知識點85　傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用
1 果酒、果醋、泡菜的制作都離不開微生物的發(fā)酵作用,下列敘述正確的是A.制作果酒時,自始至終都要保持無氧狀態(tài),這樣才能提高產(chǎn)量B.果醋發(fā)酵時,要保持充足的氧氣C.參與泡菜制作的微生物不能用于生產(chǎn)酸奶D.泡菜發(fā)酵過程中,在泡菜壇蓋邊沿的水槽中一次性注滿水即可
1.B　要提高果酒的產(chǎn)量,首先要增加酵母菌的種群數(shù)量,所以果酒發(fā)酵的前期需先通入氧氣,促進酵母菌的繁殖,A錯誤。醋酸菌是一種好氧細菌,故果醋發(fā)酵時,要保持充足的氧氣,B正確。參與泡菜制作的微生物是乳酸菌,乳酸菌也能用于生產(chǎn)酸奶,C錯誤。制作泡菜所使用的微生物是乳酸菌,其是異養(yǎng)厭氧型微生物,泡菜發(fā)酵過程中,要向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,并經(jīng)常向水槽中補水,營造無氧環(huán)境,D錯誤。
2 中國的許多傳統(tǒng)美食制作過程蘊含了生物發(fā)酵技術。下列敘述正確的是A.泡菜制作過程中,酵母菌將葡萄糖分解成乳酸B.饅頭制作過程中,酵母菌進行呼吸作用產(chǎn)生CO2C.米酒制作過程中,將容器密封可以促進酵母菌生長D.酸奶制作過程中,后期低溫處理可產(chǎn)生大量乳酸桿菌
2.B　在泡菜制作過程中,乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸,A項錯誤;在饅頭制作過程中,酵母菌進行細胞呼吸產(chǎn)生CO2,從而使饅頭變得松軟,B項正確;在米酒制作過程中,將容器密封的目的是讓酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精,將容器密封不利于酵母菌生長,C項錯誤;在酸奶制作過程中,后期低溫處理的目的是抑制微生物的生長,延長保質期,D項錯誤。
3 “葡萄美酒夜光杯,欲飲琵琶馬上催?！痹娋渲刑峒暗钠咸丫剖侨祟惱梦⑸锇l(fā)酵制作而來的。下列相關敘述正確的是 A.在18~30 ℃,打開瓶蓋,蓋上紗布,進行葡萄酒的發(fā)酵B.葡萄酒是以葡萄為主要原料,在酵母菌線粒體中發(fā)酵制成C.取新鮮葡萄先去枝梗,再用清水沖洗D.傳統(tǒng)釀制葡萄酒利用的是葡萄果皮表面附著的野生酵母菌
3.D　葡萄酒發(fā)酵時,瓶蓋不能一直打開,否則酵母菌不能進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精,A錯誤。酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精的場所是細胞質基質,進行有氧呼吸的場所是細胞質基質和線粒體,B錯誤。取新鮮葡萄先用清水沖洗1~2次,再去枝梗,C錯誤。傳統(tǒng)釀制葡萄酒利用的是葡萄果皮表面附著的野生酵母菌,D正確。
4 油炸臭豆腐是我國一些地方的風味小吃。制作時需要將豆腐浸入含有乳酸菌、芽孢桿菌等微生物的鹵汁中發(fā)酵。下列相關表述正確的是A.鹵汁中的乳酸菌和芽孢桿菌不存在競爭關系B.乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生了乳酸和CO2C.腐乳的制作也是利用了乳酸菌和芽孢桿菌的發(fā)酵D.微生物發(fā)酵產(chǎn)生了不同的代謝物使得該臭豆腐具有特殊的味道
4.D　乳酸菌和芽孢桿菌生活在同一環(huán)境下會相互競爭營養(yǎng)物質和空間等,因此二者存在競爭關系,A錯誤。乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸,不會產(chǎn)生CO2,B錯誤。制作腐乳時,多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如酵母、曲霉和毛霉等,其中起主要作用的是毛霉,C錯誤。經(jīng)過微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質等被分解產(chǎn)生了不同的代謝物,使臭豆腐具有特殊的味道,D正確。
5 如圖所示裝置可以用來制作葡萄酒和葡萄醋。相關敘述錯誤的是A.制作葡萄酒時,該裝置預留一定空間有利于酵母菌的增殖B.排氣管長而彎曲可以防止雜菌污染C.醋酸菌是厭氧型微生物,因此制作葡萄醋時需關閉充氣口D.利用裝置中產(chǎn)生的葡萄酒直接制作葡萄醋時,需提高溫度
5.C　酵母菌通過有氧呼吸增殖,所以制作葡萄酒時題圖中裝置預留一定空間有利于酵母菌的增殖,A正確。制作葡萄酒的裝置采用長而彎曲的排氣管排氣,雜菌不容易進入裝置中,可以防止雜菌污染,B正確。制作葡萄醋時,利用的是醋酸菌,醋酸菌是好氧細菌,故需持續(xù)通入氧氣,促進醋酸生成,C錯誤。葡萄酒發(fā)酵時溫度控制在18~30 ℃,如果要繼續(xù)制作葡萄醋,在發(fā)酵后期要向發(fā)酵液中通入無菌空氣,以保證發(fā)酵液處于有氧環(huán)境,并將發(fā)酵液置于30~35 ℃的環(huán)境中,D正確。
6 某同學嘗試自己制作泡菜,制作時向泡菜壇中加入了一些“陳泡菜水”進行腌制,并在不同的腌制時間測定了泡菜中亞硝酸鹽的含量。下列說法錯誤的是 A.需將“陳泡菜水”煮沸冷卻后再加入泡菜壇中B.腌制時泡菜壇要裝至八成滿,鹽水沒過全部菜料,蓋上壇蓋再用水密封C.泡菜壇內(nèi)有時會長一層白膜,這是酵母菌大量繁殖導致的D.不同的腌制時間,泡菜中亞硝酸鹽的含量可能相同
6.A　泡菜的制作離不開乳酸菌,“陳泡菜水”中含有大量的乳酸菌,煮沸會殺死乳酸菌,故不能煮沸“陳泡菜水”,A錯誤。腌制時泡菜壇要裝至八成滿,鹽水沒過全部菜料,蓋上壇蓋再用水密封,從而創(chuàng)造無氧條件,B正確。在泡菜制作過程中,泡菜發(fā)酵液的營養(yǎng)豐富,其表面往往含有適量的氧氣,適合酵母菌生長繁殖,酵母菌大量繁殖會導致泡菜壇液面形成一層白膜,C正確。泡菜腌制過程中,亞硝酸鹽的含量先增加后降低,因此在不同的腌制時間,泡菜中亞硝酸鹽的含量可能相同,D正確。
7 某興趣小組進行了泡菜制作,并對發(fā)酵過程中乳酸菌數(shù)量、泡菜中亞硝酸鹽含量以及溶液pH等進行測量記錄,繪制出曲線圖如圖所示。下列相關敘述正確的是 A.與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用B.泡菜制作過程中,乳酸菌種群數(shù)量呈“J”形增長C.溶液pH呈下降趨勢的原因是乳酸菌經(jīng)細胞呼吸生成了CO2D.制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是創(chuàng)造無光條件并保溫
7.A　與第3天相比,第8天后的泡菜中亞硝酸鹽含量較低,更適于食用,A正確。據(jù)圖分析,泡菜制作過程中,乳酸菌種群數(shù)量不呈“J”形增長,B錯誤。乳酸菌是厭氧細菌,進行無氧呼吸,不能產(chǎn)生CO2,C錯誤。制作泡菜的主要菌種是乳酸菌,泡菜壇用水密封的目的是為乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境,D錯誤。
8 約9 000年前,我們的祖先就會利用微生物將谷物、水果等發(fā)酵為含酒精的飲料。后來人們通過自然發(fā)酵或曲種傳代的固體發(fā)酵方法生產(chǎn)了醬油、醋、豆豉、腐乳等發(fā)酵食品。請根據(jù)所學知識回答下列問題。(1)人們在制作腐乳、醬油、泡菜等食品時,往往直接利用原材料中　　　　的微生物,或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團、鹵汁等發(fā)酵物中的微生物進行發(fā)酵、制作食品,這種技術一般稱為　　　　技術。該技術往往以　　　　的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主,通常是家庭式或作坊式的。(2)人們釀制的葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是　　　　　　　　。 在制作果酒時,有時候酒會變酸,其反應簡式為　　　　　　　　。(3)制作腐乳、泡菜、果酒、果醋的過程中,利用真菌進行發(fā)酵的是 。(4)做酸菜魚的“酸湯”是通過天然發(fā)酵而成的,參與該發(fā)酵過程的主要微生物是　　　　。出壇后的“酸湯”若不及時食用,一段時間后會在其表面出現(xiàn)一層白膜,這是　　　　(填微生物名稱)繁殖形成的,與進行“酸湯”發(fā)酵的主要微生物相比,該微生物在結構上的最主要區(qū)別是　　　　。
制作不同發(fā)酵食品的區(qū)別
知識點86　微生物的基本培養(yǎng)技術
1 做酵母菌的純培養(yǎng)實驗時,下列敘述不正確的是 A.等高壓蒸汽滅菌鍋的溫度自然下降后才能打開排氣閥B.倒平板時,拔出錐形瓶棉塞后,應將瓶口迅速通過火焰C.倒平板時要在酒精燈火焰旁進行,以防雜菌污染D.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應趁熱快速蘸取菌液
1.D　利用高壓蒸汽滅菌鍋進行滅菌時,應該切斷電源,等到鍋內(nèi)溫度自然下降后才能打開排氣閥,A正確。倒平板時,拔出錐形瓶棉塞后,應將瓶口迅速通過火焰,以防止雜菌污染,B正確。為了防止雜菌污染,倒平板時要在酒精燈火焰旁進行,C正確。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后,應該在火焰旁冷卻接種環(huán),同時拔出裝有菌液的試管的棉塞,將試管口通過火焰,然后用接種環(huán)在火焰旁蘸取菌液,以避免接種環(huán)因溫度太高而殺死菌種,D錯誤。
2 如表為某培養(yǎng)基的配方,有關敘述正確的是A.從物理性質看,該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基B.該培養(yǎng)基中提供碳源的物質主要是葡萄糖,提供氮源的物質是牛肉膏C.能在此培養(yǎng)基上生長的只有大腸桿菌D.該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后就可以接種使用
2.B　該培養(yǎng)基含有瓊脂,從物理性質看,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,A錯誤。該培養(yǎng)基中提供碳源的物質主要是葡萄糖,提供氮源的物質是牛肉膏,B正確。很多微生物都能利用葡萄糖進行繁殖,此培養(yǎng)基中能生長多種微生物,不是只有大腸桿菌,C錯誤。該培養(yǎng)基調(diào)節(jié)合適的pH后要進行高壓蒸汽滅菌操作,D錯誤。
3 下列有關消毒和滅菌的敘述錯誤的是A.在實驗室中,玻璃和金屬材質的實驗器具可放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌B.水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的C.巴氏消毒法可以殺死牛奶中的所有微生物,且基本不會破壞牛奶的營養(yǎng)成分D.培養(yǎng)基滅菌常采用濕熱滅菌法,未接種的培養(yǎng)基表面也可能會有菌落生長
3.C　玻璃和金屬材質的實驗器具可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌,A正確。水廠供應的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的,因為氯氣溶于水生成次氯酸,次氯酸具有殺菌功能,同時氯氣具有極強的揮發(fā)性,不會對人體造成較大的傷害,B正確。巴氏消毒法可以殺死牛奶中的絕大多數(shù)微生物,并且不破壞牛奶的營養(yǎng)成分,C錯誤。培養(yǎng)基滅菌常采用濕熱滅菌法,若培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié)或滅菌環(huán)節(jié)不合格,則未接種的培養(yǎng)基表面也可能會有菌落生長,D正確。
4 (多選)網(wǎng)傳“酵素”能夠減肥、美顏,某同學搜索水果“酵素”相關知識得到以下信息:①《酵素產(chǎn)品分類導則》中將“酵素”定義為以動物、植物、菌類等為原料,經(jīng)微生物發(fā)酵制得的含有特定生物活性成分的產(chǎn)品;②把切成塊狀的水果和水、糖等按比例放入容器,密封,注意容器內(nèi)留下20%的空間,置于陰涼處發(fā)酵一段時間后,過濾得到的濾液即為“酵素”。有關敘述正確的是A.在“酵素”制作時容器內(nèi)留下20%的空間可防止發(fā)酵液溢出,造成雜菌污染B.發(fā)酵裝置在陰涼處放置時,需要間隔一定時間放氣,后期間隔時間可適當延長C.“酵素”的本質是酶,其具有一定的減肥功能D.“酵素”中含有多種糖類、蛋白質、有機酸等,這些都是有益于人體健康的成分
4.AB　在“酵素”制作時容器內(nèi)留下20%的空間,是為了防止發(fā)酵液溢出造成雜菌污染,A正確。發(fā)酵裝置放置在陰涼處,需要間隔一定時間放氣,后期間隔時間可適當延長,是因為發(fā)酵前期營養(yǎng)充足,微生物代謝旺盛,產(chǎn)生較多氣體,到發(fā)酵后期營養(yǎng)物質減少,微生物代謝減弱,氣體釋放量減少,B正確。根據(jù)《酵素產(chǎn)品分類導則》中對“酵素”的定義可知,“酵素”的本質不是酶,C錯誤。根據(jù)題意可知,“酵素”是以動物、植物、菌類等為原料經(jīng)微生物發(fā)酵制得的產(chǎn)品,因此,“酵素”可能含有糖類、蛋白質、有機酸等成分,同時也可能含有微生物代謝產(chǎn)生的有害物質,并不一定都有益于人體健康,D錯誤。
知識點87　微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)
1 列有關稀釋涂布平板法和細菌計數(shù)板計數(shù)法的敘述,正確的是 A.兩種方法對活菌進行計數(shù)時均用到顯微鏡B.細菌計數(shù)板比血細胞計數(shù)板薄,常用于酵母菌細胞、霉菌孢子等的計數(shù)C.兩種方法計數(shù)時,均利用固體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物D.稀釋涂布平板法統(tǒng)計活菌時應選擇菌落數(shù)為30~300的平板進行計數(shù)
1.D　稀釋涂布平板法通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中所含活菌數(shù),不需要使用顯微鏡,細菌計數(shù)板計數(shù)法要用到顯微鏡,A錯誤。血細胞計數(shù)板比細菌計數(shù)板厚,常用于相對較大的酵母菌細胞、霉菌孢子等的計數(shù),B錯誤。稀釋涂布平板法計數(shù)用到固體培養(yǎng)基,細菌計數(shù)板計數(shù)利用液體培養(yǎng)基,C錯誤。稀釋涂布平板法可以將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落,為保證結果準確,常選擇菌落數(shù)為30~300的平板進行活菌計數(shù),D正確。
微生物的計數(shù)方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下觀察、計數(shù),然后計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量,統(tǒng)計的結果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和。(2)稀釋涂布平板法:通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)目,推測樣品中的活菌數(shù)。
2 下列關于選擇培養(yǎng)基的說法,錯誤的是A.為了確定選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用,應設計一個不接種的培養(yǎng)基作為對照B.可用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基將土壤中的尿素分解菌篩選出來C.可向培養(yǎng)基中添加青霉素,從而將真菌從混有細菌的培養(yǎng)基上選擇出來D.可用以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選出分解纖維素的微生物
2.A　選擇培養(yǎng)基是允許特定種類的微生物生長,同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,為了確定選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用,應設計一個在完全培養(yǎng)基上接種的培養(yǎng)皿作為對照,A錯誤。將一定稀釋度的樣品接種在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上,并在適宜的條件下培養(yǎng),尿素分解菌能在該培養(yǎng)基上生長、繁殖,而其他微生物則不能生長、繁殖,故以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可將土壤中的尿素分解菌篩選出來,B正確。青霉素能抑制細菌的繁殖,所以若要將真菌從其他細菌中分離出來,可向培養(yǎng)基中添加青霉素,配制成選擇培養(yǎng)基,C正確。若要篩選分解纖維素的微生物,則需要制備以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基上只有能分解纖維素的微生物能夠生長,D正確。
3 研究人員用無機鹽、瓊脂和石油配制的培養(yǎng)基從石油污染的土壤中篩選出一種高效石油降解菌。下列相關敘述錯誤的是A.這種培養(yǎng)基是一種選擇培養(yǎng)基B.所用培養(yǎng)基應該以石油為唯一碳源C.高效石油降解菌可以降解土壤中的石油,修復土壤D.高效石油降解菌在未被石油污染的土壤中含量較高
3.D　要分離獲得能降解石油的菌株,需要在選擇培養(yǎng)基中篩選,且該培養(yǎng)基應以石油作為唯一碳源,A、B正確。高效石油降解菌可以降解土壤中的石油,修復土壤,C正確。相對于未被污染的土壤,被石油污染的土壤中高效石油降解菌含量更高,D錯誤。
4 (多選)如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素的細菌的過程示意圖,有關敘述錯誤的是A.在配制步驟②、③的培養(yǎng)基時,都應添加瓊脂B.步驟③純化分解尿素的細菌的原理是將聚集的細菌分散,可以獲得單細胞菌落C.步驟③采用涂布平板法接種,并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素D.步驟④挑?、壑胁煌木浞謩e接種,可通過比較溶液pH的變化大小來比較細菌分解尿素的能力
4.AC　步驟②所用培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基,不需要添加瓊脂,A錯誤;步驟③為篩選、純化分解尿素的細菌,所用培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源,不能用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,C錯誤;步驟④鑒定細菌分解尿素的能力時,挑?、壑胁煌木浞謩e接種,分解尿素能力強的細菌,會產(chǎn)生更多NH3,使溶液pH變高,所以可通過比較溶液pH的變化大小來比較細菌分解尿素的能力,D正確。
5 (多選)丙草胺(C17H26ClNO2)是一種廣泛應用的除草劑。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細菌菌株,并對其計數(shù),操作過程如圖所示。下列有關敘述正確的是 A.實驗過程中應避免已滅菌處理的土壤與周圍物品接觸B.以丙草胺為唯一氮源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基C.依據(jù)實驗結果計算出每克土壤中的菌株數(shù)約為1.5×1010個D.利用稀釋涂布平板法得到的結果往往比實際活菌數(shù)要少
5.BCD　土壤不需要滅菌,A錯誤。丙草胺可提供碳源、氮源,以丙草胺為唯一氮源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,B正確。用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)時,在同一稀釋度下,應至少對3個平板進行重復計數(shù),然后求出平均值,一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進行計數(shù),據(jù)實驗結果可知,只有兩個平板滿足需求,含27個菌落的平板不能用來計數(shù),即每克土壤中的菌株數(shù)為(148+153)÷2÷0.1×107≈1.5×1010(個),C正確。圖示采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法,由于當兩個或多個細胞連在一起時,在平板上觀察到的只是一個菌落,因此用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)要少,D正確。
6 隨著能源和環(huán)境問題日益嚴峻,利用纖維素酶降解秸稈等生產(chǎn)乙醇,對緩解能源危機有著重大意義?？蒲腥藛T開展篩選、誘變及選育高產(chǎn)纖維素酶菌株的相關研究,過程如圖。請回答:(1)從物理狀態(tài)來看,CMC平板屬于　　　　培養(yǎng)基。富集培養(yǎng)后的菌種常采用　　　　法接種于CMC平板,培養(yǎng)一段時間后,可根據(jù)　　　　初步鑒定并挑取產(chǎn)纖維素酶菌株XZ-33。(2)選育高產(chǎn)纖維素酶的菌株時,向培養(yǎng)基中加入剛果紅染液,然后篩選出　　　　的菌落。(3)如圖是篩選獲得產(chǎn)纖維素酶菌株UV-C16過程中60C-γ射線輻照劑量與致死率和正突變率(符合生產(chǎn)需要的突變菌數(shù)占誘變后活菌數(shù)的比例)的關系。實驗結果表明,用60C-γ射線誘變處理時合適的輻照劑量為　　　　。
6.【參考答案】　(1)固體　稀釋涂布平板　菌落的特征　(2)透明圈大　(3)0.6 KGy【解題思路】　(1)CMC平板上可分離出產(chǎn)纖維素酶菌株XZ-33,屬于固體培養(yǎng)基;富集培養(yǎng)后,菌液的濃度較高,一般采用稀釋涂布平板法進行接種;培養(yǎng)一段時間后,常常通過菌落的形狀、大小、顏色等特征進行初步鑒定。(2)與普通產(chǎn)纖維素酶的菌株相比,高產(chǎn)纖維素酶的菌株產(chǎn)生的纖維素酶較多,因此在剛果紅培養(yǎng)基上產(chǎn)生的透明圈比較大,可以據(jù)此來篩選出高產(chǎn)纖維素酶的菌株。(3)實驗結果表明,用60C-γ射線誘變處理時,當輻照劑量為0.6 KGy時,正突變率最高,同時致死率不算太高,可以保證存活的菌株中高產(chǎn)纖維素酶的菌株占比較高。
7 如圖為某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)的過程,題表是乙培養(yǎng)基的配方。(1)題表所示培養(yǎng)基組分中為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是　　　　。圖中甲培養(yǎng)基與乙培養(yǎng)基的成分相比,唯一的區(qū)別是甲中培養(yǎng)基無瓊脂。在涂平板對甲中的菌液進行稀釋,如何確定樣品的稀釋操作是成功的 。(2)甲、乙培養(yǎng)基都是選擇培養(yǎng)基,如何確定該培養(yǎng)基能夠對土壤中微生物起到篩選作用 。(3)若想獲得每克樣品中的菌株數(shù),可用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落的數(shù)目,每隔24 h統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,應選取　　　　作為結果,這樣可以防止 。
7.【參考答案】　(1)葡萄糖、尿素(二者順序不可顛倒)　若稀釋涂布后能得到菌落數(shù)目為30~300的平板,則說明樣品的稀釋操作比較成功　(2)將土壤稀釋液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基后培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目明顯大于甲、乙選擇培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目,則說明該培養(yǎng)基能夠對土壤中微生物起到篩選作用　(3)菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄　因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目【解題思路】　(1)題表所示培養(yǎng)基組分中,為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是葡萄糖、尿素;為了保證結果準確,一般選擇菌落數(shù)為30~300的平板進行計數(shù),所以如果能得到菌落數(shù)目為30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功。(2)甲、乙培養(yǎng)基都是以尿素作為唯一的氮源,理論上只有能分解尿素的細菌才能生存下來,因此甲、乙培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基。將土壤稀釋液接種到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上,若培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目明顯大于甲、乙選擇培養(yǎng)基上菌落的數(shù)目,則說明該培養(yǎng)基能夠對土壤中微生物起到篩選作用。(3)菌落計數(shù)時,一般每隔24 h統(tǒng)計一次,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結果,這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目。
知識點88　發(fā)酵工程及其應用
1 與傳統(tǒng)發(fā)酵技術相比,發(fā)酵工程的產(chǎn)品種類更加豐富,產(chǎn)量和質量明顯提高。下列有關說法正確的是A.用于發(fā)酵工程的優(yōu)良菌種只能通過誘變育種或基因工程育種獲得B.發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身C.通常使用液體培養(yǎng)基分離獲得細菌單菌落D.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥來防治害蟲,是化學防治的重要手段
1.B　發(fā)酵工程中的優(yōu)良菌種可以從自然界中篩選,也可通過誘變育種或基因工程育種等手段獲得,A錯誤。發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能,通過現(xiàn)代工程技術,規(guī)模化生產(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品,主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身,B正確。菌落是在固體培養(yǎng)基上形成的,液體培養(yǎng)基中不能形成菌落,C錯誤。利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥來防治病蟲害,是生物防治的重要手段,D錯誤。
2 發(fā)酵工程在醫(yī)藥上的應用非常廣泛,其中青霉素的發(fā)現(xiàn)和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)進一步推動了發(fā)酵工程在醫(yī)藥領域的應用和發(fā)展。青霉素是產(chǎn)黃青霉菌在有氧條件下產(chǎn)生的一種非常重要的抗菌藥物,生產(chǎn)青霉素的主要流程如圖所示。(1)圖示生產(chǎn)青霉素的發(fā)酵過程中,對產(chǎn)黃青霉菌進行分離純化采用了　　　　法,其可以用來計數(shù)的原理為 。在制備該培養(yǎng)基時,除了添加必要的營養(yǎng)成分外,還需要將pH調(diào)至　　　　性。(2)分離得到菌種后搖瓶培養(yǎng)的目的是 (至少答2點)。
(3)發(fā)酵過程中,為了解某時刻產(chǎn)黃青霉菌的數(shù)量,取10 ml菌液加到90 ml無菌水中,混勻,將0.1 mL稀釋液接種于培養(yǎng)基上。105倍稀釋對應的三個平板中菌落數(shù)量分別為68、76和78,則每毫升菌液中產(chǎn)黃青霉菌數(shù)量為　　　　個。待完全發(fā)酵結束后,采用　　　　等方法將菌體分離。(4)若“純粹分離”的平板上混入了一些乳酸菌,請依據(jù)其代謝類型設計一個簡單實驗區(qū)分乳酸菌和產(chǎn)黃青霉菌,寫出實驗思路和預期結果。實驗思路: 。預期結果: 。
2.【參考答案】　(1)稀釋涂布平板　當樣品的稀釋度足夠高時,培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌　酸　(2)提高培養(yǎng)液中溶解氧;使產(chǎn)黃青霉菌充分接觸營養(yǎng)物質,提高營養(yǎng)物質利用率　(3)7.4×107　過濾、沉淀　(4)實驗思路:將平板置于無氧環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng),觀察菌落大小的變化　預期結果:平板上能繼續(xù)生長的菌落為乳酸菌,不能繼續(xù)生長的為產(chǎn)黃青霉菌

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