第 I 卷 選擇題（共 55 分）
一、單項(xiàng)選擇題：本題共 20 小題，每小題 2 分，共 40 分。
1．下列與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相關(guān)的描述，正確的是（ ）
A．傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)是利用不同原核生物產(chǎn)生不同代謝物的原理，生產(chǎn)人們需要的產(chǎn)物
B．發(fā)酵是在適宜的條件下，將原料通過(guò)微生物的無(wú)氧呼吸轉(zhuǎn)化為人類所需產(chǎn)物的過(guò)程
C．谷物、水果等原料可為微生物的生長(zhǎng)提供各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，發(fā)酵前無(wú)需進(jìn)行滅菌處理
D．與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)酵工程要接種通過(guò)基因工程育種獲得的優(yōu)良菌種
2．《齊民要術(shù)》中有關(guān)于釀酒的記載：“浸曲三日，如魚眼湯沸，酸米。其米絕令精細(xì)”；有關(guān)“動(dòng)酒?。ā　?br>同‘醋’）法”的釀醋工藝，“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當(dāng)臭，衣（指菌膜）生，
勿得怪也，但停置，勿移動(dòng)，撓攪之。數(shù)十日，醋成”。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．“用水三斗”是防止酒精濃度過(guò)高抑制酵母菌的繁殖
B．各地釀酒的原材料不同，但發(fā)酵過(guò)程中起主要作用的均為酵母菌
C．“動(dòng)酒酢法”的原理是醋酸菌在 O2 充足、糖源缺乏時(shí)將酒精轉(zhuǎn)化為醋酸
D．傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作過(guò)程中，往往不接種菌種，而是利用天然存在的菌種
3．研究人員探究了不同鹽濃度對(duì)泡菜發(fā)酵過(guò)程中乳酸菌含量的影響。表格為兩種鹽濃度下泡菜的配方，圖
像為乳酸菌相對(duì)濃度隨發(fā)酵時(shí)間變化曲線。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
配方 1 鹽濃度 6% 配方 2 鹽濃度 8%
水（mL） 2500 2500
食鹽（g） 150 200
白菜（g） 812 812
A．需將食鹽溶于清水，鹽水煮沸冷卻后使用
B．為保證發(fā)酵順利進(jìn)行，兩組需定期進(jìn)行通氣、排氣且時(shí)長(zhǎng)相等
C．與 6%的鹽濃度相比，8%的鹽濃度不利于乳酸菌數(shù)目的增多
D．還可跟蹤檢測(cè)兩個(gè)配方發(fā)酵過(guò)程中亞硝酸鹽含量對(duì)兩種配方進(jìn)行比較
4．藍(lán)莓酒和藍(lán)莓醋被稱為“液體黃金”“口服化妝品”等。下圖是以鮮藍(lán)莓為原料天然發(fā)酵制作藍(lán)莓酒和藍(lán)莓
醋的過(guò)程簡(jiǎn)圖。下列敘述正確的是（ ）
A．去除藍(lán)莓枝梗后及時(shí)沖洗干凈，目的是防止雜菌污染
B．過(guò)程③在氧氣不足但糖源充足的條件下可直接發(fā)酵為藍(lán)莓醋
C．在過(guò)程④時(shí)，榨出的藍(lán)莓汁需經(jīng)過(guò)濕熱滅菌后才能密閉發(fā)酵
D．過(guò)程⑤中發(fā)揮作用的微生物的最適生長(zhǎng)溫度為 30~35℃
5．發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品或直接把微
生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（ ）
A．在發(fā)酵之前需要利用固體培養(yǎng)基對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)
B．在酸性條件下可以利用谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵得到谷氨酸
C．發(fā)酵結(jié)束后，可通過(guò)過(guò)濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身
D．通過(guò)發(fā)酵工程可以從微生物細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白，用來(lái)生產(chǎn)微生物飼料
6．某生物實(shí)驗(yàn)室為培養(yǎng)大腸桿菌制備了 LB 培養(yǎng)基，其營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成如表。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
組分 胰化蛋白胨 酵母提取物 NaCl H2O
含量（g） 10 5 10 定容至 1000mL
A．該培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌效果最好
B．NaCl 既可以提供無(wú)機(jī)鹽，又可以調(diào)節(jié)滲透壓
C．酵母提取物可提供碳源、磷酸鹽和維生素等營(yíng)養(yǎng)
D．滅菌前需用稀鹽酸將培養(yǎng)基的 pH 調(diào)至 3.6~4.6
7．苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯
酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，如圖為實(shí)驗(yàn)室
的部分操作步驟，相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．本實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源
B．步驟④中接種環(huán)需在每次劃線前灼燒處理，接種后的平板需倒置培養(yǎng)
C．滅菌處理后的土壤樣品經(jīng)②③④步驟操作后可獲得純化的苯酚降解菌菌落
D．可以通過(guò)逐步提高培養(yǎng)基中苯酚的濃度，獲得高效苯酚降解菌
8．研究人員擬從新鮮蚯蚓糞中分離篩選出對(duì)番茄枯萎病有抑制效果的拮抗細(xì)菌。將蚯蚓糞加入無(wú)菌水中制
成懸浮液，利用甲培養(yǎng)基進(jìn)行篩選純化后，將獲得的不同菌株分別接種至乙培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，48h 后進(jìn)行“平
板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)”：在丙培養(yǎng)基的空白平板一側(cè)放置一直徑為 5mm 的番茄枯萎病菌的菌塊，在平行另一側(cè)放置
相同大小的濾紙片，如下圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．Ⅰ過(guò)程使用的接種方法是平板劃線法，I~Ⅲ過(guò)程均需要無(wú)菌操作
B．對(duì)照組濾紙片用無(wú)菌水處理，實(shí)驗(yàn)組濾紙片用拮抗菌菌液處理
C．應(yīng)培養(yǎng)至對(duì)照組病菌菌落長(zhǎng)滿丙培養(yǎng)基時(shí)開始測(cè)量并計(jì)算抑制率
D．選擇丙培養(yǎng)基上直徑大的病菌菌落對(duì)應(yīng)的拮抗菌作為目的菌
9．天冬氨酸缺陷型菌株不能合成天冬氨酸，必須從外界環(huán)境中獲取天冬氨酸才能生長(zhǎng)繁殖。影印法（部分
過(guò)程如圖所示）可用于天冬氨酸缺陷型菌株的篩選，其中基本培養(yǎng)基中不含氨基酸，完全培養(yǎng)基中含所有
種類的氨基酸；轉(zhuǎn)印是將揭起的絲絨布平移到培養(yǎng)基上，使吸附的菌體“印”在培養(yǎng)基平板上。下列敘述正確
的是（ ）
A．培養(yǎng)皿 1 中的培養(yǎng)基是基本培養(yǎng)基
B．過(guò)程①和過(guò)程②應(yīng)使用相同的接種工具
C．過(guò)程②中，應(yīng)將揭起的絲絨布先轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)皿 2 再轉(zhuǎn)印至培養(yǎng)皿 3 中
D．菌落 A 可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落
10．科研人員用黃曲霉毒素 B（AFB1）的結(jié)構(gòu)類似物——豆香素（C9H6O2）篩選出能高效降解 AFB1 的菌
株，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下圖中的①—④。已知菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。
對(duì)降解菌的培養(yǎng)液進(jìn)行離心，發(fā)現(xiàn)上清液中 AFB1 的殘留率明顯低于菌懸液中的殘留率。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)上清液
中含有蛋白質(zhì) K，為驗(yàn)證蛋白質(zhì) K 是降解 AFB1 的有效成分，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)⑤：在 A 中加入水解蛋白質(zhì) K 的
酶、B 中加等量的蒸餾水，充分反應(yīng)后在兩試管中均加入等量的豆香素（C9H6O2）。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．1 號(hào)培養(yǎng)基屬于選擇性培養(yǎng)基，通常需要提前在 121℃下進(jìn)行濕熱滅菌
B．步驟③使用稀釋涂布平板法，目的是篩選出能降解黃曲霉毒素的單菌落
C．實(shí)驗(yàn)⑤的結(jié)果是 A 試管中豆香素含量基本不變，B 試管中豆香素含量減少
D．蛋白質(zhì) K 屬于降解菌產(chǎn)生的胞外分泌物，可以分解培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)
11．通過(guò)植物細(xì)胞工程對(duì)光果甘草進(jìn)行培養(yǎng)以獲得藥物甘草西定，過(guò)程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是
（ ）
A．過(guò)程③通常先在生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素比例高的培養(yǎng)基中培養(yǎng)
B．過(guò)程④常用射線或化學(xué)物質(zhì)處理后即可獲得大量目的植株
C．過(guò)程⑥中甘草西定可通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)獲得，應(yīng)將愈傷組織細(xì)胞在液體培養(yǎng)基培養(yǎng)
D．所得三種植株中乙和丙的遺傳信息與甲相同，植株丁和甲是同一物種
12．下圖是利用甲（高產(chǎn)）、乙（耐鹽）兩種植物的各自優(yōu)勢(shì)，通過(guò)植物細(xì)胞工程技術(shù)培育高產(chǎn)、耐鹽的雜
種植株的流程圖。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．進(jìn)行 a 處理時(shí)，需要用到纖維素酶和果膠酶
B．b 之前的誘導(dǎo)過(guò)程除 PEG 之外還可以使用滅活的病毒
C．b 之后得到的愈傷組織細(xì)胞與正常細(xì)胞相比沒(méi)有細(xì)胞壁
D．c 是具有耐鹽性狀的幼芽，c 即可直接發(fā)育為耐鹽植株
13．科學(xué)家通過(guò)體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞，獲得了類似于胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞，稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS 細(xì)
胞）。iPS 細(xì)胞可培育出不同細(xì)胞（過(guò)程如圖所示），用于治療阿爾茲海默癥、心血管等疾病。下列相關(guān)敘述
錯(cuò)誤的是（ ）
A．圖示過(guò)程說(shuō)明人體內(nèi)細(xì)胞分化具有可逆性
B．培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時(shí)，需要 CO2 培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)
C．病人的成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)而成的 iPS 細(xì)胞用于自身疾病的治療，可避免免疫排斥
D．iPS 細(xì)胞中可能含有 c-Myc、Klf4、Sx2 和 Oct-3/4 表達(dá)的蛋白質(zhì)
14．抗體—藥物偶聯(lián)物（ADC）通過(guò)采用特定技術(shù)將具有生物活性的小分子藥物連接到能特異性識(shí)別腫瘤
細(xì)胞的單克隆抗體上，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷。ADC 的結(jié)構(gòu)及其發(fā)揮作用的機(jī)理如圖所示，下列有
關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．單克隆抗體制備過(guò)程中通常將免疫后得到的 B 淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合
B．用 96 孔板培養(yǎng)和多次篩選雜交瘤細(xì)胞后，在體外大規(guī)模培養(yǎng)可獲得單克隆抗體
C．ADC 以胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，這體現(xiàn)了細(xì)胞膜的功能特點(diǎn)具有一定的流動(dòng)性
D．ADC 在腫瘤細(xì)胞里被溶酶體裂解，釋放藥物，使腫瘤細(xì)胞死亡
15．Trp-2 是一種跨膜糖蛋白，在多種腫瘤組織中高表達(dá)，參與細(xì)胞內(nèi)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而調(diào)控細(xì)胞的增
殖和轉(zhuǎn)移。Trp-2 抗體和細(xì)胞毒素類藥物 SN-38 構(gòu)成偶聯(lián)物（SG）可以有效治療乳腺癌，下圖為 SG 的制
備過(guò)程。下列相關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．推測(cè)腫瘤組織表達(dá) Trp-2 糖蛋白可促進(jìn)細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移
B．①過(guò)程可用滅活的病毒使細(xì)胞膜的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)分子重新排布
C．③過(guò)程通過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)獲得分泌抗 Trp-2 抗體的細(xì)胞
D．④過(guò)程形成 SG 通過(guò) SN-38 特異性識(shí)別 Trp-2 并殺傷乳腺癌細(xì)胞
16．非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的體細(xì)胞核移植非常困難，我國(guó)科學(xué)家經(jīng)過(guò)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，成功培育出了體細(xì)胞克隆猴，
流程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．體細(xì)胞比胚胎細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)更容易成功
B．采集的卵母細(xì)胞應(yīng)培養(yǎng)至 MⅡ期
C．組蛋白甲基化水平降低可提高胚胎發(fā)育率
D．組蛋白乙?；缴呖商岣吲咛グl(fā)育率
17．三親嬰兒技術(shù)是一種輔助生殖技術(shù)，旨在幫助那些有線粒體疾病風(fēng)險(xiǎn)的女性生育健康的孩子。其培育
過(guò)程如圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．卵子去核實(shí)質(zhì)是指去除細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物
B．供體精子需獲能后才能與卵母細(xì)胞發(fā)生受精作用
C．該技術(shù)可避免母親線粒體 DNA 中的致病基因遺傳給后代
D．三親嬰兒的培育利用了核移植技術(shù)，屬于無(wú)性生殖
18．EPO 是人體腎臟分泌的一種肽類激素，能使骨髓生成紅細(xì)胞的量增加，提高血紅蛋白含量，增加血液
攜氧、供氧能力，是臨床上一種治療腎性貧血的藥物。下圖是采用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來(lái)生產(chǎn) EPO
的過(guò)程。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．在③之前，可以對(duì)精子用含有 Ca2+載體的獲能液處理，使其獲得受精的能量
B．在③過(guò)程，精子需要依次穿越卵母細(xì)胞的透明帶和卵細(xì)胞膜
C．在⑥之前，需要割取囊胚的部分滋養(yǎng)層細(xì)胞做 DNA 分析，鑒定性別
D．甲乙丙丁是同一物種，但只有丁獲得了人類的 EPO 基因
19．下表所示為常用的限制性內(nèi)切核酸酶（限制酶）及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
限制酶名稱 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) 限制酶名稱 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) 注：Y=C 或 T，R=A 或 C
BglII A↓GATCT KpnI CCTAC↓C
EcRI G↓AATTC MbI ↓GATC
HindI GTY↓RAC SmaI CCC↓GGG
A．限制酶的作用底物都是雙鏈 DNA，都能切開磷酸二酯鍵
B．BglⅡ和 MbI 兩種限制酶切后可形成相同的黏性末端
C．SmaI 切 DNA 后生成的末端只能用 E．cliDNA 連接酶連接
D．一種限制酶可能識(shí)別多種核苷酸序列
20．下列關(guān)于“DNA 的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）
A．可選用新鮮的香蕉、菠菜、豬肝等作為實(shí)驗(yàn)材料
B．研磨液中 2ml/L 的 NaCl 溶液有利于溶解 DNA 和去除雜質(zhì)
C．過(guò)濾液放入 4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制 DNA 酶的活性
D．DNA 溶液中加入 4mL 二苯胺試劑后即可出現(xiàn)藍(lán)色
二、不定項(xiàng)選擇題：本題共 5 小題，每小題 3 分，共 15 分。
21．腐乳是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品，具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。某科研機(jī)構(gòu)研究了腐乳生產(chǎn)過(guò)程中不同濃度的食鹽
對(duì)腐乳中氨基酸含量的影響。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A．腐乳生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)揮主要作用的微生物是酵母菌
B．時(shí)間和食鹽濃度均可影響腐乳中氨基酸的含量
C．經(jīng)過(guò)發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)全部分解為小分子肽
D．食鹽濃度越高對(duì)微生物抑制作用越強(qiáng)，制作腐乳越有利
22．為了篩選高效分解纖維素的細(xì)菌，科學(xué)家進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)：①取白蟻的腸道菌懸液接種于 CMC 液體培
養(yǎng)基 A；②一段時(shí)間后，分瓶繼續(xù)用 CMC 液體培養(yǎng)基培養(yǎng)；③將培養(yǎng)液梯度稀釋并涂布于 CMC 固體培養(yǎng)
基 B；④將 B 中長(zhǎng)出的菌落用牙簽點(diǎn)種至 CMC 固體培養(yǎng)基 C 的同一位置；⑤向培養(yǎng)基 B 中加入剛果紅，
觀察透明圈出現(xiàn)情況。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
A．CMC 培養(yǎng)基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，培養(yǎng)基 A 和 B 的區(qū)別在于有無(wú)瓊脂
B．用 CMC 液體培養(yǎng)基培養(yǎng)和分瓶有利于增加纖維素分解菌的種類
C．透明圈和菌落半徑的比值大小可反映纖維素酶的活性高低和含量多少，應(yīng)從 B 中挑取比值大的菌落用于
培養(yǎng)
D．培養(yǎng)基 B 起到鑒別作用，培養(yǎng)基 C 有利于對(duì)原菌種進(jìn)行挑選
23．蘇云金桿菌是殺滅玉米螟的重要生物，滅蚊球孢菌具有殺滅蚊子的效能，某人將這兩種菌的原生質(zhì)體
融合獲得既能殺蚊又能殺螟的新菌株，過(guò)程見下圖。微生物原生質(zhì)體的獲得等過(guò)程和植物的類似。下列敘
述錯(cuò)誤的是（ ）
A．①試管中加入 PEG 的目的是誘導(dǎo) A、B 原生質(zhì)體融合及細(xì)胞壁再生
B．圖中過(guò)程與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程相比，去壁、誘導(dǎo)融合方法、所依據(jù)的原理完全相同
C．離心洗滌后向培養(yǎng)液中加入的酶可能是溶菌酶，目的是溶解細(xì)菌細(xì)胞壁以獲得原生質(zhì)體
D．圖中的甲實(shí)驗(yàn)和乙實(shí)驗(yàn)是指滅蚊實(shí)驗(yàn)和殺滅玉米螟實(shí)驗(yàn)，獲得的融合株染色體數(shù)目加倍
24．如圖表示雙抗體夾心法檢測(cè)抗原的過(guò)程，該方法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，利用細(xì)胞工程
技術(shù)制備的單克隆抗體能增強(qiáng)該過(guò)程的有效性。下列敘述正確的是（ ）
A．圖示兩種抗體與樣品中待測(cè)抗原的結(jié)合位點(diǎn)不同
B．溫度、pH 等會(huì)影響雙抗體夾心法檢測(cè)抗原的結(jié)果
C．用雙抗體夾心法檢測(cè)抗原需要制備兩種能與抗原結(jié)合的單克隆抗體
D．雙抗體夾心法與只使用單克隆抗體相比，能增加可識(shí)別抗原的種類
25．科學(xué)家將編輯基因的分子工具構(gòu)建到靶向侵染心肌細(xì)胞的病毒中，通過(guò)尾部靜脈注射成年小鼠體內(nèi)，
成功編輯線粒體 DNA。該研究讓耳聾、癲癇、肌無(wú)力等線粒體遺傳病迎來(lái)治愈的希望。下列說(shuō)法正確的是
（ ）
A．限制性內(nèi)切核酸酶能對(duì) DNA 分子進(jìn)行剪切和拼接
B．線粒體遺傳病主要與能量代謝障礙有關(guān)
C．侵染心肌細(xì)胞的病毒作為載體導(dǎo)入受體細(xì)胞
D．耳聾等線粒體遺傳病表現(xiàn)為母系遺傳
第 II 卷 非選擇題（共 45 分）
26．（9 分）某小組利用塑料飲水杯、充氧泵、空氣過(guò)濾器、回旋式單向閥、硅膠管等材料制作的一種新型
的果酒、果醋兩用發(fā)酵裝置，如下圖。請(qǐng)分析回答
（1）制作果酒、果醋的微生物的代謝類型分別是______型、______型。
（2）圖中______和不銹鋼氣泡石能為發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液進(jìn)行充氧操作，______能為通入的空氣進(jìn)行無(wú)菌過(guò)
濾，從而對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液實(shí)現(xiàn)無(wú)菌換氣。
（3）釀制果酒時(shí)一般將溫度控制在______℃，圖示裝置一般要先通氣后緊閉軟管夾，通氣的目的是______。
若要檢測(cè)果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可從出料口取 2mL 發(fā)酵液加入試管，再滴加 0.5mL______溶液，觀
察酸性條件下是否呈現(xiàn)灰綠色。
（4）圖中排氣構(gòu)件由回旋式單向閥通過(guò)硅膠塞連接于排氣口而成，使用前先在單向閥內(nèi)裝入約 1/3 體積冷
卻的開水，這樣處理的主要好處有______，______。（至少答出兩點(diǎn)）
27．（9 分）某種物質(zhì) X（一種含有 C、H、N 的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降
解 X。研究人員按照下圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解 X 的細(xì)菌菌株。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需要甲、乙兩
種培養(yǎng)基，甲的組分為無(wú)機(jī)鹽、水和 X，乙的組分為無(wú)機(jī)鹽、水、X 和 Y。請(qǐng)分析并回答下列問(wèn)題：
（1）實(shí)驗(yàn)時(shí)，一般對(duì)配制的培養(yǎng)基采用______法進(jìn)行滅菌，乙培養(yǎng)基中的 Y 物質(zhì)是______，按用途分，甲、
乙培養(yǎng)基均屬于______培養(yǎng)基。
（2）制備實(shí)驗(yàn)所需的培養(yǎng)基時(shí)，需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的 pH，應(yīng)該在滅菌______（填“前”或“后”）進(jìn)行操作。倒
平板時(shí)為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在______附近進(jìn)行，接種后的培養(yǎng)皿需______放于 37℃
恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
（3）實(shí)驗(yàn)中初步估測(cè)搖瓶 M 中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為 2×107 個(gè)/mL，若要在每個(gè)平板上涂布 0.1mL 稀釋后的菌液，
且保證每個(gè)平長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過(guò) 200 個(gè)，至少應(yīng)將搖瓶 M 中的菌液稀釋______倍。
（4）在步驟⑤的篩選過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)當(dāng)培養(yǎng)基中的 X 超過(guò)某一濃度時(shí)，某菌株對(duì) X 的降解量反而下降，其
原因可能是______。
（5）為檢驗(yàn)培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿滅菌是否合格，可采取的措施是______。
28．（8 分）三白草和魚腥草是不同屬的兩種藥用植物，二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被用作“藥對(duì)”。
科研人員欲將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到個(gè)體生長(zhǎng)或生產(chǎn)過(guò)程，并實(shí)現(xiàn)有效成分
的工廠化生產(chǎn)，具體操作如圖 1。進(jìn)一步研究不同的原生質(zhì)體密度對(duì)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合率的影響，
結(jié)果如圖 2。
（1）圖 1 中過(guò)程①通常采用______酶去除細(xì)胞壁。過(guò)程②可體現(xiàn)細(xì)胞膜具有______特點(diǎn)，該過(guò)程除了可利
用聚乙二醇誘導(dǎo)融合外，還可采用的化學(xué)法有______等，雜種原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是______。
（2）用紅色、綠色熒光分別標(biāo)記三白草、魚腥草原生質(zhì)體后，誘導(dǎo)融合（帶熒光的原生質(zhì)體仍能
融合和再生），在熒光顯微鏡下會(huì)看到______種顏色的融合細(xì)胞（僅考慮兩兩融合情況），隨后選擇帶______
的雜種原生質(zhì)體。
（3）圖 1 獲得代謝產(chǎn)物的過(guò)程屬于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，主要應(yīng)用的技術(shù)是______（填“植物組織培養(yǎng)”
或“植物細(xì)胞培養(yǎng)”）。
（4）由圖 2 可知，促進(jìn)三白草和魚腥草原生質(zhì)體融合的最適密度約為______個(gè)/mL。
29．（11 分）人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白 T（cTnT）、肌鈣蛋白Ⅱ
（cTnl）和肌鈣蛋白 C（cTnC），其中 cTnl 在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗 cTnl 的
單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：
（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的______，
以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要，將培養(yǎng)的細(xì)胞置于含有______的混合氣體的 CO2 培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（2）每隔 2 周用 cTnl 作為抗原注射小鼠 1 次，共注射 3 次，其目的是______。取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞
懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，不同于植物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)因素是______。
（3）將獲得的 B 細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，核酸合成有兩個(gè)途徑，物質(zhì)
A 可以阻斷其中的全合成途徑（如下圖）。正常細(xì)胞內(nèi)含有補(bǔ)救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克
隆抗體時(shí)選用的骨髓瘤細(xì)胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤?H、A、T 三種物質(zhì)的“HAT 培養(yǎng)基”作為選擇培養(yǎng)基篩
選出雜交瘤細(xì)胞。
融合前將部分培養(yǎng)細(xì)胞置于含 HAT 的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時(shí)間后培養(yǎng)基中______（填“有”或“無(wú)”）骨
髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基符合實(shí)驗(yàn)要求。雜交瘤細(xì)胞可以在 HAT 培養(yǎng)基上大量增殖的原因是可以通過(guò)
______（全合成途徑/補(bǔ)救合成途徑）合成 DNA。
（4）甲、乙、丙中，只含雜交細(xì)胞的是______，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性
檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得______。單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是
______，______，______。
30．（8 分）胎盤異常是動(dòng)物克隆失敗的常見原因。中國(guó)科學(xué)院探索出一種新的解決方法：將體細(xì)胞核移植
胚胎（SCNT）的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（ICM），注入到去除 ICM 的胚胎（ICSI，由單精子注入卵細(xì)胞形成）囊胚腔中，
實(shí)現(xiàn)滋養(yǎng)層細(xì)胞替代，成功克隆出一只健康的雄性恒河猴。
（1）培育過(guò)程應(yīng)用了多種技術(shù)，其中動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)技術(shù)是______。
（2）過(guò)程①中將該細(xì)胞培養(yǎng)到______期，普遍用______法，可完成去核操作。
（3）過(guò)程②單精子注射前，解凍的精子需要離心后進(jìn)行______處理。與正常受精過(guò)程相比，單精子注射的
優(yōu)點(diǎn)為卵子的______、______（填結(jié)構(gòu)名稱）無(wú)需發(fā)生生理反應(yīng)，即可防止多精入卵。
（4）為保證胚胎的質(zhì)量，胚胎移植前能否利用重組胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞的 DNA 進(jìn)行恒河猴遺傳病篩查，請(qǐng)做
出判斷并說(shuō)明理由______，______。
參考答案
1-5CABDC 6-10DCDDD 11-15CAACD 16-20ADACD
21．ACD 22．B 23．ABD 24．ABC 25．BCD
26．（1）異養(yǎng)兼性厭氧 異養(yǎng)需氧
（2）充氧泵 空氣過(guò)濾器
（3）18～30 有利于酵母菌的繁殖 重鉻酸鉀
（4）及時(shí)排出氣體、防止外界雜菌的污染、通過(guò)氣泡的生成了解發(fā)酵狀況、排氣不需要人工控制等
27．（1）高壓蒸汽滅菌（濕熱滅菌）凝固劑（或瓊脂） 選擇
（2）前 酒精燈火焰 倒置
（3）104
（4）X 濃度超過(guò)某值時(shí)會(huì)抑制菌株生長(zhǎng)（或 X 濃度過(guò)高，菌株失水，代謝能力下降）
（5）單獨(dú)設(shè)置一個(gè)滅菌后不接種的空白培養(yǎng)皿（含培養(yǎng)基）放入相同且適宜條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落
生成
28．（1）纖維素酶、果膠酶 一定的流動(dòng)性/流動(dòng)性 高 Ca2+-高 pH 融合法 再生出細(xì)胞壁
（2）3 紅色和綠色熒光
（3）植物細(xì)胞培養(yǎng)
（4）1×106
29．（1）血清 95%空氣和 5%CO2
（2）加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的 B 淋巴細(xì)胞 滅活的病毒
（3）無(wú) 補(bǔ)救合成途徑
（4）乙和丙 能產(chǎn)生抗 cTnI 抗體的雜交瘤細(xì)胞
準(zhǔn)確識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備（特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大
量制備）
30．（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
（2）MII 顯微操作法
（3）獲能 透明帶、卵細(xì)胞膜

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