一、單選題
1.在腐乳制作的過(guò)程中，需要
A. 選擇含水量超過(guò)70%的豆腐并利用蒸煮法滅菌
B. 將豆腐小塊整齊擺放并提供毛霉生長(zhǎng)的最適溫度
C. 將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐投入到裝有鹵湯的瓶中密封
D. 控制鹵湯中酒的含量以防止腐乳成熟過(guò)慢或腐敗變質(zhì)
【答案】D
【解析】
【分析】
腐乳由豆腐在毛霉的參與下發(fā)酵獲得，毛霉是一種絲狀真菌。選擇制作腐乳的豆腐含水量不宜過(guò)大，否則不易成形，一般所選擇的豆腐含水量不超過(guò)70%。腐乳制作時(shí)的酒精含量能夠通過(guò)影響毛霉產(chǎn)生的蛋白酶的活性，從而影響發(fā)酵時(shí)間。
【詳解】選擇制作腐乳的豆腐含水量不宜過(guò)大，否則不易成形，一般所選擇的豆腐含水量不超過(guò)70%，A選項(xiàng)錯(cuò)誤；接種毛霉時(shí)，需要將豆腐小塊擺放整齊，在25~28℃環(huán)境下培養(yǎng)2~3天，毛霉的最適生長(zhǎng)溫度為15~18℃，故不一定需要提供毛霉生長(zhǎng)的最適溫度，只要選擇適宜毛霉生長(zhǎng)的溫度即可，B選項(xiàng)錯(cuò)誤；制作腐乳時(shí)，先將腐乳咸坯擺入發(fā)酵瓶中，再加入鹵湯，C選項(xiàng)錯(cuò)誤；制作腐乳時(shí)鹵湯中的酒精含量會(huì)影響發(fā)酵時(shí)間，故需要控制鹵湯中酒的含量以防止腐乳成熟過(guò)慢或腐敗變質(zhì)，D選項(xiàng)正確。

2.下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，不正確的是
A. 細(xì)胞工程應(yīng)用的是細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法
B. 可以通過(guò)在細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作，按照人的意愿來(lái)改變基因結(jié)構(gòu)
C. 植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程依據(jù)的原理不同
D. 根據(jù)操作對(duì)象的不同，可以分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程兩大領(lǐng)域
【答案】B
【解析】
胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過(guò)細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作，按照人的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)，但是沒(méi)有改變基因的結(jié)構(gòu)，A正確、B錯(cuò)誤；植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程依據(jù)的原理不同，前者的原理有植物細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性，后者的原理有細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性、動(dòng)物細(xì)胞和的全能性，C正確；根據(jù)操作對(duì)象的不同，細(xì)胞工程可以分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞，D正確。

3.下列技術(shù)或方法與原理不符的是
A. 抗病毒轉(zhuǎn)基因小麥的獲得與雜交水稻的培育——基因重組
B. 高產(chǎn)青霉菌株的獲得與轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)的培育——基因突變
C. 原生質(zhì)體的融合與動(dòng)物細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流動(dòng)性
D. 植物組織培養(yǎng)與人工種子的培育——植物細(xì)胞的全能性
【答案】B
【解析】
抗病毒轉(zhuǎn)基因小麥的獲得與雜交水稻的培育，方法分別是轉(zhuǎn)基因技術(shù)集合雜交育種，原理都是基因重組，A正確；高產(chǎn)青霉菌株的獲得，原理是基因突變，而轉(zhuǎn)基因鯉魚(yú)的培育的原理是基因重組，B錯(cuò)誤；原生質(zhì)體的融合與動(dòng)物細(xì)胞融合，都依靠了膜的流動(dòng)性，C正確；植物組織培養(yǎng)與人工種子的培育，都利用了植物細(xì)胞的全能性，D正確。
【點(diǎn)睛】本題考查了轉(zhuǎn)基因技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)等相關(guān)知識(shí)．考查了學(xué)生對(duì)生物技術(shù)的理解和掌握情況，分析和解決問(wèn)題的能力。

4.下圖是通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“番茄一馬鈴薯”植株的技術(shù)流程圖，下列說(shuō)法正確的是

A. 圖中過(guò)程②表示再分化的過(guò)程
B. 植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是原生質(zhì)體融合
C. 已知番茄、馬鈴薯分別為四倍體、二倍體，則“番茄一馬鈴薯”屬于三倍體
D. 人工種子是由發(fā)育到f過(guò)程的結(jié)構(gòu)包裹上人工種皮制備而成的
【答案】D
【解析】
據(jù)圖分析可知，②表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程，A錯(cuò)誤；植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；由于番茄、馬鈴薯分別為四倍體、二倍體，因此植物體細(xì)胞雜交得到的“番茄-馬鈴薯”屬于異源多倍體中的異源六倍體，C錯(cuò)誤；人工種子是用胚狀體包上人工種皮制成的，其中圖中f階段為胚狀體階段，D正確。

5.下圖是通過(guò)植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑，下列敘述正確的是

A. 該途徑依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性
B. 過(guò)程①需要給予適宜的光照
C. 經(jīng)過(guò)程①細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化
D. 愈傷組織的代謝類型是自養(yǎng)需氧型
【答案】C
【解析】
細(xì)胞全能性以細(xì)胞發(fā)育成個(gè)體為標(biāo)志，而圖中并沒(méi)有形成完整植物體，A錯(cuò)誤；圖中①是脫分化過(guò)程，該過(guò)程需要避光，B錯(cuò)誤；圖中①是脫分化過(guò)程，經(jīng)該過(guò)程細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，成為高度液泡化的薄壁細(xì)胞，C正確；愈傷組織的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，D錯(cuò)誤。

6.為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖 2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。

下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟环氖?br /> A. 用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒
B. 用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞
C. 在培養(yǎng)基中添加卡那霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞
D. 用分子雜交方法檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上
【答案】C
【解析】
【分析】
根據(jù)圖示，在目的基因兩端，啟動(dòng)子和終止子之間都有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI的切點(diǎn)，因此可以用 EcoRI切割目的基因和運(yùn)載體；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物，菊花屬于雙子葉植物，可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可將目的基因C導(dǎo)入到農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞染色體的DNA上；質(zhì)粒中只有潮霉素抗性基因，被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞只對(duì)潮霉素具有抗性；目的基因分子水平上的檢測(cè)方法有：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。
【詳解】A. 用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI處理目的基因和質(zhì)粒，可以使目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端，再用連接酶把切口連起來(lái)就能構(gòu)建成重組質(zhì)粒，A正確；
B. 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物，菊花屬于雙子葉植物，故可用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織，將C基因?qū)爰?xì)胞，B正確；
C. 圖2中顯示標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，應(yīng)該在培養(yǎng)基中添加潮霉素篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞，C錯(cuò)誤；
D. 要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA是否插入目的基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)，D正確。

7.下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，錯(cuò)誤的是(　　)
A. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒
B. 克隆技術(shù)可用于繁殖某一性別的家畜
C. 動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜交個(gè)體
D. 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素的目的是防止細(xì)菌的污染
【答案】C
【解析】
莖尖和根尖等分生區(qū)幾乎不含病毒，所以將植物分生區(qū)（莖尖、根尖等）進(jìn)行組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗，A正確；克隆技術(shù)屬于無(wú)性生殖，可用于繁殖某一性別的家畜，B正確；動(dòng)物細(xì)胞融合只能獲得重組細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜交個(gè)體，C錯(cuò)誤；抗生素具有殺菌作用，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素的目的是防止細(xì)菌的污染，D正確。

8.下列關(guān)于細(xì)胞工程和基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是（　　）
A. 電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，但不能使動(dòng)物細(xì)胞融合
B. 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理
C. 目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物
D. 基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)
【答案】A
【解析】
誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有物理法（電激、離心、振動(dòng)）、化學(xué)法、生物法，A錯(cuò)誤；用纖維素酶或者果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，B正確；基因工程的目的基因可以來(lái)源于動(dòng)物、植物和微生物，受體細(xì)胞也可以是動(dòng)物、植物和微生物，C正確；基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，D正確。

9.下表細(xì)胞工程技術(shù)應(yīng)用中各組所選擇的實(shí)驗(yàn)材料及材料特點(diǎn)與實(shí)驗(yàn)?zāi)康钠ヅ溴e(cuò)誤的是
組別
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?br /> 實(shí)驗(yàn)材料
材料特點(diǎn)
1
克隆高產(chǎn)奶牛
傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞
能保持細(xì)胞正常的二倍體核型
2
培育脫毒草莓
莖尖
分裂能力強(qiáng)，易誘發(fā)突變
3
培育番茄?-?馬鈴薯超級(jí)雜種
花粉粒
易于獲取，易于組織培養(yǎng)
4
燒傷患者皮膚細(xì)胞移植
自體皮膚生發(fā)層細(xì)胞
分裂能力強(qiáng)，且不會(huì)引起免疫排斥

A. 1和2 B. 2和3 C. 3和4 D. 1和4
【答案】B
【解析】
【分析】
克隆動(dòng)物用到的供體細(xì)胞應(yīng)該是傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，能保持正常的二倍體核型，1組正確；培育脫毒草莓時(shí)，應(yīng)選用根尖或莖尖的材料，原因是分裂能力強(qiáng)，但誘發(fā)突變不是選材的原因，2組錯(cuò)誤；培育番茄—馬鈴薯超級(jí)雜種植株，應(yīng)選用兩種植物的體細(xì)胞，不能選用花粉粒，3組錯(cuò)誤；燒傷患者的皮膚移植，可以選用自己的生發(fā)層細(xì)胞，分裂能力強(qiáng)，不會(huì)發(fā)生排斥反應(yīng)，4組正確；據(jù)此分析。
【詳解】據(jù)分析可知，培育脫毒草莓時(shí)，選擇莖尖的原因是莖尖不含病毒，分裂能力強(qiáng)，而培育番茄—馬鈴薯超級(jí)雜種植株利用的是體細(xì)胞融合，故2和3錯(cuò)誤，1和4正確，故選B。

10.某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究。下列相關(guān)敘述，不正確的是

A. 經(jīng)過(guò)程①形成誘導(dǎo)干細(xì)胞，提高了細(xì)胞的全能性
B. 過(guò)程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過(guò)程
C. 每個(gè)Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體，過(guò)程③需用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選
D. 過(guò)程④產(chǎn)生的單抗在排出細(xì)胞時(shí)不需細(xì)胞膜上的載體蛋白協(xié)助
【答案】B
【解析】
試題分析：細(xì)胞分化后全能性有所降低，A正確；誘導(dǎo)干細(xì)胞是多能干細(xì)胞，所以誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較高；細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，遺傳物質(zhì)本身并未產(chǎn)生差異，B錯(cuò)誤；在細(xì)胞融合后的培養(yǎng)基內(nèi)會(huì)存在至少三種類型的細(xì)胞X細(xì)胞、Y細(xì)胞和Z細(xì)胞，所以仍需篩選，C錯(cuò)誤；單抗是蛋白質(zhì)，屬生物大分子，通過(guò)內(nèi)吞和外排進(jìn)出細(xì)胞，D正確。
考點(diǎn)：本題考查細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)。

11.下列有關(guān)NaCl在生物技術(shù)實(shí)踐中的應(yīng)用，正確的是（ ）
A. 在配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，需加入瓊脂，不需要添加NaCl
B. 蛋白質(zhì)在NaCl溶液中析出時(shí)，其結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變
C. 在腐乳制作過(guò)程中，裝瓶時(shí)需逐層等量加入NaCl，以防雜菌污染
D. 將哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞浸泡于0.9%的NaCl溶液中，用以制備純凈的細(xì)胞膜
【答案】B
【解析】
在配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基時(shí)，需要添加NaCl，以提供無(wú)機(jī)鹽，A項(xiàng)錯(cuò)誤；鹽析不改變蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，B項(xiàng)正確；在腐乳制作過(guò)程中，裝瓶時(shí)需逐層加入NaCl，且隨層數(shù)的增高增加鹽量，C項(xiàng)錯(cuò)誤；哺乳動(dòng)物的成熟紅細(xì)胞在0.9%的NaCl溶液可以保持正常形態(tài)，不會(huì)破裂，D項(xiàng)錯(cuò)誤。

12.下列有關(guān)基因工程及其應(yīng)用的說(shuō)法中，正確的是
A. 可用限制酶切割煙草花葉病毒的核酸
B. 必須用相同限制酶處理目的基因和運(yùn)載體
C. DNA連接酶連接DNA片段形成磷酸二酯鍵
D. 運(yùn)載體上必須要有標(biāo)記基因，用于篩選
【答案】C
【解析】
【分析】
1、限制酶：主要從原核生物中分離純化出來(lái)．特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種。
（1）主要從原核生物中分離純化出來(lái)；（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。
2、DNA連接酶：
（1）根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E．coliDNA連接酶、T4DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T4DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低；（2）DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；（3）DNA連接酶和DNA聚合酶的區(qū)別：①DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，而DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯鍵；②DNA連接酶是同時(shí)連接雙鏈的切口，而DNA聚合酶只是在單鏈上將一個(gè)個(gè)脫氧核苷酸連接起來(lái)；③DNA連接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。
3、運(yùn)載體：（1）常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．（質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子）；（2）作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點(diǎn)； ②要有標(biāo)記基因（如抗性基因），以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來(lái)。
【詳解】限制酶只能專一切割DNA，而煙草花葉病毒的核酸是RNA，所以不可用限制酶切割煙草花葉病毒的核酸，A錯(cuò)誤；不同的限制性內(nèi)切酶可能選擇一樣的DNA特定序列處進(jìn)行切割，也能切出相同的黏性末端，所以不一定必須用相同限制酶處理目的基因和運(yùn)載體，B錯(cuò)誤；DNA連接酶連接具有相同末端的DNA片段形成磷酸二酯鍵，C正確；運(yùn)載體上必須要有標(biāo)記基因，用于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞從而進(jìn)行篩選，D錯(cuò)誤，故選C。
【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作工具的特點(diǎn)及作用，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。

13.通過(guò)選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌。利用上述方法，能從混雜的微生物中分別分離出(　)
①大腸桿菌 　②霉菌 ?、鄯啪€菌　 ④自生固氮菌
A. ④②③ B. ④③① C. ④①② D. ①②③
【答案】A
【解析】
固氮菌的氮源是氮?dú)?，所以在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無(wú)法生長(zhǎng)，但是④固氮細(xì)菌可以生長(zhǎng)；霉菌是真菌，在培養(yǎng)基中加入青霉素后，青霉素可以抑制細(xì)菌（如大腸桿菌、固氮細(xì)菌）和放線菌，但是不抑制真菌，所以加入青霉素的培養(yǎng)基可以選擇出②霉菌；培養(yǎng)基中加入10%酚可以抑制細(xì)菌（如大腸桿菌、固氮細(xì)菌）和霉菌，所以可以篩選③放線菌，故選A。
【點(diǎn)睛】解答本題關(guān)鍵是明確選擇性培養(yǎng)基是指支持特定微生物的生長(zhǎng)而抑制其他微生物生長(zhǎng)的分離培養(yǎng)基，利用這個(gè)原理可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。

14.某小組同學(xué)為了調(diào)查湖水中細(xì)菌污染情況而進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察與計(jì)數(shù)。下列與此試驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題的敘述中,正確的是( )
A. 實(shí)驗(yàn)用過(guò)的帶菌培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)加熱后才能倒掉
B. 利用平板劃線法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)
C. 觀察細(xì)菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)時(shí),最好是在另一平板上接種清水作為對(duì)照試驗(yàn)
D. 培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉可分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供氮源和碳源
【答案】D
【解析】
實(shí)驗(yàn)用的帶菌培養(yǎng)基要高壓蒸汽滅菌后才能倒掉，以免污染環(huán)境，A項(xiàng)錯(cuò)誤；應(yīng)利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)，B項(xiàng)錯(cuò)誤；要使該實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時(shí)在另一平板上接種無(wú)菌水 作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，C項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉分別為細(xì)菌培養(yǎng)提供了氮源和碳源，D項(xiàng)正確。

15.下列有關(guān)哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞的發(fā)生以及受精作用的敘述，正確的是
A. 采集到的精子和卵細(xì)胞相遇即可發(fā)生受精作用
B. 排卵就是排出成熟卵細(xì)胞的過(guò)程
C. 卵細(xì)胞形成時(shí)的分裂過(guò)程均在卵巢內(nèi)完成
D. 受精作用完成的標(biāo)志是雌雄原核結(jié)合成為合子
【答案】D
【解析】
【分析】
據(jù)題文和選項(xiàng)的描述可知：該題考查學(xué)生對(duì)哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞的發(fā)生以及受精作用等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。
【詳解】采集到的精子需進(jìn)行獲能處理才有受精能力，采集到的卵細(xì)胞則要培養(yǎng)到減數(shù)分裂第二次分裂中期才能與獲能的精子結(jié)合，發(fā)生受精作用，A錯(cuò)誤；排卵是指卵子從卵泡中排出，剛排出的卵子尚未完全成熟，B錯(cuò)誤；卵細(xì)胞形成時(shí)的減數(shù)第一次分裂過(guò)程是在卵巢內(nèi)完成，減數(shù)第二次分裂過(guò)程是在輸卵管中完成，C錯(cuò)誤；受精作用完成的標(biāo)志是雌雄原核結(jié)合成為合子，D正確。
【點(diǎn)睛】解答此題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞的發(fā)生過(guò)程以及受精作用過(guò)程，并與體外受精過(guò)程建立聯(lián)系，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。

16.基因治療是（ ）
A. 把健康的外源基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中,達(dá)到治療疾病的目的
B. 對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù),從而使其恢復(fù)正常,達(dá)到治療疾病的目的
C. 運(yùn)用人工誘變的方法,使有基因缺陷的細(xì)胞發(fā)生基因突變恢復(fù)正常
D. 運(yùn)用基因工程技術(shù),把有基因缺陷的基因切除,達(dá)到治療疾病的目的
【答案】A
【解析】
【分析】
基因治療是把正常的基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用，達(dá)到治療疾病的目的。
【詳解】基因治療只是把正?；?qū)氩∪梭w內(nèi)，并沒(méi)有對(duì)有基因缺陷的細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)，A正確；基因治療是把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，是該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，達(dá)到治療疾病的目的，B錯(cuò)誤；人工誘變具有不定向性，并且是多害少利的，C錯(cuò)誤；基因治療是把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi)，達(dá)到治療疾病的目的，并沒(méi)有切除基因，D錯(cuò)誤。
【點(diǎn)睛】解答該題只需識(shí)記基因治療的概念即能解題。

17.下列有關(guān)哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是
A. 卵裂期的胚胎中細(xì)胞數(shù)目不斷增加，胚胎的總體積逐漸變大
B. 移植用的胚胎一般取發(fā)育到桑椹胚或囊胚時(shí)期的，不同生物移植的時(shí)期是相同的
C. 胚胎干細(xì)胞的體積和細(xì)胞核都較小
D. 胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分裂、分化成各種組織和器官，滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胎膜和胎盤
【答案】D
【解析】
卵裂期的胚胎中細(xì)胞數(shù)目不斷增加，但胚胎的總體積不變或略有減小，A項(xiàng)錯(cuò)誤；移植用的胚胎一般取發(fā)育到桑椹胚或囊胚時(shí)期的，不同生物移植的時(shí)期是不相同的，B項(xiàng)錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞的體積較小，細(xì)胞核大，細(xì)胞代謝旺盛，C項(xiàng)錯(cuò)誤；胚胎的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞分裂、分化成各種組織和器官，滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胎膜和胎盤，D項(xiàng)正確。

18.研究人員用圖1中質(zhì)粒和圖2中含目的基因的片段構(gòu)建重組質(zhì)粒（圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶切割位點(diǎn)），將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌后進(jìn)行篩選及PCR鑒定。以下敘述不正確的是

A. 構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ兩種限制酶
B. 使用DNA連接酶將酶切后的質(zhì)粒和目的基因片段進(jìn)行重組
C. 含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌可以在添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存
D. 利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時(shí)應(yīng)選用引物甲和引物丙
【答案】C
【解析】
【分析】
分析題圖：質(zhì)粒和外源DNA分子都含有三種限制酶切點(diǎn)，即限制酶BamHⅠ、BclⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位點(diǎn)在質(zhì)粒的兩個(gè)標(biāo)記基因上均有，所以不能用該酶切割質(zhì)粒。用BclⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，用BclⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過(guò)DNA連接酶與質(zhì)粒（含標(biāo)記基因）連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無(wú)標(biāo)記基因，不符合要求。導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用BclⅠ和HindIII酶切割的，其中的氨芐青霉素抗性基因已被破壞，故不能抗氨芐青霉素。
【詳解】用BclⅠ和HindIII酶切質(zhì)粒切成兩個(gè)片段，一個(gè)含四環(huán)素抗性基因，另一個(gè)不含抗性基因；用BclⅠ和HindIII酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過(guò)DNA連接酶與含四環(huán)素抗性基因質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個(gè)重組質(zhì)粒無(wú)抗性基因，不符合要求，A正確；將目的基因與質(zhì)粒形成基因表達(dá)載體需要用DNA連接酶連接，B正確；由于構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，需用BclⅠ酶和HindⅢ?酶切質(zhì)粒，質(zhì)粒上氨芐青霉素抗性基因被破壞，故含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在添加氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，C錯(cuò)誤； PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要引物引導(dǎo)子鏈合成，由圖中引物引導(dǎo)子鏈形成的方向可知，利用PCR鑒定含目的基因的大腸桿菌時(shí)應(yīng)選用引物甲和引物丙，D正確。
故選C。
【點(diǎn)睛】本題結(jié)合題圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力，識(shí)記基因表達(dá)載體中必須含有標(biāo)記基因。

19.下列有關(guān)試管動(dòng)物的說(shuō)法正確的是
A. 試管牛采所用的技術(shù)中包含克隆技術(shù)和體外受精、胚胎移植
B. 卵子在受精前也要經(jīng)歷類似精子獲能的過(guò)程
C. 試管嬰兒技術(shù)讓無(wú)法產(chǎn)生生殖細(xì)胞的夫婦得到自己的孩子
D. 從雌性動(dòng)物體內(nèi)采集的卵子或卵母細(xì)胞均需體外培養(yǎng)后，才能與精子受精
【答案】B
【解析】
【分析】
試管動(dòng)物技術(shù)是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。試管動(dòng)物核克隆動(dòng)物的比較：
?
試管動(dòng)物
克隆動(dòng)物
生殖方式
有性生殖
無(wú)性生殖
技術(shù)手段
體外受精、胚胎移植
核移植技術(shù)、胚胎移植
遺傳規(guī)律
遵循
不遵循
【詳解】試管牛所采用的技術(shù)中包含體外受精、胚胎移植，但不包含克隆技術(shù)，A錯(cuò)誤；沖出的卵子還不成熟，只有培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期時(shí)，才具有與精子受精的能力，因此卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能的過(guò)程，B正確；獲得自己親生孩子的前提是夫妻必須能產(chǎn)生生殖細(xì)胞，否則就不能獲得自己的親生孩子，C錯(cuò)誤；從雌性動(dòng)物體內(nèi)采集的卵子或卵母細(xì)胞已經(jīng)成熟，無(wú)需進(jìn)行體外培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。
【點(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞工程、胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記試管動(dòng)物技術(shù)，能將試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物進(jìn)行比較；能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。

20.下列生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，能夠順利達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡氖?br /> A. 在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋的大腸桿菌培養(yǎng)液獲得單菌落
B. 在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣制作果酒
C. 土壤浸出液接種于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上篩選分解尿素的細(xì)菌
D. 在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，可以用于制取土壤稀釋液
【答案】A
【解析】
在固體培養(yǎng)基上涂布稀釋后的菌液能夠得到單個(gè)菌落，A正確；在接種酵母菌的新鮮葡萄汁中通入無(wú)菌空氣，有利于酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，不利于制作果酒，B錯(cuò)誤；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基不能篩選出分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上篩選尿素分解菌，C錯(cuò)誤；在分離土壤中的尿素分解菌實(shí)驗(yàn)中，采集的土樣經(jīng)高溫滅菌后，土樣中的微生物全部被殺死，不能用于制取土壤稀釋液，D錯(cuò)誤。

21.試管嬰兒之父——愛(ài)德華茲因體外受精技術(shù)獲得2010年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)，該體外受精技術(shù)又稱試管嬰兒技術(shù)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是
A. 將收集到的精子放到一定濃度的肝素溶液中培養(yǎng)是為了誘導(dǎo)精子獲能
B. 受精過(guò)程防止多精入卵的生理反應(yīng)包括透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)
C. 進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除加入一些必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)添加血清等天然成分
D. 一般將胚胎培養(yǎng)至囊胚或原腸胚時(shí)，再進(jìn)行胚胎移植
【答案】D
【解析】
將收集到的精子放在一定濃度的肝素溶液中培養(yǎng)是為了誘導(dǎo)精子獲能，精子獲能后才能完成受精作用，A正確；受精過(guò)程中，防止多精入卵受精的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，B正確；由于人們對(duì)動(dòng)物細(xì)胞所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全弄清楚，所以進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除加入一些必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，還應(yīng)添加血清等天然成分，C正確；胚胎移植，一般選擇發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段的胚胎進(jìn)行移植，D錯(cuò)誤。

22.下列關(guān)于果酒、果醋和腐乳制作實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是( )
A. 通過(guò)控制發(fā)酵溫度，可抑制其它微生物的生長(zhǎng)繁殖
B. 制作果酒、果醋主要利用的是胞內(nèi)酶，制作腐乳需要利用胞外酶
C. 可以利用果醋制作的菌種來(lái)探究細(xì)胞呼吸的方式
D. 都可以通過(guò)人工接種菌種來(lái)提高產(chǎn)品質(zhì)量
【答案】C
【解析】
【分析】
家庭制作果酒、果醋、泡菜、腐乳可以不用專門接種，用自然菌種；制作果酒的酵母菌、制作果醋的醋酸菌、制作泡菜和腐乳的乳酸菌中，酵母菌和毛霉是真核生物，只有乳酸菌不能進(jìn)行有氧呼吸；制作果酒的適宜溫度是18℃~25℃、制作果醋的適宜溫度是30℃~35℃、制作泡菜的適宜溫度是18℃~20℃、制作腐乳的適宜溫度是15℃~18℃。
【詳解】A、制作果酒的適宜溫度是18℃~25℃、制作果醋的適宜溫度是30℃~35℃、制作泡菜的適宜溫度是18℃~20℃、制作腐乳的適宜溫度是15℃~18℃，通過(guò)控制發(fā)酵溫度，可抑制其它微生物的生長(zhǎng)繁殖，正確；
B、果酒和果醋是利用的胞內(nèi)酶，而腐乳主要是利用的毛霉的胞外酶，正確；
C、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。而參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。因此可以利用果酒制作的菌種來(lái)探究細(xì)胞呼吸的方式，錯(cuò)誤；
D、一般工業(yè)上是采用人工接種優(yōu)良菌株而提高產(chǎn)品質(zhì)量的，正確。
故選C。
【點(diǎn)睛】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：
（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2O+能量；
（2）在無(wú)氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6→2CO2+2C2H5OH+能量。
2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：
當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。
當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br /> 3、參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。

23. 關(guān)于發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)物檢驗(yàn)的說(shuō)法，正確的是（ ）
A. 果汁發(fā)酵是否產(chǎn)生酒精，可用NaOH來(lái)檢驗(yàn)
B. 檢驗(yàn)醋酸產(chǎn)生的簡(jiǎn)單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒定
C. 泡菜制作過(guò)程中亞硝酸鹽的含量不能測(cè)定
D. 測(cè)定果酒、果醋的產(chǎn)生和亞硝酸鹽的含量均可用品嘗法
【答案】B
【解析】
果汁發(fā)酵是否產(chǎn)生酒精，可用重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，A錯(cuò)誤；檢驗(yàn)醋酸產(chǎn)生的簡(jiǎn)單易行的方法是品嘗或用pH試紙鑒定，B正確；泡菜制作過(guò)程中亞硝酸鹽的含量可以用比色法進(jìn)行測(cè)定，C錯(cuò)誤；亞硝酸鹽無(wú)味且有毒，不能用品嘗法檢測(cè)其含量，D錯(cuò)誤。

24.抗菌肽對(duì)治療癌癥有一定的作用，下圖表示抗菌肽合成過(guò)程。相關(guān)說(shuō)法正確的是

A. 用PCR克隆目的基因不需要DNA解旋酶
B. 基因表達(dá)載體應(yīng)包含起始密碼子和終止密碼子
C. 用顯微注射法導(dǎo)入目的基因片段
D. 篩選菌種時(shí)用基因探針檢測(cè)相關(guān)蛋白質(zhì)
【答案】A
【解析】
用PCR克隆目的基因通過(guò)加熱使DNA解鏈，不需DNA解旋酶，A項(xiàng)正確；基因表達(dá)載體應(yīng)包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等結(jié)構(gòu)，起始密碼子和終止密碼子是mRNA上的序列，B項(xiàng)錯(cuò)誤；畢赤酵母是微生物，導(dǎo)入目的基因的方法是感受態(tài)細(xì)胞法，C項(xiàng)錯(cuò)誤；篩選菌種時(shí)用基因探針檢測(cè)抗菌肽基因是否插入畢赤酵母的染色體DNA上或者抗菌肽基因是否轉(zhuǎn)錄，檢測(cè)相關(guān)蛋白質(zhì)的方法是抗原-抗體雜交技術(shù)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。

25.高等哺乳動(dòng)物受精后不久，受精卵開(kāi)始進(jìn)行細(xì)胞分裂。經(jīng)胚胎發(fā)育的全過(guò)程，下列有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是 （ ）

A. 圖是胚胎發(fā)育過(guò)程中囊胚期示意圖，①②③依次稱之為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
B. 高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育經(jīng)歷的時(shí)期是受精卵→桑椹胚→囊胚期→原腸胚期→幼體，其中，最關(guān)鍵的時(shí)期是原腸胚期
C. 高等哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育中的細(xì)胞分化開(kāi)始于原腸胚期，終止于生命結(jié)束
D. 選擇此時(shí)期的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意對(duì)③均等分割
【答案】C
【解析】
【分析】
動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過(guò)程：受精卵→2細(xì)胞→4細(xì)胞→8細(xì)胞→桑椹胚→囊胚→原腸胚→幼體。胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)，進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。
【詳解】如圖是囊胚期示意圖，①②③依次稱之為透明帶、滋養(yǎng)層、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，A正確；高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育經(jīng)歷的時(shí)期是受精卵→桑椹胚→囊胚期→原腸胚期→幼體，而原腸胚期進(jìn)行了組織器官的分化，因此最關(guān)鍵，B 正確； 細(xì)胞分化貫穿于整個(gè)生命歷程，在胚胎時(shí)期達(dá)到最大限度，高等哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中的細(xì)胞分化開(kāi)始于囊胚期，囊胚期開(kāi)始出現(xiàn)細(xì)胞分化形成滋養(yǎng)層和內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞，終止于生命結(jié)束，C錯(cuò)誤；進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，D正確。
【點(diǎn)睛】本題考查了胚胎發(fā)育過(guò)程中的相關(guān)知識(shí)，解題的關(guān)鍵是熟記胚胎發(fā)育過(guò)程的每個(gè)時(shí)期的特點(diǎn)。

26.微生物接種方法很多，平板劃線法是最常用的一種。下圖是平板劃線示意圖，劃線的順序?yàn)棰佗冖邰堋Ｏ铝胁僮鞣椒ㄥe(cuò)誤的是

A. 劃線操作時(shí)，將沾有菌種的接種環(huán)插入培養(yǎng)基
B. 平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)
C. 不能將第④區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連
D. 在②～④區(qū)域中劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌
【答案】A
【解析】
試題分析：平板劃線法在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作是在火焰邊進(jìn)行。在每個(gè)區(qū)域中，只要有單個(gè)活細(xì)菌，通過(guò)培養(yǎng)即可獲得所需菌落；平板劃線后培養(yǎng)微生物時(shí)要倒置培養(yǎng)；接種是讓細(xì)菌在培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，所以不能將接種環(huán)插入培養(yǎng)基中，A選項(xiàng)錯(cuò)誤。
考點(diǎn)：本題考查平板劃線操作方法，意在考查學(xué)生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。

27.下列敘述符合基因工程概念的是
A. 在細(xì)胞內(nèi)直接將目的基因與宿主細(xì)胞的遺傳物質(zhì)進(jìn)行重組，賦予生物新的遺傳特性
B. 將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的大腸桿菌菌株
C. 用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株
D. 自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上
【答案】B
【解析】
基因工程是在生物體外將DNA進(jìn)行重組，賦予生物新的遺傳特性，A錯(cuò)誤；利用基因工程技術(shù)將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株，B正確；用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過(guò)篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株，這屬于誘變育種，其原理是基因突變，與基因工程技術(shù)無(wú)關(guān)，C錯(cuò)誤；噬菌體可作為目的基因的運(yùn)載體，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，而不是噬菌體將自身DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

28. 下列關(guān)于細(xì)胞工程和基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是
A. 電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，但不能使動(dòng)物細(xì)胞融合
B. 去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理
C. 目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物
D. 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶
【答案】A
【解析】
試題分析：電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，也可使動(dòng)物細(xì)胞融合，A錯(cuò)誤；去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁需經(jīng)纖維素酶與果膠酶，將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞需胰蛋白酶，B正確；目的基因和受體細(xì)胞均可來(lái)自動(dòng)、植物或微生物，C正確；基因工程中限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶，D正確。
考點(diǎn)：本題考查細(xì)胞工程和基因工程的知識(shí)。意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。

29. 下列敘述正確的是（ ）
①限制性內(nèi)切酶的特點(diǎn)是識(shí)別特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位點(diǎn)
②上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶白蛋白的轉(zhuǎn)基因牛，可以想象這頭牛發(fā)生了基因突變
③根據(jù)mRNA的信息推出并獲取目的基因的方法是用DNA探針測(cè)出目的基因
④轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的生產(chǎn)過(guò)程中不需要用到的工具是噬菌體
⑤可以作目的基因“分子運(yùn)輸車”的是天然質(zhì)粒
⑥在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的是將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑦培育成抗除草劑的作物新品種，導(dǎo)人抗除草劑基因時(shí)只能以受精卵為受體
⑧基因工程常用細(xì)菌等原核生物作受體細(xì)胞的原因包括繁殖速度快、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、多為單細(xì)胞，操作簡(jiǎn)便
A. ①④⑥⑧ B. ①②④⑧
C. ②④⑥⑦ D. ②③⑤⑦
【答案】A
【解析】
【分析】
本題主要考查基因工程，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力?；蚬こ讨谐Ｓ玫倪\(yùn)載體有質(zhì)粒、動(dòng)植物病毒和λ噬菌體衍生物，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時(shí)，體細(xì)胞和受精卵均可以。
【詳解】①限制性核酸內(nèi)切酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，故其特點(diǎn)是識(shí)別特定的核苷酸序列和具有特定的酶切位點(diǎn)，①正確；
②基因工程培育出的轉(zhuǎn)基因牛發(fā)生了基因重組，②錯(cuò)誤；
③根據(jù)mRNA的信息推出并獲取目的基因的方法是以mRNA為模板反轉(zhuǎn)錄出目的基因，③錯(cuò)誤；
④轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的生產(chǎn)過(guò)程中需要用到的工具是限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒，不需要噬菌體，④正確；
⑤在進(jìn)行基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過(guò)人工改造的，⑤錯(cuò)誤；
⑥在基因操作的基本步驟中，人工合成目的基因、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合、檢測(cè)目的基因的表達(dá)均需要堿基互補(bǔ)配對(duì)，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)，⑥正確；
⑦植物細(xì)胞的全能性較高，可以直接導(dǎo)入體細(xì)胞 再進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，不需要像動(dòng)物一樣只能導(dǎo)入受精卵，如農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的受體細(xì)胞是植物傷口處的體細(xì)胞，⑦錯(cuò)誤；
⑧基因工程常用細(xì)菌等原核生物作受體細(xì)胞的原因包括繁殖速度快、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少、多為單細(xì)胞，操作簡(jiǎn)便，⑧正確；
故正確的選A①④⑥⑧。

30.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述正確的是
A. 通常使用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落
B. 若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH，應(yīng)該在滅菌后進(jìn)行
C. 用顯微鏡直接計(jì)數(shù)固體培養(yǎng)基中微生物數(shù)量
D. 倒置平板可防止培養(yǎng)基被滴落的冷凝水污染
【答案】D
【解析】
A．常用固體或半固體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落，液體培養(yǎng)基無(wú)法分離，A錯(cuò)誤；
B．若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH，應(yīng)該在滅菌前進(jìn)行，B錯(cuò)誤；
C．顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量的方法，固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布法直接計(jì)數(shù)單個(gè)菌落數(shù)，C錯(cuò)誤；
D．平板倒置是避免冷凝的液體掉到培養(yǎng)基上，污染培養(yǎng)基，D正確；
答案選D。

31.如圖為某個(gè)基因的部分片段，關(guān)于該結(jié)構(gòu)的敘述，正確的是

A. ①所圈定的部位是腺嘌呤 B. DNA連接酶作用于②處
C. 限制酶作用于③處 D. 解旋酶作用于④處
【答案】B
【解析】
①所圈定的部位是腺嘌呤脫氧核苷酸，A項(xiàng)錯(cuò)誤；限制酶和DNA連接酶作用于兩個(gè)脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵②處，B項(xiàng)正確，C項(xiàng)錯(cuò)誤；解旋酶作用于堿基對(duì)之間的氫鍵③處，D項(xiàng)錯(cuò)誤。

32.下列是有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，其中正確的敘述是：（ ）
A. 培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素和動(dòng)物血清
B. 用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自肌肉組織或老齡動(dòng)物的器官或組織
C. 人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)能形成細(xì)胞群
D. 目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常是50代以內(nèi)
【答案】A
【解析】
【分析】
本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，考查對(duì)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件及其培養(yǎng)過(guò)程的理解，可在熟記相關(guān)知識(shí)的基礎(chǔ)上判斷各選項(xiàng)是否正確。
【詳解】進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、微量元素，并加入動(dòng)物血清，以滿足動(dòng)物細(xì)胞生命活動(dòng)的需要，A項(xiàng)正確；肌肉組織或老齡動(dòng)物的器官或組織的細(xì)胞分裂能力較弱甚至消失，用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自幼齡動(dòng)物的器官或組織，B項(xiàng)錯(cuò)誤；人的成熟紅細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核和各種細(xì)胞器，不再繼續(xù)分裂，C項(xiàng)錯(cuò)誤；培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞可保持正常核型，目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常是10代以內(nèi)，D項(xiàng)錯(cuò)誤。

33. 有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是（ ）
A. 是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源
B. 凡碳源都提供能量
C. 除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽
D. 無(wú)機(jī)氮源也能提供能量
【答案】D
【解析】
同一種物質(zhì)可以即作碳源又作氮源，如牛肉膏，A錯(cuò)誤；自養(yǎng)微生物利用的無(wú)機(jī)物碳源不提供能量，B錯(cuò)誤；除水以外的無(wú)機(jī)物還提供碳源和氮源，C錯(cuò)誤；無(wú)機(jī)氮源也能提供能量，如硝化細(xì)菌利用的氨，D正確。

34.研究人員將魚(yú)的抗凍基因?qū)敕洋w內(nèi)，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種。下列操作合理的是
A. 設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
B. 利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體
C. 將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞之前需用Ca2+處理細(xì)胞
D. 運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)
【答案】A
【解析】
【分析】
利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將魚(yú)的抗凍基因?qū)敕洋w內(nèi)，獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種，此過(guò)程的基本程序有四步：1、提取目的基因。2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建。3、把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定。
【詳解】提取目的基因可以用PCR技術(shù)進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增，以一段已知目的基因的核苷酸序列為模板，設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的目的基因，A正確。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)要利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶進(jìn)行操作，B錯(cuò)誤。將將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入法，不用Ca2+處理細(xì)胞，C錯(cuò)誤。檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)用抗原-抗體雜交的方法，D錯(cuò)誤。
【點(diǎn)睛】目的基因的檢測(cè)和鑒定有三步，不能弄混。第一步：DNA分子雜交技術(shù)：檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因。第二步：分子雜交技術(shù)：檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA。第三步：抗原-抗體雜交的方法（或個(gè)體生物學(xué)水平鑒定）：目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)。

35.下列關(guān)于果酒、果醋制作的敘述，錯(cuò)誤的是
A. 參與發(fā)酵的微生物都是原核生物，沒(méi)有成形的細(xì)胞核
B. 制作葡萄糖酒時(shí)，應(yīng)先用清水沖洗污物再去除枝梗
C. 發(fā)酵全過(guò)程都需要防止雜菌污染，以免降低產(chǎn)品品質(zhì)
D. 發(fā)酵裝置設(shè)置出料口便于取料及對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)
【答案】A
【解析】
【分析】
果酒制作需要的菌種是酵母菌，為真核生物。果醋制作需要的菌種是醋酸桿菌，為原核生物。發(fā)酵過(guò)程中應(yīng)避免雜菌污染，以免降低產(chǎn)品品質(zhì)。
【詳解】根據(jù)分析可知，果酒制作過(guò)程中需要的是酵母菌，為真核生物，有細(xì)胞核，A錯(cuò)誤；制作果酒時(shí)，應(yīng)該先用清水沖洗掉污物，再去除爛子粒和枝梗，防止雜菌污染，B正確；所有發(fā)酵全過(guò)程都需要防止雜菌污染，以免降低產(chǎn)品品質(zhì)，C正確；發(fā)酵裝置設(shè)置出料口便于取料及對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)，以便及時(shí)了解發(fā)酵進(jìn)程，D正確。
故選A。

36.下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”的敘述，正確的是
A. 洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度
B. 將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán)
C. 常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取
D. 用玻棒緩慢攪拌濾液會(huì)導(dǎo)致DNA獲得量減少
【答案】C
【解析】
試題分析：DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中，洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜但對(duì)DNA沒(méi)有影響，A錯(cuò)誤；將DNA絲狀物溶解后加入二苯胺試劑，沸水浴后變藍(lán)，B錯(cuò)誤；常溫下菜花勻漿中有些酶類會(huì)影響DNA的提取，C正確；用玻棒緩慢攪拌濾液有利于DNA析出，D錯(cuò)誤。
考點(diǎn)：DNA粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)

37.蛋白質(zhì)工程中直接需要進(jìn)行操作對(duì)象是（ ）
A. 蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu) B. 肽鏈結(jié)構(gòu)
C. 氨基酸結(jié)構(gòu) D. 基因結(jié)構(gòu)
【答案】D
【解析】
分析：蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。
詳解：蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求，其目標(biāo)是根據(jù)人們對(duì)蛋白質(zhì)功能的特定需求，對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分子設(shè)計(jì)，但因?yàn)榛驔Q定蛋白質(zhì)，因此對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)進(jìn)行設(shè)計(jì)改造，歸根到底還需要對(duì)相應(yīng)的基因進(jìn)行操作，按要求進(jìn)行修飾、加工、改造，使之能控制合成人類需要的蛋白質(zhì)，故選D。
點(diǎn)睛：解答本題的關(guān)鍵是對(duì)蛋白質(zhì)工程的概念理解，明確蛋白質(zhì)工程為第二代基因工程，能夠根據(jù)蛋白質(zhì)工程的概念和過(guò)程判斷蛋白質(zhì)工程直接操作的對(duì)象。

38.精子的變形過(guò)程中（ ）演變?yōu)榫拥奈?br /> A. 高爾基體 B. 中心體 C. 內(nèi)質(zhì)網(wǎng) D. 細(xì)胞核
【答案】B
【解析】
精子的變形過(guò)程中，中心體演變?yōu)榫拥奈?，B正確，A、C、D均錯(cuò)誤。

39.關(guān)于腐乳發(fā)酵的原理的敘述，不正確的是
A. 多種微生物參與了腐乳發(fā)酵
B. 裝瓶后豆腐上的毛霉繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖
C. 發(fā)酵過(guò)程中蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸
D. 料酒可以影響腐乳的風(fēng)味和成熟的時(shí)間
【答案】B
【解析】
多種微生物如青霉、酵母、曲霉、毛霉等參與了腐乳發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉，A項(xiàng)正確；裝瓶后豆腐上的毛霉受高濃度鹽分、酒精抑制，不能繼續(xù)生長(zhǎng)繁殖，B項(xiàng)錯(cuò)誤；發(fā)酵過(guò)程中蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，C項(xiàng)正確；料酒可以影響腐乳的風(fēng)味和成熟的時(shí)間，D項(xiàng)正確。

40.下圖表示小方同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)大腸桿菌過(guò)程中的部分操作，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是:

A. ①②③步驟需要酒精燈火焰旁操作
B. 培養(yǎng)基中必須含碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水
C. ③步驟接種環(huán)多方向劃線是為了便于細(xì)菌計(jì)數(shù)
D. 接種結(jié)束后，將④倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
【答案】C
【解析】
【分析】
本題以“在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)大腸桿菌過(guò)程中的部分操作示意圖”為情境，考查學(xué)生對(duì)微生物純化培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。
【詳解】①②③步驟依次表示倒平板、用接種環(huán)沾取菌液、進(jìn)行平板劃線，為了防止被雜菌污染，操作時(shí)都需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，A正確；不同的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需求存在差異，但水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽都是各種微生物所需的基本營(yíng)養(yǎng)，所以培養(yǎng)基中必須含碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽和水，B正確；③步驟接種環(huán)多方向劃線是為了分離菌種，C錯(cuò)誤；④是培養(yǎng)，劃線接種結(jié)束后，將平板倒置后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，防止冷凝水污染培養(yǎng)基，D正確。
【點(diǎn)睛】解答此題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解微生物的營(yíng)養(yǎng)，掌握平板劃線法的過(guò)程及其注意事項(xiàng)等相關(guān)知識(shí)并形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。在平時(shí)的復(fù)習(xí)中一定要注意圖文結(jié)合，進(jìn)而達(dá)到鞏固熟記并理解基礎(chǔ)知識(shí)的目的。

第Ⅱ卷非選擇題
41. 下圖為吉林大學(xué)農(nóng)學(xué)部培育出世界首例賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶?！翱椗钡拇笾逻^(guò)程，請(qǐng)回答：

（1）實(shí)施基因工程的核心操作步驟是_________，實(shí)現(xiàn)②過(guò)程的常用方法是_____________。
（2）獲得黑白花奶牛成纖維細(xì)胞后，利用______________技術(shù)擴(kuò)增細(xì)胞，培養(yǎng)液中除了提供必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)之外，還需要添加_____________等天然成分。
（3）獲得重組細(xì)胞④時(shí)，以去核卵細(xì)胞為受體細(xì)胞的原因是________________________。
(4)將早期胚胎移入代孕母牛體內(nèi)之前，需要對(duì)代孕母牛進(jìn)行______處理，目的是__________。
(5)要通過(guò)⑤過(guò)程獲得較多的遺傳同質(zhì)早期胚胎，應(yīng)采用______________技術(shù)，操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育至__________期的胚胎，并將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)___________?！翱椗迸＂哌M(jìn)入泌乳期后，可以通過(guò)分泌乳汁來(lái)生產(chǎn)人類所需的賴氨酸，因而稱為_(kāi)_______________。
【答案】（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 顯微注射法
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 血清、血漿
（3）卵細(xì)胞體積大、易操作，含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件
（4）同期發(fā)情 保證胚胎在移植前后處于相同的生理環(huán)境
（5）胚胎分割 囊胚 均等分割 乳腺生物反應(yīng)器（或乳房生物反應(yīng)器）
【解析】
試題分析：
（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，圖中②過(guò)程為把目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞，最常用方法是顯微注射法。
（2）擴(kuò)增細(xì)胞需要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)液的成分需要糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、促生長(zhǎng)因子、微量元素等，還必須添加血清、血漿等天然成分。
（3）獲取重組細(xì)胞時(shí)，以去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是：卵細(xì)胞體積大，易操作，含有促進(jìn)細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和條件。
（4）胚胎移植之前，需要對(duì)供體和受體母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證早期胚胎在移植前后處于相同的生理環(huán)境。
（5）要想獲得較多的遺傳物質(zhì)相同的早期胚胎，需要用到胚胎分割技術(shù)，操作時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育到桑椹胚和囊胚時(shí)期的胚胎，分割時(shí)一定要將囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中含有藥用蛋白，稱為乳房生物反應(yīng)器或乳腺生物反應(yīng)器。
考點(diǎn)：本題考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記能力、識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。

42.以下是有關(guān)現(xiàn)代生物科技的兩個(gè)問(wèn)題，請(qǐng)回答:
I.下面是與動(dòng)物細(xì)胞工程有關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：
（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用_____處理，以使其分散成_____，制成細(xì)胞懸液。
（2）氣體環(huán)埃中 CO2 的作用是___ __。
（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代 10 代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是 10 代以后細(xì)胞可能發(fā)生_________。
（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有_____的特點(diǎn)。單克隆抗體的制備過(guò)程需要經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)獲得雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行_________和_____，經(jīng)過(guò)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。
II 轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如下圖所示，圖中 PstI、SmaI、EcoRI，ApaI 等為限制質(zhì)粒和抗病基因上的箭頭表示限制酶的切割位點(diǎn)。下圖表示四種限制酶的識(shí)別序列及酶切點(diǎn)。

限制酶
PstI
SmaI
EcoRI
ApaI

識(shí)別序列 及酶切位點(diǎn)

—CTGCA↓G—
—G↑ACGTC—

—CCC↓GGG—
—GGG↑CCC—

—G↓AATTC—
—CTTAA↑G—

—GGGCC↓C—
—C↑CCGGG—
（1）若要獲得抗病基因，能否用限制酶 SmaI 對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割？_________。要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒能否用 PstI、ApaI 限制酶切割質(zhì)粒？__ ___。
（2）卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，根據(jù)這一原理可以利用含卡那霉素的培養(yǎng) 基篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的香蕉細(xì)胞。由此推斷重組質(zhì)粒中應(yīng)含有_____基因，作為標(biāo)記基因。
（3）②、③階段是否可使用同種培養(yǎng)基?___________。
【答案】 (1). 胰蛋白酶 (2). 單個(gè)細(xì)胞 (3). 維持培養(yǎng)液 (4). pH 遺傳物質(zhì)的突變 (5). 特異性強(qiáng)，靈敏度高 (6). 克隆化培養(yǎng) (7). 抗體檢測(cè) (8). 不能 (9). 不能 (10). 抗卡那霉素 (11). 不能
【解析】
【分析】
1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
2、分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中SmaⅠ酶的切割位點(diǎn)位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點(diǎn)。所以要活動(dòng)重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ進(jìn)行切割。①→②表示脫分化過(guò)程、②→③表示再分化過(guò)程、④是新植體。
【詳解】Ⅰ．（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用胰蛋白酶處理，以使其分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。
（2）氣體環(huán)境中CO2的作用是維持培養(yǎng)液pH。
（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是10代以后細(xì)胞沒(méi)有發(fā)生遺傳物質(zhì)的突變，能保持正常的二倍體核型。
（4）單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，優(yōu)點(diǎn)是：特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備。經(jīng)過(guò)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次?篩選，才能獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。
Ⅱ．（1）因?yàn)橄拗泼窼maⅠ的切割位點(diǎn)位于抗病基因上，對(duì)SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對(duì)圖中對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割．要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，也不能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割質(zhì)粒，因?yàn)楹锌共』虻耐庠碊NA分子上沒(méi)有ApaⅠ限制酶切割位點(diǎn)。
（2）欲利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，重組質(zhì)粒中應(yīng)同時(shí)含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因。
（3）決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過(guò)程中非常重要。②、③階段培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比值不同，因此這兩個(gè)階段不能是用同種培養(yǎng)基。
【點(diǎn)睛】本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、基因工程等知識(shí)，要求考生識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程及條件；識(shí)記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

43.自然情況下，牛的生育率很低，通過(guò)胚胎工程的技術(shù)手段，可以實(shí)現(xiàn)良種牛的快速繁殖。回答下列問(wèn)題：
(1)自然條件下，哺乳動(dòng)物的受精作用是在雌性動(dòng)物的_____內(nèi)完成的。當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到______時(shí)，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成受精。
(2)釆用胚胎移植的方法，可使一頭良種雌性黃牛一年生下數(shù)十頭自已的后代。該方法的操 作過(guò)程中需要用激素對(duì)該良種母牛和代孕母牛進(jìn)行_____處理。一般來(lái)說(shuō)，胚胎移植的適宜時(shí)期是胚胎發(fā)育至_____階段。在胚胎移植過(guò)程中，移入子宮的胚胎能在受體內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是_________。
(3)釆用試管動(dòng)物技術(shù)還可以使普通雌性黃牛產(chǎn)下奶牛、良種肉牛等不同品種小牛。該技術(shù)中首先要做的是_____和早期胚胎培養(yǎng)。采集的精子需要經(jīng)過(guò)_________處理，才具備受精能力。一般情況下，符合受精要求的精子和卵子可以在_________溶液中完成受精過(guò)程。培養(yǎng)早期胚胎時(shí)，所用培養(yǎng)液的成分除了一些_________類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及_____等物質(zhì)。
【答案】 (1). 輸卵管 (2). 兩個(gè)極體 (3). 同期發(fā)情 (4). 桑椹胚或囊胚 (5). 受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng) (6). 體外受精 (7). 獲能 (8). 獲能(或?qū)Ｓ玫氖芫? (9). 無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽 (10). 血清
【解析】
【分析】
1、體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。?
（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)?
①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。?
?②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。?
（2）精子的采集和獲能?
①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。?
②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。?
（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^(guò)程。?
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。
【詳解】（1）自然條件下，哺乳動(dòng)物的受精作用是在雌性動(dòng)物的輸卵管內(nèi)完成的。當(dāng)在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個(gè)極體時(shí)，說(shuō)明卵子已經(jīng)完成受精。
（2）胚胎移植操作過(guò)程中需要用激素對(duì)該良種母牛和代孕母牛進(jìn)行同期發(fā)情處理。一般來(lái)說(shuō)，胚胎移植的適宜時(shí)期是胚胎發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段。在胚胎移植過(guò)程中，移入子宮的胚胎能在受體內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥。
（3）采集的精子需要經(jīng)過(guò)獲能處理，才具備受精能力。一般情況下，符合受精要求的精子和卵子可以在獲能溶液中完成受精過(guò)程。培養(yǎng)早期胚胎時(shí)，所用培養(yǎng)液的成分除了一些無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需要添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及動(dòng)物血清等物質(zhì)。
【點(diǎn)睛】本題考查胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記體外受精的過(guò)程，掌握胚胎移植的基本程序，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

44.某農(nóng)業(yè)生態(tài)園利用自產(chǎn)的蔬果加工食品。請(qǐng)回答：
（1）將種植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分別是____、________， 在制作葡萄酒時(shí)，發(fā)酵液裝量不能超過(guò)發(fā)酵瓶容量的_____。制作果醋時(shí)，可以利用________________技術(shù)，將微生物吸附在鋸末上進(jìn)行生產(chǎn)。
（2）將種植的黃瓜等新鮮蔬菜腌制泡菜時(shí)，微生物利用新鮮蔬菜中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行發(fā)酵，會(huì)產(chǎn)生_____和亞硝酸。泡菜中的亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生_____反應(yīng)，產(chǎn)物與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色的產(chǎn)物，根據(jù)這一特性可利用_____法定量。
（3）在果酒、果醋和泡菜的生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行嚴(yán)格滅菌也能制作成功，原因是_____。
【答案】 (1). 酵母菌 (2). 醋酸桿菌 (3). 2/3 (4). 固定化 (5). 有機(jī)酸和醇類物質(zhì) (6). 重氮化 (7). 光電比色 (8). 菌種在短時(shí)間內(nèi)大量繁殖，產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物，可抑制雜菌生長(zhǎng)
【解析】
【分析】
（1）泡菜的制作原理：
泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
（2）測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理：
在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量。
【詳解】（1）將種植的葡萄制成葡萄酒和葡萄醋，利用的微生物分別是酵母菌和醋酸桿菌；在制作葡萄酒時(shí)，發(fā)酵液裝量不能超過(guò)發(fā)酵瓶容量的2/3，以防止發(fā)酵過(guò)程產(chǎn)生的二氧化碳?xì)怏w釋放而引起的發(fā)酵基質(zhì)的膨脹。制作果醋時(shí)，可以利用固定化技術(shù)，將微生物吸附在鋸末上進(jìn)行生產(chǎn)。
（2）腌制泡菜時(shí)，在無(wú)氧的條件下，微生物利用新鮮蔬菜中的糖和其他營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)行發(fā)酵，產(chǎn)物有有機(jī)酸、醇類物質(zhì)和亞硝酸等。亞硝酸鹽可與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)，這一產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量。
（3）在果酒、果醋和泡菜的生產(chǎn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行嚴(yán)格滅菌也能制作成功，原因是菌種在短時(shí)間內(nèi)大量繁殖，產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物，如酒精、醋酸等可抑制雜菌生長(zhǎng)。
【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解果酒和果醋的制作與制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量的原理、流程、注意事項(xiàng)及影響因素等相關(guān)基礎(chǔ)知識(shí)、形成清晰的知識(shí)網(wǎng)絡(luò)。

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