
熟記基因工程的四個(gè)操作程序
1.載體必須具備的條件:①能在受體細(xì)胞中保存下來并能自我復(fù)制;②具有1個(gè)或多個(gè)限制酶切割位點(diǎn),以便與外源基因連接。③具有標(biāo)記基因。(P72)2.PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫。它是一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理,在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件,對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。(P77)3.PCR反應(yīng)過程可以在PCR擴(kuò)增儀(PCR儀)中自動完成,完成以后,常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。(P79)4.基因表達(dá)載體要包括以下四個(gè)基本的結(jié)構(gòu):目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因。(P80)5.構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且遺傳給下一代,同時(shí),使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。(P80)
6.啟動子位于目的基因的上游,它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。(P80)7.標(biāo)記基因的作用:鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。(或供重組DNA的鑒定和選擇)。8.檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功,首先是分子水平的檢測,包括通過PCR等技術(shù)檢測棉花的染色體DNA上是否插入了Bt基因或檢測Bt基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA;從轉(zhuǎn)基因棉花中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交,檢測Bt基因是否翻譯成Bt抗蟲蛋白等。其次,還需要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。例如,通過采摘抗蟲棉的葉片飼喂棉鈴蟲來確定Bt基因是否賦予了棉花抗蟲特性以及抗性的程度。(P82)9.PCR反應(yīng)需提供分別與DNA兩條鏈結(jié)合的兩種引物,引物的作用是:使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。(P77)
Ⅰ.基因工程的理論基礎(chǔ)
Ⅱ.基因工程的基本工具
能力訓(xùn)練:1.圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn),ampr表示氨芐青霉素抗性基因,ner表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是( )A.圖甲中的質(zhì)粒用BamH Ⅰ切割后,含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),可用Pst Ⅰ和BamH Ⅰ切割質(zhì)粒和外源DNAC.用Pst Ⅰ和Hind Ⅲ酶切,可以保證目的基因與質(zhì)粒正確連接D.導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長
2.研究人員利用一種從魚體內(nèi)分離出的抗凍基因,培育出抗凍番茄植株,使得其幼苗的致死低溫下降了2 ℃。具體研發(fā)過程如下圖(其中AmpR為氨芐青霉素抗性基因)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)不用限制酶Alu Ⅰ切割魚抗凍基因的原因是 ,選擇Sma Ⅰ和Pst Ⅰ兩種限制酶切割魚抗凍基因和質(zhì)粒,而不是只選擇Pst Ⅰ一種酶切割抗凍基因和質(zhì)粒的優(yōu)點(diǎn)是 。
Alu Ⅰ酶會破壞魚抗凍基因
可防止目的基因和質(zhì)粒反向連接,防止目的基因、質(zhì)粒自身環(huán)化
(2)研究人員用Sma Ⅰ和Pst Ⅰ兩種限制酶切割抗凍基因和質(zhì)粒,獲得含抗凍基因的重組質(zhì)粒后,又用不同的限制酶對原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒進(jìn)行酶切,獲得片段大小如下表:(1 kb=1 000 bp,1 bp為一個(gè)堿基對,注意:DNA片段大小與圖中所畫比例一致)
由表中數(shù)據(jù)可知,魚抗凍基因的長度為________,若不考慮終止密碼子,抗凍基因合成的抗凍蛋白最多由________個(gè)氨基酸組成
難點(diǎn)突破:1.限制酶的選擇原則
(1)根據(jù)目的基因確定限制酶①應(yīng)選擇位于目的基因兩端的限制酶;②不能選擇目的基因內(nèi)部的限制酶。
Ⅲ.基因工程的基本操作程序
1.目的基因的篩選與獲取
(1)篩選:一般從相關(guān)的已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中進(jìn)行篩選。
(3)PCR技術(shù)及應(yīng)用
體內(nèi)DNA復(fù)制引物是RNA
結(jié)果:① n次復(fù)制后含有引物A的_______個(gè)。含有引物B的_______個(gè)。同時(shí)含有引物A和B的_______個(gè)。②從第____次擴(kuò)增開始能夠獲得單純的目的基因。
PCR擴(kuò)增目的基因的過程:
視頻講解:PCR原理及其反應(yīng)過程
如果已知某目的基因的序列和結(jié)構(gòu),利用PCR篩選和擴(kuò)增出該目的基因的關(guān)鍵是:
根據(jù)目的基因兩端的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物
能力訓(xùn)練:4.(2021·高考全國卷甲改編)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌,醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作:①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果;②從病人組織樣本中提取DNA;③利用PCR擴(kuò)增DNA片段;④采集病人組織樣本?;卮鹣铝袉栴}:(1)若要得到正確的檢測結(jié)果,正確的操作順序應(yīng)該是____________(用數(shù)字序號表示)。
(2)操作③中使用的酶是________________________。PCR 反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、________三步,其中復(fù)性的結(jié)果是__________________________________________。(3)為了做出正確的診斷,PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與______________特異性結(jié)合。(4)PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是指_______________________________________________________________________________________________________________________。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。
引物通過堿基互補(bǔ)配對與單鏈DNA結(jié)合
根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理,在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件,對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)
2.基因表達(dá)載體的構(gòu)建——基因工程的核心
在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,
特別注意:①啟動子、終止子a.啟動子(DNA片段)≠起始密碼子(位于mRNA上)。b.終止子(DNA片段)≠終止密碼子(位于mRNA上)。②目的基因插入位置:啟動子與終止子之間。
[提醒] 若考慮兩兩相連,則DNA連接酶連接DNA片段會出現(xiàn)三種情況:①目的基因與目的基因的連接;②目的基因與質(zhì)粒的連接;③質(zhì)粒與質(zhì)粒的連接,需篩選出重組質(zhì)粒。
3.將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程,稱為轉(zhuǎn)化。
轉(zhuǎn)化的實(shí)質(zhì)是將目的基因整合到受體細(xì)胞基因組中。
能力訓(xùn)練:5. 下列關(guān)于目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的敘述,不正確的是( )A. 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí),農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于大多數(shù)單子葉植物B. 顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動物中采用最多的方法C. 大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變D. 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法
6.為使玉米獲得抗除草劑性狀,科研人員進(jìn)行了相關(guān)操作(如圖所示)。含有內(nèi)含子的報(bào)告基因不能在原核生物中正確表達(dá),其正確表達(dá)產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。轉(zhuǎn)化過程中愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌,會導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。下列敘述錯(cuò)誤的是
A.T-DNA可將基因G轉(zhuǎn)移并整合到愈傷組織細(xì)胞的染色體DNA上B.利用物質(zhì)K和抗生素進(jìn)行篩選1,可獲得農(nóng)桿菌的藍(lán)色菌落C.利用物質(zhì)K和除草劑進(jìn)行篩選2,更易于獲得抗除草劑的轉(zhuǎn)基因植株D.愈傷組織重新分化為芽、根等器官的過程中,需要添加植物激素
難點(diǎn)突破:2.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
特別注意:兩次拼接和兩次導(dǎo)入
第一次拼接 是將目的基因拼接到Ti質(zhì)粒的T-DNA上;
第二次拼接 指被插入目的基因的T--DNA拼接到受體細(xì)胞染色體DNA上。
第一次導(dǎo)入 是將含目的基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌;
第二次導(dǎo)入 是指含目的基因的T-DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞。
7.某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入ampr或tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活(ampr表示氨芐青霉素抗性基因,tetr表示四環(huán)素抗性基因)。有人將此質(zhì)粒載體用BamH Ⅰ酶切后,與用BamH Ⅰ酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌。結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌。回答下列問題:
(1)質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有_________________________(答出兩點(diǎn)即可),而作為基因表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動子和終止子等。
能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因
(2)如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因是____________________________________________________________;并且______________和____________________________________________的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因是________________________________________________________________________。(3)基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來自_____________。
二者均不含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均不生長
含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒(或含有重組質(zhì)粒)
二者均含有氨芐青霉素抗性基因,在該培養(yǎng)基上均能生長
難點(diǎn)突破:3.四類受體細(xì)胞的篩選與判定
當(dāng)用相應(yīng)的限制酶切割了目的基因與載體后,可將二者混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化受體細(xì)胞,其結(jié)果有如下四種:
左邊四類受體細(xì)胞中通過“標(biāo)記基因”(制備的培養(yǎng)基)可區(qū)分出(1)(2)與(3)(4),而通過PCR等技術(shù),可進(jìn)一步區(qū)分(3)與(4)?!?
4.目的基因的檢測與鑒定
①目的:檢測目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性。
受體細(xì)胞的染色體DNA上是否插入了目的基因
目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA
目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)
M:marker;1-陽性質(zhì)粒;2:原始品系;3-9轉(zhuǎn)Bt品系;轉(zhuǎn)Bt基因品系PCR瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果
視頻講解:PCR產(chǎn)物的鑒定---瓊脂糖凝膠電泳法
飼喂害蟲(抗蟲接種實(shí)驗(yàn))
病毒(菌)感染(抗病接種實(shí)驗(yàn))
提取細(xì)胞產(chǎn)物與天然產(chǎn)品進(jìn)行功能活性比較
第四步:目的基因的檢測與鑒定
(2)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定
能力訓(xùn)練:8.(2023·廣東·校聯(lián)考二模)我國的生豬產(chǎn)量約占世界的一半。2018年8月,我國首次報(bào)告非洲豬瘟疫情(由ASFV病毒感染豬肺泡巨噬細(xì)胞引起的一種急性、高度致死性傳染病,全世界尚未研制出安全有效的疫苗):截至2021年,我國累計(jì)撲殺非洲豬瘟感染生豬超過100萬頭一我國科研人員在ASFV病毒的K基因(大小為790bp)中間插入熒光素酶基因(Gluc)和增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因(EGFP),構(gòu)建了可觀察及定量檢測酶活性的重組病毒(ASFV-Gluc-EGFP)體系,如左圖所示,實(shí)現(xiàn)了ASFV病毒的快捷高效檢測
回答下列問題:(1)左圖中的HindID和I能切開兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,它們屬于基因工程的
(工具酶)Gluc基因和EGFP基因有助于重組病毒的篩選,起到基因表達(dá)載體中 (填結(jié)構(gòu))的作用。(2)為初步鑒定重組病毒是否構(gòu)建成功,科研人員對ASFV病毒和重組病毒進(jìn)行PCR擴(kuò)增和電泳鑒定擴(kuò)增過程中,引物的作用是 。電泳得到右圖中的1號和2號兩種條帶,其中屬于重組病毒PCR產(chǎn)物的條帶是______號。
限制酶(限制性核酸內(nèi)切酶) 標(biāo)記基因
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
(3)為進(jìn)一步驗(yàn)證重組病毒是否成功表達(dá),科研人員將重組病毒接種到 細(xì)胞并培養(yǎng)一段時(shí)間,培養(yǎng)過程中所需的氣體主要有 。要分別檢測Gluc和EGFP兩種基因是否成功表達(dá),前者需要采用的方法有 ,后者則可通過觀察有無綠色熒光進(jìn)行判斷。
抗原-抗體雜交技術(shù),檢測熒光素酶的活性
9.甜蛋白是一種高甜度的特殊蛋白質(zhì),將甜蛋白基因?qū)敕芽商岣叻烟鹞?,改善果?shí)品質(zhì),獲得超甜植株。下圖是甜蛋白基因和Ti質(zhì)粒上限制酶切位點(diǎn)示意圖。回答下列相關(guān)問題:
(1) 利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得超甜番茄的核心步驟是 ,該過程需要選擇 限制酶切割甜蛋白基因。(2)Ti質(zhì)粒上的啟動子是 識別和結(jié)合的位點(diǎn),為了保證甜蛋白基因能夠在番茄細(xì)胞中表達(dá),應(yīng)將Ti質(zhì)粒上的啟動子替換為 。(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化番茄細(xì)胞時(shí),T-DNA的作用是 ,
該過程發(fā)生的變異類型為 。然后在添加 物質(zhì)的培養(yǎng)幕中培養(yǎng)番茄細(xì)胞,篩選轉(zhuǎn)化成功的愈傷組織。
構(gòu)建基因表達(dá)載體
番茄細(xì)胞中能表達(dá)的基因的啟動子
攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞并將其整合到受
體細(xì)胞的染色體DNA上
與DNA有關(guān)的幾種酶的比較
10. 如圖是獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖,請回答:(1) A→B利用的技術(shù)稱為______,其中②過程需要耐高溫的__________酶才能完成。(2) 圖中將目的基因?qū)朊藁?xì)胞需要經(jīng)過③過程,該過程為構(gòu)建______________,其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且可以遺傳給下一代,并能表達(dá)。(3) 上述流程示意圖中,將目的基因?qū)朊藁?xì)胞所采用的方法是____________法,該方法一般________(填“適宜”或“不適宜”)用于將目的基因?qū)雴巫尤~植物。(4) 欲確定抗蟲基因在 G 體內(nèi)是否表達(dá),在個(gè)體水平上需要做__________實(shí)驗(yàn)。如果抗蟲基因?qū)氤晒Γ遗c某條染色體的 DNA 整合起來,該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可視為雜合子,將該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉自交一代,預(yù)計(jì)后代中抗蟲植株占___________。
BamHⅠ和BclⅠ酶切形成的粘性末端相同,部分目的基因與質(zhì)粒反向連接
12.(2022·全國乙卷,38)新冠疫情出現(xiàn)后,病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用?;卮鹣铝袉栴}:(1)新冠病毒是一種RNA病毒,檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取RT—PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA,這一過程需要的酶是________________________,再通過PCR技術(shù)擴(kuò)增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準(zhǔn)確性,在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的____________________來進(jìn)行。PCR過程每次循環(huán)分為3步,其中溫度最低的一步是______________。
逆轉(zhuǎn)錄酶(或反轉(zhuǎn)錄酶)
(3)某人同時(shí)進(jìn)行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測(檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體),若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性,說明________________________(答出1種情況即可);若核酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性,說明______________________________________________。(4)常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S(具有抗原性)的編碼序列(目的基因)。為了制備蛋白疫苗,可以通過基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是__________________________________________________________。
曾感染新冠病毒,已康復(fù)
已感染新冠病毒,是患者
目的基因的篩選與獲取→構(gòu)建基因表達(dá)載體→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測與鑒定
13.(2022·華師一附中調(diào)研)加端PCR是使擴(kuò)增產(chǎn)物的末端加上一段DNA順序的PCR,加端PCR的引物被設(shè)計(jì)成除與模板配對的那一部分以外再加上若干堿基,以便能使擴(kuò)增產(chǎn)物的末端加上額外的一段DNA。hIGF-1 cDNA編碼成熟蛋白的序列兩端無起始密碼子和終止密碼子的對應(yīng)位置,也沒有合適的限制酶割切位點(diǎn),實(shí)驗(yàn)人員為了在枯草桿菌中表達(dá)hIGF-1,應(yīng)用加端PCR技術(shù)對hIGF-1 cDNA進(jìn)行改造,以期獲得含有hIGF-1成熟蛋白79個(gè)氨基酸編碼序列,并在兩端分別帶有Pst Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位點(diǎn)。加端PCR技術(shù)示意圖如下,回答下列問題:
(1)加端PCR時(shí)應(yīng)選用的引物是____________。每一個(gè)PCR循環(huán)要經(jīng)過________________三個(gè)階段。
(2)在目的基因的兩端添加限制酶切割位點(diǎn)的目的是_________________________________________________,將含有改造后的hIGF-1基因?qū)肟莶輻U菌的常用方法是用Ca2+處理枯草桿菌,其目的是___________________________________________________________________________________________________;原核細(xì)胞作為基因工程的受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有_____________________________________________________________________________________________________________________________(答出3點(diǎn))。
使目的基因經(jīng)限制酶切割后能
產(chǎn)生黏性末端和質(zhì)粒相連
使枯草桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞(或使枯草桿菌處于
一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài))
原核細(xì)胞為單細(xì)胞;細(xì)胞繁殖速度快;
遺傳物質(zhì)相對較少;易培養(yǎng);代謝速度快
14.CEA癌胚抗原是在1965年首先從結(jié)腸癌和胚胎組織中提取出的一種腫瘤相關(guān)抗原,是一種酸性糖蛋白。常用CEA抗體檢測血清中的CEA含量,進(jìn)行相關(guān)疾病的臨床診斷。下圖是CEA單克隆抗體的制備流程示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:
(1)如果用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA(也叫cDNA)片段,與載體連接后儲存在一個(gè)受體菌群中,這個(gè)受體菌群體叫這種生物的cDNA文庫。①表示從cDNA文庫中擴(kuò)增獲取大量目的基因的過程,那么A和人體內(nèi)的CEA基因的結(jié)構(gòu)上的區(qū)別是_________________________________________________________________。制備重組質(zhì)粒過程時(shí),為確保目的基因與質(zhì)粒準(zhǔn)確連接,應(yīng)采用圖示中的__________________酶的切割位點(diǎn)。過程②常用____________法。
cDNA文庫中擴(kuò)增獲得的目的基因中無啟動子、終止子、內(nèi)含子
Asc Ⅰ和BamHⅠ
(2)誘導(dǎo)融合成為雜交瘤細(xì)胞時(shí),常用的誘導(dǎo)方法有________________________________________(寫出三種)。細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要的氣體條件是___________________________________?! ?br/>PEG融合法、電融合法
95%的空氣和5%的CO2的混合氣體
(3)③表示______________________過程,獲得的C細(xì)胞的特點(diǎn)是_________________________________。
既能無限增殖,又能分泌專一抗體
(4)應(yīng)用獲得的單克隆抗體搭載抗癌藥物制成“生物導(dǎo)彈”治療癌癥,單克隆抗體具有的優(yōu)點(diǎn)是_________________________________________________________________________。
能準(zhǔn)確識別抗原的細(xì)微差異,與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,并且可以大量制備
回答下列問題。(1)過程①中,為構(gòu)建CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒,需對含有特定sgRNA編碼序列的DNA進(jìn)行酶切處理,然后將其插入經(jīng)相同酶切處理過的質(zhì)粒上,插入時(shí)所需要的酶是_________________。(2)過程②中,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞的方法是________________。
15.(2021·高考海南卷)CRISPR/Cas9是一種高效的基因編輯技術(shù),Cas9基因表達(dá)的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”,在單鏈向?qū)NA(sgRNA)引導(dǎo)下,切割DNA雙鏈以敲除目標(biāo)基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的工作原理如圖所示。
這是一份新高考生物二輪復(fù)習(xí)熱點(diǎn)專題專項(xiàng)突破課件 專題一0四 遺傳的分子基礎(chǔ)、變異與進(jìn)化(含答案),共54頁。PPT課件主要包含了梳理核心知識,微專題3生物的進(jìn)化,用含同位素標(biāo)記,同位素標(biāo)記的苯丙氨酸,現(xiàn)代生物進(jìn)化理論等內(nèi)容,歡迎下載使用。
這是一份新高考生物二輪復(fù)習(xí)熱點(diǎn)專題專項(xiàng)突破課件 專題一0二+基因工程(含PCR和電泳視頻)(含答案),共46頁。PPT課件主要包含了磷酸二酯,④②③①,顯微注射法,Ca2+處理法,原核細(xì)胞,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,體細(xì)胞或受精卵,受精卵,害蟲死亡,未出現(xiàn)病斑等內(nèi)容,歡迎下載使用。
這是一份新高考生物二輪復(fù)習(xí)熱點(diǎn)專題專項(xiàng)突破課件 專題一0三 孟德爾遺傳定律及應(yīng)用(含答案),共39頁。PPT課件主要包含了基因分離定律,基因自由組合定律,遺傳審題注意事項(xiàng),拆分法,應(yīng)用5,XWSMXwsm等內(nèi)容,歡迎下載使用。
微信掃碼,快速注冊
注冊成功