注意事項：
1．答題前，先將自己的姓名、考號等填寫在試題卷和答題卡上，并將準考證號條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。
2．選擇題的作答：選出每小題答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標號涂黑。寫在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無效。
3．非選擇題的作答：用簽字筆直接寫在答題卡上對應(yīng)的答題區(qū)域內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙和答題卡上的非答題區(qū)域均無效。
一、單項選擇題（本題包括15小題，每小題2分，共30分。每小題只有一個選項符合題意）
1．利用山金柑愈傷組織細胞（2N）和早花檸檬葉肉細胞（2N）進行體細胞雜交可以得到高品質(zhì)的雜種植株。下圖是對某雜種植株核DNA和線粒體DNA的來源進行鑒定的結(jié)果。下列分析正確的是（ ）
A．該實驗中，誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合有多種手段，包括物理法、化學(xué)法和滅活病毒誘導(dǎo)法
B．細胞融合后獲得的融合原生質(zhì)體需放在無菌蒸餾水中以防雜菌污染
C．可通過比較融合后細胞的顏色進行初步篩選
D．雜種細胞經(jīng)過組織培養(yǎng)得到的雜種植株是四倍體
2．抗癌藥紫杉醇是從紅豆杉樹皮中提取的生物活性物質(zhì)。為減少對紫杉的破壞，科研人員利用組織培養(yǎng)技術(shù)提高了紫杉醇的產(chǎn)量。培養(yǎng)過程中細胞生物量與細胞產(chǎn)物之間的關(guān)系如圖，下列敘述正確的是（ ）
A．圖中虛線表示細胞生物量，實線表示細胞產(chǎn)物
B．紫杉醇是紫杉細胞生長所必需的物質(zhì)
C．培養(yǎng)過程中體現(xiàn)了植物細胞的全能性
D．可采用提取、分離和純化等措施來分離紫杉醇
3．下列關(guān)于動物細胞工程的說法，不正確的有幾項？（ ）
①通過PEG融合法、電融合法等方法可以誘導(dǎo)兩個動物細胞相互識別而融合為一個細胞
②動物細胞和癌細胞在培養(yǎng)過程中均會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象
③滅活的病毒失去了其抗原結(jié)構(gòu)，但保留其感染能力，可用于誘導(dǎo)動物細胞融合
④現(xiàn)階段，體細胞核移植技術(shù)成功率非常低，而且絕大多數(shù)動物存在健康問題
⑤小鼠骨髓瘤細胞染色體數(shù)為40條，其B淋巴細胞的染色體數(shù)為40條，融合后形成的雜交瘤細胞DNA分子數(shù)為80個
⑥動植物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個細胞后才能進行培養(yǎng)
⑦動物細胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織或細胞具有更高的全能性
A．4項B．5項C．6項D．7項
4．CD47跨膜蛋白可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細胞發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)，多種腫瘤細胞表面的CD47含量是正常細胞的1.6~5.0倍，這可能是導(dǎo)致腫瘤細胞難以被巨噬細胞清除的重要原因之一。為驗證抗CD47的單克隆抗體能否減少CD47對巨噬細胞的抑制作用，研究人員利用動物細胞工程研制了該單克隆抗體，過程如圖所示。下列說法正確的是（ ）

A．小鼠注射CD47后產(chǎn)生的B淋巴細胞均可分泌相應(yīng)抗體
B．細胞①中可能有一些不能產(chǎn)生抗體，但所有細胞均可無限增殖
C．篩選a步驟利用HAT選擇培養(yǎng)基，獲取產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞
D．為驗證該單克隆抗體的作用，還需要加入腫瘤細胞進一步實驗
5．治療最兇險乳腺癌“HER2+”的抗體-藥物偶聯(lián)物(T-DM1)被納入2023年醫(yī)保目錄名單。T-DM1由曲妥珠單抗、細胞毒性藥物DM1偶聯(lián)形成。T-DM1作用機制如下圖，下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）

A．曲妥珠單抗的作用是將DM1準確帶至乳腺癌細胞
B．T-DM1被乳腺癌細胞吞噬后釋放DM1抑制微管聚合進而導(dǎo)致細胞凋亡
C．曲妥珠單抗制備中可選擇DM1作為抗原刺激小鼠產(chǎn)生免疫應(yīng)答
D．利用同位素或熒光標記的曲妥珠單抗可定位診斷HER2+
6．科研人員在雜交瘤細胞的基礎(chǔ)上獲得了雙雜交瘤細胞，能夠產(chǎn)生雙特異性抗體，該抗體可以同時結(jié)合兩種抗原?？贵w由兩條重鏈和兩條輕鏈組成，重鏈和輕鏈均分為恒定區(qū)和可變區(qū)，兩條重鏈依賴于A1或B1進行組裝（A1與B1相同），重鏈與輕鏈的組裝依賴于恒定區(qū)A2、a或B2、b（a與b相同），如圖1。因此雙雜交瘤細胞產(chǎn)生的抗體種類較多，其中有一種抗體能同時與抗原α與β結(jié)合稱為雙特異性抗體，如圖2。下列敘述錯誤的是（ ）

A．科研人員將抗原α、β分別注射到小鼠體內(nèi)引起體液免疫，分泌相應(yīng)抗體
B．制備雜交瘤細胞時，需要多次篩選得到兩種雜交瘤細胞
C．誘導(dǎo)動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導(dǎo)法等
D．圖2中若1是A2，則2、3、4、5、6分別對應(yīng)a、B2、b、α、β
7．目前發(fā)現(xiàn)的雙胞胎有同卵雙胞胎、異卵雙胞胎和“半同卵雙胞胎”。1對“半同卵小姐弟雙胞胎”形成過程如圖所示，染色體全部來自父系的“合子”致死。下列相關(guān)敘述錯誤的是（ ）

A．“半同卵雙胞胎”的產(chǎn)生與透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)異常有關(guān)
B．排卵是卵子從卵泡中排出的過程，圖中卵子發(fā)育到減數(shù)分裂Ⅱ的中期
C．細胞a的染色體組成為MP1,則細胞c的染色體組成為P1P1或MM
D．這對小姐弟來源于母親的染色體相同，來源于父親的常染色體可能不同
8．某同學(xué)利用洋蔥為實驗材料，進行DNA粗提取和鑒定實驗。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）
A．該同學(xué)也可選擇雞血、豬肝等動物細胞為實驗材料提取DNA，但方法可能有所不同
B．將洋蔥切碎加研磨液研磨、過濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中
C．向含有DNA的粗提取液中加入體積分數(shù)為95%的冷酒精后，出現(xiàn)的白色絲狀物為DNA
D．鑒定DNA時，需先將DNA溶解在2ml/L NaCl溶液，再加入二苯胺試劑并進行沸水浴加熱
9．Transwell實驗可模擬腫瘤細胞侵襲過程。取用無血清培養(yǎng)液制成的待測細胞懸液加入膜上鋪有基質(zhì)膠的上室中，下室為有血清培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以一層具有一定孔徑的聚碳酸酯膜分隔開，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，通過計數(shù)下室的細胞量即可反映細胞的侵襲能力，如下圖所示。下列說法錯誤的是（ ）

A．進入下室的腫瘤細胞數(shù)量越多，說明腫瘤細胞的分裂能力越強
B．可用機械的方法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理使動物細胞分散開
C．腫瘤細胞可分泌水解酶將基質(zhì)膠中的成分分解后進入下室
D．血清培養(yǎng)液中含有某些因子促使腫瘤細胞向營養(yǎng)高的下室移動
10．一環(huán)狀DNA分子，設(shè)其長度為1。限制性內(nèi)切酶A在其上的切點位于0.0處；限制性內(nèi)切酶B在其上的切點位于0.3處；限制性內(nèi)切酶C的切點未知。但C單獨切或與A或B同時切的結(jié)果如下表，請確定C在該環(huán)狀DNA分子的切點應(yīng)位于圖中的哪處（ ）
A．0.2和0.4處B．0.4和0.6處C．0.5和0.7處D．0.6和0.9處
11．研究人員欲采用“異源囊胚補全法”將人源iPS 細胞培育出的腎元祖細胞導(dǎo)入囊胚，然后移植到去除生腎區(qū)既存的腎元祖細胞的仔豬體內(nèi)，培育出 100%人源iPS細胞來源的腎單位并實際應(yīng)用于移植醫(yī)療，部分過程如圖所示。下列說法錯誤的是（ ）

A．培育人源腎元祖細胞需向 iPS細胞培養(yǎng)液中加入定向誘導(dǎo)分化劑
B．過程②需要將熒光蛋白標記的人源腎元祖細胞植入囊胚的內(nèi)細胞團
C．該技術(shù)培育的人源腎臟不必考慮腎移植個體之間的遺傳差異
D．過程③操作之前需要對代孕母豬進行同期發(fā)情處理
12．我國科學(xué)家成功培育了體細胞克隆猴。在處理重構(gòu)胚時，將組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA、組蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA注入了重構(gòu)胚，促進囊胚的發(fā)育，提高代孕母猴的妊娠率。下列敘述錯誤的是（ ）

A．除顯微操作去核外，還可采用梯度離心、紫外線照射、化學(xué)物質(zhì)處理法在沒有穿透卵母細胞透明帶的去核或使其中的DNA變性。
B．TSA能夠抑制組蛋白脫乙酰酶的作用從而降低組蛋白的乙酰化水平
C．組蛋白去甲基化酶KDM4D能夠降低組蛋白的甲基化水平
D．培育克隆猴對研究人類疾病致病機制和研發(fā)新藥有重要意義
13．苦馬豆素（SW）因從灰苦馬豆中分離出來而得名，被認為是“未來的腫瘤治療藥物”。為研究不同濃度的苦馬豆素對小鼠腫瘤細胞的影響，實驗人員進行相關(guān)實驗，結(jié)果如圖。下列敘述錯誤的是（ ）

A．充入培養(yǎng)液的氣體中應(yīng)含5% CO2，以維持培養(yǎng)液的滲透壓
B．對該實驗對照組的處理為：加入不含SW的培養(yǎng)液，其他培養(yǎng)條件相同
C．在實驗條件下，SW濃度越高，對細胞生長的抑制作用越強
D．在實驗條件下，SW作用時間越長，對細胞生長的抑制作用越強
14．豬因其生理特性、器官大小以及胚胎發(fā)育過程等方面與人類存在高度相似性，已成為“種植”人類器官極具潛力的動物模型。如圖表示我國科學(xué)家利用豬作為載體，培育可供人類移植使用的人源腎臟的相關(guān)流程示意圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是（ ）
A．推測SIXI和SALLI兩種基因是豬腎臟發(fā)育必需的基因
B．去除卵母細胞中的核，指的是去除紡錘體—染色體復(fù)合物
C．注入人源干細胞的目的是使人源干細胞分裂分化產(chǎn)生人的器官
D．該實驗流程中涉及了體外受精、核移植、胚胎移植等生物技術(shù)
15．科學(xué)家通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長激素基因的奶牛，利用其乳腺生產(chǎn)人生長激素，為加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，對此轉(zhuǎn)基因奶牛進行克隆，過程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）

A．細胞培養(yǎng)前，可采用酶解法將動物組織分散成單個細胞
B．重組胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)之前不需要進行性別鑒定
C．可采用電融合法使供體細胞和去核卵母細胞融合
D．將重組胚胎移到雌性奶牛體內(nèi)，需要注射免疫抑制劑降低免疫排斥
二、不定項選擇題（本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題有一個或多個選項符合題目要求，全部選對得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分）
16．某質(zhì)粒中氨芐青霉素抗性基因（AmpR），四環(huán)素抗性基因（TetR）和多種限制酶的識別位點如圖所示。下列敘述錯誤的是（ ）
A．基因工程的載體也可選用噬菌體和動植物病毒
B．質(zhì)粒和目的基因用ScaI和HindⅢ切割，用四環(huán)素進行篩選
C．質(zhì)粒和目的基因用SalⅠ和SphⅠ切割，用氨芐青霉素進行篩選
D．質(zhì)粒和目的基因用ScaⅠ和PUuⅠ切割，用四環(huán)素進行篩選
17．CDR移植就是將鼠源單克隆抗體（簡稱鼠源性單抗）可變區(qū)中互補決定區(qū)（CDR）序列取代人源抗體相應(yīng)CDR序列，重組構(gòu)成人源化抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）
A．制備鼠源性單抗時使用的滅活病毒可保證細胞膜分子排布不發(fā)生改變
B．制備鼠源性單抗過程需進行兩次篩選，第二次篩選的原理是抗原—抗體雜交
C．若直接利用未人源化的鼠源單抗進行治療，機體將會通過細胞免疫清除該抗體
D．人源化抗體既有鼠源性單抗的特異性與親和力，又能最大限度地降低免疫排斥
18．CRISPR/Cas9系統(tǒng)主要由向?qū)NA（SgRNA）和Cas9蛋白兩部分組成，SgRNA可引導(dǎo)Cas9蛋白到特定基因位點進行切割，其機制如圖所示。下列說法錯誤的是（ ）
A．Cas9蛋白相當于限制酶，切割位點是脫氧核糖和堿基之間的化學(xué)鍵
B．向?qū)NA可以在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下合成，合成的原料包括四種核糖核苷酸
C．CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)有時會因SgRNA錯誤結(jié)合而出現(xiàn)“脫靶”現(xiàn)象，一般SgRNA序列越長，脫靶率越低
D．對不同目標DNA進行編輯時，使用Cas9蛋白和相同的SgRNA進行基因編輯
19．科學(xué)家將c—Myc、KIf4、Sx2和Oct—3/4這四個關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)入高度分化的小鼠成纖維細胞內(nèi)，細胞在一定條件下轉(zhuǎn)變成iPS細胞。在適當條件誘導(dǎo)下，iPS細胞可以定向分化成各種細胞。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A．iPS細胞有絲分裂后期染色體數(shù)目與核DNA分子數(shù)目相同
B．iPS細胞分化成各種組織細胞過程中DNA序列不變
C．iPS細胞的分裂、分化能力比造血干細胞弱
D．小鼠成纖維細胞轉(zhuǎn)變成iPS細胞與植物組織培養(yǎng)的脫分化過程類似，T細胞、B細胞等也能被誘導(dǎo)為iPS細胞
20．克隆動物常用的核移植方法主要有細胞質(zhì)內(nèi)注射法和透明帶下注射法。前者是用微型注射針將供體細胞核吸出并注入去核卵母細胞質(zhì)內(nèi)；后者是直接將供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內(nèi)，然后促使兩個細胞融合。“中中”和“華華”是兩只出生在我國的克隆猴，下圖是它們的培育流程簡圖。下列說法錯誤的是（ ）
A．以克隆猴為模型研發(fā)新型藥物可以有效縮短研發(fā)進程
B．供體細胞注入去核卵母細胞透明帶內(nèi)后需經(jīng)誘導(dǎo)才能形成重構(gòu)胚
C．“中中”和“華華”的遺傳性狀由圖中的胎猴和母猴以及環(huán)境共同決定
D．相比之下，細胞質(zhì)內(nèi)注射法對供體細胞核和卵母細胞的損傷更小
三、非選擇題，每空2份
21．人乳頭狀瘤病毒（HPV）與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生。如圖是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答：
圖中向小鼠注射的A是 。
(2)圖中選用B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，該細胞有 的特點。
(3)從圖中可以看出，單克隆抗體的制備過程運用了動物細胞工程中的 和 兩大技術(shù)。對應(yīng)的原理分別是 、 。
(4)單克隆抗體注入體內(nèi)后可以自動追蹤抗原（病原體或癌變細胞等）并與之結(jié)合，而且絕不攻擊任何正常細胞，故稱為“生物導(dǎo)彈”，這體現(xiàn)了單克隆抗體的優(yōu)點是 。
22．農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，單倍體植株是良好的遺傳育種材料。以下是三種常見獲取單倍體植株的技術(shù)。請回答下列問題：
(1)方法一：體外誘導(dǎo)單倍體。通常采用 的方法得到單倍體。
(2)方法二：遠緣雜交獲得單倍體(圖1)。普通大麥和球莖大麥雜交形成雜種胚的過程中發(fā)生了基因重組，在發(fā)育過程中球莖大麥的染色體逐漸消失，最后形成單倍體大麥。在育性上表現(xiàn)為 的特點
(3)方法三：種內(nèi)雜交獲得單倍體。玉米中 CENH3 是一種參與染色體分離的著絲粒蛋白。
①第一步：利用基因編輯技術(shù)破壞野生型玉米的CENH3基因，得到突變體。相關(guān)機理如圖2所示，基因編輯過程中，sgRNA與CENH3識別結(jié)合時，遵循 原則，切割CENH3基因的過程中產(chǎn)生 個游離的磷酸基團，基因編輯的結(jié)果如圖3所示，
②第二步：突變植株與野生型植株雜交，受精卵在發(fā)育過程中來自突變體的染色體全部消失，發(fā)育成僅含 染色體的單倍體。
通過以上三種方式獲得的單倍體可通過染色體數(shù)目加倍獲得穩(wěn)定的純系，與傳統(tǒng)雜交育種相比，單倍體育種的顯著優(yōu)點是 。
23．下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：

(1)若限制酶I的識別序列和切點是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是—G↓GATCC—，寫出限制酶Ⅱ的黏性末端 （寫出方向）在①過程中，應(yīng)用限制酶 切割質(zhì)粒，用限制酶 切割抗蟲基因。
(2)將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有 的培養(yǎng)基上，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入。
(3)導(dǎo)入重組質(zhì)粒大腸桿菌的表現(xiàn)型是 。
(4)⑤過程所用技術(shù)稱為 ，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是根細胞具有 。
24．科研人員通過基因工程等技術(shù)，改良了稻米的營養(yǎng)品質(zhì)，培育出了鐵含量比普通大米較高的轉(zhuǎn)基因水稻。如圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖。
圖中過程①需要的操作工具是
(2)圖中Ti質(zhì)粒上含有潮霉素抗性基因，為了篩檢成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，1號培養(yǎng)基需要加入 ，誘導(dǎo)組織細胞脫分化的培養(yǎng)基是 號培養(yǎng)基。
(3)④⑤⑥技術(shù)依據(jù)的主要原理是 。
(4)下圖1、2為質(zhì)粒、含目的基因的DNA及其們關(guān)限制酶的作用位點為提高實驗的效能，應(yīng)采用限制酶 處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA；限制酶作用于DNA分子中的 （填化學(xué)鍵名稱），用不同的限制酶切割目的基因和載體的原因是 。
C單獨切
長度為0.8和0.2的兩個片段
C與A同時切
長度為2個0.2和1個0.6的片段
C與B同時切
長度為2個0.1和1個0.8的片段

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