高二下學(xué)期期中考試試題
試時間：90分鐘　　滿分100分
一、單選題（每題2.5分，共50分）
1．下列關(guān)于發(fā)酵流程相關(guān)說法，錯誤的是
A．腐乳的制作中，前期應(yīng)該表面長出菌絲，后期沒有雜菌污染
B．菌種、雜菌、溫度、發(fā)酵時間、調(diào)味品都會影響腐乳的色、香、味
C．果酒制作過程中，開始可以通入氧氣，后期嚴格無氧環(huán)境
D．醋酸菌在有氧條件下會把乙醇直接氧化為乙酸
2．豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵，并定期取樣觀測發(fā)酵效果。以下推測不合理的是（　?。?br /> A．該實驗的自變量是菌種，溫度屬于無關(guān)變量
B．大豆發(fā)酵過程中部分蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槎嚯?，形成豆豉的獨特風(fēng)味
C．若容器內(nèi)上層大豆發(fā)酵效果優(yōu)于底層，則發(fā)酵菌為厭氧菌
D．從大豆到豆豉，大豆中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樾》肿与?、氨基?br /> 3．關(guān)于泡菜發(fā)酵的敘述，不正確的是（ ）
A．泡菜發(fā)酵過程中產(chǎn)生亞硝酸鹽，某些條件下轉(zhuǎn)化為致癌物質(zhì)亞硝胺
B．煮沸泡菜鹽水的目的是除去水中的氧氣和殺滅鹽水中的其他雜菌
C．制作泡菜利用的菌種是乳酸菌，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型
D．泡菜腌制時間過長，容易造成細菌大量滋生，亞硝酸鹽含量增加
4．防止雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物，是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是(　　)
A．實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進行消毒
B．接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌
C．在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，防止被微生物感染
D．使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境
5．下列關(guān)于培養(yǎng)基的敘述，錯誤的是(　　)
A．氮源、無機鹽、水等是微生物生長不可缺少的營養(yǎng)要素
B．根據(jù)微生物對碳源需要的差別，使用不同碳源的培養(yǎng)基
C．可在培養(yǎng)基中加入磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀，用于維持pH的相對穩(wěn)定
D．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌
6．下表是某微生物培養(yǎng)基的配方。下列說法正確的是：（ ）
編號
①
②
③
④
⑤
成分
(NH4)2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量
0．4g
4．0g
0．5g
0．5g
100mL
A．從培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分看，此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)的微生物同化作用類型是異養(yǎng)型
B．若要觀察微生物的菌落的特點，培養(yǎng)基中還應(yīng)添加的成分是葡萄糖
C．該培養(yǎng)基不需要高溫滅菌和調(diào)節(jié)pH值
D．培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)
7．下列有關(guān)纖維素分解菌分離實驗的說法正確的是（ ）
A．剛果紅能與纖維素分解后的纖維二糖和葡萄糖形成紅色復(fù)合物
B．在用剛果紅染色時只可以先培養(yǎng)微生物再加入剛果紅，不可以在倒平板時直接加入
C．該實驗只需用到選擇培養(yǎng)基，不需用到鑒別培養(yǎng)基
D．在用剛果紅染色過程中，若將微生物培養(yǎng)在事先加入剛果紅的培養(yǎng)基上，則出現(xiàn)透明圈的菌落不一定為所需菌種
8．下列有關(guān)“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述，正確的是
A．向菜花組織中加入蒸餾水并攪拌可釋放核DNA
B．鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物直接加入到二苯胺試劑中進行沸水浴
C．向DNA濾液中加入冷酒精緩慢攪拌，可見玻棒上有白色絮狀物
D．實驗結(jié)束后應(yīng)保存好剩余的二苯胺試劑，以備下次實驗時使用
9．多聚酶鏈式反應(yīng)（PCR）一次循環(huán)：95℃下使模板 DNA 變性、解鏈→55℃下復(fù)性（引物與 DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關(guān) PCR 過程的敘述中錯誤的是（ ）
A．變性過程未加解旋酶，是因為可以通過先適當加溫來破壞 DNA 堿基對中氫鍵
B．PCR 技術(shù)擴增需要的條件是目的基因、引物、四種脫氧核苷酸、DNA 聚合酶和 DNA 連接酶
C．PCR 技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等
D．如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA100 個，則經(jīng)過 30 個循環(huán)后，DNA 的數(shù)量為 100×230 個
10．下列關(guān)于酶的說法，正確的是(　　)
A．限制酶廣泛存在于各種生物中，其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)
B．一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列
C．不同的限制酶切割DNA后都會形成黏性末端
D．DNA連接酶可將單個核苷酸加到某個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵
11．如圖為某種質(zhì)粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，P為轉(zhuǎn)錄的啟動部位。已知目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，受體細胞為無任何抗藥性的原核細胞。下列有關(guān)敘述正確的是( )

A．將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有兩種
B．DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成重組質(zhì)粒，該過程形成兩個磷酸二酯鍵
C．為了防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自身環(huán)化，酶切時可選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ
D．能在含青霉素的培養(yǎng)基中生長的受體細胞表明該目的基因已成功導(dǎo)入該細胞
12．某研究所的研究人員將生長激素基因通過質(zhì)粒介導(dǎo)進入大腸桿菌細胞內(nèi)，來表達這產(chǎn)生生長激素。已知質(zhì)粒中存在兩個抗性基因：A是抗鏈霉素基因，B是抗青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而大腸桿菌不帶有任何抗性基因，下列敘述錯誤的是
A．大腸桿菌可能未導(dǎo)入質(zhì)粒
B．導(dǎo)入大腸桿菌的可能是重組質(zhì)粒，也可能是質(zhì)粒
C．可用含青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒
D．在含青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌
13．繼在上海和安徽首次發(fā)現(xiàn) H7N9 禽流感病例，我國多地出現(xiàn)禽流感疫情，為此某研究小組為了研制預(yù)防H7N9 禽流感病毒的疫苗，開展了前期研究工作。其簡要的操作流程如下圖。下列敘述錯誤的是( )

A．步驟①所代表的過程是反轉(zhuǎn)錄
B．步驟②需使用限制酶和 DNA 連接酶
C．步驟③可用顯微注射法將表達載體導(dǎo)入受體細胞
D．檢驗 Q 蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用 Q 蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進行抗原——抗體特異性反應(yīng)實驗
14．下面為番茄植物組織培養(yǎng)過程的流程圖解，以下相關(guān)敘述不正確的是（ ）
植物葉片葉組織塊愈傷組織有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)人工種子種苗
A．脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，在此過程中植物激素發(fā)揮了重要作用
B．人工種子的胚乳中含有胚狀體發(fā)育所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，還可以添加農(nóng)藥和植物激素
C．人工種子中的胚狀體與正常種子中的胚都是新個體的幼體，都只具有一個親本的遺傳物質(zhì)
D．經(jīng)該過程產(chǎn)生的人工種子屬于無性繁殖
15．如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程有關(guān)敘述不正確的是

A．圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原
B．利用滅活的病毒可誘導(dǎo)細胞融合獲得乙，卻不能誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合
C．用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長
D．丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，才能獲得大量所需抗體
16．下列有關(guān)哺乳動物精子和卵子發(fā)生的敘述，錯誤的是（　?。?br /> A．精細胞經(jīng)變形后，高爾基體發(fā)育形成精子的頂體
B．不同種動物的精子形態(tài)相似，但大小不同，體型越大的動物精子越大
C．卵母細胞發(fā)育至減數(shù)第二次分裂中期時，才具備受精能力
D．哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的儲備，是在出生前完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別
17．下列關(guān)于動物受精過程和胚胎發(fā)育的敘述，正確的是（ ）
A．用于移植的早期胚胎不一定是由受精卵發(fā)育而來
B．由于受精卵全能性比胚胎細胞更大，所以將受精卵直接移植到受體成活率會更高
C．比利時兔可以作為安哥拉兔的代孕母兔，但黃牛不能作為奶牛的代孕母牛
D．胚胎工程技術(shù)發(fā)展迅速，目前已經(jīng)產(chǎn)生的試管動物有試管牛、試管雞等
18．研究人員為探討不同換液體積對牛孤雌胚胎體外發(fā)育的影響，以SOFaa為基礎(chǔ)培養(yǎng)液，將適量牛孤雌胚胎隨機分成3組，培養(yǎng)在100μL微滴中，每隔48小時分別更換培養(yǎng)微滴的體積，實驗結(jié)果如下表。據(jù)此分析正確的是（ ）
換液體積（V/V）
卵裂率/%
囊胚率/%
0
80.71
22.54
1/4
81.82
23.39
1/2
87.50
38.84
3/4
83.33
21.71
A．不同更換微滴體積均能提高孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率
B．可以通過實驗中所測得的囊胚率數(shù)據(jù)推斷胚胎的桑椹胚率
C．實驗中換液體積為1／2的組促進牛孤雌胚胎發(fā)育效果最佳
D．定期更換微滴除了補充所需營養(yǎng)物質(zhì)外，還可防止雜菌污染
19．下列關(guān)于干細胞的敘述正確的是（　?。?br /> A．胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上，能夠迅速增殖分化
B．多能干細胞可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞
C．治療性克隆所用的干細胞是從體外受精的胚胎中分離出來的
D．對誘導(dǎo)多能干細胞（iPS）進行定向誘導(dǎo)分化后可用于疾病的治療
20．關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性,下列說法中不正確的是(　　)
A．運用重組DNA技術(shù)可以將致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器
B．轉(zhuǎn)基因植物進入自然界后不會與野生物種雜交進而威脅其他生物的生存
C．人類在發(fā)展基因工程作物時,沒有充分考慮生物和環(huán)境之間的相互影響
D．一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題,要馬上停止實驗,并銷毀重組生物
二．簡答題（共50分）
21.（10分）根據(jù)下列有關(guān)胚胎工程的示意圖，分析回答下列問題：

(1)C細胞應(yīng)選擇處于_____________的細胞；體外受精前要對B細胞進行________________處理。B細胞和C細胞在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入　　　　　　培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。
(2)將早期胚胎注入D羊子宮內(nèi)的技術(shù)叫___________，D羊?qū)ν鈦砼咛ゲ话l(fā)生____________，這使外來胚胎在其體內(nèi)存活成為了可能。在此過程中若想得到具有相同遺傳物質(zhì)的兩個子代E羊，可通過________________技術(shù)來實現(xiàn)。
(3)圖中的早期胚胎通常處于________________階段。獲得的早期胚胎若暫不移植給受體，可使用________________法保存。
(4)從早期胚胎中分離出的ES細胞可誘導(dǎo)分化出不同的組織細胞，這是因為在功能上，ES細胞具有________________。ES細胞具有體積小、________________、核仁明顯的特點。
22、（10分）近年來，《舌尖上的中國》引發(fā)全民關(guān)注美食的熱潮，其中不乏利用微生物發(fā)酵制作的美食，如素有“東方奶酪”之稱的“石寶寨牌”忠州豆腐乳、中國泡菜領(lǐng)導(dǎo)品牌“吉香居”等．請回答下列有關(guān)問題。
（1）利用蘋果、梨、葡萄等水果制作果酒時，其發(fā)酵階段所需的菌種是________；在產(chǎn)生酒精時要控制的必要條件是________。如果發(fā)酵后期，通氣口的開關(guān)被打開，一段時間后果酒變酸，這是由于酒精在_______的作用下生成了________。
（2）制作吉香居泡菜時，起主要作用的微生物是____________。泡菜制作中鹽和水的比例是_________。泡菜中的亞硝酸鹽過多會對人體產(chǎn)生危害，通常用________法檢測亞硝酸鹽含量。
（3）“石寶寨牌”忠州豆腐乳前期發(fā)酵是在嚴格的無菌條件下，溫度嚴格控制，并保持一定的濕度，然后向長滿毛霉的豆腐塊加鹽，其作用_______________________________________，同時，鹽還能_____________________，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)．之后要加入配置好的鹵湯，其中鹵湯中加酒的含量應(yīng)控制在12%左右。酒精含量過高，_________________；酒精含量過低，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)。
23.（10分）白僵菌可感染農(nóng)業(yè)害蟲，因而可用來防治農(nóng)業(yè)害蟲。由于白僵菌對草丁膦（一種除草劑）敏感，且殺死害蟲的能力較弱，科研人員將Bar基因（抗除草劑基因）和毒蛋白基因?qū)氚捉┚M行基因工程改造，流程如圖所示：

（1）從蘇云金芽孢桿菌中獲取的毒蛋白基因，可以通過 技術(shù)在體外大量擴增，與細胞內(nèi)DNA復(fù)制過程相比，該技術(shù)的不同點有： （答出兩點,2分）。
（2）圖中形成重組質(zhì)粒1時需要的限制酶是 ；形成重組質(zhì)粒2除了需要限制酶XbaⅠ外，還需要 酶。
（3）將重組質(zhì)粒2導(dǎo)入經(jīng) 處理成為感受態(tài)的白僵菌，一段時間后用含有 ________的平板培養(yǎng)基進行篩選，獲得含有Bar基因的重組白僵菌。
（4）為了檢測毒蛋白基因是否插入到受體細胞，可以采用_______ 技術(shù)檢測。
（5）為了判斷重組白僵菌的殺蟲效果，科研人員接下來應(yīng)該
。（2分）
24.（10分）細胞工程可分為植物細胞工程和動物細胞工程等，請回答下列關(guān)問題：

(1)圖1所示為植物體細胞雜交的流程。圖1中“去壁”要使用的酶是________________ ；①過程常采用的方法有物理法和化學(xué)法，物理法包括______________________等；③過程和④過程分別表示_______________________。
(2)圖2所示為制備單克隆抗體的流程。圖中“篩選”包括選擇培養(yǎng)和抗體陽性檢測。其中能在特定的選擇培養(yǎng)基中存活的細胞是_______________________，而抗體陽性檢測的目的是_____________________________________________________。（2分）
(3)圖2中，促進細胞融合的方法中，不同于圖1中促進細胞融合所涉及的方法是__________；篩選中的目標細胞還可以注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從_______________中提取單克隆抗體。與普通抗體相比，單克隆抗體具有____________________________________________（2分）等優(yōu)點。
25．（10分）為了分離和純化高效分解石油的細菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進行如圖A所示的實驗。

（1）配制好的培養(yǎng)基滅菌通?？梢允褂胈_________________法。步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是__________________________________________________。這種培養(yǎng)基從功能上看屬于_____________（(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基。
（2）同學(xué)甲進行過程④的操作，其中一個平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學(xué)的接種方法是______________；推測同學(xué)甲用此方法接種時出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是___________________________；在接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_______________________。
（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為________________。這種計數(shù)方法得到的結(jié)果一般比實際值偏小，原因可能有________________________________________________________。
（4）步驟⑤需要震蕩培養(yǎng)其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時使______________________，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率。
（5）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是_____________________________________。
參考答案
1-20 DCDBD DDCBB CCCCC BACDB
1．D
【解析】A、腐乳制作過程中，前期毛霉生長長出大量的菌絲，后期加入鹽和鹵湯可以預(yù)防雜菌污染，A正確；
B、能影響腐乳風(fēng)味的因素有：①豆腐含水量、②鹽的用量、③香辛料的用量、④酒的用量、⑤發(fā)酵溫度、⑥發(fā)酵時間、⑦是否控制好雜菌污染，B正確；
C、果酒制作時開始需要氧氣，進行有氧呼吸讓酵母菌大量繁殖，后期應(yīng)密封，保持無氧環(huán)境，讓酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，C正確；
D、醋酸菌在有氧條件下會把乙醇氧化成乙醛，再氧化成乙酸，D錯誤。
故選D。
2．C
【解析】根據(jù)題意可知，實驗中用到了甲、乙兩菌種，故該實驗的自變量是菌種，溫度屬于無關(guān)變量，A正確；大豆發(fā)酵過程中部分蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槎嚯?，形成豆豉的獨特風(fēng)味，B正確；容器內(nèi)上層為有氧環(huán)境，底層為無氧環(huán)境，若發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好，則說明該發(fā)酵菌是好氧菌，C錯誤；大豆發(fā)酵到豆豉，大豆中的蛋白質(zhì)在微生物分泌的酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)樾》肿与?、氨基酸，D正確。
3．D
【解析】A、泡菜制作過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽，若攝入體內(nèi)的亞硝酸鹽含量過多，在特定的條件下會轉(zhuǎn)化成亞硝胺，亞硝胺是化學(xué)致癌因子，可導(dǎo)致細胞癌變，A正確；
BC、制作泡菜所用菌種為乳酸菌，其代謝類型為異養(yǎng)厭氧型；故為營造無氧條件，需煮沸泡菜鹽水以除去水中的氧氣，同時此舉還可殺滅鹽水中的其他雜菌，B、C正確；
D、泡菜腌制時間過短，容易造成細菌大量滋生，亞硝酸鹽含量增加，而在整個發(fā)酵過程中，亞硝酸鹽的含量表現(xiàn)為先增加后下降的趨勢，D錯誤。
故選D。
4．B
【解析】A、在防止雜菌污染，研究和應(yīng)用微生物時應(yīng)進行消毒和滅菌，實驗室可以用紫外線或化學(xué)藥物進行消毒，A正確；
B、接種環(huán)、接種針等金屬用具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰部位灼燒滅菌，B錯誤；
C、在實驗室中，切不可吃東西、喝水，離開實驗室時一定要洗手，以防止被微生物感染，C正確；
D、使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理，以免污染環(huán)境，D正確。
故選B。
5．D
【解析】
【分析】
據(jù)微生物生長所必需的營養(yǎng)：碳源、氮源、無機鹽、水和生長因子。因微生物不同，對碳源、氮源、無機鹽、生長因子的需求也不相同，可以根據(jù)微生物的生長需求制備特殊的選擇培養(yǎng)基，來獲得單一純種。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。
【詳解】
微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、無機鹽、水和生長因子，A正確；根據(jù)微生物對碳源需要的差別，使用含不同碳源的培養(yǎng)基，例如培養(yǎng)自養(yǎng)型的細菌，在培養(yǎng)基中不需加入碳源，B正確；微生物培養(yǎng)基調(diào)節(jié)pH值時可以用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀，C正確；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，D錯誤。
【點睛】
注意：配制培養(yǎng)基必須按照培養(yǎng)微生物的營養(yǎng)需求進行，尤其要注意是先滅菌后倒平板。
6．D
【解析】
【分析】
培養(yǎng)基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)；營養(yǎng)物質(zhì)歸納為碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水；根據(jù)化學(xué)成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基；根據(jù)性質(zhì)分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基。
【詳解】
A、從培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分看（不含有機物），此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)的微生物同化作用類型是自養(yǎng)型，A錯誤；
B、微生物的菌落需要在固體培養(yǎng)基的表面生長，因此若要觀察微生物的菌落的特點，培養(yǎng)基中需要添加凝固劑(瓊脂)，使液體培養(yǎng)基凝固成固體培養(yǎng)基，B錯誤；
C、培養(yǎng)基需要高溫滅菌和調(diào)節(jié)pH值，C錯誤； ? ? ? ? ? ? ? ? ?
D、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，D正確。
故選D。
7．D
【解析】A、剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，A錯誤；
B、剛果紅可以在細菌菌落形成前的倒平板時加入，B錯誤；
C、該實驗富集纖維素分解菌時需要選擇培養(yǎng)基，分離時需要鑒別培養(yǎng)基，C錯誤；
D、有些微生物具有降解色素的能力，它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈，出現(xiàn)透明圈的菌落不一定為所需菌種，D正確。
故選D。
8．C
【解析】A、植物細胞具有細胞壁，向菜花組織中加入蒸餾水并不能使細胞吸水脹破，A錯誤；
B、鑒定DNA時，應(yīng)將絲狀物先加入NaCl溶液中，再加入二苯胺試劑并沸水浴加熱才能呈藍色，B錯誤；
C、DNA不溶于95%的冷酒精，向DNA濾液中加入冷酒精緩慢攪拌，可見玻棒上有白色絮狀物析出，C正確；
D、二苯胺試劑需要現(xiàn)配現(xiàn)用，D錯誤。
故選C。
9．B
【解析】A. 變性過程未加解旋酶，是通過高溫解旋，破壞 DNA 堿基對中氫鍵，A正確；
B. PCR 技術(shù)擴增需要的條件是目的基因、引物、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA 聚合酶，不需要 DNA 連接酶，B錯誤；
C. PCR 技術(shù)可用于基因診斷，判斷親緣關(guān)系等，C正確；
D. 如果反應(yīng)體系中加入模板 DNA100 個，則經(jīng)過 30 個循環(huán)后，DNA 的數(shù)量為 100×230 個，D正確。
故選B。
10．B
【解析】限制酶主要存在于微生物中，其化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，A項錯誤；一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，B項正確；有的限制酶切割DNA后會形成黏性末端，有的限制酶切割DNA后會形成平末端，C項錯誤；DNA連接酶可將雙連DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，D項錯誤。
11．【答案】C
【解析】本題結(jié)合圖形考查基因表達載體的構(gòu)建，要求考生理解構(gòu)建基因表達載體的方法，明確構(gòu)建的基因表達載體應(yīng)含有哪些部件及這些部件的功能，此題難度稍大。
根據(jù)題意，目的基因的兩端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，將含有目的基因的DNA與用EcoRⅠ酶切，會得到含目的基因的DNA片段和不含目的基因的DNA片段；根據(jù)質(zhì)粒的簡圖可知，將質(zhì)粒用EcoRⅠ酶切，會得到與質(zhì)粒周長等長的鏈狀DNA；因此將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切，在DNA連接酶作用下，可生成含目的基因的原DNA片段兩個之間進行連接、由含目的基因的DNA片段與質(zhì)粒周長等長的鏈狀DNA相互連接形成的鏈狀DNA、二倍于原質(zhì)粒周長的環(huán)狀DNA三種類型，A錯誤；DNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來形成一個重組質(zhì)粒，該過程形成四個磷酸二酯鍵，B錯誤；EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列不同，獲取目的基因和切割質(zhì)粒時，同時選用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因兩端形成的末端不同，切割開的質(zhì)粒兩端形成的末端不同，再用DNA連接酶連接，可以防止目的基因反向粘連和質(zhì)粒自身環(huán)化，C正確；題圖顯示，在構(gòu)建基因表達載體的過程中質(zhì)粒中的青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都不會被破壞，因此能在含青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長的受體細胞不能表明目的基因已成功導(dǎo)入該細胞，D錯誤。
12．C
【解析】大腸桿菌可能沒有導(dǎo)入質(zhì)粒，A正確；導(dǎo)入大腸桿菌的質(zhì)?？赡転橹亟M質(zhì)粒，也可能為普通質(zhì)粒，B正確；由于目的基因要插入到基因B中，即抗氨芐青霉素基因破壞，即工程菌不能抗氨芐青霉素，因此不能用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，C錯誤；據(jù)分析可知，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中不能生長，但在含鏈霉素培養(yǎng)基中能生長的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸桿菌，D正確。
13．C
【解析】本題考查基因工程的應(yīng)用，要求考生利用所學(xué)知識解讀圖形，判斷出圖中①是反轉(zhuǎn)錄，②是形成重組質(zhì)粒，③是將目的基因?qū)胧荏w細胞，④是目的基因在受體細胞內(nèi)表達，進而結(jié)合題意分析、判斷各選項。
分析圖形可知，步驟①代表反轉(zhuǎn)錄，是以禽流感病毒的RNA為模板合成DNA的過程，A正確；步驟②是用限制酶和 DNA 連接酶將目的基因與質(zhì)粒相連形成重組質(zhì)粒，B正確；步驟③將目的基因?qū)氪竽c桿菌的方法是用Ga2+處理，使大腸桿菌細胞處于感受態(tài)，進而吸收重組質(zhì)粒，C錯誤；檢驗 Q 蛋白的免疫反應(yīng)特性，可用 Q 蛋白與患禽流感康復(fù)的雞的血清進行抗原——抗體特異性反應(yīng)實驗，D正確。
14．C
【解析】A、脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，在此過程中需要植物激素誘導(dǎo)，A正確；
B、人工種子的胚乳含有胚狀體發(fā)育所需要的營養(yǎng)物質(zhì)，還可以添加農(nóng)藥和植物激素，B正確；
C、正常種子中的胚是由受精卵發(fā)育而來，具有雙親的遺傳物質(zhì)，C錯誤；
D、經(jīng)該過程產(chǎn)生的人工種子沒有經(jīng)歷生殖細胞的產(chǎn)生和融合，屬于無性繁殖，D正確。
故選C。
15．C
【解析】甲注射小鼠，產(chǎn)生能分泌特異性抗體的B淋巴細胞，則甲屬于抗原，A正確；利用聚乙二醇（化學(xué)法）、滅活的病毒（生物法）和電激（物理法）可誘導(dǎo)細胞融合獲得雜種動物細胞，但用滅活的病毒卻不能誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，B正確；用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合具有同種核的細胞和未融合細胞均不能生長，只有融合的雜種細胞能生長，C錯誤；雜交瘤細胞經(jīng)過選擇培養(yǎng)基的篩選并經(jīng)單一抗體檢測后，培養(yǎng)能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞即可制備單克隆抗體，D正確。
16．B
【解析】精細胞經(jīng)變形后，高爾基體發(fā)育形成精子頭部的頂體，A正確；不同精子形態(tài)相似且大小和動物體型大小無關(guān)，B錯誤；卵子在輸卵管內(nèi)發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期時才具備受精的能力，C正確；哺乳動物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前即（胎兒時期）完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別，D正確。
17．A
【解析】
A、用于移植的早期胚胎不一定是由受精卵發(fā)育而來，也可以是細胞核移植后得到的，A正確；
B、受精卵不能直接移植，B錯誤；
C、只要是同一物種，具有正常繁殖能力，就可以做受體，C錯誤；
D、胚胎工程的對象一般是哺乳動物，D錯誤。
故選A。
18．C
【解析】A、由表格數(shù)據(jù)可知，換液體積為3/4的囊胚率比不更換微滴體積低，A錯誤；
B、因為各組卵裂率不同，故不可以通過實驗中所測得的囊胚率數(shù)據(jù)推斷胚胎的桑椹胚率，B錯誤；
C、實驗中換液體積為1／2的組卵裂率和囊胚率均最高，促進牛孤雌胚胎發(fā)育效果最佳，C正確；
D、定期更換微滴除了補充所需營養(yǎng)物質(zhì)外，還可防止代謝產(chǎn)物積累，D錯誤。
故選C。
19．D
【解析】A、胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上，只增殖不分化，A錯誤；
B、全能干細胞可以分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞，B錯誤；
C、治療性克隆所用的細胞是從患者自身分離出來的，然后才有核移植技術(shù)和早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)形成早期胚胎，再從中獲得干細胞，C錯誤；
D、對誘導(dǎo)多能干細胞（iPS）進行定向誘導(dǎo)分化后可用于疾病的治療，D正確。
故選：D。
20．B
【解析】A、轉(zhuǎn)基因技術(shù)如果被用于軍事，制造出生物武器，那將是對人類社會極大的毀滅，A正確；
B、轉(zhuǎn)基因生物有可能會在近緣物種之間通過花粉雜交，造成基因庫的污染，B錯誤；
C、人類在推廣轉(zhuǎn)基因作物時，沒有充分考慮生物和環(huán)境之間的相互影響，C正確；
D、實驗過程中一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物，D正確。
故選B。
21、【答案】(1)減數(shù)第二次分裂中期(MⅡ中期)　獲能　發(fā)育
(2)胚胎移植　免疫排斥反應(yīng)　胚胎分割
(3)桑椹胚或囊胚　冷凍 (4)發(fā)育的全能性　細胞核大
22【答案】
（1）酵母菌 無氧(密閉、密封) 醋酸菌 醋酸
（2）乳酸菌 1：4 比色
（3）析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬 抑制微生物的生長
腐乳成熟的時間將會延長
【解析】（1）參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：
在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O2 →6CO2+12H2O+能量；
在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br /> （2）參與泡菜制作的微生物是乳酸菌。泡菜制作中鹽和水的比例是1：4；為了檢測泡菜中的亞硝酸鹽的含量，通常采用光電比色法檢測。
（3）腐乳前期發(fā)酵時，溫度應(yīng)該控制在15~18℃，并保持一定的濕度。加鹽的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐塊變硬，同時，鹽還能抑制微生物的生長，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。酒精含量一般控制在12%左右，酒精含量過高會延長腐乳成熟的時間，含量過低則不能抑制雜菌生長。其次是酒精還能使腐乳具有獨特的香味。
23.【答案】（1）PCR PCR通過高溫解旋，PCR使用的是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），引物不同，
先解旋后復(fù)制（任答兩點，每點1分，共2分）
（2）NcoⅠ、BamHⅠ DNA連接
（3）Ca2+（CaCl2溶液） 草丁膦
（4）DNA分子雜交技術(shù)
（5）將重組白僵菌噴涂在植物葉片上，再用此葉片飼喂害蟲，記錄單位時間內(nèi)的害蟲死亡的數(shù)(2分)
【解析】（1）根據(jù)題意可知，3種獲取目的基因的方法中，只有 PCR技術(shù)可以獲得大量毒蛋白基因片段。而PCR技術(shù)與細胞內(nèi)DNA復(fù)制的區(qū)別主要是PCR通過高溫解旋，PCR使用的是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），引物不同，先解旋后復(fù)制等。
（2）據(jù)圖分析，毒蛋白基因兩端是NcoⅠ、BamHⅠ作用位點，因此需要Nco I、BamH I兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。然后再用DNA連接酶形成重組質(zhì)粒1，利用兩種限制酶可以防止目的基因和質(zhì)粒自身連接；然后再利用Xal I酶分別切割重組質(zhì)粒1和BAR基因，再構(gòu)建重組質(zhì)粒2。
（3）將重組質(zhì)粒2與用鈣離子處理后處于感受態(tài)的白僵菌菌液混合進行轉(zhuǎn)化，一段時間后，用含有草甘磷的平板培養(yǎng)基進行篩選，獲得還有Bar基因的重組白僵菌。
（4）檢測毒蛋白基因是否插入到受體細胞，說明檢測對象是基因，用DNA分子雜交技術(shù)。
（5）個體水平的檢測，科研人員將重組白僵菌噴涂在植物葉片上，再用此葉片飼喂饑餓處理的害蟲，記錄單位時間內(nèi)的害蟲死亡的數(shù)，以判斷重組白僵菌的殺蟲效果。
24【答案】　(1)纖維素酶和果膠酶 離心、振動、電激 　脫分化和再分化
(2)雜交瘤細胞　篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞（2分）
(3)滅活病毒法　小鼠的腹水　特異性強、靈敏度高、并可能大量制備（2分）
【解析】(1)在進行植物體細胞雜交之前，應(yīng)先使用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁。圖1中，①過程表示誘導(dǎo)植物細胞的原生質(zhì)體融合，常用的方法有物理法和化學(xué)法，其中物理法包括離心、振動、電激等；③過程和④過程分別表示脫分化和再分化。(2)圖2中經(jīng)融合處理后還需要進行至少2次篩選，第一次(利用選擇培養(yǎng)基)篩選出雜交瘤細胞而未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡。雜交瘤細胞中只有極少數(shù)能產(chǎn)生特異性抗體，通過抗體陽性檢測來選出目標細胞。(3)誘導(dǎo)動物細胞融合的方法有物理法、化學(xué)法和滅活的病毒處理法等。篩選出雜交瘤細胞后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取大量的單克隆抗體了。
25【答案】（1）高壓蒸汽滅菌 步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源 選擇
（2）稀釋涂布平板法 涂布不均勻 檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格
（3）5．7×107 當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
（4）菌體和培養(yǎng)液充分接觸
（5）篩選出分解石油能力最好的細菌
【解析】本題考查分解石油的細菌的篩選，要求考生明確微生物的接種、篩選方法，能根據(jù)所學(xué)知識分析操作流程圖，篩選出所需要的石油分解菌，并能對計數(shù)結(jié)果進行計算。
（1）根據(jù)題意，要分離和純化高效分解石油的細菌，配制好的培養(yǎng)基滅菌通?？梢允褂酶邏赫羝麥缇?。圖中步驟②是擴大培養(yǎng)來自被石油污染過的土壤中細菌，步驟③是利用添加石油擴大培養(yǎng)分解石油的細菌，步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源。這種培養(yǎng)基從功能上看屬于選擇培養(yǎng)基。
（2）過程④是對分解石油的細菌進行分離，分析B圖可知，分解石油的細菌在培養(yǎng)基表面分布較為均勻，說明同學(xué)甲進行過程④的操作中接種方法是稀釋涂布平板法；圖B中培養(yǎng)基表面左側(cè)的菌落數(shù)目明顯比右側(cè)多，推測同學(xué)甲用此方法接種時出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是接種時涂布不均勻；在接種前需隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。
（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為（56+58+57）30.1x100x1000=5.7×107。由于細菌會相互重疊，當兩個或多個細菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以導(dǎo)致統(tǒng)計的細菌數(shù)量往往比實際數(shù)目少。
（4）步驟⑤需要震蕩培養(yǎng)其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)利用率。
（5）步驟⑤后取樣測定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最好的細菌，其中石油剩余量最少的一組所含的細菌就是分解石油能力最好的細菌。

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