的抗性表現(xiàn)和比例為，說明T1為單位點插入的轉基因株系。
(6)通過觀測轉基因擬南芥根尖細胞中，了解PA的動態(tài)變化。
64．近期，人類第一款基于CRISPR技術的Casgevy療法獲準用于治療鐮狀細胞貧血等疾病。相關信息如下圖1和圖2所示。請回答下列問題：
(1)鐮狀細胞貧血是一種遺傳病，患者β珠蛋白分子中纈氨酸代替了谷氨酸，致使去氧血紅蛋白溶解度降低并聚集形成纖維結構，壓迫細胞膜致紅細胞彎曲成鐮刀狀。由此說明控制生物體的性狀。
(2)γ基因啟動子上游的調(diào)控序列中含有BCL11A蛋白結合位點，BCL11A蛋白是一種轉錄因子，可抑制胎兒血紅蛋白的合成。出生后，隨著個體的發(fā)育進行，BCL11A蛋白的，γ基因的表達逐漸被。鐮狀細胞貧血患者一般在出生一年后出現(xiàn)癥狀，而嬰兒通常無癥狀，請嘗試解釋原因：。
(3)據(jù)圖2判斷，Cas9是一種酶，能催化鍵水解，但需要依賴識別基因組DNA上的靶點序列，才能使DNA分子在特定序列附近被切斷。
(4)Casgevy療法大致過程：從患者體內(nèi)提取合適的造血干細胞，通過電穿孔導入特異性靶向BCL11A增強子的CRISPRCas9基因編輯系統(tǒng)，獲得細胞，恢復胎兒血紅蛋白的合成。與骨髓移植相比，Casgevy療法的突出優(yōu)點是。
65．種子大小是作物重要的產(chǎn)量性狀。研究者對野生型擬南芥（2n=10）進行誘變篩選到一株種子增大的突變體。通過遺傳分析和測序，發(fā)現(xiàn)野生型DAI基因發(fā)生一個堿基G到A的替換，突變后的基因為隱性基因，據(jù)此推測突變體的表型與其有關，開展相關實驗。
回答下列問題：
(1)擬采用農(nóng)桿菌轉化法將野生型DAI基因轉入突變體植株，若突變體表型確由該突變造成，則轉基因植株的種子大小應與植株的種子大小相近。
(2)用PCR反應擴增DAI基因，用限制性核酸內(nèi)切酶對PCR產(chǎn)物和進行切割，用DNA連接酶將兩者連接。為確保插入的DAI基因可以正常表達，其上下游序列需具備。
(3)轉化后，T-DNA（其內(nèi)部基因在減數(shù)分裂時不發(fā)生交換）可在基因組單一位點插入也可以同時插入多個位點。在插入片段均遵循基因分離及自由組合定律的前提下，選出單一位點插入的植株，并進一步獲得目的基因穩(wěn)定遺傳的植株（如圖），用于后續(xù)驗證突變基因與表型的關系。
①農(nóng)桿菌轉化T0代植株并自交，將T1代種子播種在選擇培養(yǎng)基上，能夠萌發(fā)并生長的陽性個體即表示其基因組中插入了。
②T1代陽性植株自交所得的T2代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基，選擇陽性率約 %的培養(yǎng)基中幼苗繼續(xù)培養(yǎng)。
③將②中選出的T2代陽性植株（填“自交”、“與野生型雜交”或“與突變體雜交”）所得的T3代種子按單株收種并播種于選擇培養(yǎng)基，陽性率達到 %的培養(yǎng)基中的幼苗即為目標轉基因植株。為便于在后續(xù)研究中檢測該突變，研究者利用PCR擴增野生型和突變型基因片段，再使用限制性核酸內(nèi)切酶X切割產(chǎn)物，通過核酸電泳即可進行突變檢測，相關信息見下，在電泳圖中將酶切結果對應位置的條帶涂黑。
組別
培養(yǎng)基成分
a
蛋白胨、酵母提取物、甘露醇、水
b
葡萄糖、尿素、NaCl、K2HPO4、酚紅、瓊脂糖
c
礦質元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂
A：?
B：?
C：HGS7菌株發(fā)酵液+Salkawski
D：HWS1菌株發(fā)酵液+Salkawski
1
5'-TCCGGACTCAGATCTCGAGC-3'
2
5'-AGCTATAGTTCTAGATCTAGATTAACTAGTCTTAGTGGCGTC-3'
3
5'-TATCGATGGCGCCAGCTGAGGATGGTGAGCAAGGGCGA-3'
4
5'-GCTCGAGATCTGAGTCCGGACTTGTACAGCTCGTCCA-3'

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