考點(diǎn)一 植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)1.細(xì)胞工程的概念
(1)物質(zhì)基礎(chǔ)：生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有本物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全套基因。
(2)高度分化的細(xì)胞全能性表達(dá)的條件。①離體狀態(tài)。
②營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：有機(jī)營(yíng)養(yǎng)、無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)。③植物激素：生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素。
(1)植物細(xì)胞具有全能性的原因。
一般生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳信息，即都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部遺傳信息。
(2)不同細(xì)胞的全能性比較。
①體細(xì)胞全能性：分化程度低的>分化程度高的；細(xì)胞
分裂能力強(qiáng)的>細(xì)胞分裂能力弱的。
②不同細(xì)胞的全能性：受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。③不同生物的細(xì)胞全能性：植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞。④全能性與細(xì)胞分化的關(guān)系：一般情況下，隨著細(xì)胞分化程度的不斷提高，細(xì)胞的全能性逐漸降低。
3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)原理：細(xì)胞的全能性即細(xì)胞經(jīng)分裂、分化后，仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。(2)概念：將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予_____________條件，誘導(dǎo)
其形成完整植株的技術(shù)。
(3)條件：①離體的植物細(xì)胞、組織、器官(統(tǒng)稱(chēng)外植體)；②無(wú)菌和人工培養(yǎng)；③培養(yǎng)在人工制備的培養(yǎng)基上；④給予適宜的培養(yǎng)條件。
(4)過(guò)程(如菊花的組織培養(yǎng))。
(5)植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用。
(1)由愈傷組織進(jìn)行細(xì)胞分化時(shí)，一般要先誘導(dǎo)其生芽，然后誘導(dǎo)其生根，可通過(guò)控制培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例來(lái)實(shí)現(xiàn)。
(2)光照：在愈傷組織誘導(dǎo)階段，對(duì)有些植物來(lái)說(shuō)，避光培養(yǎng)有利于細(xì)胞脫分化形成愈傷組織。當(dāng)愈傷組織再分化出芽和葉時(shí)，一定要有光照，有利于葉片內(nèi)葉綠素的合成。
(3)體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達(dá)具有選
(4)細(xì)胞的全能性指的是細(xì)胞的一種潛在能力，這種潛在能力只有在特定的環(huán)境中才能表現(xiàn)出來(lái)，而不是指細(xì)胞在任何條件下都能發(fā)育成完整的生物體。
(5)植物組織培養(yǎng)中所需的碳源一般為蔗糖，少數(shù)為葡萄糖和果糖，原因是蔗糖既可提供充足的碳源，又可維持相對(duì)適中的滲透壓，而葡萄糖和果糖在與蔗糖提供相同數(shù)量碳源的前提下，其造成的滲透壓可能過(guò)高。
(6)植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中脫分化與再分化的比較。
4.植物體細(xì)胞雜交(無(wú)性生殖)技術(shù)(1)概念：將___________的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成__________，并把雜種細(xì)胞培育成___________
(2)原理：體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜的__________，雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的________。
(4)優(yōu)點(diǎn)和局限性。①優(yōu)點(diǎn)：打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植
②局限性：目前有許多理論和技術(shù)問(wèn)題未解決，還不能讓雜種植株按照人們的需求表現(xiàn)出雙親的雜合性狀。(5)植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志：新__________的形成。
5.植物細(xì)胞工程的應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑。
(2)作物新品種的培育。
優(yōu)點(diǎn)：a.明顯縮短育種年限；b.可獲得純合子，后代
不發(fā)生性狀分離，能穩(wěn)定遺傳。
②突變體的利用。a.過(guò)程：在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷_________，因此容易受到_________和_________(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而發(fā)生突變。然后篩選出對(duì)人們有用的突變體。b.原理：___________。
(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
①定義：利用______________來(lái)獲得目標(biāo)產(chǎn)物的過(guò)程
就是細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
②植物細(xì)胞培養(yǎng)：在_______條件下對(duì)______植物細(xì)胞或_________進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖的技術(shù)。③初生代謝與次生代謝。a.初生代謝是生物生長(zhǎng)和生存所必需的代謝活動(dòng)，因此在整個(gè)生命過(guò)程中它一直進(jìn)行著。初生代謝物有糖類(lèi)、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸等。
b.次生代謝不是生物生長(zhǎng)所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時(shí)間條件下才進(jìn)行。ⅰ.本質(zhì)：小分子有機(jī)化合物(如酚類(lèi)、萜類(lèi)和含氮化
ⅱ.作用：在植物抗病、抗蟲(chóng)等方面發(fā)揮作用，也是很
多藥物、香料和色素等的重要來(lái)源。
考點(diǎn)二 動(dòng)物細(xì)胞工程——?jiǎng)游锛?xì)胞培養(yǎng)1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞
____________的技術(shù)。
2.原理：____________。
(1)營(yíng)養(yǎng)：使用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，通常需要加入_______等一些天然成分。(2)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境。①需要對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行_______處理以
及在_________環(huán)境下進(jìn)行操作。
②培養(yǎng)液還需要___________，以便清除代謝物，防止________________對(duì)細(xì)胞自身造成危害。
(3)溫度、pH 和滲透壓。
(36.5±0.5) ℃
①哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以_____________為宜。②多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜 pH 為_(kāi)__________。③滲透壓也是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要考慮的一個(gè)重
(4)氣體環(huán)境：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有_______________。O2 是_____________所必需的，CO2 的主要作
用是___________________。
(1)區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶
處理的對(duì)象和是否分瓶。
①分瓶前，第一次用胰蛋白酶對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行處理后
②第二次用胰蛋白酶處理，使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來(lái)，
分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)為傳代培養(yǎng)。
(2)細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱(chēng)為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。
5.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用
(1)概念：干細(xì)胞是一類(lèi)具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。
(2)來(lái)源：早期胚胎、骨髓和臍帶血等。(3)類(lèi)型：胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞。
①在醫(yī)學(xué)上有廣泛應(yīng)用的原因：有自我更新能力及分化潛能，與組織、器官的發(fā)育、再生和修復(fù)等密切相關(guān)。②實(shí)例：將正常的造血干細(xì)胞移植到病人體內(nèi)，恢復(fù)病人的造血和免疫功能；神經(jīng)干細(xì)胞在治療神經(jīng)組織損傷和神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病方面有重要的應(yīng)用價(jià)值。
(5)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(簡(jiǎn)稱(chēng) iPS 細(xì)胞)。
動(dòng)物細(xì)胞工程——?jiǎng)游锛?xì)胞融合與單克隆抗
體的制備及動(dòng)物細(xì)胞核移植1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)(1)概念：使兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的
(2)動(dòng)物細(xì)胞的融合方法：__________法、________法、滅活病毒誘導(dǎo)法(特有)等。(3)原理：細(xì)胞膜具有________________。
(4)結(jié)果：形成具有原來(lái)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單
核細(xì)胞，稱(chēng)為雜交細(xì)胞。
(5)意義：突破了__________的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段，為制造單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑。
2.單克隆抗體及其應(yīng)用
(1)單克隆抗體制備的思路：把一種 B 淋巴細(xì)胞與能在體外大量增殖的____________融合，所得到的融合細(xì)胞就可能大量增殖，產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。(2)制備過(guò)程。
①用特定抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的原因：B 淋巴細(xì)胞要經(jīng)過(guò)免疫過(guò)程，即接觸抗原，增殖分化為有特異性免疫功能的 B 淋巴細(xì)胞，才能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，所以，與骨髓瘤細(xì)胞融合的 B 淋巴細(xì)胞實(shí)際上是漿細(xì)胞。②獲取小鼠經(jīng)免疫的 B 淋巴細(xì)胞的部位：脾。
③誘導(dǎo)融合的方法：動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方法為用滅活的病毒處理，其他物理、化學(xué)誘導(dǎo)融合的方法與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法基本相同。
④雜交細(xì)胞：在誘導(dǎo)因素的作用下進(jìn)行細(xì)胞的誘導(dǎo)融合，形成的雜交細(xì)胞有多種，若僅考慮兩兩融合的情況，形成的雜交細(xì)胞有三種，AA 型、BB 型、AB 型。只有 AB型才是我們所需要的雜交細(xì)胞，所以需要用選擇培養(yǎng)基進(jìn)
既能大量增殖，又能產(chǎn)生某
⑤雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)：__________________________________________。⑥單克隆抗體的特點(diǎn)：能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。
⑦制備單克隆抗體過(guò)程中兩次篩選的方法及目的。
⑧雜交瘤細(xì)胞的抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)。
融合后的細(xì)胞經(jīng)選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)后，能存活的細(xì)胞就是雜交瘤細(xì)胞。但這些雜交瘤細(xì)胞并非都是能分泌所需抗體的細(xì)胞，通常用“有限稀釋法”來(lái)選擇。將雜交瘤細(xì)胞稀釋?zhuān)?96 孔板培養(yǎng)，使每孔細(xì)胞不超過(guò)一個(gè)，通過(guò)培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測(cè)各孔上清液中細(xì)胞分泌的抗體(常用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)，那些上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽(yáng)性孔。陽(yáng)性孔中的細(xì)胞還不能保證是來(lái)自單個(gè)細(xì)胞，挑選陽(yáng)性孔的細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行有限稀釋?zhuān)话阈柽M(jìn)行 3～4次，直至確信每個(gè)孔中增殖的細(xì)胞為單克隆細(xì)胞。該過(guò)程即為雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)。
3.應(yīng)用(1)作為診斷試劑。(2)運(yùn)載藥物。(3)治療疾病。4.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物(1)動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)：將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成
________，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。
(2)原理：細(xì)胞核的全能性，即動(dòng)物細(xì)胞核中具有該種
(3)類(lèi)型：①胚胎細(xì)胞核移植：動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度
低，表現(xiàn)全能性相對(duì)容易。
②體細(xì)胞核移植：動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難。因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。
(4)涉及技術(shù)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、核移植技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等。其中，核移植是核心技術(shù)。
(1)在畜牧生產(chǎn)中，加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良
(2)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域。
①可作為生物反應(yīng)器，生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。②可用于異種移植。
③可用于細(xì)胞、組織、器官的移植。
(3)可用于科學(xué)研究：了解胚胎發(fā)育及衰老過(guò)程；分析致病基因；為研究疾病的致病機(jī)制和開(kāi)發(fā)相應(yīng)的藥物提供幫助。
6.存在問(wèn)題：__________、克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題等。
考點(diǎn)四 胚胎工程1.胚胎工程的概念(1)操作對(duì)象：動(dòng)物_______________________________。(2)技術(shù)手段：體外受精、胚胎移植和_______________
(3)特點(diǎn)：經(jīng)過(guò)處理后獲得的胚胎，還需移植到_______動(dòng)物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類(lèi)的各種需求。
生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎細(xì)胞
2.胚胎工程的理論基礎(chǔ)
①場(chǎng)所：雌性動(dòng)物的________內(nèi)。②受精前的準(zhǔn)備階段。a.準(zhǔn)備階段 1——精子獲能：剛剛排出的精子，不能立即與卵子受精，必須在__________________發(fā)生相應(yīng)的生
理變化后，才能獲得受精能力。
b.準(zhǔn)備階段 2——卵子的準(zhǔn)備：動(dòng)物排出的卵子成熟度不同，有的可能是_____________，如馬、犬等；有的可能是_____________，如豬、羊等。卵子要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，到_________時(shí)，才具備與精子受精的能力。
3.早期胚胎發(fā)育的過(guò)程
4.體外受精的具體步驟
(1)卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到
MⅡ期，成熟后才能與精子完成受精。
(2)精子的采集和獲能處理：采集的精子必須在專(zhuān)門(mén)的
獲能液中處理才能受精。
(3)受精：獲能的精子和成熟的卵子可以在獲能液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫?；受精后形成的受精卵需?jīng)早期發(fā)育培養(yǎng)，才能完成植入或著床。
(1)概念：胚胎移植是指將通過(guò)體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到_____________________的雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。
(2)實(shí)質(zhì)：_____________________________________
①充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。②大大促進(jìn)我國(guó)畜牧業(yè)的發(fā)展。
③推動(dòng)胚胎工程其他技術(shù)的研究和應(yīng)用。
早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置
6.胚胎分割(無(wú)性繁殖或克隆的方法之一)(1)概念：胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成 2 等份、4 等份或 8 等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多
(2)胚胎分割的基礎(chǔ)。①理論基礎(chǔ)：細(xì)胞的全能性。②物質(zhì)基礎(chǔ)：每個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)都具有______的遺傳物質(zhì)。(3)主要儀器設(shè)備：____________和顯微操作儀。(4)選擇胚胎的時(shí)期：應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的________________。
【基礎(chǔ)測(cè)評(píng)】1.易錯(cuò)診斷(1)愈傷組織是外植體通過(guò)脫分化和再分化后形成的。
)(2)相比植物體細(xì)胞雜交，動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方
式是用滅活的病毒處理。(
(3)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，是為了獲得能產(chǎn)生單克
(4)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生
(5)胚胎移植技術(shù)中對(duì)供體和受體母畜都要進(jìn)行相同
答案：(1)×　(2)√ 　(3)×　 (4)√　 (5)×
2.菊花的組織培養(yǎng)需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作以避免雜菌污
染，下列操作中哪項(xiàng)不是為了達(dá)到此目的的是(
A.接種時(shí)應(yīng)注意菊花莖段方向，不應(yīng)倒插B.將培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C.菊花莖段用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗 20分鐘左右D.接種前用體積分?jǐn)?shù)為 70%的酒精將工作臺(tái)擦拭一遍答案：A
3.以下為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖，其中甲和乙分別表示兩種二倍體植物細(xì)胞，所含有的染色體組分別是 AA
和 BB。據(jù)圖分析正確的是(
A.圖中①過(guò)程通常用纖維素酶和果膠酶處理，目的是
B.過(guò)程②常使用滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑
C.經(jīng)過(guò)②和③過(guò)程形成的 c 細(xì)胞的染色體組不一定為
D.該技術(shù)流程的目的是獲得雜種細(xì)胞，優(yōu)點(diǎn)是打破生
殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
4.2019 年 1 月 24 日，我國(guó)科學(xué)家宣布世界首批疾病克隆猴——5 只生物節(jié)律紊亂體細(xì)胞克隆猴在中國(guó)誕生，開(kāi)啟了克隆猴模型應(yīng)用于生命科學(xué)研究的“春天”?？茖W(xué)家采集了一只一歲半的、睡眠紊亂最明顯的 BMAL1(生物節(jié)律基因)敲除猴 A6 的體細(xì)胞，通過(guò)體細(xì)胞核移植技術(shù)，獲得了 5 只克隆猴，這是國(guó)際上首次成功構(gòu)建一批遺傳背景一致的生物節(jié)律紊亂獼猴模型。下列相關(guān)敘述不正確的是
A.體細(xì)胞核移植依據(jù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性B.5 只克隆獼猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞不完全
C.供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞形成的重構(gòu)胚需激活才可繼續(xù)
D.該研究可彌補(bǔ)實(shí)驗(yàn)獼猴繁殖周期長(zhǎng)、單胎數(shù)量少的
5.下列關(guān)于高等動(dòng)物受精作用的敘述，錯(cuò)誤的是(
A.在卵細(xì)胞膜和透明帶之間出現(xiàn)兩個(gè)極體表明卵子已經(jīng)受精B.在精子和卵子結(jié)合的過(guò)程中，卵子完成減數(shù)分裂ⅡC.精子細(xì)胞膜與卵子細(xì)胞膜的融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)D.精子與卵子相遇后，釋放出多種酶，防止多精入卵答案：D
考向 1 植物組織培養(yǎng)與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程
[典例 1](2020 年天津卷節(jié)選)某植物有 A、B 兩品種。科研人員在設(shè)計(jì)品種 A 組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種 B 的最佳激素配比(如表)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。
(1)Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是______________________________________________。
(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是
________階段。
(3)為確定品種 A 的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照品種 B 的激素配比(m1>2.0)，以 0.5 μml/L 為梯度，設(shè)計(jì) 5 個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為_(kāi)_______μml/L。
解析：(1)選擇莖尖、幼葉等作為外植體是因?yàn)槠涓缓稚M織，細(xì)胞分化程度低，誘導(dǎo)其脫分化形成愈傷組織更容易。(2)階段Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分別涉及脫分化、再分化和再分化過(guò)程，細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能在這些階段都發(fā)生了變化，都存在基因的選擇性表達(dá)。(3)因?yàn)閙1 μml/L 為品種B 在Ⅰ階段的最佳激素配比中的細(xì)胞分裂素濃度，所以確定品種 A 在Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度時(shí)，若以0.5 μml/L 為梯度設(shè)計(jì) 5 個(gè)濃度水平，設(shè)置的濃度由低到高應(yīng)依次為m1－1.0、m1－0.5、m1、m1＋0.5、m1＋1.0(單位均為μml/L)。
答案：(1)細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ　(3)m1＋1.0
1.(2021 年山東濟(jì)南調(diào)研)科學(xué)家用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，將番茄的原生質(zhì)體和馬鈴薯的原生質(zhì)體融合，成功地培育出了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，培育過(guò)程如下圖所示，其中①～⑤表示過(guò)程，a～f 表示細(xì)胞、組織或植株。據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)在植物體細(xì)胞雜交技術(shù)中，過(guò)程①常用__________
________酶處理植物細(xì)胞以除去細(xì)胞壁。
(2)過(guò)程②表示________________，依據(jù)的生物學(xué)原理
是_______________________。
(3)與過(guò)程③密切相關(guān)的具有單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器是
(4)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中，依據(jù)的原理是__________________，其中過(guò)程④表示_____________過(guò)程，過(guò)程⑤涉及的細(xì)胞分裂方式為_(kāi)_________________。
(5)若番茄細(xì)胞內(nèi)含 m 條染色體，馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)含 n 條染色體，則“番茄—馬鈴薯”雜種植株的體細(xì)胞內(nèi)含_____條染色體；若由雜種細(xì)胞培育成的“番茄—馬鈴薯”植株為四倍體，則此雜種植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)得到的植株為幾倍體？___________。
(6)如果形成 c 的原生質(zhì)體 a、b 來(lái)源于同一株番茄，那么更常用且有效地得到番茄植株 f 的處理方法是________
__________________________________________________
_________________________________________________。
解析：(1)由圖可知，過(guò)程①為用纖維素酶和果膠酶處理兩種植物細(xì)胞以除去細(xì)胞壁，得到原生質(zhì)體。(2)過(guò)程②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，依據(jù)的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。(3)過(guò)程③是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁，在此過(guò)程中高爾基體起重要作用。(4)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中，依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性，圖中過(guò)程④表示脫分化，過(guò)程⑤表示再分化，在過(guò)程⑤中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂。(5)植物體細(xì)胞雜交得到的雜種細(xì)胞中染色體
數(shù)目是番茄細(xì)胞和馬鈴薯細(xì)胞中染色體數(shù)目之和；若培育成的雜種植株是四倍體，則該雜種植株的花粉經(jīng)離體培養(yǎng)得到的植株是單倍體，因?yàn)槠涫怯膳渥?如花粉)發(fā)育而來(lái)的。(6)利用同一株植物的體細(xì)胞融合得到的植株是同源多倍體，獲得同源多倍體更常用且有效的方法是利用適宜濃度的秋水仙素處理萌發(fā)的植物種子或幼苗。
答案：(1)纖維素酶和果膠
(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合　細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性(3)高爾基體
(4)植物細(xì)胞的全能性　脫分化　有絲分裂(5)m＋n　單倍體
(6)用適宜濃度的秋水仙素處理萌發(fā)的番茄種子或
考向 2 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和干細(xì)胞的培養(yǎng)及應(yīng)用[典例 2](2021 年八省聯(lián)考遼寧卷)為了初步檢測(cè)藥物 X和 Y 的抗癌活性，在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞，使其貼壁生長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物 X 或 Y，培養(yǎng)過(guò)程及結(jié)果
如下圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(
A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清
B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無(wú)菌蒸餾水
D.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可以初步判斷藥物 X 的抗癌效果
解析：培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清，A 正確。對(duì)于已經(jīng)貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞，可用胰蛋白酶處理，使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)，B 正確。實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞砜(溶劑)的藥物X 或 Y，故對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞砜(溶劑)，C錯(cuò)誤。分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，添加藥物 X 的實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞數(shù)目最少，可以初步判斷藥物 X 的抗癌效果較好，D 正確。
2.根據(jù)以下資料回答問(wèn)題。
資料：美國(guó)科學(xué)家已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室中成功培育出膀胱，并順利移植到 7 名患者體內(nèi)。該培育過(guò)程：從患者的膀胱上取下普通郵票一半大小的活細(xì)胞樣本，膀胱從外到內(nèi)由三層構(gòu)成，即肌肉、膠原質(zhì)和膀胱上皮。將活細(xì)胞樣本中膠原質(zhì)剝下，將肌肉細(xì)胞和膀胱上皮細(xì)胞分別置于不同的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，約一周后將這些細(xì)胞放在一些海綿形狀的
可生物降解的由膠原質(zhì)制成的“支架”上繼續(xù)培養(yǎng)，再過(guò)7 周左右，原先的數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞已經(jīng)繁殖到 15 億個(gè)左右，布滿“支架”，膀胱上皮在內(nèi)，肌肉在外。醫(yī)生將“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。這樣新器官會(huì)繼續(xù)生長(zhǎng)并與老器官“重組”取代老器官中喪失功能的部分。培育過(guò)程如下圖所示：
(1)a 過(guò)程屬于細(xì)胞工程中的______________，其培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含有________。
(2)b 過(guò)程由數(shù)萬(wàn)個(gè)細(xì)胞繁殖到 15 億個(gè)細(xì)胞是________的結(jié)果，上述過(guò)程中不但需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，適宜的營(yíng)養(yǎng)，還需要適宜的________________、________環(huán)境。(3) 新器官與老器官的“重組”______( 填“是”或“不是”)基因重組，因?yàn)樾缕鞴倥c老器官的_______相同。
(4)“新膀胱”移植后，_______(填“會(huì)”或“不會(huì)”)成為抗原，因?yàn)樾吕掀鞴倬哂衉_______蛋白質(zhì)等物質(zhì)。(5)除上述方法外，還可將患者的體細(xì)胞核移入去核的________中，這是利用體細(xì)胞________技術(shù)，形成相應(yīng)組織、器官。
解析：(1)圖中a 過(guò)程為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基成分與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基含有的營(yíng)養(yǎng)成分的主要不同點(diǎn)是前者含動(dòng)物血清。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，不但需要無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境及適宜的營(yíng)養(yǎng)，還需要適宜的溫度、pH 及氣體環(huán)境。(3)由于新器官與老器官的遺傳物質(zhì)相同，新器官與老器官的“重組”不是基因重組。(4)因?yàn)樾吕掀鞴偌?xì)胞具有相同的表面抗原等物質(zhì)，“新膀胱”移植后不會(huì)成為抗原。(5)利用體細(xì)胞核移植技術(shù)將患者的體細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，重組細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)也可形成相應(yīng)組織、器官。
答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　動(dòng)物血清
(2)有絲分裂(細(xì)胞分裂)　溫度和 pH　氣體(3)不是　遺傳物質(zhì)(4)不會(huì)　相同的
(5)卵母細(xì)胞　核移植
考向 3 動(dòng)物核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物
[典例 3](2021 年湖南高考)M 基因編碼的 M 蛋白在動(dòng)物 A 的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)?，F(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源 DNA片段 F 插入 M 基因的特定位置，再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得 M 基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物 A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題。
(1)在構(gòu)建含有片段 F 的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA 的工具酶是________，這類(lèi)酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的________斷開(kāi)。
(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物 A 成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是___________________________。
(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細(xì)胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為_(kāi)_______(答出兩點(diǎn)即可)，功能上具有________。
(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的________淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備 M 蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用此抗體確定克隆動(dòng)物 A 中 M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路________。
解析：(1)基因工程中切割 DNA 的工具酶是限制性?xún)?nèi)切核酸酶(限制酶)，故在構(gòu)建含有片段 F 的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒 DNA 的工具酶是限制性?xún)?nèi)切核酸酶(限制酶)。限制性?xún)?nèi)切核酸酶是作用于其所識(shí)別序列中兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。不同的限制酶可以獲得不同的末端，主要分為黏性末端和平末端。(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物 A 成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝
產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(3)由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。(4)先給小鼠注射特定抗
原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B 淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo) B 細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備 M 蛋白的單克隆抗體；若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物 A 中 M 基因是否失活，如果 M基因已經(jīng)失活，則克隆動(dòng)物 A 中無(wú)法產(chǎn)生 M 蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。故實(shí)驗(yàn)思路：取動(dòng)物A 和克隆動(dòng)物A 的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交。
答案：(1)限制性?xún)?nèi)切核酸酶(限制酶) 磷酸二酯鍵(2)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，同時(shí)給細(xì)胞提供足夠的營(yíng)養(yǎng)(3)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容
易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難
胞體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯(任選兩點(diǎn)作答)
全能性(4)B 取動(dòng)物 A 和克隆動(dòng)物 A 的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交
3.(2019 年湖南長(zhǎng)郡中學(xué)第二次月考)如圖表示培育轉(zhuǎn)基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有關(guān)結(jié)構(gòu)或個(gè)體，數(shù)字代表過(guò)程、方法。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。
(1)圖中過(guò)程①～⑦所涉及的生物技術(shù)有___________
_________________(寫(xiě)兩種即可)。
(2)通過(guò)①、⑤過(guò)程獲取分散的細(xì)胞時(shí)，用到的酶是
__________，培養(yǎng)的細(xì)胞在充滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)_______________。
(3)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)將細(xì)胞置于 5% CO2 的氣體環(huán)境中，CO2 的作用是__________________。此培養(yǎng)過(guò)程中為防止雜菌感染，需要添加一定量的__________。
(4)早期胚胎可通過(guò)____________(寫(xiě)明數(shù)字及名稱(chēng))技術(shù)移入代孕母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，該技術(shù)在生產(chǎn)實(shí)踐中的意義在于______________________________。
(5)通常用去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，此時(shí)的卵母細(xì)胞應(yīng)該培養(yǎng)到________________(細(xì)胞分裂方式及時(shí)期)，f 細(xì)胞在形態(tài)上的特點(diǎn)是______________________。
解析：(1)圖中①是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，②是用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)處理，③④是將目的細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞形成重組細(xì)胞的過(guò)程，⑤是早期胚胎培養(yǎng)，⑥是胚胎移植，⑦是從早期胚胎中獲取胚胎干細(xì)胞。全過(guò)程所涉及的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植、早期胚胎培養(yǎng)等。(2)通過(guò)①、⑤過(guò)程獲取分散的細(xì)胞時(shí)，用到的酶是胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)；培養(yǎng)的細(xì)胞在充滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱(chēng)為接觸抑制。(3)圖中動(dòng)物細(xì)胞培
養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)將細(xì)胞置于 5%CO2 的氣體環(huán)境中，CO2 的作用是維持培養(yǎng)液的 pH，培養(yǎng)過(guò)程中為防止雜菌感染，需要添加一定量的抗生素。(4)早期胚胎可通過(guò)⑥胚胎移植技術(shù)移入代孕母體子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，該技術(shù)可以提高優(yōu)良母畜的繁殖率。(5)通常用去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，此時(shí)的卵母細(xì)胞應(yīng)該培養(yǎng)到減數(shù)分裂Ⅱ中期，f 胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯。
答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)(2)胰蛋白酶(或膠原蛋白酶) 接觸抑制(3)維持培養(yǎng)液的 pH 抗生素
(4)⑥胚胎移植　提高優(yōu)良母畜的繁殖率
(5)減數(shù)分裂Ⅱ的中期　體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯
考向 4 動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體的制備[典例 4](2021 年山東高考)一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱(chēng)為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細(xì)胞制備抗 p72 的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接
分離出多抗。下列說(shuō)法正確的是(
A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多
B.單抗制備過(guò)程中通常將分離出的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)
C.利用該小鼠只能制備出一種抗 p72 的單抗
D.p72 部分結(jié)構(gòu)改變后會(huì)出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有
解析：?jiǎn)慰沟闹谱餍枰Y選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，因此原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響小，A 錯(cuò)誤。單抗制備過(guò)程中通常將分離出的 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，B 錯(cuò)誤。非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 上有多種抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入 p72 后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗 p72 的單抗，C 錯(cuò)誤。p72 部分結(jié)構(gòu)改變只改變了部分抗原決定簇，因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體，所以多抗仍有效，D 正確。
4.(2020 年全國(guó)卷Ⅰ)為研制抗病毒 A 的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。
(1)上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒 A，該處理的目的是__________________________________________。(2)寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟：_____________________________________。
(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒 A 的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選。圖中篩選 1 所采用的培養(yǎng)基屬于_________________，使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果是_________________。圖中篩選 2 含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是__________________________________________________________________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒 A 的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可采用的方法有______________________________________________________(答出 2 點(diǎn)即可)。
解析：(1)實(shí)驗(yàn)前給小鼠甲注射病毒 A，是為了誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A 抗體的B 淋巴細(xì)胞。(2)取小鼠的脾臟，剪碎組織，用胰蛋白酶處理獲得單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液可以制成單細(xì)胞懸液。(3)圖中篩選 1 需要用到選擇培養(yǎng)基，只有雜交瘤細(xì)胞可以存活。篩選 2 是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，該過(guò)程要用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的原理是抗原與抗體反應(yīng)具有特異性。(4)獲得能產(chǎn)生抗病毒 A 的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞后，可以在體外培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，或在小鼠的腹腔中進(jìn)行培養(yǎng)，使雜交瘤細(xì)胞大量增殖。
答案：(1)誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒 A 抗體的 B淋巴細(xì)胞(2)取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液
只有雜交瘤細(xì)胞能夠生存
抗體的反應(yīng)具有特異性(4)將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)
考向 5 胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用[典例 5](2020 年山東等級(jí)考)經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚，通過(guò)胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有
不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(
A.用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B.體外受精前要對(duì)小鼠的精子進(jìn)行獲能處理C.胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植D.遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得
解析：為獲得更多卵子，需要用促性腺激素對(duì)雌性個(gè)體進(jìn)行超數(shù)排卵處理，A 正確。剛排出的精子不能與卵子受精，必須進(jìn)行獲能處理后才具備受精能力，B 正確。胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量，牛、羊等一般要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段才進(jìn)行移植，小鼠等可在更早的階段移植，C錯(cuò)誤?？赏ㄟ^(guò)轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞，D 正確。
5.如圖表示利用胚胎干細(xì)胞(ES 細(xì)胞)所作的一系列研
究，請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題。
(1)圖中的胚胎干細(xì)胞(ES 細(xì)胞)可以從____________
或____________中分離獲取。
(2)過(guò)程Ⅰ將胚胎干細(xì)胞置于經(jīng)γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞構(gòu)成的飼養(yǎng)層上，并加入動(dòng)物血清、抗生素等物質(zhì)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。在此過(guò)程中，飼養(yǎng)層能提供胚胎干細(xì)胞增殖所需的_______________，加入抗生素是為了_____________________。該過(guò)程對(duì)于研究細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的機(jī)理具有重要意義。
(3)過(guò)程Ⅱ是將帶有遺傳標(biāo)記的 ES 細(xì)胞注入早期胚胎的囊胚腔，通過(guò)組織化學(xué)染色，用于研究動(dòng)物體器官形成的時(shí)間、發(fā)育過(guò)程以及影響因素，這項(xiàng)研究利用了胚胎干細(xì)胞具有________________的特點(diǎn)。在哺乳動(dòng)物早期胚胎發(fā)育過(guò)程中，囊胚的后一個(gè)階段是________。
(4)過(guò)程Ⅲ是培育轉(zhuǎn)基因小鼠，將獲得的目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞之前需構(gòu)建基因表達(dá)載體，目的是_______________________________________________。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞最常用的方法是____________。(5)該研究中，包含的生物技術(shù)有__________________
______________________(至少寫(xiě)出兩種)。
解析：(1)圖中的胚胎干細(xì)胞(ES 細(xì)胞)可以從早期胚胎和原始性腺中分離獲取，在功能上具有發(fā)育的全能性。(2)過(guò)程 I 將胚胎干細(xì)胞置于γ射線滅活的鼠胎兒成纖維細(xì)胞的飼養(yǎng)層上，并加入動(dòng)物血清、抗生素等物質(zhì)，維持細(xì)胞不分化的狀態(tài)。在此過(guò)程中，飼養(yǎng)層提供干細(xì)胞增殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，加入抗生素是為了防止雜菌污染。(3)ES細(xì)胞能培養(yǎng)成小鼠個(gè)體，說(shuō)明胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性。哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過(guò)程：受精卵→卵裂→桑椹胚→囊
胚→原腸胚→個(gè)體，可見(jiàn)，囊胚將進(jìn)一步發(fā)育成原腸胚。(4)構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠正常表達(dá)和發(fā)揮作用。將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。(5)圖示過(guò)程中，包含的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)基因、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等。

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