?高考一輪生物復(fù)習(xí)策略
1、落實(shí)考點(diǎn)。
一輪復(fù)習(xí)時(shí)要在熟讀課本、系統(tǒng)掌握基礎(chǔ)知識(shí)、基本概念和基本原理后，要找出重點(diǎn)和疑點(diǎn)；通過(guò)結(jié)合復(fù)習(xí)資料，篩選出難點(diǎn)和考點(diǎn)，有針對(duì)地重點(diǎn)復(fù)習(xí)。這就需要在掌握重點(diǎn)知識(shí)的同時(shí)，要善于進(jìn)行知識(shí)遷移和運(yùn)用，提高分析歸納的能力。
2、注重理論聯(lián)系實(shí)際，高三生物的考試并不僅僅是考概念，學(xué)會(huì)知識(shí)的遷移非常重要，并要靈活運(yùn)用課本上的知識(shí)。
不過(guò)特別強(qiáng)調(diào)了從圖表、圖形提取信息的能力。歷年高考試題，圖表題都占有比較大的比例。那些圖表題雖不是教材中的原圖，但它源于教材而又高于教材，是對(duì)教材內(nèi)容和圖表的變換、深化、拓展，使之成了考查學(xué)生讀圖能力、綜合分析能力、圖文轉(zhuǎn)換能力的有效途徑。
3、一輪復(fù)習(xí)基礎(chǔ)知識(shí)的同時(shí)，還要重點(diǎn)“攻堅(jiān)”，突出對(duì)重點(diǎn)和難點(diǎn)知識(shí)的理解和掌握。
這部分知識(shí)通常都是學(xué)生難于理解的內(nèi)容，做題時(shí)容易出錯(cuò)的地方。分析近幾年的高考生物試題，重點(diǎn)其實(shí)就是可拉開(kāi)距離的重要知識(shí)點(diǎn)?！?br /> 4、學(xué)而不思則罔，思而不學(xué)則殆。
這一點(diǎn)對(duì)高三生物一輪復(fù)習(xí)很重要。尤其是對(duì)于錯(cuò)題。錯(cuò)題整理不是把錯(cuò)題抄一遍。也不是所有的錯(cuò)題都需要整理。

專題64 動(dòng)物細(xì)胞工程

一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆
1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
(1)原理：細(xì)胞增殖。
(2)培養(yǎng)條件
①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，添加抗生素，定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物。
②營(yíng)養(yǎng)：除正常的有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)外，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。
③適宜的溫度和pH：溫度為36.5±0.5_℃(哺乳動(dòng)物)，pH為7.2～7.4。
④氣體環(huán)境：含95%空氣加5%CO2的混合氣體。
(3)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程

(4)應(yīng)用：生物制品的生產(chǎn)、檢測(cè)有毒物質(zhì)、醫(yī)學(xué)研究。
特別提醒?、賱?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程所用的培養(yǎng)基一般是液體培養(yǎng)基。
②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，因?yàn)槠浞只潭鹊停鲋衬芰?qiáng)，更易于培養(yǎng)。
③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶，第一次的作用是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞；第二次是將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，目的是避免動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。
④動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH；O2 的作用是促進(jìn)細(xì)胞有氧呼吸。
2．動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物
(1)原理：動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。
(2)過(guò)程

(3)結(jié)果：產(chǎn)生新個(gè)體。
(4)應(yīng)用：①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育；②保護(hù)瀕危物種；③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植。
二、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備
1．動(dòng)物細(xì)胞融合
(1)原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。
(2)融合方法：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。
(3)意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，也為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。
特別提醒　動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的三點(diǎn)不同
①融合前的處理不同：植物體細(xì)胞雜交用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體才能融合，而動(dòng)物細(xì)胞可以直接融合。
②誘導(dǎo)方式不同：相比植物體細(xì)胞雜交，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理。
③目的不同：植物體細(xì)胞雜交的目的是為了培育雜種植株；動(dòng)物細(xì)胞融合只是為了獲得雜種細(xì)胞。
2．單克隆抗體
(1)制備過(guò)程

(2)優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，可大量制備。
(3)用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。
解題技巧
1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的兩組概念辨析
(1)細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
(2)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)
①原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒(méi)有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞核型正常。
②傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞由于空間不足或細(xì)胞密度過(guò)大導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)枯竭，影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。一般情況下，細(xì)胞傳至10～50代后，出現(xiàn)核型異常，細(xì)胞增殖會(huì)明顯減緩，甚至完全死亡。
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的比較
項(xiàng)目
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
動(dòng)物體細(xì)胞核移植
原理
細(xì)胞增殖
動(dòng)物細(xì)胞核的全能性
過(guò)程



結(jié)果
獲得細(xì)胞群
獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體
3、易錯(cuò)提醒
(1)核移植時(shí)選MⅡ期卵母細(xì)胞的原因有：①此類細(xì)胞體積大，易于操作；②卵黃多，可為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)；③卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。
(2)克隆動(dòng)物是由重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)而來(lái)的，該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)源于受體細(xì)胞，細(xì)胞核基因來(lái)源于供體細(xì)胞的細(xì)胞核，所以克隆動(dòng)物絕大部分性狀與供體動(dòng)物相同，少數(shù)性狀與提供卵母細(xì)胞的動(dòng)物相同，與代孕動(dòng)物的性狀無(wú)遺傳關(guān)系。
(3)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)從生殖方式的角度看屬于無(wú)性生殖，需要?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。
4、制備單克隆抗體過(guò)程中兩次篩選的方法及目的
項(xiàng)目
第一次篩選
第二次篩選
篩選
原因
誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細(xì)胞，另外還有未融合的細(xì)胞
由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以需經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)
篩選
方法
用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)
用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開(kāi)始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群
篩選
目的
得到雜交瘤細(xì)胞
得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞

一、單選題
1．甲羊的去核卵細(xì)胞與乙羊體細(xì)胞的細(xì)胞核“組裝”成一個(gè)新的細(xì)胞，該細(xì)胞多次分裂后植入丙羊的子宮內(nèi)發(fā)育，產(chǎn)下羊羔的毛色和性別分別與哪只羊保持一致（ ）
A．甲、丙 B．甲、甲 C．乙、乙 ? D．丙、甲
【答案】C
【分析】
動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。
【詳解】
甲羊的去核卵細(xì)胞與乙羊體細(xì)胞的細(xì)胞核“組裝”成一個(gè)新的細(xì)胞，該細(xì)胞多次分裂后植入丙羊的子宮內(nèi)發(fā)育。由于毛色和性別受細(xì)胞核基因控制，而細(xì)胞核基因來(lái)自提供細(xì)胞核的乙羊，所以產(chǎn)下羊羔的毛色和性別都和乙羊保持一致，即C正確。
故選C。
2．下列關(guān)于細(xì)胞工程技術(shù)的敘述，正確的是（　　）
A．植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理相同
B．動(dòng)物細(xì)胞工程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，植物細(xì)胞工程不需要
C．植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合都可以克服生殖隔離得到新個(gè)體
D．植物組織培養(yǎng)可用于單倍體育種，動(dòng)物體細(xì)胞核移植可以培養(yǎng)克隆動(dòng)物
【答案】D
【分析】
1．植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。
2．植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。
3．體細(xì)胞核移植：又稱體細(xì)胞克隆，作為動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的常用技術(shù)手段，即把體細(xì)胞移入去核卵母細(xì)胞中，使其重組并能發(fā)育為新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，用核移植方法獲得的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。
【詳解】
A、植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；
B、動(dòng)物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程都需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，B錯(cuò)誤；
C、動(dòng)物細(xì)胞融合不能得到新個(gè)體，C錯(cuò)誤；
D、植物組織培養(yǎng)可用于單倍體育種，如花藥離體培養(yǎng)，動(dòng)物體細(xì)胞核移植可以培養(yǎng)克隆動(dòng)物，D正確。
故選D。
3．英國(guó)科學(xué)家維爾穆特首次用羊的體細(xì)胞（乳腺細(xì)胞）成功地培育出一只小母羊，取名“多利”，這一方法被稱之為“克隆”，以下四項(xiàng)中與此方法在本質(zhì)上最相近的是（ ）
A．將兔的早期胚胎分割后，分別植入兩只母兔子宮內(nèi)，并最終發(fā)育成兩只一樣的兔子
B．將人抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上，培育出具有抗病毒能力的煙草新品種
C．將鼠骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞
D．將人的精子與卵細(xì)胞在體外受精，待受精卵在試管內(nèi)發(fā)育到囊胚期時(shí)，再植入女性子宮內(nèi)發(fā)育成“試管嬰兒”
【答案】A
【分析】
克隆原意是指以幼苗或嫩枝插條，以無(wú)性繁殖或營(yíng)養(yǎng)繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接；克隆是指生物體通過(guò)體細(xì)胞進(jìn)行的無(wú)性繁殖，以及由無(wú)性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體組成的種群，通常是利用生物技術(shù)由無(wú)性生殖產(chǎn)生與原個(gè)體有完全相同基因組織后代的過(guò)程。
【詳解】
A、來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此胚胎分割可以看作動(dòng)物的無(wú)性繁殖或克隆，A正確；
B、將人抗病毒基因嫁接到煙草DNA分子上，采用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其原理是基因重組，不屬于克隆，B錯(cuò)誤；
C、將鼠骨髓瘤細(xì)胞與經(jīng)過(guò)免疫的脾細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞具備兩個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，不屬于克隆，C錯(cuò)誤；
D、“試管嬰兒”是體外受精和胚胎移植形成的，屬于有性生殖，不是克隆，D錯(cuò)誤。
故選A。
4．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的順序是（ ）
①原代培養(yǎng)②傳代培養(yǎng)③胰蛋白酶處理組織，形成分散的懸浮細(xì)胞
A．③①② B．①②③ C．②①③ D．①③②
【答案】A
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的順序?yàn)椋孩蹖⒔M織塊分散成單個(gè)細(xì)胞，用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液→①原代培養(yǎng)→②傳代培養(yǎng)。
故選A。
5．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述中，正確的是（　?。?br /> A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的就是為獲得細(xì)胞分泌蛋白
B．傳代培養(yǎng)一般不超過(guò)10代，否則核型可能改變
C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
D．可以通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得完整的動(dòng)物個(gè)體
【答案】B
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】
A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，可以獲取細(xì)胞產(chǎn)品、制作單克隆抗體、早期胚胎培養(yǎng)等，A錯(cuò)誤；
B、傳代培養(yǎng)一般不超過(guò)10代，否則核型可能改變，故一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，B正確；
C、動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，即出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；
D、通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得克隆細(xì)胞群，不能獲得完整的動(dòng)物個(gè)體，D錯(cuò)誤。
故選B。
6．下列關(guān)于動(dòng)物克隆與植物克隆的表述，正確的是（　?。?br /> A．動(dòng)物克隆實(shí)驗(yàn)中重組卵細(xì)胞首次分裂時(shí)基因開(kāi)始轉(zhuǎn)錄與復(fù)制
B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可用滋養(yǎng)細(xì)胞支持細(xì)胞生長(zhǎng)
C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的目的一致，都是為了獲得某種優(yōu)良個(gè)體
D．植物組織培養(yǎng)過(guò)程中通常用MS培養(yǎng)基，其除蔗糖外不含其他有機(jī)成分
【答案】B
【分析】
動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎．在體外將采集到的卵母細(xì)胞培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟，可以通過(guò)顯微操作技術(shù)去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核和第一極體，核移植時(shí)，對(duì)提供細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的奶牛不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理，使用電脈沖等方法可以激活重組細(xì)胞使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育。
【詳解】
A、克隆時(shí)重組卵細(xì)胞最初分裂時(shí)雖然復(fù)制了DNA，但基因的轉(zhuǎn)錄并未開(kāi)始，A錯(cuò)誤；
B、細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)需要滋養(yǎng)細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)支持生長(zhǎng)，B正確；
C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是獲得細(xì)胞或者組織器官，植物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得某種個(gè)體，C錯(cuò)誤；
D、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中通常用MS培養(yǎng)基，其除蔗糖外，還可能含有有機(jī)氮源，D錯(cuò)誤。
故選B。
7．下列有關(guān)培育體細(xì)胞克隆牛的敘述正確的是（　?。?br /> A．對(duì)受體卵母細(xì)胞去核是在MII期
B．克隆牛的培育說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞具有全能性
C．克隆牛是對(duì)體細(xì)胞供體牛100%的復(fù)制
D．用于核移植的供體細(xì)胞一般選傳代10代以上的細(xì)胞
【答案】A
【分析】
動(dòng)物核移植的概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體，核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物。
【詳解】
A、對(duì)受體卵母細(xì)胞去核是在MII期，因?yàn)闇p數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞內(nèi)所包含的遺傳物質(zhì)正好等于一個(gè)正常細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)，且此時(shí)的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)更有助于恢復(fù)細(xì)胞核的全能性，A正確；
B、克隆牛的培育說(shuō)明高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，B錯(cuò)誤；
C、細(xì)胞核移植方法獲得的重組細(xì)胞，細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來(lái)自供體核，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來(lái)自受體的細(xì)胞質(zhì)，所以用核移植的方法得到的動(dòng)物不是對(duì)體細(xì)胞核動(dòng)物100%的復(fù)制，C錯(cuò)誤；
D、核移植時(shí)做供核一方的一般是傳代10代以內(nèi)細(xì)胞，原因是細(xì)胞能保持正常的二倍體核型，遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變，D錯(cuò)誤。
故選A。
8．下表為有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較，其中錯(cuò)誤的是（　?。?br /> 選項(xiàng)
比較項(xiàng)目
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
A
原理
動(dòng)物細(xì)胞核的全能性
植物細(xì)胞的全能性
B
培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基
固體培養(yǎng)基
C
主要過(guò)程
原代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)
脫分化、再分化，形成植株
D
主要用途
獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物
植物快速繁殖、獲得脫毒苗等
A．A B．B C．C D．D
【答案】A
【分析】
植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：
比較項(xiàng)目
植物組織培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
原理
細(xì)胞的全能性
細(xì)胞增殖
培養(yǎng)基性質(zhì)
固體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動(dòng)物血清等
培養(yǎng)結(jié)果
植物體
細(xì)胞株、細(xì)胞系
培養(yǎng)目的
快速繁殖、培育無(wú)毒苗等
獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物
【詳解】
A、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)使用液體培養(yǎng)基，制成細(xì)胞懸液；植物組織培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基，B正確；
C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要過(guò)程是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是脫分化、再分化、形成完整植株，C正確；
D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物，植物組織培養(yǎng)主要用于植物快速繁殖、獲得脫毒苗、制備人工種子等，D正確。
故選A。
9．對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，下列說(shuō)法正確的是（　?。?br /> A．取單個(gè)肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，獲得細(xì)胞群的方法不屬于克隆培養(yǎng)法
B．細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中不需考慮細(xì)菌的污染問(wèn)題
C．該培養(yǎng)液也能用來(lái)培養(yǎng)乙肝病毒
D．肝臟腫瘤細(xì)胞的分裂周期變短
【答案】D
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【詳解】
A、取單個(gè)肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)獲得細(xì)胞群的方法屬于細(xì)胞層次的克隆，A錯(cuò)誤；
B、培養(yǎng)液受細(xì)菌污染后，其中的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)發(fā)生改變，不利于細(xì)胞的培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；
C、病毒無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其生存離不開(kāi)細(xì)胞，用培養(yǎng)液不能培養(yǎng)病毒，C錯(cuò)誤；
D、肝臟腫瘤細(xì)胞分裂能力增強(qiáng)，其分裂周期變短，D正確。
故選D。
10．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③分別表示其對(duì)應(yīng)的結(jié)果，據(jù)圖分析下面說(shuō)法正確的是（　?。?br />
A．若a是胚胎分割技術(shù)，則產(chǎn)生的①中，所有個(gè)體的基因型和表型一定相同
B．若b是體外受精技術(shù)，則形成②的過(guò)程屬于有性生殖
C．若c是核移植技術(shù)，則形成③的過(guò)程中使用不同供體細(xì)胞時(shí)成功的難易程度相同
D．①②③中的代孕母畜必須是具有優(yōu)良性狀的健康同種雌性個(gè)體
【答案】B
【分析】
1、胚胎分割的特點(diǎn)：來(lái)自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動(dòng)物無(wú)性繁殖或克隆的方法之一。
2、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)表明動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。
【詳解】
A、胚胎分割技術(shù)所得個(gè)體的基因型完全相同，但表現(xiàn)型不一定完全相同，因?yàn)楸憩F(xiàn)型還受環(huán)境的影響，A錯(cuò)誤；
B、體外受精技術(shù)得到的動(dòng)物叫做試管動(dòng)物，是有性生殖，B正確；
C、哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度小于體細(xì)胞核移植，其原因是 胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易，C錯(cuò)誤；
D、①②③中的代孕母畜必須是具有健康同種雌性個(gè)體，形狀不一定要優(yōu)良，但需要與供體同期發(fā)情處理，D錯(cuò)誤。
故選B。
11．下圖所示是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A．培養(yǎng)至第6d時(shí)，新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)
B．培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理
C．曲線bc段變化的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等
D．進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動(dòng)物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時(shí)間
【答案】A
【分析】
分析曲線圖可知，表示某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果．a(chǎn)b段表示活細(xì)胞和死細(xì)胞密度都在增加，bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加，培養(yǎng)第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)。
【詳解】
A、培養(yǎng)第6天時(shí)，活細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)，A錯(cuò)誤。
B、培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具需要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌處理，防止對(duì)實(shí)驗(yàn)造成污染，B正確；
C、曲線bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加，產(chǎn)生的主要原因是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等，C正確；
D、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先需要在等滲溶液中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理新鮮的動(dòng)物組織，但要注意酶溶液的濃度和處理時(shí)間，D正確。
故選A。
12．草莓皺縮病毒（SCV）感染草莓時(shí)，會(huì)使其葉片扭曲皺縮，植株矮化，導(dǎo)致減產(chǎn)。為了能快速有效檢測(cè)出該病毒，研究人員利用SCV的病毒粒子免疫健康小鼠，制備相應(yīng)的單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br /> A．從免疫小鼠體內(nèi)分離獲得的B細(xì)胞可無(wú)限增殖
B．在獲得能分泌相應(yīng)抗體的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中，需要進(jìn)行兩次篩選
C．用單克隆抗體檢測(cè)草莓是否感染SCV是利用了抗原—抗體雜交的原理
D．在制備單克隆抗體的過(guò)程中，用到了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
【答案】A
【分析】
單克隆抗體的制備：
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
【詳解】
A、從小鼠體內(nèi)中分離獲得的已免疫的B細(xì)胞，能產(chǎn)生抗體，但不能增殖，A錯(cuò)誤；
B、將已免疫的小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過(guò)專一抗體檢測(cè)篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；
C、單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備，單克隆抗體檢測(cè)草莓是否感染SCV，利用了抗原-抗體雜交的原理，C正確；
D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體，D正確。
故選A。
13．科學(xué)家以COVID－19（新冠病毒）的核衣殼蛋白為抗原，制備出了單克隆抗體。下列相關(guān)敘述，正確的是（　?。?br /> A．利用該單克隆抗體可以診斷是否感染COVID－19
B．體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得針對(duì)COVID－19的單克隆抗體
C．將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
D．將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，從小鼠血清中分離出的抗體為單克隆抗體
【答案】A
【分析】
1、效應(yīng)B細(xì)胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力，因此利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體。
2、雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，并且單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備等特點(diǎn)。
【詳解】
A、單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，因此利用該單克隆抗體與新冠病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷是否感染COVID-19，A正確；
B、單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞有產(chǎn)生抗體的能力，但沒(méi)有無(wú)限增殖的本領(lǐng)，因此在體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞不可能獲得大量針對(duì)COVID-19的單克隆抗體，B錯(cuò)誤；
C、將等量B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，C錯(cuò)誤；
D、用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，使其產(chǎn)生免疫反應(yīng)，以獲得相應(yīng)的B細(xì)胞，D錯(cuò)誤。
故選A。
14．動(dòng)物細(xì)胞融合屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)手段之一，下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述正確的是（　?。?br /> A．動(dòng)物細(xì)胞融合產(chǎn)生的細(xì)胞稱為重組細(xì)胞
B．融合后形成的細(xì)胞為單核或多核細(xì)胞
C．常用的誘導(dǎo)融合的生物誘導(dǎo)劑是聚乙二醇、滅活的病毒等
D．也稱細(xì)胞雜交，可由兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合成一個(gè)細(xì)胞
【答案】D
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。融合后形成的具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有電激、聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒等。
【詳解】
A、動(dòng)物細(xì)胞融合產(chǎn)生的細(xì)胞稱為雜交細(xì)胞，核移植產(chǎn)生的細(xì)胞稱為重組細(xì)胞，A錯(cuò)誤；
B、融合后形成具有兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞，B錯(cuò)誤；
C、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的生物誘導(dǎo)劑是滅活的病毒，聚乙二醇屬于化學(xué)誘導(dǎo)劑，C錯(cuò)誤；
D、動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交，是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，D正確。
故選D。
15．下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是（ ）
A．大規(guī)模生產(chǎn)干擾素，用于抵抗病毒引起的感染
B．為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細(xì)胞
C．大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑等
D．利用單克隆抗體技術(shù)，可以大量制備特異性強(qiáng)，靈敏度高的抗體
【答案】C
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體等．其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動(dòng)物工程技術(shù)的基礎(chǔ)．在題目給出的選項(xiàng)中，大規(guī)模生產(chǎn)干擾素、為燒傷病人提供移植的皮膚細(xì)胞和檢測(cè)有毒物質(zhì)都離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。
【詳解】
A、生產(chǎn)許多有價(jià)值的蛋白質(zhì)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等都可以借助于動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)來(lái)生產(chǎn)，是動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用，A不符合題意；
B、用灼傷病人皮膚的健康細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得大量自身的皮膚細(xì)胞，為大面積燒傷的病人提供移植的皮膚細(xì)胞，是動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用，B不符合題意；
C、大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、殺蟲劑等是植物細(xì)胞工程的應(yīng)用，C符合題意；
D、制備單克隆抗體屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用，D不符合題意。
故選C。
16．“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述中正確的有幾項(xiàng)（ ）
①重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)
②在制備單克隆抗體和利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得雜種植株的過(guò)程中都要進(jìn)行篩選
③在誘變育種、雜交育種、單倍體育種過(guò)程中都要進(jìn)行篩選
④為了快速繁殖無(wú)子西瓜，需篩選出特定染色體組數(shù)的體細(xì)胞才能進(jìn)行組織培養(yǎng)
A．一項(xiàng) B．二項(xiàng) C．三項(xiàng) D．四項(xiàng)
【答案】C
【分析】
標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)，單克隆抗體制備的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。
【詳解】
①重組質(zhì)粒上的標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，但含有標(biāo)記基因的細(xì)胞可能導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，也可能導(dǎo)入了普通質(zhì)粒，①錯(cuò)誤；
②單克隆抗體的制備過(guò)程中篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，植物體細(xì)胞雜交需要篩選出異種細(xì)胞融合的細(xì)胞，即雜種細(xì)胞，②正確；
③誘變育種的原理是基因突變，雜交育種的原理是基因重組，單倍體育種中需要通過(guò)減數(shù)分裂獲得配子（會(huì)出現(xiàn)基因重組），且基因突變是不定向的，基因重組是隨機(jī)的，所以在誘變育種、雜交育種、單倍體育種過(guò)程中都要進(jìn)行篩選，③正確；
④無(wú)子西瓜屬于三倍體，減數(shù)分裂時(shí)，聯(lián)會(huì)紊亂，不能產(chǎn)生可育配子，為了快速繁殖無(wú)子西瓜，可篩選出分化程度低的體細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，④正確。
故選C。
17．治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義。與下圖所示流程相關(guān)的敘述不正確的是（　　）

A．去核卵細(xì)胞一般取自處于減數(shù)分裂I中期的卵母細(xì)胞
B．過(guò)程①需要提供CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的酸堿度
C．胚胎干細(xì)胞可取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有分化為各種類型細(xì)胞的能力
D．圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體B理論上不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)
【答案】A
【分析】
治療性克隆主要應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)，該技術(shù)由高度分化的體細(xì)胞提供細(xì)胞核，處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞提供細(xì)胞質(zhì)；胚胎干細(xì)胞可來(lái)自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，其具有分化為各種體細(xì)胞的能力。
【詳解】
A、去核卵細(xì)胞一般取自處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；
B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需將培養(yǎng)液至于95%空氣+5%CO2氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱中，B正確；
C、囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有分化為其他體細(xì)胞的能力，C正確；
D、個(gè)體B為提供細(xì)胞核的個(gè)體，和組織器官的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)相同，D正確；
故選A。
18．世界第一例體細(xì)胞核移植克隆動(dòng)物多利的培育過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）

A．乳腺細(xì)胞應(yīng)選取傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，以保證其正常的遺傳基礎(chǔ)
B．卵母細(xì)胞去核的過(guò)程需保護(hù)透明帶和卵母細(xì)胞質(zhì)膜功能的完整性
C．乳腺細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞需要用顯微注射法和細(xì)胞融合技術(shù)
D．克隆羊多利的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自芬蘭多賽特白面母綿羊
【答案】D
【分析】
體細(xì)胞核移植概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。
2、原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。
3、動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。
【詳解】
A、由于10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保證正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)，因此用于核移植的供體細(xì)胞一般都選用10代以內(nèi)的細(xì)胞，A正確；
B、卵母細(xì)胞去核的過(guò)程需保護(hù)透明帶和卵母細(xì)胞質(zhì)膜功能的完整性，B正確；
C、乳腺細(xì)胞核移植到去核卵母細(xì)胞需要用顯微注射法，再用細(xì)胞融合技術(shù)使供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建重組胚胎，C正確；
D、克隆羊多利的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自芬蘭多賽特白面母綿羊，D錯(cuò)誤。
故選D。
19．下圖是三親嬰兒的培育過(guò)程可選用如下技術(shù)路線。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（ ）

A．該技術(shù)會(huì)將母親的所有遺傳病基因傳遞給后代
B．三親嬰兒的染色體全部來(lái)自母親提供的細(xì)胞核
C．捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒
D．三親嬰兒的培育只需要再將受精卵移植到子宮內(nèi)即可
【答案】C
【分析】
分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過(guò)程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。
【詳解】
A、該技術(shù)母親只是提供了細(xì)胞核，故只有母親的細(xì)胞核基因會(huì)傳遞給子代，A錯(cuò)誤；
B、看圖可知：三親嬰兒采用了體外受精的技術(shù)手段，三親嬰兒的染色體一半來(lái)自于母親提供的細(xì)胞核，B錯(cuò)誤；
C、捐獻(xiàn)者只提供了細(xì)胞質(zhì)，而紅綠色盲基因存在于細(xì)胞核，故捐獻(xiàn)者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給三親嬰兒，C正確；
D、三親嬰兒需要在體外將受精卵培育成胚胎，再移植到子宮內(nèi)，D錯(cuò)誤。
故選C。
20．2017年世界上首例體細(xì)胞克隆猴在我國(guó)誕生，分別叫“中中”和“華華”，這一成果轟動(dòng)了全世界，為研究人類疾病提供了新的模型動(dòng)物。下圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />
A．卵子細(xì)胞質(zhì)中含有促使成纖維細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)
B．重組細(xì)胞需用電刺激、乙醇或滅活的病毒處理等方法激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程
C．代孕猴d對(duì)早期胚胎不會(huì)發(fā)生免疫排斥，為胚胎的繼續(xù)發(fā)育提供了可能
D．與鼠相比，克隆猴更適合作為人類疾病和進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)的模型動(dòng)物
【答案】B
【分析】
有關(guān)體細(xì)胞核移植過(guò)程應(yīng)注意：
①細(xì)胞核移植技術(shù)中注入去核卵母細(xì)胞中的不是供體細(xì)胞核，而是整個(gè)細(xì)胞，伴隨著兩細(xì)胞融合，體現(xiàn)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有一定的流動(dòng)性。
②受體細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞，此時(shí)在透明帶內(nèi)包含著第一極體，在去核的同時(shí)連同第一極體一并去掉。
③該技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。
④用卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞原因：a．卵母細(xì)胞體積大，便于操作；b．含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；c．營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富。
⑤克隆屬于無(wú)性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致。
【詳解】
A、卵子細(xì)胞質(zhì)中含有促使成纖維細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，A正確；
B、重組細(xì)胞需用電刺激、乙醇等方法激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，B錯(cuò)誤；
C、受體（代孕猴d）對(duì)外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，為胚胎的繼續(xù)發(fā)育提供了可能，C正確；
D、猴與人在進(jìn)化上親緣關(guān)系很近，因此，與鼠相比，克隆猴更適合作為人類疾病和進(jìn)行藥物實(shí)驗(yàn)的模型動(dòng)物，D正確。
故選B。
21．在細(xì)胞工程的操作過(guò)程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列選擇不合理的是（ ）
A．用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)培育出的馬鈴薯比連年采用塊莖繁殖的馬鈴薯產(chǎn)量高
B．胚胎分割技術(shù)中，可以切取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行DNA分析性別鑒定
C．選擇愈傷組織進(jìn)行射線或化學(xué)物質(zhì)的處理，可篩選出抗病、耐旱、高產(chǎn)等的新品種
D．選擇去核的MⅡ期卵母細(xì)胞作為核移植的受體，可以促進(jìn)體細(xì)胞核表現(xiàn)全能性
【答案】B
【分析】
1、動(dòng)物細(xì)胞核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆個(gè)體。
2、選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞大，容易操作；卵（母）細(xì)胞質(zhì)多，營(yíng)養(yǎng)豐富；含有促使細(xì)胞全能性表達(dá)的物質(zhì)。
3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】
A、莖尖等分生區(qū)組織幾乎不含病毒，用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)培育出的馬鈴薯是脫毒馬鈴薯，產(chǎn)量比連年采用塊莖繁殖的馬鈴薯產(chǎn)量高，A正確；
B、應(yīng)該取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行DNA分析性別鑒定，B錯(cuò)誤；
C、對(duì)愈傷組織進(jìn)行射線或化學(xué)物質(zhì)的處理，促使其發(fā)生突變，再通過(guò)誘導(dǎo)分化形成植株，可從中篩選出抗病、耐旱、高產(chǎn)等的新品種，C正確；
D、選擇去核的MⅡ期卵母細(xì)胞作為核移植的受體，該細(xì)胞除了體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，可以促進(jìn)體細(xì)胞核表現(xiàn)全能性，D正確。
故選B。
22．相比正常甲狀腺組織，甲狀腺癌細(xì)胞中N基因表達(dá)水平較低。為研究N基因?qū)谞钕侔┘?xì)胞的影響，研究者培養(yǎng)出單層細(xì)胞，通過(guò)更換培養(yǎng)基，使癌細(xì)胞不再增殖，并使用硬物劃線，48小時(shí)后觀察結(jié)果如下，下列分析錯(cuò)誤的是（ ）

A．甲狀腺髓樣癌細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖，水，氨基酸、動(dòng)物血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
B．經(jīng)過(guò)胰蛋白酶處理后的甲狀腺髓樣癌細(xì)胞在培養(yǎng)板上出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象
C．轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的組為對(duì)照組，目的是排除轉(zhuǎn)基因操作以及基因載體對(duì)細(xì)胞的影響
D．實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明N基因能夠抑制癌細(xì)胞的增殖，為預(yù)防和治療癌癥提供了新的方向
【答案】B
【分析】
下丘腦通過(guò)釋放促甲狀腺激素釋放激素(TRH），來(lái)促進(jìn)垂體合成和分泌促甲狀腺激素(TSH)，TSH則可以促進(jìn)甲狀腺的活動(dòng)，合成和釋放甲狀腺激素，這就是所謂的分級(jí)調(diào)節(jié)。而在正常情況下甲狀腺激素要維持在一定濃度內(nèi)，不能持續(xù)升高。當(dāng)甲狀腺激素達(dá)到一定濃度后，這個(gè)信息又會(huì)反饋給下丘腦和垂體，從而抑制兩者的活動(dòng)，這樣系統(tǒng)就可以維持在相對(duì)穩(wěn)定水平。
【詳解】
A、甲狀腺髓樣癌細(xì)胞屬于動(dòng)物細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖，水，氨基酸、動(dòng)物血清等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，A正確；
B、經(jīng)過(guò)胰蛋白酶處理后的甲狀腺髓樣癌細(xì)胞在培養(yǎng)板上不會(huì)出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)的現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；
C、轉(zhuǎn)入空質(zhì)粒的組為對(duì)照組，目的是排除轉(zhuǎn)基因操作以及基因載體對(duì)細(xì)胞的影響，C正確；
D、與另外兩組相比，48h后轉(zhuǎn)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞劃痕的寬度較小，說(shuō)明N基因能夠N基因能夠抑制癌細(xì)胞的增殖，為預(yù)防和治療癌癥提供了新的方向，D正確。
故選B。
23．下圖是單克隆抗體制備過(guò)程示意圖，其中1過(guò)程注射的物質(zhì)和A細(xì)胞的名稱分別為（ ）

A．抗體、T淋巴細(xì)胞 B．抗原、T淋巴細(xì)胞
C．抗體、B淋巴細(xì)胞 D．抗原、B淋巴細(xì)胞
【答案】D
【分析】
題圖分析，A細(xì)胞表示B淋巴細(xì)胞，B細(xì)胞表示骨髓瘤細(xì)胞，C細(xì)胞表示雜交瘤細(xì)胞，D表示產(chǎn)生的單克隆抗體。1表示給小鼠注射抗原，2表示提取B細(xì)胞，3表示動(dòng)物細(xì)胞融合，4表示篩選出能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞，56表示提取單克隆抗體。
【詳解】
由于制備單克隆抗體的細(xì)胞來(lái)源是B淋巴細(xì)胞（已經(jīng)免疫的）和骨髓瘤細(xì)胞；由分析可知，1表示給小鼠注射抗原，使得小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)，形成能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，故A細(xì)胞為B淋巴細(xì)胞，即D正確。
故選D。
24．某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處不正確（ ）

植物細(xì)胞工程
動(dòng)物細(xì)胞工程
技術(shù)手段
植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合等
特殊處理
酶解法去除細(xì)胞壁
胃蛋白酶處理得到細(xì)胞懸浮液
融合方法
物理方法、化學(xué)方法、生物方法
物理方法、化學(xué)方法和生物方法
典型應(yīng)用
無(wú)病毒植物的培育、人工種子、種間植物雜交等
單克隆抗體的制備等
培養(yǎng)基區(qū)別
所用的糖必須為葡萄糖
所用的糖為葡萄糖且動(dòng)物血清不可缺少
A．0 B．1 C．2 D．3
【答案】D
【分析】
植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段主要有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交，其中植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)；動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)手段主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植和核移植，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。動(dòng)、植物細(xì)胞工程的原理和技術(shù)手段有相似之點(diǎn)，但也存在不同之處，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意列表比較。
【詳解】
技術(shù)手段：植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交，動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合等，正確；
特殊處理：植物體細(xì)胞雜交時(shí)，需要用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸浮液，錯(cuò)誤；
融合方法：誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理方法和化學(xué)方法，而誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法還包括生物方法，錯(cuò)誤；
典型應(yīng)用：植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于無(wú)病毒植物的培育、制備人工種子，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于種間植物雜交等；而動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備單克隆抗體，正確；
培養(yǎng)液區(qū)別：植物組織培養(yǎng)過(guò)程中利用的是蔗糖，錯(cuò)誤。
即D符合題意，ABC不符合題意。
故選D。
25．新型冠狀病毒可通過(guò)表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒對(duì)細(xì)胞的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（ ）

A．給圖中小鼠注射S蛋白，一段時(shí)間后從小鼠的脾臟中提取B細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞融合
B．經(jīng)HAT培養(yǎng)篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞在體外擴(kuò)大培養(yǎng)，便可大量生產(chǎn)出抗S蛋白單克隆抗體
C．單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷
D．與血清抗體相比，該方法制備的單克隆抗體靈敏度更高
【答案】B
【分析】
單克隆抗體的制備時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，此過(guò)程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，再將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過(guò)體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點(diǎn)。
【詳解】
A、給圖中小鼠注射S蛋白，檢測(cè)到小鼠血清出現(xiàn)S蛋白抗體之后，說(shuō)明小鼠已經(jīng)產(chǎn)生了相應(yīng)的體液免疫過(guò)程，這時(shí)從脾臟中獲得相應(yīng)B淋巴細(xì)胞，并誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，A正確；
B、經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)后還需進(jìn)行抗體檢測(cè)才能用于單克隆抗體的生產(chǎn)，B錯(cuò)誤；
C、根據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的原理，將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；
D、一般抗血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混合物，而單克隆抗體識(shí)別抗原部位具有專一性，所以單克隆抗體比血清抗體的靈敏度更高，D正確。
故選B。
26．NRP—1是人體血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的受體，在腫瘤新生血管形成與腫瘤細(xì)胞遷移、黏附、侵襲等方面起重要調(diào)控作用。為探究NRP—1MAb（NRP-l的單克隆抗體）對(duì)乳腺癌的治療作用，研究人員以兔子為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)得到以下數(shù)據(jù)如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤（ ）

A．據(jù)圖推測(cè)，NRP—1MAb能夠有效降低腫瘤的體積，中、髙劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著
B．NRP—1MAb的制備過(guò)程中利用滅活的病毒誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，其原理是利用了病毒表面的糖蛋白和相關(guān)酶與細(xì)胞膜表面的糖蛋白發(fā)生作用
C．將NRP—1反復(fù)給兔子注射，提取已免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞都能產(chǎn)生NRP—1MAb
D．治療機(jī)理可能為NRP—1MAb．與NRP—1特異性結(jié)合，阻止了NRP—1與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的結(jié)合，從而抑制了腫瘤血管的生成和腫瘤細(xì)胞的分散轉(zhuǎn)移
【答案】C
【分析】
曲線分析：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，與對(duì)照組比較，NRP-1 MAb能夠有效地降低腫瘤的體積，并且中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著。
【詳解】
A、由曲線圖可知，NRP—1MAb能夠有效降低腫瘤的體積，中、高劑量抗體的降低效果比低劑量的效果更顯著，A正確；
B、滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝集，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子中心排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合，B正確；
C、進(jìn)過(guò)選擇培養(yǎng)基篩選的雜交瘤細(xì)胞并不能產(chǎn)生單一的抗體，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體陽(yáng)性檢測(cè)最終篩選到能只產(chǎn)生NRP—1MAb的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；
D、根據(jù)題干信息“NRP—1是人體血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的受體，在腫瘤新生血管形成與腫瘤細(xì)胞遷移、黏附、侵襲等方面起重要調(diào)控作用”，由此可推測(cè)，NRP—1MAb可能與NRP—1特異性結(jié)合，阻止了NRP—1與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的結(jié)合，從而抑制了腫瘤血管的生成和腫瘤細(xì)胞的分散轉(zhuǎn)移，D正確。
故選C。
二、多選題
27．下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中屬于原代培養(yǎng)的是（ ）
A．通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)
B．從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程
C．出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后接下來(lái)的細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程
D．哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程
【答案】AB
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，取幼齡動(dòng)物的組織，剪碎后，用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)液中進(jìn)行的培養(yǎng)是原代培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁，在用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行的是傳代培養(yǎng)。
【詳解】
A、通常將動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，A正確；
B、從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)過(guò)程是原代培養(yǎng)，B正確；
C、出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后，接去下的細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程是傳代培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；
D、無(wú)論原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程，細(xì)胞都有在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過(guò)程，D錯(cuò)誤。
故選AB。
28．下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）
A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同
B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過(guò)程中都要用到胰蛋白酶
C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株
D．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物
【答案】ACD
【分析】
植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較
比較項(xiàng)目
植物組織培養(yǎng)
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
原理
細(xì)胞的全能性
細(xì)胞增殖
培養(yǎng)基性質(zhì)
固體培養(yǎng)基
液體培養(yǎng)基
培養(yǎng)基成分
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等
營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動(dòng)物血清等
培養(yǎng)結(jié)果
植物體
細(xì)胞株、細(xì)胞系
培養(yǎng)目的
快速繁殖、培育無(wú)毒苗等
獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物
分散處理
無(wú)
有
脫分化
有
無(wú)
【詳解】
A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基中的成分不同，如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要加血清，植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要添加血清，A正確；B、植物組織培養(yǎng)不需要胰蛋白酶，B錯(cuò)誤；
C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)，莖尖組織培養(yǎng)可獲得脫毒植株，C正確；
D、煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)能得到細(xì)胞代謝產(chǎn)物，D正確。
故選ACD。
29．下列關(guān)于高產(chǎn)奶?？寺∵^(guò)程的敘述，錯(cuò)誤的是（　?。?br /> A．供體牛體細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，不可能發(fā)生細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象
B．培養(yǎng)至M Ⅱ中期的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有能促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)
C．通過(guò)電刺激促進(jìn)供體與去核受體細(xì)胞兩兩融合，供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞
D．胚胎移植時(shí)，應(yīng)將重組細(xì)胞直接移入代孕母牛的子宮
【答案】AD
【分析】
動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎。這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。核移植得到的動(dòng)物稱克隆動(dòng)物，克隆動(dòng)物的核基因完全來(lái)自供體動(dòng)物，而細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自受體細(xì)胞。
【詳解】
A、供體牛體細(xì)胞在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸性抑制，A錯(cuò)誤；
B、核移植用MⅡ中期的卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞原因有卵母細(xì)胞體積大，便于操作；含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，B正確；
C、去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過(guò)電擊后融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，構(gòu)建成重組胚胎，C正確；
D、胚胎移植時(shí)，應(yīng)先將重組細(xì)胞培養(yǎng)成早期胚胎，再把早期胚胎移入代孕母牛的子宮，D錯(cuò)誤。
故選AD。
30．三聚氰胺是小分子有機(jī)物，下圖為采用單克隆技術(shù)制備三聚氰胺特異性抗體 的過(guò)程，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />
A．三聚氰胺分子經(jīng)“擴(kuò)容”后可激活小鼠的免疫系統(tǒng)
B．從自然免疫的小鼠體內(nèi)可獲得產(chǎn)生該特異性抗體的B淋巴細(xì)胞
C．經(jīng)培養(yǎng)篩選后得到的雜交瘤細(xì)胞只具有產(chǎn)生單一抗體的特點(diǎn)
D．在基因水平上將單克隆抗體改造為嵌合抗體可降低對(duì)人體的不良反應(yīng)
【答案】BC
【分析】
分析題圖：該圖是制備三聚氰胺特異性抗體的過(guò)程。由于三聚氰胺分子量過(guò)小，不足以激活高等動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，制備抗體前必須對(duì)三聚氰胺分子進(jìn)行有效“擴(kuò)容”。
【詳解】
A、根據(jù)試題的分析，由于三聚氰胺分子量過(guò)小，不足以激活高等動(dòng)物的免疫系統(tǒng)，制備抗體前必須對(duì)三聚氰胺分子進(jìn)行有效“擴(kuò)容”，以激活小鼠的免疫反應(yīng)，A正確；
B、三聚氰胺是小分子有機(jī)物，不會(huì)被動(dòng)物的免疫細(xì)胞的受體所識(shí)別，B錯(cuò)誤；
C、經(jīng)培養(yǎng)篩選得到的雜交瘤細(xì)胞具有雙親的特性，既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生單一抗體，C錯(cuò)誤；
D、通過(guò)對(duì)鼠和人控制抗體產(chǎn)生的基因進(jìn)行拼接，實(shí)現(xiàn)對(duì)鼠源雜交瘤抗體的改造，能生產(chǎn)出對(duì)人體的不良反應(yīng)減少、效果更好的鼠-人嵌合抗體，D正確。
故選BC。
三、綜合題
31．如圖是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）容器A中放置的是動(dòng)物器官或組織，它一般取自________。
（2）容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是________，然后用________酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，這樣做的目的是________。
（3）培養(yǎng)先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)基成分有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和___等，細(xì)胞增殖產(chǎn)生的新細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)出________生長(zhǎng)現(xiàn)象。當(dāng)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)相互接觸時(shí)，就會(huì)停止分裂增殖，這稱為_(kāi)_______現(xiàn)象。需用胰蛋白酶處理后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，稱為_(kāi)_______。
（4）細(xì)胞在C瓶培養(yǎng)，出現(xiàn)極少數(shù)細(xì)胞無(wú)限繁殖，其原因是________。
【答案】胚胎或幼齡動(dòng)物 剪碎 胰蛋白（或膠原蛋白） 使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸 動(dòng)物血清 貼壁 接觸抑制 傳代培養(yǎng) 細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，帶有癌變特點(diǎn)
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
【詳解】
（1）胚胎或幼齡動(dòng)物的細(xì)胞具有旺盛的分裂能力，培養(yǎng)后可獲得較多細(xì)胞。
（2）為了增加細(xì)胞與培養(yǎng)液的接觸，應(yīng)使細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，可先用物理方法剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。
（3）血漿中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，為良好的天然營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，故在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)除了加入葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等成分，還需加入血清；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中有細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的特點(diǎn)，當(dāng)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)相互接觸時(shí)，就會(huì)停止分裂增殖，這稱為接觸抑制；接觸抑制現(xiàn)象出現(xiàn)后需用胰蛋白酶處理，使之分散開(kāi)，以便與培養(yǎng)液充分接觸；若再分瓶培養(yǎng)則為傳代培養(yǎng)。
（4）培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變異而具有癌細(xì)胞的特點(diǎn)，即具有無(wú)限增殖能力。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理、過(guò)程、特點(diǎn)等知識(shí)，識(shí)記培養(yǎng)液的成分和作用，識(shí)記癌細(xì)胞的特點(diǎn)等，并能結(jié)合題意分析作答。
圖1是培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（MEF細(xì)胞）的示意圖，圖2是在用MEF細(xì)胞制成的飼養(yǎng)層上培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）的示意圖。回答下列問(wèn)題：

32．圖1中培養(yǎng)MEF細(xì)胞的適宜溫度約為_(kāi)_______℃。當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)就停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的________。
33．ES細(xì)胞存在于________中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至________的潛能。
34．在培養(yǎng)液中單獨(dú)培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，ES細(xì)胞容易發(fā)生分化，結(jié)合圖2可推知MEF細(xì)胞的作用是____________________________________________________________________。
【答案】
32． 36．5±0．5 接觸抑制
33． 早期胚胎 個(gè)體
34．抑制ES細(xì)胞分化
【分析】
1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
2、胚胎干細(xì)胞具有胚胎細(xì)胞的特性，體積較小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物任何一種組織細(xì)胞。
32．
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)的適宜溫度約為36.5±0.5℃；當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)就停止分裂，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
33．
哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱ES或EK細(xì)胞，來(lái)源于早期胚胎中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。
34．
在培養(yǎng)液中單獨(dú)培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，ES細(xì)胞容易發(fā)生分化，結(jié)合圖2可知加入MEF細(xì)胞后ES細(xì)胞可以只增殖不分化，故可推知MEF細(xì)胞的作用是抑制ES細(xì)胞分化。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎干細(xì)胞的特點(diǎn)和應(yīng)用，意在考查學(xué)生對(duì)所學(xué)知識(shí)的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析圖形、獲取信息、解決問(wèn)題的綜合應(yīng)用的能力。
下面為制備單克隆抗體和多克隆抗體的示意圖，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

35．圖中向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，所獲得的免疫抗血清實(shí)際上是含有____________（填寫抗體的名稱）的混合物，這種方法制備的多克隆抗體不僅產(chǎn)量低，而且純度低。
36．圖中選用B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，說(shuō)明細(xì)胞膜具有________；如果僅考慮細(xì)胞的兩兩融合，其融合細(xì)胞有________種類型。
37．圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出________，篩選②的目的是篩選出__________。
38．科學(xué)工作者正在研究的用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是________________。用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥的方法優(yōu)于化療的原因是______________________________。
39．由圖中可看出，單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用了________和________兩大技術(shù)。
【答案】
35．Ab1、Ab2、Ab3、Ab4
36． 流動(dòng)性 3
37． 雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞
38． 單克隆抗體上連接抗癌藥物 不損傷正常細(xì)胞，且用藥劑量少，毒副作用小
39． 動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
【分析】
1、在制備單克隆抗體時(shí)，首先要給小鼠注射抗原，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，然后將漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過(guò)選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。
2、在單克隆抗體的制備過(guò)程中，使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。
35．
結(jié)合題圖可以看出，向小鼠注射包含多種抗原決定簇的抗原后，獲得的免疫抗血清實(shí)際上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4多種抗體的混合物。
36．
B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特性——具有一定的流動(dòng)性；如果僅考慮細(xì)胞的兩兩融合，其融合細(xì)胞有3種類型（B細(xì)胞和B細(xì)胞融合、B細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞融合、雜交瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞融合）。
37．
圖中兩次篩選的目的不同，其中篩選①的目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，篩選②的目的是篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。
38．
科學(xué)工作者正在研究的用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，借助單克隆抗體的導(dǎo)向作用，將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞；用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥和普通化療相比優(yōu)點(diǎn)是不損傷正常細(xì)胞，且用藥劑量少，毒副作用小。
39．
由圖中可看出，單克隆抗體的制備過(guò)程中，運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合（雜交瘤細(xì)胞的獲得）和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)兩大技術(shù)。
【點(diǎn)睛】
本題旨在考查單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程和分析圖并獲取信息是解答本題的關(guān)鍵。
40．CEA是一種糖蛋白，在腸癌、肺癌等患者的血清中其含量常常異常升高，也常見(jiàn)于正常人體胎兒早期的消化管等器官組織中。常用CEA抗體檢測(cè)血清中的CEA含量，進(jìn)行相關(guān)疾病的臨床診斷。下圖是CEA單克隆抗體的制備流程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題∶

（1）過(guò)程①表示從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲取大量目的基因的過(guò)程，該過(guò)程中利用添加入反應(yīng)體系中的____________將A特異性擴(kuò)增，獲得的A與人體細(xì)胞內(nèi)的CEA基因在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是____________。制備重組質(zhì)粒過(guò)程時(shí)，為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接，應(yīng)采用圖示中的____________酶的切割位點(diǎn)。過(guò)程②常用____________法。
（2）過(guò)程③在融合處理后需要利用____________方法獲取能產(chǎn)生所需的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。在過(guò)程③中發(fā)現(xiàn)小鼠被抗原蛋白免疫后，從脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞卻包含有多種能產(chǎn)生不同抗體的細(xì)胞，原因是____________。
（3）在將該雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)的過(guò)程④前，需要先將其進(jìn)行____________過(guò)程，應(yīng)用獲得的單克隆抗體搭載抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”治療癌癥，具有的優(yōu)點(diǎn)有____________。
【答案】特異性引物 無(wú)啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子 AscI和BamHI 感受態(tài)細(xì)胞（Ca2+溶液處理） 選擇性培養(yǎng)基篩選和專一抗體檢測(cè) 小鼠在用該抗原免疫前曾經(jīng)接觸過(guò)其他多種抗原 克隆化培養(yǎng) 定向原位殺死癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞，減少用藥劑量
【分析】
單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【詳解】
（1）從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲取大量目的基因可以采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的前提是需要加入特異性引物將其擴(kuò)增；
從cDNA文庫(kù)中獲得目的基因和人體內(nèi)CEA基因的結(jié)構(gòu)區(qū)別是從cDNA文庫(kù)中擴(kuò)增獲得的目的基因中無(wú)啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子；
制備重組質(zhì)粒過(guò)程時(shí)，為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接，且在啟動(dòng)子和終止子之間插入目的基因，應(yīng)選擇用AscⅠ酶和BamHⅠ酶切割；
將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌常用Ca2+溶液處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。
（2）在將B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后，需要用選擇性培養(yǎng)基篩選出產(chǎn)生特定單一抗體的細(xì)胞，和專一抗體檢測(cè)才能獲取能產(chǎn)生所需的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞；由于小鼠在用該抗原免疫前曾經(jīng)接觸過(guò)其他多種抗原，所以從脾臟中分離出B淋巴細(xì)胞有多種，能夠產(chǎn)生多種抗體。
（4）在將該雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔培養(yǎng)前，需要先將其進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)有定向原位殺死癌細(xì)胞，不損傷正常細(xì)胞，減少用藥劑量。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合單克隆抗體制備和基因工程的相關(guān)知識(shí)，考查單克隆抗體制備的原理及具體過(guò)程，考查學(xué)生提取信息和分析問(wèn)題的能力，學(xué)生需要能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
41．鐵皮石斛被國(guó)際藥用植物界稱為“藥界的大熊貓”，被民間稱為“救命的仙草”，現(xiàn)代藥理表明，鐵皮石斛具有抗腫瘤、抗衰老、增強(qiáng)免疫力等功能，但鐵皮石斛自然繁殖力極低，故對(duì)鐵皮石斛進(jìn)行體外的快速繁殖是解決目前鐵皮石斛資源和供需矛盾的主要途徑，鐵皮石斛的快速繁殖過(guò)程屬于克隆范疇?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）鐵皮石斛的快速繁殖屬于植物細(xì)胞工程應(yīng)用中的植物繁殖的新途徑，植物繁殖的新途徑中還包括__________，此外，植物細(xì)胞工程的應(yīng)用還包括____________________（答出兩項(xiàng)）。
（2）在植物的生長(zhǎng)發(fā)育中，并不是所有細(xì)胞都能表現(xiàn)出全能性，這是因?yàn)開(kāi)___________________。
（3）鐵皮石斛的快速繁殖過(guò)程應(yīng)用的植物細(xì)胞工程技術(shù)為_(kāi)_________，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的____________________（答出兩項(xiàng)）等會(huì)影響該技術(shù)中植物細(xì)胞的發(fā)育方向。
（4）克隆技術(shù)可在不同水平上進(jìn)行，基因工程中PCR技術(shù)屬于__________水平的克隆，單克隆抗體中對(duì)選擇出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)屬于__________水平的克隆，克隆羊“多莉”屬于個(gè)體水平的克隆。有關(guān)克隆人的話題中包括__________人和生殖性克隆人，我國(guó)政府對(duì)生殖性克隆的原則是____________________。
【答案】作物脫毒 作物新品種的培育和細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn) 在特定的時(shí)間和空間條件下，細(xì)胞中的基因選擇性表達(dá) 植物組織培養(yǎng) 濃度和比例 分子 細(xì)胞 治療性克隆 不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)
【分析】
植物組織培養(yǎng)過(guò)程：
（1）原理：植物細(xì)胞具有全能性。
（2）過(guò)程：

（3）用途：a、微型繁殖：用于快速繁殖優(yōu)良品神的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，也叫快速繁殖技術(shù)．繁殖過(guò)程中的分裂方式是有絲分裂，親、子代細(xì)胞內(nèi)DNA不變，所以能夠保證親、子代遺傳特性不變；
b、作物脫毒：利用莖尖、根尖等無(wú)毒組織，進(jìn)行微型繁殖，所獲幼苗是無(wú)毒的；
c、人工種子：通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織的細(xì)胞培養(yǎng)成在形態(tài)及生理上與天然種子胚相似的胚狀體，也叫作體細(xì)胞胚．這種體細(xì)胞胚有于葉、根、莖分生組織的結(jié)構(gòu)．科學(xué)家把體細(xì)胞胚包埋在膠囊內(nèi)形成球狀結(jié)構(gòu)，使其具備種子機(jī)能．所以，人工種子是一種人工制造的代替天然種子的顆粒體，可以直接播種于田間。①制作方法：人工種子是利用植物組織培養(yǎng)獲得胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等，然后包上人丁種皮就形成了人工種子。②優(yōu)點(diǎn)：可使在自然條件下不結(jié)實(shí)或種子昂貴的植物得以繁殖；保持親本的優(yōu)良性狀，因該過(guò)程為無(wú)性繁殖；節(jié)約糧食，減少種子的使用；可以控制添加一些物質(zhì)，如除草劑、農(nóng)藥、促進(jìn)生長(zhǎng)的激素、有益菌等． 周期短，易儲(chǔ)存和運(yùn)輸，不受氣候和地域的限制。
（4）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：從人工培養(yǎng)的愈傷組織細(xì)胞中提取某種成分，如紫草素、香料等。
【詳解】
（1）應(yīng)用植物細(xì)胞工程繁殖植物的新途徑除了快速繁殖外，還包括作物脫毒，植物細(xì)胞工程的應(yīng)用除了植物繁殖的新途徑外，還包括作物新品種的培育和細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
（2）在植物的生長(zhǎng)發(fā)育中，在特定的時(shí)間和空間條件下，細(xì)胞中的基因選擇性表達(dá)，導(dǎo)致不是所有細(xì)胞都能表現(xiàn)出全能性。
（3）鐵皮石斛的快速繁殖過(guò)程應(yīng)用的植物細(xì)胞工程技術(shù)為植物組織培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度和比例等會(huì)影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。
（4）基因工程中通過(guò)PCR技術(shù)可以擴(kuò)增雙鏈DNA，屬于分子水平的克隆，單克隆抗體中對(duì)選擇出的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)屬于細(xì)胞水平的克隆，克隆羊“多莉”屬于個(gè)體水平的克隆。克隆人包括治療性克隆人和生殖性克隆人，我國(guó)政府對(duì)生殖性克隆的原則是不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)。
【點(diǎn)睛】
本題考查植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，對(duì)生物學(xué)問(wèn)題作出準(zhǔn)確的判斷。
42．科研人員在雜交瘤細(xì)胞的基礎(chǔ)上，獲得了雙雜交瘤細(xì)胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。
（1）科研人員將抗原、分別注射到小鼠體內(nèi)，引起機(jī)體的______免疫，_____分泌相應(yīng)抗體。
（2）科研人員獲得上述小鼠的脾臟細(xì)胞，制備兩種雜交瘤細(xì)胞。每種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體結(jié)構(gòu)，與抗原結(jié)合的情況如圖1所示。

①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用____________處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用____________試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入____________（天然成分）培養(yǎng)。若兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。
②抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。因此，雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時(shí)與抗原α、β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2。請(qǐng)將A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中____________。
1
2
3
4
5
6
A2





③為使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員對(duì)重鏈，輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過(guò)改變____________，進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，實(shí)現(xiàn)“榫卯”式互補(bǔ)組裝的唯一性。
（3）結(jié)合雙特異性抗體特點(diǎn)，請(qǐng)分析其在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景：__________________________。
【答案】體液 已免疫的B淋巴細(xì)胞 胰蛋白酶 PEG（或聚乙二醇） 動(dòng)物血清
1
2
3
4
5
6
A2
B2
a
b


氨基酸種類（或序列） 研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細(xì)胞 【解析】
【分析】
1、題圖分析：圖1中是抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，小鼠分別產(chǎn)生的α、β的兩種單克隆抗體；圖2中是雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的雙特異性抗體。
2、圖中抗體由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進(jìn)行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同）。
【詳解】
（1）科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)，引起機(jī)體的體液免疫，由已免疫的B淋巴細(xì)胞(漿細(xì)胞)分泌相應(yīng)抗體。
（2）①制備雜交瘤細(xì)胞時(shí)，需將上述小鼠的脾臟組織，用胰蛋白酶處理獲得單細(xì)胞后，再與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到兩種雜交瘤細(xì)胞。將兩種雜交瘤細(xì)胞用PEG試劑處理促進(jìn)其融合，在培養(yǎng)基中加入動(dòng)物血清等成分培養(yǎng)。如果兩種細(xì)胞成功融合，則會(huì)同時(shí)表達(dá)出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b，這種細(xì)胞稱作雙雜交瘤細(xì)胞。
②由于圖2抗體是雙雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的雙特異性抗體，由表格信息可知1鏈為A2，則2鏈為B2，根據(jù)圖1信息判斷，3、4分別是a、b；因?yàn)?為α，則6是β。故得到如下表格：
1
2
3
4
5
6
A2
B2
a
b
α
β
③使雙雜交瘤細(xì)胞只產(chǎn)生圖2所示雙特異性抗體，降低純化分離成本，科研人員可對(duì)重鏈、輕鏈的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造獲得。改造思路是在A、B、a、b的恒定區(qū)通過(guò)改變氨基酸種類（或序列），進(jìn)而改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，這種改造屬于現(xiàn)代生物技術(shù)中的蛋白質(zhì)工程。
（3）雙特異性抗體在腫瘤治療方面的應(yīng)用前景是：研制與腫瘤細(xì)胞和抗腫瘤藥物結(jié)合的雙特異性抗體，特異性殺死腫瘤細(xì)胞。
【點(diǎn)睛】
本題考查單克隆抗體的制備過(guò)程和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。
43．在治療大面積燒傷病人時(shí)，通常是取患者自身細(xì)胞，在體外培養(yǎng)獲得大量的自體健康皮膚，再移植給患者進(jìn)行恢復(fù)性治療?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）通常要取皮膚的成纖維細(xì)胞或皮膚干細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，推測(cè)其原因是_____________。
（2）一般可取患者腹部2~3cm2的皮膚，用_____________酶來(lái)處理組織，可使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞分散成單個(gè)的好處是_______________________________________。
（3）培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，該現(xiàn)象是指__________________________。
（4）在動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程中，需要提供無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，可通過(guò)添加一定量的抗生素來(lái)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，抗生素可抑制細(xì)菌細(xì)胞中基因控制蛋白質(zhì)的合成過(guò)程，抗生素的作用機(jī)理可能有_____________________（寫出1點(diǎn)即可）。
（5）在動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程中，需要的氣體主要有O2和CO2.O2的主要作用是_____________________，CO2的主要作用是______________________________。
【答案】細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易于培養(yǎng) 胰蛋白 使細(xì)胞和培養(yǎng)液充分接觸 當(dāng)細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖 干擾核糖體的形成（或阻止tRNA和mRNA的結(jié)合，或干擾RNA聚合酶與DNA的結(jié)合，或阻止核糖體與mRNA的結(jié)合） 維持細(xì)胞的有氧呼吸 維持培養(yǎng)液的pH
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程
取動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個(gè)細(xì)胞，將處理后的細(xì)胞移入培養(yǎng)基中配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到互相接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，出現(xiàn)接觸抑制。此時(shí)需要將出現(xiàn)接觸抑制的細(xì)胞重新使用胰蛋白酶處理。再配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液。另外，原代培養(yǎng)就是從機(jī)體取出后立即進(jìn)行的細(xì)胞、組織培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞從動(dòng)植物中生長(zhǎng)遷移出來(lái)，形成生長(zhǎng)暈并增大以后，科學(xué)家接著進(jìn)行傳代培養(yǎng)，即將原代培養(yǎng)細(xì)胞分成若干份，接種到若干份培養(yǎng)基中，使其繼續(xù)生長(zhǎng)、增殖。。
【詳解】
（1）皮膚的成纖維細(xì)胞或皮膚干細(xì)胞細(xì)胞具有較強(qiáng)的分裂能力，易于培養(yǎng)，因此在進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，通常選擇成纖維細(xì)胞或皮膚干細(xì)胞細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。
（2）進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)可取患者腹部2~3cm2的皮膚，用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，這樣可使細(xì)胞和培養(yǎng)液充分接觸，從而有利于細(xì)胞增殖。
（3）由分析可知，接觸抑制是指細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中表現(xiàn)的細(xì)胞表面因?yàn)榛ハ嘟佑|而停止分裂增殖的現(xiàn)象。
（4）在動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程中，需要提供無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境，因此需要添加一定量的抗生素來(lái)抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。而抗生素可抑制細(xì)菌細(xì)胞中基因控制蛋白質(zhì)的合成過(guò)程，基因控制蛋白質(zhì)合成過(guò)程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，據(jù)此可推測(cè)抗生素的抑菌機(jī)理為干擾核糖體的形成（或阻止tRNA和mRNA的結(jié)合，或干擾RNA聚合酶與DNA的結(jié)合，或阻止核糖體與mRNA的結(jié)合）。
（5）在動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程中，需要提供氣體環(huán)境，即 5%的CO2和95%的空氣，其中O2的作用是保證細(xì)胞的有氧呼吸所需，而CO2的具有維持培養(yǎng)液pH的作用。
【點(diǎn)睛】
熟知?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)過(guò)程是解答本題的關(guān)鍵，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中所需的條件及其作用是解答本題的另一關(guān)鍵。
44．現(xiàn)代生物工程技術(shù)推動(dòng)了免疫學(xué)和畜牧業(yè)的發(fā)展。
（1）制備單克隆抗體需要借助動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，其過(guò)程中與植物不同的方法是使用________ 誘導(dǎo)，融合細(xì)胞首先需要經(jīng)過(guò)_________ 培養(yǎng)獲得雜交瘤細(xì)胞；還需進(jìn)行_______ 化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，用專一抗體檢驗(yàn)呈陽(yáng)性才可獲得足夠數(shù)量的____________ ，再進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，大量制備單克隆抗體。
（2）對(duì)大面積燒傷病人，借助________ 技術(shù)可獲取大量自身健康皮膚用于移植。培養(yǎng)的條件需要________________ 、合適的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度、通入______________ 混合氣體。
（3）用細(xì)胞核移植技術(shù)繁育良種牛的培育過(guò)程需要進(jìn)行胚胎移植，移植前需要對(duì)受體牛進(jìn)行__ 技術(shù)處理，對(duì)外來(lái)胚胎基本不發(fā)生__________ ，為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。
【答案】滅活的病毒 選擇性 克隆 能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境 含有95%空氣和5% CO2 同期發(fā)情處理 免疫排斥反應(yīng)
【分析】
1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：
（1）無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。
（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。
2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
3、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。
4、胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)：
①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的．這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境。
②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)．這就為胚胎的收集提供了可能。
③受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．這為胚胎在受體的存活提供了可能。
④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過(guò)程中不受影響。
【詳解】
(1)植物原生質(zhì)體融合的方法分為兩大類——物理法和化學(xué)法，物理法包括離心、振動(dòng)、電激；化學(xué)法一般是用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑來(lái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合。動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等；細(xì)胞融合后用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，挑選出融合的雜交瘤細(xì)胞；再對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。
(2)治療灼燒病人時(shí)，通常采用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量自身健康皮膚用于移植;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境、適宜的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度、通入95%空氣和5%CO2的混合氣體等。
(3)胚胎移植前需要對(duì)供、受體牛進(jìn)行選擇,并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理；大量的研究已經(jīng)證明,受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)；識(shí)記胚胎移植的基本程序，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病（基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素）的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答：

45．圖中①②所示的結(jié)構(gòu)分別是_________________、_______________。
46．圖中③④所示的生物工程技術(shù)分別是________________、____________________。
47．過(guò)程③通常用去核卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作，含有豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還有_____________________________。
48．過(guò)程④的完成需要用到的基因工程操作工具有_____________________。
49．圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點(diǎn)是_____________________。
【答案】
45． 細(xì)胞核 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞
46． 核移植技術(shù) 轉(zhuǎn)基因技術(shù)（或重組DNA技術(shù)或基因工程）
47．含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)
48．限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體
49．不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)
【分析】
分析題圖：①是分離得到的細(xì)胞核；②是囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，具有發(fā)育的全能性；③是核移植技術(shù)；④是基因工程技術(shù)，過(guò)程圖中涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)有基因工程、核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)。
45．
由以上分析可知：圖中①是分離體細(xì)胞后獲得的細(xì)胞核，②是囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，因?yàn)檫@些細(xì)胞還未分化，具有全能性，可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì)胞、組織、器官。
46．
由以上分析可知：圖中③將細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，表示核移植技術(shù)；④將健康胰島B細(xì)胞基因?qū)雰?nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞中，表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)（或重組DNA技術(shù)或基因工程）。
47．
）核移植時(shí)，通常用去核卵細(xì)胞作受體細(xì)胞，原因是：卵細(xì)胞體積大、易操作，含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。
48．
過(guò)程④運(yùn)用的基因工程技術(shù)需要用到的基因操作工具有限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體。
49．
圖示方法屬于體外基因治療，因?yàn)橥簧矬w的人類淋巴細(xì)胞抗原相同，且細(xì)胞核來(lái)自患者自身的體細(xì)胞，所以與一般的異體移植相比，該方法不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合治療遺傳性糖尿病的過(guò)程設(shè)計(jì)圖解，考查基因工程、細(xì)胞工程及胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)圖能力和識(shí)記能力；能理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)的能力；能綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問(wèn)題的能力。
上海某醫(yī)院病理室為確診一患者的腫瘤是良性還是惡性，切取了一小塊腫瘤組織進(jìn)行培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
50．培養(yǎng)之前，腫瘤組織必須先用胰蛋白酶或____________________等處理成單個(gè)細(xì)胞。
51．由于人們對(duì)細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未完全搞清楚，培養(yǎng)時(shí)需要在配制的合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入_________________等天然成分。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是__________________。
52．與正常細(xì)胞相比，在顯微鏡下可見(jiàn)明顯增多的細(xì)胞器是（兩項(xiàng)）___________________。
53．在腫瘤組織培養(yǎng)了60代后，發(fā)現(xiàn)有惡性腫瘤細(xì)胞存在，那么能否判斷該腫瘤組織就是惡性腫瘤?_________________。說(shuō)明理由：__________________。
54．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有許多用途。請(qǐng)列舉兩種：_______________、_______________。
【答案】
50．膠原蛋白酶
51． 血清、血漿 維持培養(yǎng)液的PH（或酸堿度）
52．線粒體、核糖體
53． 不能 因?yàn)閭鞔囵B(yǎng)超過(guò)10～50代后，部分細(xì)胞會(huì)在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中獲得不死性而發(fā)生癌變。
54． 大規(guī)模生產(chǎn)生物制品（單克隆抗體、疫苗等） 基因工程也離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；判斷某種細(xì)胞的毒性等
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
50．
培養(yǎng)之前，由于細(xì)胞彼此連在一起，因此腫瘤組織必須先用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理成單個(gè)細(xì)胞。
51．
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，即葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。由于人們對(duì)細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)尚未完全搞清楚，培養(yǎng)時(shí)需要在配制的合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上加入血清、血漿等天然成分。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要?dú)怏w環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，故細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
52．
與正常細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞由于進(jìn)行細(xì)胞分裂合成大量的蛋白質(zhì)及需要能量，故在顯微鏡下觀察可看見(jiàn)明顯增多的細(xì)胞器有核糖體和線粒體。
53．
在腫瘤組織培養(yǎng)了60代后，發(fā)現(xiàn)有惡性腫瘤細(xì)胞的存在，也不能判斷該腫瘤組織就是惡性腫瘤，因?yàn)閭鞔囵B(yǎng)超過(guò)10～50代后，部分細(xì)胞會(huì)在培養(yǎng)過(guò)程中獲得不死性而發(fā)生癌變。
54．
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有許多用途，許多重要的生物制品，如病毒疫苗、單克隆抗體等，都可以借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來(lái)大規(guī)模生產(chǎn)；基因工程也離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；判斷某種細(xì)胞的毒性等。
【點(diǎn)睛】
本題以確診腫瘤是良性還是惡性為背景，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞癌變方面的內(nèi)容，要求學(xué)生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程，理解癌變細(xì)胞的特征，能結(jié)合所學(xué)知識(shí)點(diǎn)準(zhǔn)確答題。
55．下圖所示為用兩棲動(dòng)物的卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）蝌蚪腸上皮細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的______________________，重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于蛙的_______________細(xì)胞，經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂和______________形成組織和器官。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明____________________具有全能性。
（2）圖中A過(guò)程采用的技術(shù)手段稱作_______________技術(shù)。如果用生物技術(shù)使番茄和馬鈴薯的體細(xì)胞融合，首先要獲得______________，其方法是______________________，然后誘導(dǎo)_______________。要將其融合形成的細(xì)胞培養(yǎng)成植株，要用_________________技術(shù)。從理論上講用融合后的細(xì)胞培育出的“番茄—馬鈴薯”植株是_________（可育、不可育）的。
【答案】全部基因（全部遺傳物質(zhì)） 受精卵 細(xì)胞分化 動(dòng)物細(xì)胞核 核移植 原生質(zhì)體 酶解法 原生質(zhì)體融合 植物組織培養(yǎng) 可育
【分析】
分析題圖：圖示為用兩棲動(dòng)物卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，首先用紫外線照射破壞卵細(xì)胞核，得到去核卵細(xì)胞，用微吸管吸取腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞核；其次采用顯微注射法將細(xì)胞核注入去核卵細(xì)胞得到重組細(xì)胞；重組細(xì)胞進(jìn)行胚胎發(fā)育形成蝌蚪，再變態(tài)發(fā)育形成青蛙。
【詳解】
（1）蝌蚪腸上皮細(xì)胞是由受精卵有絲分裂形成的，其細(xì)胞核中含有青蛙發(fā)育所需的全部基因（全部遺傳物質(zhì)）；重新組合的細(xì)胞相當(dāng)于蛙的受精卵細(xì)胞，經(jīng)過(guò)分裂和分化形成組織和器官。本實(shí)驗(yàn)采用了核移植技術(shù)，這說(shuō)明蝌蚪腸上皮細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。
（2）圖中A過(guò)程采用的技術(shù)手段稱作核移植技術(shù)。番茄和馬鈴薯的體細(xì)胞融合前，首先要用酶解法去壁，即用纖維素酶和果膠酶處理，去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體，然后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)和電激）和化學(xué)法（聚乙二醇）。將細(xì)胞培養(yǎng)成植株的技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。假設(shè)番茄細(xì)胞的兩個(gè)染色體組為AA，馬鈴薯細(xì)胞的兩個(gè)染色體組為BB，從理論上講用融合后的細(xì)胞培育出的“番茄-馬鈴薯”植株含有4個(gè)染色體組，減數(shù)分裂時(shí)產(chǎn)生的配子染色體組為A+B，故“番茄-馬鈴薯”植株是可育的。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合以兩棲動(dòng)物卵所做的實(shí)驗(yàn)圖解，考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植的原理、概念及操作過(guò)程；識(shí)記植物體細(xì)胞雜交過(guò)程及誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過(guò)程和克隆羊培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。

56．圖甲和圖乙所示的過(guò)程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是____________________。④是________培養(yǎng)。
57．單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用其_________________________。
58．若不考慮環(huán)境因素影響，克隆羊的性狀全部像白面綿羊嗎? _____________。原因是_____________________。
59．圖乙過(guò)程的技術(shù)具有多種用途，但是不能___________
A．有選擇地繁殖某一性別的家畜 B．繁殖家畜中的優(yōu)良個(gè)體
C．用于保存物種 D．改變動(dòng)物的核基因
60．在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下，還不能將從動(dòng)物體內(nèi)分離出來(lái)的成熟的體細(xì)胞直接培養(yǎng)成一個(gè)新個(gè)體，而是必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，你認(rèn)為原因最可能是______
A．卵細(xì)胞大，便于操作 B．卵細(xì)胞含有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)多
C．卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞胞核全能性得到表達(dá) D．重組細(xì)胞才具有全能性
【答案】
56． 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 體內(nèi)
57．特異性
58． 不是 卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀
59．D
60．C
【分析】
1、圖甲為單克隆抗體制備過(guò)程，圖中①表示給小鼠注射特定的抗原蛋白，②表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，③表示篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，④表示雜交瘤細(xì)胞的體內(nèi)培養(yǎng)。
2、圖乙表示克隆羊培育過(guò)程，圖中a表示細(xì)胞核移植，b表示胚胎移植技術(shù)。
56．
圖甲單克隆抗體制備過(guò)程，圖乙克隆羊培育過(guò)程，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。④表示雜交瘤細(xì)胞的體內(nèi)培養(yǎng)。
57．
單克隆抗體能定向攻擊癌細(xì)胞，主要是利用抗體的特異性。
58．
若不考慮環(huán)境因素影響，由于卵細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)也能控制某些性狀，所以克隆羊的性狀不是全部像白面綿羊。
59．
動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用：①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)良畜群繁育；②保護(hù)瀕危物種，增大存活數(shù)量；③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白；④作為異種移植的供體；⑤用于組織器官的移植等。但不能改變動(dòng)物的核基因，只有通過(guò)可遺傳變異才能改變動(dòng)物的核基因，故選D。
60．
在目前現(xiàn)有技術(shù)條件下，必須將體細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中才能發(fā)育成新個(gè)體，可能是因?yàn)槁鸭?xì)胞細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞核全能性得到表達(dá)。故選C。
【點(diǎn)睛】
本題屬于考綱中識(shí)記和理解層次的要求，考查了單克隆抗體制備過(guò)程與應(yīng)用、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植的過(guò)程和應(yīng)用等知識(shí)，要求考生就一定的獲取圖示信息能力、審題能力以及分析能力。
61．自1996年世界上第一只體細(xì)胞克隆羊多莉誕生以來(lái)，人類已經(jīng)成功克隆了馬、牛和豬等大型家畜，但體細(xì)胞克隆靈長(zhǎng)類動(dòng)物一直沒(méi)有取得進(jìn)展，究其原因主要是靈長(zhǎng)類動(dòng)物的卵細(xì)胞極為敏感，極輕微擠壓都可能導(dǎo)致異常分裂，且細(xì)胞核移植到去核卵細(xì)胞后不能完全恢復(fù)到分化前的功能狀態(tài)，導(dǎo)致胚胎發(fā)育率低。2017年，我國(guó)科學(xué)家利用“聰明的化學(xué)方法和操作技巧”成功培育出了體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”，該成果一經(jīng)公布轟動(dòng)了全世界。下圖所示為克隆猴的培育過(guò)程。

（1）動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是______。
（2）我國(guó)科學(xué)家經(jīng)過(guò)多年的反復(fù)試驗(yàn)，可以在10s之內(nèi)對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行去核操作，在15秒之內(nèi)完成核移植，操作迅速使卵細(xì)胞受損極小，在技巧上保證了實(shí)驗(yàn)的成功。實(shí)際操作中，去核是指去除______；去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至______期；核移植的具體操作是______，從而得到重構(gòu)胚；核移植前需用滅活的仙臺(tái)病毒對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行短暫處理，作用是______。
（3）“聰明的化學(xué)方法”也是保證實(shí)驗(yàn)成功的條件。我國(guó)科學(xué)家將組蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重構(gòu)胚，同時(shí)用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理重構(gòu)胚，提高了胚胎的發(fā)育率和妊娠率。Kdm4d和TSA的作用機(jī)理是______，從而改變組蛋白的表觀遺傳修飾來(lái)調(diào)控基因表達(dá)。Kdm4d和TSA處理前后基因的堿基序列______（填“會(huì)”或“不會(huì)”）發(fā)生改變。
（4）除操作技巧和化學(xué)方法的運(yùn)用外，克隆猴的成功也得益于每一步嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的實(shí)驗(yàn)操作。體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入______等一些天然成分，將其置于含有______混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。胚胎移植前還需對(duì)代孕母猴進(jìn)行______處理，以保證胚胎能夠繼續(xù)發(fā)育。
（5）體細(xì)胞克隆可以得到大量遺傳背景相似或相同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，這樣的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用于醫(yī)學(xué)研究的好處是______。與克隆小鼠相比，克隆猴更有利于對(duì)人類疾病的致病機(jī)制進(jìn)行研究，原因是______。
【答案】體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性困難 紡錘體—染色體復(fù)合物 減數(shù)分裂II中（MⅡ） 將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞 誘導(dǎo)細(xì)胞融合 降低組蛋白的甲基化水平，提高組蛋白的乙?；? 不會(huì) 血清 95%空氣和5%CO2 同期發(fā)情 實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的比較更具有說(shuō)服力 猴與人的親緣關(guān)系更近，可最大限度排除由基因差異造成的結(jié)構(gòu)和機(jī)理方面的不同
【分析】
1.克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。
2.原理：動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。
3.動(dòng)物細(xì)胞核移植可分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。原因：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難。
【詳解】
（1）體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性困難，而胚胎細(xì)胞分化程度低，表現(xiàn)全能性容易，因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。
（2）去核是指去除紡錘體—染色體復(fù)合物；去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂II中期；目前動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)普遍使用的去核方法是顯微操作法，核移植的具體操作是將體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞，從而得到重構(gòu)胚；核移植前需用滅活的仙臺(tái)病毒對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行短暫處理，在此過(guò)程中，滅活的仙臺(tái)病毒的作用是誘導(dǎo)體細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合。
（3）我國(guó)科學(xué)家將組蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入重構(gòu)胚，同時(shí)用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理重構(gòu)胚，這樣可降低組蛋白的甲基化水平，提高組蛋白的乙?；剑瑥亩淖兘M蛋白的表觀遺傳修飾來(lái)調(diào)控基因表達(dá)，激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，提高了胚胎的發(fā)育率和妊娠率。因?yàn)樵撎幚碇皇菍?duì)基因表達(dá)做出調(diào)控，因此，經(jīng)過(guò)Kdm4d和TSA處理前后基因的堿基序列并不發(fā)生改變。
（4）體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動(dòng)物血清等一些天然成分，并將其置于含有95%空氣和5%CO2混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)程中需要定期更換培養(yǎng)基，并創(chuàng)造無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境。胚胎移植前還需對(duì)代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理，這樣可以使移植的胚胎獲得相同的生理環(huán)境，以保證胚胎能夠繼續(xù)發(fā)育，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。
（5）體細(xì)胞克隆可以得到大量遺傳背景相似或相同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，能夠保證實(shí)驗(yàn)過(guò)程中選取材料的一致性，這樣在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的比較更具有說(shuō)服力。由于猴與人的親緣關(guān)系更近，可最大限度排除由基因差異造成的結(jié)構(gòu)和機(jī)理方面的不同，因此，與克隆小鼠相比，克隆猴更有利于對(duì)人類疾病的致病機(jī)制進(jìn)行研究。
【點(diǎn)睛】
熟知克隆動(dòng)物的過(guò)程以及相關(guān)的原理是解答本題的關(guān)鍵，正確辨析圖中的各個(gè)環(huán)節(jié)以及每個(gè)環(huán)節(jié)的操作原理是解答本題的前提，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植和胚胎移植的相關(guān)操作流程是解答本題的另一關(guān)鍵。
62．人的犬瘟熱（CD）是由犬瘟熱病毒（CDV）引起的高度接觸性、致死性傳染病。CDV的RNA編碼的血凝素蛋白（H蛋白）是宿主免疫系統(tǒng)的主要目的抗原，是產(chǎn)生中和抗體的重要抗原，在抗病毒免疫中占有重要地位。因此，制備針對(duì)H蛋白的單克隆抗體具有很高的醫(yī)用價(jià)值。
（1）H蛋白單克隆抗體制備過(guò)程中，首先用CDV弱毒株對(duì)小鼠進(jìn)行____________處理，一段時(shí)間后從小鼠脾中得到能產(chǎn)生針對(duì)H蛋白的抗體的B淋巴細(xì)胞；同時(shí)，通過(guò)____________技術(shù)培養(yǎng)小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，培養(yǎng)液中通常需要加入____________等一些天然成分，另外還需要O2和CO2，CO2的主要作用是____________________________________。
（2）將獲得的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞在適宜的條件下混合培養(yǎng)，培養(yǎng)液中加入____________的病毒誘導(dǎo)二者融合，然后將其接種到特定選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，進(jìn)行第一次篩選，篩選出的是____________細(xì)胞，然后再進(jìn)行相關(guān)操作做第二次篩選，最終選出________________________細(xì)胞，注射到小鼠腹腔內(nèi)或體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。
（3）單克隆抗體能準(zhǔn)確的識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合。該原理用于疾病的診斷，優(yōu)點(diǎn)是________________________；如將細(xì)胞毒素類藥物與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的________________________殺傷。
【答案】免疫 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 血清 維持培養(yǎng)液的Ph 滅活 融合的雜交瘤 能穩(wěn)定分泌針對(duì)H蛋白的單克隆抗體的雜交瘤 靈敏度高 選擇性
【分析】
1、單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。
2、單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【詳解】
（1）H蛋白單克隆抗體制備過(guò)程中，首先將CDV弱毒株注射到小鼠體內(nèi)，對(duì)小鼠進(jìn)行免疫處理，一段時(shí)間后從小鼠脾中得到能產(chǎn)生針對(duì)H蛋白的抗體的B淋巴細(xì)胞。同時(shí)，通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，可以獲得大量的骨髓瘤細(xì)胞。培養(yǎng)液中通常需要加入血清等一些天然成分，促進(jìn)細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)。另外還需要O2和CO2，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
（2）動(dòng)物細(xì)胞可以利用滅活的病毒促進(jìn)細(xì)胞融合。通過(guò)滅活的病毒處理，有些細(xì)胞還未融合，獲得的融合細(xì)胞有3類，可能是B淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合的，骨髓瘤細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的，也可能是B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，所以需要將其接種到特定選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，進(jìn)行第一次篩選，篩選出的雜交瘤細(xì)胞。由于B淋巴細(xì)胞的種類繁多，故獲得的雜交瘤細(xì)胞還需要第二次篩選，其目的是獲得能穩(wěn)定分泌針對(duì)H蛋白的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，再注射到小鼠腹腔內(nèi)或體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。
（3）單克隆抗體能準(zhǔn)確的識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，用于疾病的診斷，和普通的血清抗體相比優(yōu)點(diǎn)是專一性強(qiáng)，靈敏度高。如將細(xì)胞毒素類藥物與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，該抗體能特異性的和腫瘤細(xì)胞結(jié)合，細(xì)胞毒素類藥物可實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。
63．大熊貓是我國(guó)特有珍稀保護(hù)動(dòng)物，為擴(kuò)大培育大熊貓，我國(guó)研究者進(jìn)行了相關(guān)研究。
（1）研究者選擇出生夭折的熊貓作為供核個(gè)體，用酒精對(duì)其腹部進(jìn)行__________，取相應(yīng)組織，剪碎后用___________酶處理，置于____________培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（2）研究者選擇家兔細(xì)胞作為受體細(xì)胞，通過(guò)超數(shù)排卵處理，獲得大量處于MII期的_____________細(xì)胞。
（3）利用上述細(xì)胞構(gòu)建的大熊貓—兔重構(gòu)胚進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)處理及結(jié)果如表1所示
表1
組別
處理試劑
處理重構(gòu)胚數(shù)（個(gè)）
激活后發(fā)育為2細(xì)胞數(shù)（個(gè)）
1
CB
101
83
2
Col
97
63
3
CB+Col
88
55
4
DMSO
89
68
注：CB為細(xì)胞松弛素，Col為秋水仙素，均為細(xì)胞骨架抑制劑，使用時(shí)用DMSO溶解
①第4組的作用是_______。
②實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CB能夠提高核移植成功率，判斷依據(jù)是__________。
（4）研究者利用“激活后的2細(xì)胞胚胎”，進(jìn)行體外發(fā)育能力的研究，結(jié)果如表2所示。
表2
發(fā)育階段
2細(xì)胞
4細(xì)胞
桑椹胚
囊胚
成活數(shù)量（個(gè)）
135
102
45
12
依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，構(gòu)建大熊貓-兔重構(gòu)胚能否成為繁育大熊貓的新途徑，并說(shuō)明理由_____。
【答案】消毒 胰蛋白酶（膠原蛋白酶） 5%CO2和95%的空氣組成的混合氣體恒溫 去核卵母 作為對(duì)照 其核移植成功率高于對(duì)照組和其他實(shí)驗(yàn)組 不能 發(fā)育成功率較低
【分析】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
【詳解】
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作，故需要先用酒精對(duì)供核個(gè)體進(jìn)行消毒；為獲得單個(gè)細(xì)胞，需要對(duì)剪碎后的組織用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，置于5%CO2和95%的空氣組成的混合氣體恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
（2）為保證遺傳物質(zhì)主要來(lái)自于供體細(xì)胞，受體細(xì)胞應(yīng)選擇處于MII期的去核卵母細(xì)胞。
（3）①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對(duì)照與單一變量原則，據(jù)題干信息可知，使用時(shí)用DMSO溶解，故第4組的作用是作為對(duì)照。
②與第4組（對(duì)照）相比，CB組的核移植成功率為83/101≈82.2%，高于對(duì)照組68/89≈76.4%，也高于其他組別，故實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明CB能夠提高核移植成功率。
（4）據(jù)表格數(shù)據(jù)可知，激活后的2細(xì)胞（135個(gè)）胚胎能夠發(fā)育為囊胚（12個(gè)）的數(shù)目較少，即發(fā)育成功率較低，故構(gòu)建大熊貓-兔重構(gòu)胚不能成為繁育大熊貓的新途徑。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確作答。
下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。

64．單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有____________ 、_______________。
65．細(xì)胞融合是隨機(jī)的過(guò)程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是________________。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)液中需要添加無(wú)機(jī)鹽，但要注意無(wú)機(jī)鹽的_________，以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。
66．為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1 mL細(xì)胞稀釋液，其目的是_________________。
67．與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是________________。
68．若用15N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是____________________________。
【答案】
64． 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物細(xì)胞融合
65． 篩選雜交瘤細(xì)胞 種類和數(shù)量（濃度）
66．使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
67．特異性強(qiáng)，靈敏度高
68．核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜
【分析】
分析題圖：圖示為單克隆抗體的制備過(guò)程，首先給小鼠注射特定的抗原，篩選出產(chǎn)生抗體的淋巴細(xì)胞；將能產(chǎn)生抗體的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，篩選出雜交瘤細(xì)胞；最后再篩選出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞。
64．
單克隆抗體的制備涉及的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。
65．
由圖可知，骨髓瘤細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基上無(wú)法生長(zhǎng)，所以骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞也不能在該培養(yǎng)基上存活；淋巴細(xì)胞和淋巴細(xì)胞自身融合的細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上正常生活，但不能增殖，所以，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)液中需要添加無(wú)機(jī)鹽，但要注意無(wú)機(jī)鹽的種類和數(shù)量（濃度），以保證生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。
66．
為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7~10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1 mL細(xì)胞稀釋液其目的是使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）。
67．
與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。
68．
若用15N標(biāo)記的氨基酸培養(yǎng)能產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞，單克隆抗體是分泌蛋白質(zhì)，首先在核糖體中合成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上初步加工，之后內(nèi)質(zhì)網(wǎng)邊緣以“出芽"形式冒出囊泡，囊泡離開(kāi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，轉(zhuǎn)移到高爾基體上，與高爾基體膜融合，囊泡中的物質(zhì)也進(jìn)入到高爾基體中，在高爾基體中進(jìn)一步加工成成熟的蛋白質(zhì)，高爾基體膜也突起形成小泡，小泡離開(kāi)高爾基體，轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜上，小泡中物質(zhì)釋放到細(xì)胞膜外。因此，放射性物質(zhì)在細(xì)胞結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)的先后順序是：核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、細(xì)胞膜。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備，要求考生識(shí)記單克隆抗體制備的原理及過(guò)程，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。
69．新型冠狀病毒（ RNA病毒）可通過(guò)表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎?？贵w可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎研究的熱點(diǎn)之一。下圖為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖，序號(hào)①~④表示細(xì)胞。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）診斷是否感染新型冠狀病毒，可通過(guò)咽拭子取樣，其檢測(cè)的是病毒的____________。但由于采集的樣品量較少，為了增加檢材數(shù)量可進(jìn)行_________________；還可采集血液樣本檢查血清中___________________；另外通過(guò)胸透檢測(cè)胸部是否有病毒侵染的陰影，也可確診。
（2）研制抗S蛋白單克隆抗體時(shí)，需先給小鼠注射_______________以激活小鼠的免疫細(xì)胞。
（3）圖中①、②分別表示_______________；④為_(kāi)________________，對(duì)選擇培養(yǎng)的細(xì)胞④還要進(jìn)行_____________________。
（4）細(xì)胞①、②融合常用的誘導(dǎo)技術(shù)有___________________，細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使____________成為可能。
【答案】RNA PCR擴(kuò)增 是否含有抗體 S蛋白 B細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) 聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等 遠(yuǎn)緣雜交
【分析】
1、分析題圖：圖中①為漿細(xì)胞，②為骨髓瘤細(xì)胞，③為雜交瘤細(xì)胞，④為能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
2、單克隆抗體的制備是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，此過(guò)程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，再將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過(guò)體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點(diǎn)。
【詳解】
（1）因?yàn)樾鹿诓《臼荝NA病毒，故咽拭子取樣，其檢測(cè)的是病毒的RNA。為了增加檢材數(shù)量可進(jìn)行PCR擴(kuò)增；感染病毒后人體會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)抗體，故還可采集血液樣本，檢查血清中是否含有抗體。
（2）給小鼠注射S蛋白可引起小鼠特異性免疫產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞。
（3）①為B淋巴細(xì)胞，該細(xì)胞與②骨髓瘤細(xì)胞融合為③雜交瘤細(xì)胞，經(jīng)過(guò)兩次篩選，依次篩選出雜交瘤細(xì)胞和能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，④是能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，它既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一抗體，對(duì)細(xì)胞④還要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。
（4）使動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行融合的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇（PEG）、滅活的病毒、電激等，細(xì)胞融合技術(shù)突破了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。
【點(diǎn)睛】
本題以新冠病毒作為情景，結(jié)合圖解，考查單克隆抗體的制備，答題關(guān)鍵在于掌握單克隆抗體制備的原理、過(guò)程，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
70．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。下圖1是科研人員通過(guò)雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。圖2是某雙特異性抗體作用圖。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：

（1）圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是______________；與植物體細(xì)胞雜交相比，圖1中過(guò)程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是______________。
（2）過(guò)程②選用的骨髓瘤細(xì)胞沒(méi)有接觸抑制的現(xiàn)象，主要原因是____________，該瘤細(xì)胞______________ （選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加_________，并將其置于______________的氣體環(huán)境的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（3）為選出能產(chǎn)生專一抗體的細(xì)胞，將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7-10個(gè)細(xì)胞/mL，取0．1ml細(xì)胞稀釋液滴入多孔培養(yǎng)板中，使多孔培養(yǎng)板每孔中有____個(gè)細(xì)胞，然后篩選出專一抗體檢測(cè)為_(kāi)____（選填“陽(yáng)性”或“陰性”）的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為_(kāi)___________________________?。
（4） 圖1過(guò)程⑤注射后，方框內(nèi)需要經(jīng)過(guò)__次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。?
（5）圖2為雙特異性抗體分子，下列敘述不正確的有___。
A．該雙特異性抗體在核糖體當(dāng)中合成
B．雙特異性抗體可以在人體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用
C．該特異性抗體能與人體內(nèi)各類腫瘤細(xì)胞結(jié)合
D．雙特異性抗體能與藥物和腫瘤細(xì)胞結(jié)合，因而不具有特異性
（6）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是_____________________。
【答案】刺激小鼠產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞； 滅活的病毒誘導(dǎo) 細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少； 不能； 動(dòng)物血清； 95%的空氣、5%的CO2 一（或者最多一個(gè)）； 陽(yáng)性； 既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體； 2 （BCD 雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位置殺死癌細(xì)胞
【分析】
單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞（甲）；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞（乙）；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞（丙）；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】
（1）圖1中①步驟注射癌胚抗原的目的是刺激小鼠產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；與植物原生質(zhì)體融合（方法有物理方法和化學(xué)方法）相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是用滅活的病毒處理。
（2）因?yàn)楣撬枇黾?xì)胞內(nèi)原癌基因和抑癌基因發(fā)生了突變，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面的糖蛋白減少，從而具有在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增殖的能力，沒(méi)有接觸抑制現(xiàn)象；在HAT培養(yǎng)基上只有雜交瘤細(xì)胞能存活，故骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)；在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中除了提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需向培養(yǎng)基中添加動(dòng)物血清等物質(zhì)，并將其置于95%的空氣、5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（3）篩選出專一抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)，由于要使每個(gè)孔內(nèi)的細(xì)胞不多于一個(gè)，從而達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的；此后還要經(jīng)過(guò)專一抗體檢測(cè)，選出陽(yáng)性的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)；該克隆化培養(yǎng)細(xì)胞具有的特點(diǎn)為既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體（或既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體）。
（4）為制備單克隆抗體，需將癌胚抗原注射到小鼠體內(nèi)，以此獲取B淋巴細(xì)胞。為篩選能夠產(chǎn)生單克隆抗體的雜交細(xì)胞，至少需要2次篩選才能達(dá)到目的，第一次篩選獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。
（5）A、抗體的本質(zhì)為蛋白質(zhì)，該雙特異性抗體在核糖體當(dāng)中合成，A正確；
B、雙特異性抗體有一定的時(shí)效，不能長(zhǎng)期有效發(fā)揮作用，B錯(cuò)誤；
C、該特異性抗體具有專一性，不能與人體內(nèi)各類腫瘤細(xì)胞結(jié)合，C錯(cuò)誤；
D、雙特異性抗體能與藥物和腫瘤細(xì)胞結(jié)合，具有特異性，D錯(cuò)誤。
故選BCD。
（6）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物(長(zhǎng)春堿)定向帶到癌細(xì)胞所在位置，在原位殺死癌細(xì)胞，這樣既不損傷正常細(xì)胞，又減少了用藥劑量，相當(dāng)于“生物導(dǎo)彈”。
【點(diǎn)睛】
本題結(jié)合圖解，考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；識(shí)記誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法；掌握單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
71．下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖完成問(wèn)題：

（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_______酶處理去掉了細(xì)胞壁，由此生成的A和B稱為_(kāi)_________；A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中，常用的物理方法有_____________（舉出2例）。
（2）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自_______（填“幼齡”或“老齡”）健康動(dòng)物的組織，因?yàn)樵摻M織______________。對(duì)取出的組織先______________，然后用_____________處理使其分散開(kāi)來(lái)。A、B到C的過(guò)程中，常用的不用于植物細(xì)胞工程的方法是用_______誘導(dǎo)細(xì)胞融合。對(duì)融合得到的D進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)需要提供的氣體環(huán)境為_(kāi)___________加上5%的CO2，其中CO2的作用是________________。
（3）若A為骨髓瘤細(xì)胞，B為經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，那么D稱為_(kāi)_____________，這種細(xì)胞既能__________，又能產(chǎn)生________________________。
（4）若上述過(guò)程用于單克隆抗體的制備，為了大規(guī)模的生產(chǎn)單克隆抗體，還需對(duì)D進(jìn)行第二次篩選，第二次篩選的目的是篩選出____________________________的D細(xì)胞。
【答案】纖維素酶和果膠酶 原生質(zhì)體 離心、振動(dòng)、電激 幼齡 分化程度低，分裂能力強(qiáng)，更易于培養(yǎng) 剪碎 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 滅活的病毒 95%的空氣 維持培養(yǎng)液的pH 雜交瘤細(xì)胞 迅速大量繁殖 專一的抗體 能分泌所需抗體
【分析】
植物細(xì)胞工程：細(xì)胞壁阻礙著細(xì)胞間的雜交。因此，在進(jìn)行體細(xì)胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除這層細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體。原生質(zhì)體間的融合，必須要借助一定的技術(shù)手段才能實(shí)現(xiàn)。人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法基本可以分為兩大類：物理法和化學(xué)法。物理法包括電融合法、離心法等；化學(xué)法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法等。融合后得到的雜種細(xì)胞再經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)可形成愈傷組織，并可進(jìn)一步發(fā)育成完整的雜種植物。
動(dòng)物細(xì)胞工程：在從動(dòng)物體取出的成塊組織中，用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞。然后，用培養(yǎng)液將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，再將細(xì)胞懸液放入培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)。適宜的環(huán)境條件包括：溫度多以36.5±0.5℃、pH為7.2～7.4、適宜滲透壓等。氣體環(huán)境 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶并將它們置于含有95％空氣和5％CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
單克隆抗體制備過(guò)程中，有兩次篩選過(guò)程，第一次是選出雜交瘤細(xì)胞（用選擇培養(yǎng)基），第二次是進(jìn)一步選出能產(chǎn)生我們需要的特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【詳解】
（1）若A、B是植物細(xì)胞，植物細(xì)胞由細(xì)胞壁，在細(xì)胞融合之前應(yīng)該用纖維素酶和果膠酶處理去掉細(xì)胞壁，由此生成的A和B稱為原生質(zhì)體；A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中，常用的物理方法有電融合法、離心法等。
（2）動(dòng)物細(xì)胞工程中，A、B細(xì)胞一般取自年幼的、健康的動(dòng)物組織，因?yàn)樵摻M織有絲分裂旺盛，分化程度較低低。首先將取出的組織剪碎，然后用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，使組織細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)。從A、B到C的過(guò)程中，動(dòng)物細(xì)胞工程常用但是植物細(xì)胞工程中不用的方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合。對(duì)融合得到的D進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)需要提供的氣體環(huán)境為95%的空氣加上5%的CO2，其中CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH相對(duì)穩(wěn)定。
（3）若A為骨髓瘤細(xì)胞，B為經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，則D稱為雜交瘤細(xì)胞，這種細(xì)胞既能快速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一性的抗體。
（4）單克隆抗體制備過(guò)程中，有兩次篩選過(guò)程，第一次是選出雜交瘤細(xì)胞（用選擇培養(yǎng)基），第二次是進(jìn)一步選出能產(chǎn)生我們需要的特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。 若上述過(guò)程用于單克隆抗體的制備，為了大規(guī)模的生產(chǎn)單克隆抗體，還需對(duì)D進(jìn)行第二次篩選，第二次篩選的目的是篩選出能分泌所需抗體的D細(xì)胞。
【點(diǎn)睛】
本題重點(diǎn)考查動(dòng)物細(xì)胞工程和植物細(xì)胞工程的異同。難點(diǎn)是理解單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選過(guò)程。
72．克隆技術(shù)可應(yīng)用于器官移植，能解決供體器官不足和排斥反應(yīng)等問(wèn)題。下圖為克隆組織器官的流程模式圖，回答下列問(wèn)題：

（1）動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程中，通常采用卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因可能是________。
（2）動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的方法外，還可以采用________。過(guò)程①細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、抗生素和促生長(zhǎng)因子外，還需要加入________。
（3）將獲得的組織器官移植給個(gè)體B，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，原因是________。圖中流程需要用到的生物學(xué)技術(shù)有________。
【答案】卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核發(fā)育的物質(zhì) 滅活的病毒 血清、血漿 克隆器官的遺傳物質(zhì)主要與供核親本的高度一致 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和早期胚胎培養(yǎng)
【分析】
1、治療性克隆:指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞和組織(皮膚、神經(jīng)或肌肉等)用于治療性移植。生殖性克隆:指將克隆技術(shù)用于生育目的，即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。
2、分析題圖：①是核移植技術(shù)，②是早期胚胎培養(yǎng)。
【詳解】
（1）在卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促進(jìn)細(xì)胞核發(fā)育的物質(zhì)，故在動(dòng)物細(xì)胞核移植過(guò)程中，通常采用卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞。
（2）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒），故動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物細(xì)胞原生質(zhì)體融合的物理和化學(xué)方法外，還可以采用滅活的病毒。過(guò)程①細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、抗生素和促生長(zhǎng)因子外，還需要加入血清、血漿。
（3）胚胎干細(xì)胞可以來(lái)自于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，遺傳物質(zhì)主要與供核親本的高度一致。在一定條件下胎干細(xì)胞可以分化形成不同的組織器官，若將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體B不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。分析題圖可知，圖中流程需要用到的生物學(xué)技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物體細(xì)胞核移植和早期胚胎培養(yǎng)。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)、治療性克隆等知識(shí)，提升學(xué)生分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力，難度中等。
73．7歲的哈?；加薪唤缧痛蟀捫员砥に山獍Y（JEB），該病的病因是編碼層黏連蛋白332的基因之一LAMB3發(fā)生了突變，導(dǎo)致表皮和真皮很容易脫離，進(jìn)而產(chǎn)生水皰和糜爛，并伴有多種炎癥威脅其生命。科學(xué)家實(shí)施了表皮干細(xì)胞基因療法拯救了哈桑，治療過(guò)程如下圖：

（1）改造過(guò)的逆轉(zhuǎn)錄病毒作為載體，有利于提高基因治療成功率，可能的原因有_______。
a．感染率高 b．對(duì)宿主細(xì)胞沒(méi)有毒性 c．一般只感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞
（2）逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細(xì)胞中能夠合成“整合酶”，它能切開(kāi)DNA雙鏈的特定區(qū)域，便于之后目的基因與宿主DNA的整合，由此可推測(cè)整合酶的作用類似于基因工程工具中的________。感染過(guò)的細(xì)胞的后代就有了正確的LAMB3基因，經(jīng)過(guò)________________過(guò)程可以制造正常的層黏連蛋白332。
（3）圖中過(guò)程③所涉及的技術(shù)屬于生物工程中的________________。過(guò)程③所需考慮的環(huán)境條件除了無(wú)菌、無(wú)毒、營(yíng)養(yǎng)及氣體條件外，還需要保證細(xì)胞生活所需的________________，其中無(wú)菌環(huán)境的達(dá)成需要的操作包括_______________________________________________________。三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞，因?yàn)橘N壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到________________時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖。
（4）干細(xì)胞移植和基因治療最大的風(fēng)險(xiǎn)就在于導(dǎo)致癌癥。原因是逆轉(zhuǎn)錄病毒會(huì)把基因隨機(jī)插入基因組里，如果破壞了一些____________________，那么就有可能導(dǎo)致細(xì)胞癌變。
【答案】abc 限制酶 轉(zhuǎn)錄、翻譯 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 溫度和pH 對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，培養(yǎng)液中添加一定量抗生素，定期更換培養(yǎng)液 表面相互接觸 抑癌基因或原癌基因
【分析】
1、與其他病毒相比，逆轉(zhuǎn)錄病毒具有免疫原性低，感染效率高，整合性強(qiáng)，外源基因表達(dá)效率高，并且病毒本身具有一定的靶向性，一般只感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞，對(duì)宿主細(xì)胞沒(méi)有毒性等優(yōu)點(diǎn)；
2、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制；
3、逆轉(zhuǎn)錄病毒會(huì)把基因隨機(jī)插回基因組里，如果破壞了一些抑癌基因，那么就可能把細(xì)胞變成癌細(xì)胞，而且這樣的癌細(xì)胞還可能生長(zhǎng)分裂極快，超過(guò)其他細(xì)胞，成為優(yōu)勢(shì)細(xì)胞。在全部皮膚細(xì)胞里，大概有5%是皮膚干細(xì)胞，它們負(fù)責(zé)復(fù)制分化、更新所有的皮膚。
【詳解】
（1）根據(jù)分析改造的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染力高，且對(duì)宿主細(xì)胞沒(méi)有毒性，一般只感染處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞，故選abc;
（2）“整合酶”能切開(kāi)DNA雙鏈的特定區(qū)域，則整合酶的作用類似于基因工程中的限制酶，作用于DNA的磷酸二酯鍵，形成DNA片段，感染后的細(xì)胞有了LAMB3基因，通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯形成相關(guān)蛋白；
（3）圖中③過(guò)程是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，需要考慮無(wú)菌、無(wú)毒、營(yíng)養(yǎng)及氣體條件外，還要考慮細(xì)胞生活所需的溫度和pH，無(wú)機(jī)環(huán)境的操作通常包括對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理，培養(yǎng)液中添加一定量抗生素以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，定期更換培養(yǎng)液等，正常細(xì)胞具有接觸抑制的特性，當(dāng)細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，因此三種克隆都能培養(yǎng)成單層細(xì)胞；
（4）逆轉(zhuǎn)錄病毒會(huì)把基因隨機(jī)插入基因組里，如果破壞了一些原癌基因或抑癌基因則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的癌變。
【點(diǎn)睛】
本題以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為背景，考察基因工程、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，題目難度一般。
74．“生物導(dǎo)彈”是免疫導(dǎo)向藥物的形象稱呼，由單克隆抗體與藥物結(jié)合而成。單克隆抗體能自動(dòng)導(dǎo)向，在生物體內(nèi)與特定細(xì)胞或組織結(jié)合，并由其攜帶的藥物產(chǎn)生治療作用。單克隆抗體的制備過(guò)程如圖所示，分析回答下列問(wèn)題：

（1）圖中A過(guò)程是從小鼠的脾臟中取得___________細(xì)胞，提取該細(xì)胞之前，給小鼠注射的特定物質(zhì)相當(dāng)于___________；B過(guò)程最終得到的雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是______________________。
（2）體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)需要適宜氣體環(huán)境，故需將雜交瘤細(xì)胞置于含________________和________________的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。另外，培養(yǎng)基中除了添加必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需要加入一些天然成分，如______________________。
（3）特異性抗體也可以通過(guò)常規(guī)方法來(lái)制備：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物的血清中分離所需抗體。與這種常規(guī)方法相比，單克隆抗體具有______________________等優(yōu)點(diǎn)。
【答案】B淋巴 抗原 既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一性抗體 95%空氣 5%CO2 動(dòng)物血清、血漿 特異性強(qiáng)、靈敏度高，能大量制備
【分析】
1.單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。
題圖分析，A表示提取B淋巴細(xì)胞，B表示動(dòng)物細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能大量增殖，又能產(chǎn)生特定的抗體。
【詳解】
（1）圖中A過(guò)程是從小鼠的脾臟中取得B淋巴細(xì)胞，提取該細(xì)胞之前，給小鼠注射的特定抗原，目的是獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞。B過(guò)程是促進(jìn)細(xì)胞融合的過(guò)程，該過(guò)程最終需要獲得的雜交瘤細(xì)胞需要具備既能產(chǎn)生專一性抗體又能無(wú)限增殖的特點(diǎn)。
（2）體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)需要適宜氣體環(huán)境，細(xì)胞正常生活需要氧氣，加入二氧化碳是為了調(diào)節(jié)pH，故需將雜交瘤細(xì)胞置于含95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)基中除了添加必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需要加入含天然成分的動(dòng)物血清、血漿。在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，可以防止污染。為了清除代謝產(chǎn)物，防止其積累對(duì)細(xì)胞造成危害，需要定期更換培養(yǎng)液。
（3）特異性抗體也可以通過(guò)常規(guī)方法來(lái)制備：向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原，使動(dòng)物產(chǎn)生抗體，然后從動(dòng)物的血清中分離所需抗體。與這種常規(guī)方法相比，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、能大量制備的優(yōu)點(diǎn)。
【點(diǎn)睛】
熟知單克隆抗體的制備過(guò)程及其操作流程是解答本題的關(guān)鍵，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及其操作要點(diǎn)是解答本題的另一關(guān)鍵，正確分析圖示的信息是解答本題的前提。
75．下圖是“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖，請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）生物制造“細(xì)胞培養(yǎng)肉”的第一步，就是要獲取肌肉干細(xì)胞，所謂的”干細(xì)胞”，是指動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有____________能力的細(xì)胞。
（2）“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。
①進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用____________酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞。在適宜環(huán)境中培養(yǎng)，細(xì)胞懸液中的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上，稱為_(kāi)_____________。
②在適宜條件下，培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，數(shù)量不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的____________。
（3）“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造過(guò)程中，肌肉細(xì)胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系，請(qǐng)推測(cè)其原因：___________________________。
【答案】分裂和分化 胰蛋白酶或膠原蛋白 貼壁生長(zhǎng) 接觸抑制 模擬體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境，輔助形成細(xì)胞的三維結(jié)構(gòu)
【分析】
1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
2、細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁.細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
【詳解】
(1)動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞，這些細(xì)胞叫做干細(xì)胞。
(2)①胰蛋白酶或膠原蛋白酶可以將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞；在適宜環(huán)境中培養(yǎng)，細(xì)胞懸液中的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上，稱為貼壁生長(zhǎng)。
②當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。
(3)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”最終目標(biāo)是要得到類似于從動(dòng)物組織中取得的”肌肉”，這就要求細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境也跟體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境類似。所以采用支架體系主要就是模擬體內(nèi)肌肉生長(zhǎng)環(huán)境，輔助形成細(xì)胞組織的三維結(jié)構(gòu)。
【點(diǎn)睛】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過(guò)程及條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。
76．如圖表示因胰島B細(xì)胞基因缺陷而導(dǎo)致的糖尿病的基因治療過(guò)程設(shè)計(jì)圖解。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：


（1）圖中①為細(xì)胞核，②代表的細(xì)胞是______________，③表示的生物工程技術(shù)是______________，④所示的生物工程技術(shù)是轉(zhuǎn)基因技術(shù)。
（2）過(guò)程③通常用去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因除了它體積大易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富外，還因?yàn)樗黖___________。
（3）重組細(xì)胞b在一定的___________，如?；撬?、丁酰環(huán)腺苷酸等的作用下，可以定向分化形成胰島B細(xì)胞。
（4）除圖中所用的方法外，治療遺傳性糖尿病的方法還有_________________。
【答案】?jī)?nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞（或胚胎干細(xì)胞） 核移植技術(shù) 含有促進(jìn)（或激活）細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì) 分化誘導(dǎo)因子 胰島素注射、控制飲食、適量運(yùn)動(dòng)、基因敲除等
【分析】
分析題圖：①表示細(xì)胞核；②表示內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞；③采用的是核移植技術(shù)；④采用的是轉(zhuǎn)基因技術(shù)。此外圖中還運(yùn)用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)。
【詳解】
（1）由以上分析可知，囊胚中含有內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞，其中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有發(fā)育的全能性，可以定向誘導(dǎo)分化成各類細(xì)胞、組織、器官，可作為基因工程的受體細(xì)胞，因此圖中②是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞（或胚胎干細(xì)胞），③表示的生物工程技術(shù)是核移植技術(shù)。
（2）動(dòng)物體細(xì)胞核移植通常用去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其營(yíng)養(yǎng)豐富，含有促進(jìn)（或激活）細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。
（3）重組細(xì)胞b在一定的細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑（分化誘導(dǎo)因子）的作用下，可以定向分化形成胰島B細(xì)胞。
（4）治療遺傳性糖尿病的方法還有胰島素注射、控制飲食、適量運(yùn)動(dòng)和基因敲除等。
【點(diǎn)睛】
本題以遺傳學(xué)糖尿病的治療為背景，結(jié)合流程圖，答題關(guān)鍵在于掌握現(xiàn)代生物技術(shù)間的內(nèi)在聯(lián)系，理解基因工程、細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)等技術(shù)。


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