?2022學(xué)年第二學(xué)期臺(tái)州八校聯(lián)盟期中聯(lián)考
高二年級(jí)生物學(xué)科試題
一、選擇題
1. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)。下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的必要條件是（ ）
A. 生長素 B. 抗生素 C. 血清 D. 無機(jī)鹽
【答案】A
【解析】
【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，需要滿足的條件為：無菌、無毒；營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；適宜的溫度和PH；氣體環(huán)境：95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2。
【詳解】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：(1)無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。(2)營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。(3)適宜的溫度和PH。(4)氣體環(huán)境：95%空氣(細(xì)胞代謝必需的)和5%的CO2，綜上，BCD正確，A錯(cuò)誤。
故選A。
2. “基因剪刀”——限制性內(nèi)切核酸酶是基因工程中非常重要的一種工具，它所切割的部位是（ ）

A. ① B. ② C. ③ D. ④
【答案】B
【解析】
【分析】限制酶識(shí)別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。
【詳解】限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別DNA中特定核苷酸序列，并在特定的核苷酸之間切割磷酸二酯鍵，即圖中部位②，①是磷酸基團(tuán)和脫氧核糖之間的化學(xué)鍵，③是脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵，④是氫鍵，ACD不符合題意，B符合題意。
故選B。
3. 2017年11月27日，世界上首例體細(xì)胞克隆猴“中中”和“華華”在我國誕生。下列技術(shù)與“中中”和“華華”的產(chǎn)生無關(guān)的是（ ）
A. 胚胎移植 B. 體外受精 C. 胚胎體外培養(yǎng) D. 核移植
【答案】B
【解析】
【分析】動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物：（1）哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植（比較容易）和體細(xì)胞核移植（比較難）。（2）選用去核卵（母）細(xì)胞的原因：卵（母）細(xì)胞比較大，容易操作；卵（母）細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富。卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可使體細(xì)胞細(xì)胞核全能性得到表達(dá)。（3）體細(xì)胞核移植的大致過程是：將供體體細(xì)胞核導(dǎo)入受體去核卵母細(xì)胞，形成重組細(xì)胞，用電脈沖刺激形成早期胚胎，導(dǎo)入代孕母羊的子宮，妊娠、出生后即克隆動(dòng)物。
【詳解】體細(xì)胞克隆猴培養(yǎng)過程，需將體細(xì)胞細(xì)胞核移入去核卵母細(xì)胞中，構(gòu)成重構(gòu)胚，用物理或化學(xué)法誘導(dǎo)重構(gòu)胚發(fā)育，需進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng)和胚胎移植，克隆猴是無性生殖，不需要進(jìn)行體外受精，ACD不符合題意，B符合題意。
故選B。
4. 擬采用“取材→消毒→愈傷組織→出芽→生根→移栽”的方法繁殖一種名貴花卉。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 該過程為器官發(fā)生途徑
B. 整個(gè)過程需要配制不同的培養(yǎng)基
C. 用聚乙二醇處理愈傷組織，可使其發(fā)生細(xì)胞融合
D. 取材時(shí)除了要考慮其優(yōu)良性狀外還需考慮細(xì)胞全能性的表達(dá)能力
【答案】C
【解析】
【分析】植物組織培養(yǎng)原理：植物組織培養(yǎng)將植物細(xì)胞培養(yǎng)成植物個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性。植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物器官、組織或細(xì)胞→愈傷組織→胚狀體→植物體。常用的植物激素生長素和細(xì)胞分裂素。
【詳解】A、該過程是離體培養(yǎng)的組織或細(xì)胞團(tuán)（愈傷組織）分化形成不定根、不定芽等器官的過程，即器官發(fā)生途徑 ，A正確；
B、脫分化階段和再分化階段等不同階段對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)和激素的需要是不同的，整個(gè)過程需要配制不同的培養(yǎng)基 ，B正確；
C、植物體細(xì)胞雜交之前需要去除細(xì)胞壁才能誘導(dǎo)融合 ，C錯(cuò)誤；
D、不同外植體表現(xiàn)出全能性的難易程度不同，取材時(shí)除了要考慮其優(yōu)良性狀外還需考慮細(xì)胞全能性的表達(dá)能力 ，D正確。
故選C。
5. 微生物培養(yǎng)過程中十分重視無菌操作，以防止雜菌污染。請(qǐng)分析下列操作正確的是（ ）
A. 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手用75%酒精消毒
B. 接種操作時(shí)要打開紫外燈并在酒精燈火焰附近進(jìn)行
C. 培養(yǎng)工作結(jié)束后，所有使用過的器皿都必須洗滌后再高壓蒸汽滅菌處理
D. 高壓蒸汽滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間應(yīng)從高壓蒸汽滅菌鍋開始加熱時(shí)計(jì)時(shí)
【答案】A
【解析】
【分析】高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15 ~ 30min。滅菌時(shí)間從高壓蒸汽滅菌鍋達(dá)到要求溫度或壓力值到滅菌完成。
【詳解】A、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手和衣著用75%酒精消毒，A正確；
B、酒精燈火焰附近存在一個(gè)無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作時(shí)要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，但實(shí)驗(yàn)者接種操作過程不能打開紫外燈，B錯(cuò)誤；
C、培養(yǎng)工作結(jié)束后，所有使用過的器皿都必須先經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理后再洗滌，C錯(cuò)誤；
D、高壓蒸汽滅菌時(shí)，滅菌時(shí)間應(yīng)從高壓蒸汽滅菌鍋達(dá)到預(yù)設(shè)溫度或壓力值時(shí)開始計(jì)時(shí)，直至滅菌完成為止，D錯(cuò)誤。
故選A。
6. 生物是一門既古老又現(xiàn)代的技術(shù)。下列關(guān)于生物技術(shù)的操作過程、原理或應(yīng)用的說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. 基因工程的核心是構(gòu)建重組DNA分子 B. 細(xì)胞膜具有流動(dòng)性是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)
C. 胚胎分割屬于動(dòng)物有性生殖 D. 稀釋涂布平板法可用于微生物的分離與純化
【答案】C
【解析】
【分析】1.基因工程操作基本步驟中的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。
2.植物體細(xì)胞雜交技術(shù):就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。
3.胚胎分割：是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)。來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動(dòng)物無性繁殖或克隆的方法之一。
4.微生物分離與純化的方法有①平板劃線法：將滅菌過的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長， 隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
【詳解】A、基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，A正確；
B、植物體細(xì)胞雜交涉及原生質(zhì)體的融合，依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性，因此細(xì)胞膜具有流動(dòng)性是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，B正確；
C、胚胎分割可以看作動(dòng)物無性生殖方法的之一，C錯(cuò)誤；
D、稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落，可用于微生物的分離與純化，D正確。
故選C。
7. 下圖為平板劃線法接種微生物的示意圖，下列說法錯(cuò)誤的是（ ）

A. 觀察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是④
B. 劃線時(shí)要注意不能將④區(qū)域的劃線與①區(qū)域相連
C. 每次劃線后，都應(yīng)將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒
D. 劃線結(jié)束時(shí)即可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落
【答案】D
【解析】
【分析】1、平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
2、平板劃線操作的注意事項(xiàng)：（1）第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌。（2）灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。（3）劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。（4）劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。
【詳解】A、④區(qū)域的劃線與①區(qū)域沒有相連，根據(jù)箭頭方向，可知④區(qū)域是最后劃線區(qū)域，由于隨著在平板上連續(xù)劃線，菌體數(shù)量越來越少，故觀察或比較各種細(xì)菌菌落形態(tài)的最佳區(qū)域是④，A正確；
B、劃線時(shí)要注意不能將④區(qū)域的劃線與①區(qū)域相連，才能達(dá)到分離的效果，B正確；
C、圖中所示的4次劃線后，都應(yīng)將接種環(huán)放在酒精燈上灼燒，其中前三次劃線結(jié)束后的灼燒是為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端，使每次劃線菌種數(shù)目減少，最后一次灼燒是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者，C正確；
D、劃線結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置放在一定溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間后，可看到劃線末端出現(xiàn)不連續(xù)單菌落，D錯(cuò)誤。
故選D。
8. 海拉（HeLa）細(xì)胞是1951年從一位患宮頸癌的美國病人身上分離出來的宮頸癌細(xì)胞。雖然該病人已經(jīng)去世，但海拉細(xì)胞直到今天還被用于科學(xué)研究。下列說法正確的是（ ）
A. 海拉細(xì)胞可利用液體培養(yǎng)基在體外無限傳代，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B. 將癌變的宮頸癌組織分散為單個(gè)的細(xì)胞，可用胃蛋白酶處理
C. 培養(yǎng)液需定期更換，以便清除代謝廢物，防止代謝廢物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害
D. 體外培養(yǎng)海拉細(xì)胞時(shí)，需提供95％O2和5％CO2的氣體環(huán)境
【答案】C
【解析】
【分析】接觸抑制是將多細(xì)胞生物的細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)時(shí)，分散貼壁生長的細(xì)胞一旦相互匯合接觸，即停止移動(dòng)和生長的現(xiàn)象；
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：無菌、無毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)；營養(yǎng)(氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、葡萄糖、動(dòng)物血清等)；溫度和pH36.5+(-)0.5度，PH為7.2-7.44、氣體環(huán)境：(95%空氣和5%CO2保證細(xì)胞順利的生長增殖。
【詳解】A、海拉細(xì)胞屬于癌細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，A錯(cuò)誤；
B、將癌變的宮頸癌組織分散為單個(gè)的細(xì)胞，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，B錯(cuò)誤；
C、對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)營造無菌、無毒的環(huán)境，需要做到培養(yǎng)液需定期更換，以便清除代謝廢物，防止代謝廢物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，C正確；
D、體外培養(yǎng)海拉細(xì)胞時(shí)，需提供95％空氣和5％CO2的氣體環(huán)境，CO2的作用是維持溶液的pH，D錯(cuò)誤。
故選C
9. 病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)進(jìn)行擴(kuò)散導(dǎo)致果蔬產(chǎn)量和品質(zhì)退化。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速生產(chǎn)出脫毒苗。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 多種消毒藥劑配合使用來消毒植株莖尖切段，可獲得良好的消毒效果
B. 形成愈傷組織的過程中，可能會(huì)發(fā)生染色體變異、基因突變及基因重組
C. 脫毒苗培育過程中適當(dāng)提高NAA的比例有利于根的分化
D. 植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)
【答案】B
【解析】
【分析】植物組織培養(yǎng)中培養(yǎng)基生長素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時(shí)，有利于根分化、抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成。
【詳解】A、多種消毒藥劑（常用70%的酒精和5%的次氯酸鈉）配合使用來消毒植株莖尖切段，可獲得良好的消毒效果，A正確；
B、形成愈傷組織的過程發(fā)生有絲分裂，可能會(huì)發(fā)生染色體變異、基因突變，但不會(huì)發(fā)生基因重組，基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過程中，B錯(cuò)誤；
C、植物組織培養(yǎng)過程中，提高生長素的比例有利于生根，提高細(xì)胞分裂素的比例有利于芽的生長，NAA與生長素的作用類似，故脫毒苗培育過程中適當(dāng)提高NAA的比例有利于根的分化，C正確；
D、根據(jù)題干“病毒感染果蔬后，會(huì)借助胞間連絲等結(jié)構(gòu)進(jìn)行擴(kuò)散”，可知植株莖尖細(xì)胞中不含病毒的原因可能是該組織胞間連絲不發(fā)達(dá)，D正確。
故選B。
10. 下圖為人胰島素基因結(jié)構(gòu)模式圖，下列敘述正確的是（ ）

A. 啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合的部位
B. cDNA文庫和基因組文庫的基因中均含有內(nèi)含子
C. 人胰島細(xì)胞的cDNA文庫中可找到該基因
D. 細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)，只對(duì)編碼區(qū)進(jìn)行復(fù)制
【答案】A
【解析】
【分析】真核細(xì)胞的基因也是由編碼區(qū)和非編碼區(qū)兩部分組成的，編碼區(qū)包括：外顯子——能編碼蛋白質(zhì)的序列；特點(diǎn)：間隔的、不連續(xù)的，即能編碼蛋白質(zhì)的序列被不能編碼蛋白質(zhì)的序列分隔開來，成為一種斷列的形式；內(nèi)含子——不能編碼蛋白質(zhì)的序列；非編碼區(qū)：有調(diào)控作用的核苷酸序列，啟動(dòng)子——是基因結(jié)構(gòu)中位于編碼區(qū)上游的核苷酸序列，是RNA聚合酶結(jié)合點(diǎn),能準(zhǔn)確地識(shí)別轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)并開始轉(zhuǎn)錄，有調(diào)控遺傳信息表達(dá)的作用。
【詳解】A、啟動(dòng)子位于基因的非編碼區(qū)，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄，A正確；
B、cDNA文庫是以成熟mRNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成的，故cDNA文庫中的基因沒有內(nèi)含子，而基因組文庫的基因中含有內(nèi)含子，B錯(cuò)誤；
C、人胰島 α 細(xì)胞的cDNA文庫中對(duì)應(yīng)的基因無啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子，故人胰島 α 細(xì)胞的cDNA文庫中可找不到該基因，C錯(cuò)誤；
D、細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)，DNA分子中所有序列均被復(fù)制，即不管編碼區(qū)還是非編碼區(qū)均被復(fù)制，D錯(cuò)誤。
故選A。
11. 下列關(guān)于微生物發(fā)酵的敘述正確的是（ ）
A. 制作葡萄酒的過程中，將擠碎的葡萄放入發(fā)酵瓶中時(shí)，應(yīng)盡可能裝滿
B. 為防止雜菌進(jìn)入，果酒、果醋發(fā)酵都需要嚴(yán)格密封
C. 果醋發(fā)酵后期，隨著醋酸菌數(shù)量減少，醋酸含量不斷降低
D. 泡菜腌制過程中，可加入已腌制過的泡菜汁來加快發(fā)酵進(jìn)程
【答案】D
【解析】
【分析】1.果酒制作的原理是利用酵母菌在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精，若是在有氧條件下則進(jìn)行有氧呼吸而大量繁殖。參與果酒制作的微生物是酵母菌，其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒發(fā)酵是在18～30℃、缺氧、呈酸性的環(huán)境中，其中酵母菌可大量繁殖，而其他絕大多數(shù)微生物無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。
2.果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧氣充足的條件將乙醇先轉(zhuǎn)化為乙醛，在進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醋酸。醋酸菌是好氧菌，必須生活在氧氣充足的環(huán)境中，且最適生長溫度是30～35℃，所以果醋的發(fā)酵過程中，需要往發(fā)酵液中持續(xù)地通入無菌空氣（氧氣）。
【詳解】A、擠碎的葡萄放入發(fā)酵瓶中不要裝滿，一方面，留有一定空間，有氧條件，利于酵母菌快速繁殖；耗盡O2后，再進(jìn)行酒精發(fā)酵，另一方面還能防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生的CO2造成發(fā)酵液溢出，A錯(cuò)誤；
B、果酒制作的原理是利用酵母菌在無氧條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵產(chǎn)生酒精，果酒發(fā)酵需要嚴(yán)格密封；果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧氣充足的條件將乙醇先轉(zhuǎn)化為乙醛，在進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為醋酸。果醋發(fā)酵不要密封，需要往發(fā)酵液中持續(xù)地通入無菌空氣（氧氣），B錯(cuò)誤；
C.果醋發(fā)酵后期，醋酸菌數(shù)量不會(huì)減少，醋酸含量達(dá)到最大，C錯(cuò)誤；
D.泡菜腌制過程中加入一些已經(jīng)腌制過的泡菜汁，可以增加乳酸菌的數(shù)量，從而加快乳酸發(fā)酵的速率，D正確。
故選D。
利用愈傷組織中的胚性細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)基因植株的流程如圖所示，其中①、②、③表示過程。請(qǐng)回答問題。

12. ③過程涉及到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，下列有關(guān)敘述，正確的是（ ）
A. ③過程要經(jīng)歷細(xì)胞的脫分化和再分化
B. ①過程需在低滲溶液中用酶解法處理植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體
C. 在植物組織培養(yǎng)過程中無需提供光照
D. MS培養(yǎng)基中通常加入天然植物激素
13. 下列關(guān)于獲得該轉(zhuǎn)基因植株的整個(gè)流程的敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. ①過程去除細(xì)胞壁可提高②過程中目的基因?qū)氲某晒β?br /> B. ③過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性
C. 圖示途徑和植物體細(xì)胞雜交都能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性
D. 原生質(zhì)體的胞質(zhì)分裂方式與動(dòng)物細(xì)胞類似
【答案】12. A 13. D
【解析】
【分析】植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動(dòng)、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本范圍，培育作物新品種。
【12題詳解】
A、③是將原生質(zhì)體培育為轉(zhuǎn)基因植株的過程，所用技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該過程中需要經(jīng)歷脫分化和再分化，A正確；
B、①過程需在等滲或較高滲溶液中用酶解法處理植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體，以避免原生質(zhì)體吸水漲破，B錯(cuò)誤；
C、植物組織培養(yǎng)的再分化過程中需要提供光照，C錯(cuò)誤；
D、MS培養(yǎng)基中需用適宜配比的生長素和細(xì)胞分裂素溶液處理，但不一定是天然植物激素，可用其類似物，D錯(cuò)誤。
故選A。
【13題詳解】
A、原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，①過程去除細(xì)胞壁可提高②過程中目的基因?qū)氲某晒β?，A正確；
B、③是將原生質(zhì)體培育為轉(zhuǎn)基因植株的過程，所用技術(shù)是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，B正確；
C、植物體細(xì)胞雜交是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)，圖示途徑和植物體細(xì)胞雜交都能克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，C正確；
D、融合后的原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后才能進(jìn)行分裂，細(xì)胞分裂時(shí)會(huì)形成細(xì)胞板，進(jìn)而形成細(xì)胞壁，與動(dòng)物細(xì)胞向內(nèi)凹陷的分裂不同，D錯(cuò)誤。
故選D。
14. 限制性內(nèi)切核酸酶可以在特異的位點(diǎn)將DNA分子剪切開。如圖為不同種限制酶識(shí)別的序列，箭頭所指的是酶切位點(diǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 能被BamHI識(shí)別的序列也一定能被Sau3AI識(shí)別
B. 一個(gè)DNA分子被EcoRI切成兩個(gè)片段時(shí)會(huì)發(fā)生8個(gè)氫鍵的斷裂
C. 質(zhì)粒作為基因工程的常用載體，通常會(huì)有多種限制性內(nèi)切核酸酶切割位點(diǎn)
D. 用BamHI切割的目的基因和用Sau3AI切割的質(zhì)粒無法連接
【答案】D
【解析】
【分析】限制酶識(shí)別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接，可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。
【詳解】A、能被BamHI識(shí)別的序列中包含了被Sau3AI識(shí)別的序列 ，A正確；
B、一個(gè)DNA分子被EcoRI切成兩個(gè)片段時(shí)，四個(gè)AT堿基對(duì)間的氫鍵斷裂，每個(gè)AT堿基對(duì)有2個(gè)氫鍵，一共會(huì)發(fā)生8個(gè)氫鍵的斷裂 ，B正確；
C、質(zhì)粒作為基因工程的常用載體，通常會(huì)有多種限制性內(nèi)切核酸酶切割位點(diǎn) ，以便于把目的基因插入，C正確；
D、用BamHI切割的目的基因和用Sau3AI切割的質(zhì)粒，其黏性末端是相同的，可以連接 ，D錯(cuò)誤。
故選D。
15. 在進(jìn)行微生物數(shù)量測(cè)定時(shí)，下列情況會(huì)造成結(jié)果偏多的是（ ）
A. 利用顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)，滴加菌液時(shí)產(chǎn)生了氣泡
B. 利用顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)，滴加菌液后再蓋蓋玻片
C. 使用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，涂布器經(jīng)火焰灼燒后直接進(jìn)行涂布
D. 使用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，平板上有不少菌落是兩個(gè)細(xì)菌連在一起形成的
【答案】B
【解析】
【分析】對(duì)微生物數(shù)量進(jìn)行測(cè)定，可以采用稀釋涂布平板法和利用顯微鏡在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上直接計(jì)數(shù)。稀釋涂布平板法是將樣品的稀釋度足夠高，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活細(xì)菌；利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板在顯微鏡下直接計(jì)數(shù)是一種常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)法，這種方法可以直接測(cè)定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測(cè)定，由于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上的計(jì)數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計(jì)算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目。
【詳解】A、利用顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)，滴加菌液時(shí)產(chǎn)生了氣泡，導(dǎo)致實(shí)際所取菌液體積偏小，造成結(jié)果偏小，A錯(cuò)誤；
B、利用顯微鏡計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)先蓋蓋玻片，滴加菌液，如果反之，則蓋玻片可能由于已加入的液滴的表面張力作用使其未能嚴(yán)密的蓋到計(jì)數(shù)板表面上，會(huì)使計(jì)數(shù)室內(nèi)的體積增大，從而使計(jì)數(shù)結(jié)果偏高，B正確；
C、使用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，涂布器經(jīng)火焰灼燒后直接進(jìn)行涂布會(huì)燙死一部分細(xì)菌，導(dǎo)致結(jié)果偏小，C錯(cuò)誤；
D、平板上有不少菌落是兩個(gè)細(xì)菌長成的菌落連在一起形成按一個(gè)菌落計(jì)數(shù)，會(huì)使數(shù)值偏小，D錯(cuò)誤。
故選B。
16. 胚胎工程中各種操作技術(shù)如圖所示，下列分析正確的是（ ）

A. d可直接移植給受體，形成d的關(guān)鍵是要對(duì)a均等分割
B. 從良種公牛體內(nèi)獲得的精子可以直接與卵細(xì)胞結(jié)合受精
C. 早期囊胚a、b、c基因型相同，但發(fā)育得到的個(gè)體表型不一定相同
D. 代孕母牛應(yīng)用孕激素提前做好同期發(fā)情處理，避免移植胚胎發(fā)生免疫排斥
【答案】A
【解析】
【分析】胚胎移植基本程序：（1）供、受體的選擇和處理（使用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理、（促性腺激素）超數(shù)排卵處理）。（2）配種或人工受精。（3）胚胎收集（沖卵（早期胚胎））、檢查（胚胎發(fā)育到桑椹胚或囊胚）、培養(yǎng)或保存（－196℃的液氮） 。（4）胚胎移植：手術(shù)法（引出子宮和卵巢將其注入）；非手術(shù)法（用移植管將其送入子宮）。（5）移植后的檢查（是否妊娠）等。
【詳解】A、d是分割后的囊胚，可直接移植給受體，形成d的關(guān)鍵是要對(duì)a的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割 ，A正確；
B、從良種公牛體內(nèi)獲得的精子需要精子獲能處理后，才可以與卵細(xì)胞結(jié)合受精 ，B錯(cuò)誤；
C、早期囊胚a、b、c是不同精子和不同卵細(xì)胞受精作用形成的，基因型不同，C錯(cuò)誤；
D、代孕母牛的子宮對(duì)外來胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥，應(yīng)用孕激素提前做好同期發(fā)情處理，使供、受體的生理狀態(tài)相同，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育，D錯(cuò)誤。
故選A。
17. 已知一雙鏈DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ切割得到長度為120kb（kb：千堿基對(duì)）片段；用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ切割得到40kb和80kb兩個(gè)片段；同時(shí)用限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ和限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ切割時(shí)，得到10kb、80kb和30kb3個(gè)片段。據(jù)此分析該雙鏈DNA分子結(jié)構(gòu)及酶切位點(diǎn)情況為（ ）
A. B.
C.
D.

【答案】D
【解析】
【分析】根據(jù)題意，該雙鏈DNA分子，用限制酶Ⅰ切割得到長度為120kb片段；用限制酶Ⅱ切割得到40kb和80kb兩個(gè)片段，則說明該DNA分子為環(huán)狀DNA分子，據(jù)此分析。
【詳解】據(jù)分析可知，該DNA分子為環(huán)狀DNA，用限制酶Ⅰ切割得到長度為120kb片段，用限制酶Ⅱ切割得到40kb和80kb兩個(gè)片段，則說明該DNA上限制酶Ⅰ有1個(gè)酶切位點(diǎn)，限制酶Ⅱ有兩個(gè)酶切位點(diǎn)；同時(shí)用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割時(shí)，得到10kb、80kb和30kb共3個(gè)片段，則說明限制酶Ⅰ的酶切位點(diǎn)位于限制酶Ⅱ切割后的40kb片段中，D正確，ABC錯(cuò)誤。
故選D。
【點(diǎn)睛】
18. 野生型大腸桿菌菌株能在未添加某種維生素的基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在添加了多種維生素的完全培養(yǎng)基上生長，下圖為純化某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株的部分流程圖，①②③④代表培養(yǎng)基，A、B、C表示操作步驟，D、E為菌落。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />
A. 圖中①②④為基本培養(yǎng)基，③為完全培養(yǎng)基
B. 紫外線的目的是提高突變率，增加突變株的數(shù)量
C. B的正確操作是用涂布器把菌液均勻地涂布在②表面
D. 經(jīng)C過程原位影印及培養(yǎng)后，可從④中挑取D進(jìn)行純化培養(yǎng)
【答案】A
【解析】
【分析】分析題圖可知：圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運(yùn)用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中，分別是基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基；在基本培養(yǎng)基中，某氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，據(jù)此可以選擇出氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株。
【詳解】A、野生型大腸桿菌菌株能在基本培養(yǎng)基上生長，氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株無法合成某種氨基酸，只能在完全培養(yǎng)基上生長，根據(jù)題干信息和圖形分析，圖中①②④為完全培養(yǎng)基，③為基本培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；
B、紫外線照射的目的誘導(dǎo)野生大腸桿菌發(fā)生基因突變，通過紫外線照射處理可提高突變頻率，從而增加突變株的數(shù)量，B正確；
C、B操作是將菌液滴加到培養(yǎng)基表面，再用涂布器將菌液均勻的涂布在②表面，C正確；
D、從圖中可看出，D在基本培養(yǎng)基中無法生長，在完全培養(yǎng)基中可生長，說明D是氨基酸缺陷型菌落，故經(jīng)C過程影印及培養(yǎng)后，可從④培養(yǎng)基中挑取D菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)，D正確。
故選A。
19. 葡萄糖異構(gòu)酶（GI）在工業(yè)上應(yīng)用廣泛，為提高其熱穩(wěn)定性，我國科學(xué)家運(yùn)用蛋白質(zhì)工程把其第138位甘氨酸（Gly）替換為脯氨酸（Pro），由于脯氨酸側(cè)鏈的吡咯環(huán)填充了第138位氨基酸附近的空洞，使酶的熱穩(wěn)定性明顯提高。下列敘述正確的是（ ）
A. 改造后的葡萄糖異構(gòu)酶是自然界已存在的蛋白質(zhì)
B. 蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異
C. 獲得改造葡萄糖異構(gòu)酶的過程不需要基因工程參與
D. 根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)出的mRNA的堿基序列不是唯一的
【答案】D
【解析】
【分析】1、蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。
2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑。
【詳解】A、葡萄糖異構(gòu)酶的改造過程屬于蛋白質(zhì)工程 ，蛋白質(zhì)工程的實(shí)質(zhì)是定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)，故蛋白質(zhì)工程可以獲得滿足人類生產(chǎn)和生活需求的蛋白質(zhì)，改造后的葡萄糖異構(gòu)酶不是自然界已存在的蛋白質(zhì)，A錯(cuò)誤；
B、蛋白質(zhì)工程和基因工程都要對(duì)基因進(jìn)行操作，其操作對(duì)象相同，B錯(cuò)誤；
C、蛋白質(zhì)工程要通過基因工程實(shí)施，需要限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體作為工具，C錯(cuò)誤；
D、一種氨基酸可能對(duì)應(yīng)多種密碼子，所以根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)出的mRNA的堿基序列不是唯一的，D正確。
故選D。
20. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如下圖，據(jù)圖分析下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，其作用是保持原生質(zhì)體的完整性
B. 顯微鏡觀察融合的活細(xì)胞中有供體的葉綠體存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志
C. 原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而脫分化和再分化形成愈傷組織
D. 對(duì)雜種植株進(jìn)行黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株
【答案】C
【解析】
【分析】
分析題圖可知，過程①表示原生質(zhì)體的制備，用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；過程②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性。
【詳解】A、原生質(zhì)體培養(yǎng)液中加入適宜濃度的甘露醇用于維持滲透壓，有利于保持原生質(zhì)體完整，A正確；
B、觀察融合的活細(xì)胞中有無葉綠體的存在，可以作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志，B正確；
C、原生質(zhì)體再生出細(xì)胞壁后，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，C錯(cuò)誤；
D、對(duì)雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株，D正確。
故選C。
【點(diǎn)睛】
21. 下圖表示三親綿羊的培養(yǎng)過程，下列相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）

A. 三親綿羊細(xì)胞中的染色體只來自綿羊甲和綿羊丙
B. 可用紫外線短時(shí)間照射的方法對(duì)綿羊乙的卵母細(xì)胞去核
C. 圖示方法可避免攜帶有線粒體致病基因的綿羊甲產(chǎn)下患該病的子代
D. 受精卵發(fā)育成原腸胚再通過胚胎移植的方式在綿羊甲子宮內(nèi)發(fā)育成幼體
【答案】D
【解析】
【分析】三親綿羊的染色體來自綿羊甲和綿羊丙提供的細(xì)胞核，細(xì)胞質(zhì)基因來自綿羊乙。
【詳解】A、三親綿羊的染色體來自綿羊甲和綿羊丙提供的細(xì)胞核，A正確；
B、去除細(xì)胞核可用梯度離心法、紫外線短時(shí)間照射法和顯微操作法，可用紫外線短時(shí)間照射的方法對(duì)乙的卵母細(xì)胞去核，B正確；
C、根據(jù)圖示可知卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)來自于綿羊乙，可避免攜帶有線粒體致病基因的綿羊甲產(chǎn)下患該病的子代，C正確；
D、胚胎移植一般選擇桑葚胚或囊胚期的胚胎，D錯(cuò)誤。
故選D。
22. 金茶花是中國特有的觀賞品種，但易得枯萎病?？茖W(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，通過下圖所示的方法培育出了抗枯萎病的新品種，①—⑤分別生物或生物的部分結(jié)構(gòu)代表。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）

A. ②需插入①的T-DNA片段中，便于整合到金茶花細(xì)胞染色體DNA上
B. ⑤從培養(yǎng)室取出后直接用流水沖洗掉幼苗根部培養(yǎng)基，再移栽到育苗盤中
C. 抗病金茶花植株不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因型一定相同
D. 在⑤幼苗中檢測(cè)到抗枯萎病基因標(biāo)志著成功培育新品種
【答案】A
【解析】
【分析】根據(jù)題意和圖示分析可知：圖示表示抗枯萎病新品種的培育過程，其中①為質(zhì)粒，②為目的基因，③為基因表達(dá)載體，④為含有目的基因的受體細(xì)胞，⑤為抗枯萎病新品種的幼苗。
【詳解】A、①為質(zhì)粒，②為目的基因，目的基因需插入質(zhì)粒的T-DNA片段中，便于整合到金茶花細(xì)胞染色體DNA上，A正確；
B、⑤從培養(yǎng)室取出后，先將培養(yǎng)瓶的瓶口打開，放置一段時(shí)間，以提高試管苗對(duì)外部環(huán)境的適應(yīng)能力，然后用流水沖洗掉幼苗根部培養(yǎng)基，再移栽到育苗盤中，B錯(cuò)誤；
C、抗病金茶花植株不同部位的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)獲得的愈傷組織的基因型不一定相同，如花粉細(xì)胞培養(yǎng)形成的愈傷組織的基因只有體細(xì)胞的一半，C錯(cuò)誤；
D、在⑤幼苗中檢測(cè)到抗枯萎病基因標(biāo)志著目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入受體細(xì)胞，但這不能說明已經(jīng)成功培育抗枯萎病新品種，還需要檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，D錯(cuò)誤。
故選A。
23. 目前臨床上診斷新冠感染疑似患者的常用方法是先進(jìn)行咽拭子取樣，再用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)。如圖為RT-PCR技術(shù)的原理，數(shù)字①-③為相關(guān)步驟。在PCR過程中探針和引物一起與模板結(jié)合，探針兩側(cè)分別帶有熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)（抑制熒光發(fā)出），當(dāng)酶催化子鏈延伸至探針處時(shí)會(huì)水解探針，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離而發(fā)出熒光。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 若檢測(cè)結(jié)果有強(qiáng)烈熒光信號(hào)發(fā)出，說明被檢測(cè)者可能感染了病毒
B. 最終監(jiān)測(cè)的熒光強(qiáng)度與起始時(shí)反應(yīng)管內(nèi)樣本DNA的含量呈正相關(guān)
C. 熒光基因R連接在DNA探針的3’端，探針可以由新冠病毒的RNA特定序列逆轉(zhuǎn)錄獲得
D. 該反應(yīng)體系中雖未加入ATP，但新鏈的合成還是需要消耗能量的
【答案】B
【解析】
【分析】分析題圖：過程①為逆轉(zhuǎn)錄，以病毒的RNA為模板合成cDNA；過程②為引物與模板鏈的結(jié)合；過程 ③為合成子鏈（子鏈的延伸）。
【詳解】A、結(jié)合題干“當(dāng)酶催化子鏈延伸至探針處時(shí)會(huì)水解探針，導(dǎo)致熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離而發(fā)出熒光”可知，若檢測(cè)結(jié)果有強(qiáng)烈熒光信號(hào)發(fā)出，說明被檢測(cè)者可能感染了病毒，A正確；
B、結(jié)合題圖可知，經(jīng)咽拭子采樣含有的是病毒的RNA，故最終監(jiān)測(cè)的熒光強(qiáng)度與起始時(shí)反應(yīng)管內(nèi)樣本RNA的含量呈正相關(guān)，B錯(cuò)誤；
C、耐高溫的DNA聚合酶從引物的3，端進(jìn)行子鏈的延伸，結(jié)合題圖中子鏈延伸的方向，以及引物的結(jié)合情況可知，熒光基因R連接在DNA探針的3’端，探針可以由新冠病毒的RNA特定序列逆轉(zhuǎn)錄獲得，C正確；
D、該反應(yīng)體系中雖未加入ATP（加入的是dNTP，在水解的過程中既能提供能量又能提供原料），但新鏈的合成還是需要消耗能量的，D正確。
故選B。
24. 紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用，可用于某些癌癥的治療。某研究小組利用含3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷（3H-TdR）細(xì)胞培養(yǎng)液、紫杉醇對(duì)乳腺癌細(xì)胞（核DNA為2N）進(jìn)行了培養(yǎng)，如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 紫杉醇對(duì)正常的細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生毒副作用
B. 甲、乙兩瓶中，核DNA含量為4N的細(xì)胞占比較高的是乙瓶
C. 甲瓶中大量的3H-TdR會(huì)在S期進(jìn)入細(xì)胞核
D. 培養(yǎng)所用的卡氏瓶有利于乳腺癌細(xì)胞的貼壁生長
【答案】A
【解析】
【分析】有絲分裂間期分為G1（DNA合成前期）、S（DNA合成期）、G2（DNA合成后期） 三個(gè)階段，其中G1期與G2期進(jìn)行RNA（即核糖核酸）的復(fù)制與有關(guān)蛋白質(zhì)的合成，S期進(jìn)行DNA的復(fù)制。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：無菌、無毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理，通常還要在培養(yǎng)液中加入一定量的的抗生素，以防被污染，此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物累積對(duì)細(xì)胞自身產(chǎn)生危害；營養(yǎng)物質(zhì)：無機(jī)物（無機(jī)鹽、微量元素等），有機(jī)物（糖、氨基酸、促生長因子等）血清和血漿 (提供細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份)；溫度和pH：（36.5±0.5℃，7.2～7.4）；氣體環(huán)境：（95%的空氣+5%CO?的混合氣體），其中5%CO?氣體是為保持培養(yǎng)液的pH穩(wěn)定。
【詳解】A、對(duì)于正常細(xì)胞而言，分裂增殖是正?，F(xiàn)象之一，根據(jù)題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用”可知：若用紫杉醇處理正常的細(xì)胞，會(huì)影響正常細(xì)胞增殖過程中染色體的運(yùn)動(dòng)從而影響細(xì)胞的正常分裂，具有毒副作用，A錯(cuò)誤；
B、甲、乙的區(qū)別在于乙瓶中加了紫杉醇處理，根據(jù)題干“紫杉醇是紅豆杉屬植物產(chǎn)生的一種次生代謝產(chǎn)物，具有抑制紡錘絲解聚，阻止染色體運(yùn)動(dòng)的作用”可知紫杉醇可以抑制進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞正常分裂成兩個(gè)子細(xì)胞，由于核DNA的復(fù)制是正常的，經(jīng)過間期復(fù)制核DNA數(shù)量為4N，甲瓶中細(xì)胞分裂正常，乙瓶中細(xì)胞核DNA復(fù)制后無法分配到子細(xì)胞中去，仍留在原來的細(xì)胞中，導(dǎo)致乙瓶中核DNA為4N含量的細(xì)胞占比高于乙瓶，B正確；
C、3H-TdR作為DNA的合成原料之一，會(huì)在分裂間期的S（DNA合成期）進(jìn)入細(xì)胞核，以供核DNA的復(fù)制使用，C正確；
D、培養(yǎng)所用的卡氏瓶有利于乳腺癌細(xì)胞的貼壁生長，要求瓶壁是光滑無毒的，便于細(xì)胞貼附，D正確。
故選A。
25. 某單基因遺傳病患者的家系如圖1，研究人員采集了部分家系成員的DNA，對(duì)于該病相關(guān)基因的特異性片段（長度400bp，bp代表堿基對(duì)）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后用限制性內(nèi)切核酸酶HhaⅠ對(duì)其切割，進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析，結(jié)果如圖2．下列分析錯(cuò)誤的是（ ）

A. II-3的致病基因來自I-3
B. 該致病基因片段上沒有HhaⅠ酶切點(diǎn)
C. Ⅲ-2成年后進(jìn)行產(chǎn)前診斷時(shí)可參考胎兒的性別判斷其患病概率
D. Ⅱ-2與Ⅱ-3再生育兩個(gè)孩子（非同卵雙胞胎），其中一個(gè)正常的概率是3/8
【答案】C
【解析】
【分析】根據(jù)家系圖可知II-2、II-3表現(xiàn)型正常，但是他們的子女中有患者，由此判定該病為隱性遺傳病，Ⅲ-1是患者，其父親II-2表現(xiàn)型正常，由此可知該病為常染色體隱性遺傳病，通過凝膠電泳圖可知，PCR擴(kuò)增之后與該病相關(guān)基因的特異性片段的長度是400bp，而該病相關(guān)基因的特異性片段的長度是 400bp，顯然隱性致病基因沒有被切割，而顯性基因被切割成兩個(gè)200bp的片段，由此可知，I-1是顯性純合，I-2與I-3是顯性雜合，I-4是顯性純合，II-1是顯性純合，II-2與II-3是顯性雜合，Ⅲ-3是隱性純合。
【詳解】A、根據(jù)家系圖可知II-2、II-3表現(xiàn)型正常，但是他們的子女中有患者，由此判定該病為隱性遺傳病，Ⅲ-1是患者，其父親II-2表現(xiàn)型正常，由此可知該病為常染色體隱性遺傳病，通過凝膠電泳圖可知，PCR擴(kuò)增之后與該病相關(guān)基因的特異性片段的長度是400bp，而該病相關(guān)基因的特異性片段的長度是 400bp，顯然隱性致病基因沒有被切割，而顯性基因被切割成兩個(gè)200bp的片段，由此可知，I-1是顯性純合，I-2與I-3是顯性雜合，I-4是顯性純合，II-1是顯性純合，II-2與II-3是顯性雜合，Ⅲ-3是隱性純合，若用A、a基因表示該遺傳病，I-3基因型為Aa，I-4基因型為AA，則II-3的致病基因來自I-3，A正確；
B、因?yàn)橹虏』騊CR擴(kuò)增后的長度沒有變，說明限制性核酸內(nèi)切酶 HhaⅠ對(duì)其沒有切割位點(diǎn)，B正確；
C、結(jié)合A選項(xiàng)的分析可知，該病的致病基因在常染色體上，患者出現(xiàn)的概率在男女中是相等的，因此胎兒性別不會(huì)影響患病概率，C錯(cuò)誤；
D、結(jié)合A選項(xiàng)的分析可知，Ⅱ-2 與Ⅱ-3 的基因型都是Aa，他們?cè)偕齼蓚€(gè)孩子，題干提示非同卵雙胞胎，這兩個(gè)孩子都正常的概率是3/4×3/4=9/16，都患病的概率是 1/4×1/4=1/16，因此這兩個(gè)孩子有一個(gè)正常的概率是 1-9/16-1/16=3/8，D正確。
故選C。
二、非選擇題
26. 灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞具有耐鹽特性，普通高產(chǎn)大豆植物具有高產(chǎn)特性。下圖是科學(xué)家利用這兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交培育“耐鹽-高產(chǎn)大豆”新品種的過程，數(shù)字①-⑤為相關(guān)過程。請(qǐng)回答下列問題：

（1）愈傷組織是未分化的細(xì)胞，具有_____等特點(diǎn)（答出兩點(diǎn)）。
（2）圖中過程①使用了_____酶和_____酶去除細(xì)胞壁，獲得植物原生質(zhì)體。若過程②形成的細(xì)胞均為2個(gè)細(xì)胞融合而來，則經(jīng)過該過程后，產(chǎn)生的融合細(xì)胞最多有_____種。
（3）培養(yǎng)過程運(yùn)用了多種植物細(xì)胞工程技術(shù)，其中過程②③涉及_____技術(shù)，過程④⑤涉及_____技術(shù)。圖中試管苗的形成是愈傷組織經(jīng)過過程⑤_____實(shí)現(xiàn)的。
（4）科學(xué)家在甲瓶的培養(yǎng)基中加入了0．6%的NaCl，發(fā)現(xiàn)僅有部分細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織，未轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織的細(xì)胞是_____（填“灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞”“普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞”或“雜種細(xì)胞”）。
（5）除了上述辦法，還可以采用其他思路獲得“耐鹽-高產(chǎn)大豆”新品種，請(qǐng)簡(jiǎn)要列舉一種思路_____。
【答案】（1）無組織結(jié)構(gòu)##松散##薄壁##分裂快
（2） ①. 纖維素 ②. 果膠 ③. 3
（3） ①. 原生質(zhì)體融合##細(xì)胞融合 ②. 植物組織培養(yǎng) ③. 再分化
（4）普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞
（5）將耐鹽基因?qū)肫胀ǜ弋a(chǎn)大豆植物體內(nèi)進(jìn)行表達(dá)##將高產(chǎn)相關(guān)基因?qū)肽望}大豆植物體內(nèi)表達(dá)
【解析】
【分析】題圖分析：①表示去壁過程，常用酶解法；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，③表示雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁，④表示脫分化過程，⑤表示再分化過程。
【小問1詳解】
愈傷組織是未分化細(xì)胞，表現(xiàn)為分裂能力強(qiáng)，為高度液泡化的、無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞，也可描述為無組織結(jié)構(gòu)/松散/薄壁/分裂快。
【小問2詳解】
植物細(xì)胞壁的成分主要為纖維素和果膠，所以用纖維素酶和果膠酶去除植物的細(xì)胞壁，獲得植物的原生質(zhì)體。植物原生質(zhì)體間的融合，需要人工誘導(dǎo)，人工誘導(dǎo)的方法分為物理法和化學(xué)法，化學(xué)法一般用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑來誘導(dǎo)細(xì)胞融合；若過程②形成的細(xì)胞均為2個(gè)細(xì)胞融合而來，則兩種細(xì)胞的原生質(zhì)體融合時(shí)有可能是兩個(gè)灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞相互融合，也可能是兩個(gè)普通高產(chǎn)大豆相互融合，灘涂野耐鹽大豆細(xì)胞和普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞相互融合，所以有3種情況。
【小問3詳解】
培養(yǎng)過程運(yùn)用了多種植物細(xì)胞工程技術(shù)，其中過程②③涉及原生質(zhì)體融合/細(xì)胞融合技術(shù)，該過程依賴膜的流動(dòng)性實(shí)現(xiàn)，過程④⑤分別為脫分化和再分化過程，涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。圖中試管苗的形成是愈傷組織經(jīng)過過程⑤再分化實(shí)現(xiàn)，其本質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)。
【小問4詳解】
題中顯示，科學(xué)家在甲瓶的培養(yǎng)基中加入了0．6%的NaCl，發(fā)現(xiàn)只有具有耐鹽特性的細(xì)胞才能生存，而普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞不具有耐鹽特性，不能形成愈傷組織，即未轉(zhuǎn)變?yōu)橛鷤M織的細(xì)胞是普通高產(chǎn)大豆細(xì)胞。
【小問5詳解】
題中顯示，兩種大豆具有遠(yuǎn)緣雜交的障礙，故不能采用雜交的方案來進(jìn)行，故可采用基因工程育種的方式或多倍體育種的方式進(jìn)行，即提取普通高產(chǎn)大豆的高產(chǎn)基因，轉(zhuǎn)入灘涂野耐鹽大豆中培育“耐鹽—高產(chǎn)”大豆品種，為轉(zhuǎn)基因新品種，或提取灘涂野耐鹽大豆的耐鹽基因，轉(zhuǎn)入普通高產(chǎn)大豆；誘導(dǎo)灘涂野耐鹽大豆高產(chǎn)大豆雜交，而后對(duì)雜種植株進(jìn)行染色體數(shù)目加倍，形成多倍體。而后由不育變?yōu)榭捎N，這是多倍體育種方式。
27. 新型冠狀病毒抗原檢測(cè)試劑盒是相對(duì)比較簡(jiǎn)便、快速的檢測(cè)方法，抗原檢測(cè)試劑盒的生產(chǎn)依賴于新型冠狀病毒單克隆抗體的制備。制取新型冠狀病毒S蛋白的單克隆抗體部分過程如下圖所示，請(qǐng)回答下列問題：

（1）圖中操作a是指對(duì)小鼠注射_____，之后一般從該小鼠的_____中提取淋巴細(xì)胞，并在體外讓淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的特有方法是_____。
（2）誘導(dǎo)融合后至少要經(jīng)過兩次篩選，圖中的篩選1是指利用HAT選擇培養(yǎng)基將具有_____特點(diǎn)的_____細(xì)胞篩選出來；篩選2需要將細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，每個(gè)孔接種_____個(gè)細(xì)胞，取上清液作為待測(cè)樣本進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)，檢測(cè)原理如下圖所示：

加入酶標(biāo)抗體一段時(shí)間后，需要將未與_____結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗脫。據(jù)圖可知在抗體檢測(cè)中，雜交瘤細(xì)胞呈陽性的判斷依據(jù)為_____。
（3）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是_____（答出兩點(diǎn)）。利用篩選出的符合要求的細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體，既可以將細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)，也可以在體外生產(chǎn)，兩種方式相比，后者的優(yōu)點(diǎn)是_____。
【答案】（1） ①. 新冠病毒的S蛋白/抗原蛋白 ②. 脾臟 ③. 滅活的病毒
（2） ①. 既能產(chǎn)生抗體又能無限增殖 ②. 雜交瘤 ③. 1 ④. 抗S蛋白抗體 ⑤. 酶促反應(yīng)底物由無色變藍(lán)色
（3） ①. 純度高、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可大量制備等 ②. 可大量生產(chǎn)單克隆抗體，且純度高，容易提取
【解析】
【分析】單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【小問1詳解】
圖中a是注射特定抗原病毒S蛋白，小鼠產(chǎn)生分泌抗S蛋白的B細(xì)胞，該細(xì)胞主要分布在淋巴器官如脾臟中。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)。
【小問2詳解】
篩選1是用選擇培養(yǎng)基選擇出雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞是骨髓瘤細(xì)胞和B細(xì)胞融合形成的，能分泌抗體也能無限增殖。
篩選2是將產(chǎn)生抗S蛋白的雜交瘤細(xì)胞篩選出來，需要先進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，在每個(gè)孔接種1個(gè)細(xì)胞，讓其增殖，然后進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)。
檢測(cè)圖的原理是在測(cè)定時(shí)，受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體）與固相載體表面的抗原起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)藍(lán)色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。固相抗原上有S蛋白，待測(cè)樣本與S蛋白結(jié)合，進(jìn)行洗脫使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開，再用酶標(biāo)抗體結(jié)合到待測(cè)樣本上，需要將未與待測(cè)樣本即抗S蛋白抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗體洗脫，以免對(duì)下一步驟中的顯色反應(yīng)產(chǎn)生干擾。酶標(biāo)抗體能催化反應(yīng)底物由無色變?yōu)樗{(lán)色，若酶促反應(yīng)底物由無色變?yōu)樗{(lán)色，則說明待測(cè)樣本是抗S蛋白抗體。
【小問3詳解】
單克隆抗體是由產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)而來的，其優(yōu)點(diǎn)是純度高、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可大量制備等。既可以將細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行生產(chǎn)，也可以在體外生產(chǎn)，兩種方式相比，前者需從腹水中提取抗體，后者從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取抗體，后者的優(yōu)點(diǎn)是可大量生產(chǎn)單克隆抗體，且純度高，容易提取。
28. 19世紀(jì)末，巴斯德開創(chuàng)了第一次疫苗革命，其特點(diǎn)是接種滅活或減毒的病原微生物。20世紀(jì)70年代開始，現(xiàn)代生物技術(shù)的迅猛發(fā)展開創(chuàng)了第二次疫苗革命，使疫苗的研制進(jìn)入分子水平。圖1是通過基因工程制備乙型肝炎表面抗原（HbsAg）從而獲得乙肝疫苗的過程，數(shù)字①-⑦為相關(guān)步驟。

在圖1步驟①和③中，需要用合適的限制酶切割乙肝表面抗原基因和質(zhì)粒。乙肝表面抗原基因及質(zhì)粒的部分限制酶的識(shí)別序列及位置如圖2。啟動(dòng)子是質(zhì)粒中基因得以正常表達(dá)所必需的部分。LacZ基因控制合成某種酶，該酶能將無色染料X-gal變成藍(lán)色，最終能在含無色染料X-gal的培養(yǎng)基上將含該基因的菌落染成藍(lán)色。

（1）在圖1步驟④中，使用的基因工程工具酶是_____，將一個(gè)乙肝表面抗原基因與一個(gè)質(zhì)粒重組的過程中，游離的磷酸基團(tuán)數(shù)目減少_____個(gè)。
（2）根據(jù)圖2，為了避免自身環(huán)化及便于篩選，切割質(zhì)粒選用的限制酶是_____，獲得乙肝表面抗原基因選用的限制酶是_____。
（3）為篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細(xì)胞，需要將大腸桿菌接種到含_____的固體培養(yǎng)基上，挑選_____的菌落純化培養(yǎng)。
（4）若運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)乙肝表面抗原基因是否導(dǎo)入，需根據(jù)目的基因的序列設(shè)計(jì)_____，利用待檢DNA為模板進(jìn)行PCR。PCR過程包括多次循環(huán)，每個(gè)循環(huán)分為3個(gè)步驟：_____→_____→延伸。若基因?qū)氤晒CR過程中至少復(fù)制_____次可以得到兩條鏈等長的目的基因。
（5）利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗比滅活的乙肝病毒的疫苗安全性更_____，原因是_____。
【答案】（1） ①. DNA連接酶 ②. 4
（2） ①. BamHⅠ和HindⅢ ②. BclⅠ和HindⅢ
（3） ①. 氨芐青霉素和無色染料X-gal ②. 未被染上藍(lán)色的菌落/白色菌落
（4） ①. 引物 ②. 變性 ③. 退火##復(fù)性 ④. 3##三
（5） ①. 高 ②. 因?yàn)榛蚬こ躺a(chǎn)的乙肝疫苗成分中只含病毒蛋白，不含病毒核酸，不會(huì)出現(xiàn)病毒侵染的情況
【解析】
【分析】分析圖1：過程①為目的基因的獲??；過程②為提取質(zhì)粒；過程③為用限制酶切割質(zhì)粒；過程④為基因表達(dá)載體的構(gòu)建中的目的基因與質(zhì)粒的連接；過程⑤為將目的基因?qū)氪竽c桿菌（受體細(xì)胞）；過程⑥為大腸桿菌的增殖；過程⑦為目的基因的表達(dá)。
【小問1詳解】
圖1中過程④為基因表達(dá)載體的構(gòu)建中的目的基因與質(zhì)粒的連接，使用的基因工程工具酶是DNA連接酶，催化DNA分子片段中磷酸二酯鍵的形成；一個(gè)乙肝表面抗原基因（含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)）與一個(gè)質(zhì)粒（被切開的質(zhì)粒含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)）重組的過程中（圖1的步驟④），游離的磷酸基團(tuán)數(shù)目減少4個(gè)。
【小問2詳解】
目的基因中含有限制酶EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，因此不能用EcoRⅠ切割外源DNA分子，為了避免自身環(huán)化及便于篩選，切割乙肝表面抗原基因選用的限制酶是BclⅠ和HindⅢ。用限制酶BclⅠ切割質(zhì)粒會(huì)破壞啟動(dòng)子，因此切割質(zhì)粒選用的限制酶是BamHⅠ和HindⅢ（BclⅠ和BamHⅠ切割產(chǎn)生的黏性末端相同）。
【小問3詳解】
構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)使用了限制酶HindⅢ，導(dǎo)致lacZ基因被破壞（導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能合成某種酶，不能使無色染料X-gal變成藍(lán)色），但沒有破壞氨芐青霉素抗性基因（導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗氨芐青霉素）。為篩選含有乙肝表面抗原的大腸桿菌細(xì)胞，需要將導(dǎo)入操作之后的大腸桿菌接種到含氨芐青霉素和無色染料X-gal的培養(yǎng)基上，白色色大腸桿菌菌落（未被染上藍(lán)色的菌落）為所需菌種。
【小問4詳解】
若運(yùn)用PCR技術(shù)檢測(cè)乙肝表面抗原基因是否導(dǎo)入，需根據(jù)目的基因的序列設(shè)計(jì)引物，引物的作用是使得耐高溫的DNA聚合酶能夠從引物的3，端進(jìn)行子鏈的延伸；利用待檢DNA為模板進(jìn)行PCR。PCR過程包括多次循環(huán)，每個(gè)循環(huán)分為3個(gè)步驟：變性（高溫使得DNA解螺旋，DNA的兩條鏈作為模板）→退火／復(fù)性（便于引物與DNA模板單鏈結(jié)合）→延伸（合成新的子鏈）；從目標(biāo)DNA鏈中PCR出兩條鏈等長的目的基因需要進(jìn)行3次PCR循環(huán)（第一次循環(huán)擴(kuò)增出來的新片段很長很長；第二次循環(huán)以新的長片段為模板進(jìn)行，但新片段的一端是引物開頭的，所以第二個(gè)循環(huán)得到的片段就是我們需要的長度，但只是一條鏈，所以還不能分離出目的基因；第三次循環(huán)，當(dāng)以第二次循環(huán)得到的新片段為模板時(shí)，因?yàn)檫@個(gè)片段的長度就是需要擴(kuò)增的長度，當(dāng)?shù)谌窝h(huán)完成時(shí)，這個(gè)片段是需要的長度，且是雙鏈DNA，這就得到了需要的目的基因了）。
【小問5詳解】
結(jié)合題圖可知，利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗只含有蛋白質(zhì)成分，而滅活的乙肝病毒的疫苗含有蛋白質(zhì)和核酸，仍有可能出現(xiàn)病毒侵染的情況，故利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗比滅活的乙肝病毒的疫苗安全性更高，原因是基因工程生產(chǎn)的乙肝疫苗成分中只含病毒蛋白，不含病毒核酸，不會(huì)出現(xiàn)病毒侵染的情況。
29. 生姜梨酒是以梨、生姜為原料經(jīng)破碎、榨汁等處理后按照一定配比混合發(fā)酵而成的新型果酒。生姜梨酒既融合了梨生津、清熱、潤燥的功效，又融合了生姜驅(qū)寒、和胃、祛風(fēng)的功效，具有增強(qiáng)人體內(nèi)分泌、提高免疫功能、抗氧化等作用。為研究酵母菌菌種對(duì)生姜梨酒品質(zhì)的影響，利用篩選的A、B、C、D、E5種不同的酵母菌菌種及菌種的復(fù)配組合來發(fā)酵生姜梨酒，通過測(cè)定其酒精度、糖度、酸度等如圖所示的理化指標(biāo)，最終選出適合生姜梨酒發(fā)酵的最優(yōu)的酵母菌菌種及復(fù)配組合。請(qǐng)回答下列問題：

（1）酵母菌的代謝類型為_____。酵母菌接種到發(fā)酵罐前需對(duì)菌種進(jìn)行_____，以便縮短發(fā)酵時(shí)間。發(fā)酵初期可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)壓，原因是_____。
（2）為了釀造酒精度更高的生姜梨酒，需要在釀造時(shí)加入適量_____，但最終乙醇的濃度最高約到11．4%，原因是_____。
（3）影響生姜梨酒的風(fēng)味除了酵母菌菌種、溫度和pH值外，還包括_____、_____等因素。
（4）_____兩組復(fù)配發(fā)酵還原糖與其他酒樣存在差異性顯著，發(fā)酵不完全原因可能是_____。
（5）果酒中適當(dāng)?shù)乃岷坑欣诟纳凭企w顏色，增加酒體穩(wěn)定性，還可以起到_____作用。總酸較低，則酒體柔和、圓潤。要獲得酒味濃郁，酒體醇厚柔順的佳釀，應(yīng)選擇的復(fù)配組合是_____。
【答案】（1） ①. 異養(yǎng)兼性厭氧型 ②. 擴(kuò)大培養(yǎng) ③. 酵母菌需氧呼吸消耗了瓶中的O2且產(chǎn)生的CO2易溶于發(fā)酵液中
（2） ①. 蔗糖 ②. 酒精度過高抑制酵母菌發(fā)酵/使酵母菌死亡
（3） ①. 梨品種 ②. 釀造工藝/發(fā)酵時(shí)間/姜和梨比例/原料
（4） ①. B+A、B+D ②. 在相同的發(fā)酵條件下，A和B、B和D酵母在共同發(fā)酵過程中為生長競(jìng)爭(zhēng)性抑制，可能存在B的代謝物質(zhì)影響另一酵母對(duì)糖的轉(zhuǎn)化能力，降低A和D對(duì)糖的利用率，減緩發(fā)酵速率
（5） ①. 殺菌 ②. E+A
【解析】
【分析】酵母菌既可在有氧條件下生存，也可在無氧條件下生存，其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；果酒發(fā)酵的原理是酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖產(chǎn)生酒精（酵母菌的無氧呼吸）。
【小問1詳解】
酵母菌既可在有氧條件下生存，也可在無氧條件下生存，其代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型；酵母菌接種到發(fā)酵罐前需對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，增加菌種的數(shù)量，以便縮短發(fā)酵時(shí)間；由于酵母菌需氧呼吸消耗了瓶中的O2且產(chǎn)生的CO2易溶于發(fā)酵液中，在發(fā)酵初期可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)壓。
【小問2詳解】
為了釀造酒精度更高的生姜梨酒，需要在釀造時(shí)加入適量蔗糖（增加酵母菌發(fā)酵底物的量），但最終乙醇的濃度最高約到11.4%，原因是當(dāng)酒精度過高時(shí)，會(huì)抑制酵母菌的發(fā)酵或使酵母菌死亡。
【小問3詳解】
影響生姜梨酒的風(fēng)味除了酵母菌菌種、發(fā)酵溫度和pH值外，還包括梨的品種、釀造工藝、發(fā)酵時(shí)間、姜和梨比例、原料等因素。
【小問4詳解】
由圖2可知，B+A、B+D兩組復(fù)配發(fā)酵液中還原糖的含量明顯高于其他復(fù)配發(fā)酵酒樣中的還原糖，有可能是在相同的發(fā)酵條件下，A和B、B和D酵母在共同發(fā)酵過程中為生長競(jìng)爭(zhēng)性抑制，可能存在B的代謝物質(zhì)影響另一種酵母（A、D）對(duì)糖的轉(zhuǎn)化能力，降低了A和D對(duì)糖的利用率，減緩發(fā)酵的速率。
【小問5詳解】
果酒中適當(dāng)?shù)乃岷坑欣诟纳凭企w顏色，增加酒體穩(wěn)定性，還可以起到殺菌的作用；總酸較低，則酒體柔和、圓潤，由圖3可知，E+A組合的酒中總酸含量最低，故要獲得酒味濃郁，酒體醇厚柔順的佳釀，應(yīng)選擇的復(fù)配組合是E+A。

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