1．成都水井坊是我國(guó)最古老的釀酒遺址。其特色之一是在小麥、高粱中先后拌入糖曲和酒曲，發(fā)酵后進(jìn)行“量質(zhì)摘酒”——以如圖所示的生鐵“天鍋”把酒頭摘出后，邊摘邊嘗，優(yōu)中選優(yōu)。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．小麥、高粱中含有的淀粉多糖為高分子化合物
B．“天鍋”材料中只含金屬元素
C．如圖中“摘酒”操作是指通過(guò)蒸餾分離出乙醇溶液
D．通過(guò)“量質(zhì)摘酒”可得到不同酒精度的酒
2．《黃帝內(nèi)經(jīng)》中提到：“米酒甘甜，入肝經(jīng)，能補(bǔ)血行氣?！蹦称放频奶鹁魄兄挥行柩跣透咕?，這種菌促進(jìn)淀粉水解的能力強(qiáng)，產(chǎn)生酒精的能力較弱，因而用其制作的甜米酒甜味明顯又略帶酒香。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．可用根霉菌和酵母菌一起進(jìn)行有氧發(fā)酵來(lái)提高甜米酒的酒精濃度
B．用適宜的選擇培養(yǎng)基即可獲得某種用于釀制米酒的優(yōu)質(zhì)根霉菌種
C．蒸好的米飯放至室溫再添加甜酒曲可以防止根霉菌因高溫而失活
D．用純根霉菌制作的甜米酒中只有酒精一種代謝產(chǎn)物因而更加安全
3．實(shí)驗(yàn)小組從甲醛含量豐富的工廠活性污泥中篩選出了能快速降解甲醛的菌株W，用于甲醛降解的生物處理，并探究了甲醛濃度對(duì)甲醛降解率的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．篩選培養(yǎng)基中的甲醛能為菌株W的生長(zhǎng)提供碳源
B．在350mg·L-1和600 mg·L-1時(shí)，菌株W的降解甲醛的量相同
C．濃度超過(guò)750 mg·L-1后，高濃度的甲醛可能會(huì)抑制菌株的活性
D．篩選后的培養(yǎng)基在丟棄前可用高壓蒸汽鍋進(jìn)行滅菌處理
4．一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)化合物）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下圖程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的（ ）
A．分離目的菌所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是添加該除草劑的無(wú)氮固體培養(yǎng)基
B．步驟C第1次劃線前、第5次劃線后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌
C．將未接種的平板在相同條件下培養(yǎng)，可以判斷培養(yǎng)基是否滅菌合格
D．步驟D的兩種菌落氮源相同，應(yīng)該選擇透明圈大的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
5．米酒舊時(shí)稱(chēng)酒釀，其現(xiàn)代工藝流程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．蒸米有利于根霉分解糯米中的有機(jī)物，淋冷防止殺死根霉
B．加酵母曲后應(yīng)先通入一段時(shí)間無(wú)菌空氣，再進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵
C．發(fā)酵結(jié)束后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行滅菌可延長(zhǎng)米酒的保存期
D．若釀制的米酒有酸味，應(yīng)與長(zhǎng)期封閉釀酒容器有關(guān)
6．關(guān)于發(fā)酵及發(fā)酵工程的敘述，正確的是（ ）
A．進(jìn)行果酒或泡菜發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵裝置均要留出1/3空間，防止發(fā)酵菌種無(wú)氧呼吸產(chǎn)生CO2引起發(fā)酵液溢出
B．傳統(tǒng)發(fā)酵利用的菌種是天然的混合菌種，發(fā)酵工程利用的則是經(jīng)基因工程或誘變育種后選育的單一菌種
C．利用發(fā)酵工程生產(chǎn)啤酒時(shí)，需對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備進(jìn)行滅菌，且發(fā)酵過(guò)程要嚴(yán)格檢測(cè)和控制發(fā)酵條件
D．發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物，不包括酶及菌體本身
7．甜米酒又稱(chēng)酒釀，多以糯米為原料拌入酒曲發(fā)酵而成。傳統(tǒng)家庭手工制作，產(chǎn)品品質(zhì)不穩(wěn)定，容易酸敗，下面是工業(yè)化生產(chǎn)米酒的流程，其中發(fā)酵過(guò)程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段。據(jù)圖判斷下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．性狀優(yōu)良的酵母菌菌種可以從自然界中篩選，也可以通過(guò)誘變育種或基因工程育種獲得
B．發(fā)酵時(shí)要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件，以免影響微生物的生長(zhǎng)繁殖和代謝物的形成
C．酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，而大部分糖的分解和代謝物的生成在后發(fā)酵階段完成
D．罐裝、封口、殺菌要在限定時(shí)間內(nèi)完成，若時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，產(chǎn)品會(huì)腐敗變酸
8．醬油是以大豆、小麥或麥麩為原料，依靠微生物發(fā)酵而生產(chǎn)的一種液態(tài)調(diào)味品。如圖展示了某企業(yè)通過(guò)發(fā)酵制作醬油的過(guò)程，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．米曲霉發(fā)酵過(guò)程需要通入空氣并攪拌，可判斷米曲霉屬于異養(yǎng)好氧微生物
B．在發(fā)酵池發(fā)酵階段添加的乳酸菌屬于真核生物
C．添加的酵母菌在無(wú)氧條件下分解葡萄糖的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳
D．發(fā)酵池中加入的食鹽可以抑制雜菌的生長(zhǎng)和繁殖
9．在分離、純化細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，劃線接種（甲）及培養(yǎng)結(jié)果（乙）如圖所示，a、b、c、d是劃線的四個(gè)區(qū)域。下列敘述正確的是（ ）
A．實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基一般用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌
B．為了防止雜菌污染，接種環(huán)灼燒后立即蘸取菌液進(jìn)行劃線
C．圖中d區(qū)域的劃線操作是從c區(qū)域劃線的末端開(kāi)始的
D．圖示劃線接種過(guò)程中至少需要對(duì)接種環(huán)灼燒5次
10．科研人員利用誘變方式選育可高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌的過(guò)程如圖所示。未突變菌不能在含有β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。隨β-胡蘿卜素含量增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色。下列敘述正確的是（ ）
A．將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率
B．進(jìn)行③操作時(shí)，應(yīng)選擇直徑較小的橙紅色菌落中的菌株繼續(xù)接種培養(yǎng)
C．能在添加β-紫羅酮的培養(yǎng)基上長(zhǎng)成菌落的細(xì)菌，其遺傳物質(zhì)不一定發(fā)生改變
D．經(jīng)過(guò)程①紫外線照射的三孢布拉霉負(fù)菌有的不能在含β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)
11．研究人員對(duì)小鼠脾細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變黃，推測(cè)其原因可能是培養(yǎng)液pH值降低、微生物污染、未及時(shí)更換培養(yǎng)液等。下列相關(guān)分析不合理的是（ ）
A．pH值降低的原因可能是未添加緩沖液或CO2培養(yǎng)箱的氣體含量比例異常
B．微生物污染的原因可能是對(duì)培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)液的滅菌不徹底
C．未及時(shí)更換培養(yǎng)液可能會(huì)導(dǎo)致代謝產(chǎn)物的積累和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的供應(yīng)不充足
D．培養(yǎng)液變黃的原因還可能是懸浮培養(yǎng)過(guò)程中未使用胰蛋白酶處理脾細(xì)胞
12．研究人員利用甲、乙兩種二倍體植物的各自?xún)?yōu)勢(shì)，通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育兼有兩種植物優(yōu)勢(shì)且耐鹽的目的植株，其實(shí)驗(yàn)流程如下圖，a~e表示不同操作。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．通過(guò)a操作獲得完整且有活性的原生質(zhì)體，主要利用了纖維素酶和果膠酶的高效性
B．b操作可使用聚乙二醇促進(jìn)兩種原生質(zhì)體的膜融合，以獲得未分化狀態(tài)的雜種細(xì)胞
C．d操作所用培養(yǎng)基應(yīng)添加一定濃度的鈉鹽，且生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素用量比值小于1
D．甲、乙植株是兩個(gè)不同物種，因此通過(guò)該技術(shù)培育出的目的植株會(huì)表現(xiàn)出高度不育
13．為解決雜交瘤細(xì)胞在傳代培養(yǎng)中出現(xiàn)來(lái)自B淋巴細(xì)胞的染色體丟失的問(wèn)題，研究者用EBV（一種病毒顆粒）感染已免疫的B淋巴細(xì)胞，獲得“染色體核型穩(wěn)定”的EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞，進(jìn)而獲得染色體穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞，基本實(shí)驗(yàn)流程如圖。EBV轉(zhuǎn)化細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基中存活，但對(duì)Oua敏感；骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中不能存活，但對(duì)Oua不敏感。下列分析正確的是（ ）
A．雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體能針對(duì)相應(yīng)抗原和EBV
B．HAT培養(yǎng)基可去除骨髓瘤細(xì)胞和自身融合的骨髓瘤細(xì)胞
C．滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是促進(jìn)骨髓瘤細(xì)胞核和B細(xì)胞核融合
D．圖示篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞即可在小鼠腹腔內(nèi)生產(chǎn)單克隆抗體
14．如圖為產(chǎn)業(yè)化繁育良種牛的部分過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)MII期的卵母細(xì)胞進(jìn)行處理
B．過(guò)程②無(wú)核卵母細(xì)胞可以為重組細(xì)胞全能性的表達(dá)提供物質(zhì)基礎(chǔ)
C．過(guò)程③可用物理或化學(xué)方法進(jìn)行處理，目的是激活重組細(xì)胞完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，使其在體外發(fā)育至原腸胚后用于胚胎移植
D．E的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體A和C，F(xiàn)的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自供體B
15．2011 年我國(guó)首次利用轉(zhuǎn)基因和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育了高產(chǎn)賴(lài)氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為：構(gòu)建乳腺專(zhuān)一表達(dá)載體——表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞（BEF）----核移植----重組細(xì)胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植----檢測(cè)。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞（BEF） 為核供體細(xì)胞
B．需將重組細(xì)胞體外培養(yǎng)至早期囊胚再進(jìn)行胚胎移植
C．高產(chǎn)賴(lài)氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛的性狀與受體母牛極為相似
D．可用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)克隆奶牛體內(nèi)目的基因是否導(dǎo)入
16．臨床上常對(duì)羊水中胎兒脫落的細(xì)胞進(jìn)行染色體分析，得出染色體數(shù)量以及結(jié)構(gòu)變異的重要信息，輔助醫(yī)生產(chǎn)前診斷。具體操作步驟如下圖所示，下列選項(xiàng)中說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．秋水仙素處理可使細(xì)胞周期停滯在中期，便于進(jìn)行染色體分析
B．實(shí)驗(yàn)中低滲處理的目的是使細(xì)胞吸水膨脹，使染色體分散便于觀察
C．細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需適時(shí)更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累過(guò)多危害細(xì)胞生長(zhǎng)
D．利用該技術(shù)能夠檢測(cè)鐮狀細(xì)胞貧血、唐氏綜合征等染色體異常遺傳病
17．治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義，具體流程如下圖所示，下列說(shuō)法中正確的是（ ）
A．個(gè)體A提供的卵母細(xì)胞通常是指初級(jí)卵母細(xì)胞
B．胚胎干細(xì)胞可以來(lái)自囊胚中的滋養(yǎng)層細(xì)胞
C．若將圖中獲得的組織器官移植至個(gè)體A，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)
D．我國(guó)禁止生殖性克隆，主張對(duì)治療性克隆進(jìn)行有效監(jiān)管和嚴(yán)格審查
18．VP1為引起手足口病的主要病毒EV71中的特異性結(jié)構(gòu)蛋白，以VPl蛋白為抗原制備單克隆抗體的過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．克隆化培養(yǎng)可用液體培養(yǎng)基，除提供細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需加入血清
B．骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的誘導(dǎo)方法相同
C．通過(guò)HAT培養(yǎng)基和抗體檢測(cè)篩選，可得到產(chǎn)VP1蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞
D．從注射過(guò)VP1蛋白的小鼠脾臟中可獲取產(chǎn)VP1蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞
19．圖為抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）形成和作用過(guò)程示意圖，其中①②③表示細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．注射抗原只引起體液免疫
B．篩選出②需要用選擇培養(yǎng)基
C．篩選出③需要克隆化培養(yǎng)
D．ADC能選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞
20．“標(biāo)記”是生物技術(shù)與工程常用的技術(shù)手段，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，通過(guò)紅綠熒光蛋白標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞融合情況
B．分析工程酵母發(fā)酵產(chǎn)物的合成及分泌時(shí)，通過(guò)同位素標(biāo)記監(jiān)測(cè)產(chǎn)物轉(zhuǎn)移路徑
C．驗(yàn)證轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是否成功時(shí)，通過(guò)RNA分子標(biāo)記檢測(cè)目的基因是否表達(dá)
D．對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，通過(guò)熒光標(biāo)記技術(shù)實(shí)時(shí)定量測(cè)定產(chǎn)物的量
21．某實(shí)驗(yàn)室通過(guò)提高小鼠胚胎干細(xì)胞pSTAT3基因的表達(dá)水平，體外制備出桑葚胚樣全能細(xì)胞。該細(xì)胞在分子水平及發(fā)育潛能上均具有自然胚胎桑葚期細(xì)胞特性，并在體外成功模擬了小鼠胚胎發(fā)育至原腸胚階段。根據(jù)該研究，下列敘述正確的是（ ）
注：pSTAT3是調(diào)控胚胎發(fā)育的關(guān)鍵基因
A．桑葚胚發(fā)育成囊胚的過(guò)程中，pSTAT3的表達(dá)上升
B．誘導(dǎo)桑葚胚樣細(xì)胞時(shí)，基因的堿基序列和表達(dá)的情況都發(fā)生改變
C．囊胚期細(xì)胞重置至桑葚樣細(xì)胞的過(guò)程類(lèi)似于脫分化
D．桑葚胚樣細(xì)胞不可誘導(dǎo)發(fā)育至囊胚期
22．小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
A．胚胎干細(xì)胞只能從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中分離獲得
B．分離出的細(xì)胞a、b要在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)
C．定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞形成多種功能細(xì)胞時(shí)表達(dá)基因都不同
D．向培養(yǎng)液中加入動(dòng)物血清會(huì)刺激胚胎干細(xì)胞表現(xiàn)出全能性
23．胚胎工程等生物技術(shù)促進(jìn)了具有優(yōu)良性狀和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的動(dòng)物快速繁育與應(yīng)用。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．克隆珍稀野生動(dòng)物，可使用體細(xì)胞核移植結(jié)合胚胎工程技術(shù)
B．胚胎分割技術(shù)可增加移植胚胎數(shù)目，還可產(chǎn)生遺傳性狀相同的后代
C．為提高體外受精成功率，新采集的精子應(yīng)直接用于體外受精
D．動(dòng)物胚胎移植前，控制胚胎性別比例可降低后代的伴性遺傳病發(fā)病率
24．中科院神經(jīng)科學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)利用體細(xì)胞克隆技術(shù)克隆出了獼猴“中中”和“華華”，為了提高重組胚胎的發(fā)育率和妊娠率，我國(guó)科研人員將組蛋白去甲基化酶（KDM4d）的mRNA注入了重構(gòu)胚，同時(shí)用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）進(jìn)行處理，流程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．重構(gòu)胚組蛋白的甲基化程度高有利提高胚胎發(fā)育率
B．體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞通常需要在培養(yǎng)液中加入動(dòng)物血清等一些天然成分
C．卵母細(xì)胞一般要培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ中期才去核
D．“中中”和“華華”的成功培育體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞核的全能性
25．治療性克隆有望解決供體器官短缺和免疫排斥等問(wèn)題。下圖表示治療性克隆的過(guò)程，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．細(xì)胞A常采用去核卵母細(xì)胞作為移植的受體細(xì)胞
B．動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需提供95%空氣和5%CO2的混合氣體
C．胚胎干細(xì)胞分化為多種體細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果
D．該治療性過(guò)程應(yīng)用了核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)
26．下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”、“PCR擴(kuò)增”、“瓊脂糖凝膠電泳”實(shí)驗(yàn)的敘述中，正確的是（ ）
A．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中可利用DNA在酒精中溶解度較大的特點(diǎn)來(lái)提取DNA
B．將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后，溶液即可變?yōu)樗{(lán)色
C．PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在延伸過(guò)程中起作用
D．凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察
27．退化性起源學(xué)說(shuō)將病毒的起源歸納為兩個(gè)階段。首先寄生物在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生可獨(dú)立復(fù)制的DNA質(zhì)粒，其次編碼寄生物亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)單位的基因發(fā)生突變，形成編碼病毒外殼蛋白的相關(guān)基因。隨著進(jìn)化的進(jìn)行，新獲得的可在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移的特性被進(jìn)一步選擇下來(lái)。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．寄生物產(chǎn)生的可獨(dú)立復(fù)制的DNA質(zhì)粒上具有復(fù)制原點(diǎn)
B．編碼病毒蛋白外殼的相關(guān)基因可能位于DNA質(zhì)粒上
C．通過(guò)自然選擇保留下的病毒對(duì)宿主細(xì)胞是有利的
D．可轉(zhuǎn)移特性使病毒具有侵染宿主細(xì)胞的能力
28．匙葉草是一種泌鹽植物?？蒲泄ぷ髡邔⒊兹~草液泡膜Na+/H+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(TaNHX2基因)轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽棉花新品種。圖1表示獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AⅠ、EcRⅠ、BamHⅠ為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn)；圖2是三種限制酶的識(shí)別序列與酶切位點(diǎn)示意圖；圖3是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．基因工程中，TaNHX2基因可以通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增
B．切割圖1所示的DNA片段應(yīng)優(yōu)先選用Sau3AⅠ和BamHⅠ
C．將含有TaNHX2基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞后，還需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)
D．為了確定耐鹽棉花植株是否培育成功，可以從個(gè)體水平鑒定棉花植株的耐鹽性
29．New Phytlgist雜志發(fā)表了我國(guó)科學(xué)家有關(guān)大豆對(duì)鹽脅迫響應(yīng)的分子調(diào)控機(jī)制，過(guò)程如圖所示。研究發(fā)現(xiàn)，miR160a可通過(guò)切割GmARF16基因轉(zhuǎn)錄的mRNA使大豆具有耐鹽性。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．大豆的不耐鹽與耐鹽這對(duì)性狀受多對(duì)基因共同決定
B．若GmMYC2基因啟動(dòng)子甲基化程度增加可提高耐鹽性
C．脯氨酸含量增加可增大根部細(xì)胞滲透壓引起耐鹽性增強(qiáng)
D．miR160a通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則識(shí)別mRNA并斷裂氫鍵
30．下列關(guān)于教材實(shí)驗(yàn)中所涉及的方法、操作和結(jié)論的敘述正確的是（ ）
A．證明DNA半保留復(fù)制方式的實(shí)驗(yàn)和分泌蛋白的合成和運(yùn)輸實(shí)驗(yàn)都用到放射性同位素標(biāo)記法
B．質(zhì)壁分離和復(fù)原實(shí)驗(yàn)、低溫誘導(dǎo)植物細(xì)胞染色體數(shù)目的變化實(shí)驗(yàn)都要先用低倍鏡觀察，再換成高倍鏡觀察
C．鑒定DNA時(shí)，不能將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進(jìn)行沸水浴
D．調(diào)查草地中某雙子葉植物的種群密度和探究抗生素對(duì)細(xì)菌的選擇作用時(shí)，選取樣方、挑選菌落均要隨機(jī)取樣
31．棉花是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物，黃萎病是棉花的最主要病害之一，有棉花的“癌癥”之稱(chēng)。我國(guó)科學(xué)家在世界上首次獲得轉(zhuǎn)基因抗黃萎病棉花新株系。這將使棉花“癌癥”有望得到根治?？茖W(xué)家將從海島棉中分離出來(lái)的抗黃萎病基因At7導(dǎo)入陸地棉中，使陸地棉獲得抗病性狀。下列對(duì)轉(zhuǎn)基因棉的檢測(cè)與鑒定的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉是否導(dǎo)入基因At7，需要一段能與基因At7互補(bǔ)的短單鏈核酸引物
B．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉中的基因At7是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，其原理是抗原與抗體的特異性結(jié)合
C．檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因棉表達(dá)出At7蛋白，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因棉中成功導(dǎo)入了基因At7并能表達(dá)
D．檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉是否抗黃萎病，可接種黃萎病的病原體到轉(zhuǎn)基因棉植株上
32．在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常利用一些顏色反應(yīng)來(lái)鑒定細(xì)胞中的某些化學(xué)物質(zhì)或細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。以下說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．DNA與二苯胺試劑在加熱條件下反應(yīng)出現(xiàn)藍(lán)色
B．鑒定還原糖實(shí)驗(yàn)所用的斐林試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用
C．利用臺(tái)盼藍(lán)染液可把死細(xì)胞染成藍(lán)色，而活細(xì)胞不被著色
D．觀察洋蔥根尖分生組織的有絲分裂，可選用酸性染料醋酸洋紅染液染色
33．DNA測(cè)序時(shí)，先將待測(cè)單鏈DNA模板、引物、有關(guān)酶、4種脫氧核苷三磷酸（dNTP，N代表A、T、C、G，能提供能量并作為DNA復(fù)制的原料）均加入4個(gè)試管中，再分別加入一定量的含放射性同位素標(biāo)記的ddNTP（ddGTP、ddATP、ddCTP、ddTTP）。不同于dNTP的是，ddNTP的五碳糖的3位不含羥基。在DNA合成時(shí)ddNTP隨機(jī)與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核苷酸鏈延長(zhǎng)位點(diǎn)，并終止DNA的延伸，從而形成不同長(zhǎng)度的一系列終止處帶有放射性同位素標(biāo)記的DNA鏈。下圖是DNA測(cè)序時(shí)得到含放射性標(biāo)記的子代DNA的電泳圖譜。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．反應(yīng)體系中的引物為單鏈，DNA聚合酶從引物的3'端連接脫氧核苷酸
B．ddNTP終止子鏈延伸，其原理可能是其五碳糖的3'位不含羥基，無(wú)法連接新的脫氧核苷酸
C．圖中加入ddCTP的一組中，可以形成3種長(zhǎng)度的子鏈
D．圖中子代DNA的堿基序列是5'-GATCCGAAT-3'
34．為研究3對(duì)等位基因在染色體上的相對(duì)位置關(guān)系，科研人員以某果蠅若干精子為材料，用PCR技術(shù)檢測(cè)單個(gè)精子中的相應(yīng)基因，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如表所示。不考慮突變和致死，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
注：已知表中精子種類(lèi)和比例與該果蠅理論上產(chǎn)生的配子種類(lèi)和比例相當(dāng)
A．e基因可能位于X染色體上
B．A/a基因只能位于常染色體上
C．A/a和B/b不遵循自由組合定律
D．Ab和Abe兩種精子可能來(lái)自同一個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞
35．關(guān)于實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（ ）
A．DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定中，在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度有關(guān)
B．調(diào)查遺傳病時(shí)，選發(fā)病率較高的多基因遺傳病更容易推斷其遺傳方式
C．依據(jù)綠葉中光合色素吸收光譜的差異對(duì)光合色素進(jìn)行層析分離
D．探究酵母菌呼吸方式時(shí)，向酵母菌培養(yǎng)液中加入酸性重鉻酸鉀出現(xiàn)灰綠色，說(shuō)明一定有酒精產(chǎn)生
36．在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。某動(dòng)物體內(nèi)有科研人員所需要的目的基因，欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒上有EcRI、XhI、Mun I、Sal I和 NheI限制酶識(shí)別序列，相關(guān)結(jié)構(gòu)的示意圖如下。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
注：LacZ基因編碼產(chǎn)生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gaI產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。
A．啟動(dòng)子位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位
B．操作過(guò)程宜保留氨芐青霉素抗性基因，將目的基因插入LacZ基因中
C．在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)，應(yīng)在兩種引物的5'端添加SalI和NheI限制酶識(shí)別序列
D．在添加氨芐青霉素和X-gaI的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的白色菌落為導(dǎo)人重組質(zhì)粒的大腸桿菌
37．常規(guī)PCR只能擴(kuò)增兩引物間的DNA區(qū)段，要擴(kuò)增已知DNA序列兩側(cè)的未知DNA序列，可用反向PCR技術(shù)。反向PCR技術(shù)擴(kuò)增的原理如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．酶切階段，L中不能含有酶切時(shí)所選限制酶的識(shí)別序列
B．環(huán)化階段，可選用E.cli DNA連接酶或T4 DNA連接酶
C．圖中引物，應(yīng)選擇引物1和引物4，且二者間不能互補(bǔ)配對(duì)
D．PCR擴(kuò)增，每輪循環(huán)前應(yīng)加入限制酶將環(huán)狀DNA切割成線狀
38．圖甲表示真核細(xì)胞DNA復(fù)制的部分過(guò)程，其中一條鏈具有“不連續(xù)合成”的特點(diǎn)。圖乙表示真核生物基因的遺傳信息從DNA轉(zhuǎn)移到RNA上之后，對(duì)有效遺傳信息進(jìn)行“剪斷”與重新“拼接”的過(guò)程。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．圖甲中兩條子鏈的合成方向都是由5'延伸到3'
B．圖乙過(guò)程①需要DNA聚合酶的參與
C．圖乙過(guò)程②有磷酸二酯鍵的斷裂和合成
D．正常mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA與S基因不完全相同
39．2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)?lì)C給了開(kāi)發(fā)基因組編輯方法的兩位女科學(xué)家，CRISPA/Cas9基因編輯技術(shù)可對(duì)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯，其原理是由一條單鏈導(dǎo)RNA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個(gè)特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割，示意圖如下。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．向?qū)NA可識(shí)別、切割DNA上的目標(biāo)位點(diǎn)
B．單鏈向?qū)NA與識(shí)別序列，通過(guò)氫鍵連接
C．引入供體DNA分子插入切割點(diǎn)，可以對(duì)基因進(jìn)行定向改造
D．生物體自身存在的修復(fù)系統(tǒng)能將斷裂上下游兩端的序列連接起來(lái)，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的敲除
40．HIV感染是引起艾滋病的原因。利用進(jìn)入抑制劑阻止HIV進(jìn)入靶細(xì)胞是阻止 HIV感染的重要途徑。研究者按照如圖所示的途徑構(gòu)建了一種可視化的、無(wú)感染性的進(jìn)入抑制劑檢測(cè)模型。
下列說(shuō)法正確的是（ ）
A．env蛋白是介導(dǎo)HIV侵染靶細(xì)胞的重要蛋白
B．進(jìn)入抑制劑通過(guò)破壞env蛋白結(jié)構(gòu)阻止HIV侵染
C．通過(guò)測(cè)定融合細(xì)胞中env表達(dá)量判定進(jìn)入抑制劑的效果
D．進(jìn)行上述系統(tǒng)操作的實(shí)驗(yàn)員有感染HIV的風(fēng)險(xiǎn)
二、多選題
41．黃曲霉毒素是由黃曲霉產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，具有極強(qiáng)的毒性和致癌性?？蒲腥藛T用黃曲霉毒素B（AFB1）的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物——豆香素（C9H6O2）篩選出能高效降解AFB1的菌株，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖中的①—④。已知菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。對(duì)降解菌的培養(yǎng)液進(jìn)行離心，發(fā)現(xiàn)上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌懸液中的殘留率。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)上清液中含有蛋白質(zhì)K，為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)⑤：在A中加入水解蛋白質(zhì)K的酶、B中加等量的蒸餾水，充分反應(yīng)后在兩試管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．1號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇性培養(yǎng)基，通常需要提前在121℃下進(jìn)行濕熱滅菌
B．步驟③使用稀釋涂布平板法，目的是篩選出能降解黃曲霉毒素的單菌落
C．實(shí)驗(yàn)⑤的結(jié)果是A試管中豆香素含量基本不變，B試管中豆香素含量減少
D．蛋白質(zhì)K屬于降解菌產(chǎn)生的胞外分泌物，可以分解培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)
42．為探究不同抗生素抑制支原體生長(zhǎng)的情況，研究人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。制備培養(yǎng)基培養(yǎng)支原體后，將蘸有相同濃度的阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的圓形濾紙片放置于平板不同位置。培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上出現(xiàn)的抑菌圈情況如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（ ）
A．“？”處放置的是蘸有無(wú)菌水的圓形濾紙片
B．青霉素對(duì)支原體不起作用
C．實(shí)際使用時(shí)克拉霉素抑制支原體的效果比阿奇霉素好
D．長(zhǎng)期使用克拉霉素可以增強(qiáng)抑制支原體的效果
43．某大腸桿菌的質(zhì)粒上含有AmpR基因（氨芐青霉素抗性基因）和LacZ基因（編碼的酶能使含X-gal的平板上的菌落變藍(lán)），科研人員欲利用該質(zhì)粒構(gòu)建L-天冬酰胺酶高表達(dá)載體，并利用含氨芐青霉素和X-gal的平板對(duì)受體菌進(jìn)行篩選，該受體菌在普通平板上形成的菌落為白色，目的基因結(jié)構(gòu)和質(zhì)粒結(jié)構(gòu)如圖，圖中的多種限制酶識(shí)別序列各不相同。選用的限制酶和菌落應(yīng)為（ ）
A．EcRⅠ和BamHⅠB．EcRⅠ和KpnⅠ
C．白色菌落D．藍(lán)色菌落
44．某種除草劑（一種含氮有機(jī)物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）在土壤中不易降解，長(zhǎng)期使用會(huì)污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，按下圖過(guò)程選育能降解該除草劑的細(xì)菌。下列敘述正確的是（ ）
A．圖中培養(yǎng)基在各種成分都溶化后且分裝前進(jìn)行滅菌
B．圖中接種方法為平板劃線法，該方法可以于細(xì)菌計(jì)數(shù)
C．實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要將培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性
D．培養(yǎng)基上形成的兩種菌落中的細(xì)菌所利用的氮源不同
45．2018年3月，最后一頭雄性北方白犀牛去世，至此世界上僅剩兩頭雌性個(gè)體。如今，科研團(tuán)隊(duì)擬采用提前保存的北方白犀牛冷凍精子借助核移植、體外受精等技術(shù)，以南方白犀牛作為代孕母畜人工繁育北方白犀牛。下列敘述合理的是（ ）
A．須注射免疫抑制劑以減弱代孕母畜對(duì)植入胚胎的免疫排斥反應(yīng)
B．冷凍保存的精子需再經(jīng)獲能處理才可用于體外受精
C．若取雌性白犀牛的體細(xì)胞進(jìn)行核移植，獲得的克隆后代可繁衍為一個(gè)種群
D．理論上可取早期胚胎用酶處理成單個(gè)細(xì)胞分別培養(yǎng)，以提高胚胎的利用率
46．為了快速檢測(cè)某病毒，以該病毒外殼蛋白A為抗原來(lái)制備單克隆抗體，主要技術(shù)路線如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射的是抗原和抗體
B．步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是能在體外無(wú)限增殖
C．已免疫的B淋巴細(xì)胞可通過(guò)原代培養(yǎng)擴(kuò)大其細(xì)胞數(shù)量
D．利用多次克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選特定的雜交瘤細(xì)胞
47．體細(xì)胞雜交不僅可以進(jìn)行不同種、屬、科間的遠(yuǎn)緣雜交，還可以省去有性雜交育種中很多中間環(huán)節(jié)。下圖為將風(fēng)味佳的美味獼猴桃（甲）和抗寒性極強(qiáng)的軟棗獼猴桃（乙）進(jìn)行體細(xì)胞雜交的過(guò)程。據(jù)下圖分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．植物細(xì)胞經(jīng)①后得到的a、b不再發(fā)生質(zhì)壁分離，因?yàn)橐呀?jīng)不存在滲透作用失水
B．預(yù)期的體細(xì)胞雜交產(chǎn)物是能在低溫地區(qū)栽種的風(fēng)味佳的新物種
C．②過(guò)程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，③過(guò)程中有高爾基體參與
D．③④⑤分別表示脫分化、再分化和分化過(guò)程，本質(zhì)都為基因的選擇性表達(dá)
48．單克隆抗體制備的目的之一是獲得適宜條件下能無(wú)限增殖的可分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，部分過(guò)程如圖1所示，其中HAT培養(yǎng)基是一種添加了氨基蝶呤（A）、次黃嘌呤（H）和胸腺嘧啶核苷（T）的選擇培養(yǎng)基。DNA合成的兩條途徑如圖2所示，氨基蝶呤（A）能阻斷其中的全合成途徑。B淋巴細(xì)胞內(nèi)有兩條DNA合成途徑，但增殖能力有限；骨髓瘤細(xì)胞僅具有全合成途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．誘導(dǎo)融合前需要先用胃蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞
B．圖1中兩種自身融合細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基中存活的原因不同
C．經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選后得到的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生所需的特定抗體
D．若只考慮細(xì)胞兩兩融合，則放入HAT培養(yǎng)基之前有全合成途徑的融合細(xì)胞有2種
49．大鼠早期胚胎可以利用細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)機(jī)制“殺死”外來(lái)的人類(lèi)干細(xì)胞，從而導(dǎo)致人—鼠嵌合胚胎的嵌合率低下。科學(xué)家擬通過(guò)以下途徑獲得具有人類(lèi)胰腺的幼鼠，下列分析合理的是（ ）
A．iPS細(xì)胞的分裂、分化能力可能與圖中b區(qū)域的細(xì)胞相當(dāng)
B．為獲得更多的受精卵，可對(duì)雌鼠注射適量的促性腺激素
C．步驟①基因編輯的目的可能是破壞受精卵中與胰腺形成有關(guān)的基因
D．圖中過(guò)程涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及核移植、胚胎移植等
50．下圖是三親嬰兒的培育過(guò)程。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（ ）
A．三親嬰兒的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自于父親和母親
B．該技術(shù)能避免三親嬰兒攜帶母親細(xì)胞質(zhì)中的致病基因
C．體外受精前，需將精子在獲能液中培養(yǎng)一段時(shí)間使其獲能
D．受精卵發(fā)育到桑葚胚階段，開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞分化
51．下圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，有關(guān)說(shuō)法正確的是（ ）
A．A→B過(guò)程中用到的原料有4種，加入的引物有2種
B．A→B過(guò)程利用了DNA半保留復(fù)制原理，需要使用耐高溫的DNA聚合酶
C．B→C為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過(guò)程，常選用的受體細(xì)胞是卵母細(xì)胞
D．B→D為轉(zhuǎn)基因植物的培育過(guò)程，其中④過(guò)程常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
52．雙脫氧終止法對(duì)DNA進(jìn)行測(cè)序原理如圖，在4支試管中分別加入4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)和1種雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP) ； ddNTP可以與dNTP競(jìng)爭(zhēng)核苷酸鏈延長(zhǎng)位點(diǎn)，并終止DNA片段的延伸。在4支試管中DNA鏈將會(huì)分別在A、C、G及T位置終止，并形成不同長(zhǎng)度的DNA片段。這些片段隨后可被電泳分開(kāi)并顯示出來(lái)。
下列說(shuō)法正確的是 （ ）
A．這種測(cè)序方法需要引物和耐高溫的DNA聚合酶
B．電泳圖譜中的箭頭所指的DNA片段以鳥(niǎo)嘌呤結(jié)尾
C．測(cè)得未知DNA的序列為5′—GATTCGAGCTGA—3′
D．ddNTP與dNTP競(jìng)爭(zhēng)的延長(zhǎng)位點(diǎn)是核苷酸鏈的5′末端
53．下圖是某單基因（A/a）遺傳病的家系圖以及將各家庭成員的相關(guān)DNA用酶剪切成不同的片段，將這些片段進(jìn)行電泳分離（可以將DNA片段按大小分開(kāi)）的結(jié)果示意圖。已知僅一種基因上有MstⅡ的酶切位點(diǎn)。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．該遺傳病的發(fā)病率女性高于男性
B．圖中已知正常個(gè)體的基因型均為Aa
C．A和a基因的堿基數(shù)目相同，序列不同
D．若Ⅱ5的基因型為AA，則其不含MstⅡ的酶切位點(diǎn)
54．稻米胚乳直鏈淀粉含量高會(huì)導(dǎo)致食用品質(zhì)差。研究發(fā)現(xiàn)，水稻蠟質(zhì)基因（Wx）編碼直鏈淀粉合成酶。若Wx基因中第226位堿基是正常的G，該位點(diǎn)所在的內(nèi)含子能被正常剪接，胚乳中直鏈淀粉含最高，基因型記做GG；若該位點(diǎn)突變成T，則不能被正常剪接，胚乳中直鏈淀粉的合成水平會(huì)降低，基因型記做TT。為檢測(cè)Wx基因該位點(diǎn)堿基是G或T，研究人員以待測(cè)水稻葉片總DNA為材料，以Wx基因片段設(shè)計(jì)引物，對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)AccI酶切后電泳。如圖所示，已知引物1為5′-GCTTCACTTCTCTGCTTGTG-3′，AccⅠ酶的識(shí)別位點(diǎn)為5′-GTATAC-3′，兩引物之間無(wú)另外的AccI酶的識(shí)別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（ ）
A．該實(shí)驗(yàn)中需設(shè)計(jì)的引物2為5′一TTCAACTCTCGTTAAATCAT-3′
B．若電泳結(jié)果只能觀察到530bp的DNA條帶，則表明該水稻品種為T(mén)T型
C．GT雜合型水稻品種酶切電泳結(jié)果為3條條帶
D．組成上述兩種淀粉合成酶的氨基酸的種類(lèi)不同，數(shù)目相同
55．研究人員通過(guò)構(gòu)建一系列基因表達(dá)載體，將改造后的苯丙氨酸合成關(guān)鍵酶基因（P1）導(dǎo)入谷氨酸棒狀桿菌中，最終獲得了能產(chǎn)生大量苯丙氨酸的轉(zhuǎn)基因工程菌株?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建經(jīng)歷了如下圖所示的質(zhì)粒1~質(zhì)粒5的轉(zhuǎn)變過(guò)程，其中質(zhì)粒1通過(guò)PCR擴(kuò)增去除篩選效率較低的基因SacB獲得質(zhì)粒2；質(zhì)粒2與質(zhì)粒3中的基因RpsL拼接形成質(zhì)粒4；質(zhì)粒4與目的基因P1連接形成質(zhì)粒5。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．由質(zhì)粒1經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得質(zhì)粒2時(shí)需加入引物1和引物2
B．PCR擴(kuò)增質(zhì)粒3中的基因RpsL時(shí)，需在引物的5＇端加入XhⅠ識(shí)別序列
C．最終獲得的轉(zhuǎn)基因工程菌株表現(xiàn)出鏈霉素敏感和卡那霉素抗性
D．可利用PCR技術(shù)鑒定谷氨酸棒狀桿菌的染色體DNA上是否成功整合基因P1
三、非選擇題
56．濾膜法常用于對(duì)水體中的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，其大致流程：先用濾膜過(guò)濾待測(cè)水樣，水樣中的微生物留在濾膜上，再將濾膜轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)基上培養(yǎng)并統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
(1)該實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基屬于 （按物理性質(zhì)分類(lèi)）培養(yǎng)基，此類(lèi)培養(yǎng)基配制時(shí)除水和各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還需加入 。配制好的培養(yǎng)基通常用 法滅菌，如何檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底？ 。
(2)濾膜法可用于檢測(cè)飲用水中大腸桿菌是否超標(biāo)，培養(yǎng)基中需加入 ，統(tǒng)計(jì)呈 的菌落。
(3)檢測(cè)人員用濾膜過(guò)濾5L水樣后培養(yǎng)統(tǒng)計(jì)大腸桿菌菌落數(shù)（重復(fù)三次），結(jié)果如下表，該水樣中的大腸桿菌密度為 個(gè)/100mL。對(duì)水樣中的大腸桿菌計(jì)數(shù)，還可用稀釋涂布平板法；與濾膜法相比，通常稀釋涂布平板法適用于 的水樣。
57．一次性口罩主要成分是由C、H兩種元素組成的聚丙烯纖維。研究人員欲從合適的土壤樣品中篩選出能高效講解一次性口罩的細(xì)菌，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
(1)選擇土壤樣品時(shí)最好選擇一次性口罩腐爛程度 的土壤用于分離目標(biāo)菌株。
(2)在選擇培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中應(yīng)以 （填化合物名稱(chēng)）為唯一碳源；為增大菌體與培養(yǎng)基的接觸面積，從物理性質(zhì)看，該培養(yǎng)基應(yīng)是 培養(yǎng)基。
(3)將分離純化得到的不同菌種分別接種到鑒別培養(yǎng)基上，鑒別培養(yǎng)基中加入了能與聚丙烯纖維結(jié)合的顯色染色劑。設(shè)不同菌種的菌落面積為s，菌落周?chē)该魅Φ拿娣e為S，選擇S/s的比值 的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。
(4)欲估算某土壤樣品中有多少能高效降解一次性口罩的目的菌，接種平板時(shí)應(yīng)用 法。根據(jù)下圖操作能計(jì)算出1g該土壤中約有 個(gè)高效降解一次性口罩的目的菌。該結(jié)果有可能比實(shí)際活菌數(shù)要少，原因是 。
58．雙特異性抗體（BsAb）是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，雙特異性抗體在自然狀態(tài)下并不存在，可以通過(guò)重組 DNA 或細(xì)胞融合技術(shù)人工制備實(shí)現(xiàn)。長(zhǎng)春花所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖 1 是科研人員通過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)生產(chǎn)雙特異性抗體的部分過(guò)程。圖2 是某雙特異性抗體作用圖示。回答下列問(wèn)題。
(1)圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是 。過(guò)程③所用的HAT培養(yǎng)基從用途上看屬于選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上， 細(xì)胞不能生長(zhǎng)。
(2)過(guò)程④中將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行多倍稀釋?zhuān)臃N在多孔的細(xì)胞培養(yǎng)板上，使每孔細(xì)胞不超過(guò)1個(gè)，通過(guò)培養(yǎng)讓其增殖，然后利用 原理檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體，篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有 。
(3)圖1注射長(zhǎng)春堿后，要獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞，方框內(nèi)至少需要經(jīng)過(guò) 次篩選。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞因?yàn)? （答 2 點(diǎn)）等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是 。
59．科研人員擬以某病毒外殼蛋白A為抗原制備單克隆抗體，作為診斷試劑用于醫(yī)學(xué)檢測(cè)，其主要技術(shù)路線如圖所示，回答下列問(wèn)題：
(1)現(xiàn)在常用PCR特異性地快速擴(kuò)增目的基因。在生物體內(nèi)進(jìn)行DNA復(fù)制時(shí)，需要 打開(kāi)DNA雙鏈，PCR體系中該過(guò)程用 代替。在體內(nèi)或者體外進(jìn)行DNA片段的復(fù)制或者擴(kuò)增都需要引物，引物的作用是 。
(2)圖中誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法有 。按功能來(lái)區(qū)分，HAT培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基，篩選得到符合要求的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)具有的特點(diǎn)包括 。
(3)單克隆抗體能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，除了可以作為診斷試劑外，還具有的應(yīng)用是 (答出2點(diǎn))。
60．土地鹽漬化是一種全球化現(xiàn)象，嚴(yán)重制約著農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。我國(guó)育種專(zhuān)家用普通小麥（2N=42）與耐鹽偃麥草（（2N=70）體細(xì)胞雜交獲得耐鹽新品種山融3號(hào)，培育過(guò)程如下圖所示，圖中序號(hào)代表過(guò)程或結(jié)構(gòu)?；卮鹣铝袉?wèn)題：
(1)細(xì)胞①表示 。進(jìn)行原生質(zhì)體融合之前需要先去除細(xì)胞壁，原因是 。PEG的作用是 。某愈傷組織在誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上未形成芽，但分化出了根，原因可能是 。
(2)用特異性引物對(duì)普通小麥和耐鹽偃麥草基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖表示用該引物對(duì)雙親及再生植株1-6進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1-6中確定為雜種植株的有 ，判斷依據(jù)是 。
注：Ⅰ為普通小麥，Ⅱ?yàn)槟望}偃麥草
(3)在植物體細(xì)胞雜交中，為保證原生質(zhì)體在制備過(guò)程中的完整性，經(jīng)常需要將原生質(zhì)體放入適宜濃度的甘露醇中以維持原生質(zhì)體形態(tài)。為探究普通小麥原生質(zhì)體制備中甘露醇溶液的適宜濃度，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)材料及用具：普通小麥單細(xì)胞懸液、濃度為2ml/L的甘露醇溶液、纖維素酶、蒸餾水、培養(yǎng)瓶、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡（具有測(cè)距功能）等。
實(shí)驗(yàn)思路： ，處理相同且適宜時(shí)間后，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板和顯微鏡對(duì)各個(gè)培養(yǎng)瓶中的原生質(zhì)體計(jì)數(shù)，測(cè)量原生質(zhì)體的體積并記錄。其中原生質(zhì)體數(shù)目最多，且原生質(zhì)體體積最接近植物細(xì)胞體積對(duì)應(yīng)的濃度即是最適宜的甘露醇溶液濃度。
61．研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品?？茖W(xué)家培育出轉(zhuǎn)入溶菌酶基因山羊，以大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶（從乳汁中提?。^(guò)程如圖所示。其中編號(hào)①~⑨表示過(guò)程：質(zhì)粒S中的基因Leu通過(guò)控制相關(guān)酶的合成而控制亮氨酸的合成（亮氨酸是山羊細(xì)胞維持生命活動(dòng)必不可少的一種必需氨基酸），基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制性?xún)?nèi)切核酸酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見(jiàn)下表。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
(1)過(guò)程②需要的限制性?xún)?nèi)切核酸酶是 ，在③中，B與切割后的質(zhì)粒S用 酶連接，在兩個(gè)片段相鄰處形成 ，獲得重組質(zhì)粒T。
(2)為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細(xì)胞，質(zhì)粒S中用作標(biāo)記基因的是 。為達(dá)到篩選目的，培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分中特殊之處是 。若用PCR檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞中，實(shí)驗(yàn)組以待測(cè)的樣本DNA為模板，使用目的基因的特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，同時(shí)將以 片段為模板的組別作為陽(yáng)性對(duì)照組，將以非目的基因片段為模板的組別作為陰性對(duì)照組。
(3)過(guò)程⑧形成的早期胚胎中 （填結(jié)構(gòu)）將發(fā)育成完整轉(zhuǎn)基因羊個(gè)體。
62．綠色熒光蛋白在紫外線的照射下能發(fā)出綠色熒光，最初是在一種海蜇中被發(fā)現(xiàn)的。轉(zhuǎn)綠色熒光基因（Gfp）的幼鼠在紫外光下能發(fā)出綠色熒光。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，綠色熒光蛋白可以幫助人們了解細(xì)胞工作的機(jī)制，通過(guò)尋找熒光便可知道基因何時(shí)以及為什么“開(kāi)啟”，這項(xiàng)成就被稱(chēng)為“21世紀(jì)的顯微鏡”。下圖表示轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠的培育過(guò)程，圖中Ne基因編碼的產(chǎn)物能分解G418，G418是一類(lèi)對(duì)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞都有毒性的抗生素。請(qǐng)回答下列有關(guān)問(wèn)題：
(1)①過(guò)程將綠色熒光蛋白基因與目的基因連接起來(lái)利用的工具是 。
(2)可以從 中提取胚胎干細(xì)胞，③過(guò)程胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有 （答出2點(diǎn)即可）。
(3)⑤過(guò)程應(yīng)把轉(zhuǎn)基因胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入囊胚的 ，為了獲得多只小鼠c，⑥過(guò)程的操作是 ，該過(guò)程的操作要求是 。
(4)讓轉(zhuǎn)基因干細(xì)胞與這些細(xì)胞一起發(fā)育成胚胎，若幼鼠 ，則說(shuō)明Gfp基因在幼鼠體內(nèi)成功表達(dá)。
(5)據(jù)圖分析，Ne基因在轉(zhuǎn)基因綠色熒光小鼠的培育過(guò)程中發(fā)揮作用的機(jī)理是 。
63．研究開(kāi)發(fā)鎘污染土壤的清潔技術(shù)是改良和恢復(fù)被鎘污染的土壤、合理利用土壤資源的重要途徑。植物具有富集土壤中鎘元素的能力?？蒲腥藛T將酵母液泡鎘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（YCF1）基因?qū)耸茉囍参铮瑪M提高植物對(duì)鎘污染土壤的修復(fù)能力，過(guò)程如圖所示。回答下列問(wèn)題：
(1)鎘是人體的非必需元素，一般不影響人體健康。當(dāng)環(huán)境受到鎘污染后，鎘可在生物體內(nèi)富集，通過(guò) （填途徑）進(jìn)入人體，引起慢性中毒。
(2)擴(kuò)增YCF1基因時(shí)，一般要向PCR反應(yīng)緩沖溶液中添加Mg2+，目的是 。擴(kuò)增YCFI基因選用的引物組合是 ，不選用其他引物的原因是 。
(3)已知A位點(diǎn)是起始密碼子對(duì)應(yīng)的堿基序列，b鏈為轉(zhuǎn)錄的模板鏈，用限制酶SamI和PstI同時(shí)切割含YCFl基因的DNA片段。為了使YCFI基因按照正確的方向與質(zhì)粒連接，需要在A位點(diǎn)相應(yīng)引物的 （填“3′”或“5′”）端添加限制酶 的識(shí)別序列。與其他方法相比，將YCF1基因?qū)胭|(zhì)粒T-DNA的特點(diǎn)是 。
(4)由愈傷組織細(xì)胞發(fā)育成幼苗，要經(jīng)歷過(guò)程③的 階段。檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)土壤中的鎘濃度下降，能不能說(shuō)明已經(jīng)成功構(gòu)建具有鎘污染土壤高修復(fù)能力的轉(zhuǎn)基因植物？請(qǐng)判斷并說(shuō)明理由： 。
64．某科研小組欲用圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建人胰島素基因表達(dá)載體，讓其在大腸桿菌中表達(dá)出人胰島素前體物質(zhì)，對(duì)人胰島素基因所在的DNA片段進(jìn)行測(cè)序，發(fā)現(xiàn)其兩端附近無(wú)限制酶EcRI、BamHI的酶切位點(diǎn)。已知人胰島素基因表達(dá)時(shí)以②鏈為模板，且其3'端存在啟動(dòng)子，圖1所示質(zhì)粒上的ampR為氨芐青霉素抗性基因，telR為四環(huán)素抗性基因。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
(1)可采用 來(lái)獲得人胰島素基因，這一方法需要先針對(duì)人胰島素基因兩端的序列來(lái)設(shè)計(jì)引物對(duì)。這一方法獲得的產(chǎn)物一般通過(guò) 進(jìn)行鑒定，若鑒定發(fā)現(xiàn)其中有許多種相對(duì)分子質(zhì)量比人胰島素基因小的DNA片段，則原因可能是 （答出一點(diǎn)）。
(2)為保證人胰島素基因能正確連接到用限制酶EcRI和BamHI處理的圖1所示質(zhì)粒上，且利用表達(dá)載體上的啟動(dòng)子在受體菌中以②鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，則應(yīng)在配對(duì)到①鏈的引物5'端添加6個(gè)堿基，序列為5'- -3'。
(3)圖1質(zhì)粒上的ampR和tetR一般充當(dāng)基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是 。利用質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，結(jié)合微生物的培養(yǎng)，可以淘汰只轉(zhuǎn)入質(zhì)粒的大腸桿菌而獲得被成功轉(zhuǎn)入人胰島素基因表達(dá)載體的受體菌，則應(yīng)將重組載體導(dǎo)入 （填“不抗氨芐青霉素”“不抗四環(huán)素”或“不抗氨芐青霉素和四環(huán)素”）的受體大腸桿菌中。
65．蒂蛀蟲(chóng)是荔枝的重要害蟲(chóng)?？蒲腥藛T培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)荔枝的過(guò)程如下圖1所示。圖2是SalI、HindⅢ和BamHI三種限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1)與RNA相比，質(zhì)粒特有的化學(xué)成分是 ；抗氨芐青霉素基因的作用是 。
(2)研究人員采用了如下圖巢式PCR技術(shù)獲取抗蟲(chóng)基因，巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），使用兩對(duì)PCR引物擴(kuò)增完整的片段。第一對(duì)PCR引物（也稱(chēng)外引物）擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對(duì)引物稱(chēng)為巢式引物（因?yàn)樗麄冊(cè)诘谝淮蜳CR擴(kuò)增片段的內(nèi)部，也稱(chēng)內(nèi)引物）結(jié)合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴(kuò)增片段短于第一次擴(kuò)增。
①PCR擴(kuò)增時(shí)加入引物的原因是 ，在最后一個(gè)循環(huán)結(jié)束后通常還需要維持72℃5min的目的是 ，PCR產(chǎn)物常采用 來(lái)鑒定。
②相比于常規(guī)PCR，巢式PCR獲得錯(cuò)誤目標(biāo)產(chǎn)物概率 ，這是因?yàn)? 。
③為了使抗蟲(chóng)基因定向插入質(zhì)粒中，第二次PCR擴(kuò)增時(shí)需要在兩個(gè)引物5'端分別添加的序列是 ，不添加在引物3'端的原因是 。
(3)科研人員采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗蟲(chóng)基因?qū)肜笾?xì)胞，由于農(nóng)桿菌中的 ，能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并將目的基因整合到受體細(xì)胞 上。
(4)培育出的荔枝是否具有抗蟲(chóng)性狀，可采用鑒定方法是 。
精子基因組成
aB
aBe
Ab
Abe
精子數(shù)量
4
4
4
4
組別
1
2
3
菌落數(shù)
3
1
5
限制酶
BamHI
BgIII
HindIII
Xbal
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)
G'GATCC
A'GATCT
A'AGCTT
TCTAGA

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