（新人教版）新高考生物一輪復(fù)習(xí)精講課件76 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（含答案）

這是一份（新人教版）新高考生物一輪復(fù)習(xí)精講課件76 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用（含答案），共42頁。PPT課件主要包含了教學(xué)過程，概念圖，課堂練習(xí)鞏固，典型習(xí)題，規(guī)律總結(jié)，微生物的培養(yǎng)及應(yīng)用，選擇培養(yǎng)與計(jì)數(shù)，營養(yǎng)物質(zhì)，生長繁殖，培養(yǎng)基的配制等內(nèi)容，歡迎下載使用。
Teaching Prcess
2.課堂教 學(xué)內(nèi)容
(1)概念：人們按照微生物對(duì)　　　　的不同需求，配制出供其________的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)用途：用以　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物
一 . 微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用
(3)類型：按物理狀態(tài)分類
合成蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)
除了上述主要營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對(duì)_________________　　　　的需求。例如，在培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中添加_____ ；在培養(yǎng)霉菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至　　；在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，一般需要將培養(yǎng)基調(diào)至　　　　　??；在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，需要提供_____的條件。
(1)目的：獲得　　　　　　。(2)關(guān)鍵：　　　　　　。(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較
(3)區(qū)別：消毒與滅菌的比較
選擇無菌技術(shù)的原則：一要考慮無菌技術(shù)的效果，滅菌的效果比消毒要好；二要考慮操作對(duì)象的承受能力，活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能用滅菌。
(4)其他操作 ①做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與_____　　　接觸。 ②為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接下來的許多操作都應(yīng)在超凈工作臺(tái)上并在　　　　　附近進(jìn)行。
　　教材隱性知識(shí)：源于選擇性必修3 P10“相關(guān)信息”：生物消毒法是指利用生物或其　　　除去環(huán)境中的部分微生物的方法。
(2)酵母菌純培養(yǎng)的操作步驟
濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)法
請思考以下問題：①平板冷凝后，要將平板倒置的原因是什么？
答案　因?yàn)槠桨謇淠?，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，平板倒置后，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。
②在接種前隨機(jī)取若干個(gè)滅菌后的未接種的平板，先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是　　　　　　　　　　　　　　。
檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格
(3)平板劃線法操作步驟
據(jù)圖思考以下問題：①第二次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端開始，這樣做的目的是什么？
答案　能使微生物的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。
②操作第一步即取菌種之前及每次劃線之前都需要進(jìn)行火焰灼燒滅菌，劃線操作結(jié)束時(shí)，仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的填寫下表：
殺死接種環(huán)上原有的微生物
殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者
③平板劃線時(shí)最后一次劃線為何不能與第一次劃線相連？
答案　最后一次劃線已經(jīng)將酵母菌稀釋成單個(gè)細(xì)胞，如果與第一次劃線相連，則增加了酵母菌數(shù)目，得不到純化的效果。
例1.請回答下列與大腸桿菌有關(guān)的問題：(1)下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。
該培養(yǎng)基屬于 (填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中的氮源是 。(2)在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行　　(填“消毒”或“滅菌”)；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和　　。
(3)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干支試管扎成一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入　　　　　　　中滅菌，溫度為121 ℃，時(shí)間為15～30 min。滅菌完畢拔掉電源，待鍋內(nèi)壓力自然降到大氣壓時(shí)，將試管取出。(4)從一支試管向另一支試管接種時(shí)應(yīng)注意，接種環(huán)要在酒精燈__________________(填“火焰的不充分燃燒層”或“火焰的充分燃燒層”)滅菌，并且待接種環(huán)　　 后蘸取菌種。
例2.(2022·山西高三適應(yīng)考試)自然界里有多種微生物，將其進(jìn)行合理的篩選、培養(yǎng)和應(yīng)用，能給醫(yī)藥和化工等生產(chǎn)領(lǐng)域帶來巨大經(jīng)濟(jì)效益。回答下列問題：(1)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，多采取 法，而對(duì)接種環(huán)或涂布器滅菌時(shí)則用 法，若要將微生物采用平板劃線法進(jìn)行分離操作，在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行了5次劃線，則需要對(duì)接種環(huán)灼燒 次。平板劃線在做第二次及其以后的劃線操作時(shí)，要從上次劃線的 開始劃線，最后一次劃的線不能與第一次劃的線 。
高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)
(2)將接種后的固體培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的固體培養(yǎng)基放入恒溫箱中____培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基中水分的揮發(fā)。其中，培養(yǎng)未接種的固體培養(yǎng)基是為了 。
作為對(duì)照組，檢驗(yàn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染
1.區(qū)分選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基
二 . 微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
常見選擇培養(yǎng)基舉例：①缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中N2的微生物。②含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰細(xì)菌，篩選出真菌。③無有機(jī)碳源的培養(yǎng)基可篩選出自養(yǎng)微生物。
(1)稀釋涂布平板法步驟 ①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。操作步驟：
2.微生物的選擇培養(yǎng)和數(shù)量測定
(1)稀釋涂布平板法步驟 ②涂布平板操作步驟
(2)微生物的數(shù)量測定方法 ①顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
②間接計(jì)數(shù)法——活菌計(jì)數(shù)法(即稀釋涂布平板法)原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。
(2)微生物的數(shù)量測定方法
根據(jù)圖示問答以下問題：Ⅰ.為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。Ⅱ.為什么用此種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低？
答案　因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。
Ⅲ.某同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234個(gè)(涂布平板時(shí)所用稀釋液的體積為0.1 mL)，那么稀釋倍數(shù)為106的試管中細(xì)菌的濃度是 個(gè)/mL，稀釋倍數(shù)為10的錐形瓶中細(xì)菌的濃度為 個(gè)/mL，所以每克樣品中的細(xì)菌數(shù)是 個(gè)。
3.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)操作
(3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià)
對(duì)照的培養(yǎng)皿中無菌落生長
對(duì)照的培養(yǎng)皿中有菌落生長
　　教材隱性知識(shí)：選擇性必修3 P19“探究·實(shí)踐”：本活動(dòng)初步篩選了能分解尿素的細(xì)菌，請進(jìn)一步借助于生物化學(xué)的方法來鑒定所分離的菌種：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。
分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，可確定該細(xì)菌能夠分解尿素
例3.營養(yǎng)缺陷型菌株是野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自發(fā)突變失去合成某種成長因子的能力，只能在補(bǔ)充了相應(yīng)的生長因子的基本培養(yǎng)基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對(duì)酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后將甲培養(yǎng)皿的菌落影印接種(不改變菌落位置)到乙、丙兩培養(yǎng)皿的培養(yǎng)基中，進(jìn)一步培養(yǎng)得到如下圖所示結(jié)果。
下列分析正確的是( )A.接種到甲培養(yǎng)皿采用的是平板劃線法B.甲、丙兩培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基C.甲培養(yǎng)皿中菌落數(shù)有可能比接種的酵母菌數(shù)少D.甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)皿都可能存在營養(yǎng)缺陷型菌落
總結(jié)：兩種純化方法的比較
例3.(2020·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。
回答下列問題：(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用 的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是　　。甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基。
(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100 μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋 倍。
(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)S的降解量反而下降，其原因可能是____________________________ (答出1點(diǎn)即可)。
S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌
(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟：_____________________________________________________________。
泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)
(5)上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即 。
水、碳源、氮源和無機(jī)鹽
例4.(2021·山東，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸會(huì)使醇溶青瓊脂平板變?yōu)樯钏{(lán)色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養(yǎng)。甲菌菌落周圍呈現(xiàn)深藍(lán)色，乙菌菌落周圍不變色，下列說法錯(cuò)誤的是( )A.甲菌屬于解脂菌B.實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基以脂肪為唯一碳源C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區(qū)域進(jìn)行對(duì)比D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力
例5.(2021·山東，20)含硫蛋白質(zhì)在某些微生物的作用下產(chǎn)生硫化氫導(dǎo)致生活污水發(fā)臭。硫化氫可以與硫酸亞鐵銨結(jié)合形成黑色沉淀。為探究發(fā)臭水體中甲、乙菌是否產(chǎn)生硫化氫及兩種菌的運(yùn)動(dòng)能力，用穿刺接種的方法，分別將兩種菌接種在含有硫酸亞鐵銨的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，如圖所示。若兩種菌繁殖速度相等，下列說法錯(cuò)誤的是（ ）A.乙菌的運(yùn)動(dòng)能力比甲菌強(qiáng)B.為不影響菌的運(yùn)動(dòng)需選用液體培養(yǎng)基C.該實(shí)驗(yàn)不能比較出兩種菌產(chǎn)生硫化氫的量D.穿刺接種等接種技術(shù)的核心是防止雜菌的污染
填空默寫1.(選擇性必修3 P10)培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括　　　　　　　　　　　等。2.(選擇性必修3 P10)獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是　　　　　　，無菌技術(shù)除了用來　　　　　　　　　　　　　　　　　　　外，還能___　　　　　　　　　　　　　　。3.(選擇性必修3 P12)菌落是指______________________________________　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。采用_____　　法和　　　　　　法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。
水、無機(jī)鹽、碳源、氮源
防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染
效避免操作者自身被微生物感染
分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)
部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體
4.(選擇性必修3 P16)選擇培養(yǎng)基是指________________________________　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。5.(選擇性必修3 P12)平板冷凝后，要將平板倒置的原因是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微
生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基
蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以減少培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染
6.(選擇性必修3 P13)操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了__________________　　　　　　　　　?。幻看蝿澗€前灼燒接種環(huán)是為了_________________________________________________________________________________________________，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能__________________________________________________________。7.(選擇性必修3 P13)在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是　　　　　　　　　　　　　　　。
束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端
接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者
以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種