2018北京首都師大附中高二（上）期末                   生    物（理）                2018.1第I卷（共30分）一、選擇題（本大題共30小題，每小題1分，共30分。在每小題所列出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題目要求的）1.某株名貴花卉用種子繁殖會(huì)發(fā)生性狀分離，為了防止性狀分離并快速繁殖，可以利用植物體的一部分器官或組織進(jìn)行離體培養(yǎng)，發(fā)育出有出完整的植株。進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)不應(yīng)用該株的A.葉片            B.子房壁              C.莖尖             D.花粉粒2.以下不能說明細(xì)胞全能性的實(shí)驗(yàn)是A.胡蘿卜仞部細(xì)胞培育出植株                B．紫色糯性玉米種子培育出植株
C.轉(zhuǎn)入抗蟲基因的棉花細(xì)胞自出植株          D．番茄與馬鈴薯體細(xì)胞雜交后育出植株3.下圖表示一定條件下將胡蘿卜的離體組織培育形成試管苗的過程。有關(guān)敘述不正確的A.需在無菌條件下將離體組織接種到培養(yǎng)基中B.圖中①②過程分別表示脫分化和再分化C.利用此過程獲得的試管苗均為純合子D.此實(shí)驗(yàn)說明分化的植物細(xì)胞仍具有全部的遺傳信息 4.下圖表示四倍體蘭花葉片通過植物組織培養(yǎng)形成植株的過程，相關(guān)敘述中證確的是A.②和③過程會(huì)發(fā)生減數(shù)分裂過程B.階段需生長(zhǎng)素而③階段需細(xì)胞分裂素C.階段有細(xì)胞增殖但無細(xì)胞分化D.此蘭花的花藥離體培養(yǎng)所得植株為二倍體
5.下圖表示應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)玉米的過程，對(duì)此過程的相關(guān)描述惜誤的是A.B→E過程中細(xì)胞全能性的高低發(fā)生了改變B.C試管中形成的是高度液泡化的薄壁細(xì)胞C.A植株和F株體細(xì)胞中的色體組數(shù)相同D.培養(yǎng)出的F植株一般不能直接應(yīng)用于擴(kuò)人種植
6．為了使牛仔褲呈現(xiàn)“穿舊"效果，在工業(yè)洗衣機(jī)中用酶洗代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浮石擦洗，是目前重要的生產(chǎn)手段（工藝流程見下圖),下列敘述中錯(cuò)誤的是A.纖維素在仿舊中的作用機(jī)理與其在洗衣粉中去污的機(jī)理相似B.在上述工藝中，為重復(fù)使用纖維素酶，應(yīng)選用適當(dāng)?shù)陌駝┕潭ɑ?/span>C.在上述工藝中，通過調(diào)節(jié)溫度、酸堿度、處理時(shí)間可控制仿舊顏色的深淺D.纖維素酶催化葡萄糖殘基間糖苷腱的水解分解纖維素7.下列有關(guān)酶的制各和應(yīng)用的敘述，正確的是A.酶水解后再用蒸餾水漲破的方法常用于制備微生物的胞內(nèi)酶B.透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離和純化C.物質(zhì)地和衣粉用量不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果D.先用熱水溶解洗衣粉，再將水溫調(diào)節(jié)到最適溫度8.加工橘子罐頭，采用醺堿處脫去中果皮（橘絡(luò)），會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重污染。目前使用酶解去除橘絡(luò)，可減少污染。下列生長(zhǎng)在特定環(huán)境中的4類微生物，不能大量產(chǎn)生所用酶有A.生長(zhǎng)在麥麩上的黑曲霉                      B.生長(zhǎng)在酸奶中的乳酸菌C.生長(zhǎng)在棉籽殼上的平菇                      D.生長(zhǎng)在木屑上的木霉9.下列關(guān)于固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，錯(cuò)誤的是固定化酶的主要目的是實(shí)現(xiàn)酶的重復(fù)利用溶解氧交換受阻是固定化酶應(yīng)用的重要限制因素固定化細(xì)胞用于生產(chǎn)能分泌到細(xì)胞外的產(chǎn)物凝膠與被包埋細(xì)胞之間不是通過共價(jià)鍵結(jié)合10．下列有關(guān)固定化酶和固定化細(xì)胞的敘述，正確的是可用包埋法制備固定化酵母細(xì)胞反應(yīng)產(chǎn)物對(duì)固定化酶的活性沒有影響葡萄糖異構(gòu)酶固定前后專一性不同固定化酶可以催化各種反應(yīng)底物的一系列反應(yīng)
11.圖1表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖2是利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行酒精發(fā)酵的示意圖，下列敘述不正確的是剛?cè)芑暮Ｔ逅徕c應(yīng)迅速與活化的酵母菌混合制備混合液圖1中X溶液為CaC12溶液，其作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠圖2發(fā)酵過程中攪拌的目的是為了使培養(yǎng)液與酵母菌充分接觸
圖1中制備的凝膠珠用蒸餾水洗滌后再轉(zhuǎn)移到圖2裝置中12.圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖，下列敘述不正確的是圖1、2中加入蒸餾水稀釋的目的相同圖1中完成過濾之后保留濾液圖2中完成過濾之后棄去濾液在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉有助于去除雜質(zhì)13.下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的有提取動(dòng)物細(xì)胞中的DNA和蛋白都可用蒸餾水漲破細(xì)胞用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA蛋自質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化14.小鼠雜交瘤細(xì)胞表達(dá)的單克隆抗體用于人體試驗(yàn)時(shí)易引起過敏反應(yīng)，為了克服這個(gè)缺陷，可選擇性擴(kuò)增抗體的可變區(qū)基因〔目的基因）后再重組表達(dá)。下列相關(guān)敘述不正確是設(shè)計(jì)擴(kuò)增目的基因的引物時(shí)需要考慮表達(dá)載體的序列用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不必知道基因的全部序列PCR體系中一定要添加從受體細(xì)胞中提取的DNA聚合酶一定要根據(jù)目的基因編碼產(chǎn)物的特性選擇合適的受體細(xì)胞15.綠色熒光蛋白（簡(jiǎn)稱GFP)含有1條多肽鏈，有238個(gè)氨基酸組成，能發(fā)出綠色熒光。下列有關(guān)GFP的敘述不正確的是在控制GFP合成的基因中，脫氧核苷酸的數(shù)量應(yīng)該大于1428個(gè)合成GFP的轉(zhuǎn)錄過程需要RNA聚合酶和游離的脫氧核苷酸等參與將GFP整合到胚胎干細(xì)胞中，可用于胚胎發(fā)育中細(xì)胞的標(biāo)記定位轉(zhuǎn)入GFP基因的植物細(xì)胞能發(fā)出熒光說明該基因在植物中成功表達(dá)16.應(yīng)用轉(zhuǎn)基因技術(shù)可生產(chǎn)人類所需要的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，如利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素。下列選項(xiàng)中能說明人胰島素基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是在大腸桿菌細(xì)胞中檢測(cè)到人的胰島素基因在大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基區(qū)轉(zhuǎn)錄出的mRNA在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)出大腸桿菌在大腸桿菌的代謝產(chǎn)物中提取到人胰島素17.下列有關(guān)基因工程操作的敘述正確的是用同種限制性內(nèi)切酶切割運(yùn)載體與目的基因可獲得相同黏性末端以蛋白質(zhì)的氨基酸序列為依據(jù)合成的目的基因與原基因的堿基序列相同檢測(cè)到受體細(xì)胞含有目的基因就標(biāo)志著基因工程操作的成功用含抗生素抗性基因的質(zhì)粒作為運(yùn)載體是因?yàn)槠淇剐曰鶇^(qū)便于與外源基因連接18.在基因工程操作中限制性核酸內(nèi)切酶是不可缺少的工具.下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述錯(cuò)誤的是一種限制性核酸內(nèi)切酶只能識(shí)別一種特定的脫氧核苷酸序列限制性核酸內(nèi)切酶的活性受溫度和pH等因素的影響限制性核酸內(nèi)切酶可以從某些原核生物中提取限制性核酸內(nèi)切酶也可以識(shí)別和切割RNA19.下列有關(guān)基因工程的敘述中，正確的是限制性核酸內(nèi)切酶只在獲得目的基因時(shí)使用重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制通過基因工程育種可以定向地改變生物的性狀20．下列一般不作為基因工程中的標(biāo)記基因的是四環(huán)索抗性基因產(chǎn)物具有顏色反應(yīng)的基因綠色熒光蛋白基因貯藏蛋白的基因2l.下列關(guān)于基因工程的敘述正確的是DNA連接酶能使兩個(gè)粘性末端之間的堿基結(jié)合和限制性內(nèi)切酶的切口一定是GAATTC的堿序列質(zhì)粒是基因工程中唯一用作目的基因的運(yùn)載工具對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制的過程可稱為分子“克隆”22．人體某蛋白質(zhì)在細(xì)胞中合成后必須經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的進(jìn)一步加工方能分泌到細(xì)胞外.欲通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)使編碼該蛋白的基因得以表達(dá)最終獲得成熟蛋白，下列適于充當(dāng)受體細(xì)胞的是A.大腸桿菌             B.酵母菌            C.噬菌體           D.質(zhì)粒23.圖1表示含有目的基因D的DNA片段和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分基序列。現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ．MboⅠ．SmaⅠ四種限制性核酸內(nèi)切酶，它們識(shí)別的基序列和酶切位點(diǎn)分別為：C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析正確的是    若用限制MspⅠ完全切割圖1中DNA片段，會(huì)破壞2個(gè)磷酸二酯鍵若1用限制酶SmaⅠ完全切割后會(huì)產(chǎn)生4種不同的DNA片段若切割圖2中的質(zhì)粒以便拼接目的基因D選擇限酶BamHⅠ和MboⅠ含有目的基因D的重組質(zhì)粒的細(xì)菌在添加抗生素A和B的培養(yǎng)基上不能存活
24.ChIL基因是藍(lán)細(xì)菌擬核DNA上控制葉綠素合成的基因：為研究該基因?qū)θ~綠素合成的控制，而要構(gòu)建缺失chIL基因的變異株，構(gòu)建過程如下圖所示．下列敘述不正確的是chlL基因的基本組成單位是脫氧核糖核苷酸①②過程應(yīng)使用不同的限制性核酸內(nèi)切酶構(gòu)建的基因表達(dá)載體中應(yīng)含有起始密碼子和終止密碼子若操作成功，可用含紅霉素的培養(yǎng)基篩選出所需變異株
25．降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等．人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學(xué)機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素，從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙DNA,過程如下圖：獲得的雙鏈DNA經(jīng)EcoR I（識(shí)別序列和切割位點(diǎn)-G↓AATTC-）和BamH I（識(shí)別列切割位點(diǎn)-G↓GTCC-）雙酶切后插入到大腸桿菌質(zhì)粒中。下列有關(guān)分析不正確的是Klenow酶是一種DNA聚臺(tái)酶合成的雙鏈DNA有72個(gè)堿基對(duì)ECOR I和BamH I雙酶切的目的是保證目的基因和運(yùn)載體的定向連接篩選重組質(zhì)粒需要大腸桿菌質(zhì)粒中含有標(biāo)記基因
26.擬南芥的A基因位于1號(hào)染色體上，影響減數(shù)分裂時(shí)染色體交換頻率，a基因無此功能。a基因是通過將T-DNA插入到A基因中獲得的，用PCR法確定T-DNA插入位置時(shí)，應(yīng)從圖中選擇的引物組合是A.Ⅰ-Ⅱ                  B.Ⅰ-Ⅲ                C.Ⅱ-Ⅲ               D.Ⅰ-Ⅱ-Ⅲ27.現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(bp)的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用Kpn1單獨(dú)酶切得到400bp和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時(shí)酶切后得到200bp和600bp兩種長(zhǎng)度的DNA分子.該DNA分子的酶切圖譜正確的是A．                    B．C．                             D．28.限制性內(nèi)切酶能識(shí)別特定的DNA序列并進(jìn)行剪切，不同的限制性內(nèi)切酶可以對(duì)不同的核酸序列進(jìn)行剪切，現(xiàn)以3種不同的內(nèi)切酶〔X、Y、Z)對(duì)6.2kb大小的DNA分子進(jìn)行剪切，并用凝膠電泳分離各核酸片段，結(jié)果如圖所示，則由此可推斷該片斷的酶切圖是 A．
B．
C．
D．29.將ada（腺苷酸脫氨酶基因）通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達(dá)腺苷酸脫氨酶.下列敘述錯(cuò)誤的是腸桿菌細(xì)胞至少含一個(gè)重組質(zhì)粒每個(gè)pET28b質(zhì)粒至少含一個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)每個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)至少插入一個(gè)ada插入的ada至少表達(dá)一個(gè)腺苷酸脫氨酶分子30．北極比目魚中有抗凍基因，其碼的抗凍蛋白具有11個(gè)氨基酸的重復(fù)序列，該序列重復(fù)次數(shù)越多，捎凍能力越強(qiáng)，下是獲取轉(zhuǎn)基因抗凍番茄植株的過程示意，有關(guān)敘述正確的是
株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是（　?。?/span>
A. 過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測(cè)序
B. 將多個(gè)抗凍基因依次相連成能表達(dá)的新基因，不能得到抗凍性增強(qiáng)的抗凍蛋白
C. 過程②構(gòu)成重組質(zhì)粒的過程中需要用到限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
D. 利用重組質(zhì)粒的抗性基因可以篩選出目的基因完全表達(dá)的細(xì)胞第Ⅱ卷（共70分）二、填空題（本大題共9小題，每空1-2分，共70分）1.為了探究6-BA和IAA對(duì)某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某研究小組在MS培養(yǎng)基中加入6-BA和IAA，配制成四種培養(yǎng)基(見下表)，滅菌后分別接種數(shù)量相同、生長(zhǎng)狀態(tài)一致、消毒后的莖尖外植體，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(shù)(n)，結(jié)果如下表。
回答下列問題：(1)按照植物的需求量，培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的元素可分為______和________兩類。上述培養(yǎng)基中，6-BA屬于______類生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。
(2)在該實(shí)驗(yàn)中，自變量是______，因變量是______，自變量的取值范圍是_______。
(3)從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，誘導(dǎo)叢芽總數(shù)最少的培養(yǎng)基是______號(hào)培養(yǎng)基。
(4)為了誘導(dǎo)該菊花試管苗生根，培養(yǎng)基中一般不加入________(填“6-BA”或“IAA”)。 2. 已知微生物A可以產(chǎn)生油脂，微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：（1）顯微觀察時(shí)，微生物A菌體中的油脂通?？捎糜?/span>        染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用        （填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”）從菌體中提取。（2）為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應(yīng)選用以        為碳源的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。（3）若要測(cè)定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用        直接計(jì)數(shù)；若要測(cè)定其活菌數(shù)量，可選用        法進(jìn)行計(jì)數(shù)。（4）為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個(gè)溫度中，       ℃條件下該酶活力最小。為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)圍繞        ℃設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)。3.閱讀讀如下資料：資料甲：科學(xué)家將牛生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫阎?，得到了體型巨大的“超級(jí)小鼠”；科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草．
資料乙：T4溶菌酶在翁度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家對(duì)編碼T4溶菌酶的基因進(jìn)行了改造，使其表達(dá)的T4溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼?，在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個(gè)二硫鍵，提高了T4溶菌酶的耐熱性．
回答下列問題：
（1）資料甲屬于基因工程的范疇．將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用______法．構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是______和______．在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時(shí)，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌的作用是______．
（2）資料乙中的技術(shù)屬于______工程范疇．該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)______進(jìn)行改造，或制造制造一種______的技術(shù)．在該實(shí)例中，引起T4溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的______序列發(fā)生了改變．
4．圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡(jiǎn)圖，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn)，ampR為青霉素抗性基因，tctR 為四環(huán)素抗性基因，P為啟動(dòng)子，T為終止子，ori為復(fù)制原點(diǎn)。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答下列問題：⑴將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒表達(dá)載體分別用EcoRI酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶進(jìn)行連接后，其中由兩個(gè)DNA片段之間連接形成的產(chǎn)物有______種。若要從這些連接產(chǎn)物中分離出重組質(zhì)粒，需要對(duì)這些連接產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。⑵用上述幾種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長(zhǎng)的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是____________________；⑶目的基因表達(dá)時(shí)，RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)是         （用圖中符號(hào)作答），其合成的產(chǎn)物是                                      。⑷在上述實(shí)驗(yàn)中，為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是                               。5. 科學(xué)家將外源目的基因與大腸桿菌的質(zhì)粒進(jìn)行重組，并在大腸桿菌中成功表達(dá)。下圖表示構(gòu)建重組質(zhì)粒和篩選含目的基因的大腸桿菌的過程。請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）圖中質(zhì)粒上有抗氨芐青霉素和抗四環(huán)素兩個(gè)標(biāo)記基因，經(jīng)過．和．步嘯后，有些質(zhì)粒上的                  基因內(nèi)插入了外源目的基因，形成重組質(zhì)粒.由于目的基因的分隔使得該抗性基因失活．（2）步驟③是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的過程。為了促進(jìn)該過程，應(yīng)該用＿＿＿＿＿處理大腸桿菌。（3）步驟④：將三角瓶?jī)?nèi)的大腸桿菌接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基C上培養(yǎng)，目的是篩選＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。能在C中生長(zhǎng)的大腸桿菌有＿＿＿種。（4）步驟⑤:用無菌牙簽挑取C上的單個(gè)菌落，分別接種到D（含氨芐青霉素和四環(huán)素）和E（含四環(huán)素）兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上，一段時(shí)間后，菌落的生長(zhǎng)狀況如圖所示。含目的基因的菌落位于（選填“D”或“E”）＿＿＿＿上，請(qǐng)?jiān)趫D中相應(yīng)的位置上圈出來。6．如圖所示組織型纖維酶原激活劑（tPA）的生產(chǎn)過程．二氫葉酸還原酶（DHFR）能催化二氫葉酸還原成四氫葉酸，缺少該酶的倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞不能合成四氫葉酸，只能在添加胸苷、甘氨酸和嘌呤的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，轉(zhuǎn)入DHFR基因的缺失型細(xì)胞可在不含胸苷、甘氨酸和嘌呤的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)．葉酸的類似物氨甲喋呤存在時(shí)，可與葉酸競(jìng)爭(zhēng)DHFR并抑制它的活性，使細(xì)胞死亡．當(dāng)DHFR基因大量擴(kuò)增并表達(dá)時(shí)，氨甲喋呤不足以結(jié)合全部的DHFR，細(xì)胞能在含有氨甲喋呤的培養(yǎng)基中存活．請(qǐng)回答：圖（1）載體上的DHFR基因在基因工程中稱為______，1號(hào)培養(yǎng)基中不應(yīng)該加入______，2號(hào)培養(yǎng)基中應(yīng)該加入______，1號(hào)和2號(hào)培養(yǎng)基在功能上屬于______培養(yǎng)基．
（2）在2號(hào)培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞還需進(jìn)行______活性的檢測(cè)，才能大規(guī)模培養(yǎng)以獲得相應(yīng)的產(chǎn)品．7．研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑-內(nèi)皮抑素，它能有效地抑制血管增生．下面是通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得內(nèi)皮抑素的方法，請(qǐng)分析回答下列問題：（1）從肝細(xì)胞中分離出RNA，經(jīng)______過程獲得cDNA，再通過______擴(kuò)增內(nèi)皮抑素基因．（2）大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因，LacZ基因便可表達(dá)出β半乳糖苷酶，當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時(shí)，Xgal便會(huì)被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落．反之，則形成白色菌落．選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入______物質(zhì)．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成______顏色的菌落，原因是______．之所以選擇大腸桿菌作為基因工程的受體菌，其突出的優(yōu)點(diǎn)是：___                                     ___．（兩點(diǎn)以上）8. 在植物基因工程中，用土壤農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體，把目的基因重組入Ti質(zhì)粒上的T-DNA.片段中，再將重組的T-DNA.插入植物細(xì)胞的染色體DNA中。(1)將攜帶抗除草劑基因的重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入二倍體油菜細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選獲得一株有抗除草劑特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的T-DNA.片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交F1代中，仍具有抗除草劑特性的植株占總數(shù)的_______，原因是                。(2)種植上述轉(zhuǎn)基因油菜,它所攜帶的目的基因可以通過花粉傳遞給近緣物種,造成“基因污染”。如果把目的基因?qū)肴~綠體DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是___          。9. T-DNA可隨機(jī)插入植物基因組內(nèi)，導(dǎo)致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導(dǎo)擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植株形成花蕾時(shí)，將地上部分浸入農(nóng)桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子(稱為T1代)。
(1)為促進(jìn)植株側(cè)枝發(fā)育以形成更多的花蕾，需要去除_____，因?yàn)楹笳弋a(chǎn)生的____會(huì)抑制側(cè)芽的生長(zhǎng)。
(2)為篩選出已轉(zhuǎn)化的個(gè)體，需將T1代播種在含_____的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，成熟后自交，收獲種子(稱為T2代)。
(3)為篩選出具有抗鹽性狀的的突變體，需將T2代播種在含____的培養(yǎng)基上，獲得所需個(gè)體。
(4)經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與____植株進(jìn)行雜交，再自交____代后統(tǒng)計(jì)性狀分離比。
(5)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測(cè)野生型基因的存在導(dǎo)致植物的抗鹽性____。
(6)根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出被插入的基因片段。其過程是：提取__________植株的DNA，用限制酶處理后，再用__________將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如下圖)，以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取_________作為引物進(jìn)行擴(kuò)增，得到的片段將用于獲取該基因的全序列信息。 

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