1.獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是發(fā)酵工程的基礎(chǔ)。 2.發(fā)酵工程為人類提供多樣的生物產(chǎn)品。
微生物的培養(yǎng)、分離與計(jì)數(shù)
2.微生物的純化技術(shù)（1）配制馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基
（2）兩種純化微生物方法的比較
3.微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例
（1）分離土壤中分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)
（2）纖維素分解菌的分離
［易錯(cuò)提醒］關(guān)注兩種對(duì)照組與一種重復(fù)組（1）將一未接種的選擇培養(yǎng)基與接種的選擇培養(yǎng)基一起培養(yǎng)——用于確認(rèn)培養(yǎng)基滅菌是否徹底（制備是否合格）。（2）將一接種的普通培養(yǎng)基與接種的選擇培養(yǎng)基一起培養(yǎng)——用于確認(rèn)選擇培養(yǎng)基是否起“篩選”作用。（3）進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)時(shí)，每一稀釋度下至少涂布三個(gè)平板，即設(shè)置重復(fù)組，是為了求平均值，提高計(jì)數(shù)準(zhǔn)確度。
1.（2024·江蘇選擇考）酵母菌是基因工程中常用的表達(dá)系統(tǒng)。下列相關(guān)敘述正確的是( )
2.（2023·江蘇選擇考）下列關(guān)于細(xì)菌和酵母菌實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是( )
A.通常酵母菌培養(yǎng)基比細(xì)菌培養(yǎng)基有更高的碳氮比B.通常細(xì)菌的生長(zhǎng)速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大C.通常細(xì)菌培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌法滅菌，酵母菌培養(yǎng)基用過濾除菌法除菌D.血球計(jì)數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測(cè)定，也可用于細(xì)菌的數(shù)量測(cè)定
解析：選A。不同微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求不一樣，具有高碳氮比的生物需要高碳氮比的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，反之則低，酵母菌的碳氮比高于細(xì)菌，所以通常酵母菌培養(yǎng)基比細(xì)菌培養(yǎng)基有更高的碳氮比，A正確；通常細(xì)菌的生長(zhǎng)速度比酵母菌快，但形成的菌落不一定大于酵母菌，這與細(xì)菌的種類有關(guān)，部分細(xì)菌的菌落小于酵母菌，B錯(cuò)誤；通常細(xì)菌和酵母菌的培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌，C錯(cuò)誤；血球計(jì)數(shù)板適用于真菌的計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。
［把脈高考］ 該知識(shí)點(diǎn)為高頻考點(diǎn)?？疾辄c(diǎn)主要包括無菌技術(shù)、培養(yǎng)基的配制、微生物的接種方法、微生物的培養(yǎng)等。試題情境常涉及生活、生產(chǎn)實(shí)踐和環(huán)境治理，又滲透科學(xué)實(shí)驗(yàn)與探究。
（1）（2023·山東T15）不含氮源的平板不能用于微生物培養(yǎng)。( )
（3）（2021·江蘇T18）將培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中后滅菌，可降低培養(yǎng)基污染的概率。( )
（5）（2021·浙江6月T17）稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落，都可用于細(xì)胞計(jì)數(shù)。( )
（6）（2020·江蘇T19）為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落。( )
（7）（2023·全國(guó)乙T37（2））采用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，可以用淋洗液為原料制備培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中還需要加入氮源等營(yíng)養(yǎng)成分，氮源的主要作用是__________________________________________________________（答出1點(diǎn)即可）。
用于合成微生物細(xì)胞中的含氮化合物，如核酸、蛋白質(zhì)等
（8）（2022·河北T23（2））枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用__________（填“靜置”或“搖床振蕩”）培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用________________（填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”），其原因是_____________________________________________________________________________________________________________________。
用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個(gè)菌落一般都來自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法會(huì)將死亡的枯草芽孢桿菌也計(jì)算在內(nèi)
突破1 培養(yǎng)基的制備與無菌操作
1.（2024·南通高三調(diào)研）下表是一種篩選微生物的培養(yǎng)基配方，相關(guān)分析錯(cuò)誤的是( )
A.該培養(yǎng)基為無氮培養(yǎng)基，說明篩選的微生物不需要氮源B.甘露醇既可為微生物提供碳源，也可以提供能源C.該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，配制后應(yīng)先分裝再滅菌D.進(jìn)一步分離純化微生物時(shí)常用平板劃線法進(jìn)行接種
解析：選A。該培養(yǎng)基為無氮培養(yǎng)基，利用該培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)出的微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，而不是不需要氮源，A錯(cuò)誤；甘露醇是一種可溶性的碳水化合物，可以被微生物迅速代謝產(chǎn)生能量，既可為微生物提供碳源，也可以提供能源，B正確；該培養(yǎng)基含有瓊脂粉，為固體培養(yǎng)基，配制后應(yīng)先分裝再滅菌，減少污染的可能，C正確；分離純化菌種時(shí)，常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，D正確。
2.（多選）下列與微生物培養(yǎng)有關(guān)的說法，正確的是( )
A.平板劃線法每次劃線前和最后一次劃線后都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌B.常用的干熱滅菌法包括干熱空氣滅菌法和火焰灼燒法等C.果酒發(fā)酵之后再進(jìn)行果醋制作時(shí)，需要繼續(xù)密閉D.接種微生物后，將平板倒置并放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
突破2 微生物的培養(yǎng)、篩選與計(jì)數(shù)
4.（多選）（2024·宿遷高三調(diào)研）某生物活動(dòng)小組為探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，進(jìn)行了取樣、系列梯度稀釋、涂布平板、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等步驟，實(shí)驗(yàn)操作過程如下圖所示，下列說法正確的是( )
1.
2.泡菜腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變化
1.（2024·江蘇選擇考）關(guān)于“利用乳酸菌發(fā)酵制作酸奶或泡菜”的實(shí)驗(yàn)，下列敘述正確的是( )
A.制作泡菜的菜料不宜完全淹沒在煮沸后冷卻的鹽水中B.制作酸奶的牛奶須經(jīng)過高壓蒸汽滅菌后再接種乳酸菌C.發(fā)酵裝置需加滿菜料或牛奶并封裝，以抑制乳酸菌的無氧呼吸D.控制好發(fā)酵時(shí)間，以避免過量乳酸影響酸奶或泡菜的口味和品質(zhì)
2.（多選）（2023·江蘇選擇考）某醋廠和啤酒廠的工藝流程如圖所示。酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解過程。下列相關(guān)敘述正確的有( )
A.糯米“蒸熟”與大米“蒸煮”的目的是利于糖化和滅菌B.發(fā)酵原理是利用真菌的無氧呼吸與細(xì)菌的有氧呼吸C.醋酸發(fā)酵過程中經(jīng)常翻動(dòng)發(fā)酵物，可控制發(fā)酵溫度和改善通氣狀況D.啤酒釀造流程中適當(dāng)增加溶解氧可縮短發(fā)酵時(shí)間
［把脈高考］ 該知識(shí)點(diǎn)為中頻考點(diǎn)?？疾辄c(diǎn)主要包括利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作泡菜、果酒和果醋；利用發(fā)酵工程進(jìn)行啤酒制作；發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等領(lǐng)域中的應(yīng)用等。試題情境多聯(lián)系生活、生產(chǎn)實(shí)踐，指導(dǎo)應(yīng)用性較強(qiáng)。
（1）（2023·浙江6月T12）關(guān)于小曲白酒的釀造過程，糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖。( )
（2）（2022·山東T20）啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)中，大麥經(jīng)發(fā)芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、發(fā)酵、消毒等工序后，最終過濾、調(diào)節(jié)、分裝。焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子的胚并進(jìn)行滅菌。( )
（3）（2022·山東T14）目前已實(shí)現(xiàn)青霉素的工業(yè)化生產(chǎn)，選育出的高產(chǎn)菌株經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)后才可接種到發(fā)酵罐中。( )
（4）（2021·江蘇T14）果醋發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時(shí)。( )
（5）（2021·江蘇T14）果醋發(fā)酵時(shí)，用重鉻酸鉀測(cè)定醋酸含量變化時(shí)，溶液灰綠色逐日加深。( )
（6）（2021·遼寧T8）酵母菌和醋酸菌發(fā)酵過程中控制通氣的情況不同。 ( )
（7）（2021·山東T12）葡萄酒的顏色是葡萄皮中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的。( )
（8）（2020·江蘇T18）某同學(xué)在家用帶蓋玻璃瓶制作果酒和果醋時(shí)將玻璃瓶用酒精消毒后，裝滿葡萄汁，待酒精發(fā)酵后去除瓶蓋，蓋一層紗布，再進(jìn)行醋酸發(fā)酵。( )
（9）（2019·江蘇T9）利用乳酸菌制作酸奶過程中，先通氣培養(yǎng)，后密封發(fā)酵。( )
促進(jìn)有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖
突破1 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用
2.（2024·連云港高三一模）下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述正確的是( )
突破2 發(fā)酵工程及其應(yīng)用
3.米酒舊時(shí)稱酒釀，其現(xiàn)代生產(chǎn)工藝流程如下圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是( )
A.蒸米有利于根霉曲分解糯米中的有機(jī)物，淋冷可防止殺死根霉B.加酵母曲后應(yīng)先通入一段時(shí)間無菌空氣，再進(jìn)行無氧發(fā)酵C.發(fā)酵結(jié)束后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行滅菌可延長(zhǎng)米酒的保存期D.若釀制的米酒有酸味，應(yīng)與長(zhǎng)期封閉釀酒容器有關(guān)
解析：選D。將糯米蒸熟可以殺死糯米中絕大多數(shù)雜菌且蒸米過程會(huì)使有機(jī)物的結(jié)構(gòu)遭到一定破壞，有利于后續(xù)根霉曲分解糯米中的有機(jī)物，淋冷可防止殺死根霉，A正確；加酵母曲后應(yīng)先通入一段時(shí)間無菌空氣，促進(jìn)酵母菌有氧呼吸，使酵母菌大量繁殖，再進(jìn)行無氧發(fā)酵，B正確；發(fā)酵結(jié)束后對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行滅菌，可以消滅雜菌，延長(zhǎng)米酒的保存期，C正確；若釀制的米酒有酸味，可能是由于釀酒容器漏氣，導(dǎo)致氧氣進(jìn)入，促使醋酸菌進(jìn)行醋酸發(fā)酵，D錯(cuò)誤。
4.（多選）（2024·南通高三調(diào)研）食用海帶有補(bǔ)血、健脾、降低體內(nèi)膽固醇的作用，研究表明經(jīng)乳酸菌發(fā)酵后的海帶發(fā)酵液能較好降血脂。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )

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