一、單項(xiàng)選擇題（本題共12小題，每小題2分，總分24分）
1．在制作發(fā)酵食品的實(shí)踐中，控制發(fā)酵條件至關(guān)重要，下列敘述不正確的是（ ）
A．制作泡菜時(shí)，腌制的時(shí)間和食鹽用量都會(huì)影響亞硝酸鹽含量
B．在果酒發(fā)酵過(guò)程中，葡萄汁裝入發(fā)酵瓶需留大約1/3的空間
C．制作果酒后，如要繼續(xù)發(fā)酵制作果醋，需適當(dāng)降低溫度
D．泡菜腌制過(guò)程中亞硝酸鹽的含量變化趨勢(shì)是先增加后減少
2．微生物在哪種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)會(huì)形成肉眼可見(jiàn)的菌落（ ）
A．液體培養(yǎng)基B．固體培養(yǎng)基
C．選擇培養(yǎng)基D．鑒別培養(yǎng)基
3．為加速我國(guó)北方冬春季秸稈原位還田的腐化過(guò)程，研究人員以?xún)雠＜S為材料篩選出耐低溫（10°℃）的纖維素降解菌。相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．初篩菌種前，要利用固體培養(yǎng)基在37℃條件下擴(kuò)大培養(yǎng)目標(biāo)菌種
B．用于篩選的培養(yǎng)基中加入剛果紅染料、纖維素和牛肉膏蛋白胨
C．應(yīng)選擇菌落直徑與周?chē)该魅χ睆奖戎荡蟮木溥M(jìn)行純化
D．利用剛果紅染色法篩選出來(lái)的目的菌不一定都能分解纖維素
4．現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐有計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)，能對(duì)發(fā)酵過(guò)程的一些指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)和控制。下列指標(biāo)無(wú)法監(jiān)測(cè)的是（ ）
A．菌體大小B．pHC．溶解氧D．溫度
5．生長(zhǎng)素有多種生理效應(yīng)，生長(zhǎng)素及其類(lèi)似物在生產(chǎn)、生活中得到廣泛的應(yīng)用。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．提高培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值可促進(jìn)愈傷組織分化生根
B．2，4-D可殺死禾谷類(lèi)田間雙子葉雜草是由于雙子葉植物對(duì)2，4-D的敏感性高
C．雙子葉植物花、葉和果實(shí)的脫落過(guò)程中存在生長(zhǎng)素與乙烯的相互作用
D．用適宜濃度的生長(zhǎng)素類(lèi)似物處理未受粉的番茄雌蕊，可獲得無(wú)子番茄
6．紫草素是從我國(guó)傳統(tǒng)中藥植物紫草中提取出來(lái)的一種脂溶性萘醌類(lèi)化合物。多項(xiàng)研究表明紫草素具有抗炎、免疫抑制作用。下圖為紫草素的提取流程圖，錯(cuò)誤的是（ ）
A．①過(guò)程中需要在培養(yǎng)基中加入一定比例的植物激素才能獲得愈傷組織
B．紫草素能夠從愈傷組織細(xì)胞中獲得，因此判斷紫草素一定是次生代謝產(chǎn)物
C．在工廠化生產(chǎn)紫草素的過(guò)程中，無(wú)須培養(yǎng)出完整的紫草植株
D．該流程主要通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖來(lái)提高紫草素的產(chǎn)量
7．下列與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的表述中，不正確的是（ ）
A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要在5%的CO2和95%的O2混合的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)
B．原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右便會(huì)出現(xiàn)生長(zhǎng)減緩?fù)?br>C．傳代培養(yǎng)時(shí)，少數(shù)細(xì)胞會(huì)克服細(xì)胞壽命的自然極限，其遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變
D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
8．如圖為某同學(xué)構(gòu)建的細(xì)胞工程知識(shí)框架。以下相關(guān)說(shuō)法正確的是（ ）
A．圖中①指植物體細(xì)胞雜交，該過(guò)程常用滅活的病毒處理兩種植物細(xì)胞
B．圖中②屬于分子水平上的生物工程技術(shù)
C．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交，依據(jù)的原理完全相同，且都只能形成雜種細(xì)胞
D．用聚乙二醇處理大量混合在一起的兩種植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，所獲得的融合細(xì)胞并不是都具備雙親的遺傳特性
9．利用治療性克隆技術(shù)治療胰島功能異常型糖尿病患者的基本流程如圖所示，據(jù)圖分析下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．胚胎干細(xì)胞可以取自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
B．患者對(duì)注入的胰島細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生免疫排斥
C．該流程利用了細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植和胚胎移植技術(shù)
D．治療性克隆技術(shù)可能會(huì)給很多疾病患者帶來(lái)福音
10．下列關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)的敘述，正確的是（ ）
A．若檢測(cè)出標(biāo)記基因所表達(dá)的性狀，說(shuō)明重組質(zhì)粒已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞
B．農(nóng)桿菌可侵染雙子葉植物，將目的基因?qū)隩i質(zhì)粒上即完成了轉(zhuǎn)化
C．制備產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞必須進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)
D．要繁育高產(chǎn)奶牛，需要從原腸胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞取材進(jìn)行胚胎性別鑒定
11．如圖為產(chǎn)業(yè)化繁育良種牛的部分過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)MⅡ期的卵母細(xì)胞進(jìn)行處理
B．過(guò)程②無(wú)核卵母細(xì)胞可以為重組細(xì)胞全能性的表達(dá)提供物質(zhì)基礎(chǔ)
C．過(guò)程③可用物理或化學(xué)方法進(jìn)行處理，目的是激活重組細(xì)胞完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，使其在體外發(fā)育至原腸胚以后再用于胚胎移植
D．E的遺傳物質(zhì)來(lái)自供體A和C，F(xiàn)的核遺傳物質(zhì)全部來(lái)自供體B
12．下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，不正確的是（ ）
A．質(zhì)粒分子中含有A、U、G、C四種堿基
B．質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體
C．某些真核細(xì)胞中也有質(zhì)粒
D．質(zhì)粒中的每個(gè)五碳糖都與兩個(gè)磷酸基團(tuán)相連接
二、單項(xiàng)選擇題（本題共4小題，每小題4分，總分16分）
13．基因組編輯技術(shù)（如CRISPR/Cas）的問(wèn)世源自于人們?cè)诒臼兰o(jì)初對(duì)細(xì)菌抵御噬菌體的機(jī)理研究：不少的細(xì)菌第一次被特定的噬菌體感染后，由細(xì)菌Cas2基因表達(dá)的Cas2核酸內(nèi)切酶（蛋白質(zhì)）便會(huì)隨機(jī)低效切斷入侵的噬菌體DNA雙鏈，并將切下的DNA片段插入CRISPR位點(diǎn)，形成“免疫記憶”。當(dāng)細(xì)菌再次遭遇同種噬菌體時(shí)，由CRISPR位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的crRNA便會(huì)將另一種核酸內(nèi)切酶（如Cas9）準(zhǔn)確帶到入侵者DNA處，并將之切斷，即“免疫殺滅”。過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．細(xì)菌體內(nèi)發(fā)生圖中的①過(guò)程，需要細(xì)菌提供場(chǎng)所、模板、原料、能量等
B，圖中②過(guò)程的機(jī)理類(lèi)似于mRNA與DNA模板鏈的結(jié)合
C．細(xì)菌在“免疫記憶”過(guò)程中發(fā)生了磷酸二酯鍵的斷裂和形成
D．“免疫殺滅”過(guò)程中，crRNA直接作用于噬菌體的DNA分子以“殺滅”噬菌體
14．利用山金柑愈傷組織細(xì)胞（2n）和早花檸檬葉肉細(xì)胞（2n）進(jìn)行體細(xì)胞雜交可以得到高品質(zhì)、抗逆性強(qiáng)的雜種植株。下圖是7組雜種植株核DNA和線粒體DNA來(lái)源鑒定的結(jié)果。下列分析錯(cuò)誤的是（ ）
A．山金柑愈傷組織細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁，早花檸檬葉肉細(xì)胞用酶解法去除細(xì)胞壁后才能與前者融合
B．據(jù)圖分析，雜種植株應(yīng)為二倍體
C．可通過(guò)觀察融合后細(xì)胞的顏色進(jìn)行初步篩選
D．雜種植株的核基因只來(lái)自早花檸檬，線粒體基因只來(lái)自山金柑
15．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的敘述，正確的是（ ）
A．蛋白質(zhì)工程的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系
B．蛋白質(zhì)工程的操作對(duì)象是蛋白質(zhì)或控制蛋白質(zhì)合成的基因
C．蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是通過(guò)改變氨基酸的結(jié)構(gòu)改變蛋白質(zhì)的功能
D．限制蛋白質(zhì)工程發(fā)展的關(guān)鍵因素是基因工程技術(shù)還不成熟
16．抗蟲(chóng)和耐除草劑玉米雙抗12-5是我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因品種。為給監(jiān)管轉(zhuǎn)基因生物安全提供依據(jù)，采用PCR方法進(jìn)行目的基因監(jiān)測(cè)，反應(yīng)程序如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．預(yù)變性過(guò)程可促進(jìn)模板DNA邊解旋邊復(fù)制
B．后延伸過(guò)程可使目的基因的擴(kuò)增更加充分
C．延伸過(guò)程無(wú)需引物參與即可完成半保留復(fù)制
D．轉(zhuǎn)基因品種經(jīng)檢測(cè)含有目的基因后即可上市
三、非選擇題（本題共5小題，每小題12分，總分60分）
17．常見(jiàn)的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來(lái)進(jìn)行酒精發(fā)酵，而自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精。取從自然界中采集的葡萄，用無(wú)菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無(wú)菌的三角瓶中，然后按圖甲所示過(guò)程進(jìn)行酵母菌的純化培養(yǎng)。圖乙是經(jīng)過(guò)圖甲步驟A純化培養(yǎng)的結(jié)果，圖丙是步驟C操作培養(yǎng)過(guò)程中，得到的一個(gè)菌落分布平板。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）步驟A和C所用的培養(yǎng)基中的凝固劑一般是_________，培養(yǎng)基滅菌的方法是___________，滅菌后進(jìn)行倒平板操作，待平板冷凝后，要將平板倒置，其原因之一是__________。
（2）圖乙結(jié)果顯示，在培養(yǎng)基上接種時(shí)劃線的順序依次是________（用編號(hào)表示），操作中需用__________（工具）挑取單個(gè)菌落進(jìn)行接種。
（3）步驟C的接種方法是_________，根據(jù)圖丙結(jié)果判斷，接種時(shí)可能的操作失誤是____________。
（4）將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到僅以__________為碳源的培養(yǎng)基中，無(wú)氧條件下培養(yǎng)一周后，有些酵母菌死亡，說(shuō)明這些酵母菌不能利用木糖發(fā)酵。
（5）將經(jīng)上述流程培育獲得的釀酒酵母進(jìn)行酒精發(fā)酵能力測(cè)試，能用于生產(chǎn)的酵母菌除了能分解木糖外，還需要具備的條件有__________和__________等。
18．辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）培養(yǎng)時(shí)，通常選擇新生營(yíng)養(yǎng)芽作為外植體，①和②分別表示____________和__________過(guò)程。
（2）微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)不受季節(jié)氣候等環(huán)境因素的限制，繁殖速度__________，且可以保持__________。
（3）多倍體的植物細(xì)胞產(chǎn)生的辣椒素的量常高于二倍體。為了獲得更多的辣椒素，科研人員常利用___________（試劑）處理二倍體愈傷組織細(xì)胞，使其細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍。欲確定愈傷組織細(xì)胞中的染色體數(shù)目，通常需制作裝片，進(jìn)行顯微鏡觀察，此過(guò)程中需要對(duì)染色體染色，常用的染色劑是__________。
19．為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學(xué)以小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)流程。
（1）上述實(shí)驗(yàn)前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導(dǎo)小鼠甲產(chǎn)生___________。
（2）寫(xiě)出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要實(shí)驗(yàn)步驟；取小鼠脾臟組織剪碎→用___________酶處理一段時(shí)間→加入培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液。
（3）為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要進(jìn)行篩選，圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于______________（按功能），使用該培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的目的是_____________。
（4）篩選2中對(duì)于抗體檢測(cè)呈___________性的雜交瘤細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化培養(yǎng)。要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖，可在體外培養(yǎng)或___________。
20．器官移植中供體器官的嚴(yán)重缺乏一直是困擾需要器官移植患者的問(wèn)題。科學(xué)家們培育出了猴鼠嵌合體—“猴鼠”，期待成果可用于人體角膜等器官的移植。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：
（1）①培養(yǎng)過(guò)程中為了防止細(xì)胞代謝積累物對(duì)細(xì)胞自身造成危害，需要的操作是___________。
（2）常采用___________激素處理雌鼠，使其排出更多的卵子，然后從輸卵管中沖取卵子，直接與____________的精子在體外受精。
（3）實(shí)驗(yàn)中③和④要同時(shí)注射激素在操作上稱(chēng)為_(kāi)_____________，將囊胚植入受體母鼠體內(nèi)的④過(guò)程運(yùn)用了____________技術(shù)。
（4）囊胚已出現(xiàn)細(xì)胞分化，應(yīng)將猴子的皮膚干細(xì)胞注射到小鼠囊胚的________部位，才能伴隨其發(fā)育成某種組織。若想進(jìn)一步提高胚胎的利用率，可對(duì)圖中囊胚進(jìn)行________。
21．“中天楊”是由我國(guó)科學(xué)家采用生物轉(zhuǎn)基因技術(shù)，歷經(jīng)8年時(shí)間培育成功的抗鹽堿、耐干旱的楊樹(shù)新品種。該品種以八里莊楊為實(shí)驗(yàn)材料，經(jīng)轉(zhuǎn)mtl-D基因培育獲得。如圖為培育“中天楊”的操作流程，①-⑥表示操作過(guò)程，該過(guò)程中可能用到的限制酶如表所示?；卮鹣铝袉?wèn)題。
注：Ti質(zhì)粒中的Tetr為四環(huán)素抗性基因，Ampr為氨芐青霉素抗性基因。
（1）與雜交育種相比，基因工程育種的優(yōu)點(diǎn)有________（填序號(hào)）。
①操作方法簡(jiǎn)便②目的性強(qiáng)，能定向改造生物性狀③育種周期短④不受生殖隔離限制，能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙⑤安全性高，對(duì)生態(tài)沒(méi)有威脅
（2）過(guò)程②需要的工具酶是__________。
（3）培育轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)的核心工作是_________。
在進(jìn)行該工作時(shí)，應(yīng)在mt-D基因的兩側(cè)添加限制酶_________的識(shí)別序列。
（4）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞除圖示方法外，還有__________。為了確認(rèn)目的基因在植物細(xì)胞中是否成功表達(dá)，從分子水平通常使用__________法進(jìn)行檢測(cè)。
參考答案
1-16．CBDAA BADCC CA DAAB
17．（除特殊說(shuō)明外，每空1分，共12分）
（1）瓊脂 高壓蒸汽滅菌法（濕熱滅菌法） 防止冷凝水污染培養(yǎng)基（2分）
（2）①③② 接種環(huán)
（3）稀釋涂布平板法 涂布不均勻
（4）木糖（2分）
（5）產(chǎn)生酒精的能力強(qiáng) 耐酒精的能力強(qiáng)
18．（每空2分，12分）
（1）脫分化 再分化
（2）快 優(yōu)良品種的遺傳特性（優(yōu)良性狀）
（3）秋水仙素 甲紫溶液（或“醋酸洋紅液”）
19．（每空2分，12分）
（1）能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細(xì)胞（能分泌特定抗體的B淋巴細(xì)胞）
（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
（3）選擇培養(yǎng)基 獲得雜交瘤細(xì)胞
（4）陽(yáng) 注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
20．（除特殊說(shuō)明外，每空2分，12分）
（1）定期更換培養(yǎng)液
（2）促性腺（1分） 獲能（1分）
（3）同期發(fā)情處理 胚胎移植
（4）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)胚胎分割
21．（每空2分，12分）
（1）②③④
（2）限制酶和DNA連接酶
（3）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 XbaI、BclI
（4）花粉管通道法抗原-抗體雜交
限制酶
BelI
EcRI
XbaI
Sau3AI
BamHI
切割位點(diǎn)
T↓GATCA
G↓AATTC
T↓CTAGA
↓GATC
G↓GATCC

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