1．三白草和魚腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對(duì)”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到雜種細(xì)胞，并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
A．①過程可利用鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液來完成
B．②過程通常在等滲或略高滲溶液中，可采用高Ca2+﹣高pH融合法誘導(dǎo)
C．④過程需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例，誘導(dǎo)生芽和生根
D．圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性
2．甘草是中醫(yī)使用最多的藥材之一，其提取物中的黃酮具有抗衰老、抗炎等作用。如圖表示利用懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)甘草黃酮的過程。下列敘述正確的是（ ）
A．可用次氯酸鈉和酒精對(duì)種子進(jìn)行滅菌
B．圖中添加果膠酶的主要目的是獲得原生質(zhì)體
C．對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行人工誘變，其變異率常高于對(duì)器官或個(gè)體進(jìn)行誘變
D．圖示過程能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性
3．呼吸道合胞病毒（RSV）是一種引起下呼吸道感染的RNA病毒。科研人員選取病毒NS2基因獲得具有免疫原性的NS2蛋白，利用該蛋白及小鼠制備獲得了四株能分泌不同單克隆抗體的細(xì)胞系，為后續(xù)建立RSV檢測(cè)系統(tǒng)提供了實(shí)驗(yàn)材料。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A．為獲得更多的B淋巴細(xì)胞，需向小鼠多次注射NS2蛋白
B．用NS2蛋白可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能分泌多種抗體的B淋巴細(xì)胞
C．若要區(qū)分上述四株細(xì)胞系，可用NS2蛋白進(jìn)行抗體檢測(cè)
D．單克隆抗體可準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異并能夠大量制備
4．科研人員設(shè)法保存了北部白犀牛的精子和部分組織，欲通過胚胎移植等方法繁育該物種，其研究過程如圖所示，其中①②③表示操作過程。下列說法正確的是（ ）
A．①表示注射相關(guān)激素，從卵巢中收集的卵母細(xì)胞可直接與精子完成體外受精過程
B．③表示胚胎移植，重構(gòu)胚發(fā)育為胚胎的過程不需要進(jìn)行任何處理
C．兩種后代細(xì)胞中的核DNA相同，細(xì)胞質(zhì)DNA不同
D．后代B為雌性白犀牛，后代A與后代B的性別不一定相同
5．無糖組織培養(yǎng)技術(shù)通常以珍珠巖或蛭石代替瓊脂作為支撐物，加入無蔗糖培養(yǎng)液，用CO2代替糖作為植物體的碳源，是更接近植物自然生長(zhǎng)狀態(tài)的一種新型植物組織培養(yǎng)技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．該技術(shù)的外植體必須具有一定葉面積或帶綠色子葉
B．多孔的支撐物能改善組培苗的根區(qū)環(huán)境，從而促進(jìn)了根系的發(fā)育
C．為滿足植物需求，培養(yǎng)容器不能密封并需人為通入CO2
D．自養(yǎng)微生物仍可在無蔗糖培養(yǎng)液中繁殖并形成菌落
6．種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）將供體動(dòng)物體細(xì)胞與來自不同種的家畜去核卵母細(xì)胞融合并激活，以獲得較多的重構(gòu)胚，進(jìn)而獲得動(dòng)物個(gè)體。因野生動(dòng)物數(shù)量少，采集精子或卵子開展常規(guī)輔助生殖較為困難，而從活體采集體細(xì)胞利用iSCNT技術(shù)獲得動(dòng)物個(gè)體，可一定程度維持瀕危動(dòng)物數(shù)量。下列敘述正確的是（ ）
A．iSCNT技術(shù)必須通過顯微操作技術(shù)將供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出，然后注入去核的卵母細(xì)胞
B．若從野生動(dòng)物體內(nèi)采集到的體細(xì)胞數(shù)目較少，可先用添加動(dòng)物血清的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)
C．因受體不會(huì)對(duì)來自供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，代孕母體可以任意選擇不同種的家畜
D．同一野生動(dòng)物經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得的多個(gè)重構(gòu)胚中，遺傳物質(zhì)可能不完全相同
7．紫杉醇是紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種天然物質(zhì)，具有高抗癌活性，廣泛用于乳腺癌的治療。經(jīng)過我國(guó)科學(xué)家多年研究，現(xiàn)可通過植物細(xì)胞工程工廠化生產(chǎn)紫杉醇，操作環(huán)節(jié)如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．紫杉醇是初生代謝物，在細(xì)胞中含量很低
B．誘導(dǎo)愈傷組織過程需要考慮激素種類和比例
C．使用液體培養(yǎng)基并振蕩有利于細(xì)胞獲取氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
D．圖示方法的優(yōu)點(diǎn)包括不占用耕地、幾乎不受季節(jié)、天氣等限制
8．科學(xué)家以SARS病毒的核衣殼蛋白為抗原，制備出了單克隆抗體。下列相關(guān)敘述，正確的是（ ）
A．利用該單克隆抗體可以診斷是否感染SARS病毒
B．體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體
C．將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
D．將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，從小鼠血清中分離的抗體為單克隆抗體
9．細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，并取得了顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．利用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)培育出的脫毒馬鈴薯往往比未脫毒馬鈴薯產(chǎn)量高
B．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以獲得白菜—甘藍(lán)雜種植株，打破了生殖隔離
C．使用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎的過程屬于有性生殖
D．將病人自身體細(xì)胞誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞移植回病人體內(nèi)，理論上可避免免疫排斥
10．植物細(xì)胞壁中存在大量不能被動(dòng)物消化的多聚糖類物質(zhì)，研究人員通過生物工程技術(shù)培育出含多聚糖水解酶基因豬，主要流程如圖，①～⑤表示操作過程。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）
A．在基因表達(dá)載體中構(gòu)建誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，可以利用誘導(dǎo)物激活多聚糖水解酶基因表達(dá)
B．從卵巢中采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到MⅡ期后用顯微操作技術(shù)去除核膜包裹的細(xì)胞核
C．用蛋白酶合成抑制劑激活③過程形成的重構(gòu)胚使其完成分裂和發(fā)育進(jìn)程
D．④過程的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境下空間位置的轉(zhuǎn)移
11．我國(guó)科學(xué)家成功構(gòu)建了具有高比例胚胎干細(xì)胞的活產(chǎn)嵌合體猴。如圖所示，研究人員將4CL體系下培育的、可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，最終得到嵌合體猴。下列敘述正確的是（ ）
A．為防止細(xì)菌污染，培養(yǎng)4CL干細(xì)胞時(shí)可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素
B．4CL干細(xì)胞注入桑葚胚后會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生融合進(jìn)而形成嵌合體
C．對(duì)嵌合囊胚或原腸胚進(jìn)行胚胎分割后移植，可以產(chǎn)生更多的嵌合體猴
D．嵌合體猴部分細(xì)胞可發(fā)出綠色熒光，其遺傳信息不一定能遺傳給后代
12．、研究不同激素對(duì)獼猴桃組織培養(yǎng)過程的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下，相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）
注：“+”越多，生長(zhǎng)狀況越好
A．愈傷組織是已分化植物細(xì)胞發(fā)生脫分化的結(jié)果
B．第1組能誘導(dǎo)愈傷組織形成是內(nèi)源激素的作用
C．誘導(dǎo)猻猴桃組織脫分化應(yīng)選擇第5組處理方案
D．玉米素濃度超過1ppm會(huì)抑制愈傷組織再分化
13．為培育繁殖周期快、高產(chǎn)人參皂苷的雜種植物，研究人員將人參和胡蘿卜的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，并檢測(cè)了原生質(zhì)體密度對(duì)融合率的影響，結(jié)果如表。
下列相關(guān)敘述不正確的是（ ）
A．利用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理獲得原生質(zhì)體
B．原生質(zhì)體密度過高或過低均不利于原生質(zhì)體的融合
C．融合后的原生質(zhì)體經(jīng)過脫分化即可發(fā)育成雜種植株
D．對(duì)雜種植株需進(jìn)行生長(zhǎng)速度和人參皂苷含量的檢測(cè)
14．由于受到逆境脅迫影響，大豆的品質(zhì)和產(chǎn)量往往難以滿足人們的需求?？蒲腥藛T以大豆子葉節(jié)的腋生分生組織為受體材料，用攜帶抗細(xì)菌基因載體的農(nóng)桿菌侵染受體材料，獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽，然后進(jìn)一步培養(yǎng)為轉(zhuǎn)基因抗菌株系。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．與葉肉細(xì)胞相比，用大豆子葉節(jié)的腋生分生組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)更容易成功
B．農(nóng)桿菌侵染受體材料時(shí)會(huì)將帶有抗菌基因的T﹣DNA插入到受體材料的基因組中
C．需要用能殺死對(duì)應(yīng)細(xì)菌的抗生素進(jìn)行篩選來獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽
D．獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽需要注意培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度及比例
15．某科學(xué)小組探索長(zhǎng)壽花組織培養(yǎng)過程中外植體的消毒條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。下列分析不正確的是（ ）
注：褐化是指培養(yǎng)材料在組培過程中向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，并變褐死亡的現(xiàn)象。
A．消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)，組織培養(yǎng)成功率越高
B．消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)，外植體的污染率越低
C．誘導(dǎo)培養(yǎng)外植體脫分化為愈傷組織的過程中一般不需要光照
D．組織培養(yǎng)過程中提高生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例有助于生根
16．源于非洲綠猴腎細(xì)胞的Ver細(xì)胞系是一種連續(xù)細(xì)胞系。Ver細(xì)胞不表達(dá)干擾素，但干擾素受體功能正常。因此，Ver細(xì)胞對(duì)很多病毒敏感，是生產(chǎn)病毒疫苗的理想材料。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．Ver細(xì)胞的培養(yǎng)需要使用CO2培養(yǎng)箱
B．Ver細(xì)胞可多次分裂，具有不死性
C．Ver細(xì)胞用于培養(yǎng)病毒時(shí)，培養(yǎng)液中應(yīng)添加適量干擾素
D．Ver細(xì)胞可用于測(cè)定藥物對(duì)病毒復(fù)制速度的影響
17．金菊花是多年生草本植物，是經(jīng)長(zhǎng)期人工選擇培育出的名貴觀賞花卉。如圖表示某生物興趣小組利用金菊花未開花的幼嫩枝條進(jìn)行組織培養(yǎng)的過程。下列敘述正確的是（ ）
A．過程①是獲取離體的未開花的幼嫩枝條，用適宜濃度的酒精和次氯酸鈉的混合液消毒
B．過程②是經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，期間一般不需要光照
C．過程③表示再分化，需要先誘導(dǎo)生根，再誘導(dǎo)生芽
D．過程④是培育形成的試管苗直接移栽入土進(jìn)一步培養(yǎng)成金菊花植物體
18．雌性胚胎發(fā)育到一定階段時(shí)，其細(xì)胞中兩條X染色體中的隨機(jī)一條失活，失活的那個(gè)成為沉默的巴氏小體，巴氏小體上的基因不表達(dá)，未失活的染色體上的基因可以表達(dá)。人體G﹣6PD蛋白有F和S兩種類型，分別由一對(duì)等位基因XF和XS編碼。將某女性皮膚組織用酶分散成單個(gè)細(xì)胞后先進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，再用單克隆抗體對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的F和S兩種蛋白進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是（ ）
A．分散皮膚組織用的酶可以是胰蛋白酶或胃蛋白酶
B．細(xì)胞培養(yǎng)用的無菌空氣要添加5%的CO2以提供碳源
C．該女性基因型為XFXS，3、6、7號(hào)細(xì)胞中XS基因不能表達(dá)
D．用來檢測(cè)F和S兩種蛋白的單克隆抗體是由一種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的
19．轉(zhuǎn)錄因子Gh1和GhE1能調(diào)控棉花愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，參與體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中細(xì)胞命運(yùn)的重塑，其機(jī)制如圖所示。下列相關(guān)分析正確的是（ ）
A．將愈傷組織細(xì)胞在脫分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)可得到幼苗
B．Gh1基因發(fā)生甲基化可能會(huì)抑制愈傷組織細(xì)胞的增殖
C．促進(jìn)GhE1基因的表達(dá)可促進(jìn)愈傷組織分化成根等器官
D．Gh1與GhE1單獨(dú)作用均能調(diào)控GhPs基因的表達(dá)
20．懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)貼壁生長(zhǎng)，但不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B．灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行
C．灌流速率越高，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用越充分
D．培養(yǎng)管通常放置在95%的O2和5%的CO2的環(huán)境中
二．解答題（共5小題）
21．妊娠與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的功能密切相關(guān)。某研究小組通過如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程獲得了子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞，以期用于妊娠相關(guān)疾病的研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）手術(shù)獲得的皮膚組織需在適宜的低溫條件下運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，適宜低溫對(duì)細(xì)胞中各種蛋白質(zhì)的作用為 。
（2）過程①中，誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞時(shí)，需要讓4個(gè)外源基因在成纖維細(xì)胞中大量表達(dá)，通?？刹捎? 技術(shù)將這些基因?qū)朐摷?xì)胞。這4個(gè)基因的主要作用為：M基因促進(jìn)增殖，S基因和C基因控制干細(xì)胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纖維細(xì)胞形成腫瘤細(xì)胞，最有可能的原因是 基因過量表達(dá)。
（3）培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí)，應(yīng)對(duì)所處環(huán)境定期消毒以降低細(xì)胞被污染的風(fēng)險(xiǎn)。下列各項(xiàng)中可用紫外線進(jìn)行消毒的是 （多選）。
A．培養(yǎng)基
B．培養(yǎng)瓶
C．細(xì)胞培養(yǎng)室
D．CO2培養(yǎng)箱
（4）過程②中，iPS細(xì)胞經(jīng)歷的生命歷程為 。PCR技術(shù)可用于檢測(cè)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞關(guān)鍵基因的mRNA水平，mRNA需經(jīng)過 才能作為PCR擴(kuò)增的模板。
22．米酵菌酸（BA）是由椰毒假單胞菌產(chǎn)生的一種可以引起食物中毒的毒素。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，自2014年以來，我國(guó)由BA引起的食物中毒事件高達(dá)幾十余起，死亡率高達(dá)50%以上。為了應(yīng)對(duì)中毒后的快速治療處理，科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)：
①細(xì)胞融合及篩選
按小鼠脾臟細(xì)胞：骨髓瘤細(xì)胞＝10：1的比例混合后緩慢滴加1mLPEG（邊加邊輕輕攪拌），靜置1min，離心后棄去上清液，用HAT培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選出雜交瘤細(xì)胞，后用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后利用BA進(jìn)行檢測(cè)。
②抗BA單克隆抗體腹水的制備
選取10只6周齡小鼠，腹腔注射1×103個(gè)雜交瘤細(xì)胞，2周后收集小鼠腹水。
③抗BA單克隆抗體特異性檢測(cè)
選取BA及8種BA結(jié)構(gòu)類似物（毒黃素、T﹣2毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、嘔吐毒素、河豚毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉酮）進(jìn)行特異性檢測(cè)，結(jié)果如下（IC50為半數(shù)抑制濃度）。
回答下列問題：
（1）實(shí)驗(yàn)所用小鼠應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前利用 進(jìn)行免疫。已免疫小鼠脾臟剪碎后，用 酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
（2）實(shí)驗(yàn)中滴加PEG時(shí)邊加邊輕輕攪拌的目的是 。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法除實(shí)驗(yàn)中所用方法外，還可以采用 法和 法。
（3）用HAT培養(yǎng)基能選擇培養(yǎng)出雜交瘤細(xì)胞的原因是 。用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需先將細(xì)胞懸浮液稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，再在每個(gè)培養(yǎng)孔中滴加0.1mL稀釋后的細(xì)胞懸浮液，其目的是 。
（4）表格數(shù)據(jù)表明抗BA單克隆抗體與這8種毒素 （填“有”或“沒有”）交叉反應(yīng)，說明 。
23．小鼠是科學(xué)研究中不可或缺的動(dòng)物模型，具有容易飼養(yǎng)、世代周期短、繁殖率高、組織器官結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能與人類接近等特點(diǎn)。下面是關(guān)于小鼠的一系列科學(xué)研究工作，回答問題：
（1）在器官再生方面，小鼠胚胎干細(xì)胞具有顯著的能力。體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞一般需要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是 。
（2）為保留小鼠A的優(yōu)良性狀，可進(jìn)行體細(xì)胞核移植。以小鼠A的體細(xì)胞和小鼠B卵母細(xì)胞為材料進(jìn)行操作，以獲得重構(gòu)胚，主要操作步驟是 。進(jìn)行小鼠胚胎工程操作時(shí)，要在光控周期下飼養(yǎng)成年雌鼠，并注射 ，促進(jìn)排卵。從雄鼠采集的精子需進(jìn)行 處理。體外受精后，在適宜條件下培養(yǎng)受精卵，用于胚胎移植。進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是 。
（3）若將外源基因?qū)胄∈笫芫?，則外源基因可能隨機(jī)插入到小鼠受精卵DNA中，這種受精卵有的可發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請(qǐng)分析外源基因插入導(dǎo)致受精卵死亡的最可能原因是 。
（4）在藥物研究過程中，研究者發(fā)現(xiàn)因小鼠與人類親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，很多在小鼠體內(nèi)有效的候選藥物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。通過以上分析，在藥物研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面研究的方向是 。
24．如圖是轉(zhuǎn)乳糖酶基因試管牛和克隆牛的培育過程，回答下列問題：
（1）細(xì)胞1為 ，是動(dòng)物基因工程中常用的受體細(xì)胞，可通過 法導(dǎo)入目的基因，基因工程的核心步驟是 。
（2）胚胎移植前需要將細(xì)胞1在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)成胚胎，培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境條件為 。胚胎移植前可對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割和性別鑒定，性別鑒定一般用發(fā)育到囊胚期的細(xì)胞，對(duì)囊胚期胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將 均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。
（3）克隆牛的培育是通過 技術(shù)實(shí)現(xiàn)的，屬于 （填“有性”或“無性”）生殖。從進(jìn)化角度分析，試管牛相比于克隆牛的優(yōu)勢(shì)是 。
（4）有人提出，克隆動(dòng)物的培育技術(shù)已經(jīng)逐漸成熟，是時(shí)候?qū)⑵鋺?yīng)用于培育克隆人了，你是否贊同這種觀點(diǎn)？ 。對(duì)于克隆，中國(guó)政府的態(tài)度是
25．如圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過程；圖2表示培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：
（1）圖1所示過程所用的生物技術(shù)有 和 ，將特定的抗原注入小鼠，需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次以上，其目的是 。
（2）將經(jīng)免疫處理后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程中，至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過 培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過 檢測(cè)，篩選出能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
（3）培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基提供氣體條件CO2的作用 ，雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中，為避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，常采取的措施是 。
（4）圖2中的早期胚胎發(fā)育到 階段才可以移植，在移植之前，需要進(jìn)行質(zhì)量檢查，用某染料鑒定胚胎細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)活胚胎細(xì)胞不能被染色，其原因是 。為了獲得多個(gè)基因型相同的優(yōu)質(zhì)奶牛，可采用的技術(shù)手段是 。
2025年菁優(yōu)高考生物解密之細(xì)胞工程
參考答案與試題解析
一．選擇題（共20小題）
1．三白草和魚腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對(duì)”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到雜種細(xì)胞，并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
A．①過程可利用鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液來完成
B．②過程通常在等滲或略高滲溶液中，可采用高Ca2+﹣高pH融合法誘導(dǎo)
C．④過程需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例，誘導(dǎo)生芽和生根
D．圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性
【考點(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用．
【專題】模式圖；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】B
【分析】圖示為三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③脫分化形成愈傷組織，④提取代謝產(chǎn)物。
【解答】解：A、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此過程①三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程中要利用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液會(huì)殺死細(xì)胞，A錯(cuò)誤；
B、過程②通常在等滲或略高滲溶液中，不能用低滲溶液，不然原生質(zhì)體會(huì)吸水漲破；可以采用化學(xué)法（高Ca2+﹣高pH融合法）或物理法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B正確；
C、④過程為提取代謝產(chǎn)物，不需要誘導(dǎo)生芽和生根，C錯(cuò)誤；
D、圖中過程②原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性；將雜種細(xì)胞培育成一個(gè)完整的新的植物體的過程才體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，故圖中所示的生產(chǎn)流程沒有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。
故選：B。
【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查植物組織體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的原理及過程，能正確分析圖形，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)對(duì)選項(xiàng)作出正確的判斷，難度適中。
2．甘草是中醫(yī)使用最多的藥材之一，其提取物中的黃酮具有抗衰老、抗炎等作用。如圖表示利用懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)甘草黃酮的過程。下列敘述正確的是（ ）
A．可用次氯酸鈉和酒精對(duì)種子進(jìn)行滅菌
B．圖中添加果膠酶的主要目的是獲得原生質(zhì)體
C．對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行人工誘變，其變異率常高于對(duì)器官或個(gè)體進(jìn)行誘變
D．圖示過程能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】模式圖；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】C
【分析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)：
1、過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。
2、原理：植物細(xì)胞的全能性。
3、條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。
4、植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【解答】解：A、可用次氯酸鈉和酒精對(duì)種子進(jìn)行消毒，A錯(cuò)誤；
B、圖示過程中添加果膠酶的主要目的是更快獲得細(xì)胞懸液，B錯(cuò)誤；
C、愈傷組織細(xì)胞分裂旺盛，更易發(fā)生突變，C正確；
D、題圖所示過程并未從已分化的植物細(xì)胞獲得完整植株，不能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題以生產(chǎn)甘草黃酮為情境，考查植物組織培養(yǎng)。
3．呼吸道合胞病毒（RSV）是一種引起下呼吸道感染的RNA病毒?？蒲腥藛T選取病毒NS2基因獲得具有免疫原性的NS2蛋白，利用該蛋白及小鼠制備獲得了四株能分泌不同單克隆抗體的細(xì)胞系，為后續(xù)建立RSV檢測(cè)系統(tǒng)提供了實(shí)驗(yàn)材料。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A．為獲得更多的B淋巴細(xì)胞，需向小鼠多次注射NS2蛋白
B．用NS2蛋白可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能分泌多種抗體的B淋巴細(xì)胞
C．若要區(qū)分上述四株細(xì)胞系，可用NS2蛋白進(jìn)行抗體檢測(cè)
D．單克隆抗體可準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異并能夠大量制備
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【專題】正推法；克隆技術(shù)．
【答案】C
【分析】單克隆抗體的制備：
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：A、給小鼠多次注射NS2蛋白是為了刺激機(jī)體產(chǎn)生更多的已免疫的B淋巴細(xì)胞，A正確；
B、由題意可知，用NS2蛋白可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能分泌多種抗體的B淋巴細(xì)胞，B正確；
C、抗體與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，因此要區(qū)分上述四株細(xì)胞系，應(yīng)該用不同的抗原進(jìn)行抗體檢測(cè)，C錯(cuò)誤；
D、單克隆抗體可準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合，并且可以大量制備，D正確。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查單克隆抗體的制備，要求考生識(shí)記單克隆抗體制備的過程，掌握單克隆抗體的應(yīng)用及實(shí)例，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
4．科研人員設(shè)法保存了北部白犀牛的精子和部分組織，欲通過胚胎移植等方法繁育該物種，其研究過程如圖所示，其中①②③表示操作過程。下列說法正確的是（ ）
A．①表示注射相關(guān)激素，從卵巢中收集的卵母細(xì)胞可直接與精子完成體外受精過程
B．③表示胚胎移植，重構(gòu)胚發(fā)育為胚胎的過程不需要進(jìn)行任何處理
C．兩種后代細(xì)胞中的核DNA相同，細(xì)胞質(zhì)DNA不同
D．后代B為雌性白犀牛，后代A與后代B的性別不一定相同
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植．
【專題】模式圖；胚胎工程．
【答案】D
【分析】1、哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集、精子的獲取和受精等幾個(gè)主要步驟。
2、動(dòng)物排出的卵子成熟程度不同，有的可能是初級(jí)卵母細(xì)胞，如馬、犬等，有的可能是次級(jí)卵母細(xì)胞，如豬、羊等。但它們都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，當(dāng)達(dá)到減數(shù)第二次分裂的中期（MⅡ）時(shí)，才具備與精子受精的能力。
【解答】解：A、收集的卵母細(xì)胞須培養(yǎng)到MⅡ期才能與獲能的精子進(jìn)行體外受精，A錯(cuò)誤；
B、③表示胚胎的早期發(fā)育，重構(gòu)胚需要經(jīng)激活處理才能完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，B錯(cuò)誤；
C、兩種后代細(xì)胞中的核DNA與細(xì)胞質(zhì)DNA均可能不完全相同，C錯(cuò)誤；
D、后代B的細(xì)胞核來自北部白犀牛（雌性），故后代B為雌性白犀牛，后代A有性生殖產(chǎn)生的，性別不確定，D正確。
故選：D。
【點(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合胚胎移植的過程圖解，考查胚胎移植的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記胚胎移植的基本程序和受精作用的具體過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查。
5．無糖組織培養(yǎng)技術(shù)通常以珍珠巖或蛭石代替瓊脂作為支撐物，加入無蔗糖培養(yǎng)液，用CO2代替糖作為植物體的碳源，是更接近植物自然生長(zhǎng)狀態(tài)的一種新型植物組織培養(yǎng)技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．該技術(shù)的外植體必須具有一定葉面積或帶綠色子葉
B．多孔的支撐物能改善組培苗的根區(qū)環(huán)境，從而促進(jìn)了根系的發(fā)育
C．為滿足植物需求，培養(yǎng)容器不能密封并需人為通入CO2
D．自養(yǎng)微生物仍可在無蔗糖培養(yǎng)液中繁殖并形成菌落
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】D
【分析】植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。植物組織培養(yǎng)的流程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，經(jīng)再分化形成芽、根或胚狀體，進(jìn)而形成完整植株。
【解答】解：A、因?yàn)闊o糖培養(yǎng)是依靠植物葉片光合作用產(chǎn)生有機(jī)物來促進(jìn)植物生長(zhǎng)，所以無糖培養(yǎng)的對(duì)象必須能進(jìn)行光合作用，即該技術(shù)的外植體必須具有一定葉面積或帶綠色子葉，A正確；
B、多孔的支撐物具有良好的透氣性，使植物的根區(qū)環(huán)境中有較高的氧濃度，從而促進(jìn)了植株根系的發(fā)育，B正確；
C、單靠容器內(nèi)的CO2濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足植株生長(zhǎng)的需求，需要人為的輸入CO2，C正確；
D、自養(yǎng)微生物可利用無機(jī)碳源，因此可在無蔗糖培養(yǎng)液中繁殖，但菌落的形成需要固體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。
故選：D。
【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查植物組織培養(yǎng)的內(nèi)容，要求考生識(shí)記相關(guān)知識(shí)，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。
6．種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）將供體動(dòng)物體細(xì)胞與來自不同種的家畜去核卵母細(xì)胞融合并激活，以獲得較多的重構(gòu)胚，進(jìn)而獲得動(dòng)物個(gè)體。因野生動(dòng)物數(shù)量少，采集精子或卵子開展常規(guī)輔助生殖較為困難，而從活體采集體細(xì)胞利用iSCNT技術(shù)獲得動(dòng)物個(gè)體，可一定程度維持瀕危動(dòng)物數(shù)量。下列敘述正確的是（ ）
A．iSCNT技術(shù)必須通過顯微操作技術(shù)將供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出，然后注入去核的卵母細(xì)胞
B．若從野生動(dòng)物體內(nèi)采集到的體細(xì)胞數(shù)目較少，可先用添加動(dòng)物血清的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)
C．因受體不會(huì)對(duì)來自供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，代孕母體可以任意選擇不同種的家畜
D．同一野生動(dòng)物經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得的多個(gè)重構(gòu)胚中，遺傳物質(zhì)可能不完全相同
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)；體外受精和胚胎移植．
【專題】正推法；克隆技術(shù)．
【答案】D
【分析】1、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新的胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，其原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。
2、胚胎移植是指將通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。
【解答】解：A、在進(jìn)行核移植時(shí)，可以通過顯微操作技術(shù)，將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；
B、若從野生動(dòng)物體內(nèi)采集到的體細(xì)胞數(shù)目較少，可先用添加動(dòng)物血清的液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，以增加體細(xì)胞的數(shù)目，B錯(cuò)誤；
C、同種胚胎移植時(shí)受體不會(huì)對(duì)來自供體的胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，種間體細(xì)胞核移植為了保證成功率，應(yīng)盡量選擇親緣關(guān)系較近的代孕母體，C錯(cuò)誤；
D、在種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）過程中，去核的卵母細(xì)胞來自不同種、科、目或綱的家畜（馴養(yǎng)動(dòng)物），獲得的重構(gòu)胚胎的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)可能不同，因此同一野生動(dòng)物經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得的多個(gè)重構(gòu)胚中，遺傳物質(zhì)可能不完全相同，D正確。
故選：D。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，具備運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。
7．紫杉醇是紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種天然物質(zhì)，具有高抗癌活性，廣泛用于乳腺癌的治療。經(jīng)過我國(guó)科學(xué)家多年研究，現(xiàn)可通過植物細(xì)胞工程工廠化生產(chǎn)紫杉醇，操作環(huán)節(jié)如圖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．紫杉醇是初生代謝物，在細(xì)胞中含量很低
B．誘導(dǎo)愈傷組織過程需要考慮激素種類和比例
C．使用液體培養(yǎng)基并振蕩有利于細(xì)胞獲取氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)
D．圖示方法的優(yōu)點(diǎn)包括不占用耕地、幾乎不受季節(jié)、天氣等限制
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】模式圖；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】A
【分析】初生代謝是生物生長(zhǎng)和生存所必需的代謝活動(dòng)，因此在整個(gè)生命過程中它一直進(jìn)行著。初生代謝物有糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸等。次生代謝不是生物生長(zhǎng)所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時(shí)間條件下才進(jìn)行。
【解答】解：A、紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內(nèi)的一種次生代謝物，次生代謝物不是生長(zhǎng)必需的，在細(xì)胞中含量很低，A錯(cuò)誤；
B、誘導(dǎo)愈傷組織需要考慮外植體的取材部位（幼嫩部位較易成功）、培養(yǎng)基組成和激素種類（主要是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）等，B正確；
C、使用液體培養(yǎng)基并振蕩有利于細(xì)胞獲取氧氣和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，故液體培養(yǎng)基可用于擴(kuò)大培養(yǎng)，C正確；
D、圖示方法的優(yōu)點(diǎn)包括不占用耕地、幾乎不受季節(jié)、天氣等限制，D正確。
故選：A。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，學(xué)生要識(shí)記植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用，掌握細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。
8．科學(xué)家以SARS病毒的核衣殼蛋白為抗原，制備出了單克隆抗體。下列相關(guān)敘述，正確的是（ ）
A．利用該單克隆抗體可以診斷是否感染SARS病毒
B．體外培養(yǎng)單個(gè)B淋巴細(xì)胞可以獲得針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體
C．將等量B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞
D．將純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，從小鼠血清中分離的抗體為單克隆抗體
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【專題】正推法；克隆技術(shù)．
【答案】A
【分析】1、效應(yīng)B細(xì)胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的能力，因此利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體。
2、該雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，并且單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備等特點(diǎn)。
【解答】解：A、單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，因此利用該單克隆抗體與SARS病毒核衣殼蛋白特異性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者，A正確；
B、單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞有產(chǎn)生抗體的能力，但沒有無限增殖的本領(lǐng)，因此在體外培養(yǎng)單個(gè)效應(yīng)B細(xì)胞不可能獲得大量針對(duì)SARS病毒的單克隆抗體，B錯(cuò)誤；
C、將等量B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細(xì)胞不都是雜交瘤細(xì)胞，還有B細(xì)胞自身融合的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞等，C錯(cuò)誤；
D、用純化的核衣殼蛋白反復(fù)注射到小鼠體內(nèi)，使其產(chǎn)生免疫反應(yīng)，以獲得相應(yīng)的B細(xì)胞，D錯(cuò)誤。
故選：A。
【點(diǎn)評(píng)】本題難度不大，屬于考綱中識(shí)記、理解層次的要求，考查了單克隆抗體制備的有關(guān)知識(shí)，該內(nèi)容是動(dòng)物細(xì)胞工程中的重點(diǎn)內(nèi)容，考生要能夠識(shí)記制備過程以及制備過程中的相關(guān)注意點(diǎn)。
9．細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，并取得了顯著的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．利用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)培育出的脫毒馬鈴薯往往比未脫毒馬鈴薯產(chǎn)量高
B．利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以獲得白菜—甘藍(lán)雜種植株，打破了生殖隔離
C．使用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎的過程屬于有性生殖
D．將病人自身體細(xì)胞誘導(dǎo)形成的iPS細(xì)胞移植回病人體內(nèi)，理論上可避免免疫排斥
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用；干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用；胚胎分割技術(shù)．
【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】C
【分析】植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用：微型繁殖、作物脫毒（選材應(yīng)該選擇莖尖組織）、制造人工種子、單倍體育種（最大的優(yōu)點(diǎn)是明顯縮短育種年限，得到的全為純種）、篩選突變體、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【解答】解：A、莖尖組織中不帶毒或沒有病毒，因而利用莖尖作為外植體進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可獲得脫毒培育的馬鈴薯幼苗，因此利用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)培育出的脫毒馬鈴薯往往比未脫毒馬鈴薯產(chǎn)量高，A正確；
B、利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得白菜﹣甘藍(lán)雜種植株，打破了生殖隔離，克服了生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，B正確；
C、使用胚胎分割技術(shù)獲得同卵雙胎或多胎的過程屬于無性生殖，C錯(cuò)誤；
D、iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)，D正確。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查植物的組織培養(yǎng)、胚胎分割等相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于識(shí)記和理解層次的考查。
10．植物細(xì)胞壁中存在大量不能被動(dòng)物消化的多聚糖類物質(zhì)，研究人員通過生物工程技術(shù)培育出含多聚糖水解酶基因豬，主要流程如圖，①～⑤表示操作過程。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）
A．在基因表達(dá)載體中構(gòu)建誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，可以利用誘導(dǎo)物激活多聚糖水解酶基因表達(dá)
B．從卵巢中采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)到MⅡ期后用顯微操作技術(shù)去除核膜包裹的細(xì)胞核
C．用蛋白酶合成抑制劑激活③過程形成的重構(gòu)胚使其完成分裂和發(fā)育進(jìn)程
D．④過程的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境下空間位置的轉(zhuǎn)移
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植．
【專題】正推法；胚胎工程．
【答案】B
【分析】分析題圖：①為目的基因?qū)爰?xì)胞，②為核移植，③為早期胚胎的發(fā)育，④為胚胎移植，⑤為產(chǎn)生子代轉(zhuǎn)基因豬。
【解答】解：A、啟動(dòng)子（RNA聚合酶與之結(jié)合啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的片段）具有特異性，在基因表達(dá)載體中構(gòu)建誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，可以利用誘導(dǎo)物激活多聚糖水解酶基因表達(dá)，A正確；
B、常用顯微操作法去除卵母細(xì)胞紡錘體—染色體復(fù)合物，而非去除核膜包裹的細(xì)胞核，B錯(cuò)誤；
C、用蛋白酶合成抑制劑（電刺激、Ca2+載體等）激活③過程形成的重構(gòu)胚使其完成分裂和發(fā)育進(jìn)程，C正確；
D、④為胚胎移植，④過程的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境下空間位置的轉(zhuǎn)移，D正確。
故選：B。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力、運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。
11．我國(guó)科學(xué)家成功構(gòu)建了具有高比例胚胎干細(xì)胞的活產(chǎn)嵌合體猴。如圖所示，研究人員將4CL體系下培育的、可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，最終得到嵌合體猴。下列敘述正確的是（ ）
A．為防止細(xì)菌污染，培養(yǎng)4CL干細(xì)胞時(shí)可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素
B．4CL干細(xì)胞注入桑葚胚后會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生融合進(jìn)而形成嵌合體
C．對(duì)嵌合囊胚或原腸胚進(jìn)行胚胎分割后移植，可以產(chǎn)生更多的嵌合體猴
D．嵌合體猴部分細(xì)胞可發(fā)出綠色熒光，其遺傳信息不一定能遺傳給后代
【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用；胚胎分割技術(shù)．
【專題】模式圖；胚胎工程．
【答案】D
【分析】胚胎干細(xì)胞來源于早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞，是高度未分化的細(xì)胞。如果進(jìn)行體外培養(yǎng)，能夠無限的增殖和分化。胚胎肝細(xì)胞還可以分化成多功能的細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有多能性，可以分化成多種組織的能力但是無法獨(dú)自發(fā)育成一個(gè)個(gè)體細(xì)胞。胚胎里的干細(xì)胞被稱為一種“全能”細(xì)胞，可以分化成所有類型的細(xì)胞，并且攜帶生物體的全套遺傳信息。
【解答】解：A、為防止細(xì)菌污染，培養(yǎng)4CL干細(xì)胞時(shí)可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素，A錯(cuò)誤；
B、4CL干細(xì)胞不會(huì)與其他胚胎細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；
C、對(duì)嵌合囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞進(jìn)行胚胎分割后移植，可以產(chǎn)生更多的嵌合體猴，C錯(cuò)誤；
D、嵌合體猴中，由4CL干細(xì)胞增殖分化形成的組織可發(fā)出綠色熒光，如果存在于體細(xì)胞，其遺傳信息不能遺傳給后代，D正確。
故選：D。
【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的理解和掌握。
12．、研究不同激素對(duì)獼猴桃組織培養(yǎng)過程的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下，相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）
注：“+”越多，生長(zhǎng)狀況越好
A．愈傷組織是已分化植物細(xì)胞發(fā)生脫分化的結(jié)果
B．第1組能誘導(dǎo)愈傷組織形成是內(nèi)源激素的作用
C．誘導(dǎo)猻猴桃組織脫分化應(yīng)選擇第5組處理方案
D．玉米素濃度超過1ppm會(huì)抑制愈傷組織再分化
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】坐標(biāo)曲線圖；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】D
【分析】表格分析：第5組愈傷組織誘導(dǎo)率和愈傷組織生長(zhǎng)狀況最好。
曲線分析：隨著玉米素濃度升高分化成植株的比例先升高后降低。
【解答】解：A、愈傷組織是離體已經(jīng)分化的植物細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成的，A正確；
B、由表格可知，第1組沒有用相應(yīng)的激素處理，但可以形成愈傷組織，其原因是植物細(xì)胞中存在內(nèi)源激素，B正確；
C、據(jù)表格分析，在上述5組實(shí)驗(yàn)中，第5組愈傷組織誘導(dǎo)率和愈傷組織生長(zhǎng)狀況最好，因此誘導(dǎo)猻猴桃組織脫分化可選擇第5組處理方案，C正確；
D、由曲線可知，玉米素濃度超過1ppm，促進(jìn)愈傷組織分化成植株的能力減弱，D錯(cuò)誤。
故選：D。
【點(diǎn)評(píng)】本題以植物激素的相關(guān)對(duì)照實(shí)驗(yàn)為背景材料，考查植物激素的作用，要求學(xué)生能夠掌握實(shí)驗(yàn)分析方法和植物激素的基礎(chǔ)知識(shí)并運(yùn)用。
13．為培育繁殖周期快、高產(chǎn)人參皂苷的雜種植物，研究人員將人參和胡蘿卜的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，并檢測(cè)了原生質(zhì)體密度對(duì)融合率的影響，結(jié)果如表。
下列相關(guān)敘述不正確的是（ ）
A．利用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理獲得原生質(zhì)體
B．原生質(zhì)體密度過高或過低均不利于原生質(zhì)體的融合
C．融合后的原生質(zhì)體經(jīng)過脫分化即可發(fā)育成雜種植株
D．對(duì)雜種植株需進(jìn)行生長(zhǎng)速度和人參皂苷含量的檢測(cè)
【考點(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用．
【專題】數(shù)據(jù)表格；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】C
【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：
（1）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。
（2）去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的方法：酶解法（纖維素酶和果膠酶處理）。
（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：
物理法：電融合法、離心法；
化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+_ 高pH融合法。
（4）植物體細(xì)胞雜交的原理：原生質(zhì)體融合的過程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。
（5）植物體細(xì)胞雜交的意義：打破生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種。
【解答】解：A、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性原理，利用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理獲得原生質(zhì)體，A正確；
B、根據(jù)表格中數(shù)據(jù)可知，原生質(zhì)體密度過高或過低均不利于原生質(zhì)體的融合，B正確；
C、融合后的原生質(zhì)體經(jīng)過脫分化和再分化過程才可發(fā)育成雜種植株，C錯(cuò)誤；
D、該研究的目的是培育繁殖周期快、高產(chǎn)人參皂苷的雜種植物，因此對(duì)雜種植株需進(jìn)行生長(zhǎng)速度和人參皂苷含量的檢測(cè)，D正確。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題結(jié)合表格數(shù)據(jù)，考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的具體過程，能正確分析表格并從中提取有效信息準(zhǔn)確答題。
14．由于受到逆境脅迫影響，大豆的品質(zhì)和產(chǎn)量往往難以滿足人們的需求?？蒲腥藛T以大豆子葉節(jié)的腋生分生組織為受體材料，用攜帶抗細(xì)菌基因載體的農(nóng)桿菌侵染受體材料，獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽，然后進(jìn)一步培養(yǎng)為轉(zhuǎn)基因抗菌株系。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．與葉肉細(xì)胞相比，用大豆子葉節(jié)的腋生分生組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)更容易成功
B．農(nóng)桿菌侵染受體材料時(shí)會(huì)將帶有抗菌基因的T﹣DNA插入到受體材料的基因組中
C．需要用能殺死對(duì)應(yīng)細(xì)菌的抗生素進(jìn)行篩選來獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽
D．獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽需要注意培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度及比例
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】C
【分析】1、農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒有感染力；Ti質(zhì)粒的T﹣DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上。
2、轉(zhuǎn)化：目的基因插入Ti質(zhì)粒的T﹣DNA上，農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→目的基因整合到植物細(xì)胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。
【解答】解：A、分生組織細(xì)胞的全能性較高，因此，與葉肉細(xì)胞相比，用大豆子葉節(jié)的腋生分生組織進(jìn)行植物組織培養(yǎng)更容易成功，A正確；
B、農(nóng)桿菌侵染受體材料時(shí)會(huì)將帶有抗菌基因的T﹣DNA插入到受體材料的基因組中，B正確；
C、需要接種相應(yīng)細(xì)菌進(jìn)行篩選來獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽，C錯(cuò)誤；
D、獲得獨(dú)立的抗菌叢生芽需要注意培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度及比例，D正確。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程與植物組織培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。
15．某科學(xué)小組探索長(zhǎng)壽花組織培養(yǎng)過程中外植體的消毒條件，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表。下列分析不正確的是（ ）
注：褐化是指培養(yǎng)材料在組培過程中向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，并變褐死亡的現(xiàn)象。
A．消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)，組織培養(yǎng)成功率越高
B．消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)，外植體的污染率越低
C．誘導(dǎo)培養(yǎng)外植體脫分化為愈傷組織的過程中一般不需要光照
D．組織培養(yǎng)過程中提高生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例有助于生根
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)．
【專題】數(shù)據(jù)表格；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】A
【分析】表格分析：本實(shí)驗(yàn)的自變量為次氯酸鈉處理時(shí)間和酒精處理時(shí)間，因變量為污染率和褐化率。
【解答】解：A、由表格信息可知，消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)褐化率越高，死亡率越高，組織培養(yǎng)成功率越低，A錯(cuò)誤；
B、表中數(shù)據(jù)顯示消毒處理時(shí)間越長(zhǎng)污染率越低，B正確；
C、導(dǎo)愈傷組織形成過程中一般不需要光照，因?yàn)楣饪梢哉T導(dǎo)產(chǎn)生微管組織，不利于愈傷組織形成，C正確；
D、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值大時(shí)有利于根的形成，因此提高生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例有助于生根，D正確。
故選：A。
【點(diǎn)評(píng)】本題以表格的形式，考查了植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生理解植物組織培養(yǎng)的過程包括脫分化和再分化，以及各過程的培養(yǎng)條件。
16．源于非洲綠猴腎細(xì)胞的Ver細(xì)胞系是一種連續(xù)細(xì)胞系。Ver細(xì)胞不表達(dá)干擾素，但干擾素受體功能正常。因此，Ver細(xì)胞對(duì)很多病毒敏感，是生產(chǎn)病毒疫苗的理想材料。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．Ver細(xì)胞的培養(yǎng)需要使用CO2培養(yǎng)箱
B．Ver細(xì)胞可多次分裂，具有不死性
C．Ver細(xì)胞用于培養(yǎng)病毒時(shí)，培養(yǎng)液中應(yīng)添加適量干擾素
D．Ver細(xì)胞可用于測(cè)定藥物對(duì)病毒復(fù)制速度的影響
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程．
【專題】正推法；克隆技術(shù)．
【答案】C
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。
（3）溫度和pH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。
【解答】解：A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程中需要控制培養(yǎng)箱中的氣體條件為95%空氣+5%CO2，其中CO2起到維持培養(yǎng)液的pH的作用，A正確；
B、Ver細(xì)胞系是一種連續(xù)細(xì)胞系，可多次分裂，具有不死性，B正確；
C、向Ver細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染，而干擾素抗病毒，C錯(cuò)誤；
D、病毒必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)，因此Ver細(xì)胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”，可用于測(cè)定藥物對(duì)病毒復(fù)制速度的影響，D正確。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記和理解能力，難度不大。
17．金菊花是多年生草本植物，是經(jīng)長(zhǎng)期人工選擇培育出的名貴觀賞花卉。如圖表示某生物興趣小組利用金菊花未開花的幼嫩枝條進(jìn)行組織培養(yǎng)的過程。下列敘述正確的是（ ）
A．過程①是獲取離體的未開花的幼嫩枝條，用適宜濃度的酒精和次氯酸鈉的混合液消毒
B．過程②是經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，期間一般不需要光照
C．過程③表示再分化，需要先誘導(dǎo)生根，再誘導(dǎo)生芽
D．過程④是培育形成的試管苗直接移栽入土進(jìn)一步培養(yǎng)成金菊花植物體
【考點(diǎn)】菊花的組織培養(yǎng)．
【專題】正推法；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】B
【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程：（1）用酒精擦拭雙手和超凈工作臺(tái)臺(tái)面。將流水充分沖洗后的外植體（幼嫩的莖段）用酒精消毒30s，然后立即用無菌水清洗2?3次；再用次氯酸鈉溶液處理30min后，立即用無菌水清洗2?3次。（2）將消過毒的外植體置于無菌的培養(yǎng)皿中，用無菌濾紙吸去表面的水分。用解剖刀將外植體切成0.5?1cm長(zhǎng)的小段。（3）在酒精燈火焰旁，將外植體的? 插入誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基中。用封口膜或瓶蓋封蓋瓶口，并在培養(yǎng)瓶上做好標(biāo)記。（4）將接種了外植體 的錐形瓶或植物組織培養(yǎng) 瓶置于18?22℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，定期觀察和記錄愈傷組織的生長(zhǎng)情況。（5）培養(yǎng)15?20d后，將生長(zhǎng)良好的愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上。長(zhǎng)出芽后，再將其轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基上，進(jìn)一步誘導(dǎo)形成試管苗。（6）移栽前先打開封口膜或瓶蓋，讓試管苗在培養(yǎng)箱內(nèi)生長(zhǎng)幾日。用流水清洗掉根部的培養(yǎng)基后，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土。每天觀察并記錄幼苗的生長(zhǎng)情況，適時(shí)澆水、施肥，直至開花。
2、植物組織培養(yǎng)過程注意事項(xiàng)：（1）實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和所有的器械都要滅菌。（2）接種操作必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行，并且每次使用后的器械都要滅菌。（3）接種時(shí)注意外植體的方向，不要倒插。 （4）誘導(dǎo)愈傷組織期間一般不需要光照，在后續(xù)的培養(yǎng)過程中，每日需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照。
【解答】解：A、過程①是獲取離體的未開花的幼嫩枝條，先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，無菌水沖洗2～3次后，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液處理，再用無菌水清洗2～3次，A錯(cuò)誤；
B、過程②是經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，期間一般不需要光照，B正確；
C、過程③表示再分化，一般先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根，C錯(cuò)誤；
D、培育形成的試管苗要移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土，D錯(cuò)誤。
故選：B。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，具備運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力是解答本題的關(guān)鍵。
18．雌性胚胎發(fā)育到一定階段時(shí)，其細(xì)胞中兩條X染色體中的隨機(jī)一條失活，失活的那個(gè)成為沉默的巴氏小體，巴氏小體上的基因不表達(dá)，未失活的染色體上的基因可以表達(dá)。人體G﹣6PD蛋白有F和S兩種類型，分別由一對(duì)等位基因XF和XS編碼。將某女性皮膚組織用酶分散成單個(gè)細(xì)胞后先進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，再用單克隆抗體對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞的F和S兩種蛋白進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖所示。下列說法正確的是（ ）
A．分散皮膚組織用的酶可以是胰蛋白酶或胃蛋白酶
B．細(xì)胞培養(yǎng)用的無菌空氣要添加5%的CO2以提供碳源
C．該女性基因型為XFXS，3、6、7號(hào)細(xì)胞中XS基因不能表達(dá)
D．用來檢測(cè)F和S兩種蛋白的單克隆抗體是由一種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程；單克隆抗體及其應(yīng)用．
【專題】信息轉(zhuǎn)化法；克隆技術(shù)．
【答案】C
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
【解答】解：A、分散皮膚組織用的酶可以是胰蛋白酶，不能用胃蛋白酶，A錯(cuò)誤；
B、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，CO2培養(yǎng)箱中加入5%的CO2的主要目的是維持培養(yǎng)液的pH，B錯(cuò)誤；
C、女性體細(xì)胞中的兩個(gè)X染色體，會(huì)有一個(gè)隨機(jī)失活。單克隆培養(yǎng)的細(xì)胞都來自于原代培養(yǎng)的細(xì)胞，其基因型都為XFXS，只不過在細(xì)胞1、2、4、5、8、9中含XS基因的染色體具有活性，可以表達(dá)出S型G﹣6PD；而細(xì)胞3、6、7中XS基因不能表達(dá)，而含XF基因的染色體具有活性，可以表達(dá)出F型G﹣6PD，C正確；
D、由題干可知，原代培養(yǎng)細(xì)胞是基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理得到的，但是這些細(xì)胞中的兩個(gè)X染色體，會(huì)有一個(gè)隨機(jī)失活，即只能表達(dá)出一種G﹣6PD，只有檢測(cè)多個(gè)原代培養(yǎng)的細(xì)胞時(shí)，才可以檢測(cè)出兩個(gè)條帶（兩種G﹣6PD），因此用來檢測(cè)F和S兩種蛋白的單克隆抗體是由兩種雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的，D錯(cuò)誤。
故選：C。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和單克隆抗體制備的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記和理解能力，難度不大。
19．轉(zhuǎn)錄因子Gh1和GhE1能調(diào)控棉花愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育，參與體細(xì)胞胚胎發(fā)生過程中細(xì)胞命運(yùn)的重塑，其機(jī)制如圖所示。下列相關(guān)分析正確的是（ ）
A．將愈傷組織細(xì)胞在脫分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)可得到幼苗
B．Gh1基因發(fā)生甲基化可能會(huì)抑制愈傷組織細(xì)胞的增殖
C．促進(jìn)GhE1基因的表達(dá)可促進(jìn)愈傷組織分化成根等器官
D．Gh1與GhE1單獨(dú)作用均能調(diào)控GhPs基因的表達(dá)
【考點(diǎn)】植物的組織培養(yǎng)；表觀遺傳．
【專題】模式圖；遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】B
【分析】細(xì)胞的全能性是指細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性。高度分化的植物細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的能力。
【解答】解：A、將愈傷組織細(xì)胞在脫分化培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)只能得到更多的細(xì)胞，不能得到幼苗，A錯(cuò)誤；
B、由圖示可知，Gh1基因發(fā)生甲基化抑制Gh1表達(dá)Gh1蛋白，不能與的表達(dá)產(chǎn)物形成復(fù)合物調(diào)控GhPs基因表達(dá)，從而抑制愈傷組織細(xì)胞的增殖，B正確；
C、由圖示可知，GhE1基因表達(dá)GhE1蛋白，與Gh1基因的表達(dá)產(chǎn)物Gh1蛋白形成復(fù)合物調(diào)控GhPs基因表達(dá)，從而抑制愈傷組織分化成根等器官，C錯(cuò)誤；
D、由圖示可知，Gh1與GhE1共同作用才能調(diào)控GhPs基因的表達(dá)，D錯(cuò)誤。
故選：B。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查植物組織培養(yǎng)和表觀遺傳的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記能力和判斷能力，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)綜合分析問題的能力。
20．懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這些現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)貼壁生長(zhǎng)，但不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B．灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行
C．灌流速率越高，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用越充分
D．培養(yǎng)管通常放置在95%的O2和5%的CO2的環(huán)境中
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程．
【專題】正推法；克隆技術(shù)．
【答案】B
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：（1）概念：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。（2）原理：細(xì)胞增殖。（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
【解答】解：A、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞不出現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；
B、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而分裂受阻，而灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行，B正確；
C、過高的灌流速率，都會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)的細(xì)胞沒有及時(shí)利用營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，C錯(cuò)誤；
D、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。
故選：B。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程，掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。
二．解答題（共5小題）
21．妊娠與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的功能密切相關(guān)。某研究小組通過如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程獲得了子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞，以期用于妊娠相關(guān)疾病的研究?；卮鹣铝袉栴}：
（1）手術(shù)獲得的皮膚組織需在適宜的低溫條件下運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，適宜低溫對(duì)細(xì)胞中各種蛋白質(zhì)的作用為 抑制酶的活性（降低蛋白質(zhì)或酶的活性），防止蛋白質(zhì)變性（維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，抑制蛋白質(zhì)變性） 。
（2）過程①中，誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞時(shí)，需要讓4個(gè)外源基因在成纖維細(xì)胞中大量表達(dá)，通?？刹捎? 轉(zhuǎn)基因（顯微注射，病毒介導(dǎo)，基因工程） 技術(shù)將這些基因?qū)朐摷?xì)胞。這4個(gè)基因的主要作用為：M基因促進(jìn)增殖，S基因和C基因控制干細(xì)胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纖維細(xì)胞形成腫瘤細(xì)胞，最有可能的原因是 M 基因過量表達(dá)。
（3）培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí)，應(yīng)對(duì)所處環(huán)境定期消毒以降低細(xì)胞被污染的風(fēng)險(xiǎn)。下列各項(xiàng)中可用紫外線進(jìn)行消毒的是 CD （多選）。
A．培養(yǎng)基
B．培養(yǎng)瓶
C．細(xì)胞培養(yǎng)室
D．CO2培養(yǎng)箱
（4）過程②中，iPS細(xì)胞經(jīng)歷的生命歷程為 增殖、分化 。PCR技術(shù)可用于檢測(cè)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞關(guān)鍵基因的mRNA水平，mRNA需經(jīng)過 逆轉(zhuǎn)錄 才能作為PCR擴(kuò)增的模板。
【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程．
【專題】模式圖；克隆技術(shù)．
【答案】（1）抑制酶的活性（降低蛋白質(zhì)或酶的活性），防止蛋白質(zhì)變性（維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，抑制蛋白質(zhì)變性）
（2）轉(zhuǎn)基因（顯微注射，病毒介導(dǎo)，基因工程） M
（3）CD
（4）增殖、分化 逆轉(zhuǎn)錄
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。
（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。
（3）溫度和pH。
（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH。）
【解答】解：（1）酶活性的保持需要適宜的溫度，低溫可以抑制酶的活性，防止蛋白質(zhì)變性，使細(xì)胞中的蛋白質(zhì)維持正常的生理功能，故手術(shù)獲得的皮膚組織需在低溫下運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室。
（2）將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，通常需要轉(zhuǎn)基因技術(shù)，其中將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用方法是顯微注射法；分析題意可知，M基因促進(jìn)增殖，S基因和C基因控制干細(xì)胞特性，K基因抑制凋亡和衰老，腫瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞）具有無限增殖的能力，因此若成纖維細(xì)胞形成腫瘤細(xì)胞，最有可能的原因是M基因過量表達(dá)造成的。
（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是無菌操作，培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí)，應(yīng)對(duì)所處環(huán)境定期消毒以降低細(xì)胞被污染風(fēng)險(xiǎn)，可用紫外線對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)室和CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒處理，而對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)瓶需要進(jìn)行滅菌處理。
故選：CD。
（4）過程②中，iPS細(xì)胞經(jīng)歷的生命歷程為增殖（使細(xì)胞數(shù)目增多）、分化（使細(xì)胞種類增多）；PCR擴(kuò)增的模板為DNA，因此若想利用PCR技術(shù)檢測(cè)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞關(guān)鍵基因的mRNA水平，mRNA需經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程形成DNA，才可作為PCR的模板。
故答案為：
（1）抑制酶的活性（降低蛋白質(zhì)或酶的活性），防止蛋白質(zhì)變性（維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，抑制蛋白質(zhì)變性）
（2）轉(zhuǎn)基因（顯微注射，病毒介導(dǎo)，基因工程） M
（3）CD
（4）增殖、分化 逆轉(zhuǎn)錄
【點(diǎn)評(píng)】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和PCR技術(shù)等知識(shí)，要求考生識(shí)記相關(guān)操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
22．米酵菌酸（BA）是由椰毒假單胞菌產(chǎn)生的一種可以引起食物中毒的毒素。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，自2014年以來，我國(guó)由BA引起的食物中毒事件高達(dá)幾十余起，死亡率高達(dá)50%以上。為了應(yīng)對(duì)中毒后的快速治療處理，科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)：
①細(xì)胞融合及篩選
按小鼠脾臟細(xì)胞：骨髓瘤細(xì)胞＝10：1的比例混合后緩慢滴加1mLPEG（邊加邊輕輕攪拌），靜置1min，離心后棄去上清液，用HAT培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，選出雜交瘤細(xì)胞，后用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)后利用BA進(jìn)行檢測(cè)。
②抗BA單克隆抗體腹水的制備
選取10只6周齡小鼠，腹腔注射1×103個(gè)雜交瘤細(xì)胞，2周后收集小鼠腹水。
③抗BA單克隆抗體特異性檢測(cè)
選取BA及8種BA結(jié)構(gòu)類似物（毒黃素、T﹣2毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、嘔吐毒素、河豚毒素、黃曲霉毒素B1、玉米赤霉酮）進(jìn)行特異性檢測(cè)，結(jié)果如下（IC50為半數(shù)抑制濃度）。
回答下列問題：
（1）實(shí)驗(yàn)所用小鼠應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前利用 BA（米酵菌酸） 進(jìn)行免疫。已免疫小鼠脾臟剪碎后，用 胰蛋白 酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞。
（2）實(shí)驗(yàn)中滴加PEG時(shí)邊加邊輕輕攪拌的目的是 促進(jìn)PEG與小鼠脾臟細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞混合，提高誘導(dǎo)融合效率 。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法除實(shí)驗(yàn)中所用方法外，還可以采用 電融合 法和 滅活病毒誘導(dǎo) 法。
（3）用HAT培養(yǎng)基能選擇培養(yǎng)出雜交瘤細(xì)胞的原因是 在該培養(yǎng)基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞能生長(zhǎng) 。用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)需先將細(xì)胞懸浮液稀釋到7～10個(gè)細(xì)胞/mL，再在每個(gè)培養(yǎng)孔中滴加0.1mL稀釋后的細(xì)胞懸浮液，其目的是 使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的 。
（4）表格數(shù)據(jù)表明抗BA單克隆抗體與這8種毒素 沒有 （填“有”或“沒有”）交叉反應(yīng)，說明 抗BA單克隆抗體的特異性良好 。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【專題】實(shí)驗(yàn)性簡(jiǎn)答題；克隆技術(shù)．
【答案】（1）BA（米酵菌酸） 胰蛋白
（2）促進(jìn)PEG與小鼠脾臟細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞混合，提高誘導(dǎo)融合效率 電融合 滅活病毒誘導(dǎo)
（3）在該培養(yǎng)基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞能生長(zhǎng) 使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的
（4）沒有 抗BA單克隆抗體的特異性良好
【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）為制備抗BA單克隆抗體，實(shí)驗(yàn)所用小鼠應(yīng)在實(shí)驗(yàn)前利用BA（米酵菌酸）進(jìn)行免疫，以獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。已免疫小鼠脾臟剪碎后，用胰蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞，加入培養(yǎng)液制成單細(xì)胞懸液。
（2）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇PEG）和生物法（滅活的病毒），實(shí)驗(yàn)中按小鼠脾臟細(xì)胞：骨髓瘤細(xì)胞＝10：1的比例混合后緩慢滴加1mLPEG，邊加邊輕輕攪拌，能夠促進(jìn)PEG與小鼠脾臟細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞混合，提高誘導(dǎo)融合效率，因此除PEG外，還可以采用電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等。
（3）在HAT培養(yǎng)基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞能生長(zhǎng)，因此用HAT培養(yǎng)基能選擇培養(yǎng)出雜交瘤細(xì)胞。用多孔培養(yǎng)板培養(yǎng)時(shí)，需要稀釋，其目的是使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。
（4）選取BA及8種BA結(jié)構(gòu)類似物進(jìn)行特異性檢測(cè)，由表格數(shù)據(jù)可知，抗BA單克隆抗體與這8種毒素沒有交叉反應(yīng)，說明抗BA單克隆抗體的特異性良好。
故答案為：
（1）BA（米酵菌酸） 胰蛋白
（2）促進(jìn)PEG與小鼠脾臟細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞混合，提高誘導(dǎo)融合效率 電融合 滅活病毒誘導(dǎo)
（3）在該培養(yǎng)基上，未融合的細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞能生長(zhǎng) 使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的
（4）沒有 抗BA單克隆抗體的特異性良好
【點(diǎn)評(píng)】本題考查單克隆抗體的制備與應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)，要求考生理解識(shí)記有關(guān)技術(shù)的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能將教材中的知識(shí)結(jié)合題中信息進(jìn)行遷移應(yīng)用。
23．小鼠是科學(xué)研究中不可或缺的動(dòng)物模型，具有容易飼養(yǎng)、世代周期短、繁殖率高、組織器官結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能與人類接近等特點(diǎn)。下面是關(guān)于小鼠的一系列科學(xué)研究工作，回答問題：
（1）在器官再生方面，小鼠胚胎干細(xì)胞具有顯著的能力。體外培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞一般需要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是 及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害 。
（2）為保留小鼠A的優(yōu)良性狀，可進(jìn)行體細(xì)胞核移植。以小鼠A的體細(xì)胞和小鼠B卵母細(xì)胞為材料進(jìn)行操作，以獲得重構(gòu)胚，主要操作步驟是 將小鼠B卵母細(xì)胞培育到MⅡ中期，通過顯微操作去核，將小鼠A體細(xì)胞注入去核的小鼠B卵母細(xì)胞，通過電刺激方法使兩細(xì)胞融合，小鼠A體細(xì)胞核進(jìn)入小鼠B卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚 。進(jìn)行小鼠胚胎工程操作時(shí)，要在光控周期下飼養(yǎng)成年雌鼠，并注射 促性腺激素 ，促進(jìn)排卵。從雄鼠采集的精子需進(jìn)行 獲能 處理。體外受精后，在適宜條件下培養(yǎng)受精卵，用于胚胎移植。進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是 充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力 。
（3）若將外源基因?qū)胄∈笫芫?，則外源基因可能隨機(jī)插入到小鼠受精卵DNA中，這種受精卵有的可發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請(qǐng)分析外源基因插入導(dǎo)致受精卵死亡的最可能原因是 外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能表達(dá) 。
（4）在藥物研究過程中，研究者發(fā)現(xiàn)因小鼠與人類親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，很多在小鼠體內(nèi)有效的候選藥物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。通過以上分析，在藥物研究的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物方面研究的方向是 培育大批具有相同遺傳背景的與人類親緣關(guān)系較近動(dòng)物（如克隆猴） 。
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植．
【專題】信息轉(zhuǎn)化法；胚胎工程．
【答案】（1）及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
（2）將小鼠B卵母細(xì)胞培育到MⅡ期，通過顯微操作去核，將小鼠A體細(xì)胞注入去核的小鼠B卵母細(xì)胞，通過電刺激方法使兩細(xì)胞融合，小鼠A體細(xì)胞核進(jìn)入小鼠B卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚；促性腺激素；獲能；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力
（3）外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能表達(dá)
（4）可培育大批具有相同遺傳背景的與人類親緣關(guān)系較近動(dòng)物（如克隆猴）
【分析】1、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚胚或囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。
2、胚胎移植的生理基礎(chǔ)
（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；
（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；
（3）子宮不對(duì)外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。
（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。
【解答】解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，為及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，需要定期更換培養(yǎng)液。
（2）為保留小鼠A的優(yōu)良性狀，以小鼠A的體細(xì)胞和小鼠B卵母細(xì)胞為材料進(jìn)行操作，具體的步驟：將小鼠B卵母細(xì)胞培育到MⅡ期，通過顯微操作去核，將小鼠A體細(xì)胞注入去核的小鼠B卵母細(xì)胞，通過電刺激方法使兩細(xì)胞融合，小鼠A體細(xì)胞核進(jìn)入小鼠B卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚。為獲得較多的卵母細(xì)胞，可用促性腺激素對(duì)成年雌鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理。采集雄鼠的精子也需進(jìn)行獲能處理。胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。
（3）外源基因插入導(dǎo)致受精卵死亡的原因可能是外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能表達(dá)。
（4）藥物研究過程中，研究者發(fā)現(xiàn)因小鼠與人類親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，很多在小鼠體內(nèi)有效的候選藥物，用在人身上不一定有效，或有很大副作用。為解決這一問題，可培育大批具有相同遺傳背景的與人類親緣關(guān)系較近動(dòng)物（如克隆猴）。
故答案為：
（1）及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
（2）將小鼠B卵母細(xì)胞培育到MⅡ期，通過顯微操作去核，將小鼠A體細(xì)胞注入去核的小鼠B卵母細(xì)胞，通過電刺激方法使兩細(xì)胞融合，小鼠A體細(xì)胞核進(jìn)入小鼠B卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚；促性腺激素；獲能；充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力
（3）外源基因的插入使受精卵內(nèi)生命活動(dòng)必需的某些基因不能表達(dá)
（4）可培育大批具有相同遺傳背景的與人類親緣關(guān)系較近動(dòng)物（如克隆猴）
【點(diǎn)評(píng)】本題考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記識(shí)記胚胎移植的概念及基本途徑，掌握胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
24．如圖是轉(zhuǎn)乳糖酶基因試管牛和克隆牛的培育過程，回答下列問題：
（1）細(xì)胞1為 受精卵 ，是動(dòng)物基因工程中常用的受體細(xì)胞，可通過 顯微注射 法導(dǎo)入目的基因，基因工程的核心步驟是 構(gòu)建基因表達(dá)載體 。
（2）胚胎移植前需要將細(xì)胞1在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)成胚胎，培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境條件為 95%的空氣+5%的CO2 。胚胎移植前可對(duì)早期胚胎進(jìn)行胚胎分割和性別鑒定，性別鑒定一般用發(fā)育到囊胚期的細(xì)胞，對(duì)囊胚期胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。
（3）克隆牛的培育是通過 細(xì)胞核移植 技術(shù)實(shí)現(xiàn)的，屬于 無性 （填“有性”或“無性”）生殖。從進(jìn)化角度分析，試管牛相比于克隆牛的優(yōu)勢(shì)是 試管牛屬于有性生殖的產(chǎn)物，可產(chǎn)生更多的變異性，能為生物進(jìn)化提供更多的原材料 。
（4）有人提出，克隆動(dòng)物的培育技術(shù)已經(jīng)逐漸成熟，是時(shí)候?qū)⑵鋺?yīng)用于培育克隆人了，你是否贊同這種觀點(diǎn)？ 不贊同 。對(duì)于克隆，中國(guó)政府的態(tài)度是 禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆
【考點(diǎn)】體外受精和胚胎移植；胚胎分割技術(shù)；動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)．
【專題】模式圖；克隆技術(shù)；胚胎工程．
【答案】（1）受精卵；顯微注射；構(gòu)建基因表達(dá)載體
（2）95%的空氣+5%的CO2；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（3）細(xì)胞核移植；無性；試管牛屬于有性生殖的產(chǎn)物，可產(chǎn)生更多的變異性，能為生物進(jìn)化提供更多的原材料
（4）不贊同；禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆
【分析】分析題圖：圖示試管牛的培育采用了體外受體、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，屬于有性生殖；克隆牛的培育采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，屬于無性生殖。
【解答】解：（1）精子和卵細(xì)胞結(jié)合形成的細(xì)胞1為受精卵，是動(dòng)物基因工程中常用的受體細(xì)胞，將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法。構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟。
（2）將細(xì)胞1在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)成胚胎，培養(yǎng)時(shí)的氣體環(huán)境條件為95%的空氣+5%的CO2。對(duì)囊胚期胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。
（3）據(jù)圖可知，克隆牛是通過細(xì)胞核移植技術(shù)實(shí)現(xiàn)的，由于沒有經(jīng)過精卵細(xì)胞結(jié)合，因此屬于無性繁殖。試管牛是有性生殖形成的，由于減數(shù)分裂時(shí)形成的配子具有多樣性以及受精時(shí)雌雄配子隨機(jī)結(jié)合，因此有性生殖形成的子代變異性更強(qiáng)，可為生物進(jìn)化提供更多的原材料，有利于生物進(jìn)化，而克隆牛是無性繁殖的結(jié)果，只能保持親本的特性，變異性差，不能為進(jìn)化提供更多的原材料，不利于生物進(jìn)化。
（4）克隆人存在倫理道德上的爭(zhēng)議，因此不贊同克隆人；中國(guó)政府對(duì)于克隆技術(shù)的態(tài)度是禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆。
故答案為：
（1）受精卵；顯微注射；構(gòu)建基因表達(dá)載體
（2）95%的空氣+5%的CO2；內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（3）細(xì)胞核移植；無性；試管牛屬于有性生殖的產(chǎn)物，可產(chǎn)生更多的變異性，能為生物進(jìn)化提供更多的原材料
（4）不贊同；禁止生殖性克隆，但不反對(duì)治療性克隆
【點(diǎn)評(píng)】本題主要考查細(xì)胞工程及胚胎工程等相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，意在考查學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的理解和掌握。
25．如圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過程；圖2表示培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：
（1）圖1所示過程所用的生物技術(shù)有 動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 和 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) ，將特定的抗原注入小鼠，需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次以上，其目的是 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞 。
（2）將經(jīng)免疫處理后的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程中，至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過 選擇 培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過 克隆化培養(yǎng)和抗體 檢測(cè)，篩選出能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
（3）培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)基提供氣體條件CO2的作用 維持培養(yǎng)液的pH ，雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中，為避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，常采取的措施是 定期更換培養(yǎng)液 。
（4）圖2中的早期胚胎發(fā)育到 桑葚胚或囊胚 階段才可以移植，在移植之前，需要進(jìn)行質(zhì)量檢查，用某染料鑒定胚胎細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)活胚胎細(xì)胞不能被染色，其原因是 活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，染料不能進(jìn)入細(xì)胞 。為了獲得多個(gè)基因型相同的優(yōu)質(zhì)奶牛，可采用的技術(shù)手段是 胚胎分割 。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用；體外受精和胚胎移植．
【專題】圖文信息類簡(jiǎn)答題；克隆技術(shù)．
【答案】（1）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞
（2）選擇 克隆化培養(yǎng)和抗體
（3）維持培養(yǎng)液的pH 定期更換培養(yǎng)液
（4）桑葚胚或囊胚 活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，染料不能進(jìn)入細(xì)胞 胚胎分割
【分析】1、圖1所示為單克隆抗體的制備過程．小鼠的B細(xì)胞經(jīng)過免疫，再與能無限增殖的骨髓瘤細(xì)胞融合，形成的雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具備了分泌抗體和無限增殖的能力。
2、圖2將基因?qū)氪菩阅膛Ｅ咛ゼ?xì)胞，形成細(xì)胞①，該過程采用了基因工程技術(shù)，其原理是基因重組；取出細(xì)胞①的細(xì)胞核，注入去核牛卵母細(xì)胞中，形成細(xì)胞②，該過程采用了核移植技術(shù)，其原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性；要形成轉(zhuǎn)基因克隆奶牛還需要采用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)。
【解答】解：（1）圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過程，所用的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；為加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞，將特定的抗原注入小鼠時(shí)，需在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次以上。
（2）獲得能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過選擇培養(yǎng)基，篩選出雜交瘤細(xì)胞；另一次是通過抗體陽(yáng)性檢測(cè)，篩選出能分泌抗X的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
（3）提供氣體條件CO2的作用維持培養(yǎng)液的pH；為避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，常采取定期更換培養(yǎng)液的措施。
（4）早期胚胎發(fā)育到桑椹（葚）胚或囊胚階段才可以移植，在移植之前，用某染料鑒定胚胎細(xì)胞是否為活細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)活胚胎細(xì)胞不能被染色，其原因是活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，染料不能進(jìn)入細(xì)胞；為了獲得多個(gè)基因型相同的優(yōu)質(zhì)奶牛，可采用的技術(shù)手段是胚胎分割。
故答案為：
（1）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞
（2）選擇 克隆化培養(yǎng)和抗體
（3）維持培養(yǎng)液的pH 定期更換培養(yǎng)液
（4）桑葚胚或囊胚 活細(xì)胞的細(xì)胞膜具有選擇透過性，染料不能進(jìn)入細(xì)胞 胚胎分割
【點(diǎn)評(píng)】本題考查了細(xì)胞工程和胚胎工程的基本操作，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實(shí)際，綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)解決自然界和社會(huì)生活中的一些生物學(xué)問題的能力。
考點(diǎn)卡片
1．表觀遺傳
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
（1）表觀遺傳：生物體基因的堿基序列不變，但基因表達(dá)和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象。
（2）表觀遺傳發(fā)生在：普遍存在于生物體的生長(zhǎng)、發(fā)育和衰老的整個(gè)生命活動(dòng)過程中。
（3）影響表觀遺傳的因素有：DNA的甲基化、染色體組蛋白的甲基化、乙?；?。
【命題方向】
同卵雙胞胎雖然具有相同的基因組成，但行為習(xí)慣等卻有細(xì)微的差別，這種現(xiàn)象的出現(xiàn)和表觀遺傳有關(guān)，下列關(guān)于表觀遺傳的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．孟德爾遺傳定律能夠解釋表觀遺傳現(xiàn)象
B．DNA的甲基化、組蛋白甲基化或乙能化等都會(huì)影響基因的表達(dá)
C．基因部分駭基發(fā)生甲基化修飾引起的表型改變不一定會(huì)遺傳給后代
D．表觀遺傳與基因突變、基因重組和染色體變異等都屬于可遺傳變異
分析：表觀遺傳是指DNA序列不發(fā)生變化，但基因的表達(dá)卻發(fā)生了可遺傳的改變，即基因型未發(fā)生變化而表型卻發(fā)生了改變，如DNA的甲基化。
解答：A、表觀遺傳不符合孟德爾遺傳定律，故用孟德爾遺傳規(guī)律不能解釋表觀遺傳現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；
B、DNA的甲基化、組蛋白甲基化或乙?；刃揎椂紩?huì)影響基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致性狀發(fā)生改變，B正確；
C、發(fā)生在生殖細(xì)胞中的DNA甲基化修飾可能會(huì)遺傳給子代，發(fā)生在體細(xì)胞中的DNA甲基化修飾不一定遺傳給子代，C正確；
D、表觀遺傳和基因突變、基因重組、染色體變異都是可遺傳變異，D正確。
故選：A。
點(diǎn)評(píng)：本題主要考查表觀遺傳的內(nèi)容，要求考生識(shí)記相關(guān)知識(shí)，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。
【解題思路點(diǎn)撥】
DNA甲基化為DNA化學(xué)修飾的一種形式，能夠在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)。
2．植物的組織培養(yǎng)
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
（1）植物組織培養(yǎng)：
將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。
（2）植物組織培養(yǎng)的原理是：植物細(xì)胞的全能性
（3）在一定的激素和營(yíng)養(yǎng)等條件的誘導(dǎo)下，已經(jīng)分化的細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變成未分化的細(xì)胞，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊（愈傷組織）的過程。愈傷組織重新分化成芽、根等器官的過程，稱為再分化。
（4）生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成；用量比值低，有利于芽的分化，抑制根的形成；用量比值適中，促進(jìn)愈傷組織的形成。
【命題方向】
下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的說法中，錯(cuò)誤的是（ ）
A．再分化過程中，不同的細(xì)胞內(nèi)合成了部分功能不同的蛋白質(zhì)
B．脫分化與再分化過程所使用的培養(yǎng)基中激素的濃度及比例不同
C．再分化過程在實(shí)驗(yàn)室或植物組織培養(yǎng)車間進(jìn)行，需要避光處理
D．再分化過程中，核遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，但mRNA有變化
分析：離體的植物組織或細(xì)胞，在培養(yǎng)一段時(shí)間后，會(huì)通過細(xì)胞分裂形成愈傷組織。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個(gè)過程叫做再分化。再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植株體。
解答：A、再分化過程中，細(xì)胞會(huì)進(jìn)行分化，細(xì)胞內(nèi)基因選擇性表達(dá)，不同細(xì)胞內(nèi)合成了功能不同的特異性蛋白質(zhì)，A正確；
B、在植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)過程中，使用不同的植物激素能夠人為地控制細(xì)胞的脫分化和再分化，故脫分化與再分化二者使用的培養(yǎng)基主要是激素用量及比例的不同，B正確；
C、脫分化需要避光，而再分化的過程中會(huì)形成根和芽，芽的形成需要光照，有光照才能使其形成葉綠素，故再分化過程需要光照處理，C錯(cuò)誤；
D、再分化過程中，細(xì)胞會(huì)進(jìn)行分化，細(xì)胞內(nèi)基因選擇性表達(dá)，核遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，但在表達(dá)不同的細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出的信使mRNA會(huì)不同，D正確。
故選：C。
點(diǎn)評(píng)：本題考查植物組織培養(yǎng)，要求考生掌握植物組織培養(yǎng)激素，識(shí)記實(shí)驗(yàn)原理、操作步驟及注意事項(xiàng)，結(jié)合選項(xiàng)進(jìn)行作答。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握植物的組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
3．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
（1）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。
（2）去除植物細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的方法：酶解法（纖維素酶和果膠酶處理）。
（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：
物理法：電融合法、離心法；
化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+_ 高pH融合法。
（4）植物體細(xì)胞雜交的原理
原生質(zhì)體融合的過程利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，雜種細(xì)胞發(fā)育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。
（5）植物體細(xì)胞雜交的意義
打破生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種。
【命題方向】
擬矮牽牛的原生質(zhì)體在X培養(yǎng)基（A）上只能形成小細(xì)胞團(tuán)，不能形成植株，在含放線菌素﹣D的X培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)結(jié)果相同；矮牽牛的原生質(zhì)體在A上能分化成植株，但在B上不能生長(zhǎng)。在A、B上利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)均可培養(yǎng)出可育雜種矮牽牛。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A．酶解法制備原生質(zhì)體時(shí)，應(yīng)在等滲或稍微高滲溶液中進(jìn)行
B．只有雜種細(xì)胞能在B上形成植株
C．獲得的雜種矮牽牛可育，說明擬矮牽牛和矮牽牛屬于同一物種
D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性
分析：植物體細(xì)胞雜交的具體過程：
解答：A、酶解法去壁制備原生質(zhì)體應(yīng)在等滲或略高滲透壓的溶液中進(jìn)行，防止原生質(zhì)體在低滲溶液中會(huì)吸水漲破，A正確；
B、根據(jù)題干信息“擬矮牽牛的原生質(zhì)體在X培養(yǎng)基（A）上只能形成小細(xì)胞團(tuán)，不能形成植株，在含放線菌素﹣D的X培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)結(jié)果相同；矮牽牛的原生質(zhì)體在A上能分化成植株，但在B上不能生長(zhǎng)”，說明只有雜種細(xì)胞能在含放線菌素﹣D的X培養(yǎng)基上形成植株，B正確；
C、通過植物體細(xì)胞雜交獲得的雜種矮牽牛，不論擬矮牽牛和矮牽牛是否屬于同一物種，雜種矮牽牛都可育，C錯(cuò)誤；
D、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性的原理，D正確。
故選：C。
點(diǎn)評(píng)：本題考查植物體細(xì)胞雜交的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記植物體細(xì)胞雜交的具體過程及意義，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。
【解題思路點(diǎn)撥】
4．菊花的組織培養(yǎng)
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
（1）植物組織培養(yǎng)的基本過程：
（2）菊花組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，要防止雜菌污染，培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，這些微生物會(huì)和外植體爭(zhēng)奪培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并且產(chǎn)生大量對(duì)外植體有害的物質(zhì)，導(dǎo)致外植體死亡。
【命題方向】
下列關(guān)于菊花組織培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）
A．離體的菊花莖段必須經(jīng)過嚴(yán)格滅菌后才能接種到培養(yǎng)基中
B．誘導(dǎo)愈傷組織階段為了使細(xì)胞獲得能量應(yīng)給與適當(dāng)時(shí)間和降低生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值
C．誘導(dǎo)生根和生芽的培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同
D．利用菊花莖段培育形成的試管苗可直接移栽入土進(jìn)一步培養(yǎng)
分析：植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細(xì)胞等，培養(yǎng)在人工配制的 培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其形成完整植株的技術(shù)。
解答；解：A、離體的菊花莖段經(jīng)過消毒后才能接種到培養(yǎng)基中，A錯(cuò)誤；
B、誘導(dǎo)愈傷組織階段為了使細(xì)胞獲得能量應(yīng)給予適當(dāng)時(shí)間，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素比值適中，B錯(cuò)誤；
C、誘導(dǎo)生根和生芽的培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同，生長(zhǎng)素比例高有利于生根，C正確；
D、利用菊花莖段培育形成的試管苗后，要移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待其長(zhǎng)壯后再移栽入土，D錯(cuò)誤。
故選：C。
點(diǎn)評(píng)：本題主要考查的是植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解掌握，難度適中。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握菊花的組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
5．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌無毒環(huán)境：無菌﹣﹣對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。；無毒﹣﹣定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。
（2）營(yíng)養(yǎng)：
成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2：是細(xì)胞代謝所必需的 CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的
pH。
【命題方向】
下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件的敘述中，錯(cuò)誤的是（ ）
A．為保證培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，需加入一定的維生素
B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5% C02的恒溫箱中培養(yǎng)，C02的作用維持培養(yǎng)液的PH
C．培養(yǎng)液中需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等
D．細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫接近
分析：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌無毒環(huán)境：無菌﹣﹣對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。；無毒﹣﹣定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。
（2）營(yíng)養(yǎng)：
成分：所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2：是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
解答：A、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)也需要無菌、無毒的環(huán)境，需加入一定的抗生素，A錯(cuò)誤；
B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，95%空氣和5%的CO2，5%的CO2能調(diào)培養(yǎng)液pH，B正確；
C、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需加入糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)，C正確；
D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要適宜的溫度和pH，其中溫度要與動(dòng)物體溫相近，D正確。
故選：A。
點(diǎn)評(píng)：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生的識(shí)記和理解能力，難度不大。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
6．干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制能力及多向分化潛能的細(xì)胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。根據(jù)干細(xì)胞的發(fā)育潛能分為三類：全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞。
【命題方向】
下列關(guān)于干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．干細(xì)胞可存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織、器官中
B．將功能正常的造血干細(xì)胞移植到病人體內(nèi)，可用于治療白血病
C．iPS細(xì)胞可以來源于病人自身體細(xì)胞，理論上可避免免疫排斥
D．不同類型的干細(xì)胞其分化潛能沒有差別，都具有細(xì)胞全能性
分析：干細(xì)胞是一類具有自我復(fù)制能力及多向分化潛能的細(xì)胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能細(xì)胞。根據(jù)干細(xì)胞的發(fā)育潛能分為三類：全能干細(xì)胞、多能干細(xì)胞和單能干細(xì)胞。
解答：A、干細(xì)胞可存在于早期胚胎（胚胎干細(xì)胞）、臍帶血和骨髓（成體干細(xì)胞）等多種組織、器官中，A正確；
B、將功能正常的造血干細(xì)胞移植到病人體內(nèi)，可用于治療白血病，恢復(fù)病人的造血和免疫功能，B正確；
C、iPS細(xì)胞為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的簡(jiǎn)稱，是通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得類似胚胎干細(xì)胞的一類細(xì)胞，可以來源于病人自身體細(xì)胞，理論上可避免免疫排斥，C正確；
D、不同類型的干細(xì)胞其分化潛能有差別，理論上胚胎干細(xì)胞分化潛能大于成體干細(xì)胞，干細(xì)胞不一定都具有細(xì)胞全能性，D錯(cuò)誤。
故選：D。
點(diǎn)評(píng)：本題主要考查干細(xì)胞工程的內(nèi)容，要求考生識(shí)記相關(guān)知識(shí)，并結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
7．單克隆抗體及其應(yīng)用
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
1、抗體：一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體．從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差．
2、單克隆抗體的制備
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞
①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體．
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取
3、單克隆抗體的應(yīng)用
（1）作為診斷試劑，具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)．
（2）用于治療疾病和運(yùn)載藥物．
8．動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
體細(xì)胞核移植過程（以克隆高產(chǎn)奶牛為例）：
【命題方向】
如圖為核移植實(shí)驗(yàn)過程示意圖，根據(jù)圖示分析，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．胚胎和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)均需提供95%的O2和5%的CO2
B．核移植技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
C．受體動(dòng)物超數(shù)排卵后為胚胎提供了相同的生理環(huán)境
D．成年動(dòng)物細(xì)胞核移植成功率比胚胎細(xì)胞核移植成功率低
分析：1、將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。原理是動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。
2、體細(xì)胞核移植過程（以克隆高產(chǎn)奶牛為例）：
解答：A、胚胎和動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)均需提供95%的空氣（有利于細(xì)胞呼吸，進(jìn)行正常代謝活動(dòng)）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH），A錯(cuò)誤；
B、體細(xì)胞核移植需要對(duì)移植后的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，因此基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，B正確；
C、受體動(dòng)物進(jìn)行同期發(fā)情處理后為胚胎提供了相同的生理環(huán)境，C錯(cuò)誤；
D、由于分化程度不同，即胚胎細(xì)胞的分化程度低于體細(xì)胞，因此成年動(dòng)物細(xì)胞核移植成功率比胚胎細(xì)胞核移植成功率低，D正確。
故選：AC。
點(diǎn)評(píng)：本題考查細(xì)胞核移植技術(shù)，要求考生識(shí)記細(xì)胞核移植技術(shù)的概念、過程、類型及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
9．體外受精和胚胎移植
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
胚胎移植
（1）胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)．其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體”．（供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見或存量大的品種．）
地位：如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”．
（2）胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期，充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖能力．
（3）生理學(xué)基礎(chǔ)：①動(dòng)物發(fā)情排卵后，同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的．這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環(huán)境．
②早期胚胎在一定時(shí)間內(nèi)處于游離狀態(tài)．這就為胚胎的收集提供了可能．
③受體對(duì)移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．這為胚胎在受體的存活提供了可能．
④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響．
（4）基本程序主要包括：
①對(duì)供、受體的選擇和處理．選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種．并用性激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理．
②配種或人工授精．
③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存．配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）．對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段．直接向受體移植或放入﹣196℃的液氮中保存．
④對(duì)胚胎進(jìn)行移植．
⑤移植后的檢查．對(duì)受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查．
10．胚胎分割技術(shù)
【知識(shí)點(diǎn)的認(rèn)識(shí)】
（1）胚胎分割技術(shù)：采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。
（2）胚胎分割時(shí)應(yīng)選用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚。
（3）分割囊胚階段的胚胎需要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割。
（4）胚胎分割的應(yīng)用有：促進(jìn)優(yōu)良動(dòng)物品種的繁殖，胚胎移植前的性別鑒定、遺傳病篩查等。
【命題方向】
對(duì)大型農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物進(jìn)行良種繁殖時(shí)，胚胎分割技術(shù)增加了胚胎數(shù)量，對(duì)提高良種覆蓋率、加速育種進(jìn)程具有重要的意義，如圖是牛胚胎分割技術(shù)過程示意圖。

（1）用于冷凍的胚胎可以通過 （至少答出兩點(diǎn)）技術(shù)獲得。
（2）進(jìn)行胚胎分割時(shí)應(yīng)選擇 期胚胎，分割時(shí)注意將 均等分割。
（3）進(jìn)行性別鑒定應(yīng)選 細(xì)胞，理由是 。
（4）為探究冷凍胚胎分割前培養(yǎng)時(shí)間對(duì)分割后胚胎發(fā)育率的影響，每組取60枚同種冷凍胚胎，分別在解凍后培養(yǎng)0、15、30、45、60、90、120min進(jìn)行分割，將各組半胚和對(duì)照組整胚用培養(yǎng)液培養(yǎng)24h，統(tǒng)計(jì)胚胎發(fā)育率，結(jié)果見表：
表：牛冷凍胚胎分制前培養(yǎng)時(shí)間籌選結(jié)果
由表中數(shù)據(jù)可知，分割造成的損傷會(huì)降低胚胎發(fā)育率，判斷的依據(jù)是 。冷凍胚胎分割前最優(yōu)培養(yǎng)時(shí)間大約是 分鐘。
（5）分割后的胚胎需經(jīng)胚胎移植才能發(fā)育成新個(gè)體，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是 ，代孕母牛一般具有 特征。分割得到的胚胎基因組成完全一樣，但是發(fā)育所得個(gè)體的性狀不完全相同，其原因是 。
分析：胚胎分割是指用機(jī)械方法將早期胚胎分割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)，其本質(zhì)是無性繁殖。
解答：（1）用于冷凍的胚胎可以通過體外受精、核移植技術(shù)或胚胎分割技術(shù)獲得。
（2）進(jìn)行胚胎分割時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚期胚胎，分割時(shí)注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，這是因?yàn)樯］嘏吆蛢?nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性。
（3）進(jìn)行性別鑒定應(yīng)選滋養(yǎng)層細(xì)胞，因?yàn)樵摬课坏募?xì)胞將來發(fā)育成胎盤和胎膜，這樣可以避免對(duì)胚胎造成影響。
（4）由表中數(shù)據(jù)可知，各組半胚的胚胎發(fā)育率無論在解凍后培養(yǎng)多長(zhǎng)時(shí)間均低于對(duì)照組整胚的胚胎發(fā)育率，因而可得出結(jié)論：分割造成的損傷會(huì)降低胚胎發(fā)育率，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可知，冷凍胚胎分割前最優(yōu)培養(yǎng)時(shí)間大約是45分鐘左右，因?yàn)樵摃r(shí)段分割半胚的胚胎發(fā)育率最高，最接近對(duì)照組。
（5）分割后的胚胎需經(jīng)胚胎移植才能發(fā)育成新個(gè)體，且胚胎移植前對(duì)供體和受體進(jìn)行了同期發(fā)情處理，因此，胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，代孕母牛一般具有健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力。分割得到的胚胎基因組成完全一樣，但是發(fā)育所得個(gè)體的性狀不完全相同，這是因?yàn)樯锏男誀钣苫蛐蜎Q定的同時(shí)，還會(huì)受到環(huán)境的影響。
故答案為：
（1）體外受精、核移植技術(shù)或胚胎分割技術(shù)
（2）發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚 內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
（3）滋養(yǎng)層 滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎盤和胎膜，這樣可以避免對(duì)胚胎造成影響
（4）各組半胚的胚胎發(fā)育率無論在解凍后培養(yǎng)多長(zhǎng)時(shí)間均低于對(duì)照組整胚的胚胎發(fā)育率 45
（5）早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移 健康的體質(zhì)和正常的繁殖能力 生物的性狀由基因型決定的同時(shí)，還會(huì)受到環(huán)境的影響
點(diǎn)評(píng)：本題主要考查的是胚胎工程的基本技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解掌握，難度適中。
【解題思路點(diǎn)撥】
掌握胚胎分割技術(shù)的相關(guān)知識(shí)是解題的關(guān)鍵。
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組別
處理（濃度/ppm）
愈傷組織誘導(dǎo)率（%）
愈傷組織生長(zhǎng)狀況
1
﹣
29.6
++
2
細(xì)胞分裂素0.5
26.7
++
3
玉米素1
87.5
++
4
2，4﹣D0.5
85.2
+++
5
2，4﹣D0.5，細(xì)胞分裂素0.5
95.0
+++
原生質(zhì)體密度（1：1混合）
0.5×105個(gè)/mL
2×105個(gè)/mL
5×105個(gè)/mL
10×105個(gè)/mL
融合率（%）
18.6
35.8
29.2
23.6
2%次氯酸鈉處理時(shí)間（min）
8
10
12
75%酒精處理時(shí)間（min）
20
30
40
20
30
40
20
30
40
污染率（%）
25.6
21.1
13.3
22.2
16.7
12.2
20
17.8
8.9
褐化率（%）
0
0
8.9
0
5.6
14.4
7.8
16.7
16.7
交叉物
IC50/（ng/mL）
BA
10
毒黃素
＞10000
T﹣2毒素
＞10000
赭曲霉毒素
＞10000
伏馬毒素
＞10000
嘔吐毒素
＞10000
河豚毒素
＞10000
黃曲霉毒素B1
＞10000
玉米赤霉酮
＞10000
組別
處理（濃度/ppm）
愈傷組織誘導(dǎo)率（%）
愈傷組織生長(zhǎng)狀況
1
﹣
29.6
++
2
細(xì)胞分裂素0.5
26.7
++
3
玉米素1
87.5
++
4
2，4﹣D0.5
85.2
+++
5
2，4﹣D0.5，細(xì)胞分裂素0.5
95.0
+++
原生質(zhì)體密度（1：1混合）
0.5×105個(gè)/mL
2×105個(gè)/mL
5×105個(gè)/mL
10×105個(gè)/mL
融合率（%）
18.6
35.8
29.2
23.6
2%次氯酸鈉處理時(shí)間（min）
8
10
12
75%酒精處理時(shí)間（min）
20
30
40
20
30
40
20
30
40
污染率（%）
25.6
21.1
13.3
22.2
16.7
12.2
20
17.8
8.9
褐化率（%）
0
0
8.9
0
5.6
14.4
7.8
16.7
16.7
交叉物
IC50/（ng/mL）
BA
10
毒黃素
＞10000
T﹣2毒素
＞10000
赭曲霉毒素
＞10000
伏馬毒素
＞10000
嘔吐毒素
＞10000
河豚毒素
＞10000
黃曲霉毒素B1
＞10000
玉米赤霉酮
＞10000
組別
培養(yǎng)胚胎數(shù)/枚
培養(yǎng)24h囊胚數(shù)/枚
胚胎發(fā)育率/%
對(duì)照
60
57
95.00
0min
60
44
73.33
15min
60
32
53.33
30min
60
48
80.00
45min
60
61
85.00
60min
60
41
68.33
90min
60
34
56.67
120min
60
42
70，00

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