（滿分：100 分；考試時(shí)間：75 分鐘）
注意事項(xiàng)：
1.答題前，考生先將自己的姓名、班級(jí)、考場(chǎng)/座位號(hào)、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。
2.答選擇題時(shí)，必須使用 2B 鉛筆填涂；答非選擇題時(shí)，必須使用 0.5 毫米的黑色簽字筆書寫；
必須在題號(hào)對(duì)應(yīng)的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫無效；保持答卷清潔、完整。
3.考試結(jié)束后，將答題卡交回（試題卷自行保管，以備評(píng)講）。
一、選擇題：本大題共 15 小題，每小題 3 分，共 45 分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有
一項(xiàng)是符合題目要求的。
1. 奶茶中含有反式脂肪酸、高濃度果糖、淀粉、乳化劑、甜味劑、咖啡因等。其中反式脂肪酸不易被人體
分解，而順式脂肪酸容易被分解，二者的結(jié)構(gòu)如圖甲所示。另外，反式脂肪酸還可影響智力發(fā)育，使高密
度脂蛋白與低密度脂蛋白（參與體內(nèi)膽固醇的運(yùn)輸，如圖乙）的比值降低。以下分析錯(cuò)誤的是（ ）
A. 圖甲中順式脂肪酸屬于不飽和脂肪酸，室溫下不容易凝固
B. 相比順式脂肪酸，反式脂肪酸可能更容易儲(chǔ)存在人體中
C. 常飲奶茶可能導(dǎo)致高密度脂蛋白增加，進(jìn)而促進(jìn)脂質(zhì)向肝臟運(yùn)輸
D. 由于順式和反式脂肪酸不溶于水，故需結(jié)合脂蛋白才能在血液中運(yùn)輸
2. 氣孔的開關(guān)與保衛(wèi)細(xì)胞積累鉀離子密切相關(guān)。某種質(zhì)子泵（H+-ATPase）具有 ATP 水解酶的活性，利用
水解 ATP 釋放的能量，使 H+從質(zhì)膜內(nèi)側(cè)向外側(cè)泵出，在 H+濃度梯度的驅(qū)動(dòng)下 K+通過轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)
胞，保衛(wèi)細(xì)胞吸水膨脹，氣孔打開。以下說法錯(cuò)誤的是（ ）
A. K+進(jìn)入保衛(wèi)細(xì)胞的過程不需要消耗能量
B. H+轉(zhuǎn)運(yùn)過程中質(zhì)子泵會(huì)因磷酸化發(fā)生構(gòu)象改變
C. K+對(duì)氣孔的調(diào)節(jié)體現(xiàn)了無機(jī)鹽調(diào)節(jié)生命活動(dòng)的功能
D. 氣孔導(dǎo)度（氣孔張開的程度）的大小可影響蒸騰速率和暗反應(yīng)速率
3. 用現(xiàn)代生物學(xué)理論，判斷“方法與結(jié)果”和“結(jié)論或觀點(diǎn)”能相匹配 是（ ）
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選
方法與結(jié)果 結(jié)論或觀點(diǎn) 項(xiàng)
新細(xì)胞都是由老細(xì)胞 A 觀察到植物通過細(xì)胞分裂產(chǎn)生新細(xì)胞，觀察到動(dòng)物受精卵分裂產(chǎn)生新細(xì)胞
分裂產(chǎn)生的
單側(cè)光照射下，金絲雀虉草胚芽鞘彎曲生長(zhǎng)，去尖端的胚芽鞘不生長(zhǎng)也不 胚芽鞘的尖端是感光 B
彎曲 部位
將載有水綿和好氧細(xì)菌的裝片置于黑暗且缺氧的環(huán)境中，用極細(xì)光束照射 光合作用需要光、產(chǎn)生 C
后，細(xì)菌集中于有光照的部位 了氧
將活的 R 型肺炎鏈球菌與加熱殺死的 S 型肺炎鏈球菌混合后注入小鼠體內(nèi)，
D DNA 是遺傳物質(zhì)
小鼠體內(nèi)出現(xiàn)活的 S 型菌
A A B. B C. C D. D
4. 光補(bǔ)償點(diǎn)是指光合過程中固定的 CO2 與呼吸過程中釋放的 CO2 量相等時(shí)的光照強(qiáng)度。研究發(fā)現(xiàn)水稻中野
生型（WT）和突變體（ygl）在不同栽培條件下產(chǎn)量有差異。測(cè)得兩種水稻植株在弱光條件下凈光合速率的
變化如下圖。為進(jìn)一步探究其原因，研究者在相同光照強(qiáng)度的強(qiáng)光條件下，測(cè)定了兩種水稻植株的相關(guān)生
理指標(biāo)見表格。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
RuBP 羧化酶 O2 產(chǎn)生速 水稻植株 葉綠素 類胡蘿卜素
含量 率
WT 4.08 0 63 4.6 25.6
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Ygl 1.73 0.47 7.5 30.9
注：RuBP 羧化酶是指催化 CO2 固定的酶。（單位：略）
A. yg1 在光強(qiáng)度下降到 30μml·m-2·s-1 時(shí)，葉片的總光合速率仍大于其呼吸速率
B. RuBP 羧化酶能催化 3-磷酸甘油酸形成，該過程不消耗 ATP 和 NADPH
C. 相比 ygl，WT 的光合色素多，WT 在此強(qiáng)光條件下光反應(yīng)較強(qiáng)
D. 相比 ygl，WT 光補(bǔ)償點(diǎn)低，WT 在光照不足的地區(qū)有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)
5. 人體中的促紅細(xì)胞生成素（EPO）是由腎臟等分泌的一種蛋白質(zhì)類激素，能夠促進(jìn)紅細(xì)胞生成，研究發(fā)
現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)的 HIF-1α（低氧誘導(dǎo)因子）可以控制 EPO 的表達(dá)水平，并且會(huì)隨著氧濃度的改變發(fā)生相應(yīng)的改變，
調(diào)節(jié)人體和大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞對(duì)氧氣變化的復(fù)雜又精確的反應(yīng)。在正常氧條件下，HIF-1α在脯氨酸羥化酶、
蛋白酶體和 VHL 的作用下被降解。下列推測(cè)錯(cuò)誤的是（ ）
A. 正常氧氣條件下 EPO 基因不表達(dá)
B. 低氧環(huán)境下，HIF-lα能提高 EPO 基因的表達(dá)水平
C. 靜脈注射適量的 EPO 可以使肌肉更有力量
D. 骨髓造血干細(xì)胞存在 EPO 受體
6. 坐骨神經(jīng)可以支配包括腓腸肌在內(nèi)的多塊骨骼肌，由多種神經(jīng)纖維組成，不同神經(jīng)纖維的興奮性和傳導(dǎo)
速率均有差異，多根神經(jīng)纖維興奮時(shí)，其動(dòng)作電位幅值（即大小變化幅度）可以疊加，單根神經(jīng)纖維的動(dòng)
作電位存在“全或無”現(xiàn)象。取坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本，將電位表的兩個(gè)電極置于坐骨神經(jīng)表面Ⅱ、Ⅲ兩處，
如圖甲。在坐骨神經(jīng) I 處，給一個(gè)適當(dāng)強(qiáng)度的電刺激，指針偏轉(zhuǎn)情況如圖乙，其中 h1>h2，t1MA
12. 一個(gè) AaBb 的雄性果蠅（2N=8，雙親為 AABB 和 aabb）體內(nèi)，一個(gè)精原細(xì)胞的每條染色體 DNA 的一
條鏈被 32P 標(biāo)記，將其放在不含 32P 的培養(yǎng)液中進(jìn)行減數(shù)分裂，觀察到的初級(jí)精母細(xì)胞如圖所示。不考慮突
變，下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 該細(xì)胞中最多有 8 條染色單體含有 32P
B. 該細(xì)胞產(chǎn)生的次級(jí)精母細(xì)胞中含有 8 個(gè)核 DNA 分子
C. 產(chǎn)生的 4 個(gè)精細(xì)胞中含 32P 的核 DNA 分子數(shù)可以相同
D. 該細(xì)胞產(chǎn)生的精子中 aB 的精子只有一個(gè)
13. 在制備單克隆抗體的過程中 HAT 選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，一種雜交瘤細(xì)胞只能
產(chǎn)一種抗體?？茖W(xué)家通過動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞（A 和 B）融合形成雙雜交瘤細(xì)胞 AB。
雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，可以產(chǎn)生雙特異性抗體 AB。據(jù)圖分析，下列說法正確的是
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（ ）
A. 雜交瘤細(xì)胞 A、B 混合并誘導(dǎo)融合后，利用 HAT 選擇培養(yǎng)基篩選出雙雜交瘤細(xì)胞 AB
B. 雙雜交瘤細(xì)胞同時(shí)識(shí)別α、β抗原后，才能產(chǎn)生雙特異性抗體
C. 對(duì)培養(yǎng)到一定密度的雙雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，不需要使用蛋白酶使之分散
D. 體外培養(yǎng)雙克隆抗體需要定期更換培養(yǎng)液以創(chuàng)設(shè)無菌環(huán)境
14. 下圖是某種基因突變引起的單基因遺傳病的遺傳系譜圖，和部分個(gè)體用某種限制酶處理相關(guān)基因（A、
a）得到的電泳結(jié)果（數(shù)字表示酶切片段堿基對(duì)的數(shù)目）。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ）
A. 該病的遺傳方式是常染色體隱性遺傳
B. 推測(cè) X 可能是系譜圖中的Ⅱ4 的電泳結(jié)果
C. 堿基對(duì)的替換導(dǎo)致 A 基因突變?yōu)?a 基因
D. 若Ⅲ3 為男孩，其正常的概率為 1/2
15. 自交不親和是一種植物界常見的現(xiàn)象，指的是在不同基因型的株間授粉能正常結(jié)籽，但自交不能結(jié)籽。
玉米的自交不親和由 H1、H2、H3 等復(fù)等位基因和 R1、R2、R3 等復(fù)等位基因控制，H 基因和 R 基因完全連
鎖不發(fā)生重組。在受精過程中，R 基因只在雌蕊花柱中表達(dá)，編碼 R 酶（進(jìn)入花粉管后抑制花粉管的伸長(zhǎng)，
導(dǎo)致精子不能與卵細(xì)胞結(jié)合）；H 基因只在花粉中表達(dá)，編碼 H 蛋白（降解進(jìn)入花粉管的 R 酶），但對(duì)相同
來源的 R 基因編碼的 R 酶無效（如 H1 蛋白對(duì) R1 酶無效）。已知不同 R 基因在同一花柱中能同時(shí)表達(dá)，現(xiàn)
有多株不同品種的玉米，下列說法錯(cuò)誤的是（ ）
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注：1.受精時(shí)，精子隨著花粉管的伸長(zhǎng)移動(dòng)到胚珠內(nèi)部，進(jìn)而與卵細(xì)胞結(jié)合完成受精；
2.圖中 x、y 可以代表任意數(shù)字。
A. 基因型為 的玉米自交，會(huì)出現(xiàn)無法結(jié)籽的現(xiàn)象
B. 基因型 與 雜交，大量后代只有 2 種基因型
C. 基因型 與 的玉米自由交配，能產(chǎn)生純合子
D. 若想在短期內(nèi)獲得純合子 可以采用單倍體育種
二、非選擇題（本大題共 5 小題，共 55 分）
16. 真核細(xì)胞合成的多種蛋白質(zhì)，依賴其是否含有信號(hào)序列以及信號(hào)序列的差異，進(jìn)而完成準(zhǔn)確分選和運(yùn)輸，
如圖 1 所示。細(xì)胞內(nèi)的生物膜在結(jié)構(gòu)和功能上是緊密聯(lián)系的，其部分聯(lián)系如圖 2 所示。請(qǐng)回答下列問題：
（1）圖 1 中，某些蛋白質(zhì)經(jīng)過程⑦通過某結(jié)構(gòu)進(jìn)入細(xì)胞核__________（填“具有”或“不具有”）選擇性，
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該結(jié)構(gòu)的作用是__________。結(jié)合圖 2 闡述細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)定向運(yùn)輸至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的可能機(jī)制__________。
（2）圖 3 中的溶酶體內(nèi)部含有多種酸性水解酶，其作用是__________。COPI、COPII 是被膜小泡，可以介
導(dǎo)蛋白質(zhì)在甲與乙之間的運(yùn)輸。若定位在甲中的某些蛋白質(zhì)偶然摻入到乙中，則圖中的__________可以幫
助實(shí)現(xiàn)這些蛋白質(zhì)的回收。
（3）圖 3 中的結(jié)構(gòu)乙靠近細(xì)胞核的一面稱為形成面，面向細(xì)胞膜的一面稱為成熟面。從形成面到成熟面，
膜的厚度和化學(xué)成分逐漸發(fā)生改變，下列有關(guān)結(jié)構(gòu)乙敘述正確的有__________。
A. 在細(xì)胞的囊泡運(yùn)輸中，高爾基體起著重要的交通樞紐作用
B. 與口腔上皮細(xì)胞相比，唾液腺細(xì)胞中高爾基體的數(shù)量可能較多
C. 高爾基體可直接接收來自游離核糖體的蛋白質(zhì)，并準(zhǔn)確分選和運(yùn)輸
D. 形成面膜的厚度和化學(xué)成分可能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜相似，而成熟面可能與細(xì)胞膜相似
17. 光敏色素（phyB）是一類能接受光信號(hào)的分子。農(nóng)田中玉米-大豆間作時(shí)，高位作物（玉米）對(duì)低位作
物（大豆）具有遮陰作用，嚴(yán)重時(shí)引發(fā)“蔭蔽脅迫”，此時(shí)，低位植物體內(nèi)的光敏色素及多種激素共同響
應(yīng)蔭蔽脅迫。請(qǐng)回答下列問題。
（1）光照影響幼苗葉色的機(jī)制如圖 1 所示（SPA1、COP1 和 HY5 都是調(diào)節(jié)因子），在光照環(huán)境下，光敏色
素進(jìn)入細(xì)胞核前會(huì)__________，進(jìn)入細(xì)胞核后通過__________來緩解幼苗發(fā)生黃化。
（2）已知 phyB 存在非活化（Pr）和活化（Pfr）兩種形式（如圖 2）。蔭蔽脅迫下，phyB 主要以__________
形式存在，由此__________（填“減弱”或“增強(qiáng)”）對(duì) PIFs 的抑制作用，導(dǎo)致幼苗下胚軸過度伸長(zhǎng)，以
適應(yīng)“蔭蔽脅迫”環(huán)境。玉米-大豆間作時(shí)，受蔭蔽脅迫的大豆產(chǎn)量明顯降低，從有機(jī)物分配的角度分析，
主要原因是__________。
（3）為了研究紅光與藍(lán)光的比例對(duì)玉米產(chǎn)量、有機(jī)物分配的影響，以日光溫室中的玉米為實(shí)驗(yàn)材料，補(bǔ)充
不同比例的紅光和藍(lán)光進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖 3 所示。從增加產(chǎn)量的角度考慮，三種補(bǔ)光比例中最佳比
例為____________，判斷依據(jù)是__________。
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18. 著色性干皮?。╔P）是一種單基因遺傳病，該病與編碼 DNA 聚合酶 eta 的 POLH 基因有關(guān)?；颊弑憩F(xiàn)
為曝光部分出現(xiàn)皮炎，皮膚過早老化以及皮膚癌高發(fā)等。
（1）圖 1 為正常 POLH 基因中部分序列，測(cè)得突變基因中，該序列某一位點(diǎn)的堿基 C 被 T 替換，使原密碼
子變成了終止密碼子（5'-UAG-3'），導(dǎo)致 DNA 聚合酶 eta 的氨基酸序列縮短。據(jù)此推斷，該序列中的模板
鏈為__________（填“A 鏈”或“B 鏈”）。
（2）研究表明，紫外線照射可導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈上的相鄰兩個(gè)胸腺嘧啶形成胸腺嘧啶二聚體（圖 2 中圈出
部分），造成 DNA 損傷。正常人體內(nèi)有多種酶參與的 DNA 損傷修復(fù)機(jī)制，如下圖所示。而 XP 患者無法進(jìn)
行 DNA 損傷修復(fù)，但其體內(nèi)細(xì)胞分裂的過程相對(duì)正常，推測(cè)其體內(nèi)功能喪失的酶最有可能是圖中的
_________。隨著年齡的增長(zhǎng)，XP 患者幾乎都會(huì)發(fā)展為皮膚癌，推測(cè)其原因可能是__________。
（3）紫外輻射會(huì)導(dǎo)致皮膚細(xì)胞損傷并誘發(fā)細(xì)胞凋亡，人體表皮層有一種特殊的細(xì)胞稱為黑色素細(xì)胞，它產(chǎn)
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生的黑色素能阻擋紫外線。OCA2 蛋白是黑色素細(xì)胞上的膜蛋白，起到轉(zhuǎn)運(yùn)黑素體、增加黑色素的作用。研
究膚色進(jìn)化時(shí)，可檢測(cè)不同地區(qū)人群的 OCA2 基因序列，OCA2 基因序列屬于____________證據(jù)。長(zhǎng)期生
活在紫外線較弱地區(qū)的人群具有膚色較淺的適應(yīng)性特征，根據(jù)達(dá)爾文的自然選擇學(xué)說，闡述適應(yīng)性形成的
必要條件是__________。
19. 西方蜜蜂和東方蜜蜂是人工飼養(yǎng)的兩個(gè)主要蜂種。西方蜜蜂因具有更優(yōu)的生產(chǎn)效益而在世界各地被廣泛
引種，但當(dāng)把它引入到亞洲的東方蜜蜂自然分布區(qū)后，雖然導(dǎo)致當(dāng)?shù)貣|方蜜蜂的數(shù)量銳減，但隨后不久卻
又發(fā)現(xiàn)入侵者西方蜜蜂也不斷出現(xiàn)蜂群損失現(xiàn)象。
（1）每年 3 月臍橙花開，臍橙花散發(fā)出的香味能吸引數(shù)公里外的蜜蜂前來吸食花蜜和傳粉，臍橙花的香味
給蜜蜂傳遞的是_________信息，該信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用是_________。
（2）研究發(fā)現(xiàn)，狄斯瓦螨（一種微小的節(jié)肢動(dòng)物）可從原始寄主東方蜜蜂向西方蜜蜂轉(zhuǎn)移。人們推測(cè)狄斯
瓦螨可能是導(dǎo)致西方蜜蜂數(shù)量減少的原因。為驗(yàn)證推測(cè)，研究者采用針刺模擬實(shí)驗(yàn)方法（用針刺模擬狄斯
瓦螨的叮咬，同時(shí)也可排除螨傳播病毒等其他致病生物對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響），多次進(jìn)行對(duì)比分析研究。
①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下表：
組別 操作方法 檢測(cè)指標(biāo)
實(shí)驗(yàn)組 針刺幼蟲 a.幼蟲死亡率
b.成年工蜂巢內(nèi)清理行為（移除死亡或不健康的幼蟲）出現(xiàn)的頻
對(duì)照組 不針刺幼蟲
率
②實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖。（說明：左圖中的東方蜜蜂對(duì)照組曲線與橫坐標(biāo)重疊，在圖中無法顯示出來）
③進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)：研究者欲進(jìn)一步探究自然狀態(tài)下兩種蜜蜂幼蟲的死亡原因，他們?cè)O(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方法是：用攜
帶病毒的狄斯瓦螨感染兩種蜜蜂幼蟲，與模擬實(shí)驗(yàn)中的__________（填“實(shí)驗(yàn)組”或“對(duì)照組”）進(jìn)行比
較，若發(fā)現(xiàn)與同種幼蟲相比，兩種蜜蜂被攜帶病毒的狄斯瓦螨感染的幼蟲死亡率均__________（填“低于”
或“高于”）模擬實(shí)驗(yàn)，再結(jié)合其他實(shí)驗(yàn)得出：由狄斯瓦螨傳播的病毒是蜜蜂幼蟲死亡的主要原因。
④經(jīng)多年 實(shí)驗(yàn)跟蹤研究，研究者發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期來看西方蜜蜂種群比東西方蜜蜂種群更難以抵抗狄斯瓦螨傳
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播的病毒。請(qǐng)結(jié)合上述檢測(cè)指標(biāo)，解釋可能的原因__________。
（3）東方蜜蜂與狄斯瓦螨的種間互作是經(jīng)過長(zhǎng)期__________的結(jié)果，這種模式限制了西方蜜蜂在入侵地?cái)?shù)
量的持續(xù)增長(zhǎng)。兩類蜜蜂數(shù)量的減少會(huì)影響到植物的種群數(shù)量和物種多樣性，進(jìn)而降低當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)系統(tǒng)的
__________穩(wěn)定性。
20. 抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）為一種含有 432 個(gè)氨基酸的單鏈糖蛋白，是血漿中抗凝血系統(tǒng)最重要的成分，它
主要由肝臟合成后進(jìn)入血液，AT-Ⅲ水平降低可發(fā)生血栓或 DIC（彌散性血管內(nèi)凝血）。研究人員利用轉(zhuǎn)基
因奶山羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人抗凝血酶Ⅲ。
（1）獲取人抗凝血酶Ⅲ基因：從人肝細(xì)胞獲取相應(yīng)的 mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成人抗凝血酶ⅢcDNA 后，PCR
擴(kuò)增。PCR 引物堿基數(shù)一般在 15-30 個(gè)之間，過短則導(dǎo)致 DNA 擴(kuò)增的___________差。另外，設(shè)計(jì)引物時(shí)
需注意___________，以防止自身折疊成發(fā)夾結(jié)構(gòu)或形成二聚體。
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體：首先從奶山羊基因組文庫(kù)分離出β-酪蛋白基因，然后利用限制性內(nèi)切核酸酶或
____________（技術(shù)）去除其部分序列，保留啟動(dòng)部位，將人抗凝血酶Ⅲ基因連接至其啟動(dòng)序列后，在人
抗凝血酶Ⅲ基因及前端的β—酪蛋白分泌肽 DNA 序列之間加一段 DNA 序列（蛋白酶 E 能識(shí)別并切割對(duì)應(yīng)
蛋白質(zhì)），人抗凝血酶Ⅲ基因之后加入一個(gè)新霉素抗性基因，如圖所示：
（3）胚胎成纖維細(xì)胞的轉(zhuǎn)化：從奶山羊胚胎中分離成纖維細(xì)胞，放在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)，常用
___________法將前述表達(dá)載體導(dǎo)入成纖維細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后的細(xì)胞放入含__________的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，以篩選
出轉(zhuǎn)化細(xì)胞。
（4）奶山羊經(jīng)過超數(shù)排卵和__________處理，分別獲得體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞和受體母羊。陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因成纖
維細(xì)胞體外培養(yǎng)一段時(shí)間后，將其與去核卵母細(xì)胞一起用電刺激以促進(jìn)細(xì)胞融合，從而完成核移植。經(jīng)胚
激活、培養(yǎng)獲得早期胚胎移入受體母羊，妊娠產(chǎn)出克隆羊羔。
（5）克隆羊的陽(yáng)性鑒定：取少量克隆羊組織經(jīng)研磨、過濾及離心，取上清液加入_________以析出 DNA，
用限制性內(nèi)切核酸酶處理，得到的產(chǎn)物進(jìn)行電泳。將擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物與____________混合，再用微量
移液器將混合液緩慢注入凝膠的加樣孔內(nèi)。留一個(gè)加樣孔加入指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物。電泳后將 DNA
變性成單鏈后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上，用 32P 標(biāo)記的探針進(jìn)行雜交，經(jīng)放射顯影檢測(cè)克隆羊細(xì)胞是否成功轉(zhuǎn)
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化。
（6）待克隆羊成年并產(chǎn)奶，收集奶樣，可用__________技術(shù)鑒定克隆羊是否成功表達(dá)人抗凝血酶Ⅲ。經(jīng)電
泳、比對(duì)，發(fā)現(xiàn)克隆羊產(chǎn)生的抗凝血酶分子量比人抗凝血酶大，可用__________處理以得到與人抗凝血酶
Ⅲ完全相同的產(chǎn)物。
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