?解密23 微生物的培養(yǎng)與利用
A組 考點專練
考向一 培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)
1．（2019·福建廈門市·廈門外國語學校高二月考）如表是微生物培養(yǎng)基的成分。下列有關(guān)說法錯誤的是（　?。?br /> 編號
①
②
③
④
⑤
成分
（NH4）2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量/g
0.4
4.0
0.5
0.5
100mL


A．此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物
B．此表中的營養(yǎng)成分共有三類，即水、無機鹽、氮源
C．若除去①，此培養(yǎng)基可培養(yǎng)圓褐固氮菌
D．培養(yǎng)基中若加入氨基酸，則它可充當碳源、氮源
【答案】C
【解析】
【分析】
本題考查微生物的實驗室培養(yǎng)，旨在考查考生的知識遷移運用能力與綜合運用能力，解題關(guān)鍵是明確常見微生物的代謝類型及培養(yǎng)基的作用。
【詳解】
由題知，該培養(yǎng)基成分中含有水、無機鹽、氮源，但不含含碳有機物，可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物， A、B正確；圓褐固氮菌同化類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中可以沒有N源，但必須含含碳有機物，該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)圓褐固氮菌，C錯誤；培養(yǎng)基中若加入氨基酸，因氨基酸含有C和N元素，則它可充當碳源、氮源，D正確。
2．（2019·河北冀州中學（衡水市冀州區(qū)第一中學）高二月考）四環(huán)素、鏈霉素、紅霉素等抗生素能抑制細菌的生長，它們有的能阻礙細菌細胞壁的形成，導致細菌在低滲環(huán)境下膨脹破裂死亡；有的能干擾細菌核糖體的形成；有的能阻止tRNA和mRNA的結(jié)合。請根據(jù)以上事實判斷下列說法正確是
A．干擾細菌細胞壁形成過程是通過影響高爾基體的作用實現(xiàn)的
B．阻止tRNA和mRNA的結(jié)合會影響細菌蛋白質(zhì)的合成，抑制細菌的生長
C．細菌培養(yǎng)中為保證細菌的滲透壓穩(wěn)定應在培養(yǎng)液中加入HCO3-等無機鹽
D．干擾細菌核糖體的形成可以阻止遺傳信息的轉(zhuǎn)錄
【答案】B
【分析】
由題意知，抗生素能阻礙細菌細胞壁的形成，有的能干擾細菌核糖體的形成，有的能阻止tRNA和mRNA結(jié)合，細胞壁對細胞有支持和保護作用，而翻譯過程離不開核糖體及tRNA和mRNA結(jié)合，因此抗生素能阻斷翻譯過程。
【詳解】
A. 細菌屬于原核細胞，沒有高爾基體，A錯誤；
B. 蛋白質(zhì)是生命活動的承擔者，阻止tRNA和mRNA的結(jié)合會影響細菌蛋白質(zhì)的合成，會抑制細菌的生長，B正確；
C. 細菌培養(yǎng)中為保證細菌的滲透壓穩(wěn)定，應加入一定量的NaCl維持細胞內(nèi)外滲透壓平衡，而HPO42-、HCO3-等起調(diào)節(jié)pH 的作用，C錯誤；
D. 干擾細菌核糖體的形成的抗生素能阻止翻譯過程，而不是阻止轉(zhuǎn)錄過程，D錯誤。
3．（2020·大通回族土族自治縣第一完全中學高二期中）如表為某培養(yǎng)基的配方，下列有關(guān)敘述正確的是
成分
牛肉膏
葡萄糖
K2HPO4
伊紅
美藍
青霉素
瓊脂
蒸餾
含量
10 g
10 g
2 g
0.4g
0.065 g
1萬單位
適量
1000 mL


A．此培養(yǎng)基是天然鑒別培養(yǎng)基
B．能在此培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌，擬核上有抗青霉素的基因
C．此培養(yǎng)基可以用于選育轉(zhuǎn)基因大腸桿菌菌種的基因工程的操作過程中
D．此培養(yǎng)基可以用來檢測自來水中細菌含量是否符合飲用水標準
【答案】C
【解析】
【詳解】
A、此培養(yǎng)基伊紅美藍可用于鑒別大腸桿菌，但該培養(yǎng)基中加入了種類和含量已知的化學成分，屬于半合成培養(yǎng)基，不屬于天然培養(yǎng)基，A錯誤；
B、大腸桿菌中青霉素抗性基因存在于質(zhì)粒上，B錯誤；
C、此培養(yǎng)基含有青霉素，可用于篩選含青霉素抗性基因的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，C正確；
D、伊紅美藍只能用于鑒別大腸桿菌，不能鑒別其它細菌，所以此培養(yǎng)基只能用于檢測自來水中大腸桿菌含量是否符合飲用水標準，D錯誤。
故選C。
4．（2019·靜寧縣第一中學高二期末）用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中尿素分解菌的數(shù)目時，為了提高實驗結(jié)果的可信度，往往要設置對照，對于對照組的要求不包括
A．對照組培養(yǎng)基也嚴格滅菌
B．對照組和實驗組放在相同的條件下培養(yǎng)
C．所用培養(yǎng)基成分及pH值大小完全與實驗組一致
D．培養(yǎng)基的量的大小，與實驗組必須絕對相同
【答案】D
【分析】
設置對照的目的是為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，以提高實驗結(jié)果的可信度。自變量是培養(yǎng)基是否接種培養(yǎng)物，因變量是培養(yǎng)基表面是否有菌落生長，其它對培養(yǎng)物的生長有影響的無關(guān)變量應控制相同且適宜。對照組應為未接種培養(yǎng)物的培養(yǎng)基，實驗組為接種培養(yǎng)物的該培養(yǎng)基。
【詳解】
由以上分析可知：對照組培養(yǎng)基也應嚴格滅菌，且不接觸任何生物，A正確；對照組和實驗組的培養(yǎng)基應放在相同的條件下培養(yǎng)，所用培養(yǎng)基成分及pH大小完全與實驗組一致，B、C正確；對照組培養(yǎng)基的量的大小與實驗組不一定絕對相同，D錯誤。
5．（2020·上海市涇南中學高二期中）下表是培養(yǎng)某種細菌的培養(yǎng)基。以下敘述錯誤的是（ ）
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
伊紅
美藍
蒸餾水
10g
5g
5g
2g
0.4g
0.065g
1000mL

A．該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基
B．表中為該細菌提供碳源的只有乳糖
C．表中為該細菌提供氮源的只有蛋白胨
D．該培養(yǎng)基可以用來鑒定該細菌是否是大腸桿菌
【答案】B
【分析】
培養(yǎng)基的主要成分是水、無機鹽、碳源和氮源，培養(yǎng)微生物時還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。
【詳解】
A、由表中成分可知，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；?
B、表中提供碳源的有蛋白胨、乳糖、蔗糖，B錯誤；?
C、表中為該細菌提供氮源的只有蛋白胨，C正確；?
D、要鑒別所分離出的細菌是否為大腸桿菌，則應該在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍，觀察是否出現(xiàn)黑色菌落，D正確。?
故選B。

考向二 微生物的計數(shù)方法
6．（2020·貴州省思南中學高二期中）下列關(guān)于微生物的培養(yǎng)和分離的敘述，正確的是（ ）
A．倒平板操作時，培養(yǎng)基倒好后應立即將其倒過來放置
B．菌落的形狀、大小、顏色等不能作為鑒別不同微生物的依據(jù)
C．分離分解尿素的細菌時，應從周圍出現(xiàn)透明圈的菌落中挑取菌株
D．分離纖維素分解菌時，可在倒平板時加入剛果紅染色，然后接種分解菌
【答案】D
【分析】

微生物分離：指依據(jù)微生物的特征，采用各種方法從含菌樣品中獲得由單一個體（如單一菌體或孢子）或一段菌絲生長繁殖形成的微生物群體的過程。常用的分離方法有平板劃線法，稀釋涂布法。 平板分離法的基本原理包括兩個方面：（1）選擇適合于待分離微生物生長條件，如營養(yǎng)、酸堿度、溫度和氧的要求或加入某抑制劑造成只利于該微生物生長的環(huán)境。（2）微生物在固體培養(yǎng)基上生長形成的單個菌落可以是由一個細胞繁殖而成的集合體，因此可以通過挑取單菌落而獲得一種純培養(yǎng)。
【詳解】

A、倒好培養(yǎng)基后應待平板冷卻凝固后再將平板倒過來放置，以防止冷凝水倒流污染培養(yǎng)基，A錯誤；
B、菌落的特征，如形狀、大小、顏色等，可作為鑒別不同微生物的依據(jù)，B錯誤；
C、分解尿素的細菌在分解尿素時產(chǎn)生氨氣，氨氣能使酚紅指示劑顯紅色，從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株，C錯誤；
D、剛果紅染色法一般有兩種：一是先培養(yǎng)微生物長出菌落后，再加入剛果紅進行顏色反應，再加入一定濃度NaCl將多余的剛果紅帶走；一種是配制好培養(yǎng)基滅菌后，倒平板時加入滅菌處理的剛果紅，再接種微生物培養(yǎng)直至產(chǎn)生透明圈，D正確。
故選D。

7．（2020·北京密云區(qū)·高三一模）自然界中所有的微生物（ ）
A．都是原核生物 B．都必須在顯微鏡下才能看到
C．都可快速繁殖 D．在生態(tài)系統(tǒng)中都屬于分解者
【答案】C
【分析】
微生物包括：細菌、真菌以及一些小型的原核生物、顯微藻類等在內(nèi)的一大類生物群體以及病毒，它個體微小，與人類關(guān)系密切。微生物的生長條件：水分、適宜的溫度、有機物（營養(yǎng)物質(zhì)）等（病毒只能寄生在活細胞里）。
【詳解】
A、酵母菌等真菌也是微生物，屬于真核生物，A錯誤；
B、有些微生物形成菌落可以通過肉眼觀察到，B錯誤；
C、微生物具有個體微小，可快速繁殖等特點，C正確；
D、分解者一般指的是營腐生生活的細菌、真菌等微生物，但是微生物中也有生產(chǎn)者如硝化細菌、消費者如肺結(jié)核桿菌，D錯誤；
故選C。
8．（2019·山西祁縣中學高二月考）下列有關(guān)培養(yǎng)基和菌種鑒定的敘述正確的是（ ）
A．制作固體培養(yǎng)基必須加入的物質(zhì)是瓊脂
B．可利用液體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型
C．菌落的表面光滑與否、有無莢膜是R型和S型菌種鑒定的依據(jù)
D．在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌
【答案】D
【分析】
本題考查微生物培養(yǎng)、鑒定和利用的有關(guān)知識。菌落是指由一個微生物細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見的子細胞群落。菌落形態(tài)包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地、顏色和透明程度等，每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征。不同種或同種在不同的培養(yǎng)條件下，菌落特征是不同的，這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義。
【詳解】
A、固體培養(yǎng)基需加入凝固劑，瓊脂是常用的，但不是唯一的，A錯誤；
B、鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，可利用固體培養(yǎng)基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型，B錯誤；
C、菌落的大小、顏色、隆起程度等特征都可作為菌種鑒定的依據(jù)，但是有無莢膜通過肉眼無法觀察，C錯誤；
D、尿素分解菌可以分解尿素形成了氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，用酚紅試劑即可鑒定出，D正確。
故選D。
9．（2020·山西省平遙中學校高二月考）關(guān)于微生物的敘述，完全正確的是（　　）
①古細菌的細胞壁與大腸桿菌的細胞壁成分不同
②青霉素不能殺滅肝炎病毒
③酵母菌通過芽孢進行繁殖
④自生固氮菌為自養(yǎng)微生物
A．①② B．③④ C．①②④ D．②③④
【答案】A
【詳解】
①古細菌的細胞壁的成分與真核細胞一樣，而大腸桿菌的細胞壁成分由肽聚糖構(gòu)成，正確；
②青霉素能抑制細菌的細胞壁—肽聚糖的合成，而肝炎病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，所以青霉素不能殺滅肝炎病毒，正確；
③酵母菌能進行有性生殖和無性生殖，在進行無性生殖時，是通過出芽生殖的方式進行繁殖，錯誤；
④自生固氮菌能進行固氮，但不能將無機物合成有機物，因此是異養(yǎng)微生物，錯誤。
故選：A。
10．（2014·上海黃浦區(qū)·）下列關(guān)于微生物的有關(guān)敘述正確的是（ ）
A．莢膜是細菌的休眠體，能抗不良環(huán)境 B．酵母菌通過芽孢體進行繁殖
C．黏菌與乳酸菌都屬于真核生物 D．古細菌通常對利福平不敏感
【答案】D
【詳解】
A、芽孢是細菌遇到不良環(huán)境時可以形成芽孢來度過不良環(huán)境。有些細菌（多為桿菌）在一定條件下，細胞壁加厚，細胞質(zhì)高度濃縮脫水所形成的一種抗逆性很強的球形或橢圓形的休眠體。芽孢最主要的特點就是抗性強，對高溫、紫外線、干燥、電離輻射和很多有毒的化學物質(zhì)。都有很強的抵抗性。遇到適宜的環(huán)境，芽孢又恢復生命現(xiàn)象，一個芽孢只變成一個細菌，A錯誤；
B、從生殖方式上看，酵母菌條件好時進行出芽生殖，條件不好進行孢子生殖，B錯誤；
C、黏菌是一群類似霉菌的生物，會形成具有細胞壁的包子，但是生活史中沒有菌絲的出現(xiàn)，而有一段黏黏的時期，因而得名。乳酸菌也叫乳酸桿菌，是一種桿狀的細菌，C錯誤；
D、古細菌是一類很特殊的細菌，多生活在極端的生態(tài)環(huán)境中。具有原核生物的某些特征，如無核膜及內(nèi)膜系統(tǒng)；也有真核生物的特征，如以甲硫氨酸起始蛋白質(zhì)的合成、核糖體對氯霉素、利福平不敏感、RNA聚合酶和真核細胞的相似、DNA具有內(nèi)含子并結(jié)合組蛋白等，D正確。
故選：D。

考向三 微生物的篩選與鑒別
11．（2020·遼寧沈陽市·高二期末）以下有關(guān)生物技術(shù)實踐的敘述中，正確的是
A．用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數(shù)目時，測定值可能比實際值大
B．以尿素為唯一氮源并加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基可分離并鑒定土壤中分解尿素的細菌
C．制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時操作順序為計算、稱量、溶化、滅菌、調(diào)pH
D．制備果酒過程中，每隔一段時間擰松瓶蓋，目的是向瓶中通氣保證發(fā)酵順利
【答案】B
【分析】
考查生物技術(shù)實踐中相關(guān)實驗的知識點。
【詳解】
A、用稀釋涂布平板法測定某土壤浸出液中活菌數(shù)目時，可能有多個菌體長成的菌落連成一個，統(tǒng)計時認為是由一個活菌形成的菌落，統(tǒng)計結(jié)果會比實際值小，錯誤；
B、在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pH升高，在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細菌后，若pH升高，指示劑變紅，就可以準確地鑒定該細菌能夠分解尿素，正確；
C、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時操作順序為計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板，錯誤；
D、制備果酒的過程中，擰松瓶蓋是為了放出發(fā)酵瓶內(nèi)產(chǎn)生的二氧化碳氣體，避免瓶內(nèi)壓強過大，發(fā)酵過程中不能再通入氧氣，否則會影響果酒的質(zhì)量，錯誤。
故選B。
12．（2020·祿勸彝族苗族自治縣第一中學高二期中）關(guān)于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗的敘述正確的是
A．培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，該細菌與硝化細菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的
B．選擇菌落數(shù)在30～300間的所有平板進行計數(shù)，以平均數(shù)為實驗結(jié)果
C．對10mL土樣稀釋106倍后，取0.1 mL該溶液進行重復的涂布實驗，測得的菌落數(shù)分別為18、234、276，則該10 mL土樣中分解尿素的細菌數(shù)為2.55×108個
D．應該設置對照以排除非測試因素對實驗結(jié)果的干擾，提高可信度
【答案】D
【解析】
【分析】
土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的稀釋倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30～300之間的實驗組平板進行計數(shù)。
【詳解】
從土壤中分離分解尿素的細菌，培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，尿素分解菌為異養(yǎng)型，利用的是有機碳源，硝化細菌是自養(yǎng)型，以二氧化碳為碳源，二氧化碳為無機物，A錯誤；用稀釋涂布平板法測定同一樣品中的細菌數(shù)時，為了保證結(jié)果準確，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，確定對照組無菌后，應將菌落數(shù)明顯最少和最大的平板舍棄，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中的細菌總數(shù)，B錯誤；對10mL土樣稀釋106倍后，取0.1 mL該溶液進行重復的涂布實驗，測得的菌落數(shù)分別為18、234、276，則該10 mL土樣中分解尿素的細菌數(shù)為[(234＋276)÷2]÷0.1×106×10＝2.55×1010個，C錯誤；分離微生物時，需要設置不接種的培養(yǎng)基與實驗組一起培養(yǎng)做空白對照，以排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的干擾，提高可信度，D正確。
13．（2019·全國高三專題練習）下列關(guān)于剛果紅染色法的說法中，正確的是
A．先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，不需用氯化鈉溶液洗去浮色
B．倒平板時就加入剛果紅，可在培養(yǎng)皿中先加入lmlCR溶液后加入100ml培養(yǎng)基
C．培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的原因是因為纖維素被分解為葡萄糖導致的
D．倒平板時就加入剛果紅，長期培養(yǎng)剛果紅有可能被其他微生物分解形成透明圈
【答案】D
【解析】
常用的剛果紅染色法有兩種：一是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應，此種方法需用氯化鈉溶液洗去浮色，二是在倒平板時就加入剛果紅，此種方法則不需要用氯化鈉溶液洗去浮色，A錯誤；倒平板時就加入剛果紅，可在培養(yǎng)皿中先加入10mg/mLCR溶液，滅菌后，按照每200mL培養(yǎng)基加入1ml的比例加入CR溶液，B 錯誤；在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，C 錯誤；倒平板時就加入剛果紅，由于有些微生物能降解色素，長期培養(yǎng)剛果紅有可能被其他微生物分解而形成透明圈，D正確。
14．（2020·甘肅武威市·武威十八中高三月考）測定土壤中細菌數(shù)量一般選用104、105和106倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)，而測定真菌的數(shù)量一般選用102、103和104倍稀釋，其原因是
A．細菌個體小，真菌個體大
B．細菌易稀釋，真菌不易稀釋
C．細菌在土壤中數(shù)量比真菌多
D．隨機的，沒有原因
【答案】C
【詳解】
土壤中的微生物大約70%—90%是細菌，真菌的數(shù)量要比細菌少。樣品的稀釋度越高，在平板上生成的菌落數(shù)目就越少。在實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30—300之間，適于平板計數(shù)，所以細菌的稀釋倍數(shù)要高于真菌的稀釋倍數(shù)。綜上分析，C項正確，A、B、D三項均錯誤。
15．（2020·邢臺市第二中學高二期末）下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗”的敘述，不正確的是
A．用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，指示劑不變紅
B．分解尿素的細菌能產(chǎn)生脲酶，將尿素分解產(chǎn)生氨和二氧化碳
C．統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時，以菌落數(shù)在30—300的平板進行計數(shù)
D．將實驗組和對照組平板倒置，30— 35℃恒溫培養(yǎng)24?48小時
【答案】A
【解析】
用尿素為唯一氮源、加有酚紅指示劑的培養(yǎng)基培養(yǎng)尿素分解菌，尿素分解菌將尿素分解為氨和二氧化碳，氨使培養(yǎng)基堿性增強，指示劑變紅，A項錯誤，B項正確；統(tǒng)計尿素分解菌的數(shù)目時，以菌落數(shù)在30—300的平板進行計數(shù)，小于30說明稀釋倍數(shù)太大，菌液濃度分布不均，各平板之間菌落數(shù)差異會很大，造成誤差；大于300菌落的生長受到抑制,并且難以區(qū)分各個菌落準確計數(shù),造成誤差，C項正確；為排除培養(yǎng)基制備過程中可能造成的污染，應設置不接種菌液的對照組平板，將實驗組和對照組平板倒置，防止皿蓋上的冷凝水珠滴落在培養(yǎng)基上，細菌的培養(yǎng)一般需要30— 35℃恒溫培養(yǎng)24?48小時，D項正確。

考向四 微生物的利用
16．（2020·山西省平遙中學校高二月考）關(guān)于生物技術(shù)實踐中的有關(guān)檢驗，不正確的是
A．在果酒制作實驗中，檢驗是否有酒精產(chǎn)生，正確的操作步驟是先在試管中加入適量的發(fā)酵液，然后再加入硫酸和重鉻酸鉀的混合液
B．在微生物培養(yǎng)中，檢驗培養(yǎng)基是否被污染的方法是用一組不接種或接種無菌水的培養(yǎng)基與接種培養(yǎng)物的培養(yǎng)基一起培養(yǎng)
C．檢驗以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基是否分離出了分解尿素的細菌，方法是在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，則可初步鑒定該細菌能分解尿素
D．鑒定胡蘿卜素粗品的可用紙層析法，原理是不同的色素分子在層析液中的溶解度不同，隨層析液在濾紙上擴散速度不同；若樣品中有雜質(zhì)，則會出現(xiàn)不同的色素點
【答案】A
【分析】
酒精與酸性重鉻酸鉀溶液反應呈現(xiàn)灰綠色，因此可以用酸性重鉻酸鉀溶液檢測酒精；分解尿素的菌能將尿素轉(zhuǎn)化成氨氣，使培養(yǎng)基堿性增強，pH升高，酚紅指示劑會變紅；萃取法提取出的胡蘿卜素粗品可通過紙層析法進行分離和鑒定，利用的原理是色素在層析液中的溶解度不同，彼此分離的擴散速度不同，胡蘿卜素擴散速度最快。
【詳解】
在果酒制作實驗結(jié)束時要檢驗是否有酒精產(chǎn)生，正確的操作步驟是先在試管中加入適量的發(fā)酵液，然后再加入3mol/L的硫酸3滴，混勻后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察到橙色的重鉻酸鉀變成灰綠色，A錯誤；在微生物培養(yǎng)中，檢驗培養(yǎng)基是否被污染的方法是用一組不接種或接種無菌水的培養(yǎng)基與接種培養(yǎng)物的培養(yǎng)基一起培養(yǎng)，B正確；檢驗以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)是否分離出了分解尿素的細菌，方法是在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，則說明分離成功，C正確；檢驗胡蘿卜素純度的方法是紙層析法，原理是不同的色素分子在層析液中的溶解度不同，故隨層析液在濾紙上擴散的速度不同，若樣品中有雜質(zhì)，則會出現(xiàn)不同的色素點（帶），D正確。
17．（2019·四川南充市·閬中中學高二期中）某生物興趣小組以帶有落葉的表層土壤(深5cm左右)為實驗材料，研究土壤微生物在適宜溫度下的分解作用，對土壤處理情況見下表，與此有關(guān)的敘述不正確的是

A．探究的問題可以是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對落葉的分解作用
B．預期結(jié)果是 1、3 組的落葉不被分解，2、4 組中的落葉被不同程度的分解
C．為了控制實驗中的無關(guān)變量，作為實驗材料的落葉也應進行滅菌處理
D．該實驗的自變量為土壤是否滅菌處理
【答案】D
【分析】
根據(jù)題意和圖表分析可知：該實驗的自變量是土壤濕潤條件和是否滅菌，4個實驗組相互對照；落葉上面也有微生物，也可以分解落葉，所以也應該進行滅菌處理；因為1、3組土壤滅菌后，土壤中微生物被殺滅，無法分解落葉，2、4組沒有滅菌，存在微生物，因其土壤的濕潤條件不同，分解的落葉量也不相同。
【詳解】
實驗組2組合4組可以形成對照，變量是土壤的濕潤程度，來研究土壤微生物對落葉的分解作用，A正確；1組和3組由于沒有微生物，落葉不被分解，2組和4組由于有微生物，落葉不同程度的被分解，B正確；為了控制實驗中的無關(guān)變量，作為實驗材料的落葉也應進行滅菌處理，消除微生物的影響，C正確；該實驗的變量有兩個，一個是滅菌、不滅菌，一個是濕潤、不濕潤．自變量是滅菌、不滅菌，在濕潤條件下1、2形成對照，在干燥條件下3、4形成對照，所以1、3分別是兩組對照實驗的對照組，D錯誤。
18．（2019·河北冀州中學（衡水市冀州區(qū)第一中學）高二月考）下列有關(guān)現(xiàn)代生物技術(shù)的敘述中，不正確的是
A．運用固定化酶和固定化細胞進行生產(chǎn)時，都需要為其提供營養(yǎng)物質(zhì)
B．果酒和果醋制作中利用的微生物，結(jié)構(gòu)上主要差別在于有無核膜
C．采用稀釋涂布平板法和平板劃線法都能分離純化菌種，得到單細胞菌落
D．探究加酶洗衣粉的最適溫度時，洗衣粉量、污漬的種類屬于無關(guān)變量
【答案】A
【詳解】

A. 運用固定化酶和固定化細胞進行生產(chǎn)時，都需要為其提供生產(chǎn)所需的底物，酶的底物不能稱為營養(yǎng)物質(zhì)，A錯誤；
B. 果酒和果醋制作中利用的微生物分別是酵母菌和醋酸菌，結(jié)構(gòu)上主要差別在于有無核膜，B正確；
C. 采用稀釋平板法和平板劃線法都能分離純化菌種，得到單細胞菌落，區(qū)別在于前者可用于計數(shù)，后者不能，C正確；
D. 探究加酶洗衣粉的最適溫度時，溫度是自變量，洗衣粉量、污漬的種類屬于無關(guān)變量，D正確。
故選A符合題意。
19．（2020·長春市第一中學高二期中）取9個潔凈培養(yǎng)皿，均分為三組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），各組分別加入等量的不同培養(yǎng)基，每個平板均接種0.1mL大腸桿菌菌液，37℃培養(yǎng)36小時后，統(tǒng)計菌落數(shù)（見表），以下相關(guān)敘述錯誤的是（　?。?br /> 組別
培養(yǎng)基
各平板的菌落數(shù)
1
2
3
Ⅰ
瓊脂、C6H12O6、NH4NO3
30
31
27
Ⅱ
瓊脂、C6H12O6、NH4NO3、維生素
169
178
193
Ⅲ
瓊脂、NH4NO3、維生素
0
0
1


A．Ⅰ組和Ⅱ組說明維生素可以促進大腸桿菌生長繁殖
B．Ⅱ組和Ⅲ組說明大腸桿菌正常生長需要葡萄糖
C．三組實驗均采用了稀釋涂布平板法，以便菌落計數(shù)
D．三組實驗所使用的培養(yǎng)基均需62℃、30min滅菌
【答案】D
【分析】
考點是微生物的培養(yǎng)，涉及滅菌方法、接種方法和實驗結(jié)果的分析，屬于基本知識和基本方法的考查，
【詳解】
Ⅰ組和Ⅱ組培養(yǎng)基成分的差異是有無維生素，結(jié)果可以說明維生素可以促進大腸桿菌生長繁殖，A正確.
Ⅱ組和Ⅲ組的差異是有無葡萄糖，結(jié)果說明沒有葡萄糖大腸桿菌不能正常生長，B正確.
稀釋涂布平板法培養(yǎng)大腸桿菌便于菌落計數(shù)，C正確.
對培養(yǎng)基加熱到62℃不能徹底滅菌，應采用高壓蒸汽滅菌，D錯誤.
20．（2020·遼寧沈陽市·沈陽鐵路實驗中學高二期中）幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)。實驗基本步驟如下：請選擇下列敘述錯誤的一項：（ ）

A．在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置，若不倒置培養(yǎng)，將導致無法形成單菌落
B．在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有脲酶，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落變黑
C．臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標記的尿素分解為NH3和14CO2
D．步驟X表示接種，在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是為了獲得單菌落
【答案】B
【分析】
幽門螺桿菌含有脲酶，能分解尿素為菌體提供氮源，因此在配制培養(yǎng)基時要加入尿素；加入酚紅指示劑的目的是檢驗是否有Hp存在，若有Hp存在會分解尿素，培養(yǎng)基pH會升高，酚紅指示劑將變紅；用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將14C標記的尿素分解為NH3和14CO2，據(jù)此分析。
【詳解】
A. 在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中，若不倒置培養(yǎng)，將導致無法形成單菌落，A正確；
B. 在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有脲酶，它能以尿素作為氮源；若有Hp存在會分解尿素，培養(yǎng)基pH會升高，酚紅指示劑將變紅，B錯誤；
C. 臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，幽門螺桿菌含有脲酶，能分解尿素為菌體提供氮源，故Hp能將14C標記的尿素分解為NH3和14CO2，C正確；
D. 步驟X表示接種，在無菌條件下操作時，先將菌液稀釋，然后將菌液涂布到培養(yǎng)基平面上，菌液稀釋的目的是為了獲得單菌落，D正確。

B組 專題綜合練
1．（2020·廣西桂林市·桂林十八中高二期中）以下實驗中，觀測指標不正確的是 （ ）
A．當有果酒產(chǎn)生后，會在酸性條件下與重鉻酸鉀反應呈灰綠色。
B．纖維素分解菌分解纖維素后，加有剛果紅的培養(yǎng)基由無色變成紅色
C．用伊紅-美藍培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，菌落會呈現(xiàn)黑色
D．分解尿素的細菌會使培養(yǎng)基中PH升高，使酚紅指示劑變紅
【答案】B
【分析】
尿素分解菌能夠產(chǎn)生脲酶，在脲酶的作用下能夠?qū)⒛蛩胤纸鉃榘?，使pH升高與酚紅指示劑反應呈紅色．剛果紅染液可以與纖維素反應呈紅色，纖維素分解菌能夠?qū)⒗w維素分解而出現(xiàn)無色的透明圈．伊紅美藍指示劑能夠?qū)Ｒ昏b別大腸桿菌菌落，其菌落呈藍紫色或黑色的且有金屬光澤。淀粉與碘反應呈藍色，淀粉分解菌能夠分解淀粉而使菌落周圍出現(xiàn)透明圈。
【詳解】
A、當有果酒產(chǎn)生后，會在酸性條件下與重鉻酸鉀反應呈灰綠色，A正確；
B、剛果紅染液可以與纖維素反應呈紅色，纖維素分解菌能夠?qū)⒗w維素分解而出現(xiàn)無色的透明圈，說明該細菌能分解纖維素，B錯誤；
C、伊紅美藍指示劑能夠?qū)Ｒ昏b別大腸桿菌菌落，其菌落呈藍紫色或黑色且具有金屬光澤，C正確；
D、尿素為唯一氮源的培養(yǎng)集中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，如果指示劑變紅，說明該細菌能分解尿素，D正確。
故選B。
2．（2020·湖北孝感市·高二月考）漆酶屬于木質(zhì)降解酶類，在環(huán)境修復、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用途。下圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程，相關(guān)敘述正確的是

A．飲用水中含有大量微生物，是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品
B．選擇培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物作為唯一碳源
C．在已涂布的平板上直接劃線可以進一步純化獲得單菌落
D．斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物，可在常溫下長期保存菌株
【答案】B
【解析】
【分析】
1、根據(jù)題意和圖示分析可知：分離、純化和保存菌株的一般過程為：取樣→制成樣品懸液→涂布→劃線→接種。?
2、分離和純化細菌需多次進行選擇培養(yǎng)。?
3、利用平板劃線法純化目的菌，接種環(huán)在劃線前后均要進行灼燒滅菌。
【詳解】
生活污水中含有大量微生物，但不一定含有產(chǎn)漆酶的菌株，分離產(chǎn)漆酶菌株的取樣應該到對應富含木質(zhì)素的環(huán)境中，A錯誤；篩選培養(yǎng)基中加入漆酶的底物作為唯一碳源，只有能夠產(chǎn)生漆酶的菌株才能在該培養(yǎng)基上生長，其它微生物因缺少碳源而不能生長，培養(yǎng)后可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落，B正確；在涂布平板上長出的菌落可以通過平板劃線法或稀釋涂布平板法進一步純化，C錯誤；斜面培養(yǎng)基能增大接種面積，可在低溫下保存菌株，但不能長期保存，D錯誤。
故選B。
3．（2020·全國高三課時練習）下列是關(guān)于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述，其中錯誤的是（ ）
A．用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各1mL，分別涂布于各組平板上
C．統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目低
D．確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進行計數(shù)
【答案】B
【分析】
檢測土壤中細菌總數(shù)，應該進行計數(shù)，根據(jù)選項，可以看出采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進行計數(shù)。
【詳解】
A、首先要進行培養(yǎng)基的制備、用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板，A正確；
B、取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL，分別涂布于各組平板上，B錯誤；
C、當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目低，C正確；
D、確定對照組無菌后，選擇菌落數(shù)在30～300的進行記數(shù)，求起平均值，再通過計算得出土壤中細菌總數(shù)，D正確。
故選B。
4．（2020·全國高三課時練習）如圖為分離和純化分解甲醛細菌的實驗過程，其中LB培養(yǎng)基能使菌種成倍擴增，以下說法正確的是

A．需要對活性污泥作滅菌處理
B．②中LB培養(yǎng)基應以甲醛為唯一碳源
C．目的菌種異化作用類型為厭氧型
D．經(jīng)⑤處理后，應選擇瓶中甲醛濃度最低的一組進一步純化培養(yǎng)
【答案】D
【解析】
該實驗是從活性污泥中分離和純化分解甲醛細菌，則活性污泥不能滅菌，A錯誤；LB培養(yǎng)基使菌種成倍擴增，應用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，B錯誤；圖示分解甲醛細菌是在培養(yǎng)皿中進行，屬于需氧型細菌，C錯誤；經(jīng)⑤處理后，瓶中甲醛濃度降低，甲醛濃度最低的一組中分解甲醛細菌純度最高，可進一步純化培養(yǎng)，D正確。
5．（2020·云南大理白族自治州·高二期末）下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的過程示意圖，有關(guān)敘述錯誤的是

A．在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時，應先調(diào)pH值后高壓蒸汽滅菌
B．步驟③純化分解尿素的原理是將聚集的細菌分散，可以獲得單細胞菌落
C．步驟③采用涂布平板法接種，并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素
D．步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力
【答案】C
【詳解】
配制培養(yǎng)基時，應先調(diào)pH值后高壓蒸汽滅菌，A項正確；步驟③純化分解尿素的原理是將聚集的細菌通過涂布平板法分散，獲得單細胞菌落，B項正確；步驟③篩選分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中應以尿素為唯一氮源，C項錯誤；步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種，比較細菌分解尿素的能力，D項正確。


二、綜合題
6．（2020·全國高三課時練習）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。
回答下列問題：
（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制___________的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于___________培養(yǎng)基。
（2）M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有___________（答出兩點即可）。氮源進入細菌后，可參與合成的生物大分子有___________（答出兩點即可）。
（3）若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，加入的顯色劑是___________，該方法能篩選出產(chǎn)生淀粉酶微生物的原理___________。
（4）甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：
甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149，取平均值133。
乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176，取平均值124。
有人認為這兩位同學的結(jié)果中，乙同學的結(jié)果可信度低，其原因是：_____________________。
【答案】（1）細菌 選擇 （2）碳源、無機鹽 蛋白質(zhì)、DNA、RNA （3）碘液 淀粉遇碘顯藍色，產(chǎn)淀粉酶菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈 （4）乙同學的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復性差
【分析】
本題考查篩選某種微生物的原理，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分等相關(guān)知識點，在利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計數(shù)目時，要注意稀釋倍數(shù)的選取以及平板數(shù)一般要滿足30-300個才符合要求。
【詳解】
（1）M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，說明M培養(yǎng)基能滿足真菌的生長，而能抑制其它微生物的生長，鏈霉素是一種抗生素，可以抑制細菌的生長。加入了鏈霉素的培養(yǎng)基能篩選出真菌，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。
（2）微生物生長需要多種營養(yǎng)物質(zhì)除氮源外，還需要碳源、無機鹽、水以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)等。氮元素是蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子的組成元素，因此氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸（DNA、RNA）。
（3）淀粉與碘液會變成藍色，篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物，依據(jù)淀粉遇碘液顯藍色，產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈，再根據(jù)透明圈，來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。
（4）乙同學結(jié)果不合理，因為1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊較大，結(jié)果的重復性差，不能簡單的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。
7．（2020·全國高三課時練習）已知一種有機物X（僅含有C、H兩種元素）不易降解，會造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌（目標菌）。
Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X（5g/L）。
Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量），X（15g/L）。
Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉（5g/L），硝酸銨（3g/L），其他無機鹽（適量）。X（45g/L）。
回答下列問題。
（1）在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基為微生物提供碳源的有機物是_________。
（2）若將土壤懸浮液種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌比例會_________，其原因是_________。
（3）Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標菌并對菌落進行計數(shù)，接種時，應采用的方法是______________。
（4）假設從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供_________和_________。
【答案】（1）牛肉膏、蛋白胨 X （2）下降 不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細菌能夠增殖 （3）稀釋涂布平板法 （4）能量 合成其他物質(zhì)的原料
【分析】
1、選擇培養(yǎng)基的概念：在微生物學中，將允許特定微生物種類生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)基必須是固體培養(yǎng)基，本題中選擇培養(yǎng)基中的唯一碳源是有機物X，這樣能分解X的微生物能夠從該有機物獲得碳源，其他微生物由于無法獲得碳源而不能生存。
2、常用的接種微生物的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液涂布到固體瓊脂培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，將聚集在一起的微生物分散成單個細胞，獲得由單個細胞繁殖而來的菌落，微生物的計數(shù)通常采用稀釋涂布平板法。
【詳解】
（1）氮源是微生物生長需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，是含氮化合物，可為微生物的生長提供氮元素，牛肉膏、蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)，因此在1號培養(yǎng)基中，可為微生物提供氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長所需要的一類營養(yǎng)物質(zhì)，可為微生物的生長提供碳元素，而有機物均含碳元素，II、III號培養(yǎng)基均含有有機物X，因此，II、III號培養(yǎng)基為微生物的生長提供碳源的均為有機物X。
（2）由于II號培養(yǎng)基含有的碳源只有有機物X，因此若將土壤懸浮液接種在II號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后，不能降解X的細菌由于無法獲得碳源而無法增殖導致其比例減少。
（3）微生物的接種方法很多，最常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法，由于稀釋涂布平板法中，稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培養(yǎng)后，在培養(yǎng)基表面形成的一個菌落是由菌液中的一個活菌繁殖而來，所以常用來進行微生物的計數(shù)。
（4）丙酮酸參與有氧呼吸的第二階段，能被分解產(chǎn)生能量，且丙酮酸可作為許多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物，因此其可為微生物的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。
8．（2020·全國高三課時練習）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌的分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：
（1）該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是____________________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為__________________。
（2）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過__________滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是_______________________。
（3）示意圖A和B中，__________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

（4）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中__________的含量，同時可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高__________的利用率。
【答案】（1）檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107 （2）灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落 （3） B （4）溶解氧 營養(yǎng)物質(zhì)
【詳解】
（1）微生物培養(yǎng)過程應該進行無菌操作，配制的培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進行培養(yǎng)以檢測培養(yǎng)基滅菌是否徹底；由題意知1ml水樣中的菌落數(shù)是（39+38+37）÷3÷0．1×100=3．8×104個，每升水樣中的活菌數(shù)為3．8×104×103=3．8×107。
（2）對接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個細胞繁殖而來的菌落。
（3）分析題圖可知，A培養(yǎng)皿采用的接種方法是平板劃線法，B培養(yǎng)皿采用的接種方法是稀釋涂布平板法。
（4）由題意可知，振蕩培養(yǎng)比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快，由此可以說明該細菌是需氧菌，由于振蕩培養(yǎng)提高l培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，細菌生長速度加快。

三、實驗題
9．（2020·全國高三課時練習）在生產(chǎn)、生活和科研實踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：
（1）在實驗室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具________（填“可以”或“不可以”）放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。
（2）牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點是________。
（3）密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能________，在照射前，適量噴灑_________，可強化消毒效果。
（4）水廠供應的自來水通常是經(jīng)過________（填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”）消毒的。
（5）某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時，若壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度，最可能的原因是__________________________。
【答案】（1）可以 （2）在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少 （3）破壞DNA結(jié)構(gòu) 消毒液 （4）氯氣 （5）未將鍋內(nèi)冷空氣排盡
【解析】
【分析】由題意“通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染”可知，本題考查的是“無菌技術(shù)”。理清實驗室和日常生產(chǎn)、生活中常用的消毒和滅菌方法是解答此題的關(guān)鍵。
【詳解】（1）能耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。
（2）煮沸消毒法即在100℃煮沸5～6 min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢；巴氏消毒法即在70～75℃煮30 min或在80℃煮15min，可以殺死微生物，并且保證營養(yǎng)物質(zhì)不被破壞。因此，與煮沸消毒法相比，牛奶消毒常采用的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。
（3）因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu)，所以密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒。在照射前，適量噴灑消毒液，可強化消毒效果。
（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有氣味，影響水質(zhì)，不適宜消毒自來水；高錳酸鉀本身有顏色，消毒后溶液呈紫紅色，無法使用；因此水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。
（5）采用高壓蒸汽滅菌時，鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排除后才能將鍋密閉。如果未將鍋內(nèi)冷空氣排盡，則會出現(xiàn)壓力達到設定要求，而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度的現(xiàn)象。
【點睛】（1）消毒與滅菌的區(qū)別：
比較項目
消毒
滅菌
條件
使用較為溫和的理化方法
使用強烈的理化因素
結(jié)果
殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）
殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子
適用
實驗操作的空間、操作者的衣服和手
微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等
常用方法
煮沸消毒法（如在100℃，煮沸5～6 min）、巴氏消毒法（如在80℃，煮15 min）；使用酒精、氯氣、石炭酸等化學藥劑進行消毒
灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
（2）三種常用滅菌方法的比較：
滅菌方法
滅菌條件
滅菌時間
適用材料或用具
灼燒滅菌
酒精燈火焰的充分燃燒層
直至燒紅
接種環(huán)、接種針或其他金屬工具
干熱滅菌
干熱滅菌箱內(nèi)，160～170℃
1～2 h
玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）
和金屬用具等
高壓蒸汽滅菌
100kPa，121℃
15～30 min
培養(yǎng)基等
10．（2020·全國高三課時練習）物質(zhì)W是一種含氮有機物，會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌（目標菌）?；卮鹣铝袉栴}。
（1）要從土壤中分離目標菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應該是_________。
（2）在從土壤中分離目標菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標菌，應該選擇________菌落進一步純化，選擇的依據(jù)是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設計實驗進一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源，請簡要寫出實驗思路、預期結(jié)果和結(jié)論，即_______。
（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進行如下實驗，請完善相關(guān)內(nèi)容。
①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。
②一段時間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明___________。
【答案】（1）W （2）乙 乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W （3）將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源 （4）緩沖液 緩沖液不能降解W 酶E與天然酶降解W的能力相近
【分析】
篩選培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)δ承┗瘜W、物理因素的抗性而設計的，能選擇性地區(qū)分這種微生物的培養(yǎng)基。利用選擇培養(yǎng)基，可使混合菌群中的目標菌種變成優(yōu)勢種群，從而提高該種微生物的篩選效率。
【詳解】
（1）該研究小組的目標菌是能夠降解物質(zhì)W的細菌，而物質(zhì)W是一種含氮有機物，故可作篩選培養(yǎng)基中的氮源。
（2）研究小組的目標菌，是能夠降解物質(zhì)W的細菌，培養(yǎng)基中乙菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌落能夠降解物質(zhì)W，故乙菌落為該小組的目標細菌。
（3）目標菌能夠利用空氣中的氮氣作為氮源，故選用的篩選培養(yǎng)基不添加氮源，能夠在無氮源的培養(yǎng)基上生存的細菌便是目的細菌，故實驗操作為：將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細菌能生長，則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源。
（4）①C處作為空白對照，要排除作為溶劑的緩沖液對實驗可能造成的影響，故需要在C處滴加緩沖液，且保持滴加量相同；②培養(yǎng)基中的透明圈表示物質(zhì)W被降解的情況，若C處不出現(xiàn)透明圈，則說明緩沖液不能降解物質(zhì)W；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明物質(zhì)W被降解的程度相近，即酶E與天然酶降解物質(zhì)W的能力相近。


相關(guān)試卷

新高考生物二輪復習分層訓練23 微生物的培養(yǎng)與利用（解析版）：

這是一份新高考生物二輪復習分層訓練23 微生物的培養(yǎng)與利用（解析版），共23頁。試卷主要包含了培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)，微生物的計數(shù)方法，微生物的篩選與鑒別，微生物的利用等內(nèi)容，歡迎下載使用。

高中生物高考解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）（原卷版）：

這是一份高中生物高考解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）（原卷版），共10頁。試卷主要包含了培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)，微生物的計數(shù)方法，微生物的篩選與鑒別，微生物的利用等內(nèi)容，歡迎下載使用。

高中生物高考解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）（原卷版）：

這是一份高中生物高考解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）（原卷版），共10頁。試卷主要包含了培養(yǎng)基及微生物的純化培養(yǎng)技術(shù)，微生物的計數(shù)方法，微生物的篩選與鑒別，微生物的利用等內(nèi)容，歡迎下載使用。

英語朗讀寶

相關(guān)試卷 更多

高中生物解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（講義）-【高頻考點解密】2021年高考生物二輪復習講義+分層訓練

高中生物解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（講義）-【高頻考點解密】2021年高考生物二輪復習講義+分層訓練
高考生物二輪復習講義解密23微生物的培養(yǎng)與利用(含解析)

高考生物二輪復習講義解密23微生物的培養(yǎng)與利用(含解析)
高中生物解密24 酶的應用（分層訓練）（有答案）

高中生物解密24 酶的應用（分層訓練）（有答案）
解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）-【高頻考點解密】 高考生物二輪復習講義+分層訓練

解密23 微生物的培養(yǎng)與利用（分層訓練）-【高頻考點解密】 高考生物二輪復習講義+分層訓練
資料下載及使用幫助
版權(quán)申訴
版權(quán)申訴
若您為此資料的原創(chuàng)作者，認為該資料內(nèi)容侵犯了您的知識產(chǎn)權(quán)，請掃碼添加我們的相關(guān)工作人員，我們盡可能的保護您的合法權(quán)益。
入駐教習網(wǎng)，可獲得資源免費推廣曝光，還可獲得多重現(xiàn)金獎勵，申請 精品資源制作， 工作室入駐。
版權(quán)申訴二維碼
高考專區(qū)
歡迎來到教習網(wǎng)
  • 900萬優(yōu)選資源，讓備課更輕松
  • 600萬優(yōu)選試題，支持自由組卷
  • 高質(zhì)量可編輯，日均更新2000+
  • 百萬教師選擇，專業(yè)更值得信賴
微信掃碼注冊
qrcode
二維碼已過期
刷新

微信掃碼，快速注冊

手機號注冊
手機號碼

手機號格式錯誤

手機驗證碼 獲取驗證碼

手機驗證碼已經(jīng)成功發(fā)送，5分鐘內(nèi)有效

設置密碼

6-20個字符，數(shù)字、字母或符號

注冊即視為同意教習網(wǎng)「注冊協(xié)議」及「隱私條款」
QQ注冊
手機號注冊
微信注冊

注冊成功

返回
頂部