一、選擇題
1．(2024·江蘇鎮(zhèn)江模擬)下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)的敘述，正確的是( )
A．用自然生長的莖進(jìn)行組織培養(yǎng)需用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒
B．為防止雜菌污染，從接種外植體到生成試管苗盡量在同一個錐形瓶內(nèi)完成
C．培養(yǎng)基含生長素、不含細(xì)胞分裂素時，易形成多核細(xì)胞
D．花粉管通道法介導(dǎo)植物基因轉(zhuǎn)移后續(xù)需要植物組織培養(yǎng)
C 解析：自然生長莖段的消毒屬于外植體消毒，先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，再用無菌水清洗，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉消毒處理，最后再用無菌水清洗，A錯誤；植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個過程，這兩個過程的培養(yǎng)條件不同，故從接種外植體到生成試管苗不能在同一個錐形瓶內(nèi)完成，B錯誤；生長素主要促進(jìn)細(xì)胞核的分裂，細(xì)胞分裂素主要促進(jìn)細(xì)胞質(zhì)的分裂，植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基含生長素、不含細(xì)胞分裂素時，易形成多核細(xì)胞，C正確；利用花粉管通道法得到的是轉(zhuǎn)基因種子，不需要進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)，D錯誤。
2．利用同一株菊花帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗，利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織也可獲得叢狀苗，下列說法正確的是( )
A．兩者都要經(jīng)歷脫分化過程
B．前者總培養(yǎng)的過程時間比后者長
C．兩者獲得叢狀苗遺傳物質(zhì)基本相同
D．要誘導(dǎo)叢狀苗基部細(xì)胞最終形成根，應(yīng)在培養(yǎng)基中添加細(xì)胞分裂素
C 解析：用一株菊花帶側(cè)芽的莖段獲得叢狀苗，可進(jìn)一步獲得完整植株；而利用莖段誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織后，需要通過再分化獲得完整植株，可見前者不需要經(jīng)過脫分化過程，因而其培養(yǎng)過程需要的時間比后者短，A、B錯誤。由于這兩種方法獲得新植株的過程均屬于無性繁殖，所以得到的叢狀苗遺傳物質(zhì)基本相同，C正確。要誘導(dǎo)叢狀苗基部細(xì)胞最終形成根，應(yīng)在培養(yǎng)基中添加生長素，因為生長素能促進(jìn)生根，D錯誤。
3．(2024·浙江杭州模擬)某種植物組織培養(yǎng)的過程如下圖所示，其中甲、乙、丙、丁代表4個不同培養(yǎng)階段。下列敘述正確的是( )
A．甲階段和乙階段培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分不同，但生長調(diào)節(jié)劑種類和配比相同
B．乙階段，培養(yǎng)基中的生長素的含量高于細(xì)胞分裂素
C．丙階段，將叢狀苗分株后移栽到只有生長素沒有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上生根
D．丁階段，試管苗移栽前需在蛭石和珍珠巖等介質(zhì)上鍛煉，增強對低濕、弱光的適應(yīng)能力
C 解析：甲階段和乙階段培養(yǎng)基生長調(diào)節(jié)劑種類和配比不同，A錯誤；乙階段為誘導(dǎo)長出叢芽，培養(yǎng)基中生長素的含量低于細(xì)胞分裂素，B錯誤；與生芽培養(yǎng)基相比，誘導(dǎo)根分化需要較低的細(xì)胞分裂素濃度，可以只有生長素沒有細(xì)胞分裂素，C正確；試管苗移栽前需在蛭石和珍珠巖等介質(zhì)上鍛煉，增強對低濕、強光的適應(yīng)能力，D錯誤。
4．(2024·重慶模擬)利用東方百合和云南大百合進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交，部分結(jié)果如下表所示。下列相關(guān)說法錯誤的是( )
A．原生質(zhì)體的融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動性
B．獲得原生質(zhì)體后，可用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)
C．低濃度PEG促進(jìn)原生質(zhì)體融合，高濃度抑制融合
D．誘導(dǎo)形成的試管苗需移植到消毒后的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待長壯后再移栽入土
C 解析：原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動性，A正確；獲得原生質(zhì)體后，細(xì)胞已經(jīng)分散，可以利用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)，B正確；從表格中看出，PEG濃度為40%時融合率最高，題中沒有無PEG的對照組，不能說明低濃度的PEG促進(jìn)融合，高濃度的PEG抑制融合，C錯誤；誘導(dǎo)形成的試管苗需移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中，待長壯后再移栽入土，D正確。
5．“索蚌”是東方百合的一個主栽品種，夏天種植時病蟲害嚴(yán)重，花朵數(shù)少?？蒲腥藛T根據(jù)云南大百合和“索蚌”優(yōu)缺點互補的特性，以植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出多花型、花色豐富并集觀賞、抗性及藥用、食用為一體的百合新品種。下列敘述錯誤的是( )
A．“索蚌”與云南大百合的體細(xì)胞雜交之前需用纖維素酶和果膠酶處理獲得原生質(zhì)體
B．可采用高Ca2+—高pH融合法誘導(dǎo)“索蚌”與云南大百合的原生質(zhì)體融合
C．生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值小于1時可誘導(dǎo)雜種細(xì)胞形成愈傷組織
D．百合新品種的獲得不需要考慮兩親本之間的生殖隔離問題
C 解析：東方百合“索蚌”與云南大百合的體細(xì)胞雜交之前需用纖維素酶和果膠酶處理獲得原生質(zhì)體，A正確；可采用高Ca2+—高pH融合法誘導(dǎo)“索蚌”與云南大百合的原生質(zhì)體融合得到雜種細(xì)胞，B正確；生長素用量與細(xì)胞分裂素用量的比值為1時可誘導(dǎo)雜種細(xì)胞形成愈傷組織，C錯誤；百合新品種的獲得利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，不需要考慮親本之間的生殖隔離問題，D正確。
6．紅豆杉是世界上公認(rèn)瀕臨滅絕的天然珍稀抗癌植物，它的細(xì)胞提取物紫杉醇是重要的抗癌藥物之一。紅豆杉可通過播種的方法進(jìn)行繁殖，但其生長速度緩慢，再生能力差，而植物組織培養(yǎng)技術(shù)是實現(xiàn)其大規(guī)模培養(yǎng)的途徑之一。下列有關(guān)敘述正確的是( )
A．培養(yǎng)紅豆杉的愈傷組織可用于紫杉醇的工業(yè)化生產(chǎn)
B．紅豆杉不同部位的細(xì)胞，經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的愈傷組織，基因型相同
C．培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌，外植體需要用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液消毒處理
D．將花粉培育獲得單倍體，經(jīng)加倍處理后可得到雜合子
A 解析：培養(yǎng)紅豆杉的愈傷組織，可以從中提取紫杉醇，用于紫杉醇的工業(yè)化生產(chǎn)，A正確；花粉是經(jīng)過減數(shù)分裂形成的，因此紅豆杉體細(xì)胞和花粉經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因型不相同，B錯誤；培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌，外植體需要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%左右的次氯酸鈉溶液消毒處理，C錯誤；將花粉培育獲得單倍體，經(jīng)加倍處理后可獲得純合子，D錯誤。
7．(2024·廣東東莞模擬)科研人員用抗病、抗寒的二倍體阿寬蕉和三倍體無籽龍牙蕉進(jìn)行體細(xì)胞雜交，培育出抗病、抗寒的無籽新品種，拓寬了香蕉種植區(qū)域。相關(guān)敘述正確的是( )
A．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)無法獲得含雙親優(yōu)良細(xì)胞質(zhì)基因的個體
B．②過程可用滅活病毒誘導(dǎo)法、PEG融合法等方法實施誘導(dǎo)
C．③過程成功的原因是雜種細(xì)胞含個體發(fā)育的整套遺傳信息
D．抗病、抗寒無籽新品種自交，可獲得抗病、抗寒無籽后代
C 解析：植物體細(xì)胞雜交技術(shù)促進(jìn)雙親細(xì)胞融合，也融合了雙親優(yōu)良細(xì)胞質(zhì)基因，A錯誤；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不能用滅活病毒誘導(dǎo)法，B錯誤；③過程是雜種細(xì)胞發(fā)育成一個新個體，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，即該植物細(xì)胞含有個體發(fā)育的整套遺傳信息，C正確；抗病、抗寒無籽新品種是抗病、抗寒的二倍體阿寬蕉和三倍體無籽龍牙蕉進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得的，屬于異源五倍體，減數(shù)分裂時聯(lián)會紊亂，是不育的，D錯誤。
8．(2024·廣東廣州模擬)肉蓯蓉具有較高的藥用價值，自然條件下的產(chǎn)量較低，其次生代謝產(chǎn)物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人員以外植體誘導(dǎo)出愈傷組織，進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)。在不同的初始接種濃度下培養(yǎng)一段時間后，對懸浮培養(yǎng)液的PeGs進(jìn)行測定，結(jié)果如下圖所示。下列有關(guān)敘述，錯誤的是( )
A．植物組織培養(yǎng)幾乎不受季節(jié)、天氣等限制，條件可控
B．愈傷組織培養(yǎng)時需用固體培養(yǎng)基，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時需用液體培養(yǎng)基
C．若工廠化大量生產(chǎn)PeGs，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時就應(yīng)選擇接種細(xì)胞的濃度為3.2 g·L-1
D．若需進(jìn)一步了解細(xì)胞生成PeGs的能力，則要檢測培養(yǎng)后培養(yǎng)液中的細(xì)胞密度
C 解析：植物組織培養(yǎng)使用人工配制的培養(yǎng)液，可以人為控制其生長環(huán)境，故植物組織培養(yǎng)幾乎不受季節(jié)、天氣等限制，條件可控，A正確；愈傷組織培養(yǎng)時需用固體培養(yǎng)基，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時需用液體培養(yǎng)基，有利于細(xì)胞增殖，B正確；若工廠化大量生產(chǎn)PeGs，細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時，選擇接種細(xì)胞的濃度應(yīng)在2.4至4.0 g·L-1之間設(shè)置濃度梯度找到最適濃度，C錯誤；若需進(jìn)一步了解細(xì)胞生成PeGs的能力，細(xì)胞密度若過大影響其產(chǎn)量，因此要檢測培養(yǎng)后培養(yǎng)液中的細(xì)胞密度，D正確。
二、非選擇題
9．(2024·云南聯(lián)考)甲植物(2n＝18)具有由核基因控制的多種優(yōu)良性狀，遠(yuǎn)緣植物乙(4n＝32)的細(xì)胞質(zhì)中存在抗除草劑基因，科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育具有抗除草劑性狀的優(yōu)良品種丙，途徑如圖所示。已知X射線處理會使細(xì)胞分裂功能喪失但不影響線粒體功能，丙烯酸異辛酯(IOA)處理會使線粒體失活，但不影響細(xì)胞分裂?；卮鹣铝袉栴}：
(1)利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得新植物體，利用的生物學(xué)原理是_____________________________________________。取植物的頂芽細(xì)胞進(jìn)行培育，有利于獲得脫毒苗，原因是______________________________________________________________。
(2)過程①常用酶解法去除細(xì)胞壁，利用的酶是__________________。過程②常用物理法促進(jìn)細(xì)胞融合，如________________(答出1點)。
(3)在細(xì)胞融合體系中，未融合的細(xì)胞不能形成愈傷組織，原因是_________________。
(4)植物體細(xì)胞雜交成功的關(guān)鍵是無菌操作，對培養(yǎng)皿采用的滅菌方法是___________。
解析：(1)植物體細(xì)胞雜交利用細(xì)胞膜的流動性，雜種細(xì)胞形成新植物體利用植物細(xì)胞的全能性。植物頂端分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，取頂芽細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交有利于獲得脫毒苗。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁。促進(jìn)細(xì)胞融合的物理方法有電融合法和離心法等。(3)X射線處理會使細(xì)胞分裂功能喪失但不影響線粒體的功能，IOA處理會使線粒體失活，但不影響細(xì)胞分裂，因此未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞的融合細(xì)胞均不能正常分裂，都不能形成愈傷組織，只有雜種細(xì)胞由于生理功能互補能正常分裂形成愈傷組織。(4)對培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌可采用濕熱滅菌法或干熱滅菌法。
答案：(1)細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性 頂端分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒 (2)纖維素酶和果膠酶 電融合法或離心法 (3)甲細(xì)胞用 IOA處理后線粒體失活，細(xì)胞生命活動受限；乙細(xì)胞經(jīng)X射線處理后失去分裂能力 (4)濕熱滅菌法或干熱滅菌法
10．(2024·黑龍江模擬)興安杜鵑主要分布于黑龍江等地，在每年4月下旬冰雪尚未消融時就可開花，具有極高的觀賞價值，導(dǎo)致其被不法分子過量采摘，有的地方趨于消失。興安杜鵑再生很難，因此研究人員擬利用配方不同的培養(yǎng)基進(jìn)行組織培養(yǎng)，從而快速提供大量苗木，部分實驗數(shù)據(jù)如下表所示，下列有關(guān)敘述不正確的是( )
在不同培養(yǎng)基上愈傷組織的形成情況
注：愈傷組織誘導(dǎo)率＝誘導(dǎo)愈傷組織總數(shù)÷接種總數(shù)×100%。
A．由表中數(shù)據(jù)可知愈傷組織誘導(dǎo)率最高的組別是處理3
B．外植體脫分化過程中需要添加生長素和細(xì)胞分裂素
C．將外植體培養(yǎng)成愈傷組織的過程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性
D．植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以保持興安杜鵑優(yōu)良的遺傳特性
C 解析：根據(jù)表格數(shù)據(jù)可知，處理3中，誘導(dǎo)率為93.33%，是5組中最高的，A正確；外植體脫分化過程中需要添加生長素和細(xì)胞分裂素，脫分化和再分化階段生長素和細(xì)胞分裂素的比例不同，B正確；將外植體培養(yǎng)成愈傷組織屬于脫分化，未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，C錯誤；植物組織培養(yǎng)技術(shù)屬于無性生殖，可以保持興安杜鵑優(yōu)良的遺傳特性，D正確。
11．(2024·山東煙臺模擬)擬矮牽牛的原生質(zhì)體在X培養(yǎng)基(A)上只能形成小細(xì)胞團(tuán)，不能形成植株，在含放線菌素-D的X培養(yǎng)基(B)上培養(yǎng)結(jié)果相同；矮牽牛的原生質(zhì)體在A上能分化成植株，但在B上不能生長。在B上利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)均可培養(yǎng)出可育雜種矮牽牛。下列說法錯誤的是( )
A．酶解法制備原生質(zhì)體時，應(yīng)在等滲或稍微高滲溶液中進(jìn)行
B．只有雜種細(xì)胞能在B上形成植株
C．獲得的雜種矮牽牛可育，說明擬矮牽牛和矮牽牛屬于同一物種
D．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性
C 解析：原生質(zhì)體是植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后的結(jié)構(gòu)，為避免原生質(zhì)體吸水漲破，酶解法制備原生質(zhì)體時，應(yīng)在等滲或稍微高滲溶液中進(jìn)行，A正確。根據(jù)題干信息，擬矮牽牛的原生質(zhì)體在X培養(yǎng)基(A)上只能形成小細(xì)胞團(tuán)，不能形成植株，在含放線菌素-D的X培養(yǎng)基(B)中，也不能形成植株；矮牽牛的原生質(zhì)體在A上能分化成植株，但在B上不能生長，雜種細(xì)胞能在B上形成植株，故只有雜種細(xì)胞能在B上形成植株，B正確。同一物種是指在自然狀態(tài)下能相互交配并產(chǎn)生可育后代的物種，題述過程是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，是人為狀態(tài)下實現(xiàn)的，故雜種矮牽?？捎荒苷f明擬矮牽牛和矮牽牛屬于同一物種，C錯誤。植物體細(xì)胞雜交首先要使原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞，其次要把雜種細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成雜種植株。細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有流動性，植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，D正確。組別
1
2
3
4
5
PEG濃度/%
25
30
35
40
45
處理條件
黑暗、27±3 ℃、15 min
融合率/%
10
12
15
30
20
處理
接種總數(shù)/個
愈傷組織總數(shù)/塊
愈傷組織誘導(dǎo)率/%
1
30
4
13.33
2
30
25
83.33
3
30
28
93.33
4
30
8
26.67
5
30
22
73.33

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