新高考生物一輪復(fù)習(xí)精品學(xué)案 第11單元 第37講　微生物的利用（含解析）

這是一份新高考生物一輪復(fù)習(xí)精品學(xué)案 第11單元 第37講　微生物的利用（含解析），共26頁。
?
第37講　微生物的利用
[目標(biāo)要求]　1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測定。3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。
考點(diǎn)一　微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1．培養(yǎng)基
(1)概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。
(2)營養(yǎng)組成：一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。此外，還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。
(3)種類
①按物理狀態(tài)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
②按功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。
2．無菌技術(shù)
(1)目的：獲得純凈培養(yǎng)物。
(2)關(guān)鍵：防止外來雜菌的入侵。
(3)常用方法：滅菌和消毒。
(4)無菌技術(shù)的主要方法及適用對象(連一連)

教材中的隱性知識　源于選修1 P85附錄4“高壓滅菌的操作方法”
(1)滅菌桶裝入待滅菌物品不要裝太擠的原因是避免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。
(2)加熱滅菌鍋時(shí)應(yīng)打開排氣閥，目的是排除鍋內(nèi)冷空氣，之后，才能關(guān)上排氣閥。
3．制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基
(1)計(jì)算
↓
(2)稱量
↓
(3)溶化
↓
(4)滅菌
↓
(5)倒平板
4．純化培養(yǎng)
(1)方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。
(2)菌落的概念：由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。
(3)平板劃線法分離純化大腸桿菌
①
接種
在裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中接種大腸桿菌，在搖床上37 ℃下振蕩培養(yǎng)12 h
②
劃線
分離
用接種環(huán)在接種有大腸桿菌的三角瓶中沾取菌液一次，在固體培養(yǎng)基的平板上連續(xù)劃線，蓋好培養(yǎng)皿
③
培養(yǎng)
觀察
將培養(yǎng)皿倒置，放在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)12～24 h后，可看到劃線的末端出現(xiàn)不連續(xù)的單個(gè)菌落

(4)稀釋涂布平板法步驟
①系列稀釋操作：該操作常用在將細(xì)胞接種到培養(yǎng)基之前，通過液體稀釋的方法分散細(xì)胞，隨著稀釋程度的增大，單位體積中的微生物細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞得以分散。
操作步驟：

②涂布平板操作步驟

教材中的隱性知識　源于選修1 P18“旁欄小資料”
(1)微生物的接種方法除平板劃線法和稀釋涂布平板法外，還包括斜面接種、穿刺接種等方法。
(2)微生物接種的核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。
5．菌種的保藏方法
主要方法
臨時(shí)保藏法
甘油管藏法
保藏對象
頻繁使用的菌種
長期保藏的菌種
方法步驟
先接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入4 ℃的冰箱中
轉(zhuǎn)入滅菌后的甘油中，混勻后放在－20 ℃冷凍箱中保存


(1)培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽，有時(shí)還需要加入一些特殊的物質(zhì)(　√　)
(2)由于物理狀態(tài)的不同，培養(yǎng)基只有液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基兩種類型(　×　)
(3)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細(xì)胞的傷害(　√　)
(4)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌(　×　)
(5)配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)先滅菌再調(diào)pH(　×　)
(6)平板劃線法中每一次劃線后要將接種環(huán)灼燒(　√　)
(7)倒平板時(shí)，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上(　×　)
(8)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí)，只要稀釋度足夠高，就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落
(　√　)
(9)斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物質(zhì)，可在常溫下長期保存菌株(　×　)
(10)為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落(　×　)

源于選修1 P17～18討論
(1)平板冷凝后，要將平板倒置，原因是可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染；避免培養(yǎng)基水分過快揮發(fā)。
(2)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)微生物，原因是空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，可能會(huì)造成污染。
(3)平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線，原因是劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

1．選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基的比較
項(xiàng)目
選擇培養(yǎng)基
鑒別培養(yǎng)基
制備方法
培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)
培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品
原理
依據(jù)某些微生物對某些物質(zhì)或環(huán)境條件的嗜好或抗性而設(shè)計(jì)
產(chǎn)生特定的顏色或其他變化
用途
從眾多微生物中分離出所需的微生物
鑒別不同種類的微生物

2.消毒和滅菌的辨析
項(xiàng)目
條件
結(jié)果
常用方法
應(yīng)用范圍
消毒
較為溫和的物理或化學(xué)方法
僅殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)
煮沸消毒法
日常用品
巴氏消毒法
不耐高溫的液體
化學(xué)藥劑消毒法
用酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源
滅菌
強(qiáng)烈的理化因素
殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子
灼燒滅菌法
接種工具
干熱滅菌法
玻璃器皿、金屬用具
高壓蒸汽滅菌法
培養(yǎng)基及容器的滅菌

3.兩種純化方法的比較
項(xiàng)目
平板劃線法
稀釋涂布平板法
分離結(jié)果
　
　　
關(guān)鍵操作
接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線
①一系列的梯度稀釋②涂布平板操作
接種用具
接種環(huán)
涂布器
注意事項(xiàng)
(1)接種環(huán)的灼燒：①第一次劃線前，避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基；②再次劃線前，殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使每次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端；③劃線結(jié)束后，殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。
(2)接種環(huán)灼燒后，要冷卻后才能接觸菌液，以免溫度太高殺死菌種。
(3)劃線時(shí)用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破
(1)在進(jìn)行稀釋操作時(shí)，每支試管及其中的9 mL水、移液管均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離酒精燈火焰1～2 cm處。
(2)涂布平板時(shí)：①涂布器用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，取出時(shí)要讓多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃；②不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精；③酒精燈與培養(yǎng)皿距離要合適，移液管頭不要接觸任何其他物體
優(yōu)點(diǎn)
可以觀察菌落特征，對混合菌進(jìn)行分離
可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征
缺點(diǎn)
不能計(jì)數(shù)
操作較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延
共同點(diǎn)
都要用到固體培養(yǎng)基；都需進(jìn)行無菌操作；都會(huì)在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落；都可用于觀察菌落特征


考向一　培養(yǎng)基與無菌技術(shù)
1．(2019·安徽定遠(yuǎn)一模)下表所示是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基配方，請結(jié)合所學(xué)知識，回答下列相關(guān)問題：
成分
蛋白胨
乳糖
蔗糖
K2HPO4
顯色劑(伊紅美藍(lán))
瓊脂
含量
10.0 g
5.0 g
5.0 g
2.0 g
0.2 g
12.0 g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL

(1)根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細(xì)菌，需對培養(yǎng)基作出的最關(guān)鍵的調(diào)整是____________________，若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌，需做出的調(diào)整是________________________。
(2)從培養(yǎng)基的成分上看，大腸桿菌的同化類型為____________。該培養(yǎng)基能否分離篩選出大腸桿菌？為什么？
________________________________________________________________________。
答案　(1)鑒別　將蛋白胨換成尿素　將伊紅美藍(lán)換成酚紅　(2)異養(yǎng)型　不能，原因是培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存
解析　(1)伊紅美藍(lán)是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上屬于鑒別培養(yǎng)基；若要分離能分解尿素的細(xì)菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白胨換成尿素；鑒定分解尿素的細(xì)菌，需要使用酚紅指示劑。(2)大腸桿菌需要從培養(yǎng)基中獲得碳源，因此其同化作用類型是異養(yǎng)型；由于表格中的培養(yǎng)基中的碳源種類很多，可供多種微生物生存，因此該培養(yǎng)基不能分離篩選出大腸桿菌。
2．(2018·全國Ⅱ，37)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中，經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}：
(1)在實(shí)驗(yàn)室中，玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌。
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時(shí)消毒法，與煮沸消毒法相比，這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒，其原因是紫外線能______________________。在照射前，適量噴灑____________，可強(qiáng)化消毒效果。
(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。
(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時(shí)，若壓力達(dá)到設(shè)定要求，而鍋內(nèi)并沒有達(dá)到相應(yīng)溫度，最可能的原因是________________________________。
答案　(1)可以　(2)在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營養(yǎng)物質(zhì)損失較少　(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)　消毒液　(4)氯氣
(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡
考向二　微生物的培養(yǎng)
3．下列有關(guān)“微生物的分離與培養(yǎng)”實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是(　　)
A．高壓蒸汽滅菌鍋加蓋時(shí)應(yīng)按順時(shí)針方向依次旋緊每一個(gè)螺栓
B．選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類
C．對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時(shí)，應(yīng)使用記號筆在皿底標(biāo)記
D．利用平板劃線法可對微生物進(jìn)行接種、純化、分離和計(jì)數(shù)
答案　C
4．(2020·汕頭質(zhì)檢)某生物興趣小組的同學(xué)計(jì)劃調(diào)查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含量。具體實(shí)驗(yàn)步驟如下：
第一步：配制培養(yǎng)基(成分：蛋白胨、氯化鈉、乳糖、水、X和Y)。
第二步：制作無菌平板(含成分Y)。
第三步：設(shè)置空白對照組和實(shí)驗(yàn)組，對照組接種①，實(shí)驗(yàn)組接種②。
第四步：將各組平板置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。
回答下列問題：
(1)培養(yǎng)基中的乳糖可以為大腸桿菌提供____________。為了方便大腸桿菌的鑒定，需要在培養(yǎng)基中添加成分X______________，在該培養(yǎng)基表面，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)________(填顏色)。為了完成步驟二，該培養(yǎng)基中的成分Y通常是____________。
(2)完善步驟三，①是____________________________，②是___________________________。
(3)在純化大腸桿菌前，將滅菌后的空平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，目的是__________________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域長滿了菌落，第二劃線區(qū)域卻無菌落產(chǎn)生，可能的原因是______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。分析其原因是振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中____________的含量和____________的利用率。
答案　(1)碳源　伊紅美藍(lán)　黑色　瓊脂　(2)適量無菌水　取自該快餐店的等量冰塊水　(3)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　接種環(huán)灼燒后未冷卻便進(jìn)行劃線(或劃線未從第一區(qū)域末端開始)　(4)氧氣　營養(yǎng)物質(zhì)
解析　(1)乳糖是糖類物質(zhì)，不含氮元素，所以培養(yǎng)基中的乳糖可為大腸桿菌提供碳源。鑒定大腸桿菌時(shí)，常使用伊紅美藍(lán)試劑，菌落出現(xiàn)的顏色是黑色。所以在培養(yǎng)基中添加的成分X是伊紅美藍(lán)。制作無菌平板是制作固體培養(yǎng)基，所以該培養(yǎng)基中還應(yīng)加入瓊脂，即成分Y是瓊脂。(2)本實(shí)驗(yàn)是調(diào)查某快餐店的冰塊中大腸桿菌的含量，故實(shí)驗(yàn)中對照組應(yīng)接種適量無菌水，實(shí)驗(yàn)組應(yīng)接種取自該快餐店的等量冰塊水。(3)為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，常在純化大腸桿菌前，將滅菌后的空平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，若平板上有菌落生長，說明滅菌不合格。接種環(huán)在平板內(nèi)的每一次劃線前，都要先灼燒滅菌冷卻后再劃線，而且要從上一次劃線末端而非空白處劃線，若不冷卻會(huì)燙死上次劃線末端的菌株，使以后的劃線處沒有菌落生長，若從空白處劃線也不會(huì)有菌落生長。所以劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域長滿了菌落，第二劃線區(qū)域卻無菌落產(chǎn)生，可能的原因是接種環(huán)灼燒后未冷卻便進(jìn)行劃線(或劃線未從第一區(qū)域末端開始)。(4)振蕩培養(yǎng)可增加溶液中氧氣的含量以及增加菌體與營養(yǎng)物質(zhì)的接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，從而使振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長速度快。
5．(2019·廣東中山七校聯(lián)考改編)鯨死亡后會(huì)沉入海底，俗稱“鯨落”?！蚌L落”后期會(huì)形成一個(gè)以厭氧菌和硫細(xì)菌等為主體的生態(tài)系統(tǒng)。厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，同時(shí)產(chǎn)生一些硫化氫等硫化物。硫細(xì)菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機(jī)物。請回答相關(guān)問題：
(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中一般都會(huì)含有水、無機(jī)鹽、氮源和碳源，培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是________。要培養(yǎng)硫細(xì)菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在________________________________________________________________________________
__________________，這種培養(yǎng)基可以用來專一性培養(yǎng)硫細(xì)菌，所以稱為________培養(yǎng)基。
(2)在分離“鯨落”中的微生物時(shí)要制備固體培養(yǎng)基，在倒平板操作后，將平板倒置，這樣做的目的是________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
(3)為了研究“鯨落”中含有微生物的情況，需將“鯨落”提取物加水稀釋，然后將稀釋水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，這種方法稱為________________。下面所示的四種菌落分布情況中，不可能由該方法得到的是________。

(4)若想得到“鯨落”中某目標(biāo)菌種，可用平板劃線法進(jìn)行純化。若下圖甲是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對應(yīng)的平板劃線操作示意圖為________。圖甲中的③更易獲得單菌落，判斷依據(jù)是_____________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。

答案　(1)含碳有機(jī)物(或脂肪)　碳源必須是含碳無機(jī)物(或碳酸鹽)，同時(shí)加入硫化物　選擇
(2)防止培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)皿造成污染；防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā)過快
(3)稀釋涂布平板法　D
(4)丙　每次劃線的菌種都來自上一次劃線的末端，最后一次劃線結(jié)束時(shí)更容易獲得單菌落
解析　(1)厭氧菌以“鯨落”肌肉中的脂肪為食，屬于異養(yǎng)微生物，故培養(yǎng)“鯨落”群落中厭氧菌的碳源必須是含碳有機(jī)物(或脂肪)。硫細(xì)菌將硫化物氧化成硫酸鹽，并以該過程中釋放的能量合成有機(jī)物，即硫細(xì)菌為自養(yǎng)生物，所以要培養(yǎng)硫細(xì)菌，培養(yǎng)基中的成分需要特殊配制，主要體現(xiàn)在碳源必須是含碳無機(jī)物(或碳酸鹽)，同時(shí)加入硫化物。這種人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。(3)使用涂布器涂布接種微生物的方法為稀釋涂布平板法。稀釋涂布平板法接種的微生物會(huì)在培養(yǎng)基上形成均勻分布的菌落，而平板劃線法接種的微生物在劃線的起始部分菌落連在一起生長，由圖可知，A、B、C均形成了均勻分布的單個(gè)菌落，屬于稀釋涂布平板法接種的，而D中菌落是連在一起生長的，是通過平板劃線法接種的。
考點(diǎn)二　微生物的篩選和計(jì)數(shù)

1．篩選菌株的原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長。
2．微生物計(jì)數(shù)
3．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)
(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕?，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到催化作用。
(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)目一般用稀釋涂布平板法。
(3)實(shí)驗(yàn)流程
土壤取樣：富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層土
　↓
樣品的稀釋：通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間，
　　　　 適于計(jì)數(shù)的平板
↓
接種：用稀釋涂布平板法接種
↓
培養(yǎng)
↓
觀察：根據(jù)菌落的特征區(qū)分微生物
↓
計(jì)數(shù)：統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目
↓
計(jì)算：根據(jù)公式“每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M[C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)]”進(jìn)行計(jì)算
(4)分解尿素的細(xì)菌的鑒別
①方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌。
②原理
　分解尿素的細(xì)菌
　↓
CO(NH2)2＋H2OCO2＋2NH3
　　　　　　　　　　　　　　　 ↓
酚紅指示劑　―→　變紅色
③實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象及結(jié)論
培養(yǎng)基變紅：該種細(xì)菌能分解尿素。
培養(yǎng)基不變紅：該種細(xì)菌不能分解尿素。
教材中的隱性知識　源于選修1 P24“旁欄問題”：測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌數(shù)目，選用的稀釋范圍不同，分離不同微生物采用的稀釋度 不同。
4．土壤中分解纖維素的細(xì)菌的分離
(1)纖維素酶組成及作用

(2)纖維素分解菌的篩選

(3)實(shí)驗(yàn)流程


(1)選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類(　×　)
(2)尿素在脲酶的催化作用下分解成無機(jī)物(　√　)
(3)對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)只能采用稀釋涂布平板法，而不能用平板劃線法(　×　)
(4)篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中，尿素是唯一的氮源(　√　)
(5)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí)，可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨，使得培養(yǎng)基的酸堿度降低(　×　)
(6)纖維素酶只包括三種組分：C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶(　×　)
(7)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物，所以可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌
(　×　)
(8)剛果紅染色法只能在培養(yǎng)微生物的時(shí)候加入剛果紅(　×　)
(9)在篩選能分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，選擇培養(yǎng)的目的是增大樣品中目的菌株的濃度
(　√　)

(1)統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)的要求是統(tǒng)計(jì)3個(gè)菌落數(shù)在30～300之間的平板，計(jì)算菌落數(shù)的平均值。
(2)(源于選修1 P28“旁欄思考”)在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌的原因是由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對較高，從這種土樣中獲得目的微生物的概率要高于普通環(huán)境。

1．兩種微生物計(jì)數(shù)方法的比較
項(xiàng)目
間接計(jì)數(shù)法
(稀釋涂布平板法)
直接計(jì)數(shù)法
(顯微鏡計(jì)數(shù)法)
原理
當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌
利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量
公式
每克樣品中的菌落數(shù)＝×M
每毫升原液所含細(xì)菌數(shù)：每小格內(nèi)平均細(xì)菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)
缺點(diǎn)
當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)菌體連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落
不能區(qū)分細(xì)胞死活
結(jié)果
比實(shí)際值偏小
比實(shí)際值偏大

注：細(xì)菌的數(shù)目還可以通過濾膜法來測定。
2．微生物的篩選與鑒別方法
(1)微生物的篩選方法
單菌落挑取法
利用平板劃線法或稀釋涂布平板法接種到固體平板培養(yǎng)基表面，直接根據(jù)微生物菌落的特征利用單菌落挑取的方法獲得目的微生物
選擇培養(yǎng)法
利用選擇培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇培養(yǎng)，直接獲得目的微生物
鑒定培養(yǎng)法
利用鑒別培養(yǎng)基使目的微生物菌落呈現(xiàn)特有的特征，然后篩選目的微生物

(2)微生物的鑒別方法
菌落特征鑒別法
根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基表面形成的菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等特征進(jìn)行鑒別
指示劑鑒別法
如培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種微生物后，培養(yǎng)基變紅說明該種微生物能夠分解尿素
染色鑒別法
如利用剛果紅染色法，根據(jù)培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈來鑒別分解纖維素的微生物

3.微生物的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)中對照組和重復(fù)組的設(shè)置及作用
(1)兩種對照組的設(shè)置及作用
①判斷培養(yǎng)基中“是否有雜菌污染”，需將未接種的培養(yǎng)基同時(shí)進(jìn)行培養(yǎng)。
②判斷選擇培養(yǎng)基“是否具有篩選作用”，需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行接種后培養(yǎng)，觀察兩種培養(yǎng)基上菌落數(shù)目，進(jìn)行對比得出結(jié)論。
(2)重復(fù)組的設(shè)置及作用：為排除偶然因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，在每一稀釋度下宜設(shè)置至少3個(gè)平板作重復(fù)組，選擇菌落數(shù)均在30～300且數(shù)目相差不大的三個(gè)平板，用“平均值”代入計(jì)數(shù)公式予以計(jì)算菌落數(shù)。

考向一　分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)
6．分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)操作中，對于獲得純化的尿素分解菌的單菌落影響最大的是(　　)
A．制備浸出液的土壤取自土壤的表層
B．涂布前涂布器未在酒精燈外焰上灼燒滅菌
C．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中添加尿素作為氮源
D．接種操作者的雙手未用酒精棉進(jìn)行消毒
答案　C
7．(2020·四川樂山市調(diào)研)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，經(jīng)微生物分解后能更好地被植物利用。某生物興趣小組試圖探究土壤中微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)并成功篩選到能高效分解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示。
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
葡萄糖
尿素
瓊脂
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10 g
1 g
15 g

將表中物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100 mL。實(shí)驗(yàn)過程如圖所示：

回答下列問題：
(1)該培養(yǎng)基為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型包括____________________
_______________________________________________________________________________
(答出兩點(diǎn)即可)。能篩選出目的菌的原因是__________________________________________
______________________________________________________________________________。
(2)圖中將細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上時(shí)，采用的方法是 ______________。初步篩選出來的菌種還需要進(jìn)一步的鑒定：在培養(yǎng)基中加入________指示劑，接種并培養(yǎng)初步篩選的菌種，若指示劑變成________色，則可說明該菌種能夠分解尿素。
(3)在實(shí)驗(yàn)中，下列材料或用具需要滅菌的是_______(填序號)，需要消毒的是_______(填序號)。
①培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿
②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管
③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手
(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后，才能倒掉。
答案　(1)碳源、氮源(無機(jī)鹽、水)　該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源　(2)稀釋涂布平板法　酚紅　紅　(3)①②?、邸?4)滅菌
解析　(1)該培養(yǎng)基為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型包括碳源、氮源、無機(jī)鹽、水。能篩選出目的菌的原因是該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源。(2)圖中將細(xì)菌接種到固體培養(yǎng)基上時(shí)，采用的方法是稀釋涂布平板法。尿素分解菌可以用酚紅指示劑進(jìn)行鑒定，原因是其體內(nèi)產(chǎn)生的脲酶能夠催化尿素分解為氨，使酚紅指示劑變成紅色。(3)培養(yǎng)細(xì)菌的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿、玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管都需要進(jìn)行滅菌處理；實(shí)驗(yàn)操作者的雙手需要進(jìn)行消毒。(4)為避免污染環(huán)境，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉。
考向二　分解纖維素的微生物的分離
8．要從土壤中將分解纖維素的細(xì)菌分離出來，應(yīng)該將它們接種在(　　)
A．加入指示劑的鑒定培養(yǎng)基上
B．含有蛋白胨的固體培養(yǎng)基上
C．只有纖維素粉而無其他碳源的選擇培養(yǎng)基上
D．含四大營養(yǎng)要素的培養(yǎng)基上
答案　C
9．(2020·吉林長春實(shí)驗(yàn)中學(xué)期末)科學(xué)家從羊等食草動(dòng)物胃中篩選纖維素分解菌，并對其降解纖維素的能力進(jìn)行了研究。請回答下列問題：
(1)若科學(xué)家在____________平板上，發(fā)現(xiàn)以某種菌的菌落為中心的透明圈，則表明此種菌為纖維素分解菌。
(2)在纖維素分解菌的培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫箱中的溫度約為________(填“4 ℃”“20 ℃”或“35 ℃”)?？茖W(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維素分解菌。在實(shí)驗(yàn)前，需要使用__________________法對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌；在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，目的是____________________________________________________________。
(3)在接種的過程中，需要使用________(填“接種環(huán)”或“涂布器”)進(jìn)行接種。科學(xué)家欲將篩選得到的纖維素分解菌進(jìn)行大量培養(yǎng)，應(yīng)選用________(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基，并以________為唯一碳源，配制此培養(yǎng)基時(shí)，________(填“能”或“不能”)使用牛肉膏作為氮源。
答案　(1)纖維素剛果紅培養(yǎng)基　(2)35 ℃　高壓蒸汽滅菌　檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　(3)涂布器　液體　纖維素　不能
解析　(1)用纖維素剛果紅培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時(shí)，培養(yǎng)基上會(huì)出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的透明圈。(2)4 ℃、20 ℃、35 ℃三個(gè)溫度中，35 ℃最接近纖維素分解菌的生活環(huán)境——羊胃的溫度，故培養(yǎng)過程中應(yīng)保持恒溫培養(yǎng)箱中的溫度約為35 ℃。培養(yǎng)基滅菌一般用高壓蒸汽滅菌法。在接種之前，要隨機(jī)選取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(3)科學(xué)家采用稀釋涂布平板法分離、純化纖維素分解菌，故需要使用涂布器進(jìn)行接種。
考向三　微生物篩選、計(jì)數(shù)的綜合運(yùn)用
10．生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，某研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法不正確的是(　　)

A．倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染
B．倒成平板后不需要進(jìn)行滅菌處理
C．圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙或丙
D．生長圖形法還可用于某些菌種的篩選
答案　C
11．(2019·全國Ⅰ，37)已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。
Ⅰ號培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5 g/L)。
Ⅱ號培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(15 g/L)。
Ⅲ號培養(yǎng)基：氯化鈉(5 g/L)，硝酸銨(3 g/L)，其他無機(jī)鹽(適量)，X(45 g/L)。
回答下列問題：
(1)在Ⅰ號培養(yǎng)基中，為微生物提供氮源的是__________________。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中為微生物提供碳源的有機(jī)物是________。
(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)____________，其原因是__________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
(3)Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基，若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，接種時(shí)，應(yīng)采用的方法是__________________。
(4)假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細(xì)菌，且該菌能將X代謝為丙酮酸，則在有氧條件下，丙酮酸可為該菌的生長提供____________和__________________。
答案　(1)牛肉膏、蛋白胨　X　(2)下降　不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的細(xì)菌能夠增殖　(3)稀釋涂布平板法　(4)能量　合成其他物質(zhì)的原料
解析　(1)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，牛肉膏、蛋白胨為微生物生長提供了氮源，而Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中除X外的其他物質(zhì)均不含碳，所以能為微生物提供碳源的有機(jī)物是X。(2)因?yàn)棰蛱柵囵B(yǎng)基中碳源只有X，屬于選擇培養(yǎng)基，只有能降解X的細(xì)菌才能增殖，而不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要對菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(4)在有氧條件下，丙酮酸參與細(xì)菌的有氧呼吸，可以為該菌的生長提供能量和合成其他物質(zhì)的原料。




1．核心概念
(1)(選修1 P14)培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。
(2)(選修1 P15)消毒：使用較溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。
(3)(選修1 P15)滅菌：指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
(4)(選修1 P18)平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。
(5)(選修1 P19)稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。
(6)(選修1 P18)菌落：由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。
(7)(選修1 P22)選擇培養(yǎng)基：允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。
2．教材結(jié)論性語句
(1)(選修1 P22)當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。
(2)(選修1 P26)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如pH升高，指示劑將變紅，我們就可以初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。

1．(2020·江蘇，19)為純化菌種，在鑒別培養(yǎng)基上劃線接種纖維素降解細(xì)菌，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是(　　)

A．倒平板后需間歇晃動(dòng)，以保證表面平整
B．圖中Ⅰ、Ⅱ區(qū)的細(xì)菌數(shù)量均太多，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落
C．該實(shí)驗(yàn)結(jié)果因單菌落太多，不能達(dá)到菌種純化的目的
D．菌落周圍的纖維素被降解后，可被剛果紅染成紅色
答案　B
解析　溫度降低后，培養(yǎng)基易凝固，因此倒平板后要及時(shí)輕輕晃動(dòng)，以保持均一性，A項(xiàng)錯(cuò)誤；由題圖可見，隨著劃線次數(shù)增多，細(xì)菌密度減小，Ⅲ區(qū)開始出現(xiàn)單菌落，應(yīng)從Ⅲ區(qū)挑取單菌落，B項(xiàng)正確；菌落是由單個(gè)微生物細(xì)胞或多個(gè)同種細(xì)胞繁殖到一定程度后形成的，能得到單菌落即可以達(dá)到菌種純化的目的，C項(xiàng)錯(cuò)誤；剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，菌落周圍的纖維素被降解后紅色消失，出現(xiàn)透明圈，D項(xiàng)錯(cuò)誤。
2．(2020·山東，20)野生型大腸桿菌可以在基本培養(yǎng)基上生長，發(fā)生基因突變產(chǎn)生的氨基酸依賴型菌株需要在基本培養(yǎng)基上補(bǔ)充相應(yīng)氨基酸才能生長。將甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨(dú)接種在基本培養(yǎng)基上時(shí)，均不會(huì)產(chǎn)生菌落。某同學(xué)實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)，將M、N菌株混合培養(yǎng)一段時(shí)間，充分稀釋后再涂布到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后出現(xiàn)許多由單個(gè)細(xì)菌形成的菌落，將這些菌落分別接種到基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后均有菌落出現(xiàn)。該同學(xué)對這些菌落出現(xiàn)原因的分析，不合理的是(　　)
A．操作過程中出現(xiàn)雜菌污染
B．M、N菌株互為對方提供所缺失的氨基酸
C．混合培養(yǎng)過程中，菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)
D．混合培養(yǎng)過程中，菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變
答案　B
解析　據(jù)題意可知，甲硫氨酸依賴型菌株M和蘇氨酸依賴型菌株N單獨(dú)培養(yǎng)時(shí)均不會(huì)在基本培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落，兩者混合培養(yǎng)一段時(shí)間后，再接種在基本培養(yǎng)基中卻出現(xiàn)菌落，除了操作過程中出現(xiàn)雜菌污染，雜菌在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落的原因以外，還可能的原因是菌株獲得了對方的遺傳物質(zhì)，或菌株中已突變的基因再次發(fā)生突變，使突變菌株能產(chǎn)生所需的氨基酸，而變成了非依賴型菌株，從而能在基本培養(yǎng)基上生長形成菌落，A、C、D項(xiàng)正確；M、N菌株混合培養(yǎng)一段時(shí)間，稀釋涂布到基本培養(yǎng)基上后，培養(yǎng)出現(xiàn)的菌落是由單個(gè)細(xì)菌形成的，菌落中不可能有M、N菌株同時(shí)存在而互為對方提供所缺失的氨基酸，故B項(xiàng)錯(cuò)誤。
3．(2020·浙江7月選考)下列關(guān)于微生物培養(yǎng)及利用的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)
A．利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B．配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)根據(jù)微生物的種類調(diào)整培養(yǎng)基的pH
C．酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒
D．適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化
答案　A
解析　以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，讓能利用尿素的微生物生長，其他微生物不能生長，但不能迅速殺死其他微生物，A項(xiàng)錯(cuò)誤；不同微生物生長的適宜pH不同，如培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性或微堿性，B項(xiàng)正確；酵母菌釀酒時(shí)直接利用的物質(zhì)是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉發(fā)酵得到糯米酒，C項(xiàng)正確；醋酸發(fā)酵時(shí)，適宜濃度的酒精可使醋酸菌活化，較高濃度的酒精會(huì)抑制醋酸菌的活化，D項(xiàng)正確。
4．(2020·江蘇，31)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株，科研人員開展了相關(guān)研究。請回答下列問題：
(1)常規(guī)微生物實(shí)驗(yàn)中，下列物品及其滅菌方法錯(cuò)誤的是________(填編號)。
編號
①
②
③
④
物品
培養(yǎng)基
接種環(huán)
培養(yǎng)皿
涂布器
滅菌方法
高壓蒸汽
火焰灼燒
干熱
臭氧

(2)稱取1.0 g某土壤樣品，轉(zhuǎn)入99 mL無菌水中，制備成菌懸液，經(jīng)________________后，獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液。分別取0.1 mL菌懸液涂布在固體培養(yǎng)基上，其中10倍稀釋的菌懸液培養(yǎng)后平均長出了46個(gè)酵母菌落，則該樣本中每克土壤約含酵母菌____________個(gè)。
(3)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑________的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。
(4)在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株________進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。

答案　(1)④
(2)梯度稀釋　4.6×105(或460 000)
(3)誘變　脂肪　較大
(4)B　該菌株增殖速度快，單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高；降解脂肪能力強(qiáng)，凈化效果好
解析　(2)利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，需要將制備的菌懸液進(jìn)行梯度稀釋，以獲得細(xì)胞密度不同的菌懸液，一般來說，菌落數(shù)在30～300個(gè)的平板最適于計(jì)數(shù)。0.1 mL菌懸液中含有46個(gè)酵母菌落，則1 mL菌懸液中含有460個(gè)酵母菌落；1.0 g土壤樣品首先稀釋100倍，然后稀釋10倍，共稀釋了1 000倍，因此樣本中每克土壤約含酵母菌460×1 000＝4.6×105(個(gè))。(3)采用射線輻照引起酵母菌基因突變，此種方法屬于誘變育種。檢查誘變酵母菌產(chǎn)脂肪酶的能力，需要把酵母菌接種到以脂肪為唯一碳源的培養(yǎng)基上，按照產(chǎn)生菌落直徑大小進(jìn)行初步篩選，直徑大的說明產(chǎn)酶能力強(qiáng)，利用的脂肪(碳源)多，直徑小的說明產(chǎn)酶能力弱，利用的脂肪(碳源)少。(4)通過分析題圖可知，相同時(shí)間內(nèi)，菌株B細(xì)胞密度大，說明該菌株增殖速度快，單細(xì)胞蛋白產(chǎn)量高；相同時(shí)間內(nèi)，菌株B利用的脂肪多，脂肪剩余量少，說明該菌株降解脂肪的能力強(qiáng)，凈化效果好。
5．(2020·全國Ⅰ，37)某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解，會(huì)對環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解S。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和S，乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y。

回答下列問題：
(1)實(shí)驗(yàn)時(shí)，盛有水或培養(yǎng)基的搖瓶通常采用__________________的方法進(jìn)行滅菌。乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是________。甲、乙培養(yǎng)基均屬于________培養(yǎng)基。
(2)實(shí)驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布100 μL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________倍。
(3)在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的S超過某一濃度時(shí)，某菌株對S的降解量反而下降，其原因可能是_________________________________________________(答出1點(diǎn)即可)。
(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)，請寫出主要實(shí)驗(yàn)步驟：____________________
_____________________________________________________________________________。
(5)上述實(shí)驗(yàn)中，甲、乙兩種培養(yǎng)基所含有的組分雖然不同，但都能為細(xì)菌的生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即____________________________________________________________________
______________________________________________________________________________。
答案　(1)高壓蒸汽滅菌　瓊脂　選擇
(2)104
(3)S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長
(4)取淤泥加入無菌水中，涂布(或稀釋涂布)到乙培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后計(jì)數(shù)
(5)水、碳源、氮源和無機(jī)鹽
解析　(1)微生物培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌的方法。乙培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因此培養(yǎng)基中加入的是可使液體培養(yǎng)基凝固的瓊脂。甲、乙兩種培養(yǎng)基都是為了分離出可降解S的細(xì)菌，因此是選擇培養(yǎng)基。(2)設(shè)稀釋倍數(shù)為A,1 mL＝1 000 μL，可得(2×107/A)×0.1≤200，解得A≥104。(3)在篩選降解S物質(zhì)的細(xì)菌的過程中，如果培養(yǎng)基中的S濃度過高，會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌培養(yǎng)基的滲透壓增大，細(xì)菌失水而代謝活性降低，對S的降解量反而下降(或者S改變了培養(yǎng)基的pH，導(dǎo)致細(xì)菌代謝活性降低)。(4)測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)的主要步驟是①淤泥取樣，即取少量的淤泥加入無菌水中；②用稀釋涂布平板法涂布到乙培養(yǎng)基上；③微生物培養(yǎng)與觀察計(jì)數(shù)。(5)培養(yǎng)基中含有細(xì)菌生長所需要的4類基本營養(yǎng)物質(zhì)，即水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。
6．(2019·全國Ⅱ，37)物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，會(huì)污染土壤。W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時(shí)培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?；卮鹣铝袉栴}：
(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是________。
(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇______菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是________________
_______________________________________________________________________________。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础Ｈ粢O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，請簡要寫出?shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即______________
_______________________________________________________________________________。
(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請完善相關(guān)內(nèi)容。
①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加__________，三處滴加量相同。
②一段時(shí)間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明____________________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說明______________________________________。
答案　(1)W
(2)乙　乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W
(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?br /> (4)①緩沖液　②緩沖液不能降解W　酶E與天然酶降解W的能力相近
解析　(1)要從土壤中分離出能降解含氮有機(jī)物W的目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基應(yīng)以該特定物質(zhì)W為氮源。(2)題圖信息顯示，在乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明乙菌能降解W，若要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇乙菌落進(jìn)一步純化。(3)若要通過設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)確定甲、乙兩種細(xì)菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，需將甲、乙菌分別接種在無氮源培養(yǎng)基上，若某細(xì)菌能生長，則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈础?4)①實(shí)驗(yàn)應(yīng)遵循單一變量原則，故C處應(yīng)滴加緩沖液。②一段時(shí)間后，測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈，說明緩沖液不能降解W；若A、B處形成的透明圈大小相近，說明酶E與天然酶降解W的能力相近。
課時(shí)精練
1．(2019·江西贛州摸底改編)藍(lán)紋奶酪是成熟過程中內(nèi)部生長藍(lán)綠霉菌的一類奶酪的總稱，又稱為青紋奶酪?；卮鹣铝袉栴}：
(1)藍(lán)紋奶酪的原材料為牛奶，使用的消毒法為________________。
(2)藍(lán)紋奶酪制作所用的初級發(fā)酵劑為乳酸菌，初級發(fā)酵過程中不需要嚴(yán)格滅菌，原因是
___________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
(3)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)類地青霉通常使用____________(填“牛肉膏蛋白胨”“麥芽汁瓊脂”或“馬鈴薯瓊脂”)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基一般用______________法滅菌。
(4)在微生物培養(yǎng)過程中，實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法有________、________和高壓蒸汽滅菌。
(5)滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)，在酒精燈火焰旁將培養(yǎng)基倒入滅菌后的培養(yǎng)皿中，這個(gè)操作稱為________。此過程還需要將錐形瓶的瓶口迅速通過火焰，目的是________________________________________________________________________。
答案　(1)巴氏消毒法　(2)缺氧和較低pH的環(huán)境可以抑制其他細(xì)菌的生長繁殖　(3)馬鈴薯瓊脂　高壓蒸汽滅菌　(4)灼燒滅菌　干熱滅菌　(5)倒平板　防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基
解析　(1)牛奶使用巴氏消毒法消毒。(2)乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，發(fā)酵液處于缺氧和較低pH的環(huán)境中，這樣可以抑制其他雜菌的生長繁殖，故藍(lán)紋奶酪制作所用的初級發(fā)酵劑為乳酸菌，初級發(fā)酵過程中不需要嚴(yán)格滅菌。(3)類地青霉屬于真菌，實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)類地青霉通常使用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法滅菌。
2．(2020·重慶市調(diào)研)飼養(yǎng)動(dòng)物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動(dòng)物吸收利用，并且影響其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化植酸鈣水解成為可以被吸收利用的磷酸鹽等。如圖是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析回答問題：

(1)實(shí)驗(yàn)室中篩選微生物的原理是_________________________________________________
_____________________________________________________________________________。
配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須________________________。
(2)請寫出一種純化得到植酸酶的方法：__________________，其原理是________________
______________________________________________________________________________。
(3)現(xiàn)將從100 mL含有產(chǎn)植酸酶菌的土壤樣品溶液中取出的1 mL樣品溶液稀釋104倍后，取0.1 mL稀釋液均勻涂布在選擇培養(yǎng)基表面，測得菌落數(shù)的平均值為150，空白對照組平板上未出現(xiàn)菌落，則100 mL原菌液中含有產(chǎn)植酸酶菌________個(gè)，該方法的測量值與實(shí)際值相比一般會(huì)________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。
(4)由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會(huì)水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示的A～E五種菌株中，________是產(chǎn)植酸酶的最理想菌株。
(5)通常對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的__________________________________等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定(或分類)。
答案　(1)人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(合理即可)　調(diào)節(jié)pH　(2)凝膠色譜法　根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小進(jìn)行純化(或電泳法　根據(jù)待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同進(jìn)行純化)　(3)1.5×109　偏小　(4)E　(5)形狀、大小、顏色
解析　(3)100 mL原菌液中含有產(chǎn)植酸酶菌(150÷0.1)×104×100＝1.5×109(個(gè))，因?yàn)閮蓚€(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此，稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目偏少。(4)根據(jù)題意可知，透明區(qū)域越大，說明植酸酶越多，故E是最理想菌株。
3．(2021·貴州遵義模擬)油煙由多種有害物質(zhì)組成，不易降解。某同學(xué)從長期受到某品牌食用油產(chǎn)生的油煙污染的土壤中分離出油煙降解菌，其篩選分離過程如圖所示，回答下列問題：

(1)圖中①→③的過程稱為________，其目的是_______________________________________
_______________________________________________________________________________。
(2)該同學(xué)將③中的微生物培養(yǎng)液接種到培養(yǎng)基④之前，進(jìn)行了梯度稀釋，制成稀釋倍數(shù)分別為101、102、103的不同稀釋度的樣品液，分別吸取0.1 mL樣品液涂布于培養(yǎng)基上。每個(gè)稀釋倍數(shù)的樣品液涂布三個(gè)培養(yǎng)基，最終形成的菌落的數(shù)目如表所示：
培養(yǎng)基編號
稀釋倍數(shù)
甲
乙
丙
101
168
172
170
102
12
14
19
103
2
3
6

應(yīng)選擇稀釋倍數(shù)為________的培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)數(shù)，稀釋前每毫升菌液中含有油煙降解菌的數(shù)目為________個(gè)，這種計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往會(huì)比顯微鏡直接計(jì)數(shù)的結(jié)果小，其原因是
______________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________。
(3)在⑤的固體培養(yǎng)基中應(yīng)加入該品牌食用油，其作用是__________________________。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是_________________________________________________________。
答案　(1)選擇培養(yǎng)　初步篩選出能降解油煙的微生物，并增大其濃度　(2)101　1.7×104　該方法只是統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)量，并且當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，觀察到的只是一個(gè)菌落　(3)為微生物提供碳源和能源　高壓蒸汽滅菌法
解析　(1)分析圖解可知，圖中①→③的培養(yǎng)過程中加入某品牌食用油作為唯一碳源，能夠初步篩選出能降解油煙的微生物，因此稱為選擇培養(yǎng)。(2)利用稀釋涂布平板法對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)合表格數(shù)據(jù)可知，應(yīng)選擇稀釋倍數(shù)為101的培養(yǎng)基進(jìn)行計(jì)數(shù)，稀釋前每毫升菌液中含有油煙降解菌的數(shù)目＝(168＋172＋170)÷3÷0.1×101＝1.7×104(個(gè))。該方法只是統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目，并且當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，觀察到的只是一個(gè)菌落，因此這種計(jì)數(shù)方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往會(huì)比顯微鏡直接計(jì)數(shù)的結(jié)果偏小。(3)在⑤的固體培養(yǎng)基中應(yīng)加入該品牌食用油，其作用是為微生物提供碳源和能源。培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法。
4．幽門螺旋桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化道潰瘍的主要致病因素，據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，目前我國有超過50%的人感染了Hp病菌。Hp是微需氧菌，環(huán)境氧要求5%～8%，在大氣或絕對厭氧環(huán)境下均能生長，Hp中某種酶催化尿素水解形成“氨云”保護(hù)細(xì)菌在高酸環(huán)境下生存。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟為：配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→X→培養(yǎng)→觀察。請回答：
(1)在配制培養(yǎng)基時(shí)，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因?yàn)镠p含有____________________，所以它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會(huì)出現(xiàn)________色環(huán)帶。
(2)步驟X的操作如圖所示：

①微生物接種的方法有很多，但都要注意__________________；上圖所示方法為________________。
②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是_______________。
(3)在培養(yǎng)時(shí)，需將培養(yǎng)皿______并放在恒溫培養(yǎng)箱中。
答案　(1)脲酶　紅　(2)①防止外來雜菌的入侵　稀釋涂布平板法　②使微生物和無菌水混合均勻　(3)倒置
解析　(1)由于幽門螺旋桿菌含有能將尿素分解成氨的酶即脲酶，而氨會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，即pH升高，導(dǎo)致酚紅指示劑變紅。
(2)①微生物接種的方法有很多，但都要注意防止外來雜菌的入侵。接種微生物常用平板劃線法和稀釋涂布平板法。題圖為稀釋涂布平板法。②圖示每次取樣前需用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，目的是使微生物和無菌水混合均勻。
(3)培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫箱中培養(yǎng)，倒置培養(yǎng)的目的是防止皿蓋上冷凝的水珠滴在培養(yǎng)基中污染培養(yǎng)基。
5．(2020·白銀模擬)秸稈還田的過程中，配施適量的高效纖維素分解菌，能有效促進(jìn)秸稈分解，提高秸稈還田效率，且不會(huì)造成環(huán)境污染。回答下列問題：
(1)篩選纖維素分解菌時(shí)，可到腐爛稻草等環(huán)境中采集土樣，原因是_______________________
_______________________________________________________________________________。
(2)有很多類群微生物都能有效降解纖維素，為了避免不同微生物之間的生長互相影響，應(yīng)該用______________培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，獲得純化菌株。
(3)用剛果紅染色法初步鑒定纖維素分解菌后，進(jìn)一步用液體濾紙培養(yǎng)基分組復(fù)篩，其中濾紙的作用是____________________。培養(yǎng)一段時(shí)間后，將殘留的濾紙烘干稱重，殘留的濾紙?jiān)缴?，則說明____________________________________________________________________。
(4)采用__________________技術(shù)，將篩選到的高效纖維素分解菌固定，能夠阻隔其受到外界不利因素的毒害作用，增加使用壽命。
(5)為了長期保存高效纖維素分解菌菌種，可以采用__________________的方法。
(6)現(xiàn)有高效分解纖維素的細(xì)菌，為探究其最適pH，某同學(xué)設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：取錐形瓶若干分為4組，加入等量秸稈及其他必需營養(yǎng)物質(zhì)，分別設(shè)置pH為1、3、6、7，接種等量纖維素分解細(xì)菌，培養(yǎng)一段時(shí)間后，測定各組錐形瓶中秸稈減少量的平均值。該pH設(shè)置的不足之處有____________和____________。
答案　(1)腐爛稻草的土壤富含纖維素分解菌　(2)選擇　(3)提供纖維素　纖維素分解菌的分解能力越強(qiáng)　(4)固定化細(xì)胞　(5)甘油管藏　(6)pH范圍設(shè)置不合理　pH梯度設(shè)置不合理
解析　(3)要篩選到能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基，在培養(yǎng)基中加入纖維素作為唯一碳源，能在此培養(yǎng)基中存活的微生物就是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，故濾紙的作用是提供纖維素。培養(yǎng)一段時(shí)間后，將殘留的濾紙烘干稱重，殘留的濾紙?jiān)缴?，則說明纖維素分解菌的分解能力越強(qiáng)。
6．乳酸菌是對人體有益的微生物之一，常用于產(chǎn)生酸奶，其發(fā)酵產(chǎn)物為乳酸，能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣。為檢測某品牌酸奶中的乳酸菌含量是否達(dá)標(biāo)，檢驗(yàn)人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：
(1)配制培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中除含水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和______________。
(2)稀釋樣品：取1 mL待測酸奶，用______進(jìn)行梯度稀釋。
(3)接種培養(yǎng)：用______________法接種，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是________________。
(4)觀察計(jì)數(shù)：菌落周圍出現(xiàn)____________的就是乳酸菌的菌落，選擇菌落數(shù)在________的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，目的是____________________________________。
答案　(1)CaCO3　(2)無菌水　(3)稀釋涂布平板　無氧　(4)透明圈(或溶鈣圈)　30～300　防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目
解析　(1)乳酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物乳酸，能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣，因此配制培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基除加入水、無機(jī)鹽、碳源、氮源和瓊脂外，還需添加維生素和CaCO3。(2)計(jì)數(shù)乳酸菌前，需用無菌水將待測酸奶稀釋至合適濃度。(3)計(jì)數(shù)乳酸菌需用稀釋涂布平板法接種，乳酸菌是厭氧菌，培養(yǎng)時(shí)控制的氣體條件是無氧。(4)乳酸能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣，不透明的培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明(溶鈣)圈的就是乳酸菌的菌落。細(xì)菌計(jì)數(shù)時(shí)，常選擇菌落數(shù)在30～300的平板計(jì)數(shù)。每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，目的是可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。
7．(2020·合肥市質(zhì)檢)如圖是純化纖維素分解菌并生產(chǎn)乙醇的基本工作流程，請回答下列問題：

(1)圖中①過程應(yīng)選取富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選所需微生物時(shí)需用________對纖維素進(jìn)行染色并制成選擇培養(yǎng)基，最后還要在平板培養(yǎng)基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，接種時(shí)要在______________旁操作。
(2)圖中②環(huán)節(jié)獲得的酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，分別為C1酶、CX酶和______________。前兩種酶使纖維素酶分解成____________，第三種酶將前兩種酶的分解產(chǎn)物分解成葡萄糖。⑤環(huán)節(jié)常用的菌種是___________________________________________
_____________________________________________________________________________。
(3)用稀釋涂布平板法測定一土壤樣品中纖維素分解菌數(shù)量。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的稀釋液中，取0.2 mL稀釋液涂布，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果：涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、240和246；請計(jì)算每毫升原液中的菌體數(shù)是______________。
答案　(1)剛果紅　酒精燈火焰　(2)葡萄糖苷酶　纖維二糖　酵母菌　(3)1.16×109
解析　(1)分析題圖可知，圖中①過程表示纖維素分解菌的篩選，因此應(yīng)選擇富含纖維素的土壤，在鑒定和篩選所需微生物時(shí)需用剛果紅對纖維素進(jìn)行染色并制成選擇培養(yǎng)基，最后還要在平板培養(yǎng)基上分離純化目的菌。為避免雜菌污染培養(yǎng)物和環(huán)境，接種時(shí)要在酒精燈火焰旁操作。(2)從目的菌中得到的纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，分別為C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。⑤過程表示無氧發(fā)酵產(chǎn)生乙醇的過程，此過程常用的菌種是酵母菌。(3)涂布的三個(gè)平板上菌落的平均值為(210＋240＋246)/3＝232。原液中的菌體密度是232÷0.2×106＝1.16×109(個(gè)/mL)。