課時練習(xí)(三十六)　微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用1．(2021·淄博高三模擬)微生物實驗需要嚴(yán)格的無菌操作以防止污染，下列說法錯誤的是(　　)A．紫外線用于實驗室空氣及實驗臺表面的消毒B．無菌技術(shù)可有效地避免實驗操作者自身被微生物感染C．為防止DNA污染，PCR用水應(yīng)來自加熱煮沸的自來水D．使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要滅菌處理C　[紫外線能破壞DNA的結(jié)構(gòu)，故紫外線可用于實驗室空氣及實驗臺表面的消毒，A正確；無菌技術(shù)可以避免實驗材料被感染，也可以避免操作者自身被微生物感染，B正確；為防止DNA污染，PCR用水應(yīng)為高壓的雙蒸水，加熱煮沸的自來水也仍存在細(xì)菌等微生物，C錯誤；使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要高壓蒸汽滅菌處理，以免污染環(huán)境，D正確。]2．(2021·江蘇新高考適應(yīng)性測試)平板涂布是分離菌種常用的方法，下列相關(guān)敘述不恰當(dāng)?shù)氖?/span>(　　)A．固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50 ℃左右時倒平板B．倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影響菌的生長C．平板涂布分離得到的單菌落需進一步劃線純化D．平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)B　[固體培養(yǎng)基滅菌后，應(yīng)冷卻至50 ℃左右時倒平板，溫度過低易導(dǎo)致污染，溫度過高無法操作，A正確；倒好的平板需要冷卻后使用，且不宜久存，以免表面干燥，影響接種后微生物的生長，B錯誤；平板涂布分離得到的單菌落仍需進一步劃線純化，以利于菌種保藏，C正確；平板涂布法既可用于微生物的分離，也可用于微生物的計數(shù)，D正確。]3．(2021·濱州高三模擬)藝術(shù)不止存在于紙筆之間，我們可以用培養(yǎng)皿當(dāng)紙，接種環(huán)當(dāng)筆，各種形態(tài)顏色的細(xì)菌和真菌當(dāng)顏料，畫出別具風(fēng)格的作品。如在下列作品培養(yǎng)過程中，白色霉菌帶有毛茸茸的感覺，可描繪大熊貓的皮毛，紅色大腸桿菌可以描繪鵝嘴、水波則由假單胞桿菌繪就。下列說法錯誤的是(　　)圖甲　　　　　　　　　圖乙A．制備培養(yǎng)基時要經(jīng)過計算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板等步驟B．圖甲作品培養(yǎng)基的pH需為酸性，圖乙作品培養(yǎng)基的pH則需為中性或微堿性C．使用接種環(huán)接種時，取菌種前和接種后都需將接種環(huán)進行干熱滅菌D．培養(yǎng)成型的作品應(yīng)低溫保存，以免菌株瘋長影響整體效果C　[培養(yǎng)基配制過程要稱量、溶化、調(diào)pH滅菌，倒平板之前調(diào)節(jié)pH到適宜范圍以利于真菌或者細(xì)菌的繁殖，A正確；培養(yǎng)真菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，B正確；每次使用接種環(huán)前后都要進行灼燒滅菌，灼燒待冷卻后，才能置于菌液中使用，C錯誤；培養(yǎng)成型的作品應(yīng)低溫保存，以免菌株瘋長影響整體效果，D正確。]4．(2021·大連高三模擬)某種細(xì)菌的培養(yǎng)和分離過程示意圖如下。圖中①～③表示實驗過程，A1、B1、B2和B3代表平板，a1、a2、b1、b2和b3代表菌落，B1～B3中添加了適宜濃度的青霉素。有關(guān)敘述錯誤的是(　　)A．實驗操作過程中必須打開超凈臺上的紫外燈滅菌B．平板接種細(xì)菌后，放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)C．原始菌株的①擴大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)D．依圖示結(jié)果，說明b1、b2、b3具備抗青霉素的特性A　[紫外線對人有害，在實驗操作過程中，不需要打開超凈臺上的紫外燈消毒，因為在實驗操作前已經(jīng)打開紫外燈進行過消毒，A錯誤；平板接種細(xì)菌后，放入恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)，這樣可以防止冷凝水滴落到培養(yǎng)基表面，B正確；原始菌株的①擴大培養(yǎng)應(yīng)選用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，這樣可保證菌體與培養(yǎng)液充分接觸，保證營養(yǎng)獲取，C正確；依圖示結(jié)果，由于B1～B3中添加了適宜濃度的青霉素，同時采用了影印法接種，根據(jù)培養(yǎng)基上菌落的情況可知以看出b1、b2、b3均具備抗青霉素的特性，D正確。]5．(2021·泰安高三模擬)處理生活垃圾的有效方法之一是用微生物對其進行降解。下圖表示篩選高效降解淀粉菌種的過程。相關(guān)分析正確的是(　　)A．篩選所用培養(yǎng)基中的碳源應(yīng)為牛肉膏和蛋白胨B．將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是平板劃線法C．菌落①與菌落②透明圈大小不同的原因是其對碘的分解能力不同D．擴大培養(yǎng)時用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好D　[篩選所用培養(yǎng)基應(yīng)以淀粉作為唯一碳源，這樣才能將降解淀粉的菌種篩選出來，A錯誤；由培養(yǎng)基上的單個菌落可知，將菌液接種到培養(yǎng)基的方法是稀釋涂布法，B錯誤；由于培養(yǎng)基中的唯一碳源是淀粉，而淀粉遇碘液會變藍(lán)，故菌落①與②周圍透明圈的大小不同原因可能是兩個菌群對淀粉的分解能力不同，C錯誤；液體培養(yǎng)基可增大溶氧量，也能增加菌種與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，故擴大培養(yǎng)時用不加瓊脂的液體培養(yǎng)基效果更好，D正確。]6．(2021·河北衡水中學(xué)檢測)秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種，實現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設(shè)計了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實驗流程。下列敘述錯誤的是(　　)A．配制培養(yǎng)基時，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之后調(diào)節(jié)pHB．選擇培養(yǎng)時，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基C．進行梯度稀釋時，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作D．挑選菌株后，應(yīng)將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄A　[配制培養(yǎng)基時，應(yīng)在高壓蒸汽滅菌之前調(diào)節(jié)pH，避免滅菌之后調(diào)pH造成雜菌污染，A錯誤；選擇培養(yǎng)時，為分離分解纖維素的微生物菌種，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基，B正確；進行梯度稀釋時，為了無菌操作，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作，C正確；挑選菌株后，為了防止造成污染，應(yīng)將使用過的培養(yǎng)基進行滅菌后再丟棄，D正確。]7．(2021·菏澤高三模擬)精氨酸營養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上生長，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸營養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌并進行篩選的過程示意圖，過程②將紫外線照射處理的菌液接種在某培養(yǎng)基上。培養(yǎng)至菌落不再增加時，平板上的菌落如圖甲所示。過程③向培養(yǎng)基中添加某種物質(zhì)，繼續(xù)培養(yǎng)，得到如圖乙所示平板，下列敘述正確的是(　　)A．紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變或染色體變異B．圖乙中菌落B為精氨酸營養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌C．過程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是谷氨酸D．過程②所用培養(yǎng)基是一種鑒別培養(yǎng)基B　[谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，其細(xì)胞中不含染色體，因此不會發(fā)生染色體變異，A錯誤；由以上分析可知，圖乙中菌落B為精氨酸依賴營養(yǎng)缺陷型谷氨酸棒狀桿菌，B正確；過程③向培養(yǎng)基中添加的某種物質(zhì)是精氨酸，C錯誤；過程②所用培養(yǎng)基缺少精氨酸，只有能產(chǎn)生精氨酸的微生物才能生存，因此該培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基，D錯誤。]8．大腸桿菌的體積通常在0.5～3 μm，為分離獲得某噬菌體，實驗操作如圖。據(jù)圖分析，下列有關(guān)說法正確的是(　　)A．選擇污水，因為其中含有大量的大腸桿菌，容易分離獲得B．離心是為了促進噬菌體和大腸桿菌的分離C．孔徑0.22 μm是為了過濾大腸桿菌和其他細(xì)菌D．過程①表示平板劃線法，結(jié)果表明濾液中含有噬菌體C　[選擇污水是因為其中含有大量的大腸桿菌，易分離獲得寄生于大腸桿菌體內(nèi)的噬菌體，A錯誤；離心是為了得到含大腸桿菌和噬菌體的上清液，B錯誤；孔徑0.22 μm，大腸桿菌無法通過，C正確；過程①表示稀釋涂布平板法，結(jié)果出現(xiàn)噬菌斑，表明濾液中有噬菌體，D錯誤。]9．(2021·德州二模)溫泉中含有能夠分解淀粉的耐熱古細(xì)菌，在固體培養(yǎng)基中，該類細(xì)菌分解淀粉會形成透明圈。下圖表示篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌的過程，下列分析正確的是(　　)A．②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌B．配制Ⅰ號培養(yǎng)基時需要加入瓊脂，先滅菌再調(diào)節(jié)pHC．為防止污染需要對Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿進行干熱滅菌D．從Ⅰ號培養(yǎng)基中選擇透明圈最小的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基A　[據(jù)圖可知，該平板上形成的單個菌落分布均勻，②過程是利用稀釋涂布平板法分離并篩選古細(xì)菌，A正確；配制Ⅰ號培養(yǎng)基時需要加入瓊脂，先調(diào)節(jié) pH再滅菌，B錯誤；為防止污染需要對Ⅰ、Ⅱ培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌，對培養(yǎng)皿進行干熱滅菌，C錯誤；在固體培養(yǎng)基中，耐熱古細(xì)菌分解淀粉會形成透明圈，透明圈越大說明分解淀粉的能力越強。為篩選能高效產(chǎn)生淀粉酶的耐熱古細(xì)菌，從Ⅰ號培養(yǎng)基中選擇透明圈最大的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，D錯誤。]10．乳酸有L-乳酸、D-乳酸和DL-乳酸三類，人體只能代謝L-乳酸，而過多攝入D-乳酸會危害健康；傳統(tǒng)酸菜發(fā)酵產(chǎn)物多為D-乳酸。為了從酸菜中篩選出高產(chǎn)L-乳酸的菌株，某科研小組進行如下實驗。實驗材料和步驟：①準(zhǔn)備實驗材料：酸菜汁、發(fā)酵培養(yǎng)基、MRS培養(yǎng)基(成分見下表，pH6.2～6.4)等。②篩選高產(chǎn)L-乳酸菌種：將酸菜汁稀釋107倍，取0.1 mL稀釋液涂抹在MRS培養(yǎng)基中于32 ℃下培養(yǎng)2～4 d獲得單菌落，鑒定后將獲得的L-乳酸菌種接種于MRS液體培養(yǎng)基中，在32 ℃下培養(yǎng)24 h，檢測L-乳酸的產(chǎn)量。③發(fā)酵條件優(yōu)化：分別探究發(fā)酵時間、溫度等因素對發(fā)酵效果的影響。實驗結(jié)論：高產(chǎn)L-乳酸菌株的最佳發(fā)酵溫度是2 ℃、發(fā)酵最佳時間是20 h、發(fā)酵的初始pH是6.2。請回答下列問題：(1)在MRS培養(yǎng)基中添加葡萄糖的作用是__________________，無機鹽可能起到________的作用。MRS培養(yǎng)基常用________法滅菌，使用高壓蒸汽滅菌鍋時應(yīng)注意__________________________________________________________________________________________________________________________。(2)將用________稀釋后的酸菜汁涂布在MRS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后可通過菌落的____________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點)等特征將目的菌株鑒定出來；將獲得的目的菌株接種于液體MRS培養(yǎng)基中可達(dá)到______________________________的目的。(3)如何確定發(fā)酵的最佳時間？ ____________________________________________________________________________________________________。[解析]　(1)在MRS培養(yǎng)基中添加葡萄糖的作用是為乳酸菌生長提供碳源和能源。無機鹽可能起到調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的作用。MRS培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，使用高壓蒸汽滅菌鍋時應(yīng)注意要先向滅菌鍋內(nèi)倒入適量水，并加熱煮沸，將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉。(2)將用無菌水梯度稀釋菌液涂布在MRS培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后可通過菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征將目的菌株鑒定出來；將高產(chǎn)L-乳酸菌株接種于液體MRS培養(yǎng)基中可達(dá)到增加高產(chǎn)L-乳酸菌株數(shù)目的目的。(3)每隔相同時間，測定培養(yǎng)基中L-乳酸的含量，L-乳酸的含量最高的組對應(yīng)的時間即為發(fā)酵的最佳時間。[答案]　(1)為乳酸菌生長提供碳源和能源　調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓　高壓蒸汽滅菌　要先向滅菌鍋內(nèi)倒入適量水，并加熱煮沸，將其中原有冷空氣徹底排出后將鍋密閉  (2)無菌水梯度　形狀、大小、隆起程度和顏色　增加高產(chǎn)L-乳酸菌株數(shù)目　(3)每隔相同時間，測定培養(yǎng)基中L-乳酸的含量，L-乳酸的含量最高的組對應(yīng)的時間即為發(fā)酵的最佳時間11．聚對苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料類水瓶的重要原料，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了以PET為碳源和能量來源的細(xì)菌，該發(fā)現(xiàn)對PET類材料的回收利用、環(huán)境治理意義重大。請回答下列問題：(1)實驗小組欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以________為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是______。(2)該實驗小組選取PET濃度為800 mg·L－1的富集液進行系列稀釋，分別取10－3、10－4和10－5倍數(shù)的稀釋液0.1 mL涂布于培養(yǎng)基上，每個稀釋倍數(shù)涂布三個平板，各平板的菌落數(shù)分別為(35、32、31)，(286、298、297)，(36、7、2)，不適合用于計數(shù)的為__________倍數(shù)的稀釋液，用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是_______________________________________________________________________________________________。(3)倒平板時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，目的是______。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則這個平板不能用來培養(yǎng)目的菌，原因是___________________。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線，原因是________________________________________________________________________。(4)在保藏PET降解菌菌種時，可采取________的方法進行長期保存。[解析]　(1)欲從土壤中獲取PET降解菌，需將土壤樣品置于以PET為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌。(2)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，據(jù)此結(jié)合題意可知：不適合用于計數(shù)的為10－5倍數(shù)的稀釋液。用另外兩組稀釋倍數(shù)的稀釋液進行計數(shù)，得到的細(xì)菌數(shù)不一致的原因可能是稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果。(3)倒平板時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，其目的是滅菌，防止微生物污染。在倒平板的過程中，如果培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此這個平板不能用來培養(yǎng)目的菌。用平板劃線法純化PET降解菌的過程中，為使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而成的菌落，在第二次及其后的劃線操作時，須從上一次劃線的末端開始劃線。(4)對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。[答案]　(1)PET　增加PET降解菌的濃度，以確保能分離得到目的菌　(2) 10－5　稀釋倍數(shù)為10－3時，更多的菌落連在一起最終形成單菌落，導(dǎo)致結(jié)果小于稀釋倍數(shù)為10－4組的結(jié)果　(3)滅菌，防止微生物污染　空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生　使細(xì)菌數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少，最終得到由單個細(xì)菌繁殖而成的菌落　(4)甘油管藏12．(2021·德州高三大聯(lián)考)聚羥基脂肪酸酯(PHA)是一類由微生物合成，在自然條件下可完全降解的生物塑料，可替代傳統(tǒng)塑料成為新型生物材料。某科研團隊以餐廚垃圾作為碳源，按照如圖所示流程從含鹽量高的餐廚垃圾滲瀝液處理系統(tǒng)中篩選分離出PHA合成能力較強的耐鹽菌株，下列相關(guān)敘述錯誤的是(　　)(注：尼羅紅是細(xì)胞內(nèi)儲存的脂類物質(zhì)的熒光染色劑，在紫外光的照射下顯示紅色，靈敏度較高，可用于PHA和非PHA脂類物質(zhì)熒光顯微鏡觀察，并能在一定程度上將兩者區(qū)分開來。)A．配制甲培養(yǎng)基時可適當(dāng)提高培養(yǎng)基的鹽濃度，接種后應(yīng)置于搖床中振蕩培養(yǎng)B．在乙培養(yǎng)基中加入尼羅紅熒光染色劑，接種后將培養(yǎng)皿倒置在恒溫箱中培養(yǎng)C．①過程采用稀釋涂布平板法，②過程中應(yīng)挑選有紅色熒光的菌落進行培養(yǎng)D．經(jīng)過多次稀釋和篩選，形成的單菌落中所有細(xì)胞的遺傳物質(zhì)均相同D　[由題干可知，實驗?zāi)康氖呛Y選分離出PHA合成能力較強的耐鹽菌株，甲為選擇培養(yǎng)基，作用是進行選擇培養(yǎng)，配制時應(yīng)適當(dāng)提高鹽濃度，抑制非目的菌株生長。振蕩培養(yǎng)的目的是讓目的菌與培養(yǎng)液充分混合，增加目的菌的數(shù)量，A正確；選擇培養(yǎng)后，將菌液經(jīng)稀釋涂布到平板上，并在平板中加入尼羅紅熒光染色劑，在紫外燈下出現(xiàn)紅色熒光的菌株代表可產(chǎn)生PHA，接種后將培養(yǎng)皿倒置在恒溫箱中培養(yǎng)，B、C正確，細(xì)菌為原核生物，進行二分裂增殖，不能保證遺傳物質(zhì)平均分配，D錯誤。]13．(2021·江蘇百校聯(lián)考)下圖表示采用富集方法從土壤中分離能降解對羥基苯甲酸的微生物的實驗過程。下列有關(guān)敘述，不正確的是(　　)A．該實驗所用的器具、培養(yǎng)基均需滅菌處理B．①～②～③重復(fù)培養(yǎng)能提高目的菌的比例C．④～⑤的培養(yǎng)過程可以純化并計數(shù)目的菌D．⑥⑦中的培養(yǎng)基中都應(yīng)含有對羥基苯甲酸D　[圖示為微生物的實驗，需要進行無菌操作，所以該實驗所用的器具、培養(yǎng)基均需滅菌處理，A正確；①～②～③是將土壤提取液置于含對羥基苯甲酸的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，重復(fù)多次可以提高目的菌的比例，B正確；④～⑤的培養(yǎng)過程采用稀釋涂布平板法，所以可以純化并計數(shù)目的菌，C正確；⑥⑦的實驗?zāi)康氖钦f明通過選擇培養(yǎng)的確得到了欲分離的目標(biāo)微生物，有一組作為對照不含有對羥基苯甲酸，D錯誤。]
14．(2021·青島膠州實驗中學(xué))某同學(xué)從植物中提取了W物質(zhì)，并研究其抑菌效果。在平板中央處打孔后加入提取物W，測量抑菌圈的大小和計算抑菌圈平均增幅速率，實驗方法和結(jié)果如圖所示。據(jù)圖分析下列說法錯誤的是(　　)A．將一定量菌液與冷卻后的滅菌的培養(yǎng)基混勻后傾倒平板可得到試驗菌平板B．在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板C．抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物 W 的濃度和預(yù)擴散時間密切相關(guān)D．提取物 W在培養(yǎng)基中擴散，加入提取物 W 后的2 小時可獲得最佳抑菌效果D　[將一定量菌液與冷卻后的滅菌的培養(yǎng)基混勻后傾倒平板可得到試驗菌平板，A正確；在試驗平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，灼燒時鋼管上的微生物死亡，進行打孔操作時可防止微生物對平板造成污染，B正確；抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物 W 的濃度和預(yù)擴散時間有很大關(guān)系，C正確；提取物 W 在培養(yǎng)基中擴散，加入提取物 W 后的2小時獲得抑菌圈最大平均增幅速率，說明提取物在2小時內(nèi)擴散得較快，但不能確定是否為最佳抑菌效果，上述實驗結(jié)果顯示，24小時抑菌圈的直徑最大，抑菌效果更佳，D錯誤。]15．(2021·唐山高三模擬)海洋細(xì)菌A78篩選自腐爛的海帶，能在48 h內(nèi)高效降解海帶塊，具有較強的褐藻膠降解功能。某研究小組進行海洋細(xì)菌A78產(chǎn)生的褐藻膠裂解酶的誘導(dǎo)培養(yǎng)及特性研究。回答下列問題。(1)海洋細(xì)菌A78的褐藻膠裂解酶的誘導(dǎo)培養(yǎng)。將海洋細(xì)菌A78接種于經(jīng)過________滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，A、B、C三個培養(yǎng)基中分別添加0.5%、1%、1.5%的褐藻酸鈉和________，一段時間后結(jié)果如圖。該實驗結(jié)果說明_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)為得到單菌落，最常用的兩種接種方法是_____________。在培養(yǎng)基中添加海藻酸鈉培養(yǎng)后出現(xiàn)菌落，再添加10%的氯化鈣，菌落周圍能產(chǎn)生明顯的透明圈，篩選出目標(biāo)菌株。通過計算“透明圈直徑/菌落直徑”比值的大小作進一步篩選，該比值反映了_________________________________。(3)本研究初步探究出由海洋細(xì)菌A78產(chǎn)生的褐藻膠裂解酶與底物反應(yīng)的條件如下圖，最適溫度是________、最適pH值是________時褐藻膠裂解酶的活性最高。溫度實驗中褐藻膠裂解酶活力峰有2個，pH值實驗中酶活力峰也有2個，出現(xiàn)這種結(jié)果的根本原因可能是___________________________________________________________________________________________________________。[解析]　(1)培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。該實驗是海洋細(xì)菌A78的褐藻膠裂解酶的誘導(dǎo)培養(yǎng)，故三個培養(yǎng)基中應(yīng)分別添加0.5%、1%、1.5%的褐藻酸鈉和等量的海帶塊。由圖可知，B中的海帶塊被分解的最快，而A中海帶塊被分解的最慢，可說明1%的褐藻酸鈉誘導(dǎo)下菌株產(chǎn)生的褐藻膠酶數(shù)量較多，太高或太低濃度的褐藻酸鈉都不利于誘導(dǎo)菌株A78產(chǎn)酶。(2)微生物常用的兩種接種方法為平板劃線法和稀釋涂布平板法。在培養(yǎng)基中添加海藻酸鈉培養(yǎng)后出現(xiàn)菌落，再添加10%的氯化鈣，菌落周圍能產(chǎn)生明顯的透明圈，說明該菌體能分解海藻酸鈉。“透明圈直徑/菌落直徑”比值的大小可反映細(xì)菌A78降解海藻酸鈉的能力。(3)分析圖示可知，溫度為30 ℃、pH為5左右時褐藻膠酶活性最大，說明海洋細(xì)菌A78產(chǎn)生的褐藻膠裂解酶的最適溫度是30 ℃、最適pH值在5左右。溫度實驗中褐藻膠裂解酶活力峰有2個，pH值實驗中酶活力峰也有2個，出現(xiàn)這種結(jié)果的根本原因可能是該菌含有1個以上褐藻膠裂解酶基因，而2個基因表達(dá)的酶的量與特性有較大區(qū)別。[答案]　(1)高壓蒸汽　海帶塊　1%的褐藻酸鈉誘導(dǎo)下菌株產(chǎn)生的褐藻膠酶數(shù)量較多，太高或太低濃度的褐藻酸鈉都不利于誘導(dǎo)菌株A78產(chǎn)酶　(2)平板劃線法和稀釋涂布平板法　細(xì)菌A78降解海藻酸鈉的能力  (3)30 ℃　5(提示：數(shù)值在5～5.5之間即可)　該菌含有1個以上褐藻膠裂解酶基因，而2個基因表達(dá)的酶的量與特性有較大區(qū)別 

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