1.判斷有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用說(shuō)法的正誤(1)在瓊脂固體培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的單個(gè)菌落含有多種細(xì)菌。( )(2)檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)操作中，確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。( )(3)雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。( )(4)對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的有機(jī)化合物既是碳源又是氮源。( )(5)觀察細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，最好是在另一塊平板上接種無(wú)菌水作為對(duì)照實(shí)驗(yàn)。( )(6)平板劃線法要求多次劃線，稀釋涂布平板法中菌液要充分地稀釋。( )(7)倒平板時(shí)，應(yīng)將打開(kāi)的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上。( )(8)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)能采用稀釋涂布平板法，也能用平板劃線法。( )(9)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低。( )
2.判斷有關(guān)發(fā)酵工程應(yīng)用說(shuō)法的正誤(1)腐乳制作利用了毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶。( )(2)在制作果醋時(shí)，如果條件適宜，醋酸菌可將葡萄汁中的糖分解成乙酸。 ( )(3)果酒發(fā)酵所需的最適溫度高于果醋發(fā)酵溫度。( )(4)制作泡菜時(shí)，鹽水煮沸后可以立即使用。( )(5)泡菜的制作前期需要通入氧氣，后期應(yīng)嚴(yán)格保持無(wú)氧條件。( )(6)發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝產(chǎn)物、酶及菌體本身。( )(7)在啤酒生產(chǎn)中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速發(fā)酵過(guò)程，縮短生產(chǎn)周期。( )
碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽
1.發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)
2.歸納微生物在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中的應(yīng)用
C6H12O6→2C2H5OH（酒精）+CO2+能量
C6H12O6+2O2→2CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+能量
C2H5OH+O2→CH3COOH（醋酸+H2O+能量
C6H12O6→2C3H6O3（乳酸）+能量
1.(2022·湖北卷，11)關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣B.白酒、啤酒和果酒釀制的過(guò)程也是微生物生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程C.葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的都是酵母菌
2.(2022·湖北卷，14)廢水、廢料經(jīng)加工可變廢為寶。某工廠利用果糖生產(chǎn)廢水和沼氣池廢料生產(chǎn)蛋白質(zhì)的技術(shù)路線如圖所示。下列敘述正確的是(　　)
A.該生產(chǎn)過(guò)程中，一定有氣體生成B.微生物生長(zhǎng)所需碳源主要來(lái)源于沼氣池廢料C.該生產(chǎn)工藝?yán)梦⑸飬捬醢l(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)D.沼氣池廢料和果糖生產(chǎn)廢水在加入反應(yīng)器之前需要滅菌處理
3.（2023·汕尾一模）熱纖梭菌是一種能高效降解纖維素的嗜熱厭氧細(xì)菌，可分泌一種多酶復(fù)合體將纖維素水解為可溶性糖，在農(nóng)林廢棄物的轉(zhuǎn)化利用中具有應(yīng)用價(jià)值。圖是篩選該菌的過(guò)程，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．從牛糞堆的深層取樣比從表層取樣更加合理B．甲、丙都是以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基C．用平板乙統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)可準(zhǔn)確反映該菌的真實(shí)數(shù)量D．丙中纖維素的殘留量可反映該菌降解纖維素的能力
4.（2023·江門一模）甜瓣子是豆瓣醬的重要成分之一。生產(chǎn)甜瓣子時(shí)，先用蠶豆瓣和米曲霉制成豆瓣曲，待米曲霉達(dá)到一定數(shù)量后，向豆瓣曲中加一定量的鹽水制成醬醅，然后將醬醅轉(zhuǎn)入發(fā)酵池進(jìn)行發(fā)酵。下列關(guān)于甜瓣子生產(chǎn)過(guò)程的分析錯(cuò)誤的是（ ）A．制作豆瓣曲時(shí)，蠶豆瓣能為米曲霉提供碳源和氮源B．制作醬醅時(shí)，降低含鹽量有可能導(dǎo)致雜菌數(shù)量增加C．將米曲霉與蠶豆瓣混合相當(dāng)于微生物培養(yǎng)中的接種D．發(fā)酵時(shí)米曲霉數(shù)量增加，種群數(shù)量呈現(xiàn)“J”形增長(zhǎng)
5.(2022·廣東卷，21)研究深海獨(dú)特的生態(tài)環(huán)境對(duì)于開(kāi)發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學(xué)號(hào)”考察船對(duì)中國(guó)南?？瓶贾?，中國(guó)科學(xué)家采集了某海域1 146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進(jìn)一步研究了其生物學(xué)特性。
回答下列問(wèn)題：(1)研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28 ℃厭氧培養(yǎng)一段時(shí)間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________法。據(jù)圖分析，擬桿菌新菌株在以________為碳源時(shí)生長(zhǎng)狀況最好。
(2)研究發(fā)現(xiàn)，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來(lái)，推測(cè)其原因可能是__________________________________________________________________________________________。(答一點(diǎn)即可)
(3)藻類細(xì)胞解體后的難降解多糖物質(zhì)，通常會(huì)聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對(duì)深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是_______________________________________________________________________________________________________________。(4)深海冷泉環(huán)境特殊，推測(cè)此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________。
擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質(zhì)分解為無(wú)機(jī)物，歸還到無(wú)機(jī)環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進(jìn)行
某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質(zhì)才
能生存(或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活)
3.微生物培養(yǎng)中的無(wú)菌操作技術(shù)
4.培養(yǎng)基的基本成分
5.兩種純化細(xì)菌方法的比較
6.微生物分離與計(jì)數(shù)的兩個(gè)實(shí)例
紅色 復(fù)合物
通過(guò)連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散
將菌液進(jìn)行一系列的等比稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，以得到單菌落。
稀釋度合適的整個(gè)平板上都可找到單菌落
分離純化菌種，獲得單菌落
①分離純化菌種，獲得單菌落②用于計(jì)數(shù)
①都能分離純化菌種 ②都在固體培養(yǎng)基上進(jìn)行的
6.(2022·湖北卷，5)滅菌、消毒、無(wú)菌操作是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的操作。下列敘述正確的是(　　)A.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行B.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.可用濕熱滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)中所使用的微量離心管、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等進(jìn)行滅菌
7.(2022·山東濰坊統(tǒng)考)科研小組欲培養(yǎng)和分離若干種微生物用于對(duì)濕垃圾(包括剩菜、剩飯、菜葉、果皮等)的處理。下列有關(guān)敘述正確的是(　　)A.在微生物培養(yǎng)操作過(guò)程中，為防止雜菌污染，需要對(duì)培養(yǎng)基和操作者的雙手進(jìn)行滅菌B.衛(wèi)生紙類垃圾可采用焚燒的方式處理，能有效減少對(duì)環(huán)境的污染C.若從生活垃圾中分離分解尿素的微生物，可在培養(yǎng)基中加入酚酞指示劑，如果有尿素分解菌存在，則培養(yǎng)基中該菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈D.培養(yǎng)過(guò)程中需要向培養(yǎng)基中通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌，目的是使菌體充分接觸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和溶解氧，促進(jìn)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖
8.某興趣小組為研究“使用公筷對(duì)餐后菜品細(xì)菌數(shù)量的影響”，將每道菜分為3盤，一盤取樣冷藏，一盤使用公筷，一盤不用公筷，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖。下列相關(guān)操作或敘述正確的是( )。
9.（2023·揭陽(yáng)一模）中國(guó)科學(xué)家采集了某深海海域的沉積物樣品，分離、鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問(wèn)題：(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過(guò) 法接種到高氏一號(hào)（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。培養(yǎng)基中的酚能抑制細(xì)菌等雜菌的生長(zhǎng)，而放線菌能在該培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng)，這種培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。(2)通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16S rRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是 。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16S rRNA基因的原因是 。PCR產(chǎn)物一般可通過(guò) 鑒定。
耐高溫的DNA聚合酶
引物能與16S rRNA基因特異性結(jié)合或者引物是根據(jù)16S rRNA基因一段已知序列設(shè)計(jì)合成的
(3)紫色桿菌的紫色菌素（一種毒素，致死率高）能使培養(yǎng)基呈紫色，已知呋喃酮C30能明顯抑制紫色菌素的產(chǎn)生。研究人員篩選出了放線菌菌株A，用甲醇將菌株A發(fā)酵產(chǎn)物提取后配制成溶液，對(duì)提取物能否抑制紫色菌素的產(chǎn)生進(jìn)行了研究。①將紫色桿菌菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面，待菌液干燥后，將無(wú)菌圓紙片貼于培養(yǎng)基表面，按圖1所示在濾紙片上滴加溶液。該實(shí)驗(yàn)以__________組為對(duì)照，通過(guò)比較A、B、C三組的 可知提取物是否能抑制紫色菌素的產(chǎn)生。
②實(shí)驗(yàn)表明甲醇溶液不會(huì)影響紫色桿菌的繁殖，培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)A、B、C三組紫色桿菌的數(shù)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)，結(jié)果如圖2所示，據(jù)圖推測(cè)，深海放線菌A的提取物作為抗生素替代品的優(yōu)點(diǎn)是 。
不會(huì)影響致病菌的生長(zhǎng)，從而不會(huì)脅迫致病菌使其產(chǎn)生耐藥性##不易對(duì)致病菌形成選擇壓力而導(dǎo)致其產(chǎn)生耐藥性
10.泡菜是常見(jiàn)的自制食品。為提高泡菜品質(zhì)，某興趣小組開(kāi)展了以下實(shí)踐探索。(1)菌種的分離純化：選用優(yōu)質(zhì)泡菜的發(fā)酵液，用生理鹽水進(jìn)行稀釋。使用添加了1.5%CaCO3(白色粉末，可被乳酸分解)的培養(yǎng)基進(jìn)行菌株培養(yǎng)，2～3天后培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以乳酸菌為中心的________。挑取上述乳酸菌菌種，用________法進(jìn)一步純化。
(2)優(yōu)良菌種的篩選：將上述過(guò)程中獲得的多個(gè)菌種分別進(jìn)行發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，如圖。
①在發(fā)酵過(guò)程中要蓋好壇蓋并向邊緣的水槽中注滿水，這樣做的目的是保證乳酸菌發(fā)酵所需的_______環(huán)境。對(duì)照組沒(méi)有接種也能發(fā)酵，原因是_____________________。

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