一、單項選擇題（本題共12小題，每小題2分，總分24分）
1．在制作發(fā)酵食品的實踐中，控制發(fā)酵條件至關重要，下列敘述不正確的是（ ）
A．制作泡菜時，腌制的時間和食鹽用量都會影響亞硝酸鹽含量
B．在果酒發(fā)酵過程中，葡萄汁裝入發(fā)酵瓶需留大約1/3的空間
C．制作果酒后，如要繼續(xù)發(fā)酵制作果醋，需適當降低溫度
D．泡菜腌制過程中亞硝酸鹽的含量變化趨勢是先增加后減少
2．微生物在哪種培養(yǎng)基上生長會形成肉眼可見的菌落（ ）
A．液體培養(yǎng)基B．固體培養(yǎng)基
C．選擇培養(yǎng)基D．鑒別培養(yǎng)基
3．為加速我國北方冬春季秸稈原位還田的腐化過程，研究人員以凍牛糞為材料篩選出耐低溫（10°℃）的纖維素降解菌。相關敘述正確的是（ ）
A．初篩菌種前，要利用固體培養(yǎng)基在37℃條件下擴大培養(yǎng)目標菌種
B．用于篩選的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料、纖維素和牛肉膏蛋白胨
C．應選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進行純化
D．利用剛果紅染色法篩選出來的目的菌不一定都能分解纖維素
4．現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐有計算機控制系統(tǒng)，能對發(fā)酵過程的一些指標進行監(jiān)測和控制。下列指標無法監(jiān)測的是（ ）
A．菌體大小B．pHC．溶解氧D．溫度
5．生長素有多種生理效應，生長素及其類似物在生產(chǎn)、生活中得到廣泛的應用。下列說法錯誤的是（ ）
A．提高培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素的比值可促進愈傷組織分化生根
B．2，4-D可殺死禾谷類田間雙子葉雜草是由于雙子葉植物對2，4-D的敏感性高
C．雙子葉植物花、葉和果實的脫落過程中存在生長素與乙烯的相互作用
D．用適宜濃度的生長素類似物處理未受粉的番茄雌蕊，可獲得無子番茄
6．紫草素是從我國傳統(tǒng)中藥植物紫草中提取出來的一種脂溶性萘醌類化合物。多項研究表明紫草素具有抗炎、免疫抑制作用。下圖為紫草素的提取流程圖，錯誤的是（ ）
A．①過程中需要在培養(yǎng)基中加入一定比例的植物激素才能獲得愈傷組織
B．紫草素能夠從愈傷組織細胞中獲得，因此判斷紫草素一定是次生代謝產(chǎn)物
C．在工廠化生產(chǎn)紫草素的過程中，無須培養(yǎng)出完整的紫草植株
D．該流程主要通過促進細胞增殖來提高紫草素的產(chǎn)量
7．下列與動物細胞培養(yǎng)有關的表述中，不正確的是（ ）
A．動物細胞培養(yǎng)需要在5%的CO2和95%的O2混合的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)
B．原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右便會出現(xiàn)生長減緩停滯
C．傳代培養(yǎng)時，少數(shù)細胞會克服細胞壽命的自然極限，其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變
D．動物細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
8．如圖為某同學構建的細胞工程知識框架。以下相關說法正確的是（ ）
A．圖中①指植物體細胞雜交，該過程常用滅活的病毒處理兩種植物細胞
B．圖中②屬于分子水平上的生物工程技術
C．動物細胞融合與植物體細胞雜交，依據(jù)的原理完全相同，且都只能形成雜種細胞
D．用聚乙二醇處理大量混合在一起的兩種植物細胞的原生質(zhì)體，所獲得的融合細胞并不是都具備雙親的遺傳特性
9．利用治療性克隆技術治療胰島功能異常型糖尿病患者的基本流程如圖所示，據(jù)圖分析下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．胚胎干細胞可以取自囊胚期的內(nèi)細胞團
B．患者對注入的胰島細胞不會產(chǎn)生免疫排斥
C．該流程利用了細胞培養(yǎng)、細胞核移植和胚胎移植技術
D．治療性克隆技術可能會給很多疾病患者帶來福音
10．下列關于現(xiàn)代生物工程技術的敘述，正確的是（ ）
A．若檢測出標記基因所表達的性狀，說明重組質(zhì)粒已經(jīng)導入受體細胞
B．農(nóng)桿菌可侵染雙子葉植物，將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上即完成了轉(zhuǎn)化
C．制備產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞必須進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
D．要繁育高產(chǎn)奶牛，需要從原腸胚的滋養(yǎng)層細胞取材進行胚胎性別鑒定
11．如圖為產(chǎn)業(yè)化繁育良種牛的部分過程。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．過程②常使用顯微操作去核法對MⅡ期的卵母細胞進行處理
B．過程②無核卵母細胞可以為重組細胞全能性的表達提供物質(zhì)基礎
C．過程③可用物理或化學方法進行處理，目的是激活重組細胞完成細胞分裂和發(fā)育進程，使其在體外發(fā)育至原腸胚以后再用于胚胎移植
D．E的遺傳物質(zhì)來自供體A和C，F(xiàn)的核遺傳物質(zhì)全部來自供體B
12．下列有關質(zhì)粒的敘述，不正確的是（ ）
A．質(zhì)粒分子中含有A、U、G、C四種堿基
B．質(zhì)粒是基因工程中常用的運載體
C．某些真核細胞中也有質(zhì)粒
D．質(zhì)粒中的每個五碳糖都與兩個磷酸基團相連接
二、單項選擇題（本題共4小題，每小題4分，總分16分）
13．基因組編輯技術（如CRISPR/Cas）的問世源自于人們在本世紀初對細菌抵御噬菌體的機理研究：不少的細菌第一次被特定的噬菌體感染后，由細菌Cas2基因表達的Cas2核酸內(nèi)切酶（蛋白質(zhì)）便會隨機低效切斷入侵的噬菌體DNA雙鏈，并將切下的DNA片段插入CRISPR位點，形成“免疫記憶”。當細菌再次遭遇同種噬菌體時，由CRISPR位點轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的crRNA便會將另一種核酸內(nèi)切酶（如Cas9）準確帶到入侵者DNA處，并將之切斷，即“免疫殺滅”。過程如圖所示。下列說法錯誤的是（ ）
A．細菌體內(nèi)發(fā)生圖中的①過程，需要細菌提供場所、模板、原料、能量等
B，圖中②過程的機理類似于mRNA與DNA模板鏈的結(jié)合
C．細菌在“免疫記憶”過程中發(fā)生了磷酸二酯鍵的斷裂和形成
D．“免疫殺滅”過程中，crRNA直接作用于噬菌體的DNA分子以“殺滅”噬菌體
14．利用山金柑愈傷組織細胞（2n）和早花檸檬葉肉細胞（2n）進行體細胞雜交可以得到高品質(zhì)、抗逆性強的雜種植株。下圖是7組雜種植株核DNA和線粒體DNA來源鑒定的結(jié)果。下列分析錯誤的是（ ）
A．山金柑愈傷組織細胞沒有細胞壁，早花檸檬葉肉細胞用酶解法去除細胞壁后才能與前者融合
B．據(jù)圖分析，雜種植株應為二倍體
C．可通過觀察融合后細胞的顏色進行初步篩選
D．雜種植株的核基因只來自早花檸檬，線粒體基因只來自山金柑
15．下列關于蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是（ ）
A．蛋白質(zhì)工程的基礎是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構規(guī)律及其與生物功能的關系
B．蛋白質(zhì)工程的操作對象是蛋白質(zhì)或控制蛋白質(zhì)合成的基因
C．蛋白質(zhì)工程的實質(zhì)是通過改變氨基酸的結(jié)構改變蛋白質(zhì)的功能
D．限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關鍵因素是基因工程技術還不成熟
16．抗蟲和耐除草劑玉米雙抗12-5是我國自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進行目的基因監(jiān)測，反應程序如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．預變性過程可促進模板DNA邊解旋邊復制
B．后延伸過程可使目的基因的擴增更加充分
C．延伸過程無需引物參與即可完成半保留復制
D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測含有目的基因后即可上市
三、非選擇題（本題共5小題，每小題12分，總分60分）
17．常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精。取從自然界中采集的葡萄，用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，然后按圖甲所示過程進行酵母菌的純化培養(yǎng)。圖乙是經(jīng)過圖甲步驟A純化培養(yǎng)的結(jié)果，圖丙是步驟C操作培養(yǎng)過程中，得到的一個菌落分布平板。請回答下列問題：
（1）步驟A和C所用的培養(yǎng)基中的凝固劑一般是_________，培養(yǎng)基滅菌的方法是___________，滅菌后進行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置，其原因之一是__________。
（2）圖乙結(jié)果顯示，在培養(yǎng)基上接種時劃線的順序依次是________（用編號表示），操作中需用__________（工具）挑取單個菌落進行接種。
（3）步驟C的接種方法是_________，根據(jù)圖丙結(jié)果判斷，接種時可能的操作失誤是____________。
（4）將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到僅以__________為碳源的培養(yǎng)基中，無氧條件下培養(yǎng)一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌不能利用木糖發(fā)酵。
（5）將經(jīng)上述流程培育獲得的釀酒酵母進行酒精發(fā)酵能力測試，能用于生產(chǎn)的酵母菌除了能分解木糖外，還需要具備的條件有__________和__________等。
18．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）培養(yǎng)時，通常選擇新生營養(yǎng)芽作為外植體，①和②分別表示____________和__________過程。
（2）微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術不受季節(jié)氣候等環(huán)境因素的限制，繁殖速度__________，且可以保持__________。
（3）多倍體的植物細胞產(chǎn)生的辣椒素的量常高于二倍體。為了獲得更多的辣椒素，科研人員常利用___________（試劑）處理二倍體愈傷組織細胞，使其細胞中的染色體數(shù)目加倍。欲確定愈傷組織細胞中的染色體數(shù)目，通常需制作裝片，進行顯微鏡觀察，此過程中需要對染色體染色，常用的染色劑是__________。
19．為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設計了以下實驗流程。
（1）上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導小鼠甲產(chǎn)生___________。
（2）寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟；取小鼠脾臟組織剪碎→用___________酶處理一段時間→加入培養(yǎng)液制成細胞懸液。
（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選，圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于______________（按功能），使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的目的是_____________。
（4）篩選2中對于抗體檢測呈___________性的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化培養(yǎng)。要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可在體外培養(yǎng)或___________。
20．器官移植中供體器官的嚴重缺乏一直是困擾需要器官移植患者的問題?？茖W家們培育出了猴鼠嵌合體—“猴鼠”，期待成果可用于人體角膜等器官的移植。請據(jù)圖回答下列問題：
（1）①培養(yǎng)過程中為了防止細胞代謝積累物對細胞自身造成危害，需要的操作是___________。
（2）常采用___________激素處理雌鼠，使其排出更多的卵子，然后從輸卵管中沖取卵子，直接與____________的精子在體外受精。
（3）實驗中③和④要同時注射激素在操作上稱為______________，將囊胚植入受體母鼠體內(nèi)的④過程運用了____________技術。
（4）囊胚已出現(xiàn)細胞分化，應將猴子的皮膚干細胞注射到小鼠囊胚的________部位，才能伴隨其發(fā)育成某種組織。若想進一步提高胚胎的利用率，可對圖中囊胚進行________。
21．“中天楊”是由我國科學家采用生物轉(zhuǎn)基因技術，歷經(jīng)8年時間培育成功的抗鹽堿、耐干旱的楊樹新品種。該品種以八里莊楊為實驗材料，經(jīng)轉(zhuǎn)mtl-D基因培育獲得。如圖為培育“中天楊”的操作流程，①-⑥表示操作過程，該過程中可能用到的限制酶如表所示。回答下列問題。
注：Ti質(zhì)粒中的Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ampr為氨芐青霉素抗性基因。
（1）與雜交育種相比，基因工程育種的優(yōu)點有________（填序號）。
①操作方法簡便②目的性強，能定向改造生物性狀③育種周期短④不受生殖隔離限制，能克服遠緣雜交不親和障礙⑤安全性高，對生態(tài)沒有威脅
（2）過程②需要的工具酶是__________。
（3）培育轉(zhuǎn)基因楊樹的核心工作是_________。
在進行該工作時，應在mt-D基因的兩側(cè)添加限制酶_________的識別序列。
（4）將目的基因?qū)胧荏w細胞除圖示方法外，還有__________。為了確認目的基因在植物細胞中是否成功表達，從分子水平通常使用__________法進行檢測。
參考答案
1-16．CBDAA BADCC CA DAAB
17．（除特殊說明外，每空1分，共12分）
（1）瓊脂 高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法） 防止冷凝水污染培養(yǎng)基（2分）
（2）①③② 接種環(huán)
（3）稀釋涂布平板法 涂布不均勻
（4）木糖（2分）
（5）產(chǎn)生酒精的能力強 耐酒精的能力強
18．（每空2分，12分）
（1）脫分化 再分化
（2）快 優(yōu)良品種的遺傳特性（優(yōu)良性狀）
（3）秋水仙素 甲紫溶液（或“醋酸洋紅液”）
19．（每空2分，12分）
（1）能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞（能分泌特定抗體的B淋巴細胞）
（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
（3）選擇培養(yǎng)基 獲得雜交瘤細胞
（4）陽 注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
20．（除特殊說明外，每空2分，12分）
（1）定期更換培養(yǎng)液
（2）促性腺（1分） 獲能（1分）
（3）同期發(fā)情處理 胚胎移植
（4）內(nèi)細胞團胚胎分割
21．（每空2分，12分）
（1）②③④
（2）限制酶和DNA連接酶
（3）基因表達載體的構建 XbaI、BclI
（4）花粉管通道法抗原-抗體雜交
限制酶
BelI
EcRI
XbaI
Sau3AI
BamHI
切割位點
T↓GATCA
G↓AATTC
T↓CTAGA
↓GATC
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