1．簡述植物組織培養(yǎng)技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的原理和過程。2．嘗試進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。3．舉例說明植物細(xì)胞工程的應(yīng)用，有效提高了生產(chǎn)效率。4．列舉植物細(xì)胞工程在作物新品種培育方面的應(yīng)用。5．概述細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)的原理。
1．生命觀念——會用生命觀念解釋植物細(xì)胞工程給人們帶來的影響。2．科學(xué)思維——結(jié)合單倍體育種、誘變育種等育種方法來理解植物組織培養(yǎng)在作物新品種培育方面的應(yīng)用。3．科學(xué)探究——結(jié)合具體實驗，嘗試設(shè)計植物組織培養(yǎng)技術(shù)的流程簡圖。4．社會責(zé)任——了解組織培養(yǎng)技術(shù)已取得的進(jìn)展和尚未解決的問題，認(rèn)同科學(xué)是一個不斷發(fā)展的過程。
第1課時　植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)
知識點一　植物細(xì)胞的全能性
1．概念：細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有_________________或_____________________的潛能。2．生長發(fā)育過程中細(xì)胞沒有表現(xiàn)全能性的原因在特定的時間和空間條件下，細(xì)胞中的基因會_______________。
活 | 學(xué) | 巧 | 練1．任何細(xì)胞都具有全能性，任何細(xì)胞都能體現(xiàn)出全能性。( )2．細(xì)胞分化程度越高，全能性越高。( )
合 | 作 | 探 | 究與體細(xì)胞相比，生殖細(xì)胞如花粉的遺傳物質(zhì)減少了一半，為什么生殖細(xì)胞仍具有全能性？提示：在生物的體細(xì)胞中染色體是成對存在的，基因也是成對存在的，生殖細(xì)胞中遺傳物質(zhì)雖然減少了一半，但基因的種類沒有少，仍具有控制生長發(fā)育的全套的遺傳信息，因此生殖細(xì)胞仍具有全能性。
1．細(xì)胞全能性的分析(1)具有全能性的原因：一般生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳信息。(2)現(xiàn)實體現(xiàn)：在生物的生長發(fā)育過程中，生物體內(nèi)的細(xì)胞并不會表現(xiàn)出全能性，而是分化成各種組織和器官。這是因為在特定的時間和空間條件下，細(xì)胞內(nèi)的基因會選擇性地表達(dá)。
(3)不同細(xì)胞全能性的大?、袤w細(xì)胞全能性：分化程度低的>分化程度高的，細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的>細(xì)胞分裂能力弱的。②不同細(xì)胞的全能性：受精卵>胚胎干細(xì)胞>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。③不同生物的細(xì)胞全能性：植物細(xì)胞>動物細(xì)胞。(4)全能性與細(xì)胞分化的關(guān)系：隨著細(xì)胞分化程度的不斷提高，細(xì)胞的全能性逐漸降低。
2．植物細(xì)胞全能性表達(dá)所需條件(1)體細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的選擇性表達(dá)。(2)體現(xiàn)細(xì)胞全能性的條件
下列有關(guān)細(xì)胞全能性的敘述，正確的是( )A．植物體只有體細(xì)胞才具有發(fā)育成完整個體所必需的全套基因B．高度分化的植物細(xì)胞只有處于離體狀態(tài)時，才有可能表現(xiàn)出全能性C．植物體內(nèi)某些體細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性，其原因是所含基因不同D．紫色糯性玉米種子培育成植株，這反映植物種子具有全能性
解析：細(xì)胞具有全能性的原因是細(xì)胞具有發(fā)育成完整個體所必需的全套基因，而配子也具有這樣的全套基因，同樣具有全能性；植物體內(nèi)細(xì)胞沒有表現(xiàn)出全能性，這是細(xì)胞內(nèi)基因在特定時間和空間條件下選擇性表達(dá)的結(jié)果；同一植物體的不同細(xì)胞中的基因是相同的；細(xì)胞全能性表達(dá)的前提是離體培養(yǎng)的細(xì)胞、組織或器官；種子是植物的器官，由種子發(fā)育成植株，是正常的生命歷程，不屬于全能性的體現(xiàn)。
1．細(xì)胞表達(dá)全能性的標(biāo)志是發(fā)育成完整個體或分化成其他各種細(xì)胞。2．細(xì)胞具有全能性是因為細(xì)胞中具有發(fā)育成完整個體所必需的“全套基因”而不是“全部基因”，配子中有全套基因，因此仍然具有全能性。
植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是( )A．給予適宜的營養(yǎng)和外界條件B．脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和外界條件C．導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因D．將葉肉細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞內(nèi)解析： 植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件是：細(xì)胞離體和適宜的外界條件、一定的營養(yǎng)(無機(jī)、有機(jī)成分)和植物激素，B正確。
知識點二　植物組織培養(yǎng)技術(shù)
1．概念：將_______的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在___________________上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成___________的技術(shù)。
2．全能性表達(dá)的過程(植物組織培養(yǎng)過程)(1)脫分化：讓已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的_____________，轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。(2)再分化：脫分化產(chǎn)生的___________，在一定的培養(yǎng)條件下，再分化出_______________，進(jìn)而形成完整的小植株。(3)激素的作用：植物激素中_________和_____________是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。
注意：在誘導(dǎo)愈傷組織期間一般不需要光照，在后續(xù)的培養(yǎng)過程中，每日需要給予適當(dāng)時間和強(qiáng)度的光照。
活 | 學(xué) | 巧 | 練1.在植物組織培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的遺傳物質(zhì)一般都發(fā)生改變。( )2．脫分化和再分化是植物組織培養(yǎng)的重要過程。( )3．在植物組織培養(yǎng)過程中需要給予光照，以誘導(dǎo)脫分化過程。( )
合 | 作 | 探 | 究1.在植物組織培養(yǎng)過程中，為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作？提示：避免雜菌在培養(yǎng)基上面迅速生長消耗營養(yǎng)，且有些雜菌會危害培養(yǎng)物的生長。2．在組織培養(yǎng)過程中，誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基、誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基和誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基的成分有什么不同？提示：三種培養(yǎng)基成分的不同是生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同。
3．若培養(yǎng)物取自植物的幼莖、葉片等含有葉綠體的部位，愈傷組織中是否會含有葉綠體？提示：培養(yǎng)物經(jīng)過誘導(dǎo)脫分化后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞，愈傷組織中不含有葉綠體。
1．植物組織培養(yǎng)相關(guān)概念辨析(1)外植體：離體培養(yǎng)的植物器官、組織或細(xì)胞。(2)胚狀體：植物細(xì)胞離體培養(yǎng)，經(jīng)過脫分化和再分化，發(fā)育成胚狀體。胚狀體經(jīng)過生長發(fā)育成完整植株。(3)愈傷組織：一團(tuán)沒有特定結(jié)構(gòu)和功能，排列疏松而無規(guī)則，高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁組織團(tuán)塊。
(4)脫分化和再分化的比較
2.植物組織培養(yǎng)的條件(1)離體、無菌。(2)環(huán)境條件適宜：如營養(yǎng)物質(zhì)(水、無機(jī)鹽、蔗糖、維生素等)、激素(生長素和細(xì)胞分裂素)、適宜的溫度和光照。3．植物組織培養(yǎng)的過程
4．菊花組織培養(yǎng)實驗的注意事項(1)關(guān)鍵：避免微生物的污染，所有實驗用具要嚴(yán)格滅菌，接種過程進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。(2)取材：外植體的遺傳特征、取材位置都會影響愈傷組織的再分化能力。(3)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中必須含有植物生長發(fā)育所需要的全部營養(yǎng)物質(zhì)，其中生長素和細(xì)胞分裂素用量和比例對器官的發(fā)生起決定作用。(4)光照：愈傷組織培養(yǎng)，最初避光培養(yǎng)，后期見光培養(yǎng)。(5)培養(yǎng)順序：試管苗培養(yǎng)，要先進(jìn)行生芽培養(yǎng)，再進(jìn)行生根培養(yǎng)，試管苗培養(yǎng)要在光照條件下進(jìn)行。
下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是( )A．需要對外植體進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，以防止雜菌污染B．在培養(yǎng)過程中需要給予適宜的光照，以誘導(dǎo)脫分化過程C．培養(yǎng)基中所添加的激素種類和含量對培養(yǎng)過程起重要的調(diào)節(jié)作用D．若制備人工種子，外植體只需培養(yǎng)成愈傷組織即可
解析： 外植體一般只消毒，不進(jìn)行滅菌處理，以保持外植體的活性，A錯誤；愈傷組織的誘導(dǎo)一般不需要光照，在后續(xù)的培養(yǎng)過程中，每日需要給予適當(dāng)時間和強(qiáng)度的光照，B錯誤；培養(yǎng)基中所添加的激素種類和含量對培養(yǎng)過程起重要的調(diào)節(jié)作用，C正確；若制備人工種子，外植體需培養(yǎng)成胚狀體，再用人工種皮包裹，D錯誤。
植物組織培養(yǎng)中的“脫分化”過程是指( )A．已休眠的種子經(jīng)過處理使種子盡快萌發(fā)的過程B．植物根尖、莖尖等處分生組織細(xì)胞有絲分裂產(chǎn)生新細(xì)胞后分化為各種組織C．愈傷組織細(xì)胞分化為根與莖的過程D．離體的植物器官、組織、細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程解析： 脫分化是指讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。A、B、C都是細(xì)胞分裂、分化的過程。
知識點三　植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
1．概念將___________的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成___________，并把雜種細(xì)胞培育成___________的技術(shù)。2．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的流程圖及相關(guān)分析(圖中a、b、c和d表示相應(yīng)過程)
3.意義：打破植物的___________，實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種。
活 | 學(xué) | 巧 | 練1.植物體細(xì)胞雜交要先去除細(xì)胞壁的原因是細(xì)胞壁阻礙了原生質(zhì)體的融合。( )2．植物體細(xì)胞雜交過程中，細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是產(chǎn)生新的細(xì)胞壁。( )
合 | 作 | 探 | 究1.植物體細(xì)胞雜交實現(xiàn)的基礎(chǔ)和植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)分別是什么？提示：細(xì)胞膜的流動性；植物細(xì)胞的全能性。2．將兩個不同種的植物細(xì)胞A和B去除細(xì)胞壁后，經(jīng)一定的方法促融，若只考慮兩兩融合，可以形成幾種融合細(xì)胞？符合要求的雜種細(xì)胞是哪種？提示：3種(AA、BB、AB)；AB。
3．從新品種培育的角度分析，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)最大的優(yōu)點是什么？提示：克服了不同種植物遠(yuǎn)緣雜交的障礙，使不同種植物雜交成為可能。
1．植物體細(xì)胞雜交的過程
2.植物體細(xì)胞雜交育種的優(yōu)點和局限性(1)優(yōu)點：打破生殖隔離，克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。(2)局限性：目前有許多理論和技術(shù)問題未解決，還不能讓雜種植株按照人們的需求表現(xiàn)出雙親的雜合性狀。
3．植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較
用植物細(xì)胞工程技術(shù)將天竺葵與香茅草進(jìn)行雜交可產(chǎn)生驅(qū)蚊香草，使有驅(qū)蚊作用的香茅醛隨著植物的蒸騰作用散發(fā)到空氣中，達(dá)到驅(qū)蚊的效果。下列有關(guān)培養(yǎng)過程的敘述，錯誤的是( )A．原生質(zhì)體的融合常用PEG作為誘導(dǎo)劑B．形成的愈傷組織其代謝類型是自養(yǎng)需氧型C．由雜種細(xì)胞→雜種植株，要經(jīng)過有絲分裂和細(xì)胞的分化D．該項技術(shù)可克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙
解析： 植物體細(xì)胞雜交過程中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)劑是PEG。雜種細(xì)胞經(jīng)組織培養(yǎng)形成的愈傷組織，自身不含葉綠素?zé)o法進(jìn)行光合作用，其營養(yǎng)物質(zhì)來自培養(yǎng)基，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。雜種細(xì)胞要經(jīng)過有絲分裂、脫分化和再分化才能形成雜種植株。植物體細(xì)胞雜交克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。
青枯病是馬鈴薯的常見病害之一，少數(shù)馬鈴薯野生種對青枯病有抗性，但野生種難以與馬鈴薯栽培種直接雜交繁育。為獲得抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了植物體細(xì)胞雜交的實驗研究，過程如圖所示。下列分析正確的是( )A．常利用纖維素酶和果膠酶在低滲溶液中去除A、B的細(xì)胞壁B．過程①是人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，可采用物理法或化學(xué)法C．細(xì)胞C含有A和B的遺傳物質(zhì)，因此培育的雜種植株一定有抗性D．過程③歷經(jīng)了脫分化和再分化，其本質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)
解析：植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁之后，如果處在低滲溶液中，會吸水漲破，所以去壁的過程不能放在低滲溶液中進(jìn)行，A錯誤；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可采用物理法，如電融合法、離心法等方法，也可以采用化學(xué)法，如PEG融合法、高Ca2＋—高pH融合法等方法，B正確；雖然細(xì)胞C含有A和B的遺傳物質(zhì)，但是并不會把A、B兩種植株的優(yōu)良性狀都表達(dá)出來，而是隨機(jī)表達(dá)，C錯誤；過程③表示從愈傷組織到胚狀體，只是經(jīng)過再分化過程，沒有脫分化，D錯誤。
混淆植物體細(xì)胞雜交和有性雜交(1)植物體細(xì)胞雜交若兩個不同品種的植物細(xì)胞A、B進(jìn)行融合，A含有2X條染色體，2個染色體組，基因型為Aabb，B含有2Y條染色體，2個染色體組，基因型為ccDd，則新植株應(yīng)為四倍體，其體細(xì)胞中染色體數(shù)為2X＋2Y，基因型為AabbccDd，從中不難看出，體細(xì)胞雜交即兩個細(xì)胞融合成一個細(xì)胞，不管是染色體數(shù)、基因型還是染色體組都采用直接相加的方法。
(2)植物有性雜交有性雜交的子代細(xì)胞中染色體數(shù)為“X＋Y”，基因型為“AbcD”或“abcD”或“Abcd”或“abcd”，即先減半，再相加。(3)植物有性雜交過程中，遺傳物質(zhì)的傳遞遵循孟德爾遺傳定律，而植物體細(xì)胞雜交過程中，遺傳物質(zhì)的傳遞不遵循孟德爾遺傳定律。
A種植物細(xì)胞和B種植物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)如下圖所示(僅顯示細(xì)胞核中部分染色體)，將A、B兩種植物細(xì)胞去掉細(xì)胞壁后，誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體融合，形成單核的雜種細(xì)胞，若經(jīng)過組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是( )A．二倍體；基因型是DdYyRrB．三倍體；基因型是DdYyRrC．四倍體；基因型是DdYyRrD．四倍體；基因型是DDddYYyyRRrr
解析：據(jù)圖分析，A種植物的基因型為Dd，屬于二倍體，B種植物的基因型為YyRr，也屬于二倍體。植物體細(xì)胞融合后形成的雜種細(xì)胞含有兩個親本的遺傳物質(zhì)，基因型為DdYyRr，屬于異源四倍體，C項符合題意。
學(xué) | 霸 | 記 | 憶1.細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。2．植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，主要過程包括脫分化和再分化。3．生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素。4．植物細(xì)胞融合依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動性，融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁。
5．誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法和化學(xué)法。物理法包括電融合法、離心法等；化學(xué)法包括聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法等。6．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的意義：克服了不同種生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。
1．從細(xì)胞全能性的角度看，下列敘述正確的是( )A．分化程度高，具有較高的全能性B．分化程度低，具有較低的全能性C．分化程度低，具有較高的全能性D．分化程度高低與全能性無關(guān)解析： 分化程度越高，全能性越低，A錯誤；分化程度越低，全能性越高，B錯誤，C正確；全能性越高，細(xì)胞分裂能力越強(qiáng)，分化程度越低，D錯誤。
2．下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述中，錯誤的是( )A．其原理是細(xì)胞的全能性B．必須在無菌條件下進(jìn)行C．再分化的過程中需要一定光照D．一般需用培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)解析：植物組織培養(yǎng)所依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性，A正確；為保證實驗成功，植物組織培養(yǎng)的主要過程必須在無菌條件下進(jìn)行，B正確；愈傷組織的再分化過程中需要光照，原因是葉肉細(xì)胞中的葉綠素的合成需要光照，C正確；植物組織培養(yǎng)一般需要用固體培養(yǎng)基，D錯誤。
3．下圖為A、B兩種二倍體植物體細(xì)胞雜交過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：(1)步驟①采用的方法是_________。步驟②常用的化學(xué)試劑是_____________________，之后_______(填“需要”或“不需要”)篩選雜種細(xì)胞。
(2)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過程中，運(yùn)用的技術(shù)手段是___________________，其中步驟④是_________。植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新的雜種植株，與A、B兩種植物相比，該雜種植株是新物種的原因是___________________________________________。(3)培育該雜種植株的過程中，遺傳物質(zhì)的傳遞是否遵循孟德爾遺傳定律？為什么？_______________________________。
該雜種植株與A、B兩種植物均存在生殖隔離
不遵循，該過程不屬于有性生殖

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一 植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)

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