第Ⅰ卷 選擇題（共55分）
一、單項(xiàng)選擇題：本題共20小題，每小題2分，共40分。
1. 下列與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相關(guān)的描述，正確的是（ ）
A. 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理，生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物
B. 發(fā)酵是在適宜的條件下，將原料通過微生物的無氧呼吸轉(zhuǎn)化為人類所需產(chǎn)物的過程
C. 谷物、水果等原料可為微生物的生長提供各種營養(yǎng)物質(zhì)，發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理
D. 與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)酵工程要接種通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種
【答案】C
【解析】
【分析】發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。
【詳解】A、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)中用到的微生物包含酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌等。其中，酵母菌屬于真菌，毛霉也屬于真菌，它們都具有成形的細(xì)胞核，是真核生物，并非全是原核生物，所以不能說傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理來生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物，A錯(cuò)誤；
B、發(fā)酵是指人們借助微生物在有氧或無氧條件下的生命活動(dòng)來制備微生物菌體本身，或者直接代謝產(chǎn)物、次級(jí)代謝產(chǎn)物的過程，并非只是在無氧呼吸條件下，比如醋酸菌發(fā)酵產(chǎn)生醋酸是在有氧條件下，B錯(cuò)誤；
C、谷物、水果等原料本身含有多種營養(yǎng)成分，像糖類、蛋白質(zhì)、維生素等，這些可為微生物的生長提供各種營養(yǎng)物質(zhì)。而且在傳統(tǒng)發(fā)酵過程中，由于原料上本身攜帶的微生物就可以進(jìn)行發(fā)酵，所以發(fā)酵前無需進(jìn)行滅菌處理，C正確；
D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所利用的菌株通常是原材料自帶的菌株，或者是之前發(fā)酵保留下來的菌株，大多是混合菌種發(fā)酵。而發(fā)酵工程使用的菌株多是通過人工分離、選擇和培育得到的，一般為純種發(fā)酵，但不一定是通過基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種，D錯(cuò)誤。
故選C。
2. 《齊民要術(shù)》中有關(guān)于釀酒的記載：“浸曲三日，如魚眼湯沸，酸米。其米絕令精細(xì)”；有關(guān)“動(dòng)酒?。ā磅　蓖按住保┓ā钡尼劥坠に?，“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當(dāng)臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移動(dòng)，撓攪之。數(shù)十日，醋成”。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. “用水三斗”是防止酒精濃度過高抑制酵母菌的繁殖
B. 各地釀酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的均為酵母菌
C. “動(dòng)酒酢法”的原理是醋酸菌在O2充足、糖源缺乏時(shí)將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸
D. 傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過程中，往往不接種菌種，而是利用天然存在的菌種
【答案】A
【解析】
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水;在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精。
【詳解】AC、“動(dòng)酒酢法”該方法依據(jù)的原理是醋酸菌在氧氣充足、糖源不足時(shí)將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸，"酒一斗，用水三斗，合甕盛"是防止酒精濃度過高抑制醋酸菌生長繁殖，A錯(cuò)誤； C正確；
B、各地釀酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中都是利用酵母菌的無氧呼吸，B正確；
D、傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過程中，往往不接種菌種，而是利用天然存在的菌種，D正確。
故選A。
3. 研究人員探究了不同鹽濃度對(duì)泡菜發(fā)酵過程中乳酸菌含量的影響。表格為兩種鹽濃度下泡菜的配方，圖像為乳酸菌相對(duì)濃度隨發(fā)酵時(shí)間變化曲線。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. 需將食鹽溶于清水，鹽水煮沸冷卻后使用
B. 為保證發(fā)酵順利進(jìn)行，兩組需定期進(jìn)行通氣、排氣且時(shí)長相等
C. 與6%的鹽濃度相比，8%的鹽濃度不利于乳酸菌數(shù)目的增多
D. 還可跟蹤檢測(cè)兩個(gè)配方發(fā)酵過程中亞硝酸鹽含量對(duì)兩種配方進(jìn)行比較
【答案】B
【解析】
【分析】由于在泡菜制作過程中，微生物會(huì)將原料中的硝酸鹽還原形成亞硝酸鹽，因此在發(fā)酵初期亞硝酸鹽含量會(huì)逐漸升高，發(fā)酵后期亞硝酸鹽又會(huì)被某些微生物氧化成硝酸鹽，亞硝酸鹽含量又會(huì)逐漸下降，因此在泡菜制作過程中要檢測(cè)亞硝酸鹽的含量，確定合適的取食時(shí)間．
【詳解】A、將鹽水煮沸冷卻后再使用，這是為了避免高溫殺死乳酸菌，A正確；
B、乳酸菌是厭氧菌，發(fā)酵過程需要在無氧環(huán)境中進(jìn)行。定期通氣會(huì)引入氧氣，破壞厭氧環(huán)境，抑制乳酸菌的生長，B錯(cuò)誤；
C、據(jù)曲線圖可知，與6%的鹽濃度相比，8%的鹽濃度整體菌種數(shù)量更少，不利于乳酸菌數(shù)目的增多，C正確；
D、亞硝酸鹽含量是評(píng)價(jià)泡菜安全性的重要指標(biāo)，其濃度在發(fā)酵過程中會(huì)呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)。跟蹤亞硝酸鹽含量可以進(jìn)一步比較兩種配方的優(yōu)劣，D正確。
故選B。
4. 藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋被稱為“液體黃金”“口服化妝品”等。下圖是以鮮藍(lán)莓為原料天然發(fā)酵制作藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋的過程簡圖。下列敘述正確的是（ ）
A. 去除藍(lán)莓枝梗后及時(shí)沖洗干凈，目的是防止雜菌污染
B. 過程③在氧氣不足但糖源充足的條件下可直接發(fā)酵為藍(lán)莓醋
C. 在過程④時(shí)，榨出的藍(lán)莓汁需經(jīng)過濕熱滅菌后才能密閉發(fā)酵
D. 過程⑤中發(fā)揮作用的微生物的最適生長溫度為30~35℃
【答案】D
【解析】
【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。
2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?br>【詳解】A、榨汁前需將新鮮的藍(lán)莓進(jìn)行沖洗，然后除去枝梗，以避免除去枝梗時(shí)引起藍(lán)莓破損，防止增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)，A錯(cuò)誤；
B、過程③是果醋發(fā)酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧氣、糖源充足條件下可直接發(fā)酵為藍(lán)莓醋，B錯(cuò)誤；
C、過程④果酒制作的菌種的來源于藍(lán)莓皮上野生的酵母菌，所以藍(lán)莓汁不需經(jīng)過濕熱滅菌，C錯(cuò)誤；
D、過程⑤中發(fā)揮作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌，好氧細(xì)菌，發(fā)酵溫度30-35℃，D正確。
故選D。
5. 發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如圖所示。下列說法正確的是（ ）
A. 在發(fā)酵之前需要利用固體培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
B. 在酸性條件下可以利用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸
C. 發(fā)酵結(jié)束后，可通過過濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身
D. 通過發(fā)酵工程可以從微生物細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白，用來生產(chǎn)微生物飼料
【答案】C
【解析】
【分析】發(fā)酵工程，是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。
【詳解】A、在發(fā)酵之前需要利用液體培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；
B、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸需要在中性或弱堿性條件下，而不是酸性條件下，B錯(cuò)誤；
C、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥得到產(chǎn)品，C正確；
D、單細(xì)胞蛋白本身就是微生物菌體，而不是從微生物細(xì)胞中提取的，可直接作為微生物飼料，D錯(cuò)誤。
故選C。
6. 某生物實(shí)驗(yàn)室為培養(yǎng)大腸桿菌制備了LB培養(yǎng)基，其營養(yǎng)構(gòu)成如表。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 該培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌效果最好
B. NaCl既可以提供無機(jī)鹽，又可以調(diào)節(jié)滲透壓
C. 酵母提取物可提供碳源、磷酸鹽和維生素等營養(yǎng)
D. 滅菌前需用稀鹽酸將培養(yǎng)基的pH調(diào)至3.6~4.6
【答案】D
【解析】
【分析】培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長和繁殖的生存環(huán)境。
【詳解】A、高壓蒸汽滅菌可以對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，且較徹底，該培養(yǎng)基中沒有不耐高溫的物質(zhì)，可以用高壓蒸汽滅菌，A正確；
B、NaCl可以提供無機(jī)鹽（Na+、Cl-），也可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的滲透壓，B正確；
C、酵母提取物是將酵母細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、核酸等進(jìn)行降解后精制而成的一種棕黃色可溶性膏狀或淺黃色粉狀純天然制品，可提供碳源、磷酸鹽和維生素等營養(yǎng)，C正確；
D、細(xì)菌適宜的培養(yǎng)基為中性偏堿，滅菌前需用氫氧化鈉將培養(yǎng)基的pH調(diào)至中性偏堿，D錯(cuò)誤。
故選D。
7. 苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，如圖為實(shí)驗(yàn)室的部分操作步驟，相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. 本實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源
B. 步驟④中接種環(huán)需在每次劃線前灼燒處理，接種后的平板需倒置培養(yǎng)
C. 滅菌處理后的土壤樣品經(jīng)②③④步驟操作后可獲得純化的苯酚降解菌菌落
D. 可以通過逐步提高培養(yǎng)基中苯酚的濃度，獲得高效苯酚降解菌
【答案】C
【解析】
【分析】1、培養(yǎng)基配制時(shí)的注意事項(xiàng)：
（1）全程要求無菌操作，無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染。
（2）培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時(shí)，才能用來倒平板?？梢杂檬钟|摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，當(dāng)感覺到錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板。操作時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。
（3）平板冷凝后皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。
（4）在倒平板的過程中，不能將培養(yǎng)基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。
2、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：
（1）灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌。
（2）干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌。
（3）高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100 kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30 min。
3、微生物常見的接種的方法：
（1）平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
【詳解】A、本實(shí)驗(yàn)是研究降解苯酚的微生物，為排除其它物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，故培養(yǎng)基中只能以苯酚為唯一碳源，A正確；
B、每次劃線接種結(jié)束后必須灼燒接種環(huán)，這樣能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，能夠避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。培養(yǎng)基倒置能夠防止培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)、形成的冷凝水滴落在培養(yǎng)基上造成污染，倒放還可以在某種程度上防止菌落蔓延，以利于形成單個(gè)菌落，利于計(jì)數(shù)，故步驟④中接種環(huán)需在每一次劃線前灼燒處理，接種后的平板需倒置培養(yǎng)，B正確；
C、菌種的純化必須保證菌株具有活性，經(jīng)過滅菌的土樣中，菌株已經(jīng)失去活性，不能再進(jìn)行純化操作，故滅菌處理后的土壤樣品經(jīng)②③④步驟操作后不會(huì)獲得純化的苯酚降解菌菌落，C錯(cuò)誤；
D、可以通過逐步提高培養(yǎng)基中苯酚的濃度，這樣降解苯酚能力強(qiáng)的菌株能夠存活下來，經(jīng)過重復(fù)培養(yǎng)，便能獲得高效苯酚降解菌，D正確。
故選C。
8. 研究人員擬從新鮮蚯蚓糞中分離篩選出對(duì)番茄枯萎病有良好抑制效果的拮抗細(xì)菌。將蚯蚓糞加入無菌水中制成懸浮液，利用甲培養(yǎng)基進(jìn)行篩選純化后，將獲得的不同菌株分別接種至乙培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，48h后進(jìn)行“平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)”：在丙培養(yǎng)基的空白平板一側(cè)放置一直徑為5mm的番茄枯萎病菌的菌塊，在平行另一側(cè)放置相同大小的濾紙片，實(shí)驗(yàn)流程如下圖。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. Ⅰ過程使用的接種方法是平板劃線法，I~Ⅲ過程均需要無菌操作
B. 對(duì)照組濾紙片用無菌水處理，實(shí)驗(yàn)組濾紙片用拮抗菌菌液處理
C. 應(yīng)培養(yǎng)至對(duì)照組病菌菌落長滿丙培養(yǎng)基時(shí)開始測(cè)量并計(jì)算抑制率
D. 選擇丙培養(yǎng)基上直徑大的病菌菌落對(duì)應(yīng)的拮抗菌作為目的菌
【答案】D
【解析】
【分析】分析圖形：Ⅰ為接種，根據(jù)甲培養(yǎng)基是菌落的形態(tài)可知，接種的方法為平板劃線法；Ⅱ?yàn)閷⒓着囵B(yǎng)基中獲取的不同菌株分別接種至乙培養(yǎng)基；Ⅲ為接種后進(jìn)行平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)。
【詳解】A、據(jù)圖可知，甲培養(yǎng)基中是各種線的分布，故步驟Ⅰ使用的接種方法是平板劃線法；微生物分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵就是防止雜菌污染，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都需要進(jìn)行無菌操作，A正確；
B、本實(shí)驗(yàn)的目的是探究拮抗細(xì)菌是否對(duì)番茄枯萎病有良好抑制，故實(shí)驗(yàn)組濾紙片用拮抗菌菌液處理，對(duì)照組濾紙片用無菌水處理，B正確；
C、由于對(duì)照組沒有用拮抗菌菌液處理，故培養(yǎng)至對(duì)照組枯萎病菌菌落長滿時(shí)，通過對(duì)滴加拮抗菌液處理組的統(tǒng)計(jì)后，開始測(cè)量并計(jì)算抑制率，C正確；
D、為達(dá)到階段一的目的，應(yīng)選擇“平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)”培養(yǎng)后番茄枯萎病菌菌落直徑小的細(xì)菌，因?yàn)榉芽菸【渲睆皆叫。f明抑制效果越好，D錯(cuò)誤。
故選D。
9. 天冬氨酸缺陷型菌株不能合成天冬氨酸，必須從外界環(huán)境中獲取天冬氨酸才能生長繁殖。影印法（部分過程如圖所示）可用于天冬氨酸缺陷型菌株的篩選，其中基本培養(yǎng)基中不含氨基酸，完全培養(yǎng)基中含所有種類的氨基酸；轉(zhuǎn)印是將揭起的絲絨布平移到培養(yǎng)基上，使吸附的菌體“印”在培養(yǎng)基平板上。下列敘述正確的是（ ）

A. 培養(yǎng)皿1中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基
B. 過程①和過程②應(yīng)使用相同的接種工具
C. 過程②中，應(yīng)將揭起的絲絨布先轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)皿2再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)皿3中
D. 菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落
【答案】D
【解析】
【分析】分析題圖，圖中首先利用稀釋涂布平板法分離細(xì)菌，然后運(yùn)用“影印法”將菌種接種到兩種培養(yǎng)基中：基本培養(yǎng)基、完全培養(yǎng)基，則在基本培養(yǎng)基中，氨基酸缺陷型菌株不能生長，而在完全培養(yǎng)基中能夠生長，因此可以選擇出氨基酸缺陷型菌株。
【詳解】A、兩種培養(yǎng)基分別培養(yǎng)是為了篩選出氨基酸缺陷型菌株，因此與基本培養(yǎng)基相比，培養(yǎng)皿1中特有的成分有氨基酸，類似于完全培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；
B、過程①導(dǎo)致菌落均勻分布，因此該方法為稀釋涂布平板法，所用工具是涂布器，而過程②所用的工具通常是絲絨布，B錯(cuò)誤；
C、過程②應(yīng)將印在絲絨布上的菌落先轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)皿3基本培養(yǎng)基上，原因是防止基本培養(yǎng)基中混入氨基酸，C錯(cuò)誤；
D、比較基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基中的菌落可知，菌落A能在完全培養(yǎng)基上生長，但不能在基本培養(yǎng)基生長，說明菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落，D正確。
故選D。
10. 黃曲霉毒素是由黃曲霉產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，具有極強(qiáng)的毒性和致癌性?？蒲腥藛T用黃曲霉毒素B（AFB1）的結(jié)構(gòu)類似物——豆香素（C9H6O2）篩選出能高效降解AFB1的菌株，實(shí)驗(yàn)過程如下圖中的①—④。已知菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。對(duì)降解菌的培養(yǎng)液進(jìn)行離心，發(fā)現(xiàn)上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌懸液中的殘留率。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)上清液中含有蛋白質(zhì)K，為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)⑤：在A中加入水解蛋白質(zhì)K的酶、B中加等量的蒸餾水，充分反應(yīng)后在兩試管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）

A. 1號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇性培養(yǎng)基，通常需要提前在121℃下進(jìn)行濕熱滅菌
B. 步驟③使用稀釋涂布平板法，目的是篩選出能降解黃曲霉毒素的單菌落
C. 實(shí)驗(yàn)⑤的結(jié)果是A試管中豆香素含量基本不變，B試管中豆香素含量減少
D. 蛋白質(zhì)K屬于降解菌產(chǎn)生的胞外分泌物，可以分解培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)
【答案】D
【解析】
【分析】1、實(shí)驗(yàn)室常用的滅菌方法：
①灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌。
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌。
③高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。
2、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
【詳解】A、1號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇性培養(yǎng)基，培養(yǎng)基需要提前在121℃下進(jìn)行濕熱滅菌，A正確；
B、結(jié)合題圖信息分析可知，步驟③接種的培養(yǎng)基中菌落均勻分布，使用的接種方法是稀釋涂布平板法，目的是篩選出能降解豆香素的單菌落，B正確；
C、由題干信息可知，A中加入水解蛋白質(zhì)K的酶、B中加等量的蒸餾水，故實(shí)驗(yàn)⑤的結(jié)果是A試管中豆香素含量基本不變，B試管中豆香素含量減少，C正確；
D、由題干信息可知，上清液中含有蛋白質(zhì)K，且上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌懸液中的殘留率，據(jù)此推測(cè)蛋白質(zhì)K屬于降解菌產(chǎn)生的胞外分泌物，可以分解培養(yǎng)液中的豆香素，D錯(cuò)誤。
故選D。
11. 通過植物細(xì)胞工程對(duì)光果甘草進(jìn)行培養(yǎng)以獲得藥物甘草西定，過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）

A. 過程③通常先在生長素與細(xì)胞分裂素比例高的培養(yǎng)基中培養(yǎng)
B. 過程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理后即可獲得大量目的植株
C. 過程⑥中甘草西定可通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得，應(yīng)將愈傷組織細(xì)胞在液體培養(yǎng)基培養(yǎng)
D. 所得三種植株中乙和丙的遺傳信息與甲相同，植株丁和甲是同一物種
【答案】C
【解析】
【分析】根據(jù)圖分析，過程①為接種外植體，②為誘導(dǎo)脫分化形成愈傷組織，③為誘導(dǎo)再分化，④為誘變育種，⑤為植物體細(xì)胞雜交。
【詳解】A、生長素/細(xì)胞分裂素的值高時(shí)，利于生根，該值低時(shí)利于生芽，過程③是再分化，需先生芽，再生根，所以需要先在生長素與細(xì)胞分裂素比例低的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；
B、過程④為誘變育種，常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理的是愈傷組織，經(jīng)篩選，并進(jìn)一步培養(yǎng)才能獲得大量所需的突變體植株丙，B錯(cuò)誤；
C、過程⑥中甘草西定可通過植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得，應(yīng)將愈傷組織細(xì)胞懸浮培養(yǎng)，即植物組織培養(yǎng)，C正確；
D、所得三種植株中乙和丙的遺傳信息不一定與甲相同，因?yàn)橹仓瓯钦T變育種得到的，遺傳信息可能會(huì)發(fā)生改變；植株丁經(jīng)過了植物體細(xì)胞雜交，染色體數(shù)目發(fā)生了改變，和甲不一致，所以不是同一物種，D錯(cuò)誤。
故選C。
12. 下圖是利用甲（高產(chǎn)）、乙（耐鹽）兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)，通過植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽的雜種植株的流程圖。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）

A. 進(jìn)行a處理時(shí)，需要用到纖維素酶和果膠酶
B. b之前的誘導(dǎo)過程除PEG之外還可以使用滅活的病毒
C. b之后得到的愈傷組織細(xì)胞與正常細(xì)胞相比沒有細(xì)胞壁
D. c是具有耐鹽性狀的幼芽，c即可直接發(fā)育為耐鹽植株
【答案】A
【解析】
【分析】分析題圖：圖示為培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株的培育過程，其中a表示酶解法去除細(xì)胞壁，b表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，c為胚狀體。
【詳解】A、圖中a處理是去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專一性，使用纖維素酶和果膠酶可以去除細(xì)胞壁，所以進(jìn)行a處理時(shí)，需要用到纖維素酶和果膠酶，A正確；
B、滅活的病毒常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，而植物原生質(zhì)體融合可以用PEG（聚乙二醇）等方法誘導(dǎo)，一般不使用滅活的病毒，B錯(cuò)誤；
C、b過程是原生質(zhì)體融合，之后得到的愈傷組織細(xì)胞是具有細(xì)胞壁的。植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織是具有細(xì)胞壁的薄壁細(xì)胞，C錯(cuò)誤；
D、是經(jīng)過在含鈉鹽濃度為0.6%的固體培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選出的具有耐鹽性狀的愈傷組織，愈傷組織需要經(jīng)過再分化等過程才能發(fā)育為耐鹽植株，而不是直接發(fā)育為植株，D錯(cuò)誤。
故選A。
13. 科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）。iPS細(xì)胞可培育出不同細(xì)胞（過程如圖所示），用于治療阿爾茲海默癥、心血管等疾病。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 圖示過程說明人體內(nèi)細(xì)胞分化具有可逆性
B. 培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，需要CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)
C. 病人的成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)而成的iPS細(xì)胞用于自身疾病的治療，可避免免疫排斥
D. iPS細(xì)胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sx2和Oct-3/4表達(dá)的蛋白質(zhì)
【答案】A
【解析】
【分析】在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器 官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。
【詳解】A、成纖維細(xì)胞在c-Myc、Klf4、Sx2和Oct-3/4的誘導(dǎo)下才能獲得類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，在人體內(nèi)部不能發(fā)生，因此這不能說明人體內(nèi)的細(xì)胞分化具有可逆性，A錯(cuò)誤；
B、培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2。 O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的 pH，所以將它們置于含有95%空氣和5%CO2的混合氣體的 CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，B正確；
C、由于取自身成纖維細(xì)胞形成的iPS細(xì)胞表面抗原相同，所以可用于自身疾病的治療，可避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；
D、通過在誘導(dǎo)體系中加入c-Myc、Klf4、Sx2和Oct-3/4獲得了iPS 細(xì)胞，說明iPS 細(xì)胞中可能含有c-Myc、Klf4、Sx2和Oct-3/4表達(dá)的蛋白質(zhì)，有助于細(xì)胞的脫分化，D正確。
故選A。
14. 抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通過采用特定技術(shù)將具有生物活性的小分子藥物連接到能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞的單克隆抗體上，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC 的結(jié)構(gòu)及其發(fā)揮作用的機(jī)理如圖所示，下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是（ ）

A. 單克隆抗體制備過程中通常將免疫后得到的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合
B. 用96孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細(xì)胞后，在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得單克隆抗體
C. ADC以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，這體現(xiàn)了細(xì)胞膜的功能特點(diǎn)具有一定的流動(dòng)性
D. ADC在腫瘤細(xì)胞里被溶酶體裂解，釋放藥物，使腫瘤細(xì)胞死亡
【答案】C
【解析】
【分析】分析題圖，抗體藥物偶聯(lián)物(ADC) 通過將具有生物活性小分子藥物與單克隆抗體結(jié)合，被腫瘤細(xì)胞特異性識(shí)別，通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，導(dǎo)致溶酶體裂解，釋放藥物，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。
【詳解】A、B淋巴細(xì)胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的能力，因此利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，利用該細(xì)胞制備單克隆抗體，A正確；
B、單克隆抗體制備過程中至少經(jīng)過兩次篩選，一次是用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞還需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，即用96孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細(xì)胞后，就可獲得既能無限增殖，又能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；
C、ADC以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，這體現(xiàn)了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)具有一定的流動(dòng)性，C錯(cuò)誤；
D、ADC通過胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，溶酶體使其裂解，釋放藥物，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，D正確。
故選C。
15. Trp-2 是一種跨膜糖蛋白，在多種腫瘤組織中高表達(dá)，參與細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而調(diào)控細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移。Trp-2 抗體和細(xì)胞毒素類藥物 SN-38 構(gòu)成偶聯(lián)物 （SG）可以有效治療乳腺癌，下圖為 SG的制備過程。下列相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A. 推測(cè)腫瘤組織表達(dá)Trp-2糖蛋白可促進(jìn)細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移
B. ①過程可用滅活的病毒使細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)分子重新排布
C. ③過程通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)獲得分泌抗Trp-2抗體的細(xì)胞
D. ④過程形成SG 通過SN-38特異性識(shí)別 Trp-2 并殺傷乳腺癌細(xì)胞
【答案】D
【解析】
【分析】單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞(A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞)，不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【詳解】A、根據(jù)題意Trp-2 是一種跨膜糖蛋白，在多種腫瘤組織中高表達(dá)，參與細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而調(diào)控細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移，推測(cè)腫瘤組織表達(dá)Trp-2糖蛋白可促進(jìn)細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移，A正確；
B、①過程為細(xì)胞融合過程，可用滅活的病毒促進(jìn)細(xì)胞融合，B正確；
C、通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)獲得分泌抗Trp-2抗體的細(xì)胞，C正確；
D、④過程形成SG 通過Trp-2 抗體特異性識(shí)別 Trp-2 并將SN-38運(yùn)送到相應(yīng)位置殺傷乳腺癌細(xì)胞，D錯(cuò)誤。
故選D。
16. 非人靈長類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植非常困難，我國科學(xué)家經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)，成功培育出了體細(xì)胞克隆猴，流程如圖所示。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）

A. 體細(xì)胞比胚胎細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)更容易成功
B. 采集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至MII期
C. 組蛋白甲基化水平降低可提高胚胎發(fā)育率
D. 組蛋白乙酰化水平升高可提高胚胎發(fā)育率
【答案】A
【解析】
【分析】圖示過程為體細(xì)胞克隆猴培育過程，該過程應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合（去核卵母細(xì)胞與體細(xì)胞融合）和胚胎移植等技術(shù)。體細(xì)胞核移植過程中獲得的重構(gòu)胚需要激活才能完成細(xì)胞的分裂和發(fā)育進(jìn)程。
【詳解】A、胎猴體細(xì)胞高度分化，表現(xiàn)全能性比較困難，動(dòng)物體細(xì)胞核移植的難度非常大，A錯(cuò)誤；
B、卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至成熟，即培養(yǎng)至MII期，B正確；
C、據(jù)圖可知，將組蛋白去甲基化酶的mRNA注入重構(gòu)胚，這樣可降低組蛋白的甲基化水平，從而改變組蛋白的表觀遺傳修飾來調(diào)控基因表達(dá)，激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，提高了胚胎的發(fā)育率和妊娠率，C正確；
D、據(jù)圖可知，將組蛋白脫乙酰酶抑制劑處理重構(gòu)胚，提高組蛋白的乙?；剑せ钪貥?gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，提高了胚胎的發(fā)育率和妊娠率，D正確。
故選A。
17. 三親嬰兒技術(shù)是一種輔助生殖技術(shù)，旨在幫助那些有線粒體疾病風(fēng)險(xiǎn)的女性生育健康的孩子。其培育過程如圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A. 卵子去核實(shí)質(zhì)是指去除細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物
B. 供體精子需獲能后才能與卵母細(xì)胞發(fā)生受精作用
C. 該技術(shù)可避免母親線粒體DNA中的致病基因遺傳給后代
D. 三親嬰兒的培育利用了核移植技術(shù)，屬于無性生殖
【答案】D
【解析】
【分析】1、分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程，由圖可知，三親嬰兒的培育采用了動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。
2、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，克隆動(dòng)物的遺傳物質(zhì)來自雙親，其核遺傳物質(zhì)來自供核生物，而細(xì)胞質(zhì)基因來自提供細(xì)胞質(zhì)的生物。
【詳解】A、核移植的受體細(xì)胞處于MII期，捐贈(zèng)者的卵子去核實(shí)質(zhì)是指去掉細(xì)胞中的紡錘體染色體復(fù)合物，A正確；
B、供體精子需經(jīng)過體外獲能處理后才能與卵母細(xì)胞發(fā)生受精作用，B正確；
C、母親為“三親嬰兒“提供的是卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，后代的線粒體基因來自捐獻(xiàn)者的卵母細(xì)胞，故該技術(shù)可避免母親的線粒體遺傳病基因傳遞給后代，C正確；
D、三親嬰兒來源于精子和卵母細(xì)胞結(jié)合形成的受精卵，屬于有性生殖，D錯(cuò)誤。
故選D。
18. EPO是人體腎臟分泌的一種肽類激素，能使骨髓生成紅細(xì)胞的量增加，提高血紅蛋白含量，增加血液攜氧、供氧能力，是臨床上一種治療腎性貧血的藥物。下圖是采用中國倉鼠卵巢細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來生產(chǎn)EPO的過程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 在③之前，可以對(duì)精子用含有Ca2+載體的獲能液處理，使其獲得受精的能量
B. 在③過程，精子需要依次穿越卵母細(xì)胞的透明帶和卵細(xì)胞膜
C. 在⑥之前，需要割取囊胚的部分滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，鑒定性別
D. 甲乙丙丁是同一物種，但只有丁獲得了人類的EPO基因
【答案】A
【解析】
【分析】圖中①表示卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，②為精子的采集和獲能，③為體外受精，④為目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，⑤為胚胎的早期培養(yǎng)，⑥為胚胎移植，⑦為轉(zhuǎn)EPO基因倉鼠的生長發(fā)育過程，⑧為檢測(cè)目的基因EPO是否表達(dá)出EPO活性成分。
【詳解】A、對(duì)于倉鼠而言，應(yīng)采用培養(yǎng)法，即將精子放于人工配制的獲能液中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，精子就可獲能；對(duì)于牛、羊等家畜的精子而言，可將精子放在含有Ca2+載體的獲能液處理，但不是使其獲得受精的能量，A錯(cuò)誤；
B、③為體外受精，受精時(shí)，精子需要依次穿越卵母細(xì)胞透明帶和卵細(xì)胞膜，B正確；
C、根據(jù)題意“采用中國倉鼠卵巢細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來生產(chǎn)EPO的過程”，⑥為胚胎移植，在此之前需要割取囊胚的部分滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，鑒定性別，C正確；
D、由圖示可知，甲乙丙丁仍是同一物種，但只有丁通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了人類的EPO基因，D正確。
故選A。
19. 下表所示為常用的限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. 限制酶的作用底物都是雙鏈DNA，都能切開磷酸二酯鍵
B. BglⅡ和MbI兩種限制酶切后可形成相同的黏性末端
C. SmaI切DNA后成的末端可用Ecli DNA連接酶連接
D. 一種限制酶可能識(shí)別多種核苷酸序列
【答案】C
【解析】
【分析】限制酶：（1）來源：主要從原核生物中分離純化出來；（2）特異性：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂；（3）結(jié)果：形成黏性末端或平末端。
【詳解】A、限制酶能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，A正確；
B、BglⅡ和MbI兩種限制酶切后可形成相同的黏性末端，均為GATC—，B正確；
C、SmaI切DNA后成的末端為平末端，而Ecli DNA連接酶只能連接黏性末端，C錯(cuò)誤；
D、HindI限制酶的識(shí)別序列為GTY↓RAC，其中Y=C或T，R=A或G，說明其識(shí)別序列不只一種，則一種限制酶可能識(shí)別多種核苷酸序列，D正確。
故選C。
20. 下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A. 可選用新鮮的香蕉、菠菜、豬肝等作為實(shí)驗(yàn)材料
B. 研磨液中2ml/L的NaCl溶液有利于溶解DNA和去除雜質(zhì)
C. 過濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制DNA酶的活性
D. DNA溶液中加入4mL二苯胺試劑后即可出現(xiàn)藍(lán)色
【答案】D
【解析】
【分析】DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離。
【詳解】A、新鮮的香蕉、菠菜為植物材料，豬肝為動(dòng)物材料，它們都含有DNA，均可作為該實(shí)驗(yàn)材料，A正確；
B、DNA在2ml/L的NaCl溶液中溶解度較高，有利于溶解DNA，同時(shí)一些雜質(zhì)在該濃度下溶解度較低，可去除雜質(zhì)，B正確；
C、過濾液放入4°C冰箱或加入預(yù)冷的酒精，低溫環(huán)境可抑制DNA酶的活性，減少DNA的分解，C正確；
D、DNA溶液中加入4mL二苯胺試劑后，需要沸水浴加熱5min左右才會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色，而不是直接就出現(xiàn)藍(lán)色，D錯(cuò)誤。
故選D。
二、不定項(xiàng)選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。
21. 腐乳是我國傳統(tǒng)發(fā)酵食品，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。某科研機(jī)構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過程中不同濃度的食鹽對(duì)腐乳中氨基酸含量的影響。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 腐乳生產(chǎn)過程中發(fā)揮主要作用的微生物是酵母菌
B. 時(shí)間和食鹽濃度均可影響腐乳中氨基酸的含量
C. 經(jīng)過發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)全部分解為小分子肽
D. 食鹽濃度越高，對(duì)微生物抑制作用越強(qiáng)，對(duì)制作腐乳越有利
【答案】ACD
【解析】
【分析】腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。
【詳解】A、腐乳生產(chǎn)過程中發(fā)揮主要作用的微生物是毛霉，A錯(cuò)誤；
B、本實(shí)驗(yàn)的自變量是時(shí)間和食鹽濃度，從圖中可以看出，在同一時(shí)間的不同食鹽濃度中，氨基酸含量不同；在同一食鹽濃度的不同時(shí)間內(nèi)，氨基酸含量也不同，所以時(shí)間和食鹽濃度均可影響腐乳中氨基酸的含量，B正確；
C、經(jīng)過發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解為小分子的肽和氨基酸，C錯(cuò)誤；
D、高濃度食鹽能抑制微生物生長，但同樣會(huì)影響腐乳的口感，D錯(cuò)誤。
故選ACD。
22. 為了篩選高效分解纖維素的細(xì)菌，科學(xué)家進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)：①取白蟻的腸道菌懸液接種于CMC液體培養(yǎng)基A；②一段時(shí)間后，分瓶繼續(xù)用CMC液體培養(yǎng)基培養(yǎng)；③將培養(yǎng)液梯度稀釋并涂布于CMC固體培養(yǎng)基B；④將B中長出的菌落用牙簽點(diǎn)種至CMC固體培養(yǎng)基C的同一位置；⑤向培養(yǎng)基B中加入剛果紅，觀察透明圈出現(xiàn)情況。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. CMC培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，培養(yǎng)基A和B的區(qū)別在于有無瓊脂
B. 用CMC液體培養(yǎng)基培養(yǎng)和分瓶有利于增加纖維素分解菌的種類
C. 透明圈和菌落半徑的比值大小可反映纖維素酶的活性高低和含量多少，應(yīng)從B中挑取比值大的菌落用于培養(yǎng)
D. 培養(yǎng)基B起到鑒別作用，培養(yǎng)基C有利于對(duì)原菌種進(jìn)行挑選
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。
【詳解】A、為了篩選纖維素分解菌，則CMC培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，培養(yǎng)基A是液體培養(yǎng)基、B是固體培養(yǎng)基，則區(qū)別在于有無瓊脂，A正確；
B、用CMC液體培養(yǎng)基培養(yǎng)和分瓶有利于增加纖維素分解菌的數(shù)量，B錯(cuò)誤；
C、產(chǎn)生纖維素酶的菌落周圍出現(xiàn)透明圈，透明圈的越大的纖維素分解菌的分解能力越強(qiáng)，纖維素酶活力的越高，則透明圈直徑與菌落直徑比值大的菌落所產(chǎn)的纖維素酶活力高，則應(yīng)從B中挑取比值大的菌落用于培養(yǎng)，C正確；
D、培養(yǎng)基B加入剛果紅是鑒別培養(yǎng)基，起到鑒別作用，B中長出的菌落是分解纖維素的細(xì)菌，將B中長出的菌落用牙簽點(diǎn)種至CMC固體培養(yǎng)基C的同一位置，有利于對(duì)原菌種進(jìn)行挑選，D正確。
故選B。
23. 蘇云金桿菌是殺滅玉米螟的重要生物，滅蚊球孢菌具有殺滅蚊子的效能，某人將這兩種菌的原生質(zhì)體融合獲得既能殺蚊又能殺螟的新菌株，過程見下圖。微生物原生質(zhì)體的獲得等過程和植物的類似。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. ①試管中加入PEG目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合及細(xì)胞壁再生
B. 圖中過程與植物體細(xì)胞雜交過程相比，去壁方法、誘導(dǎo)融合的方法、所依據(jù)的原理均完全相同
C. 離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體
D. 圖中的甲實(shí)驗(yàn)和乙實(shí)驗(yàn)是指滅蚊實(shí)驗(yàn)和殺滅玉米螟實(shí)驗(yàn)，獲得的融合株染色體數(shù)目加倍
【答案】ABD
【解析】
【分析】植物體細(xì)胞雜交是指將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。這種技術(shù)在打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種等方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。
【詳解】A、①試管中加入PEG的目的是誘導(dǎo)A、B原生質(zhì)體融合，PEG不具有誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生的作用，A錯(cuò)誤；
B、去除細(xì)菌細(xì)胞壁和植物細(xì)胞的細(xì)胞壁都可以用酶解法，但所用酶的種類不同；圖中為細(xì)菌細(xì)胞的雜交過程，與植物體細(xì)胞雜交過程相比，誘導(dǎo)融合的方法不完全相同；圖中過程與植物體細(xì)胞雜交所依據(jù)的原理均有細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，但植物體細(xì)胞雜交還利用了植物細(xì)胞具有全能性的原理，將雜種細(xì)胞培育為雜種植物，B錯(cuò)誤；
C、溶菌酶可以溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁。離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細(xì)菌的細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體，C正確；
D、篩選到的融合株，還要從個(gè)體生物學(xué)水平檢測(cè)其是否具有殺滅玉米螟和殺滅蚊子的能力，所以圖中的甲實(shí)驗(yàn)和乙實(shí)驗(yàn)是指滅蚊實(shí)驗(yàn)和殺滅玉米螟實(shí)驗(yàn)，獲得的融合株既有蘇云金桿菌的基因，又有滅蚊球孢菌的基因，但這兩種生物是原核生物，不含染色體，D錯(cuò)誤。
故選ABD。
24. 如圖表示雙抗體夾心法檢測(cè)抗原的過程，該方法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，利用細(xì)胞工程技術(shù)制備的單克隆抗體能增強(qiáng)該過程的有效性。下列敘述正確的是（ ）
A. 圖示兩種抗體與樣品中待測(cè)抗原的結(jié)合位點(diǎn)不同
B. 溫度、pH等會(huì)影響雙抗體夾心法檢測(cè)抗原的結(jié)果
C. 用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原需要制備兩種能與抗原結(jié)合的單克隆抗體
D. 雙抗體夾心法與只使用單克隆抗體相比，能增加可識(shí)別抗原的種類
【答案】ABC
【解析】
【分析】據(jù)圖分析，固相抗體和抗原特異性結(jié)合，再與酶標(biāo)抗體結(jié)合，催化特定底物形成檢測(cè)產(chǎn)物。
【詳解】AC、據(jù)圖可知，用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原時(shí)需要用到與抗原不同位點(diǎn)結(jié)合的兩種抗體，因此用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原需要制備兩種能與抗原結(jié)合的單克隆抗體，AC正確；
B、據(jù)圖可知，雙抗體夾心法利用酶標(biāo)抗體中的酶水解相應(yīng)物質(zhì)，通過檢測(cè)水解產(chǎn)物的量來反映樣品中抗原的含量，由于酶活性受溫度、pH等因素的影響，因此溫度、pH等會(huì)影響雙抗體夾心法檢測(cè)抗原的結(jié)果，B正確；
D、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，雙抗體夾心法與只使用單克隆抗體相比，未增加識(shí)別抗原的種類，D錯(cuò)誤。
故選ABC。
25. 科學(xué)家將編輯基因的分子工具構(gòu)建到靶向侵染心肌細(xì)胞的病毒中，通過尾部靜脈注射到 成年小鼠體內(nèi)，成功編輯線粒體 DNA。該研究讓耳聾、癲癇、肌無力等線粒體遺傳病迎來治 愈的希望。下列說法正確的是（ ）
A 限制性內(nèi)切核酸酶能對(duì) DNA 分子進(jìn)行剪切和拼接
B. 線粒體遺傳病主要與能量代謝障礙有關(guān)
C. 侵染心肌細(xì)胞的病毒作為載體導(dǎo)入受體細(xì)胞
D. 耳聾等線粒體遺傳病表現(xiàn)為母系遺傳
【答案】BCD
【解析】
【分析】線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場(chǎng)所，是細(xì)胞的動(dòng)力車間。線粒體基因?qū)儆诩?xì)胞質(zhì)基因，表現(xiàn)為母系遺傳的特點(diǎn)。
【詳解】A、限制性內(nèi)切核酸酶能對(duì)DNA分子進(jìn)行剪切，但不能進(jìn)行拼接，DNA拼接需要DNA連接酶，A錯(cuò)誤；
B、線粒體是有氧呼吸的主要場(chǎng)所，是細(xì)胞的“動(dòng)力工廠”，線粒體遺傳病主要與能量代謝障礙有關(guān)，B正確；
C、侵染心肌細(xì)胞的病毒在該研究中作為運(yùn)載基因的載體，C正確；
D、受精卵中的細(xì)胞質(zhì)由卵細(xì)胞提供，線粒體中的DNA屬于細(xì)胞質(zhì)DNA，所以耳聾等線粒體遺傳病表現(xiàn)為母系遺傳，D正確。
故選BCD。
第Ⅱ卷 非選擇題（共45分）
26. 某小組利用塑料飲水杯、充氧泵、空氣過濾器、回旋式單向閥、硅膠管等材料制作的一種新型的果酒、果醋兩用發(fā)酵裝置，如下圖。請(qǐng)分析回答
（1）制作果酒、果醋的微生物的代謝類型分別是______型、______型。
（2）圖中______和不銹鋼氣泡石能為發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液進(jìn)行充氧操作，______能為通入的空氣進(jìn)行無菌過濾，從而對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液實(shí)現(xiàn)無菌換氣。
（3）釀制果酒時(shí)一般將溫度控制在______℃，圖示裝置一般要先通氣后緊閉軟管夾，通氣的目的是______。若要檢測(cè)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可從出料口取2mL發(fā)酵液加入試管，再滴加0.5mL______溶液，觀察是否呈現(xiàn)灰綠色。
（4）圖中排氣構(gòu)件由回旋式單向閥通過硅膠塞連接于排氣口而成，使用前先在單向閥內(nèi)裝入約1/3體積冷卻的開水，這樣處理的主要好處有______。（至少答出兩點(diǎn)）
【答案】（1） ①. 異養(yǎng)兼性厭氧 ②. 異養(yǎng)好氧
（2） ①. 充氧泵 ②. 空氣過濾器
（3） ①. 18～30 ②. 有利于酵母菌的繁殖 ③. 酸性重鉻酸鉀
（4）及時(shí)排出氣體、防止外界雜菌的污染、通過氣泡的生成了解發(fā)酵狀況、排氣不需要人工控制等
【解析】
【分析】1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖； （2）在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳;
2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的葡萄糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷?br>【小問1詳解】
參與果酒制作的微生物是酵母菌，為異養(yǎng)兼性厭氧型真菌，參與果醋制作的微生物是醋酸菌，為異養(yǎng)好氧細(xì)菌；
【小問2詳解】
由圖示裝置可知，通電后的充氧泵和不銹鋼氣泡石能為發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液進(jìn)行充氧操作，空氣過濾器能為通入的空氣進(jìn)行無菌過濾，從而對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液實(shí)現(xiàn)無菌換氣；
【小問3詳解】
酵母菌發(fā)酵的最適溫度為18~30℃；通氣目的是為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；用酸性重鉻酸鉀可以檢測(cè)酒精，操作步驟為從出料口取2mL發(fā)酵液加入試管，再滴加酸性重鉻酸鉀溶液，觀察溶液是否呈現(xiàn)灰綠色；
【小問4詳解】
排氣構(gòu)件由回旋式單向閥通過硅膠塞連接于排氣口而成，使用前先在單向閥內(nèi)裝入約1/3體積冷卻的開水，利用水封的原理，不僅能將發(fā)酵過程產(chǎn)生的氣體及時(shí)排出發(fā)酵罐，并通過單向閥中氣泡的生成了解發(fā)酵狀況，還能有效隔絕外界空氣對(duì)發(fā)酵介質(zhì)的氧化及外界雜菌的污染，同時(shí)排氣不需要人工控制，使用方便。
27. 某種物質(zhì)X（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解X。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解X的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過程中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，甲的組分為無機(jī)鹽、水和X，乙的組分為無機(jī)鹽、水、X和Y。請(qǐng)分析并回答下列問題：
（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用_____方法進(jìn)行滅菌，乙培養(yǎng)基中的Y物質(zhì)是_____，按用途分，甲、乙培養(yǎng)基均屬于_____培養(yǎng)基。
（2）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，應(yīng)該在滅菌_____（填“前”或“后”）進(jìn)行操作。倒平板時(shí)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在_____附近進(jìn)行，接種后的培養(yǎng)皿需_____放于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（3）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布0．1 mL稀釋后的菌液，且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè)，則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋_____倍。
（4）在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的X超過某一濃度時(shí)，某菌株對(duì)X的降解量反而下降，其原因可能是_____。
（5）為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是_____。
【答案】（1） ①. 高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌） ②. 凝固劑（或瓊脂） ③. 選擇
（2） ①. 前 ②. 酒精燈火焰 ③. 倒置
（3）104 （4）X濃度超過某值時(shí)會(huì)抑制菌株生長（或X濃度過高，菌株失水，代謝能力下降）
（5）單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種的空白培養(yǎng)皿（含培養(yǎng)基）放入相同且適宜條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落生成
【解析】
【分析】分析題圖：①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋，②為接種到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以X為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，其中Y為瓊脂，④為挑取單菌落接種到培養(yǎng)基上，⑤以X為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)一步篩選。
【小問1詳解】
滅菌的方法包括灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌，而培養(yǎng)基一般使用高壓蒸汽滅菌法。微生物的分離和篩選一般使用固體培養(yǎng)基，需要加入瓊脂，故物質(zhì)Y是瓊脂。由于甲、乙培養(yǎng)基都是以X為唯一碳源和氮源的培養(yǎng)基，故按用途劃分，二者都屬于選擇培養(yǎng)基。
【小問2詳解】
制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，需要在滅菌前調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，以免調(diào)節(jié)pH過程中又帶來雜菌的污染。倒平板時(shí)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。為防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，需要將其倒置培養(yǎng)。
【小問3詳解】
利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，在每個(gè)平板上涂布0.1 mL稀釋后的菌液，則有200×a÷0.1=2×107，則稀釋倍數(shù)a=104。
【小問4詳解】
在步驟⑤的篩選過程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的X超過某一濃度時(shí)，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌細(xì)胞由于滲透作用失水過多，導(dǎo)致活性喪失，即X濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株生長。
【小問5詳解】
為了檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是將未接種的培養(yǎng)基在相同且適宜的條件下培養(yǎng)，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，若有菌落產(chǎn)生則表示培養(yǎng)基滅菌不合格，反之合格。
28. 三白草和魚腥草是不同屬的兩種藥用植物，二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被用作“藥對(duì)”?？蒲腥藛T欲將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到個(gè)體生長或生產(chǎn)過程，并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠化生產(chǎn)，具體操作如圖1。進(jìn)一步研究不同的原生質(zhì)體密度對(duì)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合率的影響，結(jié)果如圖2。
（1）圖1中過程①通常采用________________酶去除細(xì)胞壁。過程②可體現(xiàn)細(xì)胞膜具有_____________特點(diǎn)，該過程除了可利用聚乙二醇誘導(dǎo)融合外，還可采用的化學(xué)法有_______等，雜種原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是_____________。
（2）用紅色、綠色熒光分別標(biāo)記三白草、魚腥草原生質(zhì)體后，誘導(dǎo)融合（帶熒光的原生質(zhì)體仍能融合和再生），在熒光顯微鏡下會(huì)看到_______種顏色的融合細(xì)胞（僅考慮兩兩融合情況），隨后選擇帶________________的雜種原生質(zhì)體。
（3）圖1獲得代謝產(chǎn)物的過程屬于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，主要應(yīng)用的技術(shù)是__________（填“植物組織培養(yǎng)”或“植物細(xì)胞培養(yǎng)”）。
（4）由圖2可知，促進(jìn)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度約為_____________個(gè)/mL。
【答案】（1） ①. 纖維素酶、果膠酶 ②. 一定的流動(dòng)性##流動(dòng)性 ③. 高 Ca2+ -高pH融合法 ④. 再生出細(xì)胞壁
（2） ①. 3 ②. 紅色和綠色熒光
（3）植物細(xì)胞培養(yǎng) （4）1×10 6
【解析】
【分析】分析圖可知，圖1表示三白草和魚腥草體細(xì)胞雜交過程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③為脫分化形成愈傷組織，④為提取代謝產(chǎn)物。圖2柱形圖中，隨著原生質(zhì)體密度增大，雙核異核融合體比例先升高后降低，其中在1×106個(gè)·mL-1時(shí)， 比例最高。
【小問1詳解】
植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，據(jù)圖示可知，過程①通過酶解法去除細(xì)胞壁獲取原生質(zhì)體，所用酶是纖維素酶和果膠酶。過程②為原生質(zhì)體融合，原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性的特點(diǎn)。誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法有利用化學(xué)誘導(dǎo)劑PEG（（聚乙二醇））誘導(dǎo)融合，還可以用高 Ca2+ -高pH融合法誘導(dǎo)融合。雜種原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁形成雜種細(xì)胞。
【小問2詳解】
三白草原生質(zhì)體被紅色熒光標(biāo)記，魚腥草原生質(zhì)體被綠色熒光標(biāo)記，誘導(dǎo)融合后，在熒光顯微鏡下可觀察到3種顏色的融合細(xì)胞：紅色和綠色熒光的融合細(xì)胞（一個(gè)三白草原生質(zhì)體與一個(gè)魚腥草原生質(zhì)體融合合）、只有紅色熒光的融合細(xì)胞（兩個(gè)三白草原生質(zhì)體融合）、只有綠色熒光的融合細(xì)胞（兩個(gè)魚腥草原生質(zhì)體融合）。
【小問3詳解】
圖1獲得代謝產(chǎn)物的過程屬于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，主要應(yīng)用的技術(shù)是植物細(xì)胞培養(yǎng)。這種技術(shù)涉及在離體條件下，將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行震蕩培養(yǎng)，從而得到分散成游離的懸浮細(xì)胞。通過繼代培養(yǎng)，這些細(xì)胞能夠增殖，進(jìn)而獲得大量的細(xì)胞群體。這種技術(shù)使得我們可以在體外有效地生產(chǎn)所需的代謝產(chǎn)物，實(shí)現(xiàn)工廠化、規(guī)?；纳a(chǎn)目標(biāo)。
【小問4詳解】
由圖2柱形圖可知，在密度為1×106個(gè)·mL-1時(shí)， 雙核異核融合體比例最高，說明促進(jìn)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度為1×106個(gè)·mL-1。
29. 人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白Ⅱ（cTnl）和肌鈣蛋白C（cTnC），其中cTnl在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnl的單克隆抗體，科研人員完成了以下過程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問題：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的______，以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要，將培養(yǎng)的細(xì)胞置于含有______的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（2）每隔2周用cTnl作為抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目是______。取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，不同于植物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)因素是______。
（3）將獲得的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，核酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑（如下圖）。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤際、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”作為選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。
融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中______（填“有”或“無”）骨髓瘤細(xì)胞生長，說明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。雜交瘤細(xì)胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是可以通過______（全合成途徑/補(bǔ)救合成途徑）合成DNA.
（4）甲、乙、丙中，只含雜交細(xì)胞的是______，②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得______。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是______，______，______。
【答案】（1） ①. 血清 ②. 95%空氣和5%CO2
（2） ①. 加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞 ②. 滅活的病毒
（3） ①. 無 ②. 補(bǔ)救合成途徑
（4） ①. 乙和丙 ②. 能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞 ③. 準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異 ④. 與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合 ⑤. 可以大量制備
【解析】
【分析】圖示為單克隆抗體的制備過程，首先給小鼠注射cTnI的目的是獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的漿細(xì)胞，促使?jié){細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，所得到的融合細(xì)胞就可能大量增殖，產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。但是甲中有多種融合后的細(xì)胞（漿細(xì)胞與漿細(xì)胞融合后的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的細(xì)胞，漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的細(xì)胞等）和未成功融合的細(xì)胞（漿細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞），①過程是用特定的選擇培養(yǎng)基篩選，未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞（漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合后的細(xì)胞）才能生長；所以得到的乙就是雜交瘤細(xì)胞，由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，因此乙中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞，所以要經(jīng)過②過程，就是在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞，丙代表的是能分泌抗cTnI的抗體的雜交瘤細(xì)胞。
【小問1詳解】
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營養(yǎng)成分外，為滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)對(duì)營養(yǎng)的需要，往往還需加入一定量的動(dòng)物血清，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含95%空氣和5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。
【小問2詳解】
每隔2周用cTnI 作為抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞，隨后取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有物理法（離心法、電融合法）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活病毒誘導(dǎo)）等，其中滅活病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式。
【小問3詳解】
制備單克隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶，無法通過補(bǔ)救合成途徑生成DNA，且物質(zhì)A阻斷了全合成途徑，故在HAT培養(yǎng)基中骨髓瘤細(xì)胞無法增殖，一段時(shí)間后在HAT培養(yǎng)基上無法生長。雜交瘤細(xì)胞中同時(shí)含有B淋巴細(xì)胞的全合成途徑和補(bǔ)救合成途徑，在HAT培養(yǎng)基雜交瘤細(xì)胞可以利用補(bǔ)救合成途徑合成DNA，可以在HAT培養(yǎng)基上大量繁殖、生長。
【小問4詳解】
圖中①②過程依次表示單克隆抗體制備過程中的兩次篩選，其中①過程第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，②過程第二次篩選是通過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)篩選出能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。因此，甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是乙和丙；②過程的目的是篩選獲得能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。 單克隆抗體具有能準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異、與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并可以大量制備的優(yōu)點(diǎn)。
30. 胎盤異常是動(dòng)物克隆失敗的常見原因。中國科學(xué)院探索出一種新的解決方法：將體細(xì)胞核移植胚胎（SCNT）的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM），注入到去除ICM的胚胎（ICSI，由單精子注入卵細(xì)胞形成）囊胚腔中，實(shí)現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞替代，成功克隆出一只健康的雄性恒河猴。
（1）培育過程應(yīng)用了多種技術(shù)，其中動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)是______。
（2）過程①中將該細(xì)胞培養(yǎng)到______期，普遍用______法，可完成去核操作。
（3）過程②單精子注射前，解凍的精子需要離心后進(jìn)行______處理。與正常受精過程相比，單精子注射的優(yōu)點(diǎn)為卵子的________、________（填結(jié)構(gòu)名稱）無需發(fā)生生理反應(yīng)，即可防止多精入卵。
（4）為保證胚胎的質(zhì)量，胚胎移植前能否利用重組胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞的DNA進(jìn)行恒河猴遺傳病篩查，請(qǐng)做出判斷并說明理由________，____________。
【答案】（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
（2） ①. MII ②. 顯微操作
（3） ①. 獲能 ②. 透明帶 ③. 卵細(xì)胞膜
（4） ①. 不能 ②. 重組胚胎完成了滋養(yǎng)層細(xì)胞替代，不能用滋養(yǎng)層細(xì)胞來進(jìn)行DNA分析
【解析】
【分析】胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。
【小問1詳解】
動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。
【小問2詳解】
過程①中該細(xì)胞培養(yǎng)到MII期后，普遍用顯微操作法，可完成去核操作。
【小問3詳解】
精子獲能后才具備與卵細(xì)胞受精的能力，因此過程②單精子注射前，解凍的精子需要先進(jìn)行獲能處理。受精作用中，為防止多精入卵的兩道屏障為透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)，因此與正常受精過程相比，單精子注射的優(yōu)點(diǎn)為卵子的透明帶和卵細(xì)胞膜無需發(fā)生生理反應(yīng)，即可防止多精子入卵。
【小問4詳解】
由題干信息可知，將體細(xì)胞核移植胚胎（SCNT）的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM），注入到去除ICM的胚胎（ICSI，由單精子注入卵細(xì)胞形成）囊胚腔中，實(shí)現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞替代，成功克隆出一只健康的雄性恒河猴。由于重組胚胎完成了滋養(yǎng)層細(xì)胞替代，不能用滋養(yǎng)層細(xì)胞來進(jìn)行DNA分析進(jìn)行恒河猴遺傳病篩查。
配方1鹽濃度6%
配方2鹽濃度8%
水（mL）
2500
2500
食鹽（g）
150
200
白菜（g）
812
812
組分
胰化蛋白胨
酵母提取物
NaCl
H2O
含量（g）
10
5
10
定容至1000mL
限制酶名稱
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)
限制酶名稱
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)
注：Y=C或T，R=A或C
BglII
A↓GATCT
KpnI
CCTAC↓C
EcRI
G↓AATTC
MbI
↓GATC
HindI
GTY↓RAC
SmaI
CCC↓GGG

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