1、獼猴桃是原產(chǎn)我國的野生藤本果樹，營養(yǎng)價(jià)值較高，我國現(xiàn)有 54 個(gè)種，幾十個(gè)變種，豐富的種質(zhì)資源為獼猴桃遺傳育種提供了方便。毛花獼猴桃為二倍體，果實(shí)大，維生素 C 含量高；軟棗獼猴桃為四倍體，極耐寒，在
-40℃下可安全越冬。某農(nóng)科所利用這兩種獼猴桃體細(xì)胞，通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出了獼猴桃新品種。下 列說法錯(cuò)誤的是（）
將體細(xì)胞用含相關(guān)酶的等滲溶液處理可獲得原生質(zhì)體
滅活的仙臺(tái)病毒不能用于誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合
愈傷組織形成試管苗須經(jīng)脫分化和再分化兩個(gè)過程
雜種植株體細(xì)胞中有 6 個(gè)染色體組
2、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，正確的是（）
大多數(shù)單倍體植株的細(xì)胞只含有一套染色體，因此其不是體細(xì)胞誘變育種的理想材料
植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)工廠化生產(chǎn)紫草細(xì)胞的初生代謝物紫草寧過程中，利用的是液體培養(yǎng)基 C．在植物組織培養(yǎng)過程中對(duì)愈傷組織進(jìn)行誘變處理，從分化的植株中可篩選出新品種
D．植物頂端成熟區(qū)細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)可獲得具有不含或很少含病毒的脫毒苗
3、右圖中甲、乙、丙表示生物個(gè)體或結(jié)構(gòu)，①～③表示相應(yīng)過程，下列敘述與圖示不符的是（）
若甲為二倍體植株，乙為花粉粒，丙為單倍體，則③過程可以用秋水仙素處理萌 發(fā)的種子或幼苗
若甲為植物體一部分，乙為愈傷組織，丙為胚狀體，則①過程通常在避光適宜溫 度的條件下進(jìn)行
若甲為阿爾茲海默癥患者，乙為 iPS 細(xì)胞，丙為神經(jīng)干細(xì)胞，則②過程本質(zhì)是基因選擇性表達(dá)
若甲為成年母羊，乙為去核的卵母細(xì)胞，丙為重組細(xì)胞（胚胎），則③過程的核心技術(shù)是胚胎移植
4、植物的有性生殖過程中，一個(gè)卵細(xì)胞與一個(gè)精子成功融合后通常不再與其他精子融合。我國科學(xué)家最新研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)卵細(xì)胞與精子融合后，植物卵細(xì)胞特異表達(dá)和分泌天冬氨酸蛋白酶 ECS1 和 ECS2。這兩種酶能降解一種吸引花粉管的信號(hào)分子，避免受精卵再度與精子融合。下列敘述錯(cuò)誤的是（）
精子中不含編碼 ECS1 和 ECS2 的基因
未受精的情況下，卵細(xì)胞不分泌 ECS1 和 ECS2
ECS1 和 ECS2 有利于保持后代染色體數(shù)目穩(wěn)定
ECS1和ECS2通過影響花粉管導(dǎo)致卵細(xì)胞和精子不能融合5、甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測(cè)甘草酸，科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體，其基本操作過程如右圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）
過程①注射相應(yīng)抗原后應(yīng)立即從小鼠脾臟中提取細(xì)胞甲
過程②誘導(dǎo)細(xì)胞融合，利用了細(xì)胞膜的選擇透過性
過程③篩選得到的細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗甘草酸抗體的雜交瘤細(xì)胞
過程③④的篩選方法不同，細(xì)胞丙、丁核酸不一定相同
6、在胚胎移植過程中，很多操作步驟都需要“檢查”，以避免后期人力、物力、財(cái)力的浪費(fèi)，下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）
體外受精的受精卵移入特定培養(yǎng)液中培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力
胚胎移植前，要對(duì)胚胎進(jìn)行檢查以確定其是否發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段
在胚胎分割時(shí)，應(yīng)取樣內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞做 DNA 分析，以檢查胚胎的性別
胚胎移植入受體母畜的子宮后，還需對(duì)受體母畜進(jìn)行是否妊娠檢查 7、下列關(guān)于胚胎工程理論及應(yīng)用的敘述中，正確的是（）
在優(yōu)良母畜的飼料中添加一定量的促性腺激素能使其超數(shù)排卵
理論上胚胎干細(xì)胞能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體內(nèi)所有的細(xì)胞
若對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割，滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)都需要均等分割
移植的胚胎都是來自體內(nèi)受精或者體外受精直接產(chǎn)生的胚胎 8、下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，正確的是（）
A．質(zhì)粒上常有抗生素合成基因作為標(biāo)記基因以便篩選重組 DNA 分子B．PCR 反應(yīng)中溫度的周期性改變是為了耐高溫 DNA 聚合酶催化不同的反應(yīng)
C．切割質(zhì)粒的限制酶能特異性識(shí)別 4 個(gè)、6 個(gè)、8 個(gè)或其他數(shù)量的核苷酸序列D．利用 PCR 等技術(shù)檢測(cè)出棉花細(xì)胞中含有抗蟲基因代表抗蟲棉培育成功
9、下列有關(guān)限制酶和DNA連接酶的敘述，錯(cuò)誤的是（）
每一種限制酶能夠識(shí)別雙鏈 DNA 分子的特定核苷酸序列
DNA 連接酶可催化兩個(gè) DNA 片段之間形成磷酸二酯鍵
E.cliDNA 連接酶是從大腸桿菌中分離出來的，它只能連接黏性末端
某一雙鏈 DNA 片段經(jīng) EcRI 切割形成 3 個(gè) DNA 片段，需要消耗 2 個(gè)水分子
10、用限制酶EcRⅠ、KpnⅠ和二者的混合物分別作用于一個(gè)1000bp(1bp即1個(gè)堿基對(duì))的DNA分子，同時(shí)對(duì)酶切產(chǎn)物分別進(jìn)行凝膠電泳，在電場(chǎng)的作用下，酶切產(chǎn)物分開，凝膠電泳結(jié)果如下圖1所示。該DNA分子的酶切圖譜(圖2，單位：bp)正確的是（）
11、采用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可將增強(qiáng)型綠色熒光蛋白（EGFP）基因定點(diǎn)插入到受精卵的Y染色體上， 獲得轉(zhuǎn)基因雄性小鼠。該轉(zhuǎn)基因小鼠與野生型雌性小鼠交配，通過觀察熒光可確定早期胚胎的性別。下列操作錯(cuò) 誤的是（）
通過觀察早期胚胎的熒光，能發(fā)出綠色熒光的即為雄性小鼠胚胎
分離能表達(dá) EGFP 的胚胎干細(xì)胞，通過核移植等技術(shù)可獲得大量的轉(zhuǎn)基因小鼠
基因編輯處理的受精卵在體外培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)需要用不同成分的培養(yǎng)液
基因編輯處理的受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)至原腸胚，植入同期發(fā)情小鼠的子官可獲得表達(dá)EGFP的小鼠12、下列關(guān)于DNA的粗提取與鑒定、核酸片段的擴(kuò)增及電泳鑒定實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是（）
A．使用二苯胺試劑能有效測(cè)定不同提取液中 DNA 的純度差別B．為了提升提取效果，在析出 DNA 時(shí)使用的酒精需要進(jìn)行預(yù)冷
C．PCR 反應(yīng)緩沖液中一般要添加 ATP，以激活耐高溫的 DNA 聚合酶
D．瓊脂糖凝膠電泳中的緩沖液中含指示劑，其可以在紫外燈下被檢測(cè)出來
13、基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn) 是，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是。根據(jù)下圖判斷下列操作正確的是（）
A.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割B.目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割
C.質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 D.質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
14、將 Oct3/4、Sx2、c-Myc 和 Klf4 基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞后，置于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞（ES 細(xì)
胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出與ES細(xì)胞類似的形態(tài)和活躍分裂能力，這樣的細(xì)胞稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。下列說法錯(cuò)誤的是（）
逆轉(zhuǎn)錄病毒充當(dāng)了將目的基因?qū)氤衫w維細(xì)胞的載體
從獲取途徑看，iPS 細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞
欲驗(yàn)證 iPS 細(xì)胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的對(duì)照組
欲比較 4 種基因誘導(dǎo) iPS 細(xì)胞時(shí)作用大小，應(yīng)設(shè)置分別轉(zhuǎn)入 1 種基因的四個(gè)實(shí)驗(yàn)組和轉(zhuǎn)入 4 種基因的對(duì)照組15、為減少引物與模板之間的非特異性配對(duì)，人們?cè)诔Ｒ?guī) PCR 技術(shù)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了改良，發(fā)明了巢式 PCR 技術(shù)。其原理是利用兩套 PCR 引物進(jìn)行兩輪 PCR 擴(kuò)增，首先利用第一對(duì)引物（外引物）對(duì)目的基因所在 DNA 進(jìn)行 15- 30 個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增；第二輪擴(kuò)增以第一輪擴(kuò)增產(chǎn)物為模板，利用第二對(duì)引物
（內(nèi)引物或巢式引物）進(jìn)行15-30個(gè)循環(huán)擴(kuò)增，具體過程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）
巢式 PCR 中加入的組分與常規(guī) PCR 相同，但擴(kuò)增產(chǎn)物比常規(guī) PCR 特異性更強(qiáng)
兩套引物需進(jìn)行兩次 PCR，由于和兩套引物都互補(bǔ)的靶序列較少，因此大大提高了擴(kuò)增的特異性
如果第一次擴(kuò)增產(chǎn)生了錯(cuò)誤片斷，則第二次能在錯(cuò)誤片段上進(jìn)行引物配對(duì)并擴(kuò)增的概率將會(huì)增加
內(nèi)引物擴(kuò)增的模板是外引物擴(kuò)增后的產(chǎn)物，第二階段反應(yīng)能否進(jìn)行，也是對(duì)第一階段反應(yīng)正確性的鑒定
16、1958年,美國科學(xué)家斯圖爾德應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù),將二倍體胡蘿卜韌皮部的一些細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),最終發(fā)育成完整的新植株(如圖)。關(guān)于這一科學(xué)事實(shí),下列敘述中錯(cuò)誤的是（）
①實(shí)驗(yàn)需要無菌和人工控制的條件
②培養(yǎng)基中需添加植物激素、無機(jī)鹽、糖類等物質(zhì)
③取胡蘿卜的其他部分(如莖、葉、花)不能培養(yǎng)成小植株
④韌皮部細(xì)胞通過有絲分裂增加數(shù)目
⑤圖中培養(yǎng)瓶 1 和試管 2 中的成分相同
A.①②④B.③⑤C.②③⑤D.④⑤
17、右圖表示植物組織培養(yǎng)的大致過程,據(jù)此判斷錯(cuò)誤的是（）
若①是二倍體植株的花粉,則④經(jīng)染色體加倍后可得到穩(wěn)定遺傳的品種 B.若①是不同種植物體細(xì)胞融合的雜種細(xì)胞,則④可能出現(xiàn)雙親的遺傳特性C.若①是具有雜種優(yōu)勢(shì)的農(nóng)作物細(xì)胞,則用③進(jìn)行繁育必會(huì)發(fā)生性狀分離D.若①是人參細(xì)胞,對(duì)②進(jìn)行擴(kuò)大化培養(yǎng)可以提高細(xì)胞產(chǎn)物人參皂苷的產(chǎn)量
18、植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖，下列有關(guān)敘述正確的是（） A．用藥劑對(duì)外植體消毒時(shí)，要兼顧消毒效果和植物的耐受性
以同一植株不同部位細(xì)胞為材料培育出的植株基因型相同C．植物組織培養(yǎng)時(shí)使用的 MS 培養(yǎng)基中都需添加植物激素 D．利用組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗，獲得具有抗病毒的新品種
19、現(xiàn)有甲、乙兩物種 (均為二倍體純種),其中甲種植株的光合作用能力高于乙種植株,但乙種植株很適宜在鹽堿地種植。要利用甲、乙兩種植株的各自優(yōu)勢(shì),培育出高產(chǎn)耐鹽的植株,有多種生物技術(shù)手段可以利用。下列所采
用的技術(shù)手段中可．行．的是（）
A.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù),可獲得滿足要求的四倍體目的植株B.兩種植株雜交后,得到的F1再連續(xù)自交可培育出純種目的植株
C.兩種植株雜交后,得到的F1再利用單倍體育種可較快獲得純種目的植株 D.誘導(dǎo)兩種植株的花粉融合并培育成幼苗,可培育出二倍體目的植株
20、常用的核移植方法主要有細(xì)胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法兩種。前者是用微型注射針將供體細(xì)胞的細(xì)胞核 吸出注入去核卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個(gè)細(xì)胞融合，從而 具有發(fā)育的全能性。我國科學(xué)家于 2017 年底培育出的體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”采用的就是后者。下列有關(guān)敘述正確的是（）
A．供體細(xì)胞注入卵母細(xì)胞透明帶內(nèi)后，就可自行進(jìn)入卵母細(xì)胞B．“中中”和“華華”的性狀由多個(gè)親本共同決定，屬于有性生殖 C．相比之下，透明帶下注射法對(duì)供體細(xì)胞核和卵母細(xì)胞的損傷更小
D．“中中”和“華華”核 DNA 均來自供體細(xì)胞，質(zhì) DNA 均來自去核卵母細(xì)胞
21、人乳頭瘤病毒(HPV)感染是誘發(fā)宮頸癌的重要因素。HPV具有多種類型，其中的HPV16和HPV18屬于高危型， 可引起宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)高度病變?，F(xiàn)對(duì)某就診者的取樣細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，來進(jìn)行確診。下列說法錯(cuò)誤的是（）
培養(yǎng)取樣細(xì)胞時(shí)，分散取樣的細(xì)胞必須采用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理
培養(yǎng)取樣細(xì)胞時(shí)，需要為這些細(xì)胞提供充足的營養(yǎng)條件、穩(wěn)定的外部環(huán)境等C.讓取樣細(xì)胞進(jìn)行貼壁生長，若產(chǎn)生了接觸抑制現(xiàn)象，則不屬于 HPV 高危型D.無論是原代培養(yǎng)還是傳代培養(yǎng)，都需將培養(yǎng)瓶放在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
22、為了加快良種牛的繁殖速度,科學(xué)家采用了以下兩種方法。下列說法正確的是（） A.方法Ⅰ獲得公牛的新鮮精液,可直接用于受精作用
B.胚胎體外培養(yǎng)過程中不需要利用相關(guān)技術(shù)去除透明帶
C.E 和 F 的培育過程中均用到了胚胎移植技術(shù),均屬于有性生殖 D.如圖方法Ⅱ,產(chǎn)生的F 牛的性別與C 牛相同,性狀也與C 牛完全一
致
23、試管嬰兒(test-tubebaby)是指采用人工方法讓卵細(xì)胞和精子在體外受精,并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育,然后移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育誕生的嬰兒。自 1988 年 3 月,我國內(nèi)地首例試管嬰兒在北京誕生以來,該技術(shù)在我國也越來越普及。下列相關(guān)敘述正確的是（）
A.從親體取出的精子需要經(jīng)過獲能處理,而卵細(xì)胞無需經(jīng)過處理即可完成受精 B.判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為標(biāo)志C.體外受精獲得的早期胚胎在培養(yǎng)液中培養(yǎng)到桑葚胚或原腸胚才可進(jìn)行移植D.試管嬰兒屬于生殖性克隆技術(shù),為不孕不育患者孕育新生命提供了可能
24、北方白犀牛曾經(jīng)廣泛分布于非洲中部,因盜獵和棲息地破壞而瀕臨滅絕。2018 年 3 月,北方白犀牛僅剩下最后兩頭雌性個(gè)體。此前,科學(xué)家保存了北方白犀牛的精子,欲通過胚胎工程方法繁育北方白犀牛。下列說法錯(cuò)誤的是 （ ）
A.可以從雌性北方白犀牛體內(nèi)取出卵母細(xì)胞進(jìn)行體外受精B.可以使用雌性南方白犀牛作為受體,進(jìn)行胚胎移植
C.此過程和克隆技術(shù)相同,將會(huì)得到遺傳背景一致的后代 D.可以通過胚胎分割技術(shù)得到更多遺傳物質(zhì)相同的后代
25、胚胎工程中各種操作技術(shù)如圖所示。下列分析正確的是()
d 可直接移植給受體,且得到的兩頭小牛的性狀一般相同
從良種公牛體內(nèi)獲得的精子可以直接與獲能的卵細(xì)胞 結(jié)合受精
早期囊胚 a、b、c 基因型相同,但發(fā)育得到的個(gè)體表型不一定相同
代孕母牛應(yīng)提前做好同期發(fā)情處理，避免移植胚胎發(fā)生 免疫排斥
26、正常小鼠是二倍體。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠四倍體胚胎具有發(fā)育缺陷，只能發(fā)育成胎盤等胚胎以外的結(jié)構(gòu)。ES 細(xì)
胞能夠誘導(dǎo)分化形成所有的細(xì)胞類型，但很難分化形成胎盤。四倍體胚胎與ES細(xì)胞的嵌合體則會(huì)使二者的發(fā)育潛能相互補(bǔ)償，可得到ES小鼠，其中的四倍體胚胎只能發(fā)育成胚外組織。下列敘述正確的是()
嵌合體發(fā)育形成的 ES 小鼠基因型與供體 ES 細(xì)胞的基因型不同
嵌合體中的 ES 具有自我更新能力并只能分化為胎盤等胚外組織
嵌合體胚胎發(fā)育至原腸胚時(shí)需移植入與之生理狀態(tài)相同的小鼠子宮內(nèi)才可發(fā)育 D.將正常小鼠 2 細(xì)胞期胚胎用滅活病毒誘導(dǎo)法使 2 細(xì)胞融合，可得到四倍體胚胎
27、CD47 是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的 CD47 含量比正常細(xì)
胞高 1.6-5 倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗 CD47 的單克隆抗體可以解除 CD47 對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列說法不正確的是( )
進(jìn)行步驟①的處理目的是使小鼠能產(chǎn)生抗CD47 抗體的 B 細(xì)胞
對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為：巨噬細(xì)胞+正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系+單克隆抗體C.利用該單克隆抗體可以診斷包括肺癌、結(jié)腸癌在內(nèi)的多種癌癥D.實(shí)驗(yàn)組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)照組可驗(yàn)證上述推測(cè)
28、圖為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程,①~④表示相關(guān)的操作。若限制酶 EcR Ⅰ識(shí)別G↓AATTC,BamHⅠ識(shí)別 G↓CATCC。下列選項(xiàng)正確的是( )
利用 PCR 技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí),反應(yīng)緩沖溶液中要添加 Ca2+來激活DNA 聚合酶
構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)可使用E.cliDNA 連接酶將 DNA 片段連接起來
農(nóng)桿菌侵染人參細(xì)胞后 Ti 質(zhì)粒整合到受體細(xì)胞的染色體 DNA 上
檢測(cè)干擾素基因是否導(dǎo)入人參愈傷組織細(xì)胞需要利用抗原—抗體雜交
29、熒光定量 PCR 技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中某種 DNA 含量,其原理是在 PCR 體系中每加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針,當(dāng)耐高溫的 DNA 聚合酶催化子鏈延伸至探針處時(shí),會(huì)水解探針,使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一次,就有一個(gè)熒光分子生成,過程如圖所示。下列相關(guān)
敘述錯(cuò)誤的是( )
A.引物與探針均具特異性,與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 B.反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板 DNA 含量呈正相關(guān)
若用 cDNA 作模板,上述技術(shù)也可檢測(cè)某基因的轉(zhuǎn)錄水平
耐高溫的 DNA 聚合酶催化 DNA 的合成總是從子鏈的 3'端向 5'端延伸的
30、甘草具有祛痰止咳等功效,由于人們對(duì)野生甘草破壞性地采挖,使其幾乎滅絕。甘草繁殖率低,采用組織培養(yǎng)技術(shù)可以加快其繁殖速度。關(guān)于甘草組織培養(yǎng)過程的操作,敘述錯(cuò)誤的是()
A.外植體、接種器具和培養(yǎng)基均需進(jìn)行滅菌處理,以保證無菌操作 B.外植體接種及愈傷組織誘導(dǎo)過程中均需要無菌操作
C.在誘導(dǎo)外植體脫分化及再分化的過程中需要多次更換培養(yǎng)基D.組培苗長勢(shì)弱小、適應(yīng)性差,移栽前一般需要經(jīng)過適應(yīng)性處理
二、非選擇題（本大題共 5 題，共 60 分）
植株
花椰菜
黑芥
雜合新植株 A
雜合新植株 B
雜合新植株 C
染色體數(shù)/條
18
16
34
30
58
31.（12 分）花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥對(duì)黑腐病等多種常見病害具有抗性。我國科學(xué)家將紫外線(UV)照射處理的花椰菜根原生質(zhì)體和黑芥葉肉原生質(zhì)體融合，獲得了抗黑腐病的雜合新植株。對(duì)雙親和 部分雜合新植株的染色體計(jì)數(shù)，結(jié)果如下表所示。請(qǐng)回答下列問題：
(1)原生質(zhì)體融合的理論依據(jù)是。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)法包括（填寫兩個(gè)）。(2)將花椰菜和黑芥體細(xì)胞在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，繼而經(jīng)和過程培養(yǎng)成新植物體。這項(xiàng)技術(shù)稱為，該技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于。
已知用一定劑量的UV處理黑芥原生質(zhì)體可破壞其染色體。根據(jù)表中數(shù)據(jù)，嘗試推測(cè)已獲得的花椰菜黑芥雜合新植株B染色體數(shù)目少于34(雙親染色體數(shù)之和)、雜合新植株C染色體數(shù)目大于34，可能的原因是_
_。若要分析雜合新植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取雜合新植株 與植株的根尖，制成裝片，在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。
簡(jiǎn)要寫出從雜合新植株中篩選出具有高抗性的雜合新植株的思路：
。32.(12 分)人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白 T(cTnT)、肌鈣蛋白 I(cTnI)和肌鈣蛋白 C(cTnC),其中 cTnI 在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗 cTnI 的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝產(chǎn)物的積累,可采取的措施。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,與植物原生質(zhì)體融合方法不同是還可以用。(2)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是,②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行多次和，其目的是篩選獲得。(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖所示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與同一抗原結(jié)合,這是由于。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是。
33.(12 分)請(qǐng)根據(jù)下列兩個(gè)資料回答相關(guān)問題:
資料 1:用化學(xué)方法激活小鼠成熟的卵母細(xì)胞得到 phESC(孤雌單倍體干細(xì)胞),然后利用基因編輯技術(shù)沉默 phESC 中的相關(guān)基因,使 phESC 的細(xì)胞核狀態(tài)接近精子細(xì)胞核的狀態(tài),如圖 1。
資料 2:用化學(xué)方法激活小鼠的精子得到 ahESC(孤雄單倍體干細(xì)胞),然后對(duì) ahESC 中的相關(guān)基因進(jìn)行編輯,使ahESC 的細(xì)胞核具有卵細(xì)胞核的特點(diǎn),如圖 2。
(1)體內(nèi)受精時(shí),在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,會(huì)迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來的精子進(jìn)入;精子入卵后,也會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng)拒絕其他精子再進(jìn)入，接下來卵子發(fā)生的變化有（寫三點(diǎn)）。(2)用激素對(duì)雌性小鼠進(jìn)行處理可得到較多卵母細(xì)胞。
ahESC與精子和去核卵細(xì)胞融合后,得到的融合細(xì)胞的性染色體組成可能是。
據(jù)資料分析,只依賴雄性小鼠(填“能”或“不能”)用上圖方法得到孤雄小鼠,請(qǐng)寫出兩個(gè)理由支持你的判斷。
理由1:; 理由2:。
34.（12 分）為了研究 PDCD4 基因?qū)π∈笞訉m內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響,進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
取小鼠子宮時(shí),為避免細(xì)菌污染,手術(shù)器具應(yīng)進(jìn)行處理;子宮取出剪碎后,用
處理一定時(shí)間,可獲得分散的子宮內(nèi)膜組織細(xì)胞,再分離獲得基質(zhì)細(xì)胞用于培養(yǎng)。
培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)應(yīng)有(填寫兩種);培養(yǎng)箱中CO2濃度為5%,其主要作用是。
基因工程的核心步驟是。切割PDCD4基因的工具酶是,這類酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的斷開。在含PDCD4基因的表達(dá)載體中,啟動(dòng)子的作用是。
（4）為了證明PDCD4基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡的作用,以含PDCD4基因的表達(dá)載體和基質(zhì)細(xì)胞懸浮液的混合培養(yǎng)為實(shí)驗(yàn)組,還應(yīng)設(shè)立兩個(gè)對(duì)照組,分別為對(duì)照組一：，對(duì)照組二：。經(jīng)檢測(cè),實(shí)驗(yàn)組中PDCD4表達(dá)水平和細(xì)胞凋亡率顯著高于對(duì)照組,說明該基因?qū)|(zhì)細(xì)胞凋亡具有(填“抑制”或“促進(jìn)”)作用。
35.（12 分） 2019 年新冠疫情爆發(fā)以來，疫情防控成為社會(huì)關(guān)注的熱點(diǎn)問題。下圖所示某科研團(tuán)隊(duì)運(yùn)用基因工
程研制新冠病毒疫苗的過程。質(zhì)檢中 lacZ 基因編碼的酶可以分解 X-gal 產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色?；卮鹣铝袉栴}：
獲取目的基因時(shí)，首先提取新冠病毒的RNA，再通過過程獲得cDNA（互補(bǔ)DNA）,并可借助特異性引物通過PCR擴(kuò)增圖中的片段，PCR的原理是，其中引物的作用是
_，若一個(gè)含有目的基因的DNA擴(kuò)增n代，則共消耗對(duì)引物。
圖中過程①有兩種限制酶選擇方案（注：圖中幾種限制酶切割產(chǎn)生的末端不同）：
方案一：選用一種限制酶；方案二：選用兩種限制酶；方案二優(yōu)于方案一的原因是。
將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌之前,需要用一定濃度的Ca2+處理大腸桿菌,使細(xì)胞處于
。篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌時(shí)，須在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中加入，培養(yǎng)一段時(shí)間后，挑選出色的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。
2022-2023學(xué)年下學(xué)期3月月考
高二生物試題（答案）
1-5CCAAD 6-10CBCDC11-15 DBCDC 16-20BCAAC21-25ABBCA 26-30DBBDA
31.（12分）(1)細(xì)胞膜具有流動(dòng)性 聚乙二醇(PEG)融合法 高Ca2+-高pH融合法
(2)脫分化 再分化 植物體細(xì)胞雜交 打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
(3)融合過程中染色體可能會(huì)丟失；融合是隨機(jī)的，可能存在多個(gè)細(xì)胞的融合（2分） 雙親(或花椰菜和黑芥)
(4)將不同的雜合新植株分別進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)，觀察比較它們的生長情況，生長最好的即為高抗性雜合新植株（2分）
32. (12分)(1)定期更換培養(yǎng)液 加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體形成更多能產(chǎn)生抗cTnI抗體的B淋巴細(xì)胞
滅活病毒誘導(dǎo)法
(2)乙和丙 克隆化培養(yǎng) 抗體陽性檢測(cè)
獲得足夠數(shù)量的能分泌抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞(2分)
(3) 不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合（同一抗原表面有多個(gè)不同抗體的結(jié)合部位）
抗體與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化特定底物反應(yīng)產(chǎn)生檢測(cè)產(chǎn)物，可通過測(cè)定產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量。(3分)
33. (12分)(1)透明帶 卵細(xì)胞膜 完成減數(shù)分裂Ⅱ、排出第二極體、形成雌原核（3分）
(2)促性腺激素 超數(shù)排卵
(3)XX、XY或YY（2分）
(4)不能 需要將ahESC和另一個(gè)精子一起注入到一個(gè)去核卵細(xì)胞中 體外培養(yǎng)發(fā)育成的胚胎必須移植到雌性小鼠的體內(nèi)才能發(fā)育為個(gè)體
34.（12分） (1)滅菌 胰蛋白酶或膠原蛋白酶
(2)無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、微量元素、促生長因子、血清 維持培養(yǎng)液的pH
基因表達(dá)載體的構(gòu)建 限制酶 磷酸二酯鍵 RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA（2分）
基質(zhì)細(xì)胞懸浮液空載體和基質(zhì)細(xì)胞懸浮液的混合培養(yǎng)液（對(duì)照組一二的位置可以換） 促進(jìn)
35.（12分）（1）逆轉(zhuǎn)錄 DNA半保留復(fù)制 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸 2n-1
（2）BamHⅠ BamHⅠ、KpnⅠ 或SalⅠKpnⅠ(2分)
避免切割后的目的基因及質(zhì)粒自連環(huán)化，避免目的基因反向連接到質(zhì)粒上（使目的基因和質(zhì)粒定向連接）（2分）
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài) 青霉素和X-gal 白

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