一、單選題
1．利用微生物分解纖維素對(duì)廢棄物污染的減輕和作物秸稈再利用具有重要意義。某興趣小組從富含纖維素的土壤中取樣，加入選擇培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，之后接種于鑒別培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，篩選出能夠分解纖維素的微生物。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.選擇培養(yǎng)的目的是促進(jìn)纖維素分解菌的生長(zhǎng)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)
B.振蕩培養(yǎng)可以增加溶解氧量，有利于微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的充分接觸和利用
C.鑒別培養(yǎng)基上涂布接種時(shí)，將0.1mL菌液滴到培養(yǎng)基表面再用涂布器涂布均勻
D.加入剛果紅的培養(yǎng)基上所出現(xiàn)的有透明圈的菌落，一定是能分解纖維素的細(xì)菌繁殖而成的
2．液體深層培養(yǎng)是指以獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物為目的的發(fā)酵罐大容量液體培養(yǎng)，可通過(guò)調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH和溫度、營(yíng)養(yǎng)條件以及氣體環(huán)境促使微生物迅速生長(zhǎng)，產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物，是發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)的基本培養(yǎng)方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A.在進(jìn)行液體深層培養(yǎng)前需要對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌
B.在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，前期密封保持無(wú)氧，后期可根據(jù)產(chǎn)物不同決定是否放氣
C.若發(fā)酵產(chǎn)品是微生物代謝產(chǎn)物，發(fā)酵結(jié)束后，可通過(guò)過(guò)濾、沉淀等方法獲得
D.液體深層培養(yǎng)過(guò)程中要密切關(guān)注培養(yǎng)液的pH、溫度以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗情況
3．“篩選”是生物工程中常用的技術(shù)手段，下列關(guān)于篩選的敘述錯(cuò)誤的是( )
A.用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行篩選時(shí)，實(shí)驗(yàn)組接種微生物，對(duì)照組不接種微生物
B.植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細(xì)胞需要進(jìn)行篩選
C.單克隆抗體制備過(guò)程中，在完成細(xì)胞融合后，第一次篩選出的是雜交瘤細(xì)胞
D.基因工程中通過(guò)標(biāo)記基因篩選出的細(xì)胞不一定含有重組質(zhì)粒
4．研究人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，將培育的野生獼猴桃的單倍體的細(xì)胞與栽培二倍體獼猴桃細(xì)胞的原生質(zhì)體融合，獲得了三倍體植株，為其種質(zhì)改良開(kāi)辟了新途徑。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( )
A.原生質(zhì)體獲得后需要在等滲培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)
B.原生質(zhì)體融合時(shí)可采用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)
C.三倍體植株的形成需經(jīng)過(guò)脫分化和再分化等培養(yǎng)過(guò)程
D.二倍體獼猴桃植株和三倍體獼猴桃植株屬于不同的物種
5．植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，如圖表示科學(xué)家利用植物細(xì)胞工程對(duì)紅豆杉植株進(jìn)行繁殖以及獲得紫杉醇的過(guò)程，下列敘述正確的是( )
A.外植體形成愈傷組織的過(guò)程中，會(huì)發(fā)生DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯
B.外植體形成愈傷組織和培養(yǎng)愈傷組織所用的培養(yǎng)基成分相同
C.誘導(dǎo)愈傷組織形成的過(guò)程屬于脫分化，該過(guò)程不存在基因的選擇性表達(dá)
D.培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)先用生長(zhǎng)素相對(duì)含量較高的培養(yǎng)基誘導(dǎo)生芽，再更換培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根
6．2021年6月，我國(guó)首個(gè)原創(chuàng)性抗體偶聯(lián)藥物（ADC）獲批上市。該藥采用人源化抗HER2抗體，通過(guò)可切割的接頭與高效毒性分子MMAE偶聯(lián)。ADC被腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞后，載荷MMAE被釋放到細(xì)胞質(zhì)中后，可抑制細(xì)胞中微管蛋白聚合，進(jìn)而影響紡錘體的形成。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.傳統(tǒng)鼠源性單抗可能會(huì)引起人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體進(jìn)而影響ADC的效果
B.ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會(huì)導(dǎo)致藥物分子脫落而對(duì)正常細(xì)胞造成損傷
C.連接抗體和MMAE的接頭可能在腫瘤細(xì)胞溶酶體中被蛋白酶破壞
D.MMAE可能抑制腫瘤細(xì)胞內(nèi)著絲粒分裂從而使其停滯在分裂中期
7．精子載體法是以精子作為載體攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞的方法，利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程如圖。下列敘述正確的是( )
A.導(dǎo)入外源基因的精子需放入ATP溶液中進(jìn)行獲能處理才具備受精能力
B.導(dǎo)入外源基因的精子和卵細(xì)胞經(jīng)過(guò)②過(guò)程后即轉(zhuǎn)化完成
C.過(guò)程③需將受精卵體外培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚期才可進(jìn)行胚胎移植
D.過(guò)程④進(jìn)行同期發(fā)情處理以降低代孕母鼠對(duì)外來(lái)胚胎的免疫排斥反應(yīng)
8．某實(shí)驗(yàn)小組利用菜花進(jìn)行DNA的提取及電泳鑒定，并對(duì)菜花非常保守的葉綠體基因trnL進(jìn)行PCR擴(kuò)增。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( )
A.將預(yù)冷的酒精溶液加入菜花研磨濾液離心獲得的上清液中，靜置可見(jiàn)絲狀物
B.用二苯胺鑒定DNA時(shí)，試管中溶液無(wú)藍(lán)色出現(xiàn)可能是DNA提取量過(guò)少或無(wú)
C.將混合液注入凝膠的加樣孔時(shí)，需留一個(gè)加樣孔加入指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物
D.PCR反應(yīng)體系中必須含有trnL基因的引物、Mg2+、4種脫氧核糖核苷酸以及ATP等成分
9．注射胰島素是治療1型糖尿病的主要手段。如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素的操作示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.以細(xì)胞1中提取的mRNA為模板，可逆轉(zhuǎn)錄出胰高血糖素的基因
B.通過(guò)過(guò)程⑤的重復(fù)進(jìn)行，可以短時(shí)間內(nèi)獲得大量的胰島素基因
C.過(guò)程⑦將目的基因與基因載體相連，這是基因工程的核心步驟
D.丙中往往含標(biāo)記基因，便于篩選含胰島素基因的受體細(xì)胞
10．乙肝病毒表面主蛋白是由H基因控制合成。下圖是將H基因?qū)肽辰湍妇a(chǎn)乙肝疫苗的過(guò)程。5′A和3′TT分別是該酵母菌中某基因的啟動(dòng)子和終止子，此啟動(dòng)子還能使外源基因在酵母菌中高效表達(dá)，3′A是該基因下游的序列?？茖W(xué)家將改造過(guò)的P質(zhì)粒與H基因連接形成重組質(zhì)粒，再在重組質(zhì)粒特定部位酶切，形成的重組DNA片段可以整合到酵母菌染色體上，最終實(shí)現(xiàn)H基因的表達(dá)。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可在H基因兩側(cè)分別接上SnaBⅠ和AvrⅡ的識(shí)別序列
B.用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基可以篩選出含有H基因的酵母菌
C.步驟1中，將重組質(zhì)粒先導(dǎo)入大腸桿菌的目的是復(fù)制出大量重組質(zhì)粒
D.步驟3中，用BglⅡ?qū)χ亟M質(zhì)粒進(jìn)行酶切可以獲得圖示的重組DNA片段
11．目的基因和載體如果用同一種限制酶處理，連接時(shí)會(huì)出現(xiàn)正反接的情況，為鑒定篩選出的表達(dá)載體中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR后，結(jié)合電泳技術(shù)鑒定，圖示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，其中目的基因?yàn)殚L(zhǎng)度300bp的片段。下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是( )
A.PCR復(fù)性溫度不宜太低，避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈
B.電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)
C.選取引物甲、丙，擴(kuò)增出450bp長(zhǎng)度片段時(shí)，可以說(shuō)明目的基因正接
D.選取引物甲、乙，擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片段時(shí)，可以說(shuō)明目的基因反接
12．NewPhytlgist雜志發(fā)表了我國(guó)科學(xué)家有關(guān)大豆對(duì)鹽脅迫響應(yīng)的分子調(diào)控機(jī)制，過(guò)程如圖所示。研究發(fā)現(xiàn)，miR160a可通過(guò)切割GmARF16基因轉(zhuǎn)錄的mRNA使大豆具有耐鹽性。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
A.大豆的不耐鹽與耐鹽這對(duì)性狀受多對(duì)基因共同決定
B.若GmMYC2基因啟動(dòng)子甲基化程度增加可提高耐鹽性
C.脯氨酸含量增加可增大根部細(xì)胞滲透壓引起耐鹽性增強(qiáng)
D.miR160a通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則識(shí)別mRNA并斷裂氫鍵
二、多選題
13．古籍記載了許多古人在生產(chǎn)中運(yùn)用發(fā)酵技術(shù)加工食品積累的寶貴經(jīng)驗(yàn)，下列對(duì)相關(guān)記載的理解，正確的是( )
A.“浸曲發(fā)”的目的是活化酵母菌，此時(shí)酵母菌通過(guò)有氧呼吸和無(wú)氧呼吸釋放CO2
B.“舒令極冷”是為了防止蒸熟的米溫度過(guò)高而殺死酒曲中的酵母菌等微生物
C.“令沒(méi)菜把即止”的主要目的是讓蔬菜充分吸收鹽分，使風(fēng)味品質(zhì)更佳
D.“用水三斗”是為了避免酒精濃度過(guò)高殺死醋酸菌
14．酵母菌細(xì)胞壁的主要成分是幾丁質(zhì)。釀酒酵母產(chǎn)酒精能力強(qiáng)，但沒(méi)有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精發(fā)酵能力弱。為了實(shí)現(xiàn)以谷物為原料高效生產(chǎn)酒精的目的，科研人員進(jìn)行了下圖所示改良酵母菌種實(shí)驗(yàn)。下列敘述不正確的是( )
A.以谷物為原料用釀酒酵母釀酒時(shí)，需對(duì)原料進(jìn)行糖化處理用
B.PEG誘導(dǎo)之前需用纖維素酶去除兩種酵母的細(xì)胞壁
C.在培養(yǎng)基X中以淀粉為唯一碳源即可篩選出雜種酵母
D.以淀粉轉(zhuǎn)化為還原糖的效率作為最終鑒定目的菌的指標(biāo)
15．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列說(shuō)法不正確的是( )
A.圖中②使用選擇培養(yǎng)基篩選，③用抗原—抗體雜交的方法篩選
B.雜交瘤細(xì)胞的制備原理是細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動(dòng)性
C.對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為巨噬細(xì)胞＋正常細(xì)胞共培養(yǎng)體系＋單克隆抗體
D.實(shí)驗(yàn)組中巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著低于對(duì)照組可驗(yàn)證上述推測(cè)
16．Cre酶是一種重組酶，LxP是能被Cre酶識(shí)別的特異DNA序列。Cre/LxP重組酶系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特異位點(diǎn)的基因敲除、基因插入等操作。一般而言，當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個(gè)相同的LxP序列且方向相同時(shí)，Cre酶能有效切除兩個(gè)位點(diǎn)間的DNA序列，如圖所示。下列說(shuō)法不正確的是( )
A.無(wú)Cre酶存在的細(xì)胞因STOP的作用而無(wú)法發(fā)出熒光
B.Cre酶能將兩個(gè)核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)
C.當(dāng)有兩個(gè)相同的LxP序列時(shí)Cre酶就能有效切除一個(gè)
D.啟動(dòng)子能啟動(dòng)綠色熒光基因翻譯熒光蛋白的過(guò)程
三、讀圖填空題
17．一部手機(jī)上攜帶的細(xì)菌種類(lèi)繁多，包括沙門(mén)氏菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌等，這已成為致病細(xì)菌傳播的重要途徑之一。為驗(yàn)證該觀點(diǎn)，某同學(xué)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)調(diào)查。如圖是實(shí)驗(yàn)流程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下表是2種可供選擇的培養(yǎng)基配方。
(1)經(jīng)發(fā)現(xiàn)，手機(jī)上存在著大量的微生物，如酵母菌和綠膿桿菌等，這兩種微生物的主要區(qū)別是____________。
(2)從物理性質(zhì)上看，題述兩種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，為達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?yīng)選擇上表中的培養(yǎng)基____________，理由是____________。
(3)為防止外來(lái)雜菌的入侵，對(duì)實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)基應(yīng)使用____________滅菌。
(4)結(jié)果如圖所示，如何證明該培養(yǎng)基是否被雜菌污染？____________。
(5)將上述菌懸液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?.1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品接種到3個(gè)平板上，經(jīng)培養(yǎng)計(jì)數(shù)，3個(gè)平板的細(xì)菌菌落數(shù)分別是108、105、102，則該取樣區(qū)域細(xì)菌密度約為個(gè)/cm2.
18．用化學(xué)方法激活小鼠成熟的卵母細(xì)胞得到phESC（孤雌單倍體干細(xì)胞），然后通過(guò)基因編輯技術(shù)使phESC中的3個(gè)基因沉默，phESC的細(xì)胞核狀態(tài)便可接近精子細(xì)胞核的狀態(tài)，如下圖1所示。用化學(xué)方法激活小鼠的精子得到ahESC（孤雄單倍體干細(xì)胞），然后對(duì)ahESC中的8個(gè)基因進(jìn)行編輯，ahESC的細(xì)胞核便具有卵細(xì)胞核的特點(diǎn)，如下圖2所示。根據(jù)以上資料回答下列問(wèn)題：
(1)體內(nèi)受精過(guò)程中，精子入卵后被激活的卵子完成____________，排出____________后，形成____________。
(2)用____________對(duì)雌性小鼠進(jìn)行處理可得到大量卵母細(xì)胞，將這些卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化為phESC的過(guò)程類(lèi)似于植物組織培養(yǎng)中的____________過(guò)程。
(3)ahESC與精子和去核卵細(xì)胞融合后，得到的融合細(xì)胞的性染色體組成可能是____________。
(4)據(jù)圖1和圖2分析可知，只依賴(lài)雌性小鼠就可以得到孤雌小鼠，而只依賴(lài)雄性小鼠是不能得到孤雄小鼠的，請(qǐng)寫(xiě)出兩點(diǎn)理由：____________，____________。
19．M基因編碼的M蛋白在動(dòng)物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過(guò)核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是____________，這類(lèi)酶能將特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的____________斷開(kāi)。
(2)在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是____________。
(3)與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是____________。
(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物：以免疫小鼠的____________淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡(jiǎn)要寫(xiě)出利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活的實(shí)驗(yàn)思路。____________。
20．PHB2蛋白具有抑制細(xì)胞增殖的作用。為初步探究某動(dòng)物PHB2蛋白抑制人宮頸癌細(xì)胞增殖的原因，研究者從基因數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取了該蛋白的基因編碼序列（簡(jiǎn)稱(chēng)phb2基因），大小為0.9kb（1kb＝1000堿基對(duì)），利用大腸桿菌表達(dá)該蛋白?；卮鹣铝袉?wèn)題：
注：箭頭表示切割位點(diǎn)。
(1)圖1為所用載體圖譜，圖中限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見(jiàn)表。為使phb2基因（該基因序列不含圖1中限制酶的識(shí)別序列）與載體正確連接，在擴(kuò)增的phb2基因兩端分別引入____________和____________兩種不同限制酶的識(shí)別序列。經(jīng)過(guò)這兩種酶酶切的phb2基因和載體進(jìn)行連接時(shí)，可選用____________（填“E。cliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）。
(2)轉(zhuǎn)化前需用CaCl2處理大腸桿菌細(xì)胞，使其處于____________的生理狀態(tài)，以提高轉(zhuǎn)化效率。
(3)將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，隨機(jī)挑取菌落（分別編號(hào)為1、2、3、4）培養(yǎng)并提取質(zhì)粒，用（1）中選用的兩種限制酶進(jìn)行酶切，酶切產(chǎn)物經(jīng)電泳分離，結(jié)果如圖2，____________號(hào)菌落的質(zhì)粒很可能是含目的基因的重組質(zhì)粒。
21．玉米是重要的糧食作物，其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中對(duì)水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能?？蒲腥藛T成功培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米，回答下列問(wèn)題。
(1)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是____________。
(2)利用PCR技術(shù)以圖1中的DNA片段為模板擴(kuò)增P基因，需要的引物有____________（從A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇）。
(3)培育超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米過(guò)程中所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖2所示（農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，只有T—DNA進(jìn)入植物細(xì)胞，菌體本身不進(jìn)入）。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用____________酶組合。
(4)將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入____________（填“潮霉素”“卡那霉素”或“潮霉素或卡那霉素”）進(jìn)行篩選。
(5)P蛋白在玉米株系的表達(dá)量如圖3所示，可作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究實(shí)驗(yàn)材料的有____________。
參考答案
1．答案：D
解析：A、選擇培養(yǎng)的原理是人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)，因此選擇培養(yǎng)的目的是促進(jìn)纖維素分解菌生長(zhǎng)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)，A正確；
B、振蕩培養(yǎng)可以增加溶解氧量，促進(jìn)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣的充分接觸和利用，B正確；
C、可用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的接種，鑒別培養(yǎng)基上涂布接種時(shí)，將0.1mL菌液滴到培養(yǎng)基表面再用涂布器涂布均勻，C正確；
D、加入剛果紅的培養(yǎng)基上所出現(xiàn)的透明圈的菌落是能夠分解纖維素的微生物，能夠分解纖維素的微生物既有真菌也有細(xì)菌，D錯(cuò)誤。
故選D。
2．答案：C
解析：A、為了防止微生物的污染，則在進(jìn)行液體深層培養(yǎng)前需要對(duì)發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，A正確；
B、在培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)，前期密封保持無(wú)氧，后期可根據(jù)產(chǎn)物是否含有氣體，則決定是否放氣，B正確；
C、發(fā)酵產(chǎn)品不同，分離、提純的方法不同，如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可采用過(guò)濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進(jìn)行提取，C錯(cuò)誤；
D、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、pH、溫度等條件會(huì)影響微生物的代謝，所以液體深層培養(yǎng)過(guò)程中要密切關(guān)注培養(yǎng)液的pH、溫度以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗情況，D正確。
故選C。
3．答案：A
解析：A、用選擇培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行篩選時(shí)，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均接種相同數(shù)量的微生物，實(shí)驗(yàn)組接種在選擇培養(yǎng)基上，對(duì)照組接種在普通培養(yǎng)基上，若實(shí)驗(yàn)組菌落數(shù)少于對(duì)照組，說(shuō)明選擇培養(yǎng)基具有篩選作用，A錯(cuò)誤；
B、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，原生質(zhì)體融合后獲得的細(xì)胞需要進(jìn)行篩選，選出雜種細(xì)胞，B正確；
C、單克隆抗體制備過(guò)程中，在完成細(xì)胞融合后，第一次篩選出的是雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選出的細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，C正確；
D、基因工程中通過(guò)標(biāo)記基因篩選出的細(xì)胞不一定含重組質(zhì)粒，如只含有普通質(zhì)粒，D正確。
故選A。
4．答案：B
解析：A、原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁的保護(hù)，則需要在等滲培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，防止細(xì)胞失水和吸水，A正確；
B、原生質(zhì)體融合時(shí)不可用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)，滅活的病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法，B錯(cuò)誤；
C、雜種細(xì)胞形成雜種植株需要經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)，涉及脫分化和再分化等培養(yǎng)過(guò)程，C正確；
D、二倍體獼猴桃植株和三倍體獼猴桃植株不能進(jìn)行基因交流，存在生殖隔離，屬于不同的物種，D正確。
故選B。
5．答案：A
解析：A、外植體形成愈傷組織的過(guò)程，會(huì)進(jìn)行細(xì)胞的分裂和分化，故核DNA會(huì)進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄和翻譯，A正確；
B、外植體形成愈傷組織和培養(yǎng)愈傷組織所用的培養(yǎng)基成分不同，如激素的比例等都有所差別，B錯(cuò)誤；
C、誘導(dǎo)愈傷組織形成的過(guò)程屬于脫分化，該過(guò)程與基因的選擇性表達(dá)有關(guān)，C錯(cuò)誤；
D、培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)先用細(xì)胞分裂素相對(duì)含量較高的培養(yǎng)基誘導(dǎo)生芽，再更換培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根，D錯(cuò)誤。
故選A。
6．答案：D
解析：A、傳統(tǒng)鼠源性單抗對(duì)人體來(lái)說(shuō)是抗原，可能會(huì)引起人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，使得單抗藥物療效減弱，并且引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，進(jìn)而影響ADC的效果，而人源化單抗能夠克服人抗鼠抗體反應(yīng)，避免單抗分子被免疫系統(tǒng)當(dāng)作異源蛋白而被快速清除，提高單抗藥物的藥效，A正確；
B、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）是采用人源化抗HER2抗體，通過(guò)可切割的接頭與高效毒性分子MMAE偶聯(lián)，因此ADC中接頭穩(wěn)定性偏低會(huì)導(dǎo)致藥物分子脫落而對(duì)正常細(xì)胞造成損傷，造成“脫靶毒性”，B正確；
C、抗體的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，連接抗體和MMAE的接頭是蛋白質(zhì)，因此可能在腫瘤細(xì)胞溶酶體中被蛋白酶破壞，C正確；
D、據(jù)題意可知，ADC被腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞后，可抑制細(xì)胞中微管蛋白聚合，進(jìn)而影響紡錘體的形成，進(jìn)而影響紡錘絲牽拉染色體移向兩極，不影響著絲粒的分裂，D錯(cuò)誤。
故選D。
7．答案：C
解析：A、導(dǎo)入外源基因的精子需放入人工配置的獲能液來(lái)模仿雌性生殖道內(nèi)的獲能環(huán)境來(lái)達(dá)到獲能狀態(tài)，A錯(cuò)誤；
B、轉(zhuǎn)化是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化，導(dǎo)入外源基因的精子和卵細(xì)胞經(jīng)過(guò)②過(guò)程后并不意味著轉(zhuǎn)化完成，B錯(cuò)誤；
C、通過(guò)轉(zhuǎn)基因、核移植和體外受精技術(shù)獲得的胚胎，需在體外培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段才可移植，C正確；
D、④是胚胎移植過(guò)程，需要對(duì)受體母鼠用相關(guān)激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，受體對(duì)移入子宮的外來(lái)胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，D錯(cuò)誤。
故選C。
8．答案：D
解析：A、DNA不溶于冷卻的酒精溶液，所以將預(yù)冷的酒精溶液加入菜花研磨濾液離心獲得的上清液中，靜置可見(jiàn)絲狀物，A正確；
B、正常情況下二苯胺與DNA在沸水浴條件下反應(yīng)呈藍(lán)色，試管中溶液無(wú)藍(lán)色出現(xiàn)，可能是DNA的提取量過(guò)少或未提取出DNA，B正確；
C、在進(jìn)行電泳時(shí)，要預(yù)留一個(gè)加樣孔，加入指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物在進(jìn)行電泳時(shí)，C正確；
D、PCR反應(yīng)體系中除了添加含有trnL基因的引物、Mg2+、4種脫氧核糖核苷酸以及ATP等成分外，還必須加入模板DNA，D錯(cuò)誤。
故選D。
9．答案：A
解析：A、細(xì)胞1中含有胰島素mRNA，可知細(xì)胞1是胰島B細(xì)胞，由于基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞1中不含有胰高血糖素mRNA，不能擴(kuò)增出胰高血糖素的基因，A錯(cuò)誤；
B、③④⑤為PCR過(guò)程，表示目的基因的擴(kuò)增過(guò)程，通過(guò)過(guò)程⑤的重復(fù)進(jìn)行，可以短時(shí)間內(nèi)獲得大量的胰島素基因，B正確；
C、過(guò)程⑦將目的基因與基因載體相連，⑦為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，這是基因工程的核心步驟，C正確；
D、丙（重組質(zhì)粒）中往往含有標(biāo)記基因，便于篩選含有胰島素基因的受體細(xì)胞，D正確。
故選A。
10．答案：B
解析：A、為實(shí)現(xiàn)H基因和P質(zhì)粒重組，只能用限制酶SnaBI和AvrⅡ切割質(zhì)粒，并在H基因兩側(cè)的接上相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列，這樣設(shè)計(jì)的優(yōu)點(diǎn)是確保定向連接（避免質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化及自連），A正確；
B、重組DNA片段含卡那霉素基因，用含卡那霉素的培養(yǎng)基可以篩選出含有H基因的酵母菌，B錯(cuò)誤；
C、將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，其目的是為了讓目的基因在大腸桿菌里擴(kuò)增，獲取大量重組質(zhì)粒，C正確；
D、步驟3中，重組DNA片段首尾分別是5'和3'，用BglⅡ?qū)χ亟M質(zhì)粒進(jìn)行酶切可以獲得圖示的重組DNA片段，D正確。
故選B。
11．答案：C
解析：A、退火是在高溫解旋后降低溫度讓引物與模板鏈結(jié)合，退火溫度不宜太低，避免引物錯(cuò)配和模板鏈形成雙鏈，A正確；
B、電泳條帶遷移的位置和速度與DNA分子的大小、帶電量和構(gòu)象有關(guān)，如電泳一段時(shí)間后，較大的DNA分子遷移距離小，離加樣孔近，而較小的DNA分子遷移距離大，離加樣孔遠(yuǎn)，B正確；
C、由于使用的引物是甲和丙，沒(méi)有與基因相應(yīng)位置配對(duì)，因此不管基因正接還是反接，均為450bp，C錯(cuò)誤；
D、選取引物甲乙，擴(kuò)增出400bp長(zhǎng)度片斷時(shí)，可以說(shuō)明目的基因反接，若正接，不能擴(kuò)增出100bp的片段，D正確。
故選C。
12．答案：D
解析：A、大豆的不耐鹽與耐鹽受GmARF16基因、GmMYC2基因等多對(duì)基因共同決定，A正確；
B、若GmMYC2基因啟動(dòng)子甲基化程度增加，會(huì)抑制bHLH轉(zhuǎn)錄因子的產(chǎn)生，故脯氨酸合成增加，大豆耐鹽性增加，B正確；
C、脯氨酸含量增加可增大根部細(xì)胞滲透壓，如果外部環(huán)境含鹽量一定程度的增加，細(xì)胞依然可以吸收水分，故大豆耐鹽性增強(qiáng)，C正確；
D、miR160a可通過(guò)切割GmARF16基因轉(zhuǎn)錄的mRNA，故miR160a通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則識(shí)別mRNA并斷裂磷酸二酯鍵，D錯(cuò)誤。
故選D。
13．答案：ABD
解析：A、浸曲發(fā)的目的是活化酵母菌，使其由休眠狀態(tài)變?yōu)榛钴S狀態(tài)，酵母菌可以進(jìn)行有氧呼吸（產(chǎn)生CO2和水）和無(wú)氧呼吸（產(chǎn)生酒精和CO2），所以都可以釋放CO2，A正確；
B、“舒令極冷”是降低米的溫度，為了防止蒸熟的米溫度過(guò)高而殺死酒曲中的酵母菌等微生物，B正確；
C、“令沒(méi)菜把即止”是用水將蔬菜淹沒(méi)，制造無(wú)氧環(huán)境，C錯(cuò)誤；
D、“用水三斗”可以將酒精吸收，避免酒精濃度過(guò)高殺死醋酸菌而不易形成醋酸菌衣膜，D正確。
故選ABD。
14．答案：BCD
解析：A、釀酒酵母沒(méi)有合成淀粉酶的能力，因此以谷物為原料用釀酒酵母釀酒時(shí)，需對(duì)原料進(jìn)行糖化處理，即將淀粉轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟?，A正確；
B、酵母菌的細(xì)胞壁主要成分是幾丁質(zhì)，需要用幾丁質(zhì)酶處理，植物細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，用纖維素酶不能去除兩種酵母的細(xì)胞壁，B錯(cuò)誤；
C、糖化酵母也能以淀粉為碳源，因此在培養(yǎng)基X中只以淀粉為唯一碳源無(wú)法區(qū)分雜種酵母和糖化酵母，培養(yǎng)基中可以加入酒精指示劑如重鉻酸鉀，呈灰綠色透明圈的應(yīng)該是既能利用淀粉又能產(chǎn)生酒精的雜種酵母，C錯(cuò)誤；
D、為了實(shí)現(xiàn)以谷物為原料高效生產(chǎn)酒精的目的，目的菌最終的鑒定指標(biāo)應(yīng)該是產(chǎn)生酒精的能力，D錯(cuò)誤。
故選BCD。
15．答案：CD
解析：A、題圖中②使用選擇培養(yǎng)基篩選融合的雜交瘤細(xì)胞，未融合的細(xì)胞死亡，③用抗原—抗體雜交的方法篩選出能產(chǎn)生抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞，A正確；
B、利用細(xì)胞膜的流動(dòng)性使B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞，再利用其無(wú)限增殖的特性，可以產(chǎn)生大量單克隆抗體，B正確；
C、對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系，C錯(cuò)誤；
D、實(shí)驗(yàn)組中加入了單克隆抗體，抗體與腫瘤細(xì)胞表面的CD47發(fā)生特異性結(jié)合，從而解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，而對(duì)照組中沒(méi)有加入單克隆抗體，不能與腫瘤細(xì)胞表面的CD47結(jié)合，因而無(wú)法解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，因此，實(shí)驗(yàn)組中吞噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)顯著高于對(duì)照組可驗(yàn)證上述推測(cè)，D錯(cuò)誤。
故選CD。
16．答案：BCD
解析：A、題意顯示，當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個(gè)相同的LxP序列且方向相同時(shí)，Cre酶能有效切除兩個(gè)位點(diǎn)間的DNA序列，圖中的終止子會(huì)被切除，若無(wú)Cre酶存在，則圖中STOP的作用會(huì)導(dǎo)致熒光蛋白基因不能表達(dá)，進(jìn)而無(wú)法發(fā)出熒光，A正確；
B、結(jié)合題意可知，Cre酶能將特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，B錯(cuò)誤；
C、當(dāng)有兩個(gè)相同的LxP序列且方向相同時(shí)，Cre酶就能有效切除兩個(gè)位點(diǎn)間的DNA序列，包括其中的一個(gè)LxP，C錯(cuò)誤；
D、啟動(dòng)子能啟動(dòng)綠色熒光基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程，D錯(cuò)誤。
故選BCD。
17．答案：(1)酵母菌具有以核膜為界限的細(xì)胞核，而綠膿桿菌沒(méi)有以核膜為界限的細(xì)胞核（或是否有以核膜為界限的細(xì)胞核）
(2)固體；甲；培養(yǎng)基甲具有微生物生長(zhǎng)所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)基乙缺乏氮源，不能滿(mǎn)足多種微生物的營(yíng)養(yǎng)需要
(3)高壓蒸汽/濕熱
(4)將未接種的培養(yǎng)基在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，如果未接種的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染，反之則說(shuō)明培養(yǎng)基被雜菌污染
(5)1×104
解析：（1）酵母菌屬于真核生物，綠膿桿菌屬于原核生物，兩者最主要的區(qū)別在于酵母菌具有以核膜為界限的細(xì)胞核，而綠膿桿菌沒(méi)有（或是否有以核膜為界限的細(xì)胞核）。
（2）由于兩種培養(yǎng)基配方中都有瓊脂，所以從物理性質(zhì)上看，上述兩種培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。由于培養(yǎng)基甲屬于天然培養(yǎng)基，可滿(mǎn)足多種微生物的營(yíng)養(yǎng)需要，而培養(yǎng)基乙缺乏氮源，不能滿(mǎn)足多種微生物的營(yíng)養(yǎng)需要，所以應(yīng)選擇培養(yǎng)基甲進(jìn)行培養(yǎng)，收集菌落。
（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。
（4）證明培養(yǎng)基是否被雜菌污染的操作如下，將未接種的培養(yǎng)基在相同的條件下進(jìn)行培養(yǎng)，如果未接種的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有菌落生長(zhǎng)，說(shuō)明培養(yǎng)基沒(méi)有被雜菌污染。
（5）根據(jù)題干數(shù)據(jù)，取30～300個(gè)菌落的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，則細(xì)菌密度為（108＋105＋102）÷3÷0.1×10×102÷（7×15）＝1×104個(gè)/cm2。
18．答案：(1)減數(shù)分裂Ⅱ；第二極體；雌原核
(2)促性腺激素；脫分化
(3)XX、XY或YY
(4)需要將ahESC和另一個(gè)精子一起注入一個(gè)去核卵細(xì)胞中；重構(gòu)的受精卵發(fā)育成的胚胎必須移植到雌性小鼠的體內(nèi)才能發(fā)育為個(gè)體
解析：（1）體內(nèi)受精過(guò)程中，獲能后的精子在與卵細(xì)胞相遇時(shí)，首先會(huì)發(fā)生頂體反應(yīng)，體內(nèi)受精時(shí)，當(dāng)精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，透明帶會(huì)迅速產(chǎn)生生理反應(yīng)阻止后來(lái)的精子進(jìn)入；精子入卵后卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ、排出第二極體、形成雌原核。
（2）用促性腺激素對(duì)雌性小鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理可得到大量卵母細(xì)胞，這些卵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化為phESC（孤雄單倍體干細(xì)胞）的過(guò)程（發(fā)生了分裂）相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的脫分化過(guò)程。
（3）孤雌單倍體干細(xì)胞phESC與精子和去核卵母細(xì)胞融合后，得到的融合細(xì)胞的性染色體組成可能是XX（含X精子或phESC自身融合、含X精子和phESC融合）、XY（含Y精子和phESC融合）或YY（含Y精子的自身融合）。
（4）據(jù)圖1和圖2分析可知，只依賴(lài)雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，因?yàn)樾枰獙hESC和另一個(gè)精子一起注入一個(gè)去核卵細(xì)胞中，且重構(gòu)的受精卵發(fā)育成的胚胎必須移植到雌性小鼠的體內(nèi)才能發(fā)育為個(gè)體。
19．答案：(1)限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；磷酸二酯鍵
(2)清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，同時(shí)給細(xì)胞提供足夠營(yíng)養(yǎng)
(3)動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難
(4)B；取動(dòng)物A和克隆動(dòng)物A的肝組織細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原—抗體雜交
解析：（1）基因工程中切割DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶），故在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過(guò)程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）。限制酶是作用于其所識(shí)別序列中兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。
（2）在無(wú)菌、無(wú)毒等適宜環(huán)境中進(jìn)行動(dòng)物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時(shí)，從培養(yǎng)液吸收營(yíng)養(yǎng)，往培養(yǎng)液排出代謝產(chǎn)物，所以需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害，同時(shí)給細(xì)胞補(bǔ)充足夠營(yíng)養(yǎng)。
（3）由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，故與胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)相比，體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率低。
（4）先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體；若要利用此抗體確定克隆動(dòng)物A中M基因是否失活，如果M基因已經(jīng)失活，則克隆動(dòng)物A中無(wú)法產(chǎn)生M蛋白的單克隆抗體，則可利用抗原—抗體雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，故實(shí)驗(yàn)思路為：提取克隆動(dòng)物A的肝細(xì)胞，培養(yǎng)肝細(xì)胞，在肝細(xì)胞加入帶有熒光標(biāo)記的抗Mda，檢測(cè)有無(wú)熒光出現(xiàn)。若有熒光出現(xiàn)，說(shuō)明克隆動(dòng)物A中的M基因未失活；若無(wú)熒光出現(xiàn)，說(shuō)明克隆動(dòng)物A中的M基因失活。
20．答案：(1)PvitⅡ；EcRⅠ；T4DNA連接酶
(2)能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
(3)3
解析：（1）根據(jù)啟動(dòng)子和終止子的生理作用可知，目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動(dòng)子和終止子之間。圖中看出，兩者之間存在于三種限制酶切點(diǎn)，但是由于KpnⅠ在質(zhì)粒上不止一個(gè)酶切位點(diǎn)，所以應(yīng)該選擇PvuⅡ和EcRⅠ兩種不同限制酶的識(shí)別序列；根據(jù)PvuⅡ的酶切序列，切出了平末端，所以構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該用T4DNA連接酶連接質(zhì)粒和目的基因。
（2）轉(zhuǎn)化時(shí)用Ca2+（CaCl2）處理大腸桿菌細(xì)胞，使其處于感受態(tài)（能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子）的生理狀態(tài)，以提高轉(zhuǎn)化效率。
（3）由于這些菌落都可以生長(zhǎng)在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中，因此都含有質(zhì)粒，重組質(zhì)粒包含了目的基因和質(zhì)粒，如果用PvuⅡ和EcRⅠ兩種酶切割重組質(zhì)粒電泳后將獲得含有質(zhì)粒和目的基因兩條條帶，由于phb2基因大小為0.9kb，所以對(duì)應(yīng)電泳圖是菌落3。
21．答案：(1)④
(2)B、C
(3)BamHⅠ和SacⅠ
(4)潮霉素
(5)a1、a2、a3株系
解析：（1）單鏈DNA中，5'端存在游離的磷酸基團(tuán)，3'端存在-OH，兩個(gè)DNA片段之間的磷酸集團(tuán)和-OH在DNA連接酶作用下形成磷酸二酯鍵。
故選④。
（2）已知DNA的合成方向總是從子鏈的5'端向3'端延伸，由圖1可知，5'端對(duì)應(yīng)的引物分別是B和C。
（3）為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動(dòng)子，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHI和SacI酶組合，將Ti質(zhì)粒切開(kāi)后構(gòu)建重組表達(dá)載體，原因是能將P基因和強(qiáng)啟動(dòng)子完整切割，且在與Ti質(zhì)粒連接的過(guò)程中可避免自身環(huán)化等問(wèn)題；不選用圖中其它限制酶的原因是EcRI和NtI會(huì)破壞P基因，HindIII會(huì)將強(qiáng)啟動(dòng)子和P基因分離。
（4）由圖可知，標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因，因此將農(nóng)桿菌浸泡過(guò)的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入潮霉素進(jìn)行篩選。
（5）a4玉米株系的P蛋白表達(dá)量與野生型玉米差異不顯著，所以不能選擇a4玉米株系作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究的實(shí)驗(yàn)材料，可作為超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究實(shí)驗(yàn)材料的有a1、a2、a3。
食品加工
歷史記載
釀酒
浸曲發(fā)，如魚(yú)眼湯，凈淘米八斗，炊作飯，舒令極冷
制醋
大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之……七日后當(dāng)臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移動(dòng)、撓攪之。數(shù)十日，醋成
泡菜制作
作鹽水，令極咸，于鹽水中洗菜，即內(nèi)（納）甕中……其洗菜鹽水，澄取清者，瀉著甕中，令沒(méi)菜把即止，不復(fù)調(diào)和
培養(yǎng)基名稱(chēng)
配方
培養(yǎng)基甲
牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸餾水1000mL，瓊脂20g
培養(yǎng)基乙
葡萄糖15g，KH2PO41g，MgSO4·7H2O0.5g，KCl0.5g，F(xiàn)eSO4·7H2O0.01g，蒸餾水1000mL，瓊脂20g
名稱(chēng)
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)
HindⅢ
EcRⅠ
PvitⅡ
PstⅠ
KpnⅠ
BamHⅠ

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