湖北省武漢市新洲區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期6月期末生物試卷(解析版)

這是一份湖北省武漢市新洲區(qū)2023-2024學(xué)年高二下學(xué)期6月期末生物試卷(解析版)，共20頁。
2024.6
注意：本試卷分為第I卷和第Ⅱ卷兩部分。第I卷為選擇題，第Ⅱ卷為非選擇題。I卷請(qǐng)考生用2B 鉛筆將答案填涂在答題卡上；Ⅱ卷請(qǐng)考生用黑色中性筆將自己的姓名、班級(jí)、學(xué)校等信息及所有答案填寫在答題卷相應(yīng)的位置上。
第Ⅰ卷（選擇題 共 36分）
一、選擇題（本題共18小題，每小題2分，共36分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。）
1. 下列關(guān)于種群和群落的敘述正確的是（ ）
A. 年齡結(jié)構(gòu)和性別比例都可通過影響出生率和死亡率來間接影響種群密度
B. 使用標(biāo)記重捕法調(diào)查種群密度時(shí)，所得結(jié)果往往比真實(shí)結(jié)果偏大
C. 高山不同海拔分布著不同的植被帶，屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)
D. 使用性引誘劑誘殺某種害蟲的雄性個(gè)體來降低其種群密度，這屬于化學(xué)防治
【答案】B
【分析】種群是指在一定定自然區(qū)域內(nèi)， 同種生物的全部個(gè)體形成種群。調(diào)查種群密度的方法主要包括標(biāo)志重捕法和樣方法。
群落是指在相同時(shí)間聚集在一定地域中各種生物種群的集合，群落水平上研究的問題主要包括群落的物種組成、群落的結(jié)構(gòu)、群落演替、群落的范圍和邊界、優(yōu)勢(shì)種以及群落內(nèi)的種間關(guān)系等。
【詳解】A、年齡結(jié)構(gòu)通過影響出生率和死亡率來間接影響種群密度，性別比例通過影響出生率來間接影響種群密度，A錯(cuò)誤；
B、使用標(biāo)記重捕法調(diào)查種群密度時(shí)，被標(biāo)記的動(dòng)物更難被重捕，所得結(jié)果往往比真實(shí)結(jié)果偏大，B正確；
C、高山的不同海拔分布著不同的植被帶，屬于不同的群落，不屬于群落的垂直結(jié)構(gòu)，C錯(cuò)誤；
D、使用性引誘劑誘殺害蟲的雄性個(gè)體來降低種群密度，這屬于生物防治，D錯(cuò)誤。
故選B。
2. 根據(jù)群落的外貌和物種組成可以將群落分成多種類型。某群落中的植物多為仙人掌屬、駱駝刺屬，駱駝刺植株才幾厘米高，而根長可達(dá)15米。請(qǐng)判斷該群落最可能是（ ）
A. 荒漠生物群落B. 草原生物群落
C. 森林生物群落D. 海洋生物群落
【答案】A
【分析】不同群落的主要區(qū)別是物種組成的不同，不同群落的生物都能適應(yīng)各自的環(huán)境，具有與環(huán)境相適應(yīng)的特征。
【詳解】A、群落中的植物多為仙人掌屬、駱駝刺屬，駱駝刺植株才幾厘米高，而根長可達(dá)15米，由此推斷該地區(qū)極度干旱，A正確；
B、草原上的植物往往葉片狹窄，表面有茸毛或蠟質(zhì)層，以減少水分散失，能抵抗干旱，但根系一般不會(huì)太長，B錯(cuò)誤；
C、熱帶雨林中的喬木高大，往往有板狀根，樹的分支不發(fā)達(dá)，只在樹頂形成樹冠，以爭奪陽光，C錯(cuò)誤；
D、濕地群落介于水生和陸生群落之間，所以濕地生物群落中的動(dòng)植物物種十分豐富，既有水生生物也有陸生生物，D錯(cuò)誤；
故選A。
3. “踧（dí）踧（平坦的狀態(tài)）周道（大路），鞠（jū，阻塞）為茂草”出自《詩經(jīng)·小雅·小弁》，下列與此詩句描述的關(guān)于群落水平上的問題明顯不一樣的是______。
①、山有榛，隰（低下的濕地）有苓（甘草）
②、遠(yuǎn)芳侵古道，晴翠接荒城
③、無田（治理）甫田，維莠（雜草）驕驕
④、野火燒不盡，春風(fēng)吹又生
【答案】①
【分析】踧（dí）踧（平坦的狀態(tài)）周道（大路），鞠（jū，阻塞）為茂草”意思是昔日繁華平直的大道,如今長滿茂盛的雜草，體現(xiàn)了群落的次生演替。
【詳解】①、“踧（dí）踧（平坦的狀態(tài)）周道（大路），鞠（jū，阻塞）為茂草”意思是昔日繁華平直的大道,如今長滿茂盛的雜草，體現(xiàn)了群落的次生演替。山有榛，隰有苓指榛樹長在山上， 甘草長在低下的濕地，體現(xiàn)了群落的水平結(jié)構(gòu)，①符合題意；
②、“遠(yuǎn)芳侵古道，晴翠接荒城”意思是晴空下，翠綠的野草連成一片，淹沒古道，伸向遠(yuǎn)方，連接著荒涼的古城，體現(xiàn)了群落的次生演替，②不符合題意；
③、無田（治理）甫田，維莠（雜草）驕驕?zhǔn)侵复筇飳拸V不可耕，田里的野草高高長勢(shì)旺，體現(xiàn)了群落的次生演替，③不符合題意；
④、野火燒不盡，春風(fēng)吹又生意思是不管烈火怎樣無情地焚燒，只要春風(fēng)一吹，又是遍地青青的野草，體現(xiàn)了群落的次生演替，④不符合題意。
故選①。
4. 2023年4月，習(xí)近平總書記赴湛江考察了麻章區(qū)湖光鎮(zhèn)金牛島紅樹林片區(qū)，了解當(dāng)?shù)貙?duì)紅樹林的保護(hù)情況。濕地被譽(yù)為“地球之腎”，是極其珍貴的自然資源，也是重要的生態(tài)系統(tǒng)，具有不可替代的綜合功能。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 紅樹林濕地提供了良好的休閑觀光場所，體現(xiàn)了生物多樣性的直接價(jià)值，是生物多樣性最重要的價(jià)值
B. 建立紅樹林濕地保護(hù)區(qū)是對(duì)紅樹林濕地最有效的保護(hù)
C. 在濕地修復(fù)過程中要有效選擇生物組分并合理布設(shè)，這是遵循生態(tài)工程的自生原理
D. 保護(hù)生物多樣性的關(guān)鍵是要處理好人與自然的相互關(guān)系
【答案】A
【分析】生物多樣性的保護(hù)：（1）就地保護(hù)（自然保護(hù)區(qū)）：就地保護(hù)是保護(hù)物種多樣性最為有效的措施。（2）易地保護(hù)：動(dòng)物園、植物園。
生物多樣性的價(jià)值：包括直接價(jià)值、間接價(jià)值、潛在價(jià)值。
【詳解】A、紅樹林濕地為人類提供了良好的休閑觀光場所，這體現(xiàn)了生物多樣性的直接價(jià)值，但不是生物多樣性最重要的價(jià)值，生物多樣性的間接價(jià)值明顯大于它的直接價(jià)值，A錯(cuò)誤；
B、對(duì)生物多樣性保護(hù)最有效的措施是就地保護(hù)，即建立保護(hù)區(qū)，B正確；
C、在濕地修復(fù)過程中要有效選擇生物組分并合理布設(shè)，這是遵循生態(tài)工程的自生原理，C正確；
D、保護(hù)生物多樣性的關(guān)鍵是要處理好人與自然的相互關(guān)系 ，做到協(xié)調(diào)發(fā)展，D正確。
故選A。
5. 以下有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵食品敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A. 腐乳是豆腐經(jīng)過毛霉、曲霉等混合菌種發(fā)酵制作的食品
B. 制作泡菜時(shí)，要用煮沸后冷卻的白開水浸沒新鮮蔬菜
C. 果酒發(fā)酵瓶內(nèi)留有1/3空間，可以促進(jìn)酵母菌的繁殖
D. 醋酸菌將果酒中的糖和乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸需要消耗氧氣
【答案】B
【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。
參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br>【詳解】A、腐乳的制作需要毛霉、曲霉等混合菌種參與，A正確；
B、制作泡菜時(shí)，要用煮沸后冷卻的鹽水浸沒新鮮蔬菜，B錯(cuò)誤；
C、果酒發(fā)酵瓶內(nèi)留有1/3空間，保證發(fā)酵初期有氧氣供應(yīng)，可以促進(jìn)酵母菌的繁殖，C正確；
D、醋酸菌是好氧菌，將果酒中的糖和乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸需要消耗氧氣，D正確。
故選B。
6. 下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的敘述正確的是（ ）
A. 培養(yǎng)基的配方中不一定都含有碳源、氮源
B. 微生物的純培養(yǎng)物就是不含有代謝廢物的微生物培養(yǎng)物
C. 用稀釋涂布平板法對(duì)微生物計(jì)數(shù)，通過菌落數(shù)推測(cè)出活菌數(shù)與實(shí)際值相等
D. 用平板劃線法對(duì)微生物計(jì)數(shù)，統(tǒng)計(jì)結(jié)果比實(shí)際偏小
【答案】A
【分析】培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。
由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。
【詳解】A、某些特殊種類微生物的培養(yǎng)基中可不含氮源或碳源，如硝化細(xì)菌能夠利用空氣中的CO2，其培養(yǎng)基中可以不添加碳源，A正確；
B、微生物的純培養(yǎng)物是由單一個(gè)體繁殖所獲得的不含雜菌的微生物，而不是不含代謝廢物，B錯(cuò)誤；
C、使用稀釋涂布平板法對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，C錯(cuò)誤；
D、平板劃線法能分離純化菌種，獲得單菌落，但不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。
故選A。
7. 滅菌、消毒是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見的無菌操作操作。下列敘述正確的是（ ）
A. 動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行
B. 微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C. 制作果酒的發(fā)酵瓶在清洗干凈后還需用70%的酒精消毒處理
D. 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基滅菌后蛋白質(zhì)變性失活不利于培養(yǎng)微生物
【答案】C
【分析】使用強(qiáng)烈理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和濕熱滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。
【詳解】A、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；
B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，但抗生素具有殺菌作用，因此微生物的培養(yǎng)不一定能加入抗生素，B錯(cuò)誤；
C、發(fā)酵瓶使用前要清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，是為了避免雜菌污染，C正確；
D、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)變性失活不影響微生物的利用，D錯(cuò)誤。
故選C。
8. 《齊民要術(shù)》記載了古人在生產(chǎn)中運(yùn)用發(fā)酵技術(shù)加工食品積累的許多寶貴經(jīng)驗(yàn)。其中關(guān)于桃醋的做法有如下記載：“桃爛自零者，收取，內(nèi)之于甕中，以物蓋口。七日之后，既爛，漉去皮核，密封閉之。三七日酢成，香美可食?！毕铝邢嚓P(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. “七日之后”發(fā)酵液中的pH會(huì)降低，其表面可能形成一層菌膜
B. “漉去皮核”可增加微生物與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸面積，提高發(fā)酵效率
C. “以物蓋口”和“密封閉之”都是為了防止雜菌污染、創(chuàng)設(shè)無氧環(huán)境
D. 與未成熟的桃子相比，成熟的桃子單糖含量更高，利于酵母菌發(fā)酵
【答案】C
【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)，其代謝類型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30-35℃。
【詳解】A、“七日之后”主要進(jìn)行醋酸發(fā)酵，該過程產(chǎn)生的醋酸可以使發(fā)酵液中的pH降低，發(fā)酵液表面會(huì)出現(xiàn)一層醋酸菌膜，A正確；
B、過濾皮核后，發(fā)酵微生物與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸機(jī)會(huì)增加，發(fā)酵效率提高，B正確；
C、“密封閉之”的主要目的只是為了防止雜菌污染，醋酸發(fā)酵是需氧過程，C錯(cuò)誤；
D、桃子在成熟過程中，多糖轉(zhuǎn)化成單糖，單糖含量不斷增高，利于酵母菌發(fā)酵，D正確。
故選C。
9. 如圖是微生物平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)?2345，下列說法中錯(cuò)誤的是（ ）
A. 接種環(huán)的滅菌方法可在酒精燈火焰上灼燒或用酒精消毒
B. 平板劃線操作應(yīng)在火焰旁進(jìn)行而不能在火焰上進(jìn)行
C. 在5個(gè)區(qū)域中只要有單個(gè)活細(xì)菌就可能獲得所需要的菌落
D. 在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌
【答案】A
【分析】平板劃線法通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。
【詳解】A、進(jìn)行平板劃線操作之前，以及每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在酒精燈火焰上灼燒，不能用酒精消毒，A錯(cuò)誤；
B、平板劃線操作應(yīng)在火焰旁進(jìn)行，不能在火焰上進(jìn)行，B正確；
C、由題圖可知，5區(qū)域是最后一個(gè)區(qū)域，在5個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過培養(yǎng)即可獲得所需菌落，故有可能在5區(qū)域獲得所需要的菌落，其它區(qū)域也有可能得到所需要的菌落，C正確；
D、在1、2、3、4區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，保證每次劃線的菌種來自上一區(qū)域的末端，在1區(qū)域前灼燒是為了殺死雜菌，在5區(qū)域后灼燒滅菌，是防止接種環(huán)上的細(xì)菌污染環(huán)境，D正確。
故選A。
10. 栽培馬鈴薯為四倍體，野生馬鈴薯為二倍體。傳統(tǒng)育種方法難以將野生馬鈴薯的優(yōu)質(zhì)基因轉(zhuǎn)移到栽培馬鈴薯中。運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，有望解決該問題。以下敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 因野生種與栽培種雜交的子代高度不育，存在生殖隔離
B. 用纖維素酶與果膠酶處理馬鈴薯細(xì)胞以便獲得原生質(zhì)體
C. 可以用滅活的病毒或PEG促進(jìn)兩種馬鈴薯的原生質(zhì)體融合
D. 植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能夠打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)源雜交育種
【答案】C
【分析】植物細(xì)胞融合的方法∶ 物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）和化學(xué)法（聚乙二醇）;動(dòng)物細(xì)胞融合的方法∶物理法（離心、振動(dòng)、電刺激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）。
【詳解】A、野生種馬鈴薯和栽培種馬鈴薯是兩個(gè)不同的物種，存在生殖隔離，A正確；
B、制備馬鈴薯的原生質(zhì)體，可用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞，去除細(xì)胞壁，B正確；
C、可用聚乙二醇、電激等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，而滅活的病毒只能誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，C錯(cuò)誤；
D、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)能夠打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)源雜交育種，D正確。
故選C。
11. 植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥和工業(yè)等方面有著廣泛應(yīng)用。以下敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 用組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)名貴蘭花快速繁殖，且能保持親本優(yōu)良性狀
B. 取草莓根尖成熟區(qū)細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，可以實(shí)現(xiàn)作物脫毒并提高產(chǎn)量
C. 玉米可由花藥離體培養(yǎng)、人工誘導(dǎo)染色體加倍，獲得純合二倍體
D. 離體條件下大規(guī)模培養(yǎng)紅豆杉細(xì)胞，可獲得紫杉醇的工廠化生產(chǎn)
【答案】B
【分析】植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】A、植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)名貴蘭花快速繁殖，同時(shí)植物組織培養(yǎng)屬于無性繁殖，故能保持親本優(yōu)良性狀，A正確；
B、莖尖分生區(qū)病毒數(shù)量少甚至沒有，故取草莓莖尖分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng)，可以獲得脫毒苗并提高產(chǎn)量，B錯(cuò)誤；
C、可用玉米的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)獲得單倍體，再用秋水仙素處理萌發(fā)的幼苗，人工誘導(dǎo)染色體加倍，可獲得純合二倍體，C正確；
D、離體條件下大規(guī)模培養(yǎng)紅豆杉細(xì)胞（即植物細(xì)胞培養(yǎng)），可實(shí)現(xiàn)紫杉醇的工廠化生產(chǎn)，D正確。
故選B。
12. 以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的條件，敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用胃蛋白酶分散細(xì)胞
B. 哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度在36.5℃左右
C. 氣體環(huán)境由95%空氣和5%CO2組成，加入CO2用于維持培養(yǎng)液pH
D. 需定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
【答案】A
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件
（1）無菌、無毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理；定期更換培養(yǎng)液以清除代謝廢物。
（2）營養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等之外，通常還需要加入血清等一些天然成分。
（3）溫度、pH和滲透壓：（哺乳動(dòng)物）最適溫度為（36.5±0.5）℃，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的最適pH為7.2~7.4。
（4）氣體環(huán)境：所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。
【詳解】A、進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動(dòng)物組織，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，A錯(cuò)誤；
B、哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以（36.5±0.5）℃為宜，B正確；
C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境為95%空氣（其中的O2是細(xì)胞代謝所必需的）加5%CO2，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH，C正確；
D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，D正確。
故選A。
13. 某夫婦中妻子患線粒體基因遺傳病，丈夫正常。他們用正常女性捐獻(xiàn)的卵母細(xì)胞，通過“三親嬰兒”的技術(shù)，生下了正常的孩子，其培育過程如下。據(jù)圖分析，以下敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 若這對(duì)夫婦正常生育，孩子患該病概率是100%
B. 圖中甲為患病妻子，乙為卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者
C. 培育過程運(yùn)用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)
D. 三親嬰兒的染色體基因全部來自于這對(duì)夫婦
【答案】B
【分析】由題干信息：夫婦中妻子患線粒體基因遺傳病，丈夫正常，他們用正常女性捐獻(xiàn)的卵母細(xì)胞，通過“三親嬰兒”的技術(shù)生下了正常的孩子可知，志愿者提供去核的卵母細(xì)胞、妻子提供麗母細(xì)胞的細(xì)胞核，丈夫提供正常的精子。
【詳解】A、夫婦中妻子患線粒體基因遺傳病，屬于細(xì)胞質(zhì)遺傳，若這對(duì)夫婦正常生育，孩子患該病概率是100%，A正確；
B、由圖示可知，圖中乙提供細(xì)胞核，為患病妻子，甲提供去核的卵母細(xì)胞，為卵母細(xì)胞捐獻(xiàn)者，B錯(cuò)誤；
C、由圖示可知，培育過程運(yùn)用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，C正確；
D、三親嬰兒的染色體基因是由精子和卵細(xì)胞的細(xì)胞核融合而來，全部來自于這對(duì)夫婦，D正確。
故選B。
14. 某生物活動(dòng)小組為探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，進(jìn)行了取樣、系列梯度稀釋、涂布平板、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等步驟，實(shí)驗(yàn)操作過程如下，下列說法不正確的是（ ）
A. 圖中接種的培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長的微生物可能不能合成脲酶
B. 若每支試管稀釋10倍，則圖中a的數(shù)值應(yīng)為2.7，5號(hào)試管共稀釋了 106倍
C. 圖中左上角培養(yǎng)基菌落連成一片，可能是涂布不均勻造成的
D. 若僅以4號(hào)試管接種培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，5g該土壤中含分解尿素菌的估算數(shù)目是1.4×108個(gè)
【答案】D
【分析】土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)
（1）分離原理：
①土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕浮?br>②配制以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌。
（2）鑒定原理
分解尿素的細(xì)菌合成的脲酶可以將尿素分解為氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，則可確定該細(xì)菌能分解尿素。
稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，還能用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)單菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多個(gè)活菌。
【詳解】A、分離土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)配制以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長的微生物可能不能合成脲酶，如固氮菌能利用氮源生存，但其不能合成脲酶，A正確；
B、若每支試管稀釋10倍，則將0.3mL上清液與a mL無菌水混合稀釋10倍，需要a的數(shù)值為2.7。5g土壤加入50mL無菌水中被稀釋了10倍，則5號(hào)試管共稀釋了106倍，B正確；
C、涂布不均勻會(huì)造成的培養(yǎng)基中菌落分布不均勻，可能會(huì)造成菌落連成一片，C正確；
D、使用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)的計(jì)算方法為：每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）×M，其中C表示某一稀釋度的平板上生長的平均菌落數(shù)，V表示涂布平板時(shí)稀釋液的體積，M表示稀釋倍數(shù)。若僅以4號(hào)試管接種培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，5g該土壤中含有分解尿素的細(xì)菌的估算數(shù)目=（275+285+280）÷3÷0.2×105×5=7×108個(gè)，D錯(cuò)誤。
故選D。
15. 自然情況下，牛的生育率很低，畜牧業(yè)生產(chǎn)上可通過下圖兩種途徑實(shí)現(xiàn)良種牛的快速大量繁殖。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 圖中的激素處理是應(yīng)用外源促性腺激素促使雌性牛超數(shù)排卵
B. 途徑1受精前，需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ期
C. 途徑2進(jìn)行胚胎移植前，不要對(duì)供體和受體進(jìn)行免疫檢查
D. 途徑1和途徑2過程中都有胚胎的形成，均為有性生殖
【答案】D
【分析】試管動(dòng)物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚，對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。
【詳解】A、圖中的激素處理是應(yīng)用外源促性腺激素促使雌性牛超數(shù)排卵，從而為獲得更多的胚胎做準(zhǔn)備，A正確；
B、途徑1受精前，需將采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到MⅡ中期，因?yàn)榇藭r(shí)的卵母細(xì)胞能接受獲能的精子完成受精過程，B正確；
C、途徑2進(jìn)行胚胎移植前，需要對(duì)供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，不需要做免疫檢查，因?yàn)槭荏w子宮對(duì)移入的胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，C正確；
D、途徑1獲得試管牛的技術(shù)流程中包括體外受精、體外胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)，屬于有性生殖；途徑2獲得是試管牛是通過核移植技術(shù)獲得的，為無性生殖，D錯(cuò)誤。
故選D。
16. 下列關(guān)于基因表達(dá)載體的說法，不正確的是（ ）
A. 基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟
B. 終止子位于目的基因的下游，能夠終止翻譯過程
C. 基因表達(dá)載體包含啟動(dòng)子、目的基因、終止子、標(biāo)記基因等
D. 不同的目的基因所需的啟動(dòng)子不一定相同
【答案】B
【分析】基因表達(dá)載體的構(gòu)建：（1）目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。（2）基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因+復(fù)制原點(diǎn)。
【詳解】A、基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，A正確；
BC、基因表達(dá)載體包含啟動(dòng)子、目的基因、終止子、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等，終止子位于目的基因的下游，能夠終止轉(zhuǎn)錄過程，B錯(cuò)誤，C正確；
D、啟動(dòng)子具有組織特異性，不同的目的基因所需的啟動(dòng)子不一定相同，D正確。
故選B。
17. 下圖是 4 種限制酶識(shí)別序列及其酶切位點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 不同類型的限制酶切割后，有的產(chǎn)生黏性末端，有的產(chǎn)生平末端
B. 不同類型的限制酶切割后可能產(chǎn)生相同的黏性末端
C. 用酶1和酶2分別切割目的基因和質(zhì)粒，連接形成重組 DNA 分子后，重組 DNA 分子不能被酶2識(shí)別
D. 用酶3和酶4分別切割目的基因和質(zhì)粒后，其產(chǎn)物經(jīng)T4DNA連接酶催化能連接形成重組DNA 分子
【答案】C
【分析】限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；
（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的；
（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性；
（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。
題圖分析：酶1和酶2切割會(huì)形成黏性末端，并且形成的末端序列相同；酶3和酶4切割會(huì)形成平末端。
【詳解】A、結(jié)合圖示可知，不同類型的限制酶切割后，有的產(chǎn)生黏性末端（酶1和酶2），有的產(chǎn)生平末端（酶3和酶4），A正確；
B、不同類型的限制酶切割后可能產(chǎn)生相同的黏性末端，如圖中的酶1和酶2，B正確；
C、用酶1和酶2分別切割目的基因和質(zhì)粒，形成的末端序列相同，連接形成重組DNA分子后，重組DNA分子仍能被酶2識(shí)別，C錯(cuò)誤；
D、用酶3和酶4分別切割目的基因和質(zhì)粒后，產(chǎn)生的是平末端，而T4DNA連接酶能將平末端連接起來，即用酶3和酶4切割目的基因和質(zhì)粒形成的產(chǎn)物經(jīng)T4DNA連接酶催化可以連接形成重組DNA分子，D正確。
故選C。
18. 下圖為利用PCR 技術(shù)擴(kuò)增特定DNA片段的部分示意圖，圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。下列有關(guān)描述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)變性不需要解旋酶
B. 引物是子鏈合成延伸基礎(chǔ)，子鏈沿著模板鏈的3'→5'方向延伸
C. 在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的 DNA片段且占 1/4
D. 從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為15/16
【答案】D
【分析】PCR反應(yīng)需要的條件
PCR擴(kuò)增的過程
（1）變形：加熱超過90℃時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈。
（2）復(fù)性：當(dāng)溫度下降到50℃左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。
（3）延伸：當(dāng)溫度上升到72℃左右時(shí)，溶液中的4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下，通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。
【詳解】A、PCR擴(kuò)增時(shí)，當(dāng)加熱超過90℃時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈，因此不需要解旋酶，A正確；
B、PCR擴(kuò)增時(shí)需要引物和單鏈DNA結(jié)合，引物是子鏈延伸的基礎(chǔ)。DNA聚合酶能夠從引物的3，端開始連接脫氧核苷酸，因此子鏈沿著模板鏈的3，→5，方向延伸，B正確；
C、引物A或B結(jié)合的單鏈DNA記作長鏈，引物A或B合成的子鏈記作中鏈，以中鏈為模板合成的子鏈記作短鏈，則第一次循環(huán)結(jié)束后生成2個(gè)DNA，其兩條鏈均為長中；第二次循環(huán)結(jié)束后生成4個(gè)DNA，其中2個(gè)DNA的兩條鏈為長中， 2個(gè)DNA的兩條鏈為短中；第三次循環(huán)結(jié)束后生成8個(gè)DNA，其中2個(gè)DNA的兩條鏈為長中，4個(gè)DNA的兩條鏈為短中，2個(gè)DNA的兩條鏈為短短，這兩條脫氧核苷酸鏈等長，因此在第3次循環(huán)產(chǎn)物中才開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，該DNA片段占1/4，C正確；
D、從理論上推測(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物有16個(gè)DNA分子，只含有引物A的DNA片段是與其中一個(gè)模板鏈結(jié)合形成的DNA，因此第四輪循環(huán)產(chǎn)物中只含有引物A的DNA片段所占的比例為1/16，D錯(cuò)誤。
故選D。
第Ⅱ卷（非選擇題 共64分）
二、非選擇題（本題共4小題，共64分。）
19. 番茄潛葉蛾起源于南美洲的秘魯，是一種世界檢疫性入侵害蟲， 目前已經(jīng)擴(kuò)散到全球100多個(gè)國家，主要危害茄科植物，尤其嗜食番茄，嚴(yán)重威脅全球番茄產(chǎn)業(yè)。探究番茄潛葉蛾的有效防治方法，對(duì)番茄等作物的種植具有重要意義。請(qǐng)回答下列問題：
（1）番茄潛葉蛾入侵初期其數(shù)量往往呈現(xiàn)“J”形增長，主要原因有_____。
（2）雜食性蜂是番茄潛葉蛾的天敵，對(duì)番茄潛葉蛾卵的取食量大，且雜食性蜂的取食特點(diǎn)使其在獵物匱乏時(shí)仍能在番茄植株上可依賴番茄植株存活，目前已成功用于防治番茄潛葉蛾。雜食性蜂和番茄潛葉蛾的種間關(guān)系為_____；在番茄潛葉蛾蟲害發(fā)生_____（填“前”或“后”）期釋放雜食性蜂防治效果較好；在番茄作物周邊種植金盞菊有利于保持雜食性蜂的種群數(shù)量且降低其對(duì)番茄的危害，原因可能是_____。
（3）以番茄長勢(shì)和番茄潛葉蛾發(fā)生程度基本一致的3個(gè)大棚分別記為大棚1、大棚2、大棚3，作為3 次重復(fù)。將4種不同顏色的誘蛾器放置在大棚內(nèi)的相同位置，調(diào)查統(tǒng)計(jì)每種顏色誘蛾器的誘捕數(shù)量，結(jié)果如下圖所示：
據(jù)圖分析，_____色誘蛾器的誘捕效果最好，.理由是_____。
（4）由于使用殺蟲劑防治見效快、效果好，且較為經(jīng)濟(jì)，因此這是目前控制番茄潛葉蛾的主要手段。但是目前人們?cè)絹碓絻A向于利用生物關(guān)系抑制蟲害的生物防治，其優(yōu)點(diǎn)是_____。（答出兩點(diǎn)）
【答案】（1）食物和空間條件充裕、氣候適宜、沒有天敵等
（2）①. 種間競爭和捕食 ②. 前 ③. 雜食性蜂更喜捕食金盞菊
（3）①. 藍(lán) ②. 三個(gè)大棚中，藍(lán)色誘蛾器的誘捕數(shù)量均最多
（4）對(duì)環(huán)境無污染；效果好且持久；避免害蟲抗藥性增強(qiáng)
【分析】（1）番茄潛葉蛾入侵某地初期，由于食物和空間條件充裕、氣候條件適宜、沒有天敵等，因此其數(shù)量往往呈現(xiàn)J形增長。
（2）分析題干信息，雜食性蜂是番茄潛葉蛾的天敵，對(duì)番茄潛葉蛾卵的取食量大，說明二者之間的關(guān)系為捕食；雜食性蜂在獵物匱乏時(shí)仍能在番茄植株存活，說明雜食性峰也能食用番茄，和番茄潛葉蛾為競爭關(guān)系，由此可知雜食性蜂和番茄潛葉蛾的種間關(guān)系為種間競爭和捕食。
在番茄潛葉蛾蟲害發(fā)生前期，其種群增長速率慢，種群數(shù)量少，因此此時(shí)釋放雜食性蜂防治效果較好。在番茄作物周邊種植金盞菊有利于保持雜食性蜂的種群數(shù)量且降低其對(duì)番茄的危害，其原因可能是雜食性蜂更喜捕食金盞菊，減少對(duì)番茄的危害。
（3）分析柱形圖可知，三個(gè)大棚中，藍(lán)色誘蛾器的誘捕數(shù)量均最多，說明藍(lán)色誘捕器的誘捕效果最好。
（4）生物防治采用天然的生物控制劑或有益生物來控制病蟲害。其最大的優(yōu)點(diǎn)就是不污染環(huán)境，此外還有效果好且持久、避免害蟲抗藥性增強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。
20. 依據(jù)某生態(tài)系統(tǒng)構(gòu)建碳循環(huán)模式圖1，其中A、B、C為生態(tài)系統(tǒng)的組成成分。甲、乙、丙、丁是B中相互關(guān)聯(lián)的四種生物，它們所同化的能量如表格所示。請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括_____和_____。
（2）圖1的碳在無機(jī)環(huán)境和生物群落中的循環(huán)是以_____的形式進(jìn)行的。
（3）蚯蚓的活動(dòng)有利于農(nóng)作物對(duì)無機(jī)鹽離子的吸收，蚯蚓屬于圖1中生態(tài)系統(tǒng)成分中的_____（填A(yù)、B或C）。該成分在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是_____。
（4）若僅依據(jù)同化的能量表格請(qǐng)寫出由甲、乙、丙、丁所構(gòu)成的食物鏈（網(wǎng)）：_____，該食物鏈（網(wǎng)）中的所有生物是否能構(gòu)成一個(gè)生物群落并說明理由：_____。
【答案】（1）①. 生態(tài)系統(tǒng)的組成成分 ②. 營養(yǎng)結(jié)構(gòu)（食物鏈和食物網(wǎng)）
（2）CO2 （3）①. C ②. 將動(dòng)植物遺體殘骸中的有機(jī)物分解成無機(jī)物（將有機(jī)物分解成無機(jī)物）
（4）
不能，該食物網(wǎng)中的生物只包含生產(chǎn)者和消費(fèi)者，群落應(yīng)是該生態(tài)系統(tǒng)的所有生物，還缺少分解者
【分析】分析題圖可知，該圖是生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)模式圖，根據(jù)雙向箭頭判斷A為生產(chǎn)者，根據(jù)生產(chǎn)者指向消費(fèi)者、生產(chǎn)者、消費(fèi)者均指向分解者判斷B是消費(fèi)者，C是分解者。根據(jù)表格中四中生物同化的能量可以判斷甲、乙是初級(jí)消費(fèi)者，丙是次級(jí)消費(fèi)者，丁是三級(jí)消費(fèi)者。
（1）生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營養(yǎng)結(jié)構(gòu)（食物鏈和食物網(wǎng)）。
（2）綠色植物通過光合作用吸收大氣中的CO2，同時(shí)綠色植物、動(dòng)物的呼吸作用釋放CO2到大氣中，因此碳在無機(jī)環(huán)境與生物群落之間的主要循環(huán)形式為CO2。
（3）分析題圖，根據(jù)雙向箭頭判斷A為生產(chǎn)者，根據(jù)生產(chǎn)者指向消費(fèi)者、生產(chǎn)者、消費(fèi)者均指向分解者判斷B是消費(fèi)者，C是分解者。蚯蚓能將動(dòng)植物遺體殘骸中的有機(jī)物分解為無機(jī)物，是異養(yǎng)生物，在生態(tài)系統(tǒng)中屬于分解者，即屬于C。
（4）根據(jù)表格中四中生物同化的能量可以判斷甲、乙是初級(jí)消費(fèi)者，丙是次級(jí)消費(fèi)者，丁是三
級(jí)消費(fèi)者。所以構(gòu)成的食物網(wǎng)為。該食物網(wǎng)中的生物只包含生產(chǎn)者和消費(fèi)者，群落應(yīng)該是生態(tài)系統(tǒng)所有生物，缺失分解者，因此該食物網(wǎng)中的所有生物不能構(gòu)成一個(gè)生物群落。
21. 尼帕病毒是一種新型人獸共患病毒，能引起廣泛的血管炎，感染者有發(fā)熱、嚴(yán)重頭痛、腦膜炎等癥狀，給人及動(dòng)物帶來嚴(yán)重危害?？蒲腥藛T以獼猴為實(shí)驗(yàn)材料來生產(chǎn)抗尼帕病毒的單克隆抗體，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，已知B淋巴細(xì)胞的基因型為AA、骨髓瘤細(xì)胞的基因型為BB，回答以下問題：
（1）圖中應(yīng)向獼猴注射________。
（2）骨髓瘤細(xì)胞的生長特點(diǎn)是________。兩兩融合后的融合細(xì)胞可能存在的基因型是________，篩選1需要使用特定的培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上________的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。
（3）篩選2的兩個(gè)步驟是________。該過程中通常會(huì)使用有限稀釋法，即將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋，最終調(diào)整密度為5個(gè)/mL；將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL；在顯微鏡下挑選含1個(gè)細(xì)胞的孔，補(bǔ)加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克隆。與植物組織培養(yǎng)相比，該培養(yǎng)液中需要添加的特殊成分是________。檢測(cè)過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗尼帕病毒抗體，原因是________________________。
【答案】（1）滅活的尼帕病毒
（2）①. 適宜條件下可以無限增殖 ②. AABB、AAAA、BBBB ③. 未融合的細(xì)胞和同種融合的細(xì)胞
（3）①. 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè) ②. 血清 ③. 形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗體
【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
（1）分析題意，本流程目的是以獼猴為實(shí)驗(yàn)材料來生產(chǎn)抗尼帕病毒的單克隆抗體，由于抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，故圖中應(yīng)向獼猴注射（滅活的）尼帕病毒，誘導(dǎo)其產(chǎn)生特異性免疫。
（2）骨髓瘤細(xì)胞的生長特點(diǎn)是在適宜條件下可以無限增殖；細(xì)胞的融合具有隨機(jī)性，結(jié)合題干“已知B淋巴細(xì)胞的基因型為AA、骨髓瘤細(xì)胞的基因型為BB”可知，兩兩融合后的融合細(xì)胞可能存在的基因型是AABB、AAAA、BBBB；篩選1需要使用特定的培養(yǎng)基（通常是HAT培養(yǎng)基），在該培養(yǎng)基上未融合的細(xì)胞和同種融合的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長。
（3） 篩選2為第二次篩選，是對(duì)經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)（專一抗體檢驗(yàn)陽性），經(jīng)多次篩選，獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞；有限稀釋法是克隆化培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的一種方法：將細(xì)胞懸液進(jìn)行連續(xù)倍數(shù)稀釋，最終調(diào)整密度為5個(gè)/mL，將稀釋好的細(xì)胞懸液接種于96孔板，每孔加0.1mL，24h后在顯微鏡下挑選只含一個(gè)細(xì)胞的孔，補(bǔ)加培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)獲得細(xì)胞克??；為保證細(xì)胞正常生長，體外培養(yǎng)時(shí)與植物組織培養(yǎng)相比，該培養(yǎng)液中需要添加的特殊成分是血清；每種B細(xì)胞只能分泌一種抗體，而由于形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，不一定都能分泌抗尼帕病毒抗體，故檢測(cè)過程有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗尼帕病毒抗體。
22. 人們追求的除草劑的施用效果是既能高效除草，又能確保作物安然無恙?？赏ㄟ^轉(zhuǎn)基因技術(shù)將耐受或經(jīng)修飾的能降解草甘膦的基因?qū)胱魑?，使其耐除草劑。?qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）獲取抗除草劑基因之后，可以通過PCR特異性快速擴(kuò)增該基因，該反應(yīng)需要在一定的_____中進(jìn)行，需要提供模板、2種特異性引物、4種脫氧核苷酸和_____酶。常采用_____來鑒定 PCR的產(chǎn)物。
（2）為便于目的基因的表達(dá)和篩選，在基因表達(dá)載體的構(gòu)建時(shí)應(yīng)選用限制酶_____來切割質(zhì)粒和目的基因。構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心步驟，其目的是_____。
（3）啟動(dòng)子的作用是_____。在構(gòu)建好的基因表達(dá)載體中的標(biāo)記基因是_____，其作用是_____。
【答案】（1）①. 緩沖液 ②. 耐高溫的DNA聚合（TaqDNA聚合）③. 瓊脂糖凝膠電泳（電泳）法
（2）①. BamH I 和Sau3A I ②. 使目的基因在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定并表達(dá)
（3）①. RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄 ②. 四環(huán)素抗性基因 ③. 便于對(duì)重組DNA分子的篩選
【分析】PCR基本原理：PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子拷貝。在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，加入設(shè)計(jì)引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。
（1）PCR需要在一定的緩沖液中進(jìn)行，維持pH，需要提供模板、2種特異性的引物，4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（TaqDNA聚合），鑒定產(chǎn)物常用瓊脂糖凝膠電泳（電泳）法。
（2）根據(jù)圖中箭頭可知，目的基因應(yīng)位于啟動(dòng)子和終止子之間，所以不能用Bcl Ⅰ進(jìn)行切割，為了防止目的基因和運(yùn)載體的反向連接，不采用同種限制酶，即不用圖中的Hind Ⅲ，因此應(yīng)選用限制酶BamH I和Sau3A I切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段。構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中維持穩(wěn)定并表達(dá)。
（3）啟動(dòng)子位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。使用BamH I切割質(zhì)粒，將青霉素抗性基因破壞，所以標(biāo)記基因是四環(huán)素抗性基因，抗性基因的作用是便于對(duì)重組DNA分子的篩選。條件
在DNA復(fù)制中的作用
DNA母鏈
提供DNA復(fù)制模板
4種脫氧核苷酸
合成DNA子鏈的原料
（耐高溫的）DNA聚合酶
催化合成DNA子鏈
引物
使DNA聚合酶能夠從引物的3，端開始連接脫氧核苷酸
緩沖液（含Mg2+）
真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活
溫度
控制溫度可以使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行
甲
乙
丙
丁
同化的能量KJ·m-2·a-1
5000
3000
600
120