?山東省菏澤市定陶區(qū)明德學校2022-2023學年高二3月月考生物試題
學校:___________姓名：___________班級：___________考號：___________

一、單選題
1．果酒和果醋制作過程中，發(fā)酵條件的控制至關重要。下列相關措施正確的是（　?。?br /> A．葡萄汁要裝滿發(fā)酵瓶，造成無氧環(huán)境，有利于發(fā)酵
B．果酒發(fā)酵過程中，每隔12 h左右打開瓶蓋一次，放出CO2
C．果酒發(fā)酵過程中溫度控制在30 ℃，果醋發(fā)酵過程中溫度控制在20 ℃
D．在果醋發(fā)酵過程中，要適時通過充氣口充氣，以利于醋酸菌的代謝
【答案】D
【分析】果酒和果醋發(fā)酵過程：將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，并封閉充氣口；在果酒發(fā)酵過程中，每隔12 h左右將瓶蓋擰松一次，不能打開瓶蓋；果酒發(fā)酵過程中溫度控制在18~30 ℃，而果醋發(fā)酵過程中溫度控制在30~35 ℃。
【詳解】A、將葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時，要留有大約1/3的空間，并封閉充氣口，防止發(fā)酵液溢出，A錯誤；
B、葡萄酒發(fā)酵過程中，每隔12h左右擰松瓶蓋一次，放出二氧化碳，不能打開瓶蓋，目的是防止雜菌污染，B錯誤；
C、果酒發(fā)酵過程中溫度控制在18~30 ℃，而果醋發(fā)酵過程中溫度控制在30~35 ℃，C錯誤；
D、醋酸菌是好氧菌，因此在果醋發(fā)酵過程中，要適時通過充氣口充氣，有利于醋酸菌的代謝，D正確。
故選D。
2．下列對發(fā)酵過程中滅菌的理解不正確的是（????）
A．防止雜菌污染
B．消滅雜菌
C．培養(yǎng)基和發(fā)酵設備都必須滅菌
D．滅菌必須在接種前
【答案】B
【分析】滅菌是微生物發(fā)酵過程中的一個重要環(huán)節(jié)，無菌技術的相關知識：（1）關鍵：防止外來雜菌的入侵；（2）具體操作①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌；③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接觸。
【詳解】A、滅菌的目的是防止雜菌污染，A正確；
B、滅菌使用強烈的理化因素殺死物體內外所用的微生物（包括芽孢和孢子），B錯誤；
C、發(fā)酵過程中培養(yǎng)基和發(fā)酵設備都必須滅菌，發(fā)酵作用的微生物是滅菌后專門接種的，C正確；
D、滅菌必須在接種前進行，否則導致發(fā)酵采用的菌種被殺滅，D正確。
故選B。
3．下列有關用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化大腸桿菌的敘述，正確的是（　?。?br /> A．都需要用液體培養(yǎng)基
B．都需要使用接種針進行接種
C．都需要在酒精燈火焰旁進行接種
D．都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌
【答案】C
【分析】分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選或分類微生物時需要使用固體培養(yǎng)基進行平板劃線法或稀釋涂布平板法接種，其中稀釋涂布平板法還可以用來進行微生物的計數(shù)。
【詳解】A、平板劃線法和稀釋涂布平板法都是為了在培養(yǎng)基表面形成單個菌落，所以都需要用固體培養(yǎng)基，A錯誤；
B、平板劃線法使用接種環(huán)進行接種，而稀釋涂布平板法采用涂布器操作，B錯誤；
C、純化時，要進行無菌操作，為防止雜菌污染，操作時都需要在酒精燈火焰旁進行接種，C正確；
D、平板劃線法不能用于計數(shù)活菌，只能用于分離菌種，稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌，D錯誤。
故選C。
4．制備各種牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，關于倒平板的具體描述正確的是（????）
①待培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板
②將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰
④用左手的拇指和食指完全打開皿蓋
⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋
⑥等待平板冷卻5～10s，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上
A．①③④⑤ B．④⑤⑥ C．③⑤ D．①②④⑥
【答案】C
【分析】倒平板操作的步驟：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。
【詳解】①等培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，防止雜菌污染，①錯誤；
②不能將滅過菌的培養(yǎng)皿放在桌面上，因為桌面上可能有雜菌，②錯誤；
③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰，高溫可防止雜菌污染，③正確；
④倒平板時皿蓋只需要傾斜出一定角度，在酒精燈火焰旁進行，④錯誤；
⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上皿蓋，并通過酒精燈火焰，⑤正確；
⑥等待平板冷卻5～10分鐘，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，⑥錯誤。
因此，只有③⑤兩項正確。
故選C。
5．研究小組利用稀釋涂布平板法來探究某河流中大腸桿菌的數(shù)量。每一個濃度涂布四個平板，并且設置空白對照組。下列關于操作步驟的敘述正確的是（????）
A．涂布前，將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃盡后還要冷卻8～10s
B．涂布完成后，在培養(yǎng)皿的皿蓋上做標記，以避免混淆，并將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)
C．計算平板上的菌落數(shù)時，四個培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)無論多少，都要全部平均
D．若空白對照組上有5個菌落，則實驗組數(shù)據(jù)基礎上減去5，以獲得最準確數(shù)據(jù)
【答案】A
【分析】常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，目的是讓聚集在一起的微生物分散成單個細胞，然后得到由這個細胞繁殖而來的肉眼可見的單個群落。稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。
【詳解】A、使用涂布器在酒精燈下涂布時，要先將涂布器沾有少量酒精進行灼燒滅菌，燃盡后還要冷卻8~10s再進行涂布，A正確；
B、涂布完成后，在培養(yǎng)皿的皿底上做標記，B錯誤；
C、計算平板上的菌落數(shù)時，應選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)，C錯誤；
D、若空白對照組上有5個菌落，說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，需要重新進行實驗，D錯誤。
故選A。
【點睛】本題考查微生物分離與計數(shù)的相關知識，意在考查考生對實驗過程、細節(jié)的掌握，能結合所學知識，準確作答。
6．有關微生物營養(yǎng)物質的敘述中，正確的是（　?。?br /> A．是碳源的物質不可能同時是氮源
B．凡碳源都提供能量
C．除水以外的無機物只提供無機鹽
D．無機氮源也能提供能量
【答案】D
【分析】 微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是起單一方面的作用。
【詳解】A、有的碳源只能是碳源，如CO2；有的碳源可同時是氮源，如NH4HCO3，A錯誤；
B、自養(yǎng)微生物利用的無機物碳源不提供能量，如藍藻、硝化細菌利用CO2，B錯誤；
C、除水以外的無機物種類繁多、功能也多樣．如CO2，可作自養(yǎng)型微生物的碳源；NH4HCO3可作自養(yǎng)型生物的碳源和無機鹽；而NaCl則只能提供無機鹽，C錯誤；
D、NH3可為硝化細菌提供能量和氮源，D正確；
故選D。
7．北京冬奧會食堂讓各國運動健兒愛上中國味道，其餐余垃圾在垃圾集中點采用生化+霧化+膜過濾技術處理后，可以達到無次污染的標準。為篩選對抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，提高“生化”處理的效率，研究人員將餐余垃圾機械化處理后加入裝有無菌水的錐形瓶中制備餐余垃圾浸出液，然后進行如圖所示操作，下列說法錯誤的是（????）

A．餐余垃圾浸出液在接種前通常需要進行高壓蒸汽滅菌處理
B．可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上
C．X培養(yǎng)基含有淀粉和抗生素，Y培養(yǎng)基是不含瓊脂的液體培養(yǎng)基
D．圖中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型
【答案】A
【分析】微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。
【詳解】A、若對餐余垃圾浸出液在接種前通常進行高壓蒸汽滅菌會殺死菌種，導致實驗失敗，A錯誤；
B、微生物的接種方法包括稀釋涂布平板法和平板劃線法，可用稀釋涂布平板法將餐余垃圾浸出液接種在X培養(yǎng)基上，B正確；
C、結合題意可知，本實驗目的是篩選對抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，故圖中X培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源，且應添加抗生素起選擇作用；Y培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，進行擴大培養(yǎng)，其中不含凝固劑瓊脂，C正確；
D、淀粉與碘變藍色，加入碘液后，能夠分解淀粉的菌落周圍出現(xiàn)清晰區(qū)，圖中能最高效降解淀粉的微生物是⑤（分解圈最大）；不同微生物形成的菌落特征不同，可根據(jù)菌落特征初步判斷微生物類型，D正確。
故選A。
8．關于發(fā)酵工程的菌種說法錯誤的是（　?。?br /> A．發(fā)酵工程的菌種可以從自然界中篩選出來
B．發(fā)酵工程可以利用原材料中含有的菌種
C．發(fā)酵工程的菌種可以來自基因工程
D．發(fā)酵工程的菌種可以來自誘變育種
【答案】B
【解析】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術。發(fā)酵工程的內容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配置、滅菌、種子擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。
【詳解】發(fā)酵工程中所用的菌種大多是單一菌種，一旦有雜菌污染，可能導致產(chǎn)量大大下降，因此，培養(yǎng)基因和發(fā)酵設備都必須經(jīng)過嚴格滅菌。故發(fā)酵工程的菌種不可以利用原材料中含有的菌種。發(fā)酵工程的優(yōu)良性狀的菌種可以從自然界中篩選出來，也可以通過誘變育種和基因工程育種獲得。B錯誤。
故選B。
9．植物組織培養(yǎng)可以歸納為①②③→④，下列相關敘述錯誤的是（????）
A．通常選取根尖、莖尖、形成層等誘導形成愈傷組織
B．②→③再分化過程中，細胞增殖的方式為有絲分裂
C．①→②→③過程中，應在培養(yǎng)基中加入水、無機鹽、蔗糖、氨基酸、植物激素等物質
D．將①經(jīng)脫分化培養(yǎng)成②時，得到胚狀體
【答案】D
【分析】分析題圖：圖示為植物組織培養(yǎng)過程，其中①為外植體，即離體的植物組織、細胞、器官等；②為愈傷組織；③為胚狀體；④為新的植物體。
【詳解】A、從理論上講，①誘導脫分化通常選取根尖、莖葉、形成層等組織或細胞，A正確；
B、②→③指愈傷組織再分化生芽生根的過程，細胞增殖的方式為有絲分裂，B正確；
C、①→②→③過程中，應在培養(yǎng)基中加入水、無機鹽、蔗糖、氨基酸、植物激素等物質，外植體經(jīng)脫分化培養(yǎng)成愈傷組織、由愈傷組織進行細胞分化時，一般要先誘導其生芽，然后誘導其生根，可通過控制培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比例來實現(xiàn)，C正確；
D、將①（外植體）經(jīng)脫分化培養(yǎng)成②（愈傷組織），②（愈傷組織）需要經(jīng)過再分化才能形成胚狀體，D錯誤。
故選D。
10．下圖是利用體細胞核移植技術克隆優(yōu)質奶牛的簡易流程圖，有關敘述正確的是（　?。?br />
A．后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質共同決定
B．過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體
C．過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理
D．過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至原腸胚后移植
【答案】B
【分析】分析圖解：圖示過程為體細胞克隆過程，取乙牛體細胞，對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細胞去核，然后進行細胞核移植；融合后的細胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進行胚胎移植，最終得到克隆牛。
【詳解】A、后代丁的細胞核的遺傳物質來自甲，細胞質的遺傳物質來自于乙牛，則丁的遺傳性狀由甲和乙的遺傳物質共同決定，A錯誤；
B、動物細胞培養(yǎng)中需要提供95%空氣（保證細胞的有氧呼吸）和5%CO2（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體，B正確；
C、過程②常使用顯微操作去核法對卵母細胞進行處理，C錯誤；
D、過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至囊胚或桑椹胚后移植，D錯誤。
故選B。
【點睛】
11．利用山金柑愈傷組織細胞（2n）和早花檸檬葉肉細胞（2n）進行體細胞雜交可以得到高品質、抗逆性強的雜種植株。下圖是7組雜種植株核DNA和線粒體DNA來源鑒定的結果。下列分析正確的是（????）

A．山金柑愈傷組織細胞沒有細胞壁，早花檸檬葉肉細胞用酶解法去除細胞壁后才能與前者融合
B．用滅活的病毒誘導兩種細胞原生質體的融合，依賴于細胞膜的流動性
C．可通過觀察融合后細胞的顏色進行初步篩選
D．雜種植株是四倍體，其核基因只來自早花檸檬，線粒體基因只來自山金柑
【答案】C
【分析】圖題是7組雜種植株核DNA和線粒體DNA來源鑒定的結果，觀察結果可知，雜種植株核DNA與早花檸檬細胞核DNA完全相同，而雜種植株的線粒體DNA與山金柑細胞的線粒體DNA完全相同，說明雜種植株的核DNA來自于早花檸檬，而線粒體DNA來自于山金柑。
【詳解】A、山金柑愈傷組織細胞的細胞壁薄，具有很強的分裂和再生能力，也需要用酶解法去除細胞壁，A錯誤；
B、滅活的病毒常用于誘導動物細胞融合，而植物細胞的原生質體融合，一般采用物理或化學方法，B錯誤；
C、愈傷組織無色，葉肉細胞因為含有葉綠體為綠色，其中供體細胞特有的結構是葉綠體，可通過觀察葉綠體的有無，即有無綠色作為初步篩選雜種細胞的標志，C正確；
D、雜種植株核DNA與早花檸檬細胞核DNA完全相同，而早花檸檬屬于二倍體生物，故雜種植株應該是二倍體，D錯誤。
故選C。
12．如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（????）

A．雙抗可同時與2種抗原結合
B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞
C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原
D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞
【答案】D
【分析】單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結合，A正確；
B、 根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物發(fā)揮相應的作用，B正確；
C、在兩種不同的抗原刺激下，B細胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細胞分泌形成兩種抗體，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原-抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；
D、 同時注射2種抗原可刺激B細胞分化形成不同的漿細胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細胞，D錯誤。
故選D。
13．為了加快優(yōu)良牛的繁殖速度，科學家采用了以下兩種方法。請根據(jù)圖示信息分析，下列正確的是（????）

A．試管牛和克隆牛的培育過程中均用到了胚胎移植技術，均屬于有性生殖
B．胚胎移植的實質是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉移
C．獲得的優(yōu)秀公牛的新鮮精液，可直接用于受精作用
D．如圖方法Ⅱ，產(chǎn)生F牛的性別與C相同，性狀也與C完全一致
【答案】B
【分析】分析題圖：圖示為加快優(yōu)良和牛繁殖速度的兩種方法，方法Ⅰ采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術，產(chǎn)生的試管牛E屬于有性生殖的產(chǎn)物；方法II采用了體細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術，產(chǎn)生的克隆牛F屬于無性生殖的產(chǎn)物。
【詳解】A、試管牛的培育用到的技術有：體外受精、細胞培養(yǎng)、胚胎移植，克隆牛的培育用到的技術有，核移植、細胞培養(yǎng)、胚胎移植，均用到了胚胎移植技術，但克隆牛屬于無性生殖，A錯誤；
B、胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下（供體和受體之間）空間位置的置換，B正確；
C、獲得的優(yōu)秀公牛的新鮮精液，需獲能后才能進行受精作用，C錯誤；
D、F牛是核移植后經(jīng)細胞培養(yǎng)，然后將早期胚胎移入母牛子宮發(fā)育而產(chǎn)生的，為無性生殖。F牛的性別由其細胞核決定，與良種奶牛C的性別一致，為雌性，但F牛一少部分遺傳物質來自無核卵細胞中的細胞質，因此性狀也與C不完全一致，D錯誤。
故選B。
14．北方白犀牛曾經(jīng)廣泛分布于非洲中部，因盜獵和棲息地破壞而瀕臨滅絕。2018年3月，北方白犀牛僅剩下最后兩頭雌性個體。此前，科學家保存了北方白犀牛的精子，欲通過胚胎工程方法繁育北方白犀牛。下列說法錯誤的是（　　）
A．可以從雌性北方白犀牛體內取出卵母細胞進行體外受精
B．可以使用雌性南方白犀牛作為受體，進行胚胎移植
C．此過程和克隆技術相同，將會得到遺傳背景一致的后代
D．可以通過胚胎分割技術得到更多遺傳物質相同的后代
【答案】C
【分析】試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術，可見試管嬰兒技術主要包括體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植技術。
【詳解】A、為了繁育北方白犀牛，由于已經(jīng)保存了北方白犀牛的精子，因此需要從雌性體內取出卵母細胞進行體外受精，以便獲得較多的胚胎，A正確；
B、因為受體子宮對移入的胚胎基本無免疫排斥反應，因此，可以使用雌性南方白犀牛作為受體，進行胚胎移植，B正確；
C、此過程采用了體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的技術手段，為有性生殖的過程，而克隆技術為無性繁殖，顯然二者有差別，不會得到遺傳背景一致的后代，C錯誤；
D、為了得到更多遺傳性狀相同的后代，可以通過胚胎分割技術，該過程中需要對胚胎進行均等分割，通常選擇桑椹胚和囊胚進行分割，選擇囊胚時注意對內細胞團進行均等分割，D正確。
故選C。
15．右圖示哺乳動物生殖過程。其中b為卵細胞，c為體細胞。下列敘述不正確的是

A．形成①②的過程分別屬于有性生殖和無性生殖
B．產(chǎn)生②的過程中可以發(fā)生基因突變、基因重組等
C．②的產(chǎn)生表明動物細胞的細胞核具有全能性
D．a(chǎn)bc三種細胞的形成過程，僅c為有絲分裂
【答案】B
【分析】分析題圖可知，a是精子，b為卵細胞，動物①是通過受精作用，由受精卵發(fā)育成的個體，c為體細胞，動物②是通過動物的和移植技術由重組細胞發(fā)育而來的個體。
【詳解】A、動物②由受精卵發(fā)育而來，屬于有性生殖；動物②沒有經(jīng)過受精作用，由體細胞的細胞核與卵細胞的細胞質重組形成的重組細胞發(fā)育而來，屬于無性生殖，A正確；
B、動物②是無性生殖產(chǎn)生的，只能發(fā)生基因突變和染色體變異，不能發(fā)生基因重組，B錯誤；
C、動物②沒有經(jīng)過受精作用，由體細胞的細胞核與卵細胞的細胞質重組形成的重組細胞發(fā)育而來，表明動物細胞的細胞核具有全能性，C正確；
D、a是精子，b為卵細胞，都是通過減數(shù)分裂形成的；c是體細胞，是通過有絲分裂形成的，D正確。
故選B。

二、多選題
16．下列關于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗的敘述，正確的是（????）
A．該實驗采用稀釋涂布平板法或平板劃線法均能達到分離與計數(shù)的目的
B．判斷選擇培養(yǎng)基是否起選擇作用，需設置未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對照
C．將未接種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24~48 h，以檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格
D．以尿素為唯一氮源且加入酚紅的培養(yǎng)基上長出的菌落周圍可能會出現(xiàn)紅色區(qū)域
【答案】CD
【分析】1、稀釋涂布平板法：將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細胞分散開，使成單個細胞存在，再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內。
2、平板劃線法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞，用接種環(huán)在平板表面上作多次由點到線的劃線稀釋而獲得較多獨立分布的單個細胞，并讓其成長為單菌落的方法。
【詳解】A、該實驗采用稀釋涂布平板法或平板劃線法均能達到分離菌種的目的，但平板劃線法不能用來計數(shù)，A錯誤；
B、判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用，需將菌液稀釋相同的倍數(shù)后接種在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上作為對照，若在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，則說明選擇培養(yǎng)基起到了選擇作用，B錯誤；
C、將未接種的培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h，可以檢驗培養(yǎng)基滅菌是否合格，若滅菌合格，則培養(yǎng)基上應沒有任何菌落出現(xiàn)，C正確；
D、用以尿素為唯一氮源且加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)該細菌后能產(chǎn)生脲酶，使尿素分解成氨，導致酚紅指示劑變紅，故菌落周圍可能會出現(xiàn)紅色區(qū)域，D正確。
故選CD。
17．檸檬酸廣泛應用于食品、醫(yī)療和化工領域，具有重要的商業(yè)價值。以玉米粉為原 料，利用黑曲霉有氧發(fā)酵生產(chǎn)檸檬酸的基本流程如圖所示。下列分析正確的是（????）

A．玉米清液可以為黑曲霉提供碳源和能源
B．發(fā)酵前將黑曲霉孢子接種到種子培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)
C．發(fā)酵培養(yǎng)基和種子培養(yǎng)基滅菌后加入發(fā)酵罐內發(fā)酵
D．需嚴格控制發(fā)酵罐內的溫度、溶解氧和pH等條件
【答案】ABD
【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質，是進行微生物培養(yǎng)的物質基礎，通常含有水、碳源、氮源和無機鹽。
【詳解】A、玉米清液中含有蛋白質和糖類等物質，故可以為黑曲霉提供碳源和能源，A正確；
B、據(jù)圖可知，發(fā)酵前將黑曲霉孢子接種到種子培養(yǎng)基，該措施的目的是進行擴大培養(yǎng)，增加黑曲霉孢子的數(shù)量，B正確；
C、種子培養(yǎng)基中有發(fā)酵所需的菌種，若進行滅菌處理會殺滅菌種而導致發(fā)酵失敗，C錯誤；
D、黑曲霉屬于需氧生物，且微生物發(fā)酵過程需要適宜條件，所以在發(fā)酵罐內發(fā)酵需嚴格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D正確。
故選ABD。
18．胚胎工程中各種操作技術如圖所示。下列分析正確的是（????）

A．從良種公牛體內獲得的精子可以直接與獲能的卵細胞結合受精
B．早期囊胚 a、b、c 基因型相同，但發(fā)育得到的個體表型不一定相同
C．d 可直接移植給受體，且得到的兩頭小牛的性狀一般相同
D．胚胎移植時因代孕母牛幾乎對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應，因此無需使用免 疫抑制劑
【答案】CD
【分析】試管動物技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術。
【詳解】A、從良種公牛體內獲得的精子在體外獲能后才可以與培養(yǎng)到MII期的卵母細胞結合受精，A錯誤；
B、據(jù)圖可知，三種早期囊胚由不同受精卵發(fā)育而來，故a、b、c細胞核中的遺傳物質不一定相同，B錯誤；
C、d是經(jīng)過胚胎分割形成的兩個健康的胚胎，可直接移植給受體，該過程屬于無性生殖，得到的兩頭小牛來自同一個受精卵，性狀一般相同，C正確；
D、胚胎具有免疫豁免現(xiàn)象，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應，不需要注射免疫抑制劑，D正確。
故選CD。

三、單選題
19．科研人員在制備雜交瘤細胞的基礎上，獲得了能夠產(chǎn)生雙特異性抗體（BsAb）的雙雜交瘤細胞。BsAb可以同時結合兩種抗原，拓展了抗EGFR（表皮生長因子受體）單克隆抗體的臨床應用范圍，其原理如圖所示。下列說法不正確的是（　　）

A．制備和篩選雙雜交瘤細胞所依據(jù)的原理是抗原抗體反應的特異性
B．BsAb能與T細胞表面抗原CD3結合，激活T細胞發(fā)揮細胞免疫
C．BsAb能與腫瘤細胞表面的EGFR結合，誘導腫瘤細胞凋亡
D．抗原部分結構改變后可能會出現(xiàn)原雙特異性抗體中一種單抗失效
【答案】A
【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、制備雙雜交瘤細胞所依據(jù)的基本原理有動物細胞增殖和細胞膜的流動性，篩選過程利用了抗原抗體反應的特異性原理及培養(yǎng)基的選擇，A錯誤；
B、據(jù)圖可知，BsAb能與T細胞表面抗原CD3結合，同時能與腫瘤細胞的EGFR結合，該過程會激活T細胞，釋放顆粒酶穿孔素，使腫瘤細胞凋亡，發(fā)揮了細胞免疫作用，B正確；
C、據(jù)圖可知，BsAb能與腫瘤細胞表面的表皮生長因子受體EGFR結合，在T細胞釋放的顆粒酶穿孔素作用下，誘導癌細胞凋亡，C正確；
D、抗原和抗體可特異性結合，抗原的部分結構改變后，可能會出現(xiàn)原雙特異性抗體中一種單抗失效而另一種單抗仍有效應的情況，D正確。
故選A。

四、多選題
20．小鼠胚胎干細胞經(jīng)定向誘導可獲得多種功能細胞、制備流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（????）

A．為獲得更多的囊胚，采用激素注射促進雄鼠產(chǎn)生更多的精子
B．細胞a和細胞b內含有的核基因不同，所以全能性高低不同
C．用胰蛋白酶將細胞a的膜蛋白消化后可獲得分散的胚胎干細胞
D．胚胎干細胞和誘導出的各種細胞都需在CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)
【答案】ABC
【分析】1、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。
2、ES細胞在飼養(yǎng)層細胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)．在培養(yǎng)液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環(huán)腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向不同類型的組織細胞分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段。
【詳解】A、為了獲得更多的囊胚，可以采用激素促進成熟雌性個體超數(shù)排卵，然后將卵細胞從母體內取出，在試管內與人工采集的精子進行體外受精，培育成胚胎，A錯誤；
B、細胞a和細胞b是由同一個受精卵經(jīng)過有絲分裂形成的，故核基因相同，B錯誤；
C、運用細胞培養(yǎng)技術可以從哺乳動物的早期胚胎中獲得胚胎干細胞，首先必須用胰蛋白酶處理內細胞團，分解細胞間的膠原蛋白等，使之分散成單個細胞，C錯誤；
D、動物細胞培養(yǎng)時需要在5% CO2的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，以維持培養(yǎng)液的pH，D正確。
故選ABC。

五、實驗題
21．某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設計品種A組織培養(yǎng)實驗時，參照品種B的最佳激素配比（如表）進行預實驗。
品種B組織培養(yǎng)階段
細胞分裂素濃度（μmol/L）
生長素濃度（μmol/L）
Ⅰ誘導形成愈傷組織
m1
n1
Ⅱ誘導形成幼芽
m2
n2
Ⅲ誘導生根
m3
n3
據(jù)表回答：
(1)Ⅰ階段時通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是_____。
(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達的是_____階段。
(3)為確定品種A的Ⅰ階段的最適細胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比（m1>2.0），以0.5μmol/L 為梯度，設計5個濃度水平的實驗，細胞分裂素最高濃度應設為_____μmol/L。
(4)在_____階段用秋水仙素對材料進行處理，最易獲得由單個細胞形成的多倍體。
【答案】(1)細胞分化程度低，容易誘導產(chǎn)生愈傷組織
(2)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ
(3)m1+1.0
(4)Ⅰ

【分析】分析表格內容：Ⅰ是經(jīng)過脫分化（去分化）形成愈傷組織的過程，細胞的形態(tài)、結構和功能發(fā)生改變；Ⅱ、Ⅲ階段是經(jīng)過再分化成芽和根的階段。
【詳解】（1）Ⅰ階段時通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是莖尖、幼葉細胞的分化程度低，更容易誘導產(chǎn)生愈傷組織。
（2）Ⅰ過程為脫分化，Ⅱ、Ⅲ過程是形成幼芽、根的再分化過程，再分化和脫分化都存在基因的選擇性表達，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段都存在基因的選擇性表達。
（3）表中數(shù)據(jù)為品種B的最佳激素配比，若要確定品種A的Ⅰ階段最佳細胞分裂素濃度，設計5組對照實驗，以0.5μmol/L為梯度，可參考m1為中間值，故實驗中細胞分裂素最高濃度可設為m1+（0.5+0.5）μmol/L，即（m1+1.0）μmol/L。
（4）Ⅰ階段誘導形成的愈傷組織的全能性最高，因此在Ⅰ階段用秋水仙素對材料進行處理，最易獲得由單個細胞形成的多倍體。

六、綜合題
22．為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。

回答下列問題：
（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是_________________。
（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：_________________。
（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于_________________，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結果是_________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是_________________。
（4）若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有________________（答出2點即可）。
【答案】 誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞 取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液 選擇培養(yǎng)基 只有雜交瘤細胞能夠生存 抗原與抗體的反應具有特異性 將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內增殖；將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)
【分析】由圖可知，篩選1指用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，篩選2指進行克隆化培養(yǎng)和專一抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。
【詳解】（1）實驗前給小鼠甲注射病毒A，是為了誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞。
（2）取小鼠的脾臟，剪碎組織，用胰蛋白酶處理獲得單個細胞，加入培養(yǎng)液可以制成單細胞懸液。
（3）圖中篩選1需要用到選擇培養(yǎng)基，只有雜交瘤細胞可以存活。篩選2是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞，該過程要用到抗原抗體雜交，故篩選所依據(jù)的原理是抗原-抗體反應具有特異性。
（4）獲得能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞后，可以在體外培養(yǎng)液中進行培養(yǎng)，或在小鼠的腹腔中進行培養(yǎng)，使雜交瘤細胞大量增殖。
【點睛】制備單克隆抗體的過程中，需要用到動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)，需要用到兩次篩選，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的目的是獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。
23．如圖所示表示科學家采用不同方法培育良種牛的過程，a～h 為操作過 程，請據(jù)圖回答有關問題：

(1)“試管?！奔夹g的操作流程是_____（填字母）。
(2)圖中用到的生物技術有等_____（寫出三種），圖中 A 牛和 B 牛的性別_____（填“相同”“不同”或“不一定相同”）。
(3)圖中用到的激素是_____，其目的是獲得更多的卵母細胞，經(jīng)受精后可得到多個早期胚胎。
(4)用于移植的胚胎除圖中所示外還有_____（一項即可）等來源。
(5)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是_____。與胚胎細胞核移植技術相比，體細胞核移植技術的成功率更低，原因是_____。
【答案】(1)a→b→f→g
(2) 體外受精、胚胎的早期培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割 相同
(3)促性腺激素
(4)核移植的胚胎
(5) 可以清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物累積對細胞自身造成傷害；給細胞提供足夠的營養(yǎng) 動物體細胞分化程度高，表現(xiàn)其全能性困難（或動物胚胎細胞分 化程度低，表現(xiàn)其全能性容易）

【分析】圖中a是體外受精，b是早期胚胎培養(yǎng)，c是胚胎分割，d是胚胎移植，f是胚胎移植，g和f過程是個體發(fā)育過程。
【詳解】（1）試管牛技術首先是體外受精過程a、然后是早期胚胎培養(yǎng)b、再然后是胚胎移植f、最后是個體發(fā)育g。
（2）圖中利用了a體外受精、b胚胎的早期培養(yǎng)、c胚胎移植、d胚胎分割。
（3）圖中用激素處理良種奶牛，使卵細胞增多，此激素是促性腺激素。
（4）用于移植的胚胎可以來源于轉基因、核移植和體外受精等獲得的胚胎。
（5）細胞培養(yǎng)過程中可產(chǎn)生代謝廢物，營養(yǎng)液中的營養(yǎng)也會被消耗，定期更換培養(yǎng)液可以清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物累積對細胞自身造成傷害，給細胞提供足夠的營養(yǎng)。動物體細胞分化程度高，表現(xiàn)其全能性困難，胚胎細胞核移植技術相比，體細胞核移植技術的成功率更低。

七、實驗題
24．多菌靈是一種廣譜性有機殺菌劑，對多種由真菌引起的作物病害有一定的防治效果，在我國的使用范圍廣泛，但其殘留能引起肝病和染色體畸變。某科研小 組從長期受多菌靈污染的土壤中取樣，進行了多菌靈降解菌的分離，分離過程如下：

請回答下列有關問題。
(1)“第二步”所用的培養(yǎng)基是以多菌靈為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基的作用是_____；“第二步”的目的是_____。
(2)與“第二步”所用培養(yǎng)基相比，培養(yǎng)基A中還需要加入的成分是_____。涂布平板過程中的無菌操作有哪些？_____（至少答出2點）。
(3)對涂布的平板進行培養(yǎng)時，將已接種的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入恒 溫箱中培養(yǎng)，這樣操作的目的是_____。
(4)需要對菌液進行系列梯度稀釋的原因是_____，但稀釋度不宜過高的原因是_____。
【答案】(1) 允許特定種類的微生物生長，抑制或阻止其他種類微生物的生長 篩選并增加多菌靈降解菌的濃度
(2) 瓊脂 將沾有酒精的涂布器在酒精燈火焰上灼燒；涂布過程在酒精燈火焰附近進行
(3)檢測培養(yǎng)基是否滅菌徹底（或是否被污染）
(4) 只有在稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物才能被分散成單個細胞，并形成單個菌落 稀釋度過高時，得到的平板菌落數(shù)太少，實驗的偶然性太大

【分析】選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學、物理因素的抗性而設計的培養(yǎng)基，使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率。稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)，當樣品的稀釋度足夠高時，一個活菌會形成一個菌落。
【詳解】（1）選擇培養(yǎng)基是允許特定種類的微生物生長，抑制或阻止其他種類微生物的生長；“第二步”所用的培養(yǎng)基是以多菌靈為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，只有能夠分解多菌靈的微生物才能生長，所以該步驟目的是篩選并增加多菌靈降解菌的濃度。
（2）培養(yǎng)基A上可獲得菌落，應為固體培養(yǎng)基，所以與“第二步”所用培養(yǎng)基相比，培養(yǎng)基A中還需要加入瓊脂；涂布平板過程中，將沾有酒精的涂布器在火焰上灼燒引燃，涂布過程在酒精燈火焰附近進行，目的都是防止雜菌污染。
（3）對涂布的平板進行培養(yǎng)時，將接種的培養(yǎng)基和一個未接種的培養(yǎng)基都放入恒溫箱中培養(yǎng)，目的是作為對照，用以檢測培養(yǎng)基是否滅菌徹底（或是否被污染）。
（4）稀釋涂布平板法也是一種常用的微生物接種方法，這一方法常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。需要對菌液進行系列梯度稀釋的原因是只有在稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物才能被分散成單個細胞，并形成單個菌落；但稀釋度過高時，得到的平板菌落數(shù)太少，實驗的偶然性太大，故稀釋度也不宜過高。

八、綜合題
25．科研人員偶然從土壤中篩選出一種可以降解塑料的細菌，它能夠在30℃下經(jīng)過6個星期完全降解PET薄膜。進一步研究發(fā)現(xiàn)，這種細菌使用PET作為能量源，其中的ISF6酶在降解過程中起著決定性的作用?？蒲腥藛T為進一步檢測土壤中降解塑料的細菌數(shù)量，進行了如圖所示實驗。

（1）該實驗所采用的接種方法是________，對本實驗中所使用的培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃器皿常用滅菌方法為________。
（2）在接種前，為檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格，應進行的操作是________。
（3）有三位同學各取0．1mL的培養(yǎng)液接種培養(yǎng)，得到以下統(tǒng)計結果∶甲同學涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是47和53；乙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是43、47和51；丙同學涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是11、42和55。請對三位同學的統(tǒng)計結果進行評價，并簡單闡述統(tǒng)計結果正確與否的原因________。
（4）通過以上分析，每克樣品中細菌數(shù)的理論值為_________。除了上述的計數(shù)法外，還可采用在顯微鏡下直接計數(shù)。在相同條件下，采用這兩種方法對同一培養(yǎng)液進行計數(shù)時，在操作和計算均正確的前提下，兩種計數(shù)結果是否完全相同，原因是________。
【答案】 稀釋涂布平板法 干熱滅菌法（或高壓蒸汽滅菌） 隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時間 甲同學錯誤，因為甲同學只涂布了兩個平板，實驗數(shù)據(jù)說服力不夠;乙同學正確，乙同學涂布的三個平板結果相近;丙同學錯誤，丙同學其中一個平板的計數(shù)結果與另兩個相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，數(shù)據(jù)缺乏正確性。 4．7×107 不完全相同，涂布平板法結果偏低，因為該方法只能統(tǒng)計活菌的數(shù)量，且當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落;而顯微計數(shù)法的統(tǒng)計結果是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。
【分析】1、純化菌種（1）原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落。
（2）微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。
2、在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，有沒有被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中將溫度設置為37℃或適宜的溫度，倒置培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成，若有菌落生成，則說明培養(yǎng)基已經(jīng)被污染。
【詳解】（1）該實驗所采用的是稀釋涂布平板法接種，采用該種接種方法的目的是將聚集的細菌分散成單個細胞，從而獲得單個的菌落。常用干熱滅菌法對所使用的培養(yǎng)皿、錐形瓶等玻璃器皿進行滅菌處理。
（2）在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，有沒有被污染，被污染的培養(yǎng)基將會影響實驗結果?？梢噪S機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)一段時間，以檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格。
（3）菌落計數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30-300之間的平板進行計數(shù)，分析3名同學的數(shù)據(jù)可知，甲同學只涂布了兩個平板，實驗數(shù)據(jù)不足，說服力不夠，丙同學的涂布平板中有一個平板計數(shù)的結果與另兩個相差太遠，說明操作過程出現(xiàn)錯誤，數(shù)據(jù)缺乏正確性，乙同學涂布的三個平板結果相近，能夠作為正確實驗結果。
（4）由稀釋液梯度圖可知，經(jīng)過步驟①～②后，土壤中細菌稀釋倍數(shù)是102，②過程重復3次后的細菌稀釋倍數(shù)為105，菌落數(shù)=（3個平板平均菌落數(shù)÷涂布取樣量）×稀釋倍數(shù)，3個平板平均菌落數(shù)為（43+47+51）÷3=47個，則菌落數(shù)為（47÷0.1）×105=4.7×107個，故每克樣品中細菌數(shù)的理論值為4.7×107個，顯微鏡直接計數(shù)時，能夠觀察到死菌和活菌以及連在一起的菌落，而平板計數(shù)只能觀察到活菌，且平板計數(shù)時相連的菌落會被計算為一個菌落。
【點睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記微生物培養(yǎng)基礎知識，掌握菌落計數(shù)的計算，能運用所學知識，完成解答。

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