時(shí)間:90分鐘 滿分:100分
試卷說明:本卷共兩大題,答案寫在答卷的指定位置上,考試結(jié)束后,只交答卷。
一、選擇題(共50分,1-5每題1分,6-20每題2分,21-25每題3分,每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求)
1. 人類有意無意地利用微生物發(fā)酵制作果酒或其他食品,已有幾千年的歷史。下列有關(guān)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用說法不正確的是( )
A. 醋酸發(fā)酵屬于需氧發(fā)酵
B. 制作腐乳需要酵母菌、曲霉、毛霉的發(fā)酵
C. 制作泡菜前需將配制好的鹽水煮沸,再冷卻使用
D. 酒發(fā)酵初期通氣的目的是促進(jìn)酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,產(chǎn)生酒精
2. 如圖所示裝置可用于生物技術(shù)實(shí)踐的相關(guān)實(shí)驗(yàn),下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 裝置乙既可用于果酒的制作,又可用于果醋的制作
B. 利用裝置甲制作果酒時(shí),瓶中的果汁不能裝滿,要留大約1/3的空間
C. 用裝置乙制作果酒時(shí)溫度應(yīng)控制在30℃左右,制作果醋時(shí)應(yīng)適當(dāng)降溫
D. 裝置乙的充氣口在制作果酒時(shí)要先打開后關(guān)閉,在制作果醋時(shí)要通入無菌空氣
3. 如圖表示培養(yǎng)和分離某種細(xì)菌的部分操作步驟,下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 步驟①倒平板操作時(shí),應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行
B. 步驟②接種環(huán)應(yīng)在灼燒并冷卻后才可伸入并蘸取菌液劃線
C. 步驟③每次劃線前都應(yīng)灼燒,每組劃線朝不同方向,使接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)一段時(shí)間后出現(xiàn)單個(gè)菌落
D. 步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)過程需要倒置,皿蓋在下,皿底在上
4. 下列有關(guān)發(fā)酵工程基本環(huán)節(jié)的說法,錯(cuò)誤的是( )
A. 在啤酒生產(chǎn)中,使用基因工程改造的啤酒酵母,可以加速發(fā)酵過程,縮短生產(chǎn)周期
B. 在生產(chǎn)實(shí)踐中,培養(yǎng)基的配方要經(jīng)過反復(fù)試驗(yàn)才能確定
C. 培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須經(jīng)過嚴(yán)格的滅菌
D. 滅菌和接種是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)
5. 下列關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是( )
A. 利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得初生代謝物時(shí),需要在培養(yǎng)基中添加瓊脂
B. 體外增養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)基加入血清后需濕熱滅菌以確保無菌
C. 培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染
D. 分離并純化固氮菌時(shí),培養(yǎng)基中無需添加碳源但需要添加氮源
6. 微生物合成的油脂是制備生物柴油的新型原料。為篩選出產(chǎn)油脂的細(xì)菌,某小組進(jìn)行了如圖所示的實(shí)驗(yàn)。物質(zhì)甲可將菌體內(nèi)的油脂染成黑色。下列分析正確的是( )
A. 應(yīng)將土壤菌液系列稀釋、滅菌后再涂布到培養(yǎng)基A上
B. 培養(yǎng)基A、B、C都應(yīng)添加油脂以達(dá)到篩選的目的
C. 培養(yǎng)基B中的菌落2和菌落4是產(chǎn)油脂的目的菌
D. 挑選培養(yǎng)基B中的目的菌接種到固體培養(yǎng)基中擴(kuò)大培養(yǎng)
7. 如圖表示通過植物細(xì)胞工程技術(shù),利用馬鈴薯細(xì)胞和番茄細(xì)胞培育出雜種植株的實(shí)驗(yàn)流程.下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. c過程需要適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照
B. 經(jīng)a過程處理時(shí)需要將細(xì)胞置于無菌水中
C. b過程依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性
D. 甲是呈不定形的薄壁組織團(tuán)塊
8. 為實(shí)現(xiàn)多肉植物的規(guī)?;a(chǎn),科研人員開展了如下研究。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 過程①宜選擇幼嫩的葉片,分別用次氯酸鈉和70%的酒精消毒處理
B. 過程②應(yīng)避光培養(yǎng)
C. 過程③應(yīng)配制2種培養(yǎng)基,其主要目的是滿足不同階段試管苗對(duì)特定激素的需求
D. 過程④應(yīng)在珍珠巖基質(zhì)中添加適量蔗糖,為幼苗生長提供碳源
9. 某研究小組為測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性,準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞(甲)和正常肝細(xì)胞(乙)進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是( )
A. 制備肝細(xì)胞懸液時(shí)可用胃蛋白酶處理肝組織
B. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常需要加入血清等天然成分
C. 恒溫培養(yǎng)箱中CO2濃度維持在5%左右,主要為了維持細(xì)胞內(nèi)PH
D. 乙細(xì)胞在原代培養(yǎng)過程中,通常會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象
10. 我國科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠,部分流程如下圖所示,其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶,TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列說法正確的是( )
A. 圖示流程運(yùn)用了重組DNA、體細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù)
B. ①過程的小分子化合物誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞
C. ③過程中使用有活性的病毒處理的目的是誘導(dǎo)細(xì)胞融合
D. 組蛋白乙酰化和去甲基化有利于重構(gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程
11. 傳統(tǒng)的多重PCR(MPCR)是在普通PCR的基礎(chǔ)上,在同一個(gè)反應(yīng)體系中加入不同的引物對(duì),針對(duì)不同的模板或同一模板的不同區(qū)段進(jìn)行特異性的擴(kuò)增,從而得到多個(gè)目的片段的技術(shù)。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,MPCR技術(shù)在擴(kuò)增方面取得新的突破,不再局限于在同一反應(yīng)管中進(jìn)行擴(kuò)增,而是將不同的引物對(duì)和模板分散于相應(yīng)獨(dú)立的空間中進(jìn)行擴(kuò)增。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 對(duì)于同一DNA片段的不同區(qū)段進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),不同引物的堿基排列順序不能互補(bǔ)
B. 同一反應(yīng)體系中擴(kuò)增不同模板時(shí)需加入更多耐高溫DNA聚合酶才能使擴(kuò)增正常進(jìn)行
C. 在目的DNA片段擴(kuò)增時(shí),若復(fù)性階段溫度控制過高,可能導(dǎo)致無產(chǎn)物
D. PCR擴(kuò)增DNA時(shí)打開雙螺旋的方式與細(xì)胞內(nèi)不同,實(shí)質(zhì)都是磷酸二酯鍵斷裂
12. 2023年9月7日法新社報(bào)道:中國科學(xué)家首次成功地在豬胚胎中培育出含有人細(xì)胞的腎臟??茖W(xué)家利用基因編輯技術(shù)敲除豬胚胎中腎臟形成所必需的兩個(gè)基因、從而在胚胎相應(yīng)位置創(chuàng)造出一個(gè)空位并添加人類多能干細(xì)胞來填補(bǔ)這個(gè)空位,最終培育擁有人細(xì)胞且功能正常的腎臟,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 敲除豬胚胎中腎臟形成所必需的兩個(gè)基因引起的變異屬于基因突變
B. 早期胚胎培養(yǎng)需在CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行,培養(yǎng)液含有糖類、血清等物質(zhì)
C. 為獲得更多胚胎,可通過注射促性腺激素促使母豬超數(shù)排卵
D. 該研究的突破,為解決器官移植中供體短缺問題帶來了曙光
13. 在基因工程操作中常用聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)不同DNA片段??蒲腥藛T利用EcRⅠ和SamⅠ兩種限制酶處理某DNA分子,得到如下電泳圖譜。其中1號(hào)泳道是標(biāo)準(zhǔn)DNA樣品,2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)分別是EcRⅠ單獨(dú)處理、SamⅠ單獨(dú)處理、EcRⅠ和SamⅠ共同處理后的電泳結(jié)果。下列說法正確的是( )
A. 該DNA可能是含1000bp的環(huán)狀DNA分子
B. 電泳圖譜中DNA片段越小,距離起點(diǎn)越近
C. EcRⅠ和SamⅠ能夠催化DNA的氫鍵斷裂
D. EcRⅠ和SamⅠ切點(diǎn)最短相距約800bp
14. CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA(SgRNA)和Cas9蛋白兩部分組成,SgRNA可引導(dǎo)Cas9蛋白到特定基因位點(diǎn)進(jìn)行切割,其機(jī)制如圖所示。下列說法正確的是( )

A. Cas9蛋白相當(dāng)于限制酶,切割特定基因位點(diǎn)的脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵
B. 向?qū)NA可以在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成,合成的原料包括四種核糖核苷酸
C. CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)會(huì)因SgRNA錯(cuò)誤結(jié)合而出現(xiàn)“脫靶”現(xiàn)象,一般SgRNA序列越長,脫靶率越低
D. 對(duì)不同目標(biāo)DNA進(jìn)行編輯時(shí),使用Cas9蛋白和相同的sgRNA進(jìn)行基因編輯
15. 對(duì)牛的生殖細(xì)胞、受精卵或早期胚胎進(jìn)行顯微操作和處理可以獲得目標(biāo)個(gè)體,以滿足人類的各種需求。下列相關(guān)敘述正確的是( )
A. 胚胎分割時(shí),需將原腸胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割再體外培養(yǎng)或移植
B. 體外受精時(shí),精子和卵子需在獲能液中處理以獲得能量
C. 胚胎移植前,供受體母牛需用促性腺激素進(jìn)行超數(shù)排卵
D. 用牛的體細(xì)胞進(jìn)行克隆的成功率顯著低于胚胎細(xì)胞
16. RT-PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù),可利用此技術(shù)獲取目的基因,具體過程如圖所示,以下說法錯(cuò)誤的是( )
A. 設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)需考慮基因表達(dá)載體的序列
B. G—C含量高的引物在與模板鏈結(jié)合時(shí),需要更高的溫度
C. 過程Ⅰ需要加入緩沖液、原料、耐高溫的DNA聚合酶和引物A等
D. 該技術(shù)用于對(duì)某些微量RNA病毒的檢測(cè),可提高檢測(cè)的靈敏度
17. 下列有關(guān)受精過程和胚胎發(fā)育的說法,正確的是( )
A. 精子在雌性動(dòng)物的子宮中獲能后才能參與受精
B. 卵裂期細(xì)胞數(shù)目增多,每個(gè)細(xì)胞體積變小,有機(jī)物含量和種類不斷減少
C. 囊胚期的細(xì)胞出現(xiàn)了細(xì)胞分化,但遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變
D. 精子入卵后,保留原有的核膜,細(xì)胞核體積增大稱為雄原核
18. 如圖為以蘋果皮為材料分離純化用于果醋制作的菌種,已知所用培養(yǎng)基為“米曲汁乙醇碳酸鈣培養(yǎng)基”—米曲汁1000mL、CaCO310g、95%乙醇30mL(滅菌后加入),在該培養(yǎng)基上、醋酸菌菌落周圍會(huì)形成透明圓。下列有關(guān)說法正確的是( )
A. 圖中器具、培養(yǎng)基都可用干熱滅菌法滅菌
B. ②中的純培養(yǎng)物來自蘋果皮上的野生型酵母菌
C. ①擴(kuò)大培養(yǎng)基中的菌種濃度約為8.1×109個(gè)/mL
D. 分離、計(jì)數(shù)的培養(yǎng)基至少制備3個(gè),運(yùn)用平板劃線法
19. 將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin Ⅱ?qū)霔顦浼?xì)胞,培育成了抗蟲楊樹。如圖表示含目的基因的DNA分子和農(nóng)桿菌質(zhì)粒,圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因,Ner表示新霉素抗性基因,箭頭表示識(shí)別序列完全不同的4種限制酶的切割位點(diǎn)。下列敘述不正確的是( )
A. 目的基因插入到質(zhì)粒的T--DNA上,才能整合到受體細(xì)胞染色體中
B. 為使目的基因與質(zhì)粒高效重組,最好選用EcRⅠ和PstⅠ
C. 成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素
D. 轉(zhuǎn)化了的楊樹細(xì)胞在合適條件下經(jīng)脫分化即可形成抗蟲楊樹
20. 利用動(dòng)物細(xì)胞融合方法,以SARS病毒棘突蛋白作為抗原制備出單克隆抗體(抗體D)。下圖為使用不同抗體抑制病毒感染細(xì)胞的檢測(cè)結(jié)果。下列相關(guān)敘述不正確的是( )

A. 對(duì)照抗體應(yīng)不與SARS病毒特異性結(jié)合
B. 將抗體檢測(cè)呈陽性的雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi),可獲得大量抗體D
C. 檢測(cè)抗體效果時(shí)需將SARS病毒與細(xì)胞混合一段時(shí)間后再加入抗體
D 抗體D需達(dá)到一定濃度才有明顯抑制效果
21. 大腸桿菌pUC118質(zhì)粒是基因工程中常用的一種運(yùn)載體,具有氨芐青霉素抗性基因,該質(zhì)粒中某限制酶的唯一切點(diǎn)位于lacZ基因中在特定的選擇培養(yǎng)基中,若lacZ基因沒有被破壞,則大腸桿菌菌落呈藍(lán)色;若lacZ基因被破壞,則菌落呈白色。關(guān)于圖中操作的說法不正確的是( )

A. 試管1中應(yīng)加入DNA連接酶處理
B. 試管2中需要使大腸桿菌成為感受態(tài)細(xì)胞,以便重組載體導(dǎo)入不含lacZ基因的大腸桿菌中
C. 若大腸桿菌的菌落為藍(lán)色,則質(zhì)粒未導(dǎo)入大腸桿菌
D. 培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入適量氨芐青霉素
22. 傳統(tǒng)食醋釀造過程中,發(fā)酵液表面產(chǎn)生的凝膠狀膜主要為細(xì)菌纖維素,研究人員通過 實(shí)驗(yàn)研究了細(xì)菌纖維素生產(chǎn)過程中各種指標(biāo)的變化情況,獲得的參數(shù)曲線如下圖。下列有 關(guān)敘述正確的是 ( )
A. 食醋釀造過程中的主要菌種為醋酸菌,能在缺少糖源和氧氣時(shí)將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸
B. 傳統(tǒng)食醋釀造過程中,發(fā)酵液表面的細(xì)菌纖維 素來自細(xì)菌的高爾基體
C. 菌體的密度檢測(cè)用的是抽樣檢測(cè)法
D. 隨著發(fā)酵的進(jìn)行,發(fā)酵液pH 下降,后期應(yīng)只有醋酸菌在繁殖
23. 干擾素是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,在臨床上常用于治療病毒感染性疾病,科研人員通過構(gòu)建基因工程菌來生產(chǎn)干擾素。下圖為構(gòu)建工程菌的流程圖,圖中質(zhì)粒A上m、n分別是啟動(dòng)子和終止子,目的基因的b鏈為模板鏈。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A. ②過程需在b鏈5'端加接NcI的識(shí)別序列
B. ①過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶,RNA可從淋巴細(xì)胞中獲得
C. ③過程使用了DNA連接酶
D. ④過程常用方法為Ca2+處理法
24. 脂多糖(LPS)是傷寒沙門氏菌的主要致病毒素。在研發(fā)傷寒沙門氏菌LPS疫苗的過程中,利用多肽模擬LPS。多肽模擬LPS抗原特征的相似程度越高,其與LPS競(jìng)爭(zhēng)抗體結(jié)合位點(diǎn)的能力越強(qiáng)。為鑒定多肽A、B模擬、LPS抗原特征的相似程度,研究人員利用抗LPS單克隆抗體進(jìn)行檢測(cè),部分實(shí)驗(yàn)步驟如圖1,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2。下列敘述正確的是( )

A. 抗LPS單克隆抗體的制備過程中利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性
B. 圖1步驟c中與LPS結(jié)合抗體會(huì)被洗脫掉,與多肽結(jié)合的抗體未被洗脫
C. b過程利用的原理是抗原和抗體的特異性結(jié)合
D. 圖2表明多肽B模擬LPS效果更好
25. 下圖為噬菌體侵染細(xì)菌后, 細(xì)菌通過一系列相關(guān)基因的表達(dá),形成“免疫記憶”。當(dāng)相同的噬菌體再次侵染細(xì)菌時(shí),細(xì)菌對(duì)其進(jìn)行“免疫殺滅”的示意圖。具體過程是:首次侵染時(shí), 細(xì)菌Cas2基因表達(dá)的Cas2核酸內(nèi)切酶會(huì)隨機(jī)低效切斷噬菌體DNA雙鏈,并將切下的DNA片段插入CRISPR位點(diǎn),形成“免疫記憶”。當(dāng)同種噬菌體再次侵染時(shí),由位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的crRNA就會(huì)將另一種核酸內(nèi)切酶(如Cas9)準(zhǔn)確帶到入侵DNA處,并將其切斷實(shí)現(xiàn)“免疫殺滅”。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A. 噬菌體侵染細(xì)菌時(shí),將其DNA注入細(xì)菌體內(nèi),蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)菌表面
B. ①過程的產(chǎn)物對(duì)DNA的堿基序列不具有特異性識(shí)別的特點(diǎn)
C. ②過程的堿基配對(duì)方式與DNA復(fù)制過程中堿基配對(duì)方式相同
D. 細(xì)菌通過“免疫殺滅”方式,實(shí)現(xiàn)自我保護(hù),對(duì)其生存是有利的
二、非選擇題(共50分)
26. 對(duì)生活垃圾進(jìn)行分類處理,是提高垃圾的資源價(jià)值和改善生活環(huán)境的重要措施。科研小組欲分離及培養(yǎng)若干種微生物用于處理濕垃圾,如剩菜剩飯、骨頭、菜根菜葉、果皮等食品類廢物。
(1)科研小組從土壤中篩選產(chǎn)脂肪酶的菌株時(shí),要想達(dá)到篩選的目的,該培養(yǎng)基與普通培養(yǎng)基相比,最大的區(qū)別是:該培養(yǎng)基___。若要測(cè)定土壤中的微生物活菌數(shù),常用的方法是___。
(2)獲得產(chǎn)脂肪酶的菌株后,在處理含油垃圾的同時(shí),可獲得單細(xì)胞蛋白,實(shí)現(xiàn)污染物資源化?,F(xiàn)獲得可產(chǎn)脂肪酶的AB兩種菌株,并進(jìn)行了培養(yǎng)研究,結(jié)果如圖1所示。據(jù)圖1分析,應(yīng)選擇菌株___進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究,理由___。
(3)科研小組從土壤中篩選淀粉分解菌時(shí),加碘液染色后,選擇培養(yǎng)基上出現(xiàn)了A、B和C三種菌落(如圖2所示)。若要得到淀粉酶活力最高的菌株,應(yīng)選擇___菌落進(jìn)一步純化。經(jīng)檢測(cè)A菌落為硝化細(xì)菌,A菌落能在此培養(yǎng)基上生長且沒有形成透明圈的原因是___。
(4)在微生物分解處理垃圾的過程中,纖維素分解菌能夠分泌纖維素酶,該酶可將纖維素分解為葡萄糖。若讓你從土壤中分離纖維素分解菌,應(yīng)該選擇到的環(huán)境中采集土樣,為什么?___。
(5)實(shí)驗(yàn)室中微生物的分離、純化和培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,為了防止病原微生物污染環(huán)境或感染科研工作者,應(yīng)采取的防護(hù)措施有___(至少答2點(diǎn))。
27. 近年來,隨著技術(shù)更新速度的加快,植物細(xì)胞育種也在快速發(fā)展。研究人員發(fā)現(xiàn)馬鈴薯脫毒苗的成苗率和脫毒率與外植體的大小有關(guān),結(jié)果如圖1;圖2是獲得馬鈴薯--番茄的流程圖。回答下列問題:
(1)通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行快速繁殖,屬于_______生殖。圖1表明,馬鈴薯脫毒苗培育過程中,適宜的莖尖大小為_______。
(2)圖2誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是____________________。 獲得的X細(xì)胞中_____(填“含有”或“不含”)同源染色體,由X到出芽生根需要經(jīng)歷的過程是________,此過程常用的植物激素是___________________。
(3)若想獲得抗鹽植株,可選用融合原生質(zhì)體形成的愈傷組織作為人工誘變的材料,原因是_______________,且需在___________________________的培養(yǎng)基中篩選。
28. 靶向治療是目前治療腫瘤的有效方法之一,其原理是利用抗體等特異性物質(zhì)作為載體,將藥物送到腫瘤部位,對(duì)腫瘤進(jìn)行特異性殺傷,其作用原理如圖1所示。為了生產(chǎn)能同時(shí)與藥物和腫瘤細(xì)胞抗原結(jié)合的抗體,科學(xué)家創(chuàng)造了制備雙特異性抗體的方法,過程如圖2所示。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問題:
(1)由圖1可以看出,抗體是由___條肽鏈構(gòu)成的蛋白質(zhì),細(xì)胞內(nèi)合成抗體時(shí),其空間結(jié)構(gòu)形成的場(chǎng)所是___。
(2)圖2中①過程是給小鼠注射___,從而獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞。
(3)經(jīng)過HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細(xì)胞,要稀釋、滴入多孔培養(yǎng)板中,使多孔培養(yǎng)板每孔中有一個(gè)細(xì)胞,然后篩選出抗體檢測(cè)呈___(填“陽性”或“陰性”)的細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng),進(jìn)行這一操作的原因是___;通過多次上述操作后獲得的細(xì)胞具有的特點(diǎn)為___。
(4)圖中⑤過程給小鼠注射抗腫瘤藥物的目的是___,圖2方框內(nèi)的主要操作是___。
(5)獲得的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng)或___,均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。
29. 研究人員把豬卵母細(xì)胞進(jìn)行人為的孤雌激活處理,使其發(fā)育成胚胎,移植到代孕母豬體內(nèi),獲得了成活的孤雌生殖克隆豬。這種克隆豬不同于核移植獲得的克隆豬,現(xiàn)將兩種技術(shù)進(jìn)行比較。請(qǐng)回答有關(guān)問題:

(1)圖中過程①②③④是獲得孤雌生殖克隆豬的技術(shù)流程。那么獲得核移植克隆豬的技術(shù)流程是過程___(填序號(hào))。
(2)孤雌生殖克隆豬仍然是二倍體生物,但由于缺失___方親本基因,導(dǎo)致其生長發(fā)育中出現(xiàn)多種問題,給研究者提供了很好的材料。
(3)體細(xì)胞核移植技術(shù)中也會(huì)用到卵母細(xì)胞,需要選擇發(fā)育至___的卵母細(xì)胞,并用___技術(shù)取出細(xì)胞核和第一極體。
(4)完成過程③時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的___。進(jìn)行⑤過程之前,需要對(duì)代孕母豬進(jìn)行___處理,為早期胚胎發(fā)育提供相同的生理環(huán)境。受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生___反應(yīng),這為胚胎存活提供了可能。
30. 靛藍(lán)是最早發(fā)現(xiàn)的天然染料之一。研究人員將靛藍(lán)色素酶基因(IDG)與啟動(dòng)子PTL12相連以構(gòu)建基因表達(dá)載體(如圖,KpnI、HindⅢ、BamHI、PstI代表不同限制酶,圖中質(zhì)粒上酶的位置為其對(duì)應(yīng)的酶切位點(diǎn)),并最終培育出能在棉纖維細(xì)胞中表達(dá)靛藍(lán)色素酶的彩色棉新品種。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:
(1)圖中所示是基因工程操作步驟中的___。
(2)啟動(dòng)子的作用是___,本研究中將IDG與啟動(dòng)了PTL12結(jié)合的主要目的是___。
(3)過程①②都使用KpnI切割質(zhì)粒,目的是___,過程③使用的Ti質(zhì)粒中的T-DNA內(nèi)部至少應(yīng)含有的限制酶是___。
(4)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)朊藁?xì)胞的過程:首先將___轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌,然后通過農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞,將___整合到受體植物細(xì)胞的___上。

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