?合肥六中2021-2022學(xué)年第二學(xué)期高二年級期中考試
生物試卷
一、選擇題
1. 用白蘿卜制作泡菜的過程中，采用適當(dāng)?shù)姆椒煽s短腌制時間。下列方法中錯誤的是（　?。?br /> A. 將白蘿卜切成小塊
B. 向容器中通入無菌空氣
C. 添加已經(jīng)腌制過的泡菜汁
D. 注意保持適宜的發(fā)酵溫度
【答案】B
【解析】
【分析】1、泡菜腌制過程中起作用的主要是假絲酵母和乳酸菌，在無氧條件下乳酸菌無氧呼吸產(chǎn)生乳酸。
2、泡菜的制作流程是：選擇和處理原料、洗凈泡菜壇、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵。
【詳解】A、將白蘿卜切成小塊可以擴大白蘿卜與腌料的接觸面積，縮短腌制時間，A正確；
B、泡菜制作所需菌種為乳酸菌，制作過程中應(yīng)保持無氧環(huán)境，向容器中通入無菌空氣不利于腌制，B錯誤；
C、泡菜汁中含有一定量的發(fā)酵菌種，所以在腌制過程中，加入一些已經(jīng)腌制過的泡菜汁可縮短腌制時間，C正確；
D、乳酸菌中的酶發(fā)揮作用需要適宜的溫度，故保持適宜的發(fā)酵溫度，有利于乳酸菌的無氧呼吸，可縮短腌制時間，D正確。
故選B。
2. 發(fā)酵產(chǎn)品是中國傳統(tǒng)食品中一個重要的類別，承載了中華民族悠久的歷史和豐富的文化內(nèi)涵。下列有關(guān)敘述正確的是（　?。?br /> A. 泡菜制作過程中，需要警惕亞硝酸鹽含量過高
B. 利用簡易裝置制作酸奶的發(fā)酵過程中，無需適時打開瓶蓋放出氣體
C. 檢測果酒發(fā)酵前后發(fā)酵液的溫度變化，可作為果酒制作是否成功的依據(jù)
D. 果醋制作中醋酸菌的碳源和能源，都只來自于果酒發(fā)酵產(chǎn)生的酒精
【答案】B
【解析】
【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理： (1) 在有氧條件下，酵母菌進行 有氧呼吸大量繁殖；(2) 在無氧條件下，酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。
2、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
3、果醋制作過程中的菌種是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，在氧氣、糖源充足時，醋酸菌能將糖分解成醋酸，糖源不足時可以將乙醇轉(zhuǎn)化成乙醛再轉(zhuǎn)化成醋酸，最適宜醋酸菌生長繁殖的溫度是30~ 35℃。
【詳解】A、隨著泡菜腌制時間的延長，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸增多，亞硝鹽的含量會降低，不需要警惕亞硝酸鹽含量過高，A錯誤；
B、酸奶發(fā)酵的原理是乳酸菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，因為乳酸菌無氧呼吸只能產(chǎn)生乳酸，不會產(chǎn)生氣體，因此利用簡易裝置制作酸奶的保溫發(fā)酵過程中，無需適時打開瓶蓋放出氣體，B正確；
C、酵母菌細胞呼吸會釋放能量，其中大部分能量以熱能形式散失，這會導(dǎo)致發(fā)酵液的溫度發(fā)生變化，但這不可作為果酒制作是否成功的依據(jù)，C錯誤；
D、果醋制作中醋酸菌的碳源和能源，可以是來自于果酒發(fā)酵產(chǎn)生的酒精，也可以來自葡萄糖，D錯誤。
故選B。
3. 下圖為某同學(xué)設(shè)計的釀制蘋果醋的基本流程圖和發(fā)酵裝置示意圖。相關(guān)敘述錯誤的是（　?。?br />
A. ①過程要先清洗再切塊以減少雜菌的污染
B. ②過程加入果膠酶可以充分破壞細胞壁以提高出汁率
C. ③過程發(fā)酵所用的醋酸菌無具膜結(jié)構(gòu)的細胞器
D. ④過程需要將圖2發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)打開
【答案】C
【解析】
【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。
2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br /> 【詳解】A、過程①如果先切塊，則內(nèi)部組織容易被雜菌污染，故應(yīng)先清洗后切塊，A正確；
B、細胞壁的成分主要是纖維素和果膠，可以在過程②過濾之前用纖維素酶和果膠酶破壞細胞壁，提高蘋果的出汁率，B正確；
C、③過程發(fā)酵屬于酒精發(fā)酵，需要的菌種為酵母菌，酵母菌屬于真核細胞，存在具膜結(jié)構(gòu)的細胞器，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體等，C錯誤；
D、④過程為醋酸發(fā)酵，所需要的菌種為醋酸菌，為需氧菌，故需要將發(fā)酵裝置中的充氣口開關(guān)打開，D正確。
故選C。
4. 下列有關(guān)實驗的操作中，錯誤的是（ ）
①煮沸消毒可以殺死微生物的營養(yǎng)細胞和部分芽孢
②接種操作要在酒精燈火焰附近進行
③對于不耐高溫的液體，如牛奶，用巴氏消毒法消毒
④家庭制作葡萄酒時要將容器和葡萄進行滅菌
⑤培養(yǎng)基要進行高壓蒸汽滅菌
⑥加入培養(yǎng)基中的指示劑和染料不需要滅菌
⑦接種環(huán)應(yīng)采用火焰灼燒的方式滅菌
A. ①③ B. ②④ C. ⑤⑦ D. ④⑥
【答案】D
【解析】
【分析】使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌，常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。
【詳解】①100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細胞和一部分芽孢，①正確；
②酒精燈火焰附近存在一個無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰附近進行，②正確；
③對牛奶這種不耐高溫的液體可用巴氏消毒法消毒，③正確；
④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附著于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒時葡萄不進行滅菌，以免殺死酵母菌，④錯誤；
⑤培養(yǎng)基通常用高壓蒸汽滅菌的方法進行滅菌，⑤正確；
⑥指示劑和染料混有微生物，故加入培養(yǎng)基前需滅菌，⑥錯誤；
⑦接種環(huán)應(yīng)采用火焰灼燒的方式滅菌，即用灼燒滅菌法進行滅菌，⑦正確。
故選D。
5. 解磷菌是土壤中的一類功能微生物，包括細菌、真菌和放線菌。篩選出土壤中的高效解磷菌并制成生物菌劑，可以提高難溶性磷的利用率。下表為“分離出土壤中具有解磷功能的微生物實驗”的培養(yǎng)基配方，下列說法正確的是（　　）
物質(zhì)
葡萄糖
(NH4)2SO4
NaCl
KCl
CaCO3
磷酸三鈣
瓊脂
質(zhì)量/g
10
0.5
3
0.3
5
20
15

A. 培養(yǎng)基中加入瓊脂的目的是作為凝固劑和提供碳源
B. 該培養(yǎng)基是以磷酸三鈣為唯一磷源的選擇培養(yǎng)基
C. 用平板劃線法純化解磷菌可以計數(shù)其活菌的數(shù)量
D. 可根據(jù)培養(yǎng)基中透明圈的大小確定菌株的解磷能力
【答案】B
【解析】
【分析】1、微生物常見的接種的方法：（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。
2、選擇培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌，從而提高該菌的篩選率，如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌。
【詳解】A、配制固體培養(yǎng)基時可加入瓊脂作為凝固劑，瓊脂一般不會被微生物所利用，A錯誤；
B、本實驗的目的是獲得具有解磷功能的微生物，故其選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以磷酸三鈣為唯一磷源，B正確；
C、用稀釋涂布平板法純化解磷菌可以計數(shù)其活菌的數(shù)量，C錯誤；
D、可根據(jù)透明圈直徑（D）與菌落直徑（d）的比值（D/d）代表微生物解磷能力大小，D錯誤。
故選B。
6. 制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程中，關(guān)于倒平板的描述正確的是（　?。?br /> ①等培養(yǎng)基冷卻至40℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板
②將滅過菌的培養(yǎng)皿放在酒精燈旁的桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰
④用左手的拇指和食指打開皿蓋
⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上皿蓋
⑥等待平板冷卻?5～10s，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上
A. ①②③④ B. ②③⑤
C. ④⑤⑥ D. ①②④⑥
【答案】B
【解析】
【分析】倒平板操作的步驟：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰；用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋；等待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上，這樣可以防止皿蓋上的水分滴到培養(yǎng)基上造成培養(yǎng)基的污染。
【詳解】①等培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，防止雜菌污染，①錯誤；
②將滅過菌的培養(yǎng)皿放在酒精燈旁的桌面上，左手拔出棉塞，可防止雜菌污染，②正確；
③右手拿錐形瓶，使瓶口迅速通過火焰，高溫可防止雜菌污染，③正確；
④用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不能打開皿蓋，④錯誤；
⑤右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上皿蓋，并通過酒精燈火焰，⑤正確；
⑥等待平板冷卻5～10分鐘，將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，⑥錯誤。
故選B。
【點睛】
7. 下圖表示小明同學(xué)在實驗室培養(yǎng)大腸桿菌過程中的部分操作，下列說法錯誤的是（　?。?br />
A. ①②③步驟需要在酒精火焰旁操作
B. 培養(yǎng)基中必須含碳源、氮源、無機鹽和水
C. ③步驟中從一次劃線末端迅速開始下一次劃線
D. 接種結(jié)束后，將④倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
【答案】C
【解析】
【分析】由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進行平板劃線，④是培養(yǎng)。
【詳解】A、由分析可知，①②③步驟依次表示倒平板、用接種環(huán)沾取菌液、進行平板劃線，了防止被雜菌污染，操作時都需要在酒精燈火焰旁進行，A正確；
B、不同的微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需求存在差異，但水、碳源、氮源和無機鹽是各種微生物所需的基本營養(yǎng)，所以培養(yǎng)基中必須含碳源、氮源、無機鹽和水，B正確；
C、每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的未端，從而通過多方向劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落，故③步驟中一次劃線結(jié)束需要先灼燒接種環(huán)再開始下一次劃線，C錯誤；
D、④是培養(yǎng)，劃線接種結(jié)束后，要將平板倒置后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，防止皿蓋上水珠落入培養(yǎng)基造成污染，D正確。
故選C。
8. 下列有關(guān)土壤中分解尿素的細菌的分離，說法正確的是（　　）
A. 以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基平板上也可以分離出根瘤菌
B. 篩選分解尿素的細菌時，培養(yǎng)基中唯一的營養(yǎng)物質(zhì)是尿素
C. 需對土樣進行充分稀釋再用稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基上
D. 脲酶需要經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工后才具有生物學(xué)活性
【答案】C
【解析】
【分析】培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基中的唯一氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。
【詳解】A、以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基平板只能獲得分解尿素的微生物，而根瘤菌是共生固氮菌，所以該培養(yǎng)基上不可以分離出根瘤菌，A錯誤；
B、篩選分解尿素的細菌時，培養(yǎng)基中唯一的氮源是尿素，但培養(yǎng)基中還含有其他營養(yǎng)物質(zhì)，如水和無機鹽，B錯誤；
C、稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面，故需對土樣進行充分稀釋再用稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基上，進行培養(yǎng)，C正確；
D、分解尿素細菌屬于原核生物，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，D錯誤。
故選C。
9. 我國是名副其實的發(fā)酵大國，發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)院工業(yè)及農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列相關(guān)敘述錯誤的是（　?。?br /> A. 利用極端條件下的微生物如嗜熱菌、嗜鹽菌生產(chǎn)洗滌劑
B. 利用黑曲霉發(fā)酵制得檸檬酸作為食品酸度調(diào)節(jié)劑使用
C. 將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再通過發(fā)酵可生產(chǎn)乙型肝炎疫苗
D. 利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥，作為化學(xué)防治的重要手段，可用于防治病蟲害
【答案】D
【解析】
【分析】發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配置、滅菌、種子擴大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。
【詳解】A、極端微生物能在各種極端惡劣的環(huán)境中正常生活，利用極端條件下的微生物如嗜熱菌、嗜鹽菌可以生產(chǎn)洗滌劑，A正確；
B、生產(chǎn)食品酸度調(diào)節(jié)劑，如檸檬酸可以通過黑曲霉的發(fā)酵制得，B正確；
C、可以通過基因工程，將乙肝病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌，再通過發(fā)酵工程制備乙肝疫苗，C正確；
D、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段，將在農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展方面發(fā)揮越來越 重要的作用，D錯誤。
故選D。
10. 發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品。常用好氧菌谷氨酸棒狀桿菌利用圖1的發(fā)酵罐來大量生產(chǎn)味精，發(fā)酵流程如圖2所示。下列敘述正確的是（　?。?br />
A. 發(fā)酵中所使用的谷氨酸棒狀桿菌菌種可從自然界篩選也可通過雜交育種獲得
B. 為了保證發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)，圖中發(fā)酵配料及發(fā)酵罐需經(jīng)過嚴格的滅菌
C. 在發(fā)酵過程中，通過加料口取樣，隨時監(jiān)測產(chǎn)物濃度和微生物數(shù)量
D. 發(fā)酵過程中需通入無菌空氣，并通過攪拌使培養(yǎng)液與菌種充分接觸后關(guān)閉通氣口
【答案】B
【解析】
【分析】發(fā)酵工程，是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。
【詳解】A、谷氨酸棒狀桿菌屬于原核生物，其繁殖方式是無性生殖，不能進行有性生殖，無法通過雜交育種獲得，A錯誤；
B、無菌技術(shù)是微生物發(fā)酵成功的關(guān)鍵，為了保證發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和品質(zhì)，圖中發(fā)酵配料及發(fā)酵罐需經(jīng)過嚴格的滅菌，防止雜菌污染，B正確；
C、在發(fā)酵過程中，應(yīng)通過放料口取樣，隨時監(jiān)測產(chǎn)物濃度和微生物數(shù)量，不能通過加料口取樣，可能會導(dǎo)致雜菌污染，C錯誤；
D、谷氨酸棒狀桿菌屬于好氧菌，在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣，不能關(guān)閉通氣口，D錯誤。
故選B。
11. 植物組織培養(yǎng)是依據(jù)細胞的全能性，在體外將植物組織細胞培養(yǎng)成一個完整植株的過程。如圖所示，下列相關(guān)敘述錯誤的是（　　）

A. 甲和丙分別是脫分化和再分化
B. 乙是愈傷組織，是離體的植物組織經(jīng)過細胞增殖與分化形成的
C. 離體的植物細胞之所以能培養(yǎng)成完整植株，是因為植物細胞具有全能性
D. 丙過程的實質(zhì)是基因的選擇性表達
【答案】B
【解析】
【分析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)：過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。原理：植物細胞的全能性。條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。植物細胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。題圖分析，圖中甲為脫分化過程，乙為愈傷組織，丙為再分化過程。
【詳解】A、植物組織培養(yǎng)的過程包括脫分化和再分化，分別是圖中的甲和丙，A正確；
B、乙是愈傷組織，外植體經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織，脫分化過程只進行細胞增殖不進行細胞分化，B錯誤；
C、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞具有全能性，故離體的植物細胞之所以能培養(yǎng)成完整植株，是因為植物細胞具有全能性，C正確；
D、丙過程為愈傷組織的再分化，該過程的實質(zhì)是基因的選擇性表達，D正確。
故選B。
12. 科學(xué)家將天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進行誘導(dǎo)融合，培育出的驅(qū)蚊香草能散發(fā)出特殊氣味，從而達到驅(qū)蚊的效果。下列關(guān)于驅(qū)蚊香草培育的敘述，錯誤的（　?。?br /> A. 驅(qū)蚊香草的培育屬于細胞工程育種，關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是原生質(zhì)體間的融合
B. 驅(qū)蚊香草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、聚乙二醇等試劑或電融合法等方法
C. 驅(qū)蚊香草培育過程有愈傷組織和試管苗的形成，只利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)
D. 驅(qū)蚊香草不能通過天竺葵和香茅草有性雜交獲得是因為不同物種間存在生殖隔離
【答案】C
【解析】
【分析】根據(jù)題干信息分析，驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進行誘導(dǎo)融合培育而成的，利用的是植物體細胞雜交技術(shù)，該技術(shù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性，該技術(shù)最大的優(yōu)點是克服遠緣雜交不親和障礙。
【詳解】A、驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進行誘導(dǎo)融合培育而成的，采用了植物體細胞雜交技術(shù)，屬于細胞工程育種，關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一是原生質(zhì)體間的融合，A正確；
B、驅(qū)蚊草的培育過程中首先要用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁獲得原生質(zhì)體，誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（用聚乙二醇即PEG等試劑）或物理法（離心法、電融合法等），B正確；
C、驅(qū)蚊香草培育過程采用了植物體細胞雜交技術(shù)和植物組織培養(yǎng)技術(shù)，C錯誤；
D、不同物種間存在生殖隔離，故驅(qū)蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得，D正確。
故選C。

13. 用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖一種名貴花卉的過程中，下列敘述不正確的是（ ）
A. 消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害
B. 在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細胞
C. 用花粉離體培養(yǎng)可獲得單倍體植株，說明花粉細胞仍具有全能性
D. 誘導(dǎo)愈傷組織生根時，培養(yǎng)基內(nèi)通常應(yīng)含生長素類調(diào)節(jié)劑
【答案】B
【解析】
【詳解】外植體消毒既要殺死材料表面的微生物，消毒劑還不能對細胞有傷害，A正確。在愈傷組織培養(yǎng)中進入細胞融合的誘導(dǎo)劑，因為愈傷組織有細胞壁，細胞不能融合，所以無法得到染色體加倍的細胞，B錯誤。用花粉離體培養(yǎng)可以得到單倍體植株，說明花粉細胞具有全能性，C正確。誘導(dǎo)愈傷組織生根時，培養(yǎng)基中生長素類應(yīng)高于細胞分裂素類含量，D正確。
點睛：植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例都會影響細胞的發(fā)育方向。如生長素用量比細胞分裂素用量比值高時，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低時，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值適中時，促進愈傷組織的形成。
14. 對皮膚燒傷進行治療時，可選取燒傷患者的自身細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)獲得自體健康皮膚，再通過皮膚移植術(shù)對患者進行治療。下列說法錯誤的是（　?。?br /> A. 進行原代培養(yǎng)前，選取的組織需經(jīng)胰蛋白酶等處理成單個細胞后制成細胞懸液
B. 在體外培養(yǎng)細胞時，需要對培養(yǎng)液和用具進行滅菌處理，并且定期更換培養(yǎng)液
C. 細胞培養(yǎng)于含有95%的O2和5%的CO2的混合氣體中，以維持培養(yǎng)液的pH
D. 進行傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細胞可直接用離心法收集后分瓶培養(yǎng)
【答案】C
【解析】
【分析】動物細胞的培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。（2）營養(yǎng)：成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基）。（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。O2是細胞代謝所必需的；CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
【詳解】A、進行原代培養(yǎng)前，選取的組織需經(jīng)胰蛋白酶等處理成單個細胞后制成細胞懸液，A正確；
B、在體外培養(yǎng)細胞時，需要對培養(yǎng)液和用具進行滅菌處理，防止雜菌污染，并且定期更換培養(yǎng)液，補充營養(yǎng)物質(zhì)，B正確；
C、動物細胞培養(yǎng)所需的氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，因此細胞培養(yǎng)過程需要提供含有95%空氣和5%CO2的混合氣體，以維持培養(yǎng)液的pH，C錯誤；
D、進行傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細胞可直接用離心法收集后制成細胞懸液，然后分瓶培養(yǎng)，D正確。
故選C。
15. 下列對動物細胞核移植技術(shù)的描述中，錯誤的是（　?。?br /> A. 胚胎細胞核移植技術(shù)難度要明顯高于體細胞核移植技術(shù)
B. 核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的核
C. 核移植過程中通常采用MⅡ的卵母細胞作為受體細胞
D. 核移植技術(shù)培育的克隆動物并不是對供核動物進行100%的復(fù)制
【答案】A
【解析】
【分析】動物核移植是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎。這個新的胚胎最終發(fā)育為動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。
【詳解】A、哺乳動物核移植包括胚胎細胞核移植和體細胞核移植，由于動物胚胎細胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，而動物體細胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，因此，動物體細胞核移植的難度也就明顯高于胚胎細胞核移植，且胚胎細胞核移植成功率更高，A錯誤；
B、核移植的過程中可通過顯微操作去除卵母細胞中的細胞核，同時也可一起吸出第一極體，B正確；
C、體細胞核移植中，作為受體細胞的卵母細胞要在體外培養(yǎng)到MⅡ的中期，且卵母細胞中含有使全能性表達的物質(zhì)，C正確；
D、通過體細胞核移植方法生產(chǎn)的重組細胞中，其核遺傳物質(zhì)來自于供體細胞核，細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自于受體細胞的細胞質(zhì)，所以不是對供核動物進行了100%的復(fù)制，D正確。
故選A。
16. 雙特異性單克隆抗體是指可同時與癌細胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。下圖是科學(xué)家設(shè)計的生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物）的雙特異性單克隆抗體的部分過程。相關(guān)敘述不正確的是（　?。?br />

A. 單克隆抗體的制備需要用到動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)
B. 該過程僅需兩次篩選，即可篩選出單克隆雜交—雜交瘤細胞
C. 過程⑤的目的與過程①的目的都是獲得相應(yīng)的B淋巴細胞
D. 通過該技術(shù)合成的雙特異性單克隆抗體的靈敏度更高
【答案】B
【解析】
【分析】
單克隆抗體的制備過程的細節(jié)：（1）二次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。（2）細胞來源：B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖。（3）雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。（4）提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取。
【詳解】A、制備單克隆抗體過程中需用到動物細胞融合（骨髓瘤細胞和B淋巴細胞）和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)，A正確；
B、在單克隆抗體的制備過程中需兩類篩選，第一類篩選③是選出出雜交瘤細胞，第二類篩選⑥是選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞群，其中⑥需要多次進行篩選，故該過程中的篩選次數(shù)＞2次，B錯誤；
C、過程⑤的與過程①均是對小鼠注射特定抗原，目的都是獲得相應(yīng)的B淋巴細胞，C正確；
D、該雙特異性單克隆抗體能同時識別癌胚抗原和長春堿（一種抗癌藥物），故通過該技術(shù)合成的雙特異性單克隆抗體的靈敏度更高，D正確。
故選B。
17. 物理學(xué)家霍金曾經(jīng)患有肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”。有研究表明該病是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的流動；也有最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多功能干細胞（IPS細胞）制作前驅(qū)細胞，然后移植給漸凍癥實驗鼠，能延長其壽命。下列相關(guān)描述錯誤的是（ ）
A. 誘導(dǎo)多功能干細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達，使細胞種類增多
B. 誘導(dǎo)多功能干細胞分化成的多種細胞中核酸相同，蛋白質(zhì)卻不完全相同
C. 用正常基因?qū)⒖刂坪铣啥镜鞍谆蛱鎿Q，可以起到良好治療作用
D. 植入神經(jīng)干細胞，使受損的運動功能得到恢復(fù)，可以一定程度改善“漸凍癥”
【答案】B
【解析】
【分析】1、核酸包括DNA和RNA，DNA基本組成單位是脫氧核苷酸，RNA的基本組成單位是核糖核苷酸。
2、在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程，叫細胞分化。
【詳解】A、細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達，這會導(dǎo)致細胞種類的增多，A正確；
B、核酸分為兩種，DNA和RNA，誘導(dǎo)多功能干細胞分化成的多種細胞中DNA相同，mRNA和蛋白質(zhì)不完全相同，B錯誤；
C、由題意“該病是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的流動”可知，用正常基因?qū)⒖刂坪铣啥镜鞍椎幕蛱鎿Q，可能起到良好治療作用，C正確；
D、由題意“利用誘導(dǎo)多功能干細胞（IPS細胞）制作前驅(qū)細胞，然后移植給漸凍癥實驗鼠，能延長其壽命”可知，植入神經(jīng)干細胞，使受損的運動功能得到恢復(fù)，可以在一定程度改善“漸凍癥”，D正確。
故選B。
18. 小鼠克隆胚胎著床后胎盤發(fā)育顯著異?？赡苁桥c克隆胚胎中H3K27me3印記基因過度表達有關(guān)，H3K27me3印記基因敲除極大提高了體細胞克隆的成功率，H3K27me3印記基因敲除的實驗組克隆小鼠的體重與受精卵來源的小鼠一致，而對照組克隆小鼠的體重顯著髙于受精卵來源的小鼠：實驗組克隆小鼠的胎盤直徑和重量也顯著低于對照組克隆小鼠，而與受精卵來源的小鼠一致。下列相關(guān)分析錯誤的是（ ）
A. 克隆胚胎過大可能是克隆胚胎著床后成活率低的原因
B. 克隆胚胎過大的原因可能是克隆胚胎的胎盤過大
C. H3K27me3印記基因過度表達抑制胎盤的發(fā)育
D. H3K27me3印記基因的表達產(chǎn)物可能影響早期胚胎滋養(yǎng)層細細胞發(fā)育
【答案】C
【解析】
【分析】1、生物體通過無性繁殖所生成的群體或個體稱為克隆，由動物體內(nèi)一個細胞經(jīng)過無性生殖過程進而發(fā)育形成的動物個體為克隆動物。體細胞克隆即取出一個雙倍體細胞核移入一個去核的卵細胞，并在一定條件下進行核卵重組，再植入代孕母體中發(fā)育成新個體的過程。供體細胞均來自高度分化的體細胞，其種類繁多、數(shù)量無限。
2、H3K27me3印記基因敲除極大提高了克隆的成功率，H3K27me3印記基因敲除的實驗組克隆小鼠的體重與受精卵來源的小鼠一致，顯著低于對照組克隆小鼠的體重，說明克隆胚胎過大可能降低克隆胚胎著床后成活率。
【詳解】A、通過分析可知，克隆小鼠的體重顯著高于受精卵來源的小鼠，故克隆胚胎過大可能是克隆胚胎著床后成活率低的原因，A 正確；
B、實驗組克隆小鼠的胎盤直徑和重量顯著低于對照組克隆小鼠，而與受精卵來源的小鼠一致，說明克隆胚胎過大的原因可能是克隆胚胎的胎盤過大，B 正確；
C、H3K27me3 印記基因敲除的實驗組，克隆小鼠的胎盤直徑和重量顯著低于對照組克隆小鼠，而與受精卵來源的小鼠一致，說明 HBK27me3印記基因可促進胎盤的發(fā)育，C錯誤；
D、H3K27me3印記基因可影響胎盤的發(fā)育，而胎盤是由滋養(yǎng)層細胞發(fā)育而來的，故其表達產(chǎn)物可能影響早期胚胎滋養(yǎng)層細胞的發(fā)育，D正確。
故選C。
19. 印度沙漠貓是一種珍稀貓科動物，通過胚胎工程技術(shù)，可以讓家貓代孕而繁育，主要步驟如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（　?。?br />
A. 為避免代孕貓對植入胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑
B. 為了獲得更多的卵母細胞，需用促性腺激素對雌性印度沙漠貓進行處理
C. 采集到的卵母細胞和精子，要經(jīng)過成熟培養(yǎng)和獲能處理后才能受精
D. 如需對早期胚胎進行胚胎分割處理，應(yīng)選擇桑椹胚或囊胚
【答案】A
【解析】
【分析】1、胚胎移植的生理基礎(chǔ)：（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對外來胚胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。
2、進行胚胎分割時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚；對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。
【詳解】A、代孕貓一般不會對植入胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)，不需要注射免疫抑制劑，A錯誤；
B、用促性腺激素對雌性印度沙漠貓進行處理，可促其超數(shù)排卵，獲得更多的卵母細胞，B正確；
C、步驟甲為體外受精，體外受精時對精子要進行獲能處理，卵母細胞也需要培養(yǎng)至減Ⅱ中期才能進行受精作用，C正確；
D、進行胚胎分割時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，對囊胚階段的胚胎進行分割時，還要注意將內(nèi)細胞團均等分割，D正確。
故選A。
20. 動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③分別表示其對應(yīng)的結(jié)果，請據(jù)圖判斷下面說法正確的是（　?。?br />
A. 若a是胚胎分割技術(shù)，則①中個體的表現(xiàn)型完全相同
B. 若b是體外受精技術(shù)，則形成②的過程屬于克隆
C. 若c是核移植技術(shù)，則形成③的過程體現(xiàn)了動物體細胞具有全能性
D. 胚胎移植過程中，需要對代孕母畜和供體母畜做同期發(fā)情處理
【答案】D
【解析】
【分析】1、動物細胞核移植技術(shù)表面動物細胞核具有全能性。
2、體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細胞的采集和培養(yǎng)、體外受精，該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物，屬于有性生殖。
3、胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一。
4、表現(xiàn)型=基因型+外界環(huán)境。
【詳解】A、表現(xiàn)型=基因型+外界環(huán)境，故同一個胚胎分割形成的后代即使具有相同的遺傳物質(zhì)，但表現(xiàn)型不一定相同，A錯誤；
B、若b是體外受精技術(shù)，則②為試管動物，形成②的過程屬于有性生殖，不屬于克隆，B錯誤；
C、若c是體細胞核移植技術(shù)，則③反映了動物體細胞的細胞核具有全能性，沒有體現(xiàn)動物體細胞具有全能性，C錯誤；
D、①②③胚胎移植生產(chǎn)過程中的代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情，保證胚胎植入相同的生理環(huán)境，D正確。
故選D。
21. 將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接，構(gòu)建 L1-GFP 融合基因，再將融合基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建下圖所示的表達載體。圖中限制酶 E1～E4 處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同。下列敘述錯誤的是（　　）

A. 構(gòu)建L1-GFP融合基因需要用到的限制酶有E1、E2、E4
B. E1、E4 雙酶切可確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接
C. GFP可用于檢測受體細胞中目的基因是否表達
D. 啟動子和終止子是DNA聚合酶識別和結(jié)合部位
【答案】D
【解析】
【分析】限制酶的選擇依據(jù)：
（1）根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點確定限制酶的種類：①應(yīng)選擇位于目的基因兩端的限制酶；②不能選擇目的基因內(nèi)部的限制酶。
（2）根據(jù)質(zhì)粒的特點確定限制酶的種類：①通常選擇與切割目的基因相同的限制酶，以確保出現(xiàn)相同的黏性末端；②在只有一種標記基因時，選擇的限制酶不能破壞標記基因。
【詳解】A、構(gòu)建L1-GFP融合基因需要先用內(nèi)切酶處理獲得L1基因和GFP基因，并將二者連接，故需要用到E1、E2、E4三種酶，A正確；
B、圖中限制酶E1—E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同，E1、E4雙酶切可以有效減少載體自身連接和融合基因自身連接，保證L1-GFP融合基因與載體準確連接，B正確；
C、綠色熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達，C正確；
D、啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能啟動轉(zhuǎn)錄過程，終止子也不是DNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，其具有終止轉(zhuǎn)錄過程的作用，D錯誤。
故選D。
22. 動物生物反應(yīng)器和研究開發(fā)重點是動物乳腺反應(yīng)器，可把人體相關(guān)基因?qū)氲讲溉閯游锏穆鸭毎?，使生出的轉(zhuǎn)基因動物長大后產(chǎn)生的乳汁中含有人類所需要的不同蛋白質(zhì)。培育作為“生物反應(yīng)器”的動物涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有（　?。?br /> ①基因工程　???②體外受精　???③胚胎移植　???④早期胚胎培養(yǎng)
A. ①②③④ B. ②③④
C. ①③④ D. ②③
【答案】A
【解析】
【分析】培育作為“動物生物反應(yīng)器”的動物需要的技術(shù)流程為，首先將所需要的不同蛋白質(zhì)的相關(guān)基因通過基因工程技術(shù)導(dǎo)入到哺乳動物的卵細胞中，形成受精卵，該受精卵可通過體外受精獲得，而后將轉(zhuǎn)基因成功的受精卵經(jīng)早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，培育出能生產(chǎn)所需要的不同蛋白質(zhì)的動物，該動物稱為生物反應(yīng)器。
【詳解】①依題意可知：利用“動物生物反應(yīng)器”獲得人類所需要的不同蛋白質(zhì)，需要根據(jù)人們的意愿定向改造生物的性狀，因而需要用到基因工程技術(shù)，①正確；
②在基因工程技術(shù)中，獲得的重組DNA需要用顯微注射技術(shù)導(dǎo)入到哺乳動物的卵細胞中，再形成受精卵，而受精卵的獲得離不開體外受精，②正確；
③當(dāng)胚胎發(fā)育到一定階段，需進行胚胎移植才能獲得具有“動物生物反應(yīng)器”的動物，③正確。
④含有目的基因的受精卵，需用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)（或早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)）進行培養(yǎng)，使之發(fā)育為早期胚胎，④正確。
綜上分析，A符合題意。
故選A。
23. 在基因工程操作中，科研人員利用識別兩種不同序列的限制酶（R1和R2）處理基因載體，進行聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖所示。以下相關(guān)敘述中，不正確的是（ ）

A. 該載體最可能為環(huán)形DNA分子
B. 兩種限制酶在載體上各有一個酶切位點
C. 限制酶R1與R2的切割位點最短相距200bp
D. 限制酶作用與該載體會導(dǎo)致氫鍵和肽鍵斷裂
【答案】D
【解析】
【分析】限制酶可識別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的核苷酸之間切開磷酸二酯鍵，產(chǎn)生具有黏性末端或平末端的DNA片段。據(jù)圖可知，當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時，僅產(chǎn)生一種長度的DNA片段，兩種限制酶同時切割時產(chǎn)生兩種長度的DNA片段。
【詳解】A、由題可知，當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時，僅產(chǎn)生一種長度的DNA片段，因此該載體最有可能為環(huán)狀DNA分子，A正確；
B、由題可知，當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時，兩種限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段等長，而兩種限制酶同時切割時則產(chǎn)生兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶在載體上各有一個酶切位點，B正確；
C、由題可知，兩種限制酶同時切割時則產(chǎn)生600 bp和200 bp兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶的酶切位點至少相距200 bp，C正確；
D、限制酶切割DNA分子，破壞的是作用位點上兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。
故選D。
24. 關(guān)于基因工程，下列說法正確的有（　?。?br /> ①一種限制酶只能識別一種核苷酸序列
②基因工程是在DNA分子水平上進行的設(shè)計和施工
③限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列
④只要目的基因進入受體細胞就能成功實現(xiàn)表達
⑤基因工程可以將一種生物的優(yōu)良性狀移植到另一種生物身上
⑥質(zhì)粒是基因工程中唯一用作運載目的基因的載體
A. 2項 B. 3項
C. 4項 D. 5項
【答案】B
【解析】
【分析】1、基因工程又叫DNA重組技術(shù)，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。
2、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。
【詳解】①酶具有專一性，故一種限制酶只能識別一種核苷酸序列，①正確；
②基因工程是在DNA分子水平上進行的設(shè)計和施工，②正確；
③不同限制酶的切口一般是不同的堿基序列，③錯誤；
④目的基因進入受體細胞不一定能成功實現(xiàn)表達，④錯誤；
⑤基因工程可以將一種生物的優(yōu)良性狀移植到另一種生物身上，⑤正確；
⑥質(zhì)粒是基因工程中常用作運載目的基因的載體，但不是唯一的載體，⑥錯誤。
故選B。
25. 缺乏維生素a就容易導(dǎo)致出現(xiàn)夜盲癥，營養(yǎng)不良，甚至有一些能夠威脅到生命。而β-胡蘿卜素可以在人體內(nèi)轉(zhuǎn)化成維生素a?？茖W(xué)家嘗試通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)富含胡蘿卜素的大米。八氫番茄紅素合酶（其基因用psy表示）和胡蘿卜素脫飽和酶（其基因用crtl表示）參與β-胡蘿卜素的合成。根據(jù)以上信息分析正確的是
A. 重組質(zhì)粒中的目的基因含有psy基因和crtl基因
B. 構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制酶、DNA連接酶和核酸酶
C. 可通過顯微注射法將目的基因?qū)胨臼荏w細胞
D. PCR既可擴增特定基因也可檢測目的基因表達
【答案】A
【解析】
【分析】基因工程需要用到的工具有限制酶、DNA連接酶和運載體。
【詳解】A、根據(jù)“八氫番茄紅素合酶和胡蘿卜素脫飽和酶參與β-胡蘿卜素的合成”可知，重組質(zhì)粒中的目的基因含有psy基因和crtl基因，A正確；
B、構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制酶、DNA連接酶，不需要核酸酶，B錯誤；
C、可通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨臼荏w細胞，C錯誤；
D、PCR既可擴增特定基因，但要檢測目的基因是否表達應(yīng)該用抗原-抗體雜交法，D錯誤。
故選A。
26. 限制酶a和b的識別序列和切割位點如圖所示．下列有關(guān)說法錯誤的是（　?。?br />
A. a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同
B. 能被b酶識別并切割的序列也能被 a切割
C. 在相同的DNA分子中a酶的識別位點一般明顯要比b酶多
D. 將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段不一定全都能被a切割
【答案】D
【解析】
【分析】分析題圖：限制酶a和限制酶b的識別序列不同，但兩者切割產(chǎn)生的黏性末端相同，因此經(jīng)過兩種酶切后的黏性末端可在DNA連接酶的作用下連接形成重組DNA分子。
【詳解】A、a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同，都是磷酸二酯鍵，A正確；
B、據(jù)圖分析，酶a的識別序列是-GATC-，酶b識別序列是-GGATCC-，酶b的識別序列包含酶a的序列，故能被b酶識別并切割的序列也能被a切割，B正確；
C、a酶的識別序列比b酶短，識別序列越短，含有的識別位點就越多，因此在相同的DNA分子中b酶的識別位點明顯少于a酶，C正確；
D、將大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新連接后的DNA片段全都能被a切割，但只有部分能被b酶切割，D錯誤。
故選D。
27. 限制酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶，以下說法正確的是 (　　)
A. DNA連接酶能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯鍵
B. 限制酶只能切割雙鏈DNA片段，不能切割煙草花葉病毒的核酸
C. E·coli DNA連接酶既能連接黏性末端，也能連接平末端
D. 限制酶主要從原核生物中分離純化而來，所以也能剪切自身的DNA
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程最基本的工具：①基因的“剪刀”---限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱限制酶）②基因的 “針線”---DNA連接酶③基因的運載體---質(zhì)粒、噬菌體、動植物病毒等。
【詳解】DNA連接酶連接的是兩個DNA片段，故A錯誤；限制酶只能切割DNA分子，煙草花葉病毒的核酸是RNA，不能切割，故B正確；E·coli DNA連接酶只能連接黏性末端，不能連接平末端，故C錯誤；限制酶主要從原核生物中分離純化而來，但是不會剪切自身的DNA，故D錯誤。
【點睛】解決本題需要明確兩點：一是限制酶只能在特定的位點上切割DNA分子；二是限制酶存在于原核生物，主要作用是切割外源DNA，而使之失效，達到保護自身的目的。
28. 下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說法，錯誤的是（　?。?br /> A. 蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，使之更加符合人類需要
B. 蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對蛋白質(zhì)分子直接進行操作
C. 蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生自然界中不曾存在的新型蛋白質(zhì)分子
D. 蛋白質(zhì)工程需要從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，從而設(shè)計出相應(yīng)的基因
【答案】B
【解析】
【分析】蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。
【詳解】A、蛋白質(zhì)工程能按照人們的意愿定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)，使之更加符合人類需要，A正確；
B、基因的結(jié)構(gòu)決定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，因此，要對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進行設(shè)計改造，最終還必須通過改造基因來完成，而不是直接對蛋白質(zhì)分子進行操作，B錯誤；
C、蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過的新型蛋白質(zhì)分子，C正確；
D、蛋白質(zhì)工程的流程為：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），即蛋白質(zhì)工程需要從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，從而設(shè)計出相應(yīng)的基因，D正確。
故選B。
29. 如圖是PCR擴增的過程示意圖，其中敘述正確的是（ ）

A. A過程不需要解旋酶參與
B. Taq DNA聚合酶是在B過程發(fā)揮作用的
C. 該過程需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是互補的
D. PCR反應(yīng)體系只需要加入模板DNA、TaqDNA聚合酶和四種脫氧核苷酸
【答案】A
【解析】
【分析】1、PCR技術(shù)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。
（2）原理：DNA復(fù)制。
（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物。
（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
（5）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。
2、分析題圖：A是高溫變性過程，B為低溫復(fù)性過程，C為中溫延伸過程。
【詳解】A、A為高溫變性過程，該過程中高溫會破壞DNA雙鏈間的氫鍵，進而達到解旋的目的，因此不需要解旋酶的參與，A正確；
B、TaqDNA聚合酶是在C中溫延伸過程發(fā)揮作用的，B錯誤；
C、該過程需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是不互補的，否則會形成引物二聚體，進而影響目的基因的擴增，C錯誤；
D、PCR反應(yīng)體系需要加入模板DNA、TaqDNA聚合酶、四種脫氧核苷酸和兩種引物，D錯誤。
故選A。
30. 植物基因工程可以改造農(nóng)作物性狀，使農(nóng)作物變得更加高產(chǎn)。如圖是培育良種水稻的有關(guān)原理和步驟，有關(guān)敘述錯誤的是（　?。?br />
A. 圖中表達載體中的T-DNA插入外源基因后將失去作用
B. 圖中②過程需要在無菌環(huán)境下用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌
C. 需要用除草劑檢測轉(zhuǎn)基因植株是否具有抗除草劑性狀
D. 相關(guān)抗性基因可以整合到植物細胞的染色體DNA上
【答案】A
【解析】
【分析】據(jù)圖分析，圖中①代表構(gòu)建基因表達載體，②代表將含有目的基因的Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，③代表用農(nóng)桿菌侵染植物愈傷組織細胞，④代表再分化，⑤代表植物生長發(fā)育為植株的過程。
【詳解】A、T-DNA可將T-DNA之間的DNA序列轉(zhuǎn)移并整合至受體細胞的染色體DNA上，使目的基因能夠穩(wěn)定遺傳，故T-DNA插入外源基因后不會失去作用，A錯誤；
B、用Ca2+處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于感受態(tài)，利于農(nóng)桿菌吸收目的基因完成轉(zhuǎn)化過程，故圖中②將載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌過程需要在無菌環(huán)境下用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，B正確；
C、為從個體水平上檢測圖中植株是否具有抗除草劑性狀，可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴灑待測植株，C正確；
D、農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA具有可轉(zhuǎn)移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上的特點，故相關(guān)抗性基因可以整合到植物細胞的染色體DNA上，D正確。
故選A。
二、非選擇題
31. 孔雀石綠（簡稱MG）是廣泛使用的有機染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明。

（1）MG降解菌富集培養(yǎng)時，制備的培養(yǎng)基應(yīng)該能為其生長提供4類營養(yǎng)物質(zhì)，即___________________。
（2）圖中所示的分離純化細菌的方法是_________________。對土壤中的MG降解菌進行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是_____________________。實驗中初步估測A培養(yǎng)瓶中細菌細胞數(shù)為1.5×109個/mL，若要在圖中每個平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，且每個平板上長出的菌落數(shù)約為150個，則應(yīng)將A中的菌液稀釋_______倍。
（3）MG高效降解菌株的鑒定：將純化獲得的菌種接種于含過量MG的固體培養(yǎng)基（其他營養(yǎng)成分等適宜）上，根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn)_____________，就可以鑒別出目的菌株。
【答案】（1）水、碳源、氮源和無機鹽
（2）①稀釋涂布平板法 ②菌液濃度過高 ③106
（3）透明圈
【解析】
【分析】1、培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的要求。
2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。
【小問1詳解】
培養(yǎng)基為微生物提供水、碳源、氮源和無機鹽4類營養(yǎng)物質(zhì)。
【小問2詳解】
圖中所示的分離純化細菌的方法是稀釋涂布平板法，對土壤中的MG降解菌進行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能是菌液濃度過高，未形成單菌株。設(shè)A中的菌液稀釋X倍，則150÷0.1×X=1.5×109個/mL，計算出X=106。
【小問3詳解】
MG高效降解菌株的鑒定：由題干信息可知，MG在水中溶解度低，含過量MG的固體培養(yǎng)基不透明，若目的菌株能夠降解MG，則會在培養(yǎng)基上出現(xiàn)以菌株為中心的透明圈。
【點睛】本題考查微生物的分離與培養(yǎng)，要求考生識記微生物實驗中的滅菌、接種方法等知識，意在考查學(xué)生識記所學(xué)知識要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡(luò)的能力，同時獲取題圖信息準確答題。
32. 如圖為利用生物技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體和經(jīng)體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過程。請回答下列問題：

（1）要獲得已免疫的小鼠B細胞，需要用__________對小鼠進行免疫。
（2）經(jīng)由到融合產(chǎn)生的A細胞可能有多種，需要經(jīng)選擇培養(yǎng)以獲得雜交瘤細胞，然后再進行____________，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。
（3）與單克隆抗體相比，常規(guī)血清抗體的缺點是_______________。
（4）若要同時獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對圖Ⅱ中囊胚進行___________，操作過程需要特別注意的問題是須將囊胚的內(nèi)細胞團進行_______________。
【答案】（1）特定的抗原
（2）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
（3）產(chǎn)量低、純度低、特異性差
（4）①胚胎分割 ②均等分割
【解析】
【分析】1、單克隆抗體的制備：（1）細胞來源：B淋巴細胞：能產(chǎn)生特異性抗體，在體外不能無限繁殖；骨髓瘤細胞：不產(chǎn)生專一性抗體，體外能無限繁殖；（2）雜交瘤細胞的特點：既能大量增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體；（3）兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細胞（去掉未雜交細胞以及自身融合的細胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細胞群；（4）兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性；（5）提取單克隆抗體：從培養(yǎng)液或小鼠腹水中提??；（6）單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高，并可能大量制備。
2、胚胎分割：是指采用機械方法將早期胚胎切割2等份、4等份等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)。
【小問1詳解】
對小動物注射抗原，可從該動物的脾臟中獲取效應(yīng)B細胞，效應(yīng)B細胞產(chǎn)生的抗體具有專一性，故要獲得已免疫的小鼠B細胞，需要用特定的抗原對小鼠進行免疫。
【小問2詳解】
在動物細胞融合過程中，直接產(chǎn)生的A細胞可能有3種，包括小鼠B細胞自身融合細胞、小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞、雜交瘤細胞，經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測等篩選過程，最終才能獲得產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞。
【小問3詳解】
單克隆抗體與一般的抗體相比，優(yōu)點是特異性強，靈敏度高，可在體外大量生產(chǎn)，而常規(guī)血清抗體的缺點是產(chǎn)量低、純度低、特異性差。
【小問4詳解】
若要同時獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對圖Ⅱ中囊胚進行胚胎分割，操作過程需要注意將囊胚的內(nèi)細胞團進行均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。
【點睛】本題考查單克隆抗體的制備、動物細胞培養(yǎng)、胚胎移植的相關(guān)知識，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。
33. 野生黑芥（染色體數(shù)為2A）具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜（染色體數(shù)為2B）易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技術(shù)獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，操作流程如圖。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中①涉及到的生物工程技術(shù)是__________________。此時培養(yǎng)液需要保持一定滲透壓的目的是________________________________。
（2）經(jīng)過①操作后，在顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體黑芥細胞的__________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細胞的標志。
（3）用上述方法培養(yǎng)的該雜種植株含有的染色體數(shù)目是________________。用黑腐病菌感染雜種植株，篩選出具有______________能力的雜種植株。
【答案】（1）①植物體細胞雜交 ②維持原生質(zhì)體的正常形態(tài)
（2） 葉綠體
（3）①2A＋2B ②抗黑腐病
【解析】
【分析】分析題圖：本題是植物體細胞雜交過程，①是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，②是再分化形成再生植株，培養(yǎng)液需要保持一定滲透壓，保持原生質(zhì)體原有的形態(tài)。該過程涉及原生質(zhì)體的融合及植物組織培養(yǎng)。
【小問1詳解】
圖中涉及到的生物工程技術(shù)有植物體細胞雜交（原生質(zhì)體融合與植物組織培養(yǎng)）。過程①PEG的作用是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，涉及到的生物工程技術(shù)是植物體細胞雜交。此時培養(yǎng)液需要保持一定滲透壓的目的是維持原生質(zhì)體的正常形態(tài)。
【小問2詳解】
用于融合的兩個細胞，一個是黑芥苗的葉肉細胞，一個是花椰菜的根部細胞，其中供體細胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體，因此可通過觀察葉綠體的有無作為初步篩選雜種細胞的標志。
【小問3詳解】
野生黑芥的染色體數(shù)為2A，花椰菜的染色體數(shù)為2B，因此用上述方法培養(yǎng)的該雜種植株，即黑芥—花椰菜，含有的染色體數(shù)目是2A＋2B。由題可知，實驗的目的是獲取抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，故用黑腐病菌感染雜種植株，可篩選出具有抗黑腐病的雜種植株。
【點睛】本題考查植物體細胞雜交技術(shù)和染色體變異，要求考生識記和理解植物體細胞雜交技術(shù)的過程和原理，考生的識記能力和理解能力是解答本題的關(guān)鍵。
34. 研究人員將抗鹽基因轉(zhuǎn)入普通煙草培育出抗鹽煙草，該過程所用的質(zhì)粒與含抗鹽基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性核酸內(nèi)切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它們識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。請回答下列問題。

（1）利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，擴增第n次時，需要________個引物。
（2）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建基因表達載體時，應(yīng)選用限制酶___________切割質(zhì)粒，選用限制酶___________切割含目的基因的DNA片段。
（3）將上述切開的質(zhì)粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導(dǎo)入受體細胞，受體細胞的類型（對兩種抗生素表現(xiàn)出抗性R或敏感性S）可能包含_________（不考慮基因突變）。
①XR、YR?? ?②XR、YS　 ③XS、YR 　 ④XS、YS
（4）轉(zhuǎn)基因植物所攜帶的目的基因可能傳遞給非轉(zhuǎn)基因植物，造成基因污染。如果將目的基因?qū)肴~綠體DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是________________________。
【答案】（1）2n
（2）①BamHⅠ ②Sau3AⅠ（或BamHⅠ、Sau3AⅠ）
（3） ①②④
（4）葉綠體基因不會通過花粉傳給下一代
【解析】
【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：
1、目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。
2、基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
3、將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。
4、目的基因的檢測與鑒定。
【小問1詳解】
利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時，擴增第1次時，需要2個引物；擴增第2次時，需要4個引物，所以擴增第n次時，需要2n個引物。
【小問2詳解】
由于目的基因必須插入運載體的啟動子與終止子之間，才能正常表達，所以不能用限制酶BclⅠ和HindⅢ進行切割，又因為BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ三種限制酶切割形成的粘性末端是相同的，所以應(yīng)該用BamHⅠ切割質(zhì)粒；目的基因兩側(cè)有限制性核酸內(nèi)切酶BamHI和Sau3AⅠ的識別序列，故可用Sau3AⅠ或BamHⅠ、Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段。
【小問3詳解】
由于將上述切開的質(zhì)粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，可能產(chǎn)生三種結(jié)果：普通質(zhì)粒、重組質(zhì)粒、目的基因自身環(huán)化結(jié)構(gòu)，因此導(dǎo)入受體受體細胞，導(dǎo)入普通質(zhì)粒的將表現(xiàn)為①XR、YR；導(dǎo)入重組質(zhì)粒的將表現(xiàn)為②XR、YS；導(dǎo)入目的基因環(huán)化結(jié)構(gòu)的將表現(xiàn)為④XS、YS，故選①②④。
【小問4詳解】
轉(zhuǎn)基因植物所攜帶的目的基因可能會通過花粉傳遞給非轉(zhuǎn)基因植物，造成基因污染。如果將目的基因?qū)肴~綠體DNA中，葉綠體基因是細胞質(zhì)基因，不會通過花粉傳給下一代，就可以有效避免基因污染。

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