考試時間：75分鐘；滿分：100分
第Ⅰ卷（選擇題）
一、單選題（每題2分，共40分）
1. 下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的敘述，錯誤的是（ ）
A. 蛋白質(zhì)工程的直接操作對象是蛋白質(zhì)
B. 基因工程工程原則上只能生產(chǎn)自然界中已存在的蛋白質(zhì)
C. 蛋白質(zhì)工程既能改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)，又能制造新的蛋白質(zhì)
D. 蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程
2. 下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵的敘述，正確的是（ ）
A. 糖源不充足、氧氣充足時，醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸
B. 果酒放置一段時間后，表面形成一層酵母菌構(gòu)成的“白膜”
C. 腐乳發(fā)酵是以毛霉為單一菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主
D. 泡菜制作過程中，乳酸越多，亞硝酸鹽含量越低，泡菜品質(zhì)越佳
3. 以下沒有使用植物細(xì)胞工程技術(shù)的是（ ）
A. 用多倍體育種技術(shù)培育無子西瓜B. 利用白菜和甘藍(lán)體細(xì)胞培育白菜-甘藍(lán)
C. 利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育抗軟化番茄D. 培養(yǎng)紅豆杉細(xì)胞，提取紫杉醇
4. 體外受精和胚胎移植都是在醫(yī)學(xué)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用較多的胚胎工程技術(shù)。下列相關(guān)表述正確的是（ ）
A. 采集來的卵母細(xì)胞和精子可以直接用于體外受精
B. 經(jīng)胚胎移植產(chǎn)生的后代，其遺傳特性與受體保持一致
C. 進(jìn)行胚胎移植前，要對受體注射免疫抑制劑，以防止發(fā)生免疫排斥反應(yīng)
D. 對供體和受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，目的是為供體胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境
5. 鞣質(zhì)（單寧）是一種具有止血、殺菌等作用的中藥成分，在植物中廣泛分布。為研究鞣質(zhì)對自然界中生存條件相同的甲、乙、丙三種細(xì)菌的殺傷能力，某科研小組將等量的甲、乙、丙三種細(xì)菌接種到含有適量鞣質(zhì)的培養(yǎng)基和不含鞣質(zhì)的培養(yǎng)基上，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間，觀察菌落大小，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)說法不正確的是（ ）

A. 對實驗中所用培養(yǎng)皿的滅菌可以采用干熱滅菌的方法
B. 由圖中結(jié)果可知，對鞣質(zhì)的抵抗能力：乙細(xì)菌>丙細(xì)菌>甲細(xì)菌
C. 為判斷上述兩組培養(yǎng)物中是否有雜菌污染，還需設(shè)置未接種的不含鞣制的培養(yǎng)基作為對照
D. 本實驗在兩種培養(yǎng)基上同種細(xì)菌的接種量應(yīng)當(dāng)保持一致
6. 山楂醋中富含多種維生素、黃酮、果酸、礦物質(zhì)、三萜類物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)。利用山楂制作果醋的大致流程為先在滅菌的果肉勻漿中接種酵母菌，發(fā)酵10天后，再接入活化的醋酸桿菌，發(fā)酵12～15天。下列有關(guān)敘述錯誤的是（ ）
A. 酵母菌在缺氧條件下進(jìn)行發(fā)酵，將山楂中的糖類轉(zhuǎn)化為酒精和二氧化碳
B. 醋酸桿菌在有氧條件下將酵母菌產(chǎn)生的酒精氧化為醋酸
C. 發(fā)酵過程中，酵母菌和醋酸桿菌的代謝產(chǎn)物都對山楂醋的風(fēng)味有重要影響
D. 在整個發(fā)酵過程中，酵母菌發(fā)酵時的溫度一般要高于醋酸桿菌發(fā)酵時的溫度
7. 植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是（ ）
A. 植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞具有全能性
B. 培養(yǎng)基中含有營養(yǎng)物，故誘導(dǎo)愈傷組織、生根、生芽期間都不需要光照
C. 需用酒精和次氯酸鈉溶液對外植體進(jìn)行消毒處理
D. 菊花組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵激素是生長素和細(xì)胞分裂素
8. 某小組用限制酶處理DNA后獲得了如圖所示的3種黏性末端。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A. 限制酶的識別序列都是由6個核苷酸組成的
B. 這3種黏性末端都是由同種限制酶切割獲得的
C. T4 DNA連接酶不能連接互補(bǔ)的黏性末端
D. E.cli DNA連接酶可以將甲、乙連接起來
9. 基因運(yùn)輸工具——載體，必須具備的條件之一及理由均正確的是（ ）
A. 能夠復(fù)制，以便目的基因插入其中
B. 具有多個限制酶切割位點(diǎn)，便于目的基因的表達(dá)
C. 對受體細(xì)胞無害，便于重組DNA的篩選
D. 具有某些標(biāo)記基因，便于重組DNA的篩選
10. 下圖表示現(xiàn)代生物工程技術(shù)，b表示其結(jié)果，下列說法正確的是（ ）
A. 若b是克隆牛，則b的遺傳物質(zhì)完全來自供體核
B. 若b是試管動物，原理是動物細(xì)胞核具有全能性
C. 若b是“三親嬰兒”（父親提供精子，母親提供卵細(xì)胞核，還有一方提供卵細(xì)胞質(zhì)），則a過程涉及基因工程、核移植和體外受精等操作
D. 若b是基因型相同的多個個體，則a可表示胚胎分割
11. 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用，如圖為制備iPS細(xì)胞的操作過程。下列相關(guān)敘述正確的是（ ）
A. 誘導(dǎo)形成iPS細(xì)胞的過程中會破壞胚胎
B. iPS細(xì)胞可以直接在生物體內(nèi)產(chǎn)生和獲取
C. iPS細(xì)胞與成體干細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個體的能力
D. iPS細(xì)胞分化成的神經(jīng)細(xì)胞可能對治療阿爾茲海默癥有一定幫助
12. 我國是世界上啤酒生產(chǎn)和消費(fèi)大國。啤酒是以大麥為主要原料經(jīng)酵母菌發(fā)酵制成，主要工藝流程如圖所示，其中糖化主要是將麥芽中的淀粉等有機(jī)物水解為小分子物質(zhì)。下列關(guān)于啤酒發(fā)酵的敘述正確的是（ ）
A. 用赤霉素處理大麥，可使大麥無須發(fā)芽就能產(chǎn)生α-淀粉酶
B. 破碎有利于淀粉進(jìn)入酵母菌，提升發(fā)酵速率
C. 焙烤是為了利用高溫殺死大麥種子胚，同時使淀粉酶失活
D. 主發(fā)酵階段完成酵母菌繁殖，后發(fā)酵階段進(jìn)行代謝產(chǎn)物生成
13. 微生物與人類生活有密切的關(guān)系，在食品制作、疾病防治、環(huán)境保護(hù)等方面有著廣泛應(yīng)用，如傳統(tǒng)食品中的酒、面包、泡菜、醋、醬油等就是利用微生物發(fā)酵而成的，發(fā)酵過程中防止雜菌污染至關(guān)重要。下列說法正確的是（ ）
A. 微生物發(fā)酵產(chǎn)生了不同的代謝物使得發(fā)酵食品具有特殊的味道
B. 家庭釀制葡萄酒時，需要對發(fā)酵的原料及發(fā)酵容器進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，防止雜菌污染
C. 篩選釀醋菌種時，可在培養(yǎng)基中加入一定量的青霉素，防止雜菌污染
D. 制作泡菜時，“泡菜之水，用花椒和鹽煮沸”的目的只是徹底滅菌
14. 下列關(guān)于基因工程的說法正確的是（ ）
A. 基因表達(dá)載體中啟動子是DNA聚合酶的結(jié)合部位，啟動復(fù)制過程
B. 基因表達(dá)載體一般包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動子和終止密碼子等結(jié)構(gòu)
C. 利用PCR技術(shù)獲取目的基因依據(jù)的是DNA半保留復(fù)制的原理
D. 將目基因?qū)胫参锛?xì)胞和動物細(xì)胞分別采用花粉管通道法和農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
15. 下列關(guān)于培養(yǎng)基配制的敘述，錯誤的是（ ）
A. 常用固體培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行分離、純化和鑒定
B. 固體培養(yǎng)基中的瓊脂既是凝固劑，也提供碳源和氮源
C. 培養(yǎng)有特殊生長條件需求的微生物時，要對培養(yǎng)基做相應(yīng)調(diào)整
D. 無論是固體培養(yǎng)基還是液體培養(yǎng)基，配制時都要加水
16. 甘薯屬無性繁殖作物，具有自交不育和雜交不親和性，這使甘薯生產(chǎn)和育種存在諸多常規(guī)方法難以解決的問題。下列相關(guān)操作不合理的是（ ）
A. 利用培養(yǎng)的愈傷組織進(jìn)行誘變育種，可以顯著提高變異頻率，加速育種進(jìn)程
B. 利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，可以高效快速的實現(xiàn)種苗的大量繁殖
C. 利用原生質(zhì)體融合實現(xiàn)體細(xì)胞雜交，可以克服雜交不親和
D. 利用莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒苗，使植株具備抗病毒的能力
17. 妊娠與子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的功能密切相關(guān)。某研究小組通過如圖所示的實驗流程獲得了子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞，以期用于妊娠相關(guān)疾病的研究。已知細(xì)胞培養(yǎng)過程均為貼壁培養(yǎng)，下列相關(guān)分析錯誤的是（ ）
A. 可用機(jī)械法處理人皮膚組織以分散成單個細(xì)胞
B. 過程①獲得的iPS細(xì)胞能分化為多種類型的細(xì)胞
C. 過程②在原代培養(yǎng)的過程中，會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
D. 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞在傳代培養(yǎng)時，直接用離心法收集
18. 近日動物學(xué)家在某林地發(fā)現(xiàn)了少量野生瀕危的亞洲黑熊，他們期望通過與動物園現(xiàn)存的亞洲黑熊之間進(jìn)行雜交、體內(nèi)授精、胚胎移植等方法拯救亞洲黑熊，其過程如下圖。以下說法錯誤的是（ ）
A. E后代和F后代的形成都離不開胚胎移植技術(shù)
B. D受體雌性必須和動物園亞洲黑熊干A、野生亞洲黑熊干B同期發(fā)情處理
C. 超數(shù)排卵一般用促性腺激素，排出的卵細(xì)胞必須培養(yǎng)到MII期
D. E后代和F后代形成方式相比，前者繁殖的后代有更大的生活力和變異性
19. 酵母菌的品質(zhì)影響葡萄酒的產(chǎn)量和質(zhì)量，研究人員為分離出產(chǎn)酒精能力強(qiáng)的酵母菌菌株，進(jìn)行了如圖I所示實驗，甲、乙、丙、丁錐形瓶內(nèi)分別加入100mL完全培養(yǎng)基，下列說法錯誤的是（ ）

A. 發(fā)酵過程中缺氧環(huán)境、酵母菌產(chǎn)生的酒精等可抑制雜菌的繁殖
B. 用稀釋涂布平板法計算出葡萄酒過濾液的活菌數(shù)可能低于實際的活菌數(shù)
C. 對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法，菌種接種過程中的試管口、瓶口等需灼燒滅菌
D. 由圖Ⅱ可知，乙、丙、丁培養(yǎng)基渾濁的原因是培養(yǎng)基滅菌不徹底，丁組酵母菌產(chǎn)酒精能力比乙強(qiáng)
20. 下列關(guān)于基因工程基本工具的敘述，正確的是（ ）
A. DNA聚合酶能夠催化形成磷酸二酯鍵，是基因工程中的“分子縫合針”
B. 限制酶切割DNA分子一次可斷開2個磷酸二酯鍵，產(chǎn)生2個游離的磷酸基團(tuán)
C. 有些DNA連接酶既能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端，又能連接雙鏈DNA片段的平末端，從而恢復(fù)被限制酶切開的氫鍵
D. 用做分子運(yùn)輸車的質(zhì)粒有抗生素合成基因，便于重組DNA分子的篩選
第Ⅱ卷（非選擇題）
二、非選擇題（4題，共60分）
21. 為確定某致病細(xì)菌對不同抗生素的敏感性，研究人員設(shè)置了四組實驗：分別將含有A、B、C、D四種抗生素（含量相同）的濾紙片均勻置于同一平板上的不同位置，放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時間后，觀察其透明圈的大小，實驗結(jié)果如下表。回答下列問題：
（1）微生物的培養(yǎng)都需要提供水、__________和無機(jī)鹽，缺一不可。在微生物培養(yǎng)過程中，獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，用平板培養(yǎng)細(xì)菌時一般需要將平板倒置，其原因是__________.
（2）若配制的培養(yǎng)基可以促進(jìn)某一種微生物生長而抑制其他微生物生長，則該培養(yǎng)基被稱為__________培養(yǎng)基。
（3）實驗需使用涂布器接種，接種前涂布器的滅菌方法為__________。該實驗中，宜使用__________方法接種細(xì)菌，在培養(yǎng)和接種細(xì)菌時要特別注意進(jìn)行無菌操作，接種時需在__________進(jìn)行操作。
（4）根據(jù)實驗結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素種類為__________；在排除雜菌污染的情況下，第4組實驗說明細(xì)菌對抗生素D產(chǎn)生了__________。
（5）該實驗還缺少一組空白對照，請嘗試補(bǔ)充：___________。
22. 美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下?；卮鹣铝袉栴}：
抗CD14單克隆抗體的制備流程如下圖所示：
（1）步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射_____和_____。
（2）步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長特點(diǎn)是_____。在進(jìn)行該細(xì)胞培養(yǎng)時，需要給細(xì)胞提供氣體環(huán)境為95％空氣和_____，其作用是_____。
（3）吸?、壑械纳锨逡旱舰艿呐囵B(yǎng)孔中，需經(jīng)過_____和_____，才能獲得所需要的雜交瘤細(xì)胞。
（4）單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是_____。因此，在醫(yī)藥領(lǐng)域有重要作用，如用于病原體的鑒定。新冠抗原快速檢測試劑盒原理如下圖：膠體金墊上有膠體金標(biāo)記的抗體1（足量，可移動，聚集后會呈紅色），在檢測線（T）上有抗體2，這兩種抗體都能與抗原結(jié)合。抗抗體1抗體（抗體3）位于質(zhì)控線（C）上，可與多余的抗體1結(jié)合。若檢測呈陽性，則T、C線都顯色，共發(fā)生_____次抗原—抗體特異性結(jié)合。
23. 下圖中親本植株的基因型為Tt（體細(xì)胞染色體數(shù)為2n），A、B、C、D表示以親本植株為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過程，請據(jù)圖回答下列問題：
（1）四種人工繁殖過程都用到植物細(xì)胞工程技術(shù)是_______技術(shù)。圖中不同的方法都能獲得子代植株，其原因是_______。
（2）經(jīng)過B過程獲得的子代植株的基因型為_______。
（3）植物細(xì)胞獲得具有活力的原生質(zhì)體需要用_______處理，②過程表示將該植物的兩個原生質(zhì)體進(jìn)行融合，融合前需用化學(xué)試劑_______進(jìn)行誘導(dǎo)；圖中A、B、C、D過程都能得到一種高度液泡化的薄壁細(xì)胞組成的結(jié)構(gòu)即_______。
（4）通過D過程獲得子代植株的工程技術(shù)手段是_______技術(shù)。
24. 科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstI、SmaI、HindⅢ、Alul四種限制性內(nèi)切核酸酶切割位點(diǎn)，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（amp'為抗氨芐青霉素基因），其中①~④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，甲、乙表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請據(jù)圖作答：
（1）基因工程中常用質(zhì)粒作為載體，將基因送入受體細(xì)胞中。作為運(yùn)載體的質(zhì)粒除了必須有復(fù)制原點(diǎn)、標(biāo)記基因之外，通常還需要有_______，圖中的標(biāo)記基因是_______，其主要作用是_______。
（2）基因工程中核心步驟是_______，在此過程中，為使目的基因定向插入運(yùn)載體中，本實驗中應(yīng)該選用限制酶_______對魚抗凍蛋白基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割。
（3）培育出的番茄植株是否具有抗凍性狀，可采用鑒定方法是_______。
（4）PCR技術(shù)是獲取目的基因的主要手段。PCR擴(kuò)增目的基因時設(shè)計引物序列的主要依是_______，若一個該DNA分子在PCR儀經(jīng)過4次循環(huán)，產(chǎn)物中共有_______個等長的目的基因片段，PCR產(chǎn)物通常采用_______法來鑒定。
（5）研究人員采用了如下圖巢式PCR技術(shù)獲取抗凍蛋白基因，巢式PCR是一種變異的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），使用兩對PCR引物擴(kuò)增完整的片段。第一對PCR引物（也稱外引物）擴(kuò)增片段和普通PCR相似。第二對引物稱為巢式引物（因為他們在第一次PCR擴(kuò)增片段的內(nèi)部，也稱內(nèi)引物）結(jié)合在第一次PCR產(chǎn)物內(nèi)部，使得第二次PCR擴(kuò)增片段短于第一次擴(kuò)增。
實驗組別
抗生素種類
實驗結(jié)果
1
A
濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈
2
B
濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈
3
C
濾紙片周圍的透明圈比含A的小
4
D
濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落

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